Hình Thể Trứng Một Số Loài Giun Sán

HÌNH THỂ TRỨNG MỘT SỐ LOÀI GIUN SÁN Giun, sán ký sinh ở đường tiêu hoá sinh sản thải trứng qua phân. Do đó để chẩn đoán nhiễm giun, sán cần định danh trứng giun, sán trong phân. • Trứng giun, sán thải ra phân có thể chứa ấu trùng hay chưa tuỳ loại giun, sán. Ví dụ: giun lươn, giun móc có thể đã có ấu trùng. • Để định danh trứng giun, sán khi quan sát cần mô tả các đặc điểm cấu tạo sau: Hình dạng, kích thước, màu sắc, tính chất... Hình thể trứng giun 1.1 Trứng giun đũa (Ascaris lumbricoides) 1.1.1.Trứng thụ tinh - Hình thuẫn, hình tròn (nếu nằm ngang) - Kích thước: 35-50 x 55-75 µm. - Tính chất: + Vỏ: Lớp vỏ albumin ngoài sần sùi nhuộm màu vàng của muối mật. Có thể tróc ra để lộ lớp vỏ trong màu xám đậm, dày. + Nhân: thường có một tế bào. + Khoảng trống giữa nhân và vỏ mờ. Trứng không thụ tinh - Hình thuẫn kéo dài ra. - Kích thước: 43-47 x 85-95 µm. - Tính chất: + Lớp vỏ sần sùi bên ngoài dễ tróc ra. Lớp vỏ trong mỏng. + Nhân: chứa nhiều không bào. 1.2. Trứng giun móc (Ancylostome duodenale) Giun mỏ ( Necator americanus) - Hình thuẫn. - Kích thước: 36-40 x 60-75 µm. - Tính chất: + Vỏ: 1 lớp vỏ móng. + Nhân: thường 4-8 tế bào, có khi đã có phôi bào. + Khoảng trống giữa vỏ và nhân rõ. Trứng giun đũa Trứng giun móc Màu vàng nhạt Màu xám nhạt Vỏ dày Vỏ mỏng Nhân 1 tế bào Nhân 4 tế bào Khoảng trống mờ Khoảng trống rõ 1.3. Trứng giun tóc (Trichuris trichiura) - Hình dạng: quả cau, hai đầu có nút là nơi ấu trùng đẩy vỏ chui ra. - Kích thước: 22-24 x 50-55 µm. - Tính chất: + Vỏ 2 lớp dày bắt màu vàng đậm. + Nhân: 1 tế bào. 1.4. Trứng giun kim (Enterobius vermicularis) - Hình dạng: hình bầu dục méo một bên. - Kích thước: 20-32 x 50-60 µm. - Tính chất: + Vỏ: 2 lớp mỏng màu xám nhạt. + Bên trong thường chứa ấu trùng. + Trứng giun kim rất chiết quang. Hình thể trứng sán Sán lá gan bé: (Clonorchis sinensis) - Hình quả đu đủ, có nắp ở đầu. Phía dưới có 1 gai nhỏ. - Kích thước: 12-19 x 27-35 µm. - Tính chất: + Vỏ: một lớp dày đều màu vàng nhạt. + Nhân: thường đã có ấu trùng lông màu nâu sẫm. Trứng sán lá gan lớn (Fasciola hepatica) Trứng sán lá ruột (Fasciolopsis buski) - Hình thuẫn rất lớn (lớn nhất trong các loại trứng giun sán ký sinh). - Kích thước: 63-90 x 130-150 µm. - Tính chất: + Vỏ: 2 lớp vỏ màu vàng ở một đầu có nắp. + Nhân: chứa nhiều tế bào. Trứng sán dây Sán dây lợn (Toenia solium) Sán đây bò (Toenia saginata) - Hình tròn, có màu vàng sẫm. - Đường kính: 31 x 43 µm. - Tính chất: + Vỏ: 2 lớp vỏ, có khía ngang như hình vành khăn. + Nhân: thường chứa đầy phôi, có 3 cặp móc. + Khoảng cách giữa vỏ và nhân rõ. KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM PHÂN TÌM KÝ SINH TRÙNG ĐƯỜNG TIÊU HOÁ Giun sán và đơn bào ký sinh ở hệ tiêu hóa sinh sản thải mầm bệnh trong phân (trứng, đốt sán, ấu trùng; kén đơn bào và thể hoạt động). Vì vậy xét nghiệm phân là phương pháp cơ bản để chẩn đoán nhiễm giun sán và đơn bào đường tiêu hóa. Chuẩn bị dụng cụ: - Lọ đựng phân: sạch khô, không thấm nước, có miệng rộng, nắp vặn chặt, thường dùng lọ penicillin, bao nylon, ghi tên tuổi, số giường, địa chỉ. - Dụng cụ lấy phân: que cấy, tăm tre, que nhựa; Số lượng phân: - Lượng phân từ: 3-5g (khoảng bằng hạt ngô) không lẫn nước tiểu, tạp chất. lamelle lame chai hoàûc tuïi nilon âæûng phán KHV que tre Cách lấy bệnh phẩm - Đối tượng lấy phân: bn cần chẩn đoán nhiễm KSTĐR, điều tra cộng đồng. - Nếu phân có khuôn: lấy ở nhiều vị trí trong và ngoài. - Nếu phân nhầy: lấy ở nơi có nhầy. - Nếu phân lỏng: lấy bất kỳ vị trí nào. Bảo quản bệnh phẩm - Thời gian từ lúc lấy phân đến lúc làm xét nghiệm: đối với giun sán không quá 24 giờ; đơn bào không quá 1 giờ để bảo đảm trứng giun không nở ra ấu trùng, đơn bào hoạt động không chết. - Trong trường hợp sau khi lấy phân mà chưa xét nghiệm được ngay nên bảo quản phân bằng 1 trong các dung dịch sau: + Formaline 5% + Formaline 10% + F2AM ( Phenol-Formol-Alcol-Methylene blue) + Dung dịch MIF ( Merthiolate Iodine Fomaline) Nước muối bảo hòa Lugol NaCl 0,9% Giấy cellophane Băng keo trong PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP - Đặt lame trên giá, đánh số thứ tự theo mẫu phân hay tên bệnh nhân lên một góc lame, chia lame làm 2 phần. - Nhỏ một giọt NaCl 0,9% lên trên trung tâm trái của lame và 1 giọt Lugol 2% lên trung tâm phải của lame. - Lấy que cấy chấm nhiều nơi nghi ngờ trên bệnh phẩm đặt lên giọt NaCl 0,9% khuấy đều cho đến lúc đục như nước vo gạo là được. - Cũng làm như vậy đối với giọt lugol 2%. - Dùng lamelle chạm nhẹ vào bờ giọt tạo góc 450 rồi thả nhẹ nhàng xuống để tránh không khí lọt vào. - Sau đó soi kính hiển vi: + Sử dụng vật kính x10 đối với trứng giun sán, khi có hình ảnh nghi ngờ đơn bào thì chuyển sang vật kính x40 để khảo sát hình thể chi tiết. + Soi toàn bộ lame theo hình ziczac (chữ chi) để không bỏ sót vi trường nào. . Tiêu chuẩn kỹ thuật - Tiêu bản không dày hoặc mỏng quá (đọc được chữ bên dưới tiêu bản phân). - Phân tan đều, không có bọt, lượng nước vừa đủ (khi nghiêng tiêu bản nước không bị chảy ra ngoài, lá kính không bị trôi nổi). Ý nghĩa - Kỹ thuật trực tiếp có thể phát hiện được tất cả đơn bào và trứng giun sán cho kết quả nhanh, đơn giản, nhưng có thể bỏ sót vì lượng phân ít. Kỹ thuật phong phú Willis Nguyên tắc: - Làm nổi trứng giun sán bằng dung dịch nước muối bão hoà,(có tỉ trọng lớn d=1,15 -1,20) - Trứng giun sán có khuynh hướng bám vào mặt thuỷ tinh. Cách làm: - Cho 5g phân vào lọ penicillin - Đổ NaCl bão hoà vào lọ khoảng 1/3 chai rồi đánh cho tan. - Đổ nước muối cho đầy (vớt rác bẩn). - Thêm vài giọt nước muối bão hòa sao cho mặt cong lồi lên miệng lọ. - Lấy lame úp lên miệng,sau15 phút cho trứng nổi lên dính vào lame. Sau đó lật nhanh lame lên, đậy lamelle lại soi kính hiển vi vật kính x10. Ý nghĩa: Xác định trứng giun tốt hơn do tập trung được nhiều trứng nhưng chậm. Tuy nhiên không phát hiện được trứng sán (nổi lên chậm) và đơn bào (đơn bào bị teo lại do nước muối bão hoà). Kỹ thuật Kato (do Kato và Miura đưa ra năm 1954). Nguyên tắc: Là phương pháp tìm trứng giun sán với số lượng phân lớn. Dụng cụ, hóa chất: - Kính hiển vi, lame, nút cao su, que tre để lấy phân. - Giấy Kato có sẵn trên thị trường hoặc có thể tự làm trong phòng xét nghiệm. Cách làm giấy cellophane ưa nước được cắt thành từng mảnh, kích thước 26 x 28mm, dày 40µm.ngâm 24 giờ trong dung dịch: + 100 ml nước cất. + 100 ml glycerine. + 1 ml dung dịch lục malachite 3% Cách làm: - Dùng que tre lấy khoảng 60-70 mg phân (bằng hạt đậu đen) cho lên lame. Nếu phân khô quá thì cho 1 ít NaCl 0,9% để làm mềm phân. - Đậy mảnh giấy Kato lên trên. - Dùng nút cao su ấn cho phân dàn đều đến rìa của giấy Kato, ủ tiêu bản ở 37oC/ 30 phút. - Soi dưới kính hiển vi vật kính x10. * Chú ý: - Nếu để tiêu bản khô quá trứng giun móc có thể biến dạng khó nhận biết, ngược lại để tiêu bản ướt chưa đủ độ trong cần thiết cũng khó soi. Tiêu bản đạt yêu cầu khi đặt lên tờ báo có thể đọc được chữ bên dưới. Ý nghĩa: số lượng phân nhiều hơn nên kết quả chính xác hơn kỹ thuật xét nghiệm phân trực tiếp. Vì vậy kỹ thuật này thuận tiện trong chẩn đoán, điều tra và nghiên cứu cộng đồng 4. KYÎ THUÁÛT KATO : • Caïc h tiãún haìn h. B2: Đậy mảnh cellophane đã B3: Dùng nút cao su ấn cho phân dàn được ngâm trong dung dịch B1: Dùng que tre lấy đều đến rìa của mãnh cellophane, có malachite lên trên. khoảng 60-70mg phânđể tiêu bản khô. (bằng hạt đậu đen) cho lên phiến kính. 4. KYÎ THUÁÛT KATO : • Yãu cáöu kyî thuáût : - Khä âuí âäü cáön thiãút. • Æu nhæåüc âiãøm : - Xaïc âënh täút træïng giun saïn do læåüng phán nhiãöu. - Máút thåìi gian, khäng phaït hiãûn âæåüc âån baìo hoaût âäüng. Kỹ thuật giấy bóng kính tìm trứng giun kim (kỹ thuật Graham): Nguyên tắc Dùng giấy bóng kính dính để thu thập trứng giun kim. Dụng cụ, hóa chất Kính hiển vi, lame, giấy bóng kính dính. Cách làm - Dùng giấy bóng kính lớn bôi một lớp hồ ở một mặt (đánh dấu mặt bôi hồ) rồi để khô tự nhiên (phơi nắng hồ sẽ bong ra) ở nơi im mát. Sau đó cắt từng miếng nhỏ 2cm x 4cm. Đánh dấu mặt có hồ bằng cách cắt một góc trái của mặt có hồ. Bôi một lớp nước cho mềm lớp hồ. Áp giấy vào hậu môn bệnh nhân rồi lấy ra dán lên lame và soi kính hiển vi vật kính x10. - Hiện nay người ta sử dụng băng keo trong thay cho giấy bóng kính có bôi hồ ở trên. - Để bảo đảm kết quả: lấy phân vào buổi sáng lúc bệnh nhân chưa đi cầu. Ý nghĩa Do đặc điểm sinh học của giun kim là không đẻ trứng trong đường tiêu hóa nên đây là kỹ thuật chuyên biệt để phát hiện trứng giun kim. [...]... chảy ra ngồi, lá kính khơng bị trơi nổi) Ý nghĩa - Kỹ thuật trực tiếp có thể phát hiện được tất cả đơn bào và trứng giun sán cho kết quả nhanh, đơn giản, nhưng có thể bỏ sót vì lượng phân ít Kỹ thuật phong phú Willis Ngun tắc: - Làm nổi trứng giun sán bằng dung dịch nước muối bão hồ,(có tỉ trọng lớn d=1,15 -1,20) - Trứng giun sán có khuynh hướng bám vào mặt thuỷ tinh Cách làm: - Cho 5g phân vào lọ... phút cho trứng nổi lên dính vào lame Sau đó lật nhanh lame lên, đậy lamelle lại soi kính hiển vi vật kính x10 Ý nghĩa: Xác định trứng giun tốt hơn do tập trung được nhiều trứng nhưng chậm Tuy nhiên khơng phát hiện được trứng sán (nổi lên chậm) và đơn bào (đơn bào bị teo lại do nước muối bão hồ) Kỹ thuật Kato (do Kato và Miura đưa ra năm 1954) Ngun tắc: Là phương pháp tìm trứng giun sán với số lượng.. .Trứng sán dây Sán dây lợn (Toenia solium) Sán đây bò (Toenia saginata) - Hình tròn, có màu vàng sẫm - Đường kính: 31 x 43 µm - Tính chất: + Vỏ: 2 lớp vỏ, có khía ngang như hình vành khăn + Nhân: thường chứa đầy phơi, có 3 cặp móc + Khoảng cách giữa vỏ và nhân rõ KỸ THUẬT XÉT NGHIỆM PHÂN TÌM KÝ SINH TRÙNG ĐƯỜNG TIÊU HỐ Giun sán và đơn bào ký sinh ở hệ tiêu hóa sinh sản thải mầm bệnh trong phân (trứng, ... nhẹ vào bờ giọt tạo góc 450 rồi thả nhẹ nhàng xuống để tránh khơng khí lọt vào - Sau đó soi kính hiển vi: + Sử dụng vật kính x10 đối với trứng giun sán, khi có hình ảnh nghi ngờ đơn bào thì chuyển sang vật kính x40 để khảo sát hình thể chi tiết + Soi tồn bộ lame theo hình ziczac (chữ chi) để khơng bỏ sót vi trường nào Tiêu chuẩn kỹ thuật - Tiêu bản khơng dày hoặc mỏng q (đọc được chữ bên dưới tiêu... nhỉåüc âiãøm : - Xạc âënh täút trỉïng giun sạn do lỉåüng phán nhiãưu - Máút thåìi gian, khäng phạt hiãûn âỉåüc âån bo hoảt âäüng Kỹ thuật giấy bóng kính tìm trứng giun kim (kỹ thuật Graham): Ngun tắc Dùng giấy bóng kính dính để thu thập trứng giun kim Dụng cụ, hóa chất Kính hiển vi, lame, giấy bóng kính dính Cách làm - Dùng giấy bóng kính lớn bơi một lớp hồ ở một mặt (đánh dấu mặt bơi hồ) rồi để khơ... bệnh trong phân (trứng, đốt sán, ấu trùng; kén đơn bào và thể hoạt động) Vì vậy xét nghiệm phân là phương pháp cơ bản để chẩn đốn nhiễm giun sán và đơn bào đường tiêu hóa Chuẩn bị dụng cụ: - Lọ đựng phân: sạch khơ, khơng thấm nước, có miệng rộng, nắp vặn chặt, thường dùng lọ penicillin, bao nylon, ghi tên tuổi, số giường, địa chỉ - Dụng cụ lấy phân: que cấy, tăm tre, que nhựa; Số lượng phân: - Lượng phân... giấy Kato, ủ tiêu bản ở 37oC/ 30 phút - Soi dưới kính hiển vi vật kính x10 * Chú ý: - Nếu để tiêu bản khơ q trứng giun móc có thể biến dạng khó nhận biết, ngược lại để tiêu bản ướt chưa đủ độ trong cần thiết cũng khó soi Tiêu bản đạt u cầu khi đặt lên tờ báo có thể đọc được chữ bên dưới Ý nghĩa: số lượng phân nhiều hơn nên kết quả chính xác hơn kỹ thuật xét nghiệm phân trực tiếp Vì vậy kỹ thuật này thuận... mặt có hồ bằng cách cắt một góc trái của mặt có hồ Bơi một lớp nước cho mềm lớp hồ Áp giấy vào hậu mơn bệnh nhân rồi lấy ra dán lên lame và soi kính hiển vi vật kính x10 - Hiện nay người ta sử dụng băng keo trong thay cho giấy bóng kính có bơi hồ ở trên - Để bảo đảm kết quả: lấy phân vào buổi sáng lúc bệnh nhân chưa đi cầu Ý nghĩa Do đặc điểm sinh học của giun kim là khơng đẻ trứng trong đường tiêu... trí trong và ngồi - Nếu phân nhầy: lấy ở nơi có nhầy - Nếu phân lỏng: lấy bất kỳ vị trí nào Bảo quản bệnh phẩm - Thời gian từ lúc lấy phân đến lúc làm xét nghiệm: đối với giun sán khơng q 24 giờ; đơn bào khơng q 1 giờ để bảo đảm trứng giun khơng nở ra ấu trùng, đơn bào hoạt động khơng chết - Trong trường hợp sau khi lấy phân mà chưa xét nghiệm được ngay nên bảo quản phân bằng 1 trong các dung dịch sau:... Dung dịch MIF ( Merthiolate Iodine Fomaline) Nước muối bảo hòa Lugol NaCl 0,9% Giấy cellophane Băng keo trong PHƯƠNG PHÁP TRỰC TIẾP - Đặt lame trên giá, đánh số thứ tự theo mẫu phân hay tên bệnh nhân lên một góc lame, chia lame làm 2 phần - Nhỏ một giọt NaCl 0,9% lên trên trung tâm trái của lame và 1 giọt Lugol 2% lên trung tâm phải của lame - Lấy que cấy chấm nhiều nơi nghi ngờ trên bệnh phẩm đặt lên .. .Giun, sán ký sinh đường tiêu hố sinh sản thải trứng qua phân Do để chẩn đốn nhiễm giun, sán cần định danh trứng giun, sán phân • Trứng giun, sán thải phân chứa ấu trùng hay chưa tuỳ loại giun, ... Ví dụ: giun lươn, giun móc có ấu trùng • Để định danh trứng giun, sán quan sát cần mơ tả đặc điểm cấu tạo sau: Hình dạng, kích thước, màu sắc, tính chất Hình thể trứng giun 1.1 Trứng giun đũa... Khoảng trống vỏ nhân rõ Trứng giun đũa Trứng giun móc Màu vàng nhạt Màu xám nhạt Vỏ dày Vỏ mỏng Nhân tế bào Nhân tế bào Khoảng trống mờ Khoảng trống rõ 1.3 Trứng giun tóc (Trichuris trichiura)