khảo sát lý hóa tính và mật số vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn hòa tan lân trong đất xám trồng bắp ở miền đông nam bộ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC -------- LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHẢO SÁT LÝ HÓA TÍNH VÀ MẬT SỐ VI KHUẨN CỐ ĐỊNH ĐẠM, VI KHUẨN HÒA TAN LÂN TRONG ĐẤT XÁM TRỒNG BẮP Ở MIỀN ĐÔNG NAM BỘ CÁN BỘ HƯỚNG DẪN GS.Ts CAO NGỌC ĐIỆP SINH VIÊN THỰC HIỆN LÝ HOÀNG THÂN MSSV: 3102864 LỚP: CNSH K36 Cần Thơ, Tháng 11/2013 PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Cao Ngọc Điệp Lý Hoàng Thân XÉT DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN Cần Thơ, Ngày tháng năm 2013. CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG LỜI CẢM TẠ ------------------ -----------------Đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến cha mẹ - người có công sinh thành, nuôi dưỡng dạy dỗ đến ngày hôm nay. Chân thành cảm ơn Ban Lãnh đạo tất quý thầy cô Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học tạo điều kiện cho em học tập, nghiên cứu, trao dồi kiến thức năm qua. Xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến Thầy hướng dẫn – GS. Ts Cao Ngọc Điệp dìu dắt, tận tâm dẫn suốt thời gian học tâp trình thực thí nghiệm viết luận văn. Cám ơn chị Trần Thị Giang – cán phòng thí nghiệm anh, chị, em phòng thí nghiệm Vi sinh vật môi trường – Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghệ Sinh học tất bạn lớp Công nghệ Sinh học K36 nhiệt tình giúp đỡ, động viên cho lời khuyên bổ ích thời gian học tập lúc thực luận văn. Cuối lời, xin kính chúc Cha Mẹ, quý Thầy Cô anh chị dồi sức khoẻ, thành công hạnh phúc, chúc tất bạn lớp Công nghệ Sinh học K36 hoàn thành luận văn xuất sắc. TÓM LƯỢC Khảo sát số lý hóa tính đất bao gồm tiêu pH, hàm lượng chất hữu cơ, lân hữu dụng, đạm tổng số nhằm hiểu thêm thổ nhưỡng vùng đất Đông Nam Bộ. Kiểm tra mật số loài vi khuẩn có ích vi khuẩn hòa tan lân vi khuẩn cố định đạm có đất xám trồng bắp tỉnh: Tây Ninh, Đồng Nai, Bà Rịa- Vũng Tàu, Bình Phước. Thí nghiệm bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, đếm mật số vi khuẩn 24 mẫu đất lặp lại lần phương pháp đếm sống nhỏ giọt. Sau kết khảo sát thấy loài vi khuẩn có ích diện đất trồng bắp Đông Nam Bộ với mật số cao, có tiềm khai thác loài vi khuẩn địa làm phân sinh học lớn.Kiểm tra tương quan mật số loài vi khuẩn với tiêu hóa lý đất, cho thấy số tiêu đất có tương quan với mật số loài vi khuẩn trên. Mật số vi khuẩn cố định đạm pH (r =0,724*), chất hữu đất (r =0,651*), đạm tổng số (r =0,491*). Vi khuẩn hòa tan lân với pH (r =0,692*) chất hữu (r =0,412*). Ngoài tương quan tiêu khác lân hữu dụng, đạm tổng số với mật số vi khuẩn khác biệt ý nghĩa mặt thống kê mức 5%. Từ khóa: đạm tổng số, đếm sống nhỏ giọt, hệ số tương quan, lân hữu dụng, vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn hòa tan lân i MỤC LỤC PHẦN KÍ DUYỆT LỜI CẢM TẠ TÓM TẮT i MỤC LỤC .… ii DANH SÁCH BẢNG . V DANH SÁCH HÌNH . VI TỪ VIẾT TẮT………… .…………… ……………………………………………VII CHƯƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1. Đặt vấn đề 1.2. Mục tiêu đề tài . CHƯƠNG 2: LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1. Sơ lược Bắp . 2.1.1. Đặc điểm hình thái 2.1.2. Đặc điểm sinh trưởng bắp 2.1.3. Tình hình trồng bắp nước ta . 2.2. Sơ lược đất Đông Nam Bộ . 2.3. Quá trình cố định đạm sinh học 2.3.1. Quá trình cố định đạm (cố định nitơ phân tử) . 2.3.2. Các loài vi sinh vật tham gia trình cố định đạm 2.4. Quá trình chuyển hóa lân đất . 2.4.1. Đối với lân hữu 2.4.2. Đối với lân vô . 2.4.2.1. Sự chuyển hóa lân đất chua . 2.4.2.2. Sự chuyển hóa lân đất kiềm . 10 2.4.3. Các vi sinh vật chuyển hóa lân 10 CHƯƠNG 3. PHƯƠNG TIỆN VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1. Thời gian địa điểm nghiên cứu . 12 ii 3.1.1. Thời gian nghiên cứu 12 3.1.2. Địa điểm nghiên cứu . 12 3.2. Nguyên vật liệu nghiên cứu . 12 3.3. Phương tiện nghiên cứu . 12 3.3.1. Thiết bị 12 3.3.2. Dụng cụ thí nghiệm . 12 3.3.3. Hóa chất . 13 3.4. Phương pháp nghiên cứu 14 3.4.1. Thí nghiệm đo đạt số tiêu chất lượng đất 14 3.4.2. Khảo sát mật số vi khuẩn cố định đạm vi khuẩn hòa tan lân . 14 3.4.3. Xác định mật số vi sinh vật phương pháp đếm sống nhỏ giọt (Drop plate count) (Hoben Somasegaran, 1982) . 15 3.4.3. Xác định độ ẩm . 16 3.4.4. Phương pháp xử lý số liệu . 17 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 4.1. Các tiêu hóa lý mẫu đất xám trồng bắp Đông Nam Bộ . 18 4.1.1. Kết đo lân hữu dụng, chất hữu pH mẫu đất . 18 4.1.2. Kết đo hàm lượng đạm tổng số . 19 4.2. Kết khảo sát mật số vi khuẩn cố định đạm vi khuẩn hòa tan lân đất xám Đông Nam Bộ . 20 4.2.1. Mật số vi khuẩn cố định đạm . 20 4.2.2. Mật số vi khuẩn hòa tan lân 21 4.3. Kiểm tra tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn hòa tan lân với số tiêu hóa lý đất . 22 4.3.1. Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm với tiêu hóa lý đất. . 22 4.3.1.1. Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm pH 22 4.3.1.2. Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm đạm tổng số 24 iii 4.3.1.3. Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm chất hữu 25 4.3.1.4. Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm lân hữu dụng 27 4.3.2. Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với tiêu hóa lý đất. . 28 4.3.2.1. Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với pH 28 4.3.2.2. Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với đạm tổng số 29 4.3.2.3. Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với chất hữu . 30 4.3.2.4. Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với lân hữu dụng . 31 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 32 5.1. Kết luận 32 5.2. Đề nghị . 32 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 PHỤ LỤC iv DANH SÁCH BẢNG Bảng 1: Các loại đất vùng Đông Nam Bộ Bảng 2: Kết đo lân hữu dụng, chất hữu pH………………………………19 v DANH SÁCH HÌNH Hình 1: Cây bắp Hình 2: Vi khuẩn Sinorhizobium meliloti Hình 3: Vi khuẩn Rhizobium nốt sần rễ. .6 Hình 4: Vi khuẩn Azotobacter sp. Hình 5: Vi khuẩn Clostridium sp. Hình 6: Vi khuẩn Bacillus megaterium .11 Hình 7: Vi khuẩn Pseudomonas fluorescens .11 Hình 8: Pha loãng nhỏ giọt phương pháp đếm sống nhỏ giọt .16 Hình 9: Hàm lượng đạm tổng mẫu đất khảo sát……………………… 20 Hình 10: Mật số vi khuẩn cố định đạm mẫu đất khảo sát……………… 21 Hình 11: Mật số vi khuẩn hòa tan lân mẫu đất khảo sát………………… 22 Hình 12: Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm với pH…………………… 23 Hình 13: Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm với hàm lượng đạm tổng số ….24 Hình 14: Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm với hàm lượng chất hữu ….25 Hình 15: Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm với hàm lượng lân hữu dụng …26 Hình 16: Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với pH………………………… 27 Hình 17: Tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với chất hữu cơ…………………28 vi TỪ VIẾT TẮT cfu: Colony Forming Unit VK: Vi khuẩn Cđđ: cố định đạm ĐNB: Đông Nam Bộ TQ: Tương quan vii Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1. Kết luận Qua khảo sát mật số vi khuẩn cố định đạm vi khuẩn hòa tan lân đất xám trồng bắp Đông Nam Bộ, kết loài diện đất trồng với mật số cao [log(cfu/g đất khô kiệt)> 5,5] vi khuẩn cố định đạm [log(cfu/g đất khô kiệt)>4,1] với vi khuẩn hòa tan lân. Với mật số cao loài vi khuẩn có ích phân lập lựa chọn dòng địa có hoạt tính cao để sử dụng làm phân vi sinh. Kiểm tra tương quan mật số loài vi khuẩn với tiêu hoá lý đất. kết mật số vi khuẩn có tương quan chặt với vi khuẩn cố định đạm với pH (r =0,724*), chất hữu đất (r =0,651*), đạm tổng số (r =0,491*). Vi khuẩn hòa tan lân với pH (r =0,692*) chất hữu (r =0,412*). Bổ sung chất hữu cơ, bón vôi hay loại lân chậm tan có ý nghĩa để nâng cao mật số vi khuẩn cố định đạm vi khuẩn hòa tan lân. Mật số vi khuẩn cố định đạm tăng có ý nghĩa để tạo tiềm cung cấp đạm cải tạo đất. Với tiêu lân hữu dụng tương quan với mật số không rõ ràng ý nghĩa mặt thống kê mức 5%. 5.2. Đề nghị Khảo sát thêm đặc tính lý hóa đất để có hiểu biết sâu hàm lượng ion Al3+, Fe2+, hàm lượng kali có đất. Kiểm tra mật số vi khuẩn độ sâu khác nhau, mật số vi khuẩn đất qua mùa năm hay mùa vụ gieo trồng. Khảo sát đánh giá thêm mẫu đất tỉnh, thành phố khác thuộc miền Đông Nam Bộ nhằm có đánh giá tổng quan hơn. Kiểm tra thêm số tương quan khác mật số suất trồng, mật số ion Al, Fe. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 32 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Lê Hoàng Thăng. 2008. Phân lập số dòng vi khuẩn cố định đạm Azospirillum lúa. Luận văn tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ sinh học. Đại học Cần Thơ. Lê Văn Tri. 2002. Hỏi – đáp phân bón. NXB Nông Nghiệp. Lê Xuân Phương. 2005. Giáo trình vi sinh – trình công nghệ sinh học bảo vệ môi trường. Trường Đại học bách khoa Đà Nẵng. Nguyễn Đăng Diệp. 2000. Đề án kinh tế kĩ thuật xây dựng xưởng sản xuất phân bón sinh hóa hữu tổng hợp. Nguyễn Đức Lượng. 2004. Công nghệ vi sinh vật tập – Cơ sở vi sinh vật công nghiệp. NXB Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh. Nguyễn Đức Lượng. 2004. Công nghệ vi sinh vật tập – Vi sinh vật công nghiệp. NXB Đại học Quốc gia Thành phố Hồ Chí Minh. Nguyễn Hữu Hiệp, Renato Fani, Lê NgọcThúy, Ngô Bảo Ngọc, Trần thị NgọcTố Phạm Thị Khánh Vân. 2008. Phân lập dòng vi khuẩn nội sinh để sản xuất phân vi sinh quy mô phòng thí nghiệm cho mía trồng tỉnh Sóc Trăng. Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Đình Quyến Phạm Văn Ty. 2008. Vi sinh vật học. NXB Giáo Dục. Nguyễn Phú Thọ. 2006. Phân vi sinh. Thông tin khoa học – Đại học An Giang, (27), tr. 10-11. Nguyễn Quốc Thanh. 2005. Phân lập số dòng vi khuẩn hòa tan lân khó tan. Luận văn tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ. Nguyễn Thanh Hiền. 2003. Phân hữu cơ, phân vi sinh phân ủ. NXB Nghệ An. Nguyễn Xuân Thành, Lê Văn Hưng, Phạm Văn Toản. 2003. Giáo trình Công nghệ vi sinh vật sản xuất nông nghiệp bảo vệ môi trường. NXB Nông Nghiệp. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 33 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Phạm Thị Ánh Loan. 2007. Ảnh hưởng Polyvinyl Pyrrolidone (PVP) lên sống sót hoạt động Azospirillum lipoferum Pseudomonas syringea lúa cao sản OM4498, Luận văn tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ. Phạm Văn Kim. 2000. Giáo trình vi sinh vật chuyển hóa vật chất đất. Trường Đại học Cần Thơ. Trần Quốc Dẹn. 2009. Khảo sát khả sống sót phát triển vi sinh vật có ích phân vi sinh với chất mang bã bùn mía. Luận văn tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ Trần Thanh Việt. 2005. Chất mang thích hợp cho vi khuẩn Pseudomonas để sản xuất phân sinh học. Luận văn tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ. Trần Thị Ngọc Tố. 2006. Nghiên cứu nguồn Carbon thích hợp nuôi vi khuẩn Gluconacetobacter diazotrophicus chất mang thích hợp để sản xuất phân vi sinh cho mía. Luận văn tốt nghiệp Cử nhân Công nghệ sinh học, Đại học Cần Thơ. Viện Thổ Nhưỡng Nông Hóa. 1998. Sổ tay phân tích đất – nước, phân bón trồng. NXB Nông Nghiệp. Võ Đình Ngộ, Nguyễn Siêu Nhân, Trần Mạnh Trí. 1997. Than bùn Việt Nam sử dụng than bùn nông nghiệp. NXB Nông nghiệp Tp. Hồ Chí Minh. Hội khoa học đất Việt Nam. 2000. Đất Việt Nam. Nxb. Nông nghiệp, trang 110-195. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 34 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Tiếng Anh Glick, B.R. 1995. The enhancement of plant growth by free-living bacteria. Canadian journal of Microbiology. 41:109-117. Goldstein, A.H. 1986. Bacterial solubilization of mineral phosphates: historical perspective and furture prospects. American Journal of Alternative Agriculture. 1:51- 57. E. Yagil, S. Silver. Phosphate in Microorganisms: Cellular and Molecular Biology. Washington, DC. ASM Press:197 - 203 Neumann, B.A, H. Pospiech and H.U. Schairrer . 1992. Rapid isolation of genomic DNA from Gram – negative bacteria. Trends Genet, 8:332 - 333. Rajan, S.S.S., J.H. Watkinson and A.G. Sinclair . 1996. Phosphate rock of for direct application to soils. Adv. Agron. 57: 77-159. Sheng, X.F., Y. He, W.Y. Huang . 2002. The coditions of rekeasing potasium by a silicate dissolving bacterial strain NBT. Agr. Sci. China. 10:662-666. Sperberg, J.I. (1958). The incidence of apatite- solubilizing organisms in the rhizosphere and soil. Australian Journal of Agricultural and Resource Economics. 9:778. Tamura K., D. Peterson, N. Peterson, G. Stecher, M. Nei and S. Kumar. 2011. Molecular Evolutionary Genetics Analysis using Maximum Likehood, Evolutionary Distance and Maximum Parsimorcy Methods, 2011. In: MBE Advance Access published. Xiufang H, C. Jishuang and G. Jiangfeng . 2006. Two phosphate- and potassiumsolubilizing bacteria isolated from Tianmu Moutain, Zhejiang, China. World Journal of Microbiology and Biotechnology, 22: 983 - 990. TRANG WEB http:// vi.wikipedia.org(ngày 25/7/2013). http://vaas.vn/kienthuc/cayngo/dattrongngovungdongnambo(ngày 25/7/2013). http://doc.edu.vn/tai-lieu(ngày 25/7/2013). http://catethulhu.deviantart.com(ngày 25/7/2013). http://www.ppdictionary.com(ngày 25/7/2013) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 35 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Trường ĐHCT 36 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 36 -2013 Trường ĐHCT PHỤ LỤC Phụ lục 1: Các hình ảnh (a) (b) Hình 18: Máy phân tích đạm tổng KJELTMTM2300(a), lò vô hóa FOSS (b) (a) (b) Hình 19: Tủ ủ (a) tủ cấy vô trùng (b) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC & PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Hình 20: Máy đo pH Eutech (a) Trường ĐHCT Hình 24. Máy khuấy từ (b) Hình 21: Cân điện tử (a) nồi khử trùng nhiệt ướt (b) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Phụ lục 2. Các phương pháp phân tích 1. Xác định chất hữu phương pháp Walkley-Black Qui trình - Cân xác 0,5g đất cho vào bình tam giác. Thêm vào bình 10ml K Cr O 1N. Thêm tiếp 15ml H SO đậm đặc lắc nhẹ cho đất vào hóa chất trộn lẫn với nhau. Để yên khoảng 30 phút sau cho vào 150 ml nước cất. Thêm 10 ml H PO ml chất thị diphenylamin. - Chuẩn độ dung dịch với FeSO 1N dung dịch chuyển từ màu tím xanh sang xanh rêu dừng lại. - Đối với mẫu blank, tất bước làm giống khác đất. Công thức tính %C %C= (V0-V)*N*0,3F W V0(ml). thể tích FeSO4 chuẩn độ mẫu đối chứng V . thể tích FeSO4 chuẩn độ mẫu thật W(g) . trọng lượng mẫu đất (0,5g) N . nồng độ FeSO4 (1N) F . 100/75 2. Xác định hàm lượng nitơ tổng phương pháp Kjeldahl Nguyên tắc: Oxy hóa hoàn toàn hợp chất chứa N H2SO4 đậm đặc có xúc tác. Sau lôi NH3 NaOH hấp thụ vào dung dịch acid Boric H3BO3. Chuẩn độ lượng acid Boric dư H2SO4 dung dịch từ xanh chuyển sang hồng dừng lại Qui trình Cân xác 1g mẫu cho vào ống Kjeldahl, thêm 0,5g chất xúc tác( K2SO4, CuSO4, Se) thêm 5ml acid H2SO4 đậm đặc. đem vô hóa 420oC 1h. Lôi đạm dung dịch xút 40%. Hấp thụ hết khí amoniac vào bình đựng acid Boric 3%. Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Chuẩn độ dung dịch H2SO4 1N chuyển màu từ xanh sang hồng lợt. Hoặc đem mẫu vô hóa vào hệ thống phân tích đạm tự động KJELTM 2300 3. Xác định hàm lượng lân dễ tiêu phương pháp Oniani Dung dich A: (NH4)Mo7O24 12g KsbOC4H2O6 0,2908g H2SO4 dđ 140ml Dung dịch B: dung dịch A Acid ascorbic 200ml 1,056g Qui trình Cân 1g đất cho vào ống nghiệm, thêm 10ml H2SO4 0,1N, lắc chờ lắng 20 phút. Lọc phần đem pha dung dịch đo xác định hàm lượng lân hữu dụng đất. Đường chuẩn lân. Nước Lân chuẩn 0,5 1,5 2,5 Dụng dịch B Nước 3,5 2,5 1,5 Pha mẫu theo ống số 1, thay dung dịch lân chuẩn mẫu.Đo OD bước sống 880nm. 4. Các tính chất hóa học đất Bảng 3: phân cấp độ chua đất theo pHH2O (USDA, 1983). pHH2O Phân loại pHH2O Phân loại < 3,5 Cực chua 6,1 - 6,5 Chua 3,5 - 4,4 Rất chua 6,6 - 7,3 Trung tính 4,5 - Chua nhiều 7,4 - 7,8 Kiềm yếu 5,1 - 5,5 Chua vừa 7,9 - 8,4 Kiềm trung tính 5,6 - 6,0 Chua 8,5 - 9,0 Kiềm mạnh Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Bảng 4: phân cấp chất hữu đất (Theo I.V.Chiurin, 1972). Chất hữu đất Phân loại < 1% Rất nghèo 1,1 - 3,0% Nghèo 3,1 - 5% Trung bình 5,1 - 8% Khá > 8,1% Giàu Bảng 5: phân loại theo hàm lượng đạm tổng số (%) (theo Kyuma, 1976). Đạm tổng số(%) Phân loại < 0,08 Rất nghèo 0,081 - 0,1 Nghèo 0,11 - 0,15 Trung bình 0,16 - 0,2 Khá > 0,2 Giàu Bảng 6: phân loại theo lân hữu dụng mg/100g đất phương pháp Oniani (Lê Văn Căn, 1978). Lân hữu dụng (mg/100g đất) Phân loại < Rất nghèo 3,1 - Nghèo 5,1 - Trung bình 8,1 - 15 Khá > 15 Giàu Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Phụ lục 3. Kết Bảng 7: Kết đếm mật số vi khuẩn cố định đạm. Stt Mẫu Mật số CFU/g chất khô lần 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Bình Phước Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai 5.5607 6.7735 6.6383 6.8200 5.9564 6.0281 6.6452 6.0754 7.0914 6.1655 6.2480 6.6493 5.7032 6.8856 6.9757 5.9671 6.3069 6.4944 5.5218 6.4164 6.4460 6.7404 6.8097 5.8601 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Mật số CFU/g chất khô lần 5.5358 6.8589 6.5591 6.6632 5.9367 6.0530 6.5580 6.0827 6.6823 6.1136 6.1837 6.5524 5.7565 6.8454 6.9534 6.0726 6.1977 6.6985 5.3757 6.6383 6.4782 6.9552 6.9036 5.8601 Mật số CFU/g chất khô lần Mật số CFU/g chất khô trung bình 5.5484 6.8741 6.5948 6.7164 5.9844 6.0239 6.6250 6.0642 7.0987 6.2119 6.2370 6.5787 5.7032 6.9452 6.9477 6.1132 6.2099 6.4644 5.3757 6.6490 6.5082 6.9107 6.7452 5.8744 5.5484 6.8377 6.5986 6.7382 5.9596 6.0352 6.6110 6.0741 6.9957 6.1655 6.2238 6.5954 5.7217 6.8940 6.9591 6.0552 6.2410 6.5655 5.4301 6.5803 6.4782 6.8782 6.8244 5.8649 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Bảng 8: Kết đếm mật số vi khuẩn hòa tan lân. Stt Mẫu Mật số CFU/g chất khô lần 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Bình Phước Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai 4.9586 7.0028 5.8212 5.8578 5.6042 5.8119 6.1021 6.2683 6.0914 6.0996 5.9469 5.8923 5.9326 6.9452 6.1730 5.9778 5.9547 6.6193 5.2788 6.6595 5.9341 7.0327 6.8787 5.7809 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Mật số CFU/g chất khô lần 4.9286 7.0028 5.8212 5.9035 5.4493 5.8888 6.1479 6.2183 6.0609 5.9770 5.9629 5.8534 5.9490 6.9876 6.1932 6.1359 6.0930 6.6985 5.5518 6.6990 6.0481 6.8739 6.8021 5.8302 Mật số CFU/g chất khô lần Mật số CFU/g chất khô trung bình 4.9586 6.9915 5.9181 5.9142 5.6456 5.8646 6.0952 6.2262 6.0366 5.9770 5.9246 5.8733 5.9436 6.8312 6.1997 6.0974 6.1379 6.8368 5.5518 6.7352 6.0803 7.0237 6.7452 5.8223 4.948 6.999 5.856 5.892 5.574 5.856 6.115 6.238 6.063 6.021 5.945 5.873 5.941 6.926 6.188 6.075 6.068 6.727 5.478 6.699 6.025 6.982 6.812 5.811 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Bảng 9. Kết khảo sát đặc tính lý hóa đất. Stt Mẫu pH Chất hữu (%) Lân hữu dụng (mg/100g đất) Đạm tổng (%N) 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Bình Phước Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai 4.5 5.23 4.59 4.43 4.78 4.54 4.86 5.2 5.01 4.9 5.23 4.97 4.72 5.37 4.89 4.67 4.9 5.85 6.19 5.95 5.07 5.22 5.49 5.08 1.35 1.64 1.03 0.81 1.10 1.59 1.13 1.22 1.54 1.03 2.03 1.69 1.32 1.82 1.72 1.72 1.31 1.38 2.06 1.43 1.33 1.84 1.52 1.29 3.21 1.43 3.45 3.02 3.55 3.39 2.96 3.49 3.11 1.46 1.81 3.92 2.61 3.48 3.34 1.56 1.27 1.33 1.58 1.42 1.14 2.26 2.05 1.53 0.07 0.12 0.09 0.07 0.07 0.18 0.08 0.08 0.17 0.06 0.15 0.12 0.1 0.17 0.12 0.12 0.12 0.18 0.23 0.11 0.15 0.13 0.12 0.14 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Bảng 10. Địa điểm thu mẫu đất. Stt Mẫu 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Bình Phước Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Tây Ninh Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Bà Rịa Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Đồng Nai Địa ấp 4, Nha Bích, Chơn Thành Gia Bình, Trảng Bàng Cẩm Gian, Gò Dầu Đồng Khởi, Châu Thành Ấp 4, Trà Đông,Tân Biên Thạnh Đông, Tân Biên Phước Thạnh, Gò Dầu Suối Cao, Phước Đông, Gò Dầu Thành Nông, Kim Nông, Châu Đức Hòa Bình, Xuyên Mộc Đá Bạc, Châu Đức Suối Rao, Châu Đức Nghĩa Thành, Bà Rịa Nghĩa Thành, Châu Đức Tân Hiệp, Long Tân ấp Nam, Trung Hòa, Trảng Bom ấp 2,Lộ 25, H. Thống Nhất ấp Lộ 25, Bàu Hàm 2, H.Thống Nhất TT. Long Thành, H. Long Thành ấp 3, Suối Trầu, H. Long Thành ấp 11 Bình Sơn, H. Long Thành Tổ 1, Cẩm Đường, H. Long Thành Tổ 2, Cẩm Đường, H. Long Thành ấp Cẩm Sơn, Cẩm Mỹ, H. Long Thành Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT Phụ lục 4. Kết thống kê 1. Kết thống kê tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm với tiêu hóa lý Correlations: Mật số vi khuẩn cố định đạm, pH Pearson correlation of Mật số vi khuẩn cố định đạm and pH = 0.724 P-Value = 0.000 Correlations: Mật số vi khuẩn cố định đạm, Chất hữu cơ(%C) Pearson correlation of Mật số vi khuẩn cố định đạm and Chất hữu cơ(%C) = 0.651 P-Value = 0.001 Correlations: Mật số vi khuẩn cố định đạm, Lân hữu dụng(mg/100g đất) Pearson correlation of Mật số vi khuẩn cố định đạm and Lân hữu dụng =-0.178 P-Value = 0.404 Correlations: Mật số vi khuẩn cố định đạm, Đạm tổng số(%N) Pearson correlation of Mật số vi khuẩn cố định đạm and Đạm tổng số(%N) = 0.491 P-Value = 0.015 2. Kết thống kê tương quan mật số vi khuẩn hòa tan lân với tiêu hóa lý Correlations: Mật số vi khuẩn hòa tan lân, pH Pearson correlation of Mật số vi khuẩn hòa tan lân and pH = 0.692 P-Value = 0.000 Correlations: Mật số vi khuẩn hòa tan lân, Chất hữu cơ(%C) Pearson correlation of Mật số vi khuẩn hòa tan lân and Chất hữu cơ(%C) = 0.412 P-Value = 0.045 Correlations: Mật số vi khuẩn hòa tan lân, Lân hữu dụng(mg/100g đất) Pearson correlation of Mật số vi khuẩn hòa tan lân and Lân hữu dụng(mg/100g đất) = -0.353 P-Value = 0.091 Correlations: Mật số vi khuẩn hòa tan lân, Đạm tổng số(%N) Pearson correlation of Mật số vi khuẩn hòa tan lân and Đạm tổng số(%N) = 0.396 P-Value = 0.055 3. Kết thống kê tương quan số tiêu với Correlations: Chất hữu cơ(%C), Đạm tổng số(%N) Pearson correlation of Chất hữu cơ(%C) and Đạm tổng số(%N) = 0.709 P-Value = 0.000 Correlations: Đạm tổng số(%N), pH Pearson correlation of Đạm tổng số(%N) and pH = 0.576 P-Value = 0.003 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT 4: Bản giá trị hệ số tương quan df = n -2 Level of Significance (p) for Two-Tailed Test .05 .01 df … .997 .9999 … … 14 .497 .623 15 .482 .606 16 .468 .590 17 .456 .575 18 .444 .561 19 .433 .549 20 .423 .537 21 .413 .526 22 .404 .515 23 .396 .505 24 .388 .496 25 .381 .487 26 .374 .479 27 .367 .471 28 .361 .463 29 .355 .456 (nguồn: http://www.gifted.uconn.edu, ngày 22/11/2013) Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học [...]... Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT 4.2 Kết quả khảo sát mật số vi khuẩn cố định đạm và vi khuẩn hòa tan lân trong đất xám ở Đông Nam Bộ 4.2.1 Mật số vi khuẩn cố định đạm Hình 10: Mật số vi khuẩn cố định đạm log(cfu/g đất khô) Hình 10 tính bằng mật số vi khuẩn cố định đạm trong đất xám trồng bắp ở vùng Đông Nam Bộ, trong quá trình đếm sống nhỏ giọt trên môi trường Burk’s không đạm, thấy mật số vi khuẩn ở các... 4.2.2 Mật số vi khuẩn hòa tan lân Có nhiều loài vi khuẩn có khả năng phân giải hợp chất lân khó tan thành các dạng lân hòa tan bao gồm các loài vi khuẩn nitrat, vi khuẩn vùng rễ, xạ khuẩn, … Khảo sát mật số vi khuẩn trong đất xám trên môi trường NBRIP chứa lân khó tan Ca3(PO4)2, đếm các khuẩn lạc vi khuẩn có khả năng hòa tan lân (tạo vòng halo) Kết quả đếm mật số vi khuẩn hòa tan lân được trình bày ở hình... số Hình 13: Mật số vi khuẩn cố định đạm log(cfu/g đất khô) và đạm tổng số (r=0,491* có tương quan giữa mật số vi khuẩn và lượng đạm tổng số ở mức ý nghĩa 5%) Qua hình 13 và r = 0, 491>0,404 có sự tương quan giữa mật số vi khuẩn cố định đạm và đạm tổng số Với đạm tổng số trong đất cao nhất %N=0,23 thấy mật số vi khuẩn cố định đạm cũng ở mức cao nhất log(cfu/g đất khô)=6,996 Đa số đạm tổng số trong đất. .. khí(Allos và Bartholome, 1959) Vì vậy hàm lượng phân bón vào đất cũng có thể ảnh hưởng đến mật số vi khuẩn cố định đạm ở mức có ý nghĩa 4.3.1.3 Tương quan mật số vi khuẩn cố định đạm và chất hữu cơ Hình 14: Mật số vi khuẩn cố định đạm log(cfu/g đất khô) và chất hữu cơ (r=0,651* có tương quan mật thiết giữa mật số vi khuẩn và chất hữu cơ với mức ý nghĩa 5%) Hình 14 cho thấy có sự tương quan giữa mật số vi khuẩn. .. Mật số vi khuẩn hòa tan lân log(cfu/g đất khô) Mật số vi khuẩn hòa tan lân nhìn chung thấp hơn vi khuẩn cố định đạm nhưng vẫn hiện diện khá cao [log10(cfu/g đất khô kiệt) >4,5], đa số trong các mẫu đất có trên 105 tế bào/g đất khô Mẫu Tây Ninh 1 có mật số vi khuẩn cao nhất [log10(cfu/g đất khô kiệt)=6] và thấp nhất là mẫu đất Bình Phước với [log10(cfu/g đất khô kiệt)=4] Sự khác nhau về mật số của vi. .. mật số vi khuẩn cố định đạm và pH Hình 12: Mật số vi khuẩn cố định đạm log(cfu/g đất khô) và pH (r= 0,724* có tương quan giữa mật số vi khuẩn và pH có ý nghĩ về mặt thống kê ở mức 5%) Qua hình 12 thấy có sự tương quan thuận giữa mật số vi khuẩn cố định đạm và pH, khi pH tăng gần bằng pH trung tính thì vi khuẩn cũng hiện diện với mật số khá cao Chỉ số pH ảnh hưởng đến quá trình hấp thu dinh dưỡng, tính. .. 0.1N và xác định hàm lượng bằng máy đo quang phổ hấp thụ ở bước sóng 880nm 3.4.1.4 Hàm lượng đạm tổng số Sử dụng phương pháp Kjeldahl xác định hàm lượng nitơ tổng trong đất (Namoni, N- nitrat và N- trong các hợp chất hữu cơ) 3.4.2 Khảo sát mật số vi khuẩn cố định đạm và vi khuẩn hòa tan lân Thí nghiệm được tiến hành nhằm kiểm tra, đánh giá mật số của hai loại vi khuẩn có lợi là cố định đạm và hòa tan lân. .. mật số của vi khuẩn cố định đạm và vi khuẩn hòa tan lân có thể do quá trình canh tác, đặc tính lý hóa của đất và điều kiện phát triển mỗi loài vi khuẩn tác động Tuy nhiên với mật số [log10(cfu/g đất khô kiệt)>4,5] thì tiềm năng loài vi khuẩn có ích này trong đất xám ở miền Đông Nam Bộ rất lớn, có thể khai thác sử dụng trong phân vi sinh Thực hiện các biện pháp giúp tăng hơn nữa mật số vi Chuyên ngành... 21 Vi n NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại Học khóa 36-2013 Trường ĐHCT khuẩn trong đất cũng là cải tạo lại độ phì nhiêu đang dần bị thoái hóa ngày một nhanh của đất xám 4.3 Kiểm tra sự tương quan giữa mật số vi khuẩn cố định đạm, vi khuẩn hòa tan lân với một số chỉ tiêu hóa lý của đất 4.3.1 Tương quan giữa mật số vi khuẩn cố định đạm với các chỉ tiêu hóa lý của đất 4.3.1.1 Tương quan mật. .. sinh trưởng của vi khuẩn Với hệ số tương quan r=0.724 cho thấy làm tăng chỉ số pH đất có khả năng nâng cao mật số vi khuẩn cố định đạm ở mức rất có ý nghĩa, pH khoảng từ 5,5-6,5 mật số vi khuẩn có sự thay đổi rõ rệt và pH=6,19 có mật số cực đại [log(cfu/g đất khô)≈7, với đất xám là loại đất nghèo cation kiềm, phản ứng đất từ hơi chua đến rất chua (pH phổ biến 4,1-5,5) nên mật số vi khuẩn sẽ rất hạn . Somasegaran, 1 982 ) 15 3.4.3. Xác định độ ẩm 16 3.4.4. Phương pháp xử lý số liệu 17 CHƯƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 18 4.1. Các chỉ tiêu hóa lý của các mẫu đất xám trồng bắp ở Đông Nam Bộ 18 4.1.1 Hình 4: Vi khuẩn Azotobacter sp. 8 Hình 5: Vi khuẩn Clostridium sp. 8 Hình 6: Vi khuẩn Bacillus megaterium 11 Hình 7: Vi khuẩn Pseudomonas fluorescens 11 Hình 8: Pha loãng và nhỏ giọt trong. 40kg N/ha/năm (Smith et al., 19 78) . Ở Brazil, Azospirillum lipoferum có thể cung cấp cho bắp 2kg nitơ mỗi ngày. Ở Thái Lan, những thí nghiệm trên bắp năm 1 984 – 1 985 cho thấy sản lượng bắp tăng