Xét Nghiệm Chuẩn Đoán Bệnh Vi Nấm

XÉT NGHIỆM CHẨN ĐOÁN BỆNH VI NẤM Mục tiêu: 1. Xét nghiệm nấm trực tiếp: nguyên lý, kỹ thuật tiến hành với một số bệnh phẩm, đọc kết quả 2. Nuôi cấy nấm: các đặc tính nuôi cấy của vi nấm, môi trường nuôi cấy, thời gian nhiệt dộ nuôi cấy, phân lập và định danh 3. Hình thể gây bệnh một số vi nấm thường gặp XÉT NGHIỆM NẤM TRỰC TiẾP Nguyên tắc của kỹ thuật Vách Tb nấm: cellulose, chitosan, chitin: + KOH (10- 20%) Nguyên tắc lấy bệnh phẩm: đúng vị trí Chuẩn bị hóa chất, dụng cụ • • • • Dụng cụ lấy bệnh phẩm Dụng cụ đựng bệnh phẩm Dụng cụ làm tiêu bản Hóa chất Dụng cụ: - lam, lamen, giá đựng lam, bút viết lam - Dụng cụ lấy bệnh phẩm - Đèn cồn Hóa chất: - Cồn sát khuẩn - Hóa chất XN + KOH 10%, 20%, 30% + NaCl 0,9% + Mực Tàu + Thuốc nhuộm Giemsa + LPCB Yêu cầu khi lấy bệnh phẩm - Đảm bảo vô khuẩn - Đúng vị trí - Đúng kỹ thuật - Bn không dùng thuốc kháng nấm trước đó (7-10 ngày) Kỹ thuật xét nghiệm nấm trực tiếp Người lấy bệnh phẩm: Bệnh phẩm gì? - Bệnh nhân tự lấy - Kỹ thuật viên lấy - Bác sĩ chuyên khoa lấy KỸ THUẬT TIẾN HÀNH Bệnh nấm nông: Da lông tóc móng Da KOH 20% Tóc Móng Niêm mạc, dịch tiết NaCl 0,9% 5. Phân 6. Nước tiểu 7. Đàm 8. Dịch não tủy 9. Máu 10. Tổ chức sinh thiết NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ Có nấm - nấm men - nấm sợi có vách ngăn - nấm sợi không có vách ngăn -bào tử nấm: bào tử chồi, bào tử đốt, bào tử đính Không có nấm: bệnh nhân có nhiễm nấm không? Đọc kết quả XNTT BP Da XNTT BP tóc XNTT BP móng Trường hợp nấm nội hoại sinh CẤY NẤM Mục tiêu: 1.Kể tên các môi trường nuôi cấy nấm thông dụng, ứng dụng cụ thể 2.Các đặc tính nuôi cấy của nấm 3.Điều kiện nuôi cấy nấm CÁC ĐẶC TÍNH NUÔI CẤY CỦA VI NẤM 1. Dinh dưỡng đơn giản: Môi trường Sabouraud 2. Vi nấm mọc chậm hơn VK: S + chloramphenicole: SC 3. Nấm gây bệnh mọc chậm hơn nấm nhiễm: SC + Cycloheximide (Actidion) :SCC, SAC 4. Hiện tượng nhị độ: Histoplasma capsulatum, Sporothrix schenskii, Penicillium marneffei 5. Hiện tượng biến hình NUÔI CẤY NẤM Mục đích Nguyên tắc: dinh dưỡng của nấm Các môi trường cấy nấm thông dụng - SC - SCA -Sabouraud lỏng, thạch máu, BHI -Thạch khoai tây, - Thạch bột ngô –tween 80 Điều kiện nuôi cấy Thời gian nuôi cấy: - Nấm men - Nấm sợi Nhiệt độ nuôi cấy - 25 -280 C - 37 0 C - Cấy hai nhiệt độ Định danh vi nấm: Nấm sợi Hình ảnh định danh nấm men C.albicans trên môi trường thạch bột ngô Định danh C. parapilosis bằng kit Auxcolor Định danh C. tropicalis bằng kit Auxcolor HÌNH THỂ VI NẤM Nấm ngoại biên:Trứng tóc đen (Piedraia hortai) NẤM DA Nấm sợi có vách ngăn, định danh nấm chủ yếu dựa vào bào tử đính lớn, bào tử đính nhỏ phát sinh trực tiếp từ sợi nấm Bào tử đính lớn - Số lượng -Kích thước (µm) - Số vách ngăn -Bề dầy vách -Bề mặt vách tế bào - Cách đính vào sợi tơ nấm - Số loại hiện biết Microsporum rất nhiều Trichophyton Epidermophyton (5-100) x (3-8) hiếm, đôi khi không có (20-50) x (4-6) nhiều (20-40) x (6-8) 3 - 15 dầy xù xì, có gai 2-8 mỏng nhẵn 2-4 trung bình nhẵn từng cái từng cái chùm 2, 3 cái 15 21 1 - Microsporum sp. - Epidermophyton floccosum Hçnh aín h âaûi thãø vaì vi thãø cuía M.canis Hçnh aín h âaûi thãø vaì vi thãø cuía E. floccosum Microsporum Trichophyton Trichophyton rubrum Trichophyton NẤM NỘI TẠNG • Nấm men: + Cryptococcus neoformans + Candida sp. • Nấm sợi: + Aspergillus sp. + Penicillium sp. CRYPTOCOCCUS Khúm Candida sp. trên môi trường Sabouraud Thử nghiệm huyết thanh Aspergillus fumigatus Aspergillus niger Aspergillus flavus Aspergillus nidulans Penicillium Penicillium sp Penicillium sp Penicillium sp Penicillium sp [...]... BP túc XNTT BP múng Trng hp nm ni hoi sinh CY NM Mc tiờu: 1.K tờn cỏc mụi trng nuụi cy nm thụng dng, ng dng c th 2.Cỏc c tớnh nuụi cy ca nm 3.iu kin nuụi cy nm CC C TNH NUễI CY CA VI NM 1 Dinh dng n gin: Mụi trng Sabouraud 2 Vi nm mc chm hn VK: S + chloramphenicole: SC 3 Nm gõy bnh mc chm hn nm nhim: SC + Cycloheximide (Actidion) :SCC, SAC 4 Hin tng nh : Histoplasma capsulatum, Sporothrix schenskii,... ngụ tween 80 iu kin nuụi cy Thi gian nuụi cy: - Nm men - Nm si Nhit nuụi cy - 25 -280 C - 37 0 C - Cy hai nhit nh danh vi nm: Nm si Hỡnh nh nh danh nm men C.albicans trờn mụi trng thch bt ngụ nh danh C parapilosis bng kit Auxcolor nh danh C tropicalis bng kit Auxcolor HèNH TH VI NM Nm ngoi biờn:Trng túc en (Piedraia hortai) NM DA Nm si cú vỏch ngn, nh danh nm ch yu da vo bo t ớnh ln, bo t ớnh nh... (20-40) x (6-8) 3 - 15 dy xự xỡ, cú gai 2-8 mng nhn 2-4 trung bỡnh nhn tng cỏi tng cỏi chựm 2, 3 cỏi 15 21 1 - Microsporum sp - Epidermophyton floccosum Hỗnh aớn h õaỷi thóứ vaỡ vi thóứ cuớa M.canis Hỗnh aớn h õaỷi thóứ vaỡ vi thóứ cuớa E floccosum Microsporum Trichophyton ... -bo t nm: bo t chi, bo t t, bo t ớnh Khụng cú nm: bnh nhõn cú nhim nm khụng? c kt qu XNTT BP Da XNTT BP túc XNTT BP múng Trng hp nm ni hoi sinh CY NM Mc tiờu: 1.K tờn cỏc mụi trng nuụi cy nm thụng... lam, lamen, giỏ ng lam, bỳt vit lam - Dng c ly bnh phm - ốn cn Húa cht: - Cn sỏt khun - Húa cht XN + KOH 10%, 20%, 30% + NaCl 0,9% + Mc Tu + Thuc nhum Giemsa + LPCB Yờu cu ly bnh phm - m bo vụ