khả năng sử dụng đạm amon thay thế đạm nitrate trong nuôi tảo chaetoceros gracilis và chlorella sp

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN ----------- NGUYỄN THỊ SA MI KHẢ NĂNG SỬ DỤNG ĐẠM AMON THAY THẾ ĐẠM NITRATE TRONG NUÔI TẢO Chaetoceros gracilis VÀ Chlorella sp. LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN ----------- NGUYỄN THỊ SA MI KHẢ NĂNG SỬ DỤNG ĐẠM AMON THAY THẾ ĐẠM NITRATE TRONG NUÔI TẢO Chaetoceros gracilis VÀ Chlorella sp. LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN TS. TRẦN SƯƠNG NGỌC 2014 KHẢ NĂNG SỬ DỤNG ĐẠM AMON THAY THẾ ĐẠM NITRATE TRONG NUÔI TẢO Chaetoceros gracilis VÀ Chorella sp. Bậc đào tạo : Đại Học Chuyên ngành : Nuôi trồng thủy sản Năm : 2014 Số Trang : 10 trang SVTH : Nguyễn Thị Sa Mi – MSSV : C1200997 Email : mic1200997@student.ctu.edu.vn – 01692257283 GVHD : Trần Sương Ngọc _Khoa thủy Sản – Trường Đại Học Cần Thơ Email : tsngoc@ctu.edu.vn - 0907877540 TÓM TẮT Thí nghiệm nhằm mục đích thay NaNO3 (NH4)2SO4 môi trường Walne nuôi cấy tảo Chaetoceros gracilis Chlorella sp. Chaetoceros gracilis Chlorella sp. nuôi dưỡng bình tam giác L nước có nồng độ muối 25‰, ánh sáng đèn huỳnh quang sục khí liên tục gồm nghiệm thức với nồng độ đạm đạm amon 32 mg/L (NH4.1), 48 mg/L (NH4.1.5), 64 mg/L (NH4.2) môi trường Walne chứa đạm nitrate nồng độ 32 mg/L nghiệm thức đối chứng với mật độ bố trí ban đầu triệu tb/mL. Kết thí nghiệm cho thấy tảo Chaetoceros gracilis, nghiệm thức sử dụng đạm Nitrate cho mật độ cao 12,83 ± 0,51 triệu tb/mL khác biệt ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức NH4.1 với mật độ 11,27 ± 1,35 triệu tb/mL, với kết ta sử dụng đạm Amon nghiệm thức NH4.1 để thay thể đạm nitrate để nuôi cấy Chaetoceros gracilis. Thí nghiệm Chlorella sp cho kết mật độ cao nghiệm thức đối chứng với mật độ cực đại trung bình 44,4 ± 5,59 triệu tb/mL khác biệt ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức đạm amon 48 mg/L với mật độ trung bình cao 39,57 ± 1,69 triệu tb/mL. ABSTRACT The experiments were performe to replace NaNO3 by (NH4)2SO4 in Walne medium to cultured of Chaetoceros gracilis and Chlorella sp. Experimental were done in liter Erlenmeyer flask water salinity was 25‰, supply light and continuous aeration of treatments with nitrogen fertilizer ammonium concentration 32 mg/L (NH4.1), 48 mg/L (NH4.1.5 ), 64 mg/L (NH4.2 ) and Walne medium containing nitrate nitrogen concentration of 32 mg/L as the control treatment with original density stock was million of cells/ml. Results experiment Chaetoceros gracilis showed that Nitrate nitrogen treatments using the highest density was 12,83 ± 0,51 million of cells/mL and difference was not statistically significant compared to the treatments NH4.1 with density 11,27 ± 1,35 million of cells/mL. This result also showed that using in protein Amon NH4.1 to alternative treatments for nitrate nitrogen Chaetoceros gracilis cultures. In experiment Chlorella sp. showed that in the highest density stock in the control treatment with Exaggeration average density was 44,4 ± 5,59 million cells/mL and difference was not statistically significant compared with amon protein 48 mg/L treatments with the highest average density 39,57 ± 1,69 million of cells/mL, Amon protein 48 mg/L is the best choice to replace nitrate nitrogen in cultured Chlorella sp. 1. GIỚI THIỆU Vi tảo nguồn thức ăn quan trọng để nuôi luân trùng, nuôi ấu trùng loài thuỷ sản, loài tảo Chaetoceros sp. Chlorella sp. coi giống tảo đặc biệt quan trong nuôi trồng loài thủy sản. Do nhu cầu thức ăn cho ấu trùng số loài hải sản nên Trang công nghệ nuôi tảo silic phát triển. Bên cạnh tảo Chaetoceros sp. Chlorella sp. xem nguồn thức ăn tốt cho luân trùng, ấu trùng cá biển thiếu hệ thống ương ấu trùng tôm cá với vai trò quan trọng giúp ổn định môi trường ương nuôi loài thủy sản. Trong nuôi loài vi tảo nguồn cung cấp đạm thiếu, đạm thành phần quan trọng nhiều hợp chất cấu trúc, di truyền trao đổi chất tế bào thực vật, thành phần chất diệp lục, hợp chất để sản xuất loại đường trình quang hợp. Hầu hết loài tảo có khả sử dụng N2 dạng NH4+, NO3-, số vi tảo có khả sử dụng nito từ khí trời tảo lam, số vi tảo có khả sử dụng nguồn N2 acid amin (Oh_Shama, 1986). Trong môi trường nuôi tảo nguồn cung cấp đạm chủ yếu NaNO3 theo pháp lệnh 16/2011/UBTVQH12 ngày 30/6/2011 Ủy Ban Thường Vụ Quốc Hội quản lý, sử dụng vũ khí, vật liệu nổ công cụ hỗ trợ có hiệu lực vào 1/1/12012 loại hóa chất xếp vào danh mục tiền chất thuốc nổ hạn chế kinh doanh thị trường. Do đó, nhằm mục đích xác định hàm lượng (NH4)2SO4 phù hợp nhằm thay NaNO3 môi trường nuôi cấy tảo Chaetoceros sp Chlorella sp. đề tài “Khả sử dụng đạm Amon thay đạm Nitrate nuôi tảo Chaeroceros gracilis Chlorella sp.” triển khai. 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Các nghiệm thức bố trí Đề tài thực gồm thí nghiệm với lần lặp lại tảo Chaetoceros gracilis Chlorella sp. Dựa khả thay N2 đạm Nitrate đạm Amon (NH4)2SO4, thí nghiệm bố trí : 1) Walne có NaNO3 với hàm lượng N = 32 mg/L. 2) Walne có (NH4)2SO4 với hàm lượng N = 32 mg/L. 3) Walne có (NH4)2SO4 với hàm lượng N = 48 mg/L. 4) Walne có (NH4)2SO4 với hàm lượng N = 64 mg/L. Trang 2.1. Thành phần dung dịch Walne Thành phần chất Lượng Dung dịch A (dùng – mL cho lít nước tảo nuôi) FeCl3.6H2O MnCl2.4H20 H3BO3 EDTA NaH2PO4.2H2O NaNO3 Dung dịch B Nước cất đến Dung dịch B ZnCl2 CoCl2.6H2O (NH4)6.Mo 7O24.4H2O CuSO4.5H2O HCl đậm đặc Nước cất đến Dung dịch C (0.1 mL cho lít nước nuôi tảo) Vitamin B12 Vitamin B1 Nước cất đến Dung dịch D (dùng cho tảo khuê, -3 mL/L nước nuôi Na2SiO3.5H2O Nước cất đến 1.30 g 0.36 g 33.6 g 45 g 20 g 100 g mL 1000 mL 2.1g 2.0g 0.9g 2.0g 10.0 mL 100.0 mL 10 mg 200 mg 100 mL 40 g 1000 mL 2.2. Phương pháp thí nghiệm Tảo Chaetoceros gracilis Chlorella sp. có nguồn gốc từ trung tâm nghiên cứu Artemia, ĐH Gent, Bỉ nuôi cấy giữ giống từ phòng thí nghiệm thức ăn tự nhiên, Bộ môn thủy sinh học ứng dụng, Khoa Thủy Sản, Trường Đại Học Cần Thơ bố trí bình tam giác L với nguồn nước 25‰, mật độ ban đầu triệu tb/mL hệ thống sục khí hoạt động liên tục 24/24. Nhiệt độ bố trí từ 25-27 °C, ánh sáng liên tục từ đèn huỳnh quang 1,2 m. Hằng ngày theo dõi phát triển tảo cách thu mẫu (lúc giờ) đếm mật độ tảo, sử dụng nước cất để bổ sung lượng nước trình bốc trước thu mẫu . Các yếu tố môi trường thu mẩu vào : pH, TAN, PO43-, NO3- theo dõi ngày/lần. Nhiệt độ ánh sáng đo lần/ngày. Mật độ tảo đếm ngày thu mẫu vào buổi sáng để xác định tốc độ tăng trưởng. Xác định mật độ tảo : Tảo thu ngày xác định buồng đếm Burker. Phương pháp đếm công thức xác định mật độ tảo theo Coutteau (1996). Số tế bào tảo/ml = ((n1+n 2)/160)*106*d Trong đó: n1 làsố tế bào buồng đếm thứ nhất, n2 số tế bào buồng đếm thứ hai, d hệ số pha loãng. Trang Xác định tốc độ tăng trưởng theo E Valenzuela-Espinoza (2007) trích Trần Thị Tuyết Ngân (2013) : µ = (ln(N1) – ln(No)) / (T1 – To) Trong đó: N1 mật độ tế bào thời điểm T1, No mật độ tế bào thời điểm To, To thời điểm bắt đầu thí nghiệm, T1 thời điểm cuối thí nghiệm. Xác định kích thước tế bào : xác định kích thước đầu kích thước cuối tế bào tảo cách đo ngẫu nhiên 30 tế bào/mẫu kính hiển vi độ phóng đại 400. Phương pháp xử lý số liệu : Các số liệu xử lý phần mềm Excel Statistica 5.0 tố để so sánh độ sai biệt có ý nghĩa nghiệm thức với P[...]... số trong cùng một hàng có ký tự giống nhau là khác biệt không có ý nghĩa thống kê Các ký tự khác nhau là chỉ sự khác biệt có ý nghĩa thống kê ở p < 0,05 Kết quả này cho thấy khả năng hấp thu đạm Amon của tảo Chlorella sp tương đương đạm Nitrate ở hàm lượng đạm amon là 48 mg/L Đạm Amon 64 mg/L được coi là không phù hợp với sự phát triển của Chlorella sp Nguồn nitơ sử dụng là muối amonium, nitrate và. .. đầu (Trần Văn Vĩ, 1995) 4 KẾT LUẬN Có thể nuôi cấy tảo Chaetoceros gracilis trong môi trường walne thay thế đạm NO3- bằng đạm NH4+ với tỉ lệ đạm bằng nhau là 32 mg/L Có thể nuôi cấy tảo Chlorella sp trong môi trường walne thay thế đạm NO3- bằng NH4+ nồng độ đạm là 48 mg/L 5 LỜI CẢM TẠ Trong khoảng thời gian thực hiện đề tài tôi đã nhận được nhiều sự động viên và giúp đỡ từ thầy cô, bạn bè để hoàn thành... Triển Của Vi Tảo Chaetoceros sp Và Thử Nghiệm Nuôi Sinh Khối Trong Hệ Thống Nuôi Kín An Toàn Sinh Học Tạp chí khoa học Trường Đại học Vinh Số 2A: 14 –21 Nguyễn Văn Hoà, Huỳnh Thanh Tới, Nguyễn Thị Hồng Vân, Trần Hữu Lễ 2006 Nuôi tảo Chaetoceros sp làm nguồn thức ăn cho hệ thống ao nuôi Artemia Tạp Chí Nghiên Cứu Khoa Học Trường ĐH Cần Thơ Số 2A : 52-61 Oh – Hama T and S Myjachi, 1986 Chlorella , Micro... lượng đạm Amon ở nghiệm thức NH4.1.5 là phù hợp cho sự sinh trưởng Chlorella sp 50.00 Mật độ tảo (triệu tb/mL) 45.00 40.00 35.00 30.00 25.00 20.00 15.00 10.00 5.00 0.00 1 2 3 4 5 6 7 NaNO3 NH4 1.5 8 9 10 NH4 1 NH4 2 Hình 3.8 Mật độ tảo tảo Chlorella sp Trang 10 11 Ngày 3.2.8 Tốc độ tăng trưởng Thí nghiệm Chlorella sp có tốc độ tăng trưởng ở các nghiệm thức khác biệt không có ý nghĩa thống kê vào 3... dụng là muối amonium, nitrate và urea trong đó amonium cho kết quả tốt nhất (Iriarte, 1991) So sánh với đề tài nghiên cứu của Trần thị Thủy 2008 “Ảnh hưởng của pH, nhiệt độ, dinh dưỡng lên sự phát triển của tảo Chlorella , kết quả mật độ cao nhất ở nghiệm thức sử dụng môi trường Walne 22,72  5,0 triệu tb/mL vào ngày thứ 9 Như vậy môi trường Walne sử dụng đạm Nitrate là tốt nhất Tuy nhiên, kết quả... nghiệm thức nồng độ đạm NaNO3, NH4.1, NH4.1.5 và NH4.2 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0 1 4 NT NaNO3 NT NH4.1.5 7 NT NH4.1 NT NH4.2 10 Ngày Hình 3.7 Biến động hàm lượng PO43- của tảo Chlorella sp 3.2.6 NO3Thí nghiệm Chlorella sp có hàm lượng NO3- ở nghiệm thức đối chứng tương đương thí nghiệm Chaetoceros gracilis trung binh là 32,5 ± 1,64 mg/L Ở nghiệm thức , NH4.1, NH4.1.5 và NH4.2 do thành phần đạm bổ sung là NH4+... động hàm lượng TAN của tảo Chlorella sp 4 Hàm lượng PO (mg/L) 3.2.5 PO43Việc hấp thu P của vi tảo phụ thuộc vào nồng độ P trong môi trường, ánh sáng pH, K+, Na+, Mg2+ P đóng vai trò chuyển hóa orthphotphat thành dạng nguyên tử năng lượng cao năng ATP Hàm lượng PO43- ban đầu ở các nghiệm thức ít giao động trung bình 8,48 ± 0,39 mg/L, sau đó PO43 giảm dần do sự hấp thu của tảo và đạt giá trị cực tiểu... dần trong quá trình phát triển của tảo, vào ngày thứ 10 NO3- có xu hướng tăng trở lại do sự phân hủy của xác tảo 3.2.7 Mật độ Trang 9 Thí nghiệm Chlorella sp cho kết quả nghiệm thức NaNO3 với mật độ cực đại cao nhất là 44,4 ± 5,59 triệu tb/mL vào ngày thứ 8 của thí nghiệm khác biệt không có ý nghĩa thống kê so với nghiệm thức NH4.1.5 Mật độ trung bình (triệu tb/mL) của các nghiệm thức ở thí nghiệm Chlorella. .. do tảo ở các nghiệm thức phát triển tương đương nhau Các nghiệm thức có tốc độ tăng trưởng cao nhất vào ngày đầu của thí nghiệm sau đó giảm dần từ ngày thứ 2 và đạt giá trị cực thấp vào ngày cuối của thí nghiệm Cụ thể là nghiệm thức NaNO3 là -0,26 ± 0,19 vào ngày 11, nghiệm thức NH4.1 vào ngày thứ 7 là -0,16 ± 0,1, NH4.1.5 có tốc độ tăng trưởng vào ngày thứ 10 là -0,25 ± 0,17, NH4.2 là -0,05 ± 0,04 vào... sản xuất và sử dụng thức ăn sống để nuôi thủy sản.Tài liệu kỹ thuật nghề cá của FAO, 361 Bộ Thủy Sản Việt Nam Trần Văn Vĩ, 1995.Thức ăn tự nhiên NXB Nông nghiệp, Hà Nội Trần Thị Tuyết Ngân, 2013 Ảnh hưởng của nhiệt độ và pH đối với sự phát triển của tảo Tetraselmis suecica LVTN trường Đại Học Cần Thơ Việt Nam Trần Thị Thủy, 2008 Ảnh hưởng của pH, nhiệt độ, dinh dưỡng lên sự phát triển của tảo Chlorella . nhằm thay thế NaNO 3 trong môi trường nuôi cấy tảo Chaetoceros sp và Chlorella sp. đề tài Khả năng sử dụng đạm Amon thay thế đạm Nitrate trong nuôi tảo Chaeroceros gracilis và Chlorella sp. ”. THỊ SA MI KHẢ NĂNG SỬ DỤNG ĐẠM AMON THAY THẾ ĐẠM NITRATE TRONG NUÔI TẢO Chaetoceros gracilis VÀ Chlorella sp. LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN . THỊ SA MI KHẢ NĂNG SỬ DỤNG ĐẠM AMON THAY THẾ ĐẠM NITRATE TRONG NUÔI TẢO Chaetoceros gracilis VÀ Chlorella sp. LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN