nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và chất điều hoà sinh trưởng đến khả năng tái sinh và nhâ nhanh giống hoàng lan thuộc chi lan kiếm cymbidium

BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI - - LÊ MINH NGUYỆT NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MÔI TRƯỜNG VÀ CHẤT ðIỀU HOÀ SINH TRƯỞNG ðẾN KHẢ NĂNG TÁI SINH VÀ NH NHANH GIỐNG HOÀNG LAN THUỘC CHI LAN KIẾM CYMBIDIUM LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành : DI TRUYỀN VÀ CHỌN GIỐNG CÂY TRỒNG Mã số : 60.62.05 Người hướng dẫn khoa học : PGS.TS VŨ VĂN LIẾT GS.TSKH TRẦN DUY QUÝ HÀ NỘI – 2009 LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng: ñây công trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa ñược công bố công trình khác Tôi xin cam ñoan rằng: thông tin trích dẫn luận văn ñều ñã ñược rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2009 Tác giả luận văn Lê Minh Nguyệt Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………i LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành tốt luận văn này, trước hết, em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc ñến GS.TSKH Trần Duy Quý PGS.TS Vũ Văn Liết ñã tận tình hướng dẫn, giúp ñỡ em hoàn thành luận văn Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành ñến thầy, cô giáo giảng dạy môn Di truyền chọn giống trồng, trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội cô chú, anh chị môn Công nghệ sinh học – viện lương thực thực phẩm, sở – Thanh Trì – Hà Nội suốt trình em làm luận văn Em xin cảm ơn gia ñình, bạn bè người thân ñã ñộng viên, khích lệ, giúp ñỡ em mặt vật chất lẫn tinh thần thời gian em học tập, nghiên cứu viện, trường Dù ñã cố gắng hết sức, song chắn luận văn không tránh khỏi thiếu sót, tác giả mong nhận ñược chia sẻ ý kiến ñóng góp quý báu Hà Nội, ngày tháng năm 2009 Tác giả luận văn Lê Minh Nguyệt Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………ii MỤC LỤC Lời cam ñoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng vi Danh mục ñồ thị vii Danh mục hình ảnh .viii MỞ ðẦU 1.1 ðặt vấn ñề 1.2 Mục ñích, yêu cầu ñề tài 1.2.1 Mục ñích 1.2.2 Yêu cầu 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Sơ lược lan 2.1.1 Hệ thống phân loại họ Lan 2.1.2 Phân bố Lan 2.1.3 ðặc ñiểm hình thái Cymbidium 2.1.3.1 Thân 2.1.3.2 Rễ lan 10 2.1.3.3 Lá lan 11 2.1.3.4 Hoa lan 12 2 Các phương pháp nhân giống lan 15 2.2.1 Nhân giống hữu tính 15 2.2.2 Nhân giống vô tính 17 2.2.2.1 Phương pháp tách chiết thông thường 17 2.2.2.2 Phương pháp nuôi cấy mô 17 2.3 Ứng dụng công nghệ sinh học nuôi cấy mô lan 18 2.3.1 Tổng quan công nghệ sinh học nuôi cấy mô 18 2.3.2 Môi trường nuôi cấy lan 22 2.3.3 Các chất ñiều tiết sinh trưởng nuôi cấy mô 25 Về ngành hàng Lan Việt Nam 28 2.4.1 Hiện trạng ngành hàng lan Việt Nam 28 2.4.2 Tiềm ngành sản xuất hoa Lan Việt Nam 30 2.4.2.1 Sự tăng trưởng kinh tế 30 2.4.2.2 Thu nhập từ trồng hoa lan 31 2.4.2.3 Thu nhập cao từ kinh doanh hoa lan 32 2.4.3 Xu hướng phát triển ngành hàng hoa Lan Việt Nam 32 2.4.4.1 Giống 33 2.4.4.2 Công nghệ sinh học 33 2.4.4.3 Công nghệ canh tác, sản xuất hoa lan 33 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………iii 2.4.4.4 Công nghệ sau thu hoạch 34 2.5 Sản xuất thương mại hoa Lan giới 34 2.5.1 Xu hướng phát triển ngành thương mại hoa lan giới 34 2.5.2 Sản xuất hoa Lan giới 35 ðỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 3.1 ðối tượng nghiên cứu 38 3.2 Nội dung nghiên cứu 40 3.2.1 Giai ñoạn tạo vật liệu khởi ñầu 41 3.2.2 Giai ñoạn nhân nhanh 42 3.2.3 Giai ñoạn tạo hoàn chỉnh 46 3.2.4 Giai ñoạn vườn ươm 46 3.3 Phương pháp nghiên cứu 47 3.3.2 Kỹ thuật dùng giai ñoạn tạo hoàn chỉnh 47 3.3.3 Kỹ thuật dùng giai ñoạn vườn ươm 47 3.4 Phương pháp bố trí thí nghiệm 47 3.5 ðịa ñiểm ñiều kiện thí nghiệm 47 3.6 Các tiêu theo dõi 48 3.6.1 Giai ñoạn nhân nhanh 48 3.6.2 Giai ñoạn tạo hoàn chỉnh 48 3.6.4 Giai ñoạn vườn ươm 48 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 49 4.1 Giai ñoạn nhân nhanh cụm chồi 49 4.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP ñén HSN, chất lượng chồi 49 4.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin ñến HSN, chất lượng chồi 52 4.1.3 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP NAA ñến HSN, chất lượng chồi 55 4.1.4 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin NAA ñến HSN, chất lượng chồi 58 4.1.5 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP, NAA Kinetin ñến HSN, chấtlượng chồi 61 4.1.6 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN, chất lượng chồi 64 4.1.7 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN, chất lượng chồi 67 4.1.8 Nghiên cứu ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN, chất lượng chồi 70 4.1.9 Nghiên cứu ảnh hưởng chuối xanh, BAP ñến HSN, chất lượng chồi 73 4.1.10 Nghiên cứu ảnh hưởng nước dừa ñến HSN, chất lượng chồi 76 4.2 Giai ñoạn tạo hoàn chỉnh 79 4.2.1 Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD5 CD9 79 4.2.2 Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến rễ CD5 CD9 83 4.3 Giai ñoạn vườn ươm 86 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………iv 4.3.1 Ảnh hưởng giá thể ñến tỷ lệ sống sinh trưởng phát triển CD5 CD9 sau tháng theo dõi 86 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 90 5.1 Kết luận 90 5.2 ðề nghị 90 TÀI LIỆU THAM KHẢO 92 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………v DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Môi trường nuôi cấy khởi ñộng CD5 CD9 41 Bảng 4.1 Ảnh hưởng BAP ñến HSN, chất lượng chồi sau tháng theo dõi 50 Bảng 4.2 Ảnh hưởng Kinetin ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 53 Bảng 4.3 Ảnh hưởng BAP NAA ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 56 Bảng 4.4 Ảnh hưởng Kinetin NAA ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 59 Bảng 4.5 Ảnh hưởng BAP, NAA Kinetin ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 62 Bảng 4.6 Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 65 Bảng 4.7 Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 68 Bảng 4.8 Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 71 Bảng 4.9 Ảnh hưởng BAP chuối xanh ñến HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 74 Bảng 4.10 Ảnh hưởng nước dừa tới HSN, chất lượng chồi CD5 CD9 sau tháng theo dõi 77 Bảng 4.12 Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến khả rễ, chất lượng rễ CD5 CD9 84 Bảng 4.13 Ảnh hưởng giá thể ñến tỷ lệ sống CD5 CD9 87 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………vi DANH MỤC CÁC ðỒ THỊ ðồ thị 4.1 Ảnh hưởng BAP ñến HSN CD5 CD9 51 ðố thị 4.2 Ảnh hưởng Kinetin ñến HSN CD5 CD9 54 ðồ thị 4.3 Ảnh hưởng BAP NAA ñến HSN CD5 CD9 57 ðồi thị 4.4 Ảnh hưởng Kinetin NAA ñến HSN CD5 CD9 60 ðồ thị 4.5 Ảnh hưởng BAP, NAA Kinetin ñến HSN CD5 CD9 63 ðồ thị 4.6 Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD5 CD9 66 ðồ thị 4.7 Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN CD5 CD9 69 ðồ thị 4.8 Ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh ñến HSN CD5 CD9 72 ðố thị 4.9 Ảnh hưởng BAP dịch chiết chuối xanh ñến HSN CD5 CD9 75 ðồ thị 4.10 Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD5 CD9 78 ðồ thị 4.11 Ảnh hưởng than hoạt tính ñến số rễ trung bình 82 ðồ thị 4.12 Ảnh hưởng than hoạt tính ñến chiều dài trung bình rễ 82 ðồ thị 4.13 Ảnh hưởng THT NAA ñến chiều dài TB rễ 85 ðồ thị 4.14 Ảnh hưởng THT NAA ñến số rễ/cây 85 ðồ thị 4.15 Ảnh hưởng giá thể tới tỷ lệ sống CD5 CD9 87 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………vii DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 2.1 Sơ ñồ cắt dọc ñỉnh sinh trưởng chồi lan 22 Ảnh 3.1 Cymbidium iridioides var trangvietnam 38 Ảnh 3.2 Cymbidium iridioides var timhot .39 Ảnh 3.3 Vật liệu khởi ñầu 41 Ảnh 3.4 Sau tháng .41 Ảnh 4.1 Ảnh hưởng BAP ñến HSN CD5 51 Ảnh 4.2 Ảnh hưởng BAP ñến HSN CD9 51 Ảnh 4.3 Ảnh hưởng Kinetin ñến HSN CD5 54 Ảnh 4.4 Ảnh hưởng Kinetin ñến HSN CD9 54 Ảnh 4.5 Ảnh hưởng BAP NAA ñến HSN CD5 57 Ảnh 4.6 Ảnh hưởng BAP NAA ñến HSN CD9 57 Ảnh 4.7 Ảnh hưởng Kinetin NAA ñến HSN CD5 60 Ảnh 4.8 Ảnh hưởng Kinetin NAA ñến HSN CD9 60 Ảnh 4.9 Ảnh hưởng BAP, NAA Kinetin ñến HSN CD5 63 Ảnh 4.10: Ảnh hưởng BAP, NAA Kinetin ñến HSN CD9 63 Ảnh 4.11 Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD5 66 Ảnh 4.12 Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD9 66 Ảnh 4.13 Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN CD5 69 Ảnh 4.14 Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN CD9 69 Ảnh 4.15 Ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh ñến HSN CD5 72 Ảnh 4.16 Ảnh hưởng dịch chiết chuối xanh ñến HSN CD9 72 Ảnh 4.17 Ảnh hưởng BAP dịch chiết chuối xanh ñến HSN CD5 75 Ảnh 4.18 Ảnh hưởng BAP dịch chiết chuối xanh ñến HSN CD975 Ảnh 4.19 Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD5 78 Ảnh 4.20 Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD9 78 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………viii DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT BAP: 6-benzyl amino purine CD5: Cymbidium iridioides var trangvietnam CD9: Cymbidium iridioides var timhot HSN: Hệ số nhân IBA: 3-indole butyric acid Ki: Kinetin NAA: α-naphthalene acetic acid Pr: protocorm Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………ix BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE KNI9 27/ 7/ 21:38 :PAGE Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN CD9 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 205.561 41.1122 267.61 0.000 * RESIDUAL 18 2.76530 153628 * TOTAL (CORRECTED) 23 208.327 9.05768 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KNI9 27/ 7/ 21:38 :PAGE Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 4 HSN 12.6786 9.57143 8.92857 7.07143 5.89286 3.42857 SE(N= 4) 0.195977 5%LSD 18DF 0.582276 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KNI9 27/ 7/ 21:38 :PAGE Ảnh hưởng Kinetin, NAA IBA ñến HSN CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 7.9286 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.0096 0.39195 4.9 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………110 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE BNI5 27/ 7/ 20:57 :PAGE Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD5 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 388.847 77.7694 331.37 0.000 * RESIDUAL 18 4.22449 234694 * TOTAL (CORRECTED) 23 393.071 17.0901 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BNI5 27/ 7/ 20:57 :PAGE Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD5 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 4 HSN 19.5000 11.2143 10.5714 9.71428 7.78571 7.42857 SE(N= 4) 0.242226 5%LSD 18DF 0.719689 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BNI5 27/ 7/ 20:57 :PAGE Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD5 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 11.036 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.1340 0.48445 4.4 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………111 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE BNI9 27/ 7/ 21:20 :PAGE Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD9 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 288.688 57.7376 231.21 0.000 * RESIDUAL 18 4.49491 249717 * TOTAL (CORRECTED) 23 293.183 12.7471 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BNI9 27/ 7/ 21:20 :PAGE Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 4 HSN 17.1429 13.4643 11.6429 10.0357 8.60714 6.35714 SE(N= 4) 0.249858 5%LSD 18DF 0.742366 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BNI9 27/ 7/ 21:20 :PAGE Ảnh hưởng BAP, NAA IBA ñến HSN CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 11.208 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.5703 0.49972 4.5 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………112 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE CH5 27/ 7/ 21: :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN CD5 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 28.5510 7.13776 170.61 0.000 * RESIDUAL 15 627552 418368E-01 * TOTAL (CORRECTED) 19 29.1786 1.53571 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CH5 27/ 7/ 21: :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN CD5 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 HSN 3.21429 5.85714 6.50000 4.42857 4.10714 SE(N= 4) 0.102270 5%LSD 15DF 0.308279 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CH5 27/ 7/ 21: :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN CD5 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 20) NO OBS 20 4.8214 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2392 0.20454 4.2 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………113 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE CH9 27/ 7/ 21:27 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN CD9 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 31.2796 7.81990 258.32 0.000 * RESIDUAL 15 454085 302723E-01 * TOTAL (CORRECTED) 19 31.7337 1.67019 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CH9 27/ 7/ 21:27 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 HSN 3.03571 6.85714 4.42857 4.32143 4.17857 SE(N= 4) 0.869947E-01 5%LSD 15DF 0.262233 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CH9 27/ 7/ 21:27 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh ñến HSN CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 20) NO OBS 20 4.5643 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.2924 0.17399 3.8 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………114 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE CH+5 30/ 7/ 21:17 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh BAP ñến HSN CD5 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 210.953 52.7383 393.53 0.000 * RESIDUAL 15 2.01019 134013 * TOTAL (CORRECTED) 19 212.963 11.2086 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CH+5 30/ 7/ 21:17 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh BAP ñến HSN CD5 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 HSN 12.2500 13.2857 11.5000 6.25000 5.42857 SE(N= 4) 0.183039 5%LSD 15DF 0.551744 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CH+5 30/ 7/ 21:17 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh BAP ñến HSN CD5 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 20) NO OBS 20 9.7429 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.3479 0.36608 3.8 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………115 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE CH+9 30/ 7/ 21:49 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh BAP ñến HSN CD9 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 326.225 81.5561 778.50 0.000 * RESIDUAL 15 1.57140 104760 * TOTAL (CORRECTED) 19 327.796 17.2524 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE CH+9 30/ 7/ 21:49 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh BAP ñến HSN CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 DF HSN 12.9643 13.8929 6.60714 4.85714 4.53571 SE(N= 4) 0.161833 5%LSD 15DF 0.487823 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE CH+9 30/ 7/ 21:49 :PAGE Ảnh hưởng chuối xanh BAP ñến HSN CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 20) NO OBS 20 8.5714 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.1536 0.32367 3.8 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………116 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE NDUA5 27/ 7/ 21:10 :PAGE Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD5 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 13.7449 4.58163 114.64 0.000 * RESIDUAL 12 479593 399661E-01 * TOTAL (CORRECTED) 15 14.2245 948299 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NDUA5 27/ 7/ 21:10 :PAGE Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD5 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 HSN 4.00000 6.32143 4.85714 4.10714 SE(N= 4) 0.999576E-01 5%LSD 12DF 0.308003 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NDUA5 27/ 7/ 21:10 :PAGE Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD5 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 16) NO OBS 16 4.8214 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.97381 0.19992 4.1 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………117 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSN FILE NDUA9 27/ 7/ 21:40 :PAGE Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD9 VARIATE V003 HSN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 15.1173 5.03912 141.10 0.000 * RESIDUAL 12 428571 357143E-01 * TOTAL (CORRECTED) 15 15.5459 1.03639 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NDUA9 27/ 7/ 21:40 :PAGE Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 HSN 3.39286 5.89286 4.10714 3.67857 SE(N= 4) 0.944911E-01 5%LSD 12DF 0.291159 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NDUA9 27/ 7/ 21:40 :PAGE Ảnh hưởng nước dừa ñến HSN CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE HSN GRAND MEAN (N= 16) NO OBS 16 4.2679 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.0180 0.18898 4.4 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………118 BALANCED ANOVA FOR VARIATE L R? TB FILE THT5 1/ 8/ 21:48 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD5 VARIATE V003 L R? TB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 4.05500 1.01375 272.19 0.000 * RESIDUAL 15 558660E-01 372440E-02 * TOTAL (CORRECTED) 19 4.11087 216361 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THT5 1/ 8/ 21:48 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD5 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 L R? TB 0.972587 1.28808 2.20779 1.94739 1.80638 SE(N= 4) 0.305139E-01 5%LSD 15DF 0.919797E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THT5 1/ 8/ 21:48 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD5 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE L R? TB GRAND MEAN (N= 20) NO OBS 20 1.6444 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.46515 0.61028E-01 3.7 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………119 BALANCED ANOVA FOR VARIATE L R? TB FILE THAN9 1/ 8/ 21:53 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD9 VARIATE V003 L R? TB LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 6.49723 1.62431 586.22 0.000 * RESIDUAL 15 415625E-01 277084E-02 * TOTAL (CORRECTED) 19 6.53879 344147 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE THAN9 1/ 8/ 21:53 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 L R? TB 1.02846 1.34688 2.41784 2.32023 2.24367 SE(N= 4) 0.263194E-01 5%LSD 15DF 0.793358E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE THAN9 1/ 8/ 21:53 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính ñến rễ CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE L R? TB GRAND MEAN (N= 20) NO OBS 20 1.8714 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.58664 0.52639E-01 2.8 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………120 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DàI R? T FILE NVAC5 1/ 8/ 21:51 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến rễ CD5 VARIATE V003 DàI R? T LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.11617 623233 215.11 0.000 * RESIDUAL 18 521514E-01 289730E-02 * TOTAL (CORRECTED) 23 3.16832 137753 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NVAC5 1/ 8/ 21:51 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến rễ CD5 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 4 DàI R? T 2.11608 2.32215 2.86210 3.14666 2.63875 2.27056 SE(N= 4) 0.269133E-01 5%LSD 18DF 0.799633E-01 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NVAC5 1/ 8/ 21:51 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến rễ CD5 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DàI R? T GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 2.5594 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.37115 0.53827E-01 2.1 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………121 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DàI R? T FILE TVAN9 1/ 8/ 21:55 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến HSN CD9 VARIATE V003 DàI R? T LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 5.61071 1.12214 224.80 0.000 * RESIDUAL 18 898524E-01 499180E-02 * TOTAL (CORRECTED) 23 5.70056 247850 - TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TVAN9 1/ 8/ 21:55 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến HSN CD9 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS 4 4 4 DàI R? T 2.36862 2.93988 3.36949 3.88684 3.57892 3.16030 SE(N= 4) 0.353263E-01 5%LSD 18DF 0.104960 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TVAN9 1/ 8/ 21:55 :PAGE Ảnh hưởng than hoạt tính NAA ñến HSN CD9 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE DàI R? T GRAND MEAN (N= 24) NO OBS 24 3.2173 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.49785 0.70653E-01 2.2 0.0000 | | | | Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………122 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………123 [...]... và nhân nhanh giống Hoàng Lan thuộc chi lan kiếm Cymbidium 1.2 Mục ñích, yêu cầu của ñề tài 1.2.1 Mục ñích Xác ñịnh ñược môi trường và nồng ñộ chất ñiều hoà sinh trưởng phù hợp cho tái sinh, nhân nhanh và tạo cây hoàn chỉnh, góp phần xây dựng quy trình nhân giống cây hoa Hoàng Lan 1.2.2 Yêu cầu - Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và chất ñiều hoà sinh trưởng (Cytokinins, Auxin) ñến nhân nhanh, tái. .. giống lan Giống Hoàng Lan thuộc chi lan kiếm Cymbidium có rất nhiều thứ, và 2 trong số những thứ rất ñẹp và nổi tiếng của giống này là Cymbidium iridioides var timhot va Cymbidium iridioides var trangvietnam Tuy nhiên, chưa có nhiều kết quả nghiên cứu về 2 loại lan này Vì vậy, chúng tôi tiến hành nghiên cứu ñề tài: Nghiên cứu ảnh hưởng của môi trường và chất ñiều hoà sinh trưởng ñến khả năng tái sinh và. .. ñồ cắt dọc ñỉnh sinh trưởng chồi lan 2.3.2 Môi trường nuôi cấy lan Thường môi trường nuôi cấy ñỉnh sinh trưởng tương ñối ñơn giản Môi trường khoáng MS (1962) có bổ sung chất ñiều hòa tăng trưởng BA 1mg/l và NAA 0,1 mg/l Ngoài ra các chất chi t từ trái cây cũng ñược sử dụng như nước dừa 10%, khoai tây [10], [43] Sau 10-12 tuần nuôi cấy, các ñỉnh sinh trưởng chuyển sang màu xanh lục và tạo ra các khối... phân chia lan theo mùa hoa nở như: xuân lan, thu lan, ñông lan [31] Lan ở ðà Lạt ñược xếp thành 3 loại chính là thổ lan, thạch lan và phong lan Thổ lan tức lan ñất, mọc ở trên bờ suối hay ở những nơi ẩm ướt trong rừng thẳm Thạch lan tức lan ñá, mọc trong khe hay trên núi ñá có rêu xanh Phong lan thì sống cộng sinh trên thân cây khác Từ những cây sống cộng sinh trên các thân cây khác trong rừng, lan. .. bộ phận rất cần thiết cho sự sinh trưởng và phát triển của lan ña thân [14] Giả hành có thể nhỏ như lan Kiếm hoặc khá to như lan Bầu rượu (Catlanthe), ngắn hình thoi như lan Hoàng thảo Vẩy rồng, nhưng có loài khá dài (lan Hoàng thảo Phi ñiệp) dài tới 1m [31] Như vậy, thuật ngữ giả hành (củ giả) chỉ là thân của cây lan, chúng có các hình thù khác nhau Các chồi mới của lan ña thân mọc lên từ thân rễ, căn... mục ñích khác như nhân nhanh giống, nhân giống sạch bệnh, tăng hệ số nhân, nhân kiểu gen dị hợp… Nhiều cây trồng nhân giống in vitro ñã ñược thương mại ở Mỹ và Châu Âu với hàng trăm loài cây trồng khác nhau [56] Nhân giống in vitro ở cây thuốc cũng thu ñược những kết quả cao ở trên 100 loài cây thuốc và cây nhân giống invitro cho các hoạt chất tốt ñược N.Haq công bố năm 2000 [61] Nhân giống sử dụng nuôi... có nhiều người nghiên cứu về các khoá phân loại lan Kiếm, nên chúng ta chưa thể xếp các loài lan Kiếm truyền thống Việt Nam vào loại nào trong bảng phân loại bằng thuật ngữ khoa học Theo tập quán của các nghệ nhân chơi lan, lan Kiếm mọc trên ñất ñược phân loại theo màu sắc hoa như dòng Hoàng, dòng Thanh, dòng Mặc, dòng Bạch … [31] Sách Lan Vân Nam chia lan theo nhóm, lá bọc ñài dài và ngắn, nhóm trụ... nghiệp…) Năm 1963, Donald E Vimber ñã nghiên cứu trên giống Cymbidium nhưng lại cấy mô phân sinh trên môi trường lỏng và cũng cho kết quả tốt, tạo ra hàng trăm cây con từ một mô nuôi cấy trong thời gian từ 4 – 5 tháng [17], [43] Năm 1966, Yonco Sagawa và T Shoji ñã nuôi cấy mô phân sinh ñỉnh và mô phân sinh bên của Cymbidium trên cùng lúc hai môi trường lỏng và ñặc Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội –... 2,5% saccarose [46] Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ………………………23 Theo Nguyễn Quang Thạch, Hoàng Thị Nga, Lê Văn Vy, Hoàng Minh Tú (Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội) thực hiện nghiên cứu xây dựng quy trình kỹ thuật nuôi trồng cây ñịa lan (Cymbidium spp.) cấy mô Nghiên cứu tiến hành với 4 giống ñịa lan Xanh Chi u, Trung Quốc Xanh, Hồng Hoàng và Bạch Ngọc Kết quả... cấy ñỉnh sinh trưởng ñể tạo PLB là môi trường 1/2 MS (Murashige và Skoog, 1962) hay môi trường KnudsonC Môi trường nuôi cấy là môi trường MS có bổ sung chất kích thích sinh trưởng gồm 0,2 mg/l NAA; 2,0 mg/l BA và 15 % nước dừa là thích hợp cho quá trình nhân nhanh PLB [44] Qua các kỹ thuật cắt PLB thì cách cắt làm tư theo chi u gốc ngọn tạo PLB nhiều nhất [44] Môi trường có bổ sung 0,5 mg/l NAA thích