Phân tích đa hình một số gen liên quan đến chất lượng thịt lợn bằng phương pháp PCR-RFLP

Phân tích đa hình một số gen liên quan đến chất lượng thịt lợn bằng phương pháp PCR-RFLP

luận văn thạc sĩ sinh học luận văn thạc sĩ sinh học Phân tích đa hình một số gen liên quan đến chất Phân tích đa hình một số gen liên quan đến chất lượng thịt lợn bằng phương pháp PCR-RFLP lượng thịt lợn bằng phương pháp PCR-RFLP Chuyên ngành: di truyền học Chuyên ngành: di truyền học Mã số: 62.42.70 Mã số: 62.42.70 Luận văn thạc sĩ khoa học Luận văn thạc sĩ khoa học Học viên thực hiện: Nguyễn Thị Hoa Học viên thực hiện: Nguyễn Thị Hoa Lớp: cao học k16 Lớp: cao học k16 Trường: ĐHSP Thái Nguyên Trường: ĐHSP Thái Nguyên Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Văn Cường Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Nguyễn Văn Cường Viện công nghệ sinh học, viện khoa học và công nghệ Việt Viện công nghệ sinh học, viện khoa học và công nghệ Việt Nam. Nam. Nội dung Nội dung Mở đầu Mở đầu 1.Tính cấp thiết của đề tài 1.Tính cấp thiết của đề tài 2.Mục tiêu và nhiệm vụ của đề tài 2.Mục tiêu và nhiệm vụ của đề tài * Chương 1: Tổng quan tài liệu * Chương 1: Tổng quan tài liệu 1.1. Chỉ thị di truyền 1.1. Chỉ thị di truyền 1.2. Ứng dụng các chỉ thị di truyền đến các tính trạng số lượng ở lợn 1.2. Ứng dụng các chỉ thị di truyền đến các tính trạng số lượng ở lợn 1.3. Gen Heart-fatty acid binding protein ( 1.3. Gen Heart-fatty acid binding protein ( H-FABP H-FABP ) ) 1.4. Gen Lipin1 ( 1.4. Gen Lipin1 ( Lpin1 Lpin1 ) ) * Chương 2: Vật liệu và phương pháp nghiên cứu * Chương 2: Vật liệu và phương pháp nghiên cứu 2.1. Nguyên liệu, hóa chất và trang thiết bị 2.1. Nguyên liệu, hóa chất và trang thiết bị 2.2. Phương pháp nghiên cứu 2.2. Phương pháp nghiên cứu * Chương 3: Kết quả và thảo luận * Chương 3: Kết quả và thảo luận 3.1. Tách chiết DNA tổng số từ các mẫu mô tai lợn 3.1. Tách chiết DNA tổng số từ các mẫu mô tai lợn 3.2. Phân tích đoạn gen 3.2. Phân tích đoạn gen H-FABP H-FABP bằng phương pháp PCR-RFLP bằng phương pháp PCR-RFLP 3.3. Phân tích gen 3.3. Phân tích gen Lpin1 Lpin1 bằng phương pháp PCR-RFLP bằng phương pháp PCR-RFLP Kết luận và đề nghị Kết luận và đề nghị Mở đầu Mở đầu 1.Tính cấp thiết của đề tài 1.Tính cấp thiết của đề tài Ngành chăn nuôi lợn của Việt Nam đóng vai trò quan trọng trong sản xuất Ngành chăn nuôi lợn của Việt Nam đóng vai trò quan trọng trong sản xuất nông nghiệp với sản lượng thịt chiếm 80% lượng thịt được tiêu thụ và chiếm nông nghiệp với sản lượng thịt chiếm 80% lượng thịt được tiêu thụ và chiếm 25% giá trị sản suất nông nghiệp của Việt Nam [7]. Sự phát triển của ngành 25% giá trị sản suất nông nghiệp của Việt Nam [7]. Sự phát triển của ngành chăn nuôi lợn đã góp phần đáng kể trong việc nâng cao chất lượng cuộc sống chăn nuôi lợn đã góp phần đáng kể trong việc nâng cao chất lượng cuộc sống cho người dân. cho người dân. Các giống lợn nội của Việt Nam rất đa dạng, chúng thích nghi với điều kiện Các giống lợn nội của Việt Nam rất đa dạng, chúng thích nghi với điều kiện khí hậu, nguồn thức ăn ở VN, lợn nội cho chất lượng thịt tốt, ngon khi chế khí hậu, nguồn thức ăn ở VN, lợn nội cho chất lượng thịt tốt, ngon khi chế biến…song nhược điểm: tăng trưởng chậm, trọng lượng thấp, thành phần mỡ biến…song nhược điểm: tăng trưởng chậm, trọng lượng thấp, thành phần mỡ nhiều, trong thịt xẻ và tỉ lệ tiêu tốn thức ăn cao. Do vậy đã có nhiều hướng nhiều, trong thịt xẻ và tỉ lệ tiêu tốn thức ăn cao. Do vậy đã có nhiều hướng nghiên cứu cải tạo giống lợn nội cho năng suất cao mà vẫn giữ được những nghiên cứu cải tạo giống lợn nội cho năng suất cao mà vẫn giữ được những ưu điểm trên. ưu điểm trên. Trong công tác lai tao và chọn giống truyền thống còn nhiều hạn chế, để Trong công tác lai tao và chọn giống truyền thống còn nhiều hạn chế, để khắc phục những hạn chế đó, nhờ vào thành tựu về giải mã gen người và khắc phục những hạn chế đó, nhờ vào thành tựu về giải mã gen người và động vật làm sáng tỏ nhiều locus tính trạng số lượng có ý nghĩa kinh tế. động vật làm sáng tỏ nhiều locus tính trạng số lượng có ý nghĩa kinh tế. Thành tựu này mở ra khả năng ứng dụng chỉ thị di truyền phân tử hỗ trợ Thành tựu này mở ra khả năng ứng dụng chỉ thị di truyền phân tử hỗ trợ chọn giống trong nghành nuôi lợn. chọn giống trong nghành nuôi lợn. Tại viện cnsh vn kết hợp với viện chăn nuôi Thụy Phương HN, trong những Tại viện cnsh vn kết hợp với viện chăn nuôi Thụy Phương HN, trong những năm vừa qua, để cải thiện năng suất các giống lợn nội đã tiến hành lai giữa năm vừa qua, để cải thiện năng suất các giống lợn nội đã tiến hành lai giữa lợn thuần ngoại với lợn nội. Trong chương trình nghiên cứu này lợn ngoại là Y lợn thuần ngoại với lợn nội. Trong chương trình nghiên cứu này lợn ngoại là Y và lợn nội là MC. và lợn nội là MC. Chúng tôi xác xác định tính đa hình của một số ứng cử Chúng tôi xác xác định tính đa hình của một số ứng cử gen liên quan đến chất lượng thịt lợn, góp phần phát triển chỉ thị di truyền gen liên quan đến chất lượng thịt lợn, góp phần phát triển chỉ thị di truyền phân tử phục vụ cho công tác chọn giống chúng tôi tiến hành nghiên cứu phân tử phục vụ cho công tác chọn giống chúng tôi tiến hành nghiên cứu “ “ Phân tích đa hình một số gen liên quan đến chất lượng thịt lợn Phân tích đa hình một số gen liên quan đến chất lượng thịt lợn bằng phương pháp PCR -RFLP’’. bằng phương pháp PCR -RFLP’’. Mở đầu Mở đầu 2. Mục tiêu và nhiệm vụ của đề tài 2. Mục tiêu và nhiệm vụ của đề tài Mục tiêu Mục tiêu Xác định các biến thể DNA của gen Xác định các biến thể DNA của gen Lpin1, H-FABP Lpin1, H-FABP liên liên quan đến chất lượng thịt lợn, nhằm hỗ trợ công tác chọn quan đến chất lượng thịt lợn, nhằm hỗ trợ công tác chọn giống. giống. Nhiệm vụ Nhiệm vụ Phân tích đa hình gen Phân tích đa hình gen Lpin1, H-FABP Lpin1, H-FABP ở lợn Móng Cái và ở lợn Móng Cái và Yorshire bằng phương pháp PCR-RFLP. Yorshire bằng phương pháp PCR-RFLP. Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 1: Tổng quan tài liệu 1.1. Chỉ thị di truyền (Genetic marker) 1.1. Chỉ thị di truyền (Genetic marker) Chỉ thị di truyền phân tử (genetic marker) là một gen hay một trình tự Chỉ thị di truyền phân tử (genetic marker) là một gen hay một trình tự DNA đã được xác định vị trí trên nhiễm sắc thể, và có tương quan với một DNA đã được xác định vị trí trên nhiễm sắc thể, và có tương quan với một gen hoặc một tính trạng cụ thể. Nó được biết như một biến dị được sinh ra gen hoặc một tính trạng cụ thể. Nó được biết như một biến dị được sinh ra do đột biến hoặc do sự biến đổi vị trí trong hệ gen. Một chỉ thị di truyền có do đột biến hoặc do sự biến đổi vị trí trong hệ gen. Một chỉ thị di truyền có thể là một trình tự DNA ngắn như trình tự lặp lại xung quanh một base-pair thể là một trình tự DNA ngắn như trình tự lặp lại xung quanh một base-pair hoặc một đoạn dài như minisatellites [28]. hoặc một đoạn dài như minisatellites [28]. 1.1.1. Chỉ thị loại 1 1.1.1. Chỉ thị loại 1 (known function) (known function) Còn gọi là các ứng cử gen (candidate gene) - là những chỉ thị đối với Còn gọi là các ứng cử gen (candidate gene) - là những chỉ thị đối với những gen đã biết chính xác sản phẩm biểu hiện. những gen đã biết chính xác sản phẩm biểu hiện. 1.1.2. Chỉ thị loại 2 1.1.2. Chỉ thị loại 2 (unknown function) (unknown function) Là những chỉ thị nằm ngoài vùng mã hóa của gen, nó có thể nằm gần Là những chỉ thị nằm ngoài vùng mã hóa của gen, nó có thể nằm gần hoặc cách xa đoạn gen đã biết sản phẩm biểu hiện. Chỉ thị loại này chưa hoặc cách xa đoạn gen đã biết sản phẩm biểu hiện. Chỉ thị loại này chưa được biết sản phẩm của nó. được biết sản phẩm của nó. 1.2. Ứng dụng các chỉ thị di truyền đến các tính trạng số lượng ở 1.2. Ứng dụng các chỉ thị di truyền đến các tính trạng số lượng ở lợn lợn Thời gian qua, số lượng gen và chỉ thị di truyền liên quan đến tính trạng có Thời gian qua, số lượng gen và chỉ thị di truyền liên quan đến tính trạng có ý nghĩa kinh tế đã đem lại hiệu quả to lớn trong điều khiển năng suất giống ý nghĩa kinh tế đã đem lại hiệu quả to lớn trong điều khiển năng suất giống lợn. lợn. Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 1: Tổng quan tài liệu 1.2.1. Nghiên cứu gen lợn ở nước ngoài 1.2.1. Nghiên cứu gen lợn ở nước ngoài Nghiên cứu này được bắt đầu từ những năm 90 ở những nước Nghiên cứu này được bắt đầu từ những năm 90 ở những nước trong khối EU, Mỹ, Úc, Trung Quốc… trong khối EU, Mỹ, Úc, Trung Quốc… Các vạch ghi trên bản đồ gen lợn đã nhanh chóng được tăng Các vạch ghi trên bản đồ gen lợn đã nhanh chóng được tăng lên Đến tháng 1/2009 ngân hàng dữ liệu bản đồ gen lợn đã có lên Đến tháng 1/2009 ngân hàng dữ liệu bản đồ gen lợn đã có 4928 QTLs liên quan đến 499 tính trạng khác nhau, trong đó 3711 4928 QTLs liên quan đến 499 tính trạng khác nhau, trong đó 3711 QTLs liên quan đến tính trạng chất lượng thịt [27]. QTLs liên quan đến tính trạng chất lượng thịt [27]. 1.2.2. Nghiên cứu gen lợn ở Việt Nam 1.2.2. Nghiên cứu gen lợn ở Việt Nam Nghiên cứu trong nước về lĩnh vực này đang được quan tâm Nghiên cứu trong nước về lĩnh vực này đang được quan tâm Tại viện công nghệ sinh học, viện khoa học và công nghệ Việt Tại viện công nghệ sinh học, viện khoa học và công nghệ Việt Nam từ năm 2001 đã hợp tác với trường đại học Stuttgart, CHLB Nam từ năm 2001 đã hợp tác với trường đại học Stuttgart, CHLB Đức nghiên cứu đa hình gen trong một số giống lợn thuần nội Việt Đức nghiên cứu đa hình gen trong một số giống lợn thuần nội Việt Nam. Kết quả nghiên cứu cho thấy các giống lợn nội Việt Nam có Nam. Kết quả nghiên cứu cho thấy các giống lợn nội Việt Nam có tính di truyền cao. Tuy nhiên tần suất kiểu gen liên quan đến tốc tính di truyền cao. Tuy nhiên tần suất kiểu gen liên quan đến tốc độ sinh trưởng cao, chất lượng thịt tốt ở lợn Việt Nam là thấp. độ sinh trưởng cao, chất lượng thịt tốt ở lợn Việt Nam là thấp. Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 1: Tổng quan tài liệu 1.3. Gen Heart- fatty acid binding 1.3. Gen Heart- fatty acid binding protein ( protein ( H-FABP H-FABP ) ) 1.3.1. Vị trí, cấu trúc, chức năng của gen 1.3.1. Vị trí, cấu trúc, chức năng của gen H-FABP H-FABP vị trí: vị trí: Gen H-FABP là gen mã hóa cho Gen H-FABP là gen mã hóa cho protein gắn axit béo ở cơ, nằm trên protein gắn axit béo ở cơ, nằm trên nhiễm sắc thể số 6 ở lợn, tại vị trí 6q21 nhiễm sắc thể số 6 ở lợn, tại vị trí 6q21 -> 6q26 [19], Ovilo đã xác định được gen -> 6q26 [19], Ovilo đã xác định được gen H-FABP nằm trong khoảng giữa marker H-FABP nằm trong khoảng giữa marker SW316 và SO228 (SW316- 3,4cM – H- SW316 và SO228 (SW316- 3,4cM – H- FABP – 12,5cM – SO228) [39, 40]. FABP – 12,5cM – SO228) [39, 40]. Cấu trúc: Cấu trúc: Gồm 4 exon mã hóa lần lượt cho các đoạn polypeptit gồm 24, 58, 34, 17 aa và 3 intron có kích thước 4,2; 2,5; 1,5 kb[19] Hình 1.1. Vị trí gen mã hóa H-FABP trên nhiễm sắc thể số 6 ở lợn Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 1: Tổng quan tài liệu Chức năng của gen H-FABP Chức năng của gen H-FABP Gen Gen H-FABP H-FABP là gen mã hóa cho một là gen mã hóa cho một protein protein H-FABP H-FABP liên kết axit béo ở cơ, có liên kết axit béo ở cơ, có kích thước là 15kDa. kích thước là 15kDa. + H-FABP có mặt ở các mô có nhu cầu cao + H-FABP có mặt ở các mô có nhu cầu cao về các axit béo: mô cơ, mô tim, mô cơ về các axit béo: mô cơ, mô tim, mô cơ xương, tuyến sữa xương, tuyến sữa + H-FABP là các protein nhỏ nội bào liên + H-FABP là các protein nhỏ nội bào liên kết với các axit béo để vận chuyển các axit kết với các axit béo để vận chuyển các axit béo này qua màng tế bào chất, để cung béo này qua màng tế bào chất, để cung cấp năng lượng hoặc tổng cấp năng lượng hoặc tổng hợptriacylglycerol (TAG) hay phospholipid hợptriacylglycerol (TAG) hay phospholipid [62]. [62]. + Hơn thế nữa, + Hơn thế nữa, H-FABP H-FABP có thể điều chỉnh có thể điều chỉnh hàm lượng axit béo trong cơ và thông qua hàm lượng axit béo trong cơ và thông qua con đường này chúng điều khiển quá trình con đường này chúng điều khiển quá trình tổng hợp lipid. tổng hợp lipid. H-FABP H-FABP và và A-FABP A-FABP được coi được coi là hai ứng cử gen cho tính trạng hàm lượng là hai ứng cử gen cho tính trạng hàm lượng mỡ ở lợn. mỡ ở lợn. 1.3.2. Đa hình di truyền gen 1.3.2. Đa hình di truyền gen H-FABP H-FABP Gen Gen H-FABP H-FABP nằm trên nhiễm sắc thể nằm trên nhiễm sắc thể số 6, chúng được giải trình tự và có 3 vị trí số 6, chúng được giải trình tự và có 3 vị trí cắt của enzym giới hạn. Ba vị trí đa hình độ cắt của enzym giới hạn. Ba vị trí đa hình độ dài đoạn giới hạn đã được xác định trên dài đoạn giới hạn đã được xác định trên trình tự gen trình tự gen H-FABP H-FABP : điểm cắt của enzyme : điểm cắt của enzyme HaeIII HaeIII tại nucleotit 1811 (G bị thay thế tại nucleotit 1811 (G bị thay thế bằng C), điểm cắt của enzyme bằng C), điểm cắt của enzyme HaeIII HaeIII nằm nằm trên intron của gen trên intron của gen H-FABP H-FABP [19]. [19]. Hình 1.3 Cơ chế hoạt Hình 1.3 Cơ chế hoạt động của động của H-FABP H-FABP trong tế bào trong tế bào Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 1: Tổng quan tài liệu 1.4. Gen Lipin1 (Lpin1) 1.4. Gen Lipin1 (Lpin1) 1.4.1. Vị trí, cấu trúc, chức năng của 1.4.1. Vị trí, cấu trúc, chức năng của gen Lpin1 gen Lpin1 Vị trí: Vị trí: Gen Lpin1 nằm trên nst số 3, Gen Lpin1 nằm trên nst số 3, Trên nhiễm sắc thể gen Trên nhiễm sắc thể gen Lpin1 Lpin1 nằm ở nằm ở vị trí SW 717 (LOD = 7,55, Dics = vị trí SW 717 (LOD = 7,55, Dics = 50cR) ( 50cR) ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov http://www.ncbi.nlm.nih.gov ) ) [29] [29] Cấu trúc: Cấu trúc: Trình tự cDNA 5,559 bp thu Trình tự cDNA 5,559 bp thu được bằng phương pháp RT-PCR và 3’ được bằng phương pháp RT-PCR và 3’ RACE (genbank mã số 164.847 E.U) RACE (genbank mã số 164.847 E.U) chuỗi này bao gồm: chuỗi này bao gồm: + 5’- UTR là vùng không dịch mã có + 5’- UTR là vùng không dịch mã có kích thước 111 bp kích thước 111 bp + vùng dịch mã, quy định mã hóa + vùng dịch mã, quy định mã hóa protein gồm 894 aa với phân tử lượng protein gồm 894 aa với phân tử lượng 98,83 kDa 98,83 kDa +Vùng 3’- UTR có kích thước 2763 bp +Vùng 3’- UTR có kích thước 2763 bp [30, 37] [30, 37] Hình 1.4. Vị trí gen Lpin1 của lợn trên nhiễm sắc thể số 3 Chương 1: Tổng quan tài liệu Chương 1: Tổng quan tài liệu Chức năng phân tử của gen Chức năng phân tử của gen Lpin1 Lpin1 Lpin1: chức năng như enzyme Lpin1: chức năng như enzyme trong tổng hợp Triacylglycerol trong tổng hợp Triacylglycerol (TAG) và sinh tổng hợp (TAG) và sinh tổng hợp phospholipid phospholipid . . Gen Gen Lpin1 Lpin1 hoạt động như một hoạt động như một enzyme phosphatidate enzyme phosphatidate phosphatase (PAP), chuyển đổi phosphatase (PAP), chuyển đổi phosphatidate để hình thành chất phosphatidate để hình thành chất béo trung tính diacylglycerol, béo trung tính diacylglycerol, phosphatidylcholine, và sinh tổng phosphatidylcholine, và sinh tổng hợp phosphatidylethanolamine hợp phosphatidylethanolamine [13] [13] . . Lpin1 là coactivator phiên mã Lpin1 là coactivator phiên mã Lpin1 trực tiếp tương tác với Lpin1 trực tiếp tương tác với các thụ thể hạt nhân Peroxisome các thụ thể hạt nhân Peroxisome proliferator (PPARα) và proliferator (PPARα) và coactivator-1α (PGC-1α).Dẫn đến coactivator-1α (PGC-1α).Dẫn đến hình thành một phiên mã gen. hình thành một phiên mã gen. Hình 1.5. Chức năng phân tử của gen Lipin 1, 2, 3 [...]... quả phân tích cho thấy là kiểu gen: CC có hàm lượng mỡ lá và mỡ giắt thấp hơn so với hàm lượng mỡ lá và mỡ giắt của lợn có kiểu gen TT, TC Trên đối tượng là con người, đa hình gen Lpin1 liên quan với nhiều đặc điểm trao đổi chất, hàm lượng insulin, mức độ glucose [52], quá trình trao đổi chất và ảnh hưởng đến huyết áp tâm thu Đa hình gen Lpin1 có liên quan đến bệnh nhân tiểu đường loại 2 Một đa hình. .. 8 9 Hình 3.1 Điện di đồ sản phẩm DNA tách chiết từ mô tai lợn Hình 3.2 Phổ hấp thụ tử ngoại của DNA của lợn Móng cái và Yorshire CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2 Phân tích đoạn gen H-FABP bằng phương pháp PCR-RFLP 1kb 3.2.1 Phân tích đoạn gen H-FABP bằng phương pháp PCR Dựa trên trình tự gen H-FABP được công bố trên ngân hàng gen GenBankY15180 để thiết kế cặp mồi dùng cho phản ứng PCR Đoạn gen H-FABP... quan tài liệu 1.4.2 Đa hình di truyền gen Lpin1 Kết quả nghiên cứu của Zhao và cs (3/2008) nghiên cứu trên 162 con lợn: Tong Cheng (42), Large White (25) và con lai Large White * (Landrace * Tong Cheng) (47), Landrace* (Large White * Tong Cheng) (48) Kết quả phân tích về sự lắng đọng chất béo được phân tích trong thịt Lipid tập trung ở thịt vai, thăn, mông, mỡ lưng, xương xườn, mỡ lá Phân tích đa hình. .. phản ứng PCR của gen H-FABP và Lpin1 ở bảng 2.6 Chu trình nhiệt của phản ứng PCR thể hiện ở bảng 2.7 2.2.5 Phương pháp phân tích đa hình đoạn cắt giới hạn (RFLP) Thành phần phản ứng cắt sản phẩm PCR thể hiện ở bảng 2.8 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Tách chiết DNA tổng số từ các mẫu mô tai lợn DNA đã được tách từ 150 mẫu mô tai lợn được kiểm tra bằng 2 phương pháp là điện di và đo quang phổ 1 2... LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2 Phương pháp nghiên cứu Quy trình thí nghiệm được trình bày tóm tắt như sau: Tách chiết và tinh sạch DNA hệ gen từ mẫu mô tai lợn Kiểm tra DNA bằng quang phổ kế, điện di trên gel agarose 1% Khuyếch đại đoạn gen H-FABP và Lpin1 bằng phương pháp PCR với cặp mồi đặc hiệu Điện di kiểm tra sản phẩm PCR trên gel agarose 1% Cắt sản phẩm PCR bằng enzyme giới hạn: đoạn gen H-FABP... HaeIII) đoạn gen Lpin1 (với MspI) Điện di sản phẩm cắt trên gel agarose 2% Xác định kiểu gen của H-FABP và Lpin1 CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.2.1 Phương pháp tách chiết DNA từ mẫu mô tai lợ Bước 1: Phá vỡ màng tế bào và màng nhân Bước 2: Loại bỏ các thành phần không có bản chất DNA Bước 3: Tủa DNA 2.2.2 Phương pháp kiểm tra DNA bằng điện di gel agarose 2.2.3 Định lượng DNA bằng quang phổ... HaeIII trên đoạn gen H-FABP CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Sản phẩm PCR được cắt bằng enzyme HaeIII Kết quả phân tích đa hình RFLP gen H-FABP với enzyme HaeIII thể hiện ở hình 3.4 (M: chỉ thị DNA 100 bp, 1- sản phẩm PCR; 2-5 sản phẩm cắt đoạn gen H-FABP Trong đó giếng 2- kiểu gen dd; giếng 3, 4- kiểu gen Dd; giếng 5- kiểu gen DD) 5 683bp 405bp 287bp 4 3 2 1 M 816bp 500bp 117bp 60bp Hình 3.4 Điện di... trí nucleotit 1401 đến vị trí số 2216 của intron thứ 2 M 1 2 3 4 5 816bp Hình 3.3 Điện di đồ sản phẩm PCR nhân đoạn gen H-FABP CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2.2 Phân tích đoạn genH-FABP bằng enzyme cắt giới hạn HaeIII Allele Vị trí Base Độ dài đoạn cắt (bp) D 1517, 1533 G, G 683/117/16 d 1517, 1533, 1811 G, G, G 405/278/117/16 Bảng 3.2 Các điểm cắt của enzyme HaeIII trên đoạn gen H-FABP 117 bp... gây ra một sự thay thế acid amin trong miền C-Lip và được kết hợp với statin gây ra bệnh cơ [58] CHƯƠNG 2 VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu, hoá chất và trang thiết bị 2.1.1 Nguyên liệu Mẫu mô tai của giống lợn Móng cái (MC, n=97) và Yorshire (Y, n=53) Được lấy từ viện chăn nuôi Thụy Phương, Hà Nội Mẫu mô tai được bảo quản trong cồn 750, ở -200C, được sử dụng phân tích các gen trong...Chương 1: Tổng quan tài liệu      Lpin1 là cần thiết cho sự phát triển của adipocytes trưởng thành Tăng cường biểu hiện Lpin1 ở chuột biến đổi gen gây béo phì Lpin1 trong mô mỡ ảnh hưởng tới độ nhạy cảm insulin và biểu hiện cytokine giảm viêm ở người Lpin1 là cần thiết cho trao đổi chất bình thường giữa các mô mỡ và gan Lpin1 và chức năng thần kinh ngoại vi Hình 1.6 Các loại gen Lpins: Lpin1A,