Nghiên cứu đặc điểm phấn hoa của một số cây thuốc thuộc họ cúc (asteraceae), lớp ngọc lan (magnoliosidae)

Hạt phấn hoa rất ổn định về hình dạng, kích thước và cấu tạo do đó đặc điểm của hạt phấn có ý nghĩa quan trọng trong việc xác định, phân loại thực vật và kiểm nghiêm dược liệu mang hoa..

B ộ Y TÊ

DƯƠNG THỊ KIÈU MAI

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIẺM PHÁN HOA CỦA MỘT SÓ

NGỌC LÃN (MAGNOLIOPSIDAE)

(KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ KHÓA 2003-2007)

iỊ.

Ị* ’ (Íi-VÌỆN;

V 'y

Người hưởng dẫn: ThS Hoàng Quỳnh Hoa

DS Lê Đình Bích

Thời gian thực hiện: 03/2007 - 20/05/2007

HÀ NỘI, THÁNG 05/2007

LỜI CẢM ƠN

Trong một khoảng thời gian không dài, để thực hiện khóa luận tốt nghiệp, tôi đã gặp phái những khó khăn và bỡ ngỡ ban đầu Tuy nhiên với sự khuyến khích và chỉ bảo tận íình của thầy cô hướng dần, tôi đã thực hiện và hoàn thành tốt khóa luận của mình Với lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc, tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô:

DS Lê Đình Bích

ThS Hoàng Quỳnh Hoa

Tôi xin cảm ơn các thầy cô giáo, các kỹ thuật viên của bộ môn Thực vật đã giúp đỡ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong quá trình làm khóa luận tốt nghiệp.

Tôi xin cảm ơn gia đỉnh, bạn bè và đồng nghiệp đã luồn động viên và giúp đỡ tôi hoàn thành khóa ìiiận tốt nghiệp.

Tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô và bạn bè đã giúp đỡ tôi trong 4 năm học qua.

Hà Nội, ngày 15 tháng 5 năm 2007

Sinh viên

Dương Thị Kiều Mai

CHÚ GIẢI CHỮ VIẾT TẮT

Chữ viết đầv đủ Chữ viết tắtĐại học Dược Hà Nội ĐHDHNĐại học Y Dược Thái Nguyên ĐHYDTN

MỤC LỤC

ĐẶT VẤN ĐỂ 1

PH Ẩ N l - TỔNG QUAN 2

1.1 Đặc điểm hình thái phấn hoa 2

1.1.1 Tính phân cực của hạt phấn 2

1.1.2 Hình dạng hạt phấn 3

1.1.3 Kích thước hạt phấn 3

1.1.4 Trọng lượng hạt phấn 5

1.1.5 Màu sắc hạt phấn 5

1.2 Cấu trúc màng hạt phấn 5

1.2.1 Cấu tạo màng hạt phấn 5

1.2.2 Kiến trúc bề mặt hạt phấn 7

1.3 Phân loại hình thái hạt phấn 11

1.4 Những nghiên cứu về đặc điểm phấn hoa ở Việt Nam 11

1.5 Đặc điểm thực vật họ cúc (Asteraceae) 13

1.5.1 Đặc điểm hình thái họ Cúc (Asteraceae) 13

1.5.2 Phân loại họ Cúc (Asteraceae) 13

1.6 Đặc điểm phấn hoa họ Cúc (Asteraceae) 15

1.7 Công dụng của họ Cúc (Asteraceae) 16

PHẨN 2 - THỰC NGHIỆM VÀ KÊT QUẢ 17

2.1 Nguyên vật liệu và phương pháp thực nghiệm 17

2.1.1.Nguyên liệu 17

2.1.2 Phương pháp nghiên cứu 17

2.2 Kết quả thực nghiệm và nhận xét 19

2.2.1 Mô tả đặc điểm hình thái mẫu cây 19

2.2.2 Mô tả đặc điểm hình thái phấn hoa 31

2.2.3 Phân loại dựa trên đặc điểm hình thái 42

2.3 Bàn luận 44

2.3.1 Nghiên cứu đặc điểm hình thái thực vật 44

2.3.2 Nghiên cứu đặc điểm và phân loại phân hoa 44

PHẨN 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XU ÂT 46

3.1 Kết luận 46

3.2 Đề xuất 46

ĐẶT VẤN ĐỂ

Ngày nay, nhu cầu quay trở về với thiên nhiên đang ngày càng lớn, do

đó xu hướng sử dụng thuốc đông y để chữa bệnh và bồi bổ sức khỏe cũng tăng theo Để đáp ứng nhu cầu ấy, các sản phẩm thuốc đông y được sử dụng theo phương pháp cổ phương hay thuốc đông y dưới dạng các sản phẩm đông dược được bào chế theo phương pháp hiện đại đang được các công ty dược sản xuất ngày càng nhiều cả về số lượng và chủng loại

Sự gia tăng về sản xuất và sử dụng thuốc đông dược lại không đồng hành cùng với hệ thống tiêu chuẩn chất lượng kiểm nghiệm các thuốc đông dược Vì vậy, việc quản lý, kiểm tra chất lượng và chống nhầm lẫn các vị dược liệu dùng trong thuốc đông dược còn gặp nhiều khó khăn

Đối với một chuyên luận kiểm nghiệm dược liệu, tiêu chí về đặc điểm thực vật là tiêu chuẩn đầu tiên để đánh giá chất lượng Với dược liệu mang hoa, đặc điểm hình thái phấn hoa là một trong những tiêu chí để phân biệt

Hạt phấn hoa rất ổn định về hình dạng, kích thước và cấu tạo do đó đặc điểm của hạt phấn có ý nghĩa quan trọng trong việc xác định, phân loại thực vật và kiểm nghiêm dược liệu mang hoa

Hiện nay, chưa có tài liệu nào về thực vật và dược liệu mô tả đầy đủ phần đặc điểm phấn hoa như một trong các tiêu chí kiểm nghiệm hay phân biệt một loài thực vật hay một vị dược liệu Vì vậy, để góp phần tạo các cơ sở thành lập các chuyên luận kiểm nghiệm thuốc đông dược, chúng tôi tiến hành khóa luận “ Nghiên cứu đặc điểm phấn hoa của một số cây thuốc thuộc họ

Cúc (Asteraceae) - lớp Ngọc Lan {Magnoliopsidae) ” với các mục tiêu sau:

1 Mô tả hình thái phấn hoa các mẫu nghiên cứu

2 Phân loại các mẫu dựa trên đặc điểm hình thái phấn hoa

Khi còn trong bộ bốn, hạt phấn thể hiện tính phân cực rõ rệt Mỗi hạtphấn có:

- Mặt trên: Mặt hướng ra phía ngoài của bộ 4, trung tâm của mặt trên là cực trên

- Mặt dưới: Mặt hướng vào phía trong của bộ 4, trung tâm của mặt dưới là cực dưới

- Trục cực: Là đường nối cực trên và cực dưới

- MP xích đạo: Mặt ngăn cách mặt trên và mặt dưới của hạt phấn

- Trục xích đạo: Là đường kính của mặt phẳng xích đạo

pRủrlíí tlíM

Hinh 1.1: Bộ bốn hình tháp và hướng nhìn từ cực và xích đạo của hạt phấn

ở thực vật hạt kín, hạt phấn tách khỏi bộ bốn sớm và 2 cực giống nhau nên gọi là đẳng cực.

Edtman dùng tỷ lệ: Trục cực/trục xích đạo (P/E) để mô tả hình dạng hạt phấn:

trong họ Nyctaginceae, Cucurbitaceae hoặc ở chi Morinda, hạt phấn rất to có

thể phân biệt được bằng mắt thường

Kích thước hạt phấn ty lệ thuận với kích thước của hoa ở thực vật có hoa to do bao phấn lớn nên kích thước hạt phấn lớn, thực vật có hoa nhỏ và các hoa sắp xếp thành cụm hoa thì kích thước hạt phấn thường nhỏ do bao phấn nhỏ dẫn đến sự giảm kích thước của từng hạt phấn.

Kích thước hạt phấn còn phụ thuộc chặt chẽ vào độ dài của khoảng

cách mà ống phấn cần phải đi ở các loài có vòi nhụy dài, hạt phấn phải lớn

để tích trữ nhiều chất dinh dưỡng cẩn cho sự phát triển của ống phấn Sự tương quan giữa kích thước hạt phấn và độ dài của vòi nhụy tương đối cố định trong phạm vi chi, họ và đôi khi ở những bộ khác nhau

Kích thước hạt phấn còn liên quan đến số lượng nhiễm sắc thể, số lượng nhiễm sắc thể nhiều thì kích thước hạt phấn lớn và ngược lại

Hạt phấn được phân chia thành 7 nhóm căn cứ vào số đo kích thước trục lớn nhất của hạt phấn như sau:

1.1.4 Trọng lượng hạt phấn [7]; [19]

Trọng lư(Ịfng hạt phấn tỷ lệ thuận với kích thước hạt phấn Do kích thước của hạt phấn thường nhỏ nên trọng lượng hạt phấn cũng nhỏ thưòỉng chưa đến 1 microgam

1.2.12 Lớp giữa (Exiìi)

Cấu tạo bởi sporopollenin và một lượng nhỏ polysaccharid

Cấu tạo của lớp giữa rất khác nhau đồng thời cũng rất cố định trong các nhóm vì vậy nó có ý nghĩa lớn trong phân loại Hình dạng đặc sắc với những chạm trổ trên bề mặt hạt phấn giúp nhận dạng hạt phấn Do lớp exin chứa sporopollenin nên rất bền vững và được giữ lại trong các hóa thạch.

Theo quan niệm của Reitsma, lớp giữa gồm sexin và nexin

- Sexin cấu tạo bởi sporopollenin có sexin 1, sexin 2, sexinS:

+ Sexin 3: Các yếu tố chạm trổ

+ Sexin 2: Là 1 mái (tectum), mái này có thể đủ, không đủ hoặc hoàn toàn vắng mặt, trên mái có các yếu tố chạm trổ hoặc không Sự hình thành mái

là một bước tiến hóa cao của thực vật

+ Sexin 1: Có các trụ đỡ mái (columella) hướng xuyên tâm, nâng đỡ mái hoặc trụ (bacula) không nâng đỡ gì cả

- Nexin: Gồm nexin 1 và nexin 2

+ Nexin 1: Cấu tạo bởi các lớp sporopollenin dạng xuyên tâm, bắt màu đậm

+ Nexin 2: Cấu tạo bởi các lớp sporopollenin dạng phiến nhỏ, xếp ihành từng lớp bắt màu yếu, một phần bị phá hủy khi xử lý mẫu

« 9

.Tttnirổ -ÃŨÃT-Oilinĩẽlla -Smtal

1.22.1 Kiến trúc vùng ngoài miệng

Do cấu tạo phức tạp của màng mà hạt phấn có các kiến trúc bề mặt rất phong phú và đa dạng

Bảng 1.1: Các kiểu kiến trúc bề mặt hạt phấn

Nhẵn (Psilate) Bề mặt hoàn toàn nhẵn

Nhóm các yếu tô lõm trên bề mặt

Lỗ (Perforate) Bề mặt có lỗ đường kính > 1 Ịim

Hốc lõm (Foveolate) Bề mặt có lỗ nhỏ hoặc chỗ lõm có đường kính

< lịLim, khoảng cách giữa chúng luôn lớn hơn bề

rộng của chúngMáng (Canaculate) Những máng thẳng hay cong, song song trên bề mặt

Kiểu Mô tả Ị(Scabrate granulate)

Hột cơm

(Verrucate)

Những mấu lồi như hột cơm thường rộng hơn cao và không bao giờ thắt ở gốc, cỡ > lịam, đường kính < khoảng cách giữa chúng

Có nhú

(Papilate)

Vói chỗ lõm, chỗ nhô ra như ngón tay dài hofn rộng

và luôn cao hơri 1 |Lim

Gậy (Baculate) Những phần tử chạm trổ dạng gậy dài hơn rộng và

cao hơn 1 |amChồi (Gemmate) Các phần tử chạm trổ cao hơn l|a.m, rộng và cao

bằng nhau và thắt lại ở gốcChùy (Clavate) Những phần tử chạm trổ hình chùy cao hơn 1

micromet, giống như một baculum nhưng ở đỉnh dày hơn ở gốc

Đầu đinh (Pilate) Các roi của phần tử phồng lên dạng đầu đinh > 1 |LimGai (Echilate) Những chạm trổ cao hcfn 1 micromet

Luống ngắn

(Rugulate)

Các phần tử chạm trổ kéo dài, rộng > lỊ^m và sắp xếp trong một mô hình không đều

Có sọc (Striate) Các mấu lồi kéo dài (ơ iiều dài ít nhất gấp đôi

chiều rộng) nối tiếp nhau thành dải đoìi hay phân nhánh và chạy song song

Có mạng lưới

(Reticulate)

Các phần tử chạm trổ dạng gò sắp xếp thành một mạng lưới có bề rộng các mắt > lfam, các vách (muri) lớn hơn hoặc bằng bề mặt các mắt

uSülf^ölJliöÄ ^^.rri: I s « ct äi im, -« p ftBrrri^ộr» j 4jr^ r»

•55^ 9 ^ £j^ y{j[j!^ T«!Cị:»tiu- «ịSị ii^«rir,JV-^rTfi‘T«faF

2^ # ir r i ä t « ä c r r s « 3 «ii, « „ j ; » M m X m rstH i^rT - ^iJfrr.K

Hinh 1.3: Cäc kieu cham tro khi nhin be mät hat phän vä

tren lät cät quang hoc

Khu vuc nhö len; sang

Khu vTJc thä'p hön hoäc cäc hö: toị

1.22.2 Cäc kieu mieng vä vi tri cüa mieng tren be mät hat phän

Däc trimg ve mieng hat phän lä mot trong cäc däc diem d6 nhan biet vä phän biet hat phän giua cäc loäị

Miệng là một phần mỏng của exin hoặc vùng exin có cấu trúc đặc biệt

là nơi đi ra của ống phấn Miệng được giới hạn bởi một đường do sự Ihay đổi

độ dày của sexin hoặc nexin hoặc cả hai cùng một lúc

Miệng ngoài; Đặc trưng của sexin

Miệng trong: Đặc trưng của nexin

t g Rurrìớx

t.g Pũỉyỹor-iurrĩ

ị

oxvsữ^rrrìUĩT-Hình 1.4: Các kiểu miệng hạt phấn.

1.3 PHÂN LOẠI HÌNH THÁI HẠT PHẤN [19]

Dựa vào đặc trưng miệng hạt phấn để phân loại hình thái hạt phấn \ ì đó

là đặc điểm quan trọng nhất để mô tả ngắn gọn hạt phấn

Để mô tả miệng hạt phấn dùng hệ thống tiéu chuẩn N,p,c trong đó:

-TREM E - L E P T -TRICHO- -COLPATE-PORATE -COLP- -P O R -

COLPATE

Hình 1.5: Hệ thống NPC.

1.4 NHŨNG NGHIÊN c ú ư VỀ ĐẶC ĐIỂM PHẤN h o a ở v iệ t n a m

Hiện nay, ở nước ta chưa có tài liệu nào nghiên cứu mô tả về đặc điểm hạt phấn hoa như một trong các phương pháp kiểm nghiệm, cũng như để giúp phân biệt một loài thực vật hay một vị dược liệu dùng làm thuốc

Trong Dược điển Việt Nam III, có 21 chuyên luận kiểm nghiêm dược liệu bộ phận dùng có hoa Kết quả thống kê các chuyên luận kiểm nghiệm dược liệu có liên quan đến phấn hoa như sau [5]

• Mô tả hình dạng hạt phấn (không có kích thước): 9 chuyên luận.

• Mô tả hình dạng và kích thước hạt phấn: 7 chuyên luận

• Đề cập đến hạt phấn nhưng chưa mô tả đặc điểm hạt phấn: 2 chuyênluận

• Chưa đề cập đến hạt phấn trong bột dược liệu bộ phận dùng có hoa: 3chuyên luận

Một số tài liệu và chuyên đề khóa luận đã mô tả hình dạng, kích thước hạt phấn nhưng các đặc điểm về cấu trúc của hạt phấn chưa được nêu rõ và chưa có tính hệ thống phân loại tới các họ và chi

Năm 2004, trong khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ “Nghiên cứu khả năng

sử dụng đặc điểm hạt phấn hoa trong kiểm nghiệm Dược liệu” của Ngô Thị

Mỹ Hằng, đã nghiên cứu mô tả, chụp ảnh phấn hoa của 36 vị dược liệu làm thuốc và phân biệt một số vị dược liệu dễ nhầm lẫn [10]

Trong khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ năm 2005 “Nghiên cứu phấn hoa của một số họ thực vật có nhiều cây thuốc” của Trần Thị Minh Hằng, đã nghiên cứu mô tả và chụp ảnh phấn hoa của 50 vị dược liệu làm thuốc [11]

Năm 2006, trong khóa luận tốt nghiệp Dược sỹ “Nghiên cứu đặc điểm phấn hoa cây thuốc” của Nguyễn Thị Ngọc Hà, đã nghiên cứu mô tả và chụp ảnh phấn hoa của 100 loài cây thuốc [12\

Những nghiên cứu trên đã tạo nền tảng cho việc nghiên cứu phấn hoa

có tính hệ thống và tạo cơ sở dữ liệu về phấn hoa để sử dụng như là một tiêu chí trong các chuyên luận kiểm nghiệm dược liệu

1.5 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT HỌ c ú c (ASIERACEAE)

1.5.1 Đặc điểm hình thái họ Cúc (Asteraceae)

Cây thảo, leo, ít khi cây gỗ; lá mọc so le, không có lá kèm Cụm hoa gồm các hoa mọc tập trung thành đầu, nằm trong tổng bao lá bắc chung; lá bắc của hoa không có hoặc giảm thành vảy hoặc lông tơ; các đầu tập trung thành chùm đầu, ngù đầu, chùy đầu Đầu có 3 loại: đầu gồm tất cả các hoa hình ống, đầu gồm tất cả các hoa hình lưỡi nhỏ, đầu có cả hoa hình lưỡi nhỏ ở xung quanh và thường là hoa cái, hoa hình ống ở trung tâm Hoa có thể lưỡng tính hoặc hoa đơn tính (hoa cái) cùng gốc hoặc khác gốc; đài thường biến thành mào lông hoặc vẩy hoặc tiêu giảm hoàn toàn, tràng liền, 2 dạng: lưỡi nhỏ, ống hoặc hình chuông với 4 - 5 thùy đều nhau hoặc gần bằng nhau, hoặc lưỡi nhỏ ở trên một ống ngắn, đĩa ở phía trên bầu; nhị 4 - 5 cái đính trên tràng, chỉ nhị gần như luôn luôn rời, bao phấn luôn dính nhau ở mép tạo thành ống, đính gốc, trung đới kéo dài ở đỉnh, ô phấn thường có phần phụ ở gốc tạo thành tai nhỏ; hạt phấn thường hình cầu có gai, hai lá noãn, bầu dưới một ô, một noãn đảo vòi mảnh thường chia làm hai thùy Quả bế một hạt, hạt có cây mầm thẳng, không có nội nhũ [20]

1.5.2 Phân loại họ Cúc (Asteraceae)

Theo Lecomte [20], họ Cúc Compositae (Asteraceae) ở Đông Dương

gồm 7 Section, 78 chi, 215 loài Các section được chia theo khóa sau:

4 Bao phấn không tai S.41^ Hoa cái hình lưỡi nhỏ hoặc tất cả các hoa hình lưỡi nhỏ

5 Hoa hình lưỡi nhỏ ở xung quanh, hoa hình ống ở giữa

6 Bao phấn không tai S.5

6 Bao phấn có tai S.6

5 Tất cả hoa hình lưỡi nhỏ, bao phấn có tai S.7

78 chi thuộc họ Cúc bao gồm:

Adenostemma (1 loài), Ageratum (1 loài), Eỉephantopus (2 loài), Mikania (1

loài), Eupatoríum (6 loài), Gynura (7 loài), Emilia (4 loài).

• s 3: 11 chi, 50 loài

Pỉuchea (4 loài), Blumea (31 loài), Pterocaulon (1 loài), Leontopodium (1

loài), Anaphalis (3 loài), Gnaphaìium (3 loài), Spheromorphaea (1 loài),

Carpesium (2 loài), Enhydra (1 loài), Aetheocephalus (ỉ loài), Sphaeranthiis

(2 loài)

• s 4: 12 chi, 22 loài

Bhtmeopsỉs (1 loài), Laggera (3 loài), Thespis (4 loài), Grangea (1 loài),

Crossostephỉum (1 loài), Cotuỉa (2 loài), Poilania (1 loài), Cyathodỉne (1

loài), Dichrocephala (2 loài), Aríemisỉa (4 loài), Centipeda (1 loài), Xanthiiim

(1 loài)

• s 5: 25 chi, 37 loài

Parthenium (1 loài), Achilea (1 loài), Blainviỉỉea (1 loài), Anisipappus (1

loài), Gossogyne (3 loài), Colobogyne (1 loài), Spỉỉanthes (1 loài), Ecỉỉpta (1

loài), Siegesbeckia (1 loài), Wedelia (5 loài), Synedrella (1 loài), Bidens (2 loài), Cosmos (1 loài), Tridax (1 loài), Asler (1 loài), Solidago (1 loài),

Mỉcroglossa (1 loài), Conyia (3 loài), Erigeron (3 loài), Chrysanthemum (2

loài), Boỉtonia (1 loài), Lagenophora (1 loài), Myriactis (1 loài),

Rhynchospermum (1 loài), Caỉotỉs (1 loài).

1.6 ĐẶC ĐIỂM PHẨSÍ HOA HỌ cúc (ASTERACEAE)

Họ Cúc xuất hiện hầu như ở khắp mọi nơi khi nghiên cứu thực địa Sự phân tầng của vỏ hạt phấn, đặc biệt là sexin thường rất phức tạp ở chi

Artemỉsia và các chi thụ phấn nhờ gió, hạt phấn thường nhỏ hơn, không có gai

và không trạm trổ [19]

Hình 1.6: Ví dụ về sự phân tầng của sexin ở một số loài trong họ Cúc.

A - Taraxacum officinale', B - Artemisia absinthium.

1? 14 Í 5

Hình 1 7: Các dạng gai của Sexin.

1 Lychnophora; 2 - Eupatorium; 3 - Baccharris; 4 - Osmites; 5 - Arnica; 6 - Calendula; 7 - Artosis; 8 - Berkheya; 9 - Gorteria; 10 - Carduus; 11- Cirsium; 12 - Berardia; 13 - Mutisia; 14 - Oxyphyllum; 15 - Trixis.

1.7 CÔNG DỤNG CỦA HỌ cúc {ASTERACEAE)

Các loài thuộc họ Cúc được dùng làm thuốc gồm: Theo Đỗ Tất Lợi 16] có 51 loài, theo Phạm Hoàng Hộ [14] có 111 loài, theo Viện Dược liệu [18] có 88 loài

- Do thời gian nghiên cứu ngắn nên việc thu mẫu hoa tươi của họ Cúc gặp

nhiều khó khăn Vì vậy chúng tôi đã kết hợp nghiên cứu mẫu hoa tươi và hoa khô

- Địa điểm lấy mẫu

+ Phòng tiêu bản - Bộ môn Thực vật Trường Đại học Dược Hà Nội

+ Vườn thực vật - Trường Đại học Dược Hà Nội

+ Vườn thực vật - Trường Đại học y dược Thái nguyên

+ SaPa

+ Sơn La

- Tổng số mẫu đã nghiên cứu: 46 mẫu

2.1.2 Phương pháp nghiên cứu

2.12.1 Mô tả hình thái mẫu cây

- Mô tả hình thái theo phương pháp ghi trong tài liệu “ Thực tập Thực vật và

nhận thức cây thuốc “ [4]

- Phân tích hoa theo phương pháp ghi trong tài liệu “ Thực tập Thực vật và

nhận thức cây thuốc “ [A'.

- Chụp ảnh mẫu tiêu bản, mẫu hoa phân tích nếu mẫu là tiêu bản khô.

- Chụp ảnh mẫu cây tươi và mẫu hoa phân tích, ép tiêu bản theo phương pháp ghi trong tài liệu “ Thực tập Thực vật và nhận thức cây thuốc “ [4] nếu là mẫu cây tươi.

2.1.2.2 Nghiên cứu hình thái hạt phấn

a Phương pháp làm tiêu bản hạt phấn

* Lấy mẫu phấn hoa: Lấy nụ hoa, cả hoa hoặc chỉ lấy riêng bộ nhị củahoa

* Xử lý mẫu: Theo phương pháp Acetolyse của Erdtman [19]

* Làm tiêu bản hạt phấn trên phiến kính

b Quan sái tiêu bản phấn hoa theo phương pháp phân tích L - o [19].

Đặt tiêu bản lên mâm kính

Soi tìm hạt phấn hoa dưới vật kính X 10 rồi sang vật kính X 40, sau đóchuyển vật kính X 100

Quan sát, mô tả đặc điểm hình thái các hạt phấn ở các vị trí; vị trí cực,

vị trí xích đạo theo phương pháp phân tích L - 0 (phân tích sáng tối); một lát cắt quang học không làm rõ cấu trúc tinh vi của exin, sau đó cần suy ra từ cách đặt tiêu điểm cẩn thận qua các trạm trổ khi nhìn bề mặt của hạt phấn

ở tiêu điểm cao nhất các hố hoặc các yếu tố lõm có màu sẫm, các yếu

tố nhô lên có màu sáng trắng Khi tiêu điểm hoá cẩn thận xuống qua exin chúng sẽ thay đổi sáng tối, do sự thay đổi trong sự nhiễũ xạ các hình ảnh tạo

ra Bất cứ các khu vực nào nhô lên cũng có thể tối, khu \ạrc lõm xuống cũng

có thể sáng, như vậy một lỗ thủng và một trụ có thể là những đốm tối nhưng ở những mặt phẳng tiêu điểm khác nhau Bằng cách tập trung những chú ý trên một khu vực nhỏ của exin \'à quan sát những thay đổi biểu kiến trong khi hạ thấp tiêu điểm, cấu trúc của exin có thể được suy diễn Sự nghiên cứu này

được gọi ]à phân tích L- 0 [19] L - 0 là trình tự các đảo sáng và các kênh tối (tiêu điểm cao) tiếp theo bởi những đảo tối và những kênh sáng (tiêu điểm thấp).

c Phương pháp đo kích thước hạt phấn

Chụp ảnh hạt phấn và trắc vi vật kính ở cùng độ phóng đại Dùng phần

mềm Photoshop để ghép ảnh thước vào ảnh hạt phấn, rồi di chuyển thước để

đo kích thước hạt phấn Kích thước hạt phấn được xác định bởi kích thước trung bình của 10 lần đo

d Phương pháp chụp ảnh hạt phấn

Chọn các hạt phấn đặc trưng ở vị trí điển hình để chụp ảnh Sử dụng kính hiển vi gắn máy ảnh kỹ thuật số để chụp trực tiếp hình ảnh hạt phấn trên kính hiển vi Chuyển các file ảnh từ máy ảnh vào máy vi tính với sự trợ giúp của một số chương trình phần mềm xử lý ảnh, sau đó in ra giấy in thích hçfp

2.1.23 Phân loại đặc điểm hạt phấn

Dùng phần mềm PC - Ord 4.0 để phân loại các hạt phấn, dựa trên đặc điểm hình thái phấn hoa

2.2 KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT

2.2.1 Mô tả đặc điểm hình thái mẫu cây

2.2.1.1 Ageratum conyzoides L (Cỏ cứt lợn)

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm: Cây thảo mọc hàng năm, cao chừiig 25 -50cm Lá mọc đối hình trứng, mép có răng cưa tròn Thân và lá có lông Hoa nhỏ màu tím, xếp thành đầu, các đầu tập hợp thành ngù, toàn hoa hình ống, lá bắc hình dải

2.2.1.2 Artemisia amomaỉa (Tăng ky)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm; Lá có phiến một lần kép 3 - 5 lá chét xoan, không lông, mép có răng to, thưa Cụm hoa đầu toàn hoa hình ống, hoa ngoài cái, hoa trong lưỡng tính Bao phấn có tai nhỏ

2.2.1.3 Artemisia camfoloa

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm; Lá đơn, mọc đối, phiến lá hình mác, mép lá nguyên Cụm hoa đầu gồm toàn hoa hình ống, đài biến thành mào lông dài gần bằng ống hoa Bao phấn không tai

2.2.1.4 Artemisia japónica Thunb (Ngải cứu rừng)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá không cuống, phiến thon ngược, nhỏ, da 2 - 4cm, từ

từ hẹp lên ngọn và nhánh, không lông Chùy hoa mang chùm dài, hẹp, nhánh mang nhiều hoa đầu gắn một bên, hoa đầu có cuống, cao 2mm, lá bắc có mép trong, không lông, toàn hoa hình ống, hoa ngoài cái, hoa trong lưỡng tính

22.1.5 Artemisia scoparia Waldst.et Kit (Ngải lá kim)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá xẻ thành đoạn hẹp dài đến 3cm, rộng 0,3 - 0,5mm, không lông Hoa đầu cao 2mm, lá bắc không lông, hoa toàn hình ống, hoa ngoài cái, hoa giữa lưỡng tính

22.1.6 Artemisia sp.

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm: Cây thảo, ỉá mọc so le, phiến chia thùy Cụm hoa toàn hình ống, đầu cao 3 - 4mm, đài biến thành mào lông nhỏ mềm, bao phấn có tai nhỏ

22.1.7 Artemisia suldigitata Mattf (Nghĩa lộ)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá có phiến thùy hình lông chim sâu, cuống có tai dạng kèm cao Chùm đầu ở ngọn nhánh, hoa đầu nhỏ, lá bắc không lông, có 3 - 4 hàng, toàn hoa hình ống, hoa ngoài cái, hoa trong lưỡng tính

2.2.1.8 Artemisia vulgaris L (Ngải cứu)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le, xẻ nhiều kiểu từ xẻ lông chim đến xẻ thùy theo đường gân, mặt dưới có lông Hoa đầu, xếp thành chùy như bông, dài 2 - lOcm, đứng ở nách lá Mỗi hoa đầu rộng 3 - 4mm, hoa hình ống gồm hoa cái

và hoa lưỡng tính Bao phấn có tai

2.2.1.9 Bidenspilosa L (Quỷ châm thảo)

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm: Cây thảo cao 0,3 - Im, mọc đứng, phân nhánh nhiều, thân

và cành có rãnh dọc Lá mọc đối, cuống dài, đơn hay thường có 3 lá chét hình trứng thuôn, dài 3 - 6cm, rộng 1,5 - 2cm mặt trên ráp, mép khía răng cưa nhọn, đều Cụm hoa ở nách lá hay ở ngọn, mọc riêng lẻ hay từng đôi một Trong mỗi đầu hoa, hoa vòng ngoài trung tính hình lưỡi màu trắng có 3 thùy,

các hoa ở giữa lưỡng tính hình ống màu vàng, đài có mào lông, bao phấn

không tai đính gốc

2.2.1.10 Bìumea balsamifera (L.) DC ( Đại bi )

" Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le, phiến lá hình trứng, hai đầu nhọn, hơi tù, dài từ 8 - 30cm, rộng 3 - 6cm, có lông ở mặt dưới, mép có răng cưa, cuống lá

có 2 - 3 tai Cụm hoa hình ngù ở nách lá hay ở ngọn, có nhiều đầu, trong mỗi đầu có nhiều hoa, toàn hoa hình ống, hoa cái ở ngoài, hoa trong lưỡng tính

2.2.1.11 Blumea glomerata (Cổ định)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá đơn mọc so le, phiến lá hình ô van, mép lá khía răng cưa Cụm hoa đầu, đài có mào lông

2.2.1.12 Boltonia indica (L.) Benth (Hài nhi cúc)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá đơn mọc so le, phiến lá có chia thùy Cụm hoa đầu toàn hoa hình ống, cao khoảng 5mm, đài biến thành mào lông, bao phấn có tai nhỏ

2.2.1.13 Calendula ojficinalis L (Hoa xu xi)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm; Các lá ở dưới hình cái bay, các lá ở trên từ hình mác đến hình bầu dục, dài 5 - 12cm, 2 mặt có lông Hoa đầu lớn, đường kính 3 - 3cm, ở giữa là các hoa hình ống xung quanh là các hoa hình lưỡi xếp nhiều vòng, có khi trong đầu hoa chỉ có hoa hình lưỡi mà không có hoa hình ống Bao phấn không tai

2.2.1.14 Centaurea cyaniis L (Thanh cúc)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá phía gốc hình bầu dục có cuống, lá ở thân và ngọn hình dải, dài 8 - 15cm, rộng 4 - 5mm, có lông mịn Hoa đầu to ở ngọn, có cuống dài Lá bắc nhiều hàng, mép có răng to, làm thành rìa, lá bắc trong có mép nguyên Các hoa ngoài lo

2.2.1.15 Centaurea scabiosa L.

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá kép lông chim, phiến lá chia thùy Cụm hoa trung bình Hoa hình ống có đài biến đổi thành mào lông

2.2.1.16.Centipeda minima (L.) A Br et Aschers (Cây cóc mẩn)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá nhỏ, mọc so le, mép khía răng Hoa đầu mọc ở ngọn hay ở bên, đối diện với một lá rất bé Trong đầu có 5 dãy hoa cái ở neoài ở giữa là hoa lưỡng tính hình ống, đài biến đổi thành mào lông

2.2.2.17 Centratherum intermedium Less (Cúc tím)

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm: Cây thảo, sống dai Thân càỉih có nhiều lỏnu mịn Lá mọc

đối, hình trứng, mép ]á khía tròn, ngọn lá nhọn, gốc lá men xu(>ng theo cuống

lổ làm cho lá hầu như không có cuống, phiến iá nhấn có mầu xanh thẩm Cụm hoa đầu, ngav dưới đầu có vòng 3 - 7 !á giốns; lá tổng bao ựồm 3 hàng lá bắc,

Lá bắc của hoa khoĩìịi có Hoa 3 lá đài ròi hình váy dài 2mm, màu xanh xám

tràng hình ốnơ cong, dài lem phía trên chia làm 5 thùy, thùy dài 3mm, mầu

tím Nhị 5, chỉ nhị rời đính trên Iràng, bao phấỉi 2 ô, Iruns đới kéo dài thànhmũi nhọn dài (),5mm Lá noãn 2, bầu dưới ỉ ô đính noãn bên.

2.2.1.18 Chrysanthemum coronarium L (Cải cúc)

* Mẫu cây: Khó

* Đặc điểm: Lá ôm vào thân, xẻ 2 lần lông chim thùv hình thìa khôngđều Cụm hoa ở nách lá, hoa cái ở ngoài hình lưỡi, hoa lưỡng tính ở giữa,không có mào lông Lá bắc của bao chung không đều

2.2.1.19 Chrysanthemum sinensis (Cúc liên chi)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Cụm hoa cao khoảng 2-3 cm, hoa hình ống có đài biến thành mào lông

2.2.1.20 Crossostephhim artemisíoides Less (Cúc mốc)

* Mẫu câv: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le, phía gốc chia 3 thuỳ nhỏ, thuỳ hình bầu dục, đầu tù, lá ở phía trên nguyên, thuôn 2 mặt có lông Cụm hoa mọc ở kẽ lá thành bông gồm nhiều đầu, lá bắc xếp nhiều hàng, hoa cái ở xung quanh, có nhiều vảy dính liền nhau ở phần dưới, tràng 2 - 3 thuỳ, toàn hoa hình ống, hoa lưỡng tính ở ngoài, tràng có 5 thuỳ, 5 nhị, bầu hình trứng ngược nhẩn

2.2.121 Cynara scoìymus L (Actiso)

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm: Cây thảo, cao 1 - 2m Thân có lông mềm và có khía dọc

Lá to dài mọc so le, phiến lá ở gốc chia thuỳ lông chim 2 - 3 lần Lá ở ngọn gần như nguyên, mặt trên màu lục, mặt dưới có lông trắng, cuống lá to và ngắn Cụm hoa hình đầu ở ngọn các nhánh của thân, gồm nhiều hoa hình ống

màu lam tím đính trên 1 đế hoa nạc đường kính 6 - 1 5 cm, bao bởi nhiều lá bắc nạc ở gốc có chóp nhọn.

2.2.1.22 Eclipta prostrata L (Cỏ nhọ nồi)

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm; Cây cỏ, cao 0,1 - 0,8m, có lông trắng cứng thưa, có nhựa trong rồi đen khi ra không khí Lá mọc đối, phiến nguyên, gân phụ không rõ, cuống ngắn Hoa đầu có cuống dài, 1 vòng lá bắc, hoa cái hình lưỡi màu trắng, hoa hình ống lưỡng tính, bầu dưới, bao phấn không tai đính gốc

2.2.1.23 Elephantopus scaber L (Cúc chỉ thiên)

* Mẫu cây; Khô

* Đặc điểm: Lá mọc thành hoa thị ở gốc, thuôn thon hay thành cuống

ôm thân, tù ở đầu, dài 6 - 12cm, rộng 3 - 5cm, có răng, có lông ráp ở 2 mặt Hoa xếp 4 cái thành đầu, các đầu tập hợp thành ngù bao bởi 2 lá bắc hình tam giác, dài 10 - 15mm, rộng ở gốc

2.2.1.24 Elephantopus spicatus Juss.ex Aublet (ơiân voi gié)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá không cuống, phiến xoan ngược, gốc lá có thuỳ ôm thân, mép lá có răng, gân phụ 5 - 8 cặp Hoa kép, hoa đầu nhỏ, có lá bắc

2.2.1.25 Emilia sonchifolia (L.) DC (Cây Rau má lá rau muống)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm; Lá không cuống, có tai ở gốc, gốc lá xòe rộng ôm lấy thân Cụm hoa hình đầu, thưa, mang hoa giống nhau

2.2.1.26 Erigeron canadense L (CỎ tai hùm)

* Mẫu cây; Khô

* Đặc điểm: Lá phía gốc hình hoa thị, dạng trái xoan ngược dài, có răng, thót lại rất dài thành cuống có khi dài tới lOcm Lá phía trên hình dải rộng, nguyên, không cuống, càng lên cao càng nhỏ dần Cụm hoa hình đầu, rộng 3 - 5mm xếp rất nhiều cái thành chùy kép Lá bắc của bao chung nhiều, hẹp, mép có dạng màng Hoa ở mép là hoa cái, hình môi, hoa ở giữa lưỡng tính hình ống

2.2.1.27 Eupatorium odoratum L (Cỏ lào)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc đối, hình trái xoan nhọn, mép có răng, cuống dài

1 - 2cm, có 3 gân chính Cụm hoa xếp thành hình ngù kép Mỗi cụm hoa có bao chung gồm nhiều lá bắc xếp 3 - 4 hàng, hoa toàn hình ống lưỡng tính

2.2.1.28 Eupatorium staechadosmiim Hanc ( Mần tưới)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc đối hình dải rộng, nhọn dài ở đầu, thon hẹp ngắn

ở gốc, dài 5 - 12cm, rộng 2,5 - 4,5cm, mép lá có răng đều, gân hình lông chim Cụm hoa hình ngù kép, ở ngọn nhiều đầu hoa, trong mỗi đầu có nhiều hoa, lá bắc tròn tù, đài biến đổi thành mào lông

2.2.1.29 Gnaphaỉium ìuteo album L (Rau khúc tẻ)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Thân có lông Lá mọc so le, nguyên, hình trái xoan ngược, có mũi cứng ở đầu thon hẹp dài ở gốc hơi men theo cuống, dài 4 - 7cm, rộng 5 - 15cm Đầu hoa xếp thành ngù ở ngọn, lá bắc có lông

2.2.130 Grangea maderaspatana (L.) Poir (Cải đí -ìg)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le, hình gần bầu dục, đầu lá tù, gốc thuôn, có 2

- 5 đôi thuỳ lông chim, 2 mặt lá có lông Cụm hoa đầu ở ngọn hoặc ở nách lá,

lá bắc 2 - 3 hàng có lông Trong đầu hoa có hoa cái và hoa lưỡng tính, bao phấn dài 0,5mm không có tai

2.2.131 Grindelia camponum Greene.

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le Cụm hoa đầu đường kính khoảng 3cm, hoa lưỡi nhỏ và hoa hình ống

2.2.1.32 Gynura crepidioỉdes Benth (Rau tàu bay)

* Mẫu cây: Tươi

* Đặc điểm: Cây thảo mập, mọc đứng cao tới Im Thân tròn hay khía rãnh Lá hình trứng dài, phần chóp phiến lá có hình thoi, phần dưới có những thùy xẻ sâu, mép có răng cưa Cụm hoa dạng đầu mọc ở nách lá hay ở ngọn, gồm nhiều hoa màu hồng nhạt hình ống, bao chung có 2 hàng lá bắc hình sợi

2.2.1.33 Heìichrysum bracteatum (Vent.) Andrews (Cúc bất tử)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Cụm hoa đầu xếp thành chuỳ Bao chung gồm nhiều lá bắc dạng vẩy cứng, trong đầu hoa toàn hoa hình ống

2.2.134 Hemisteptỉa lyrata Bunge (Cây đàn lia)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá xẻ thu\ hình đàn lia dài 10 - 25cm, rộng 6 - 14cm, mép lượn sóng Hoa đầu mọc thành ngC thưa ở ngọn, hoa toàn hình ống, đài

có mào lông mềm Các lá bắc của bao chung rất không đều nhau, trên lá bắc

có 1 phần biến dạng gờ

2.2.J.35 ỉnuỉa cappa (Buch - Ham Ex D Don) DC (Cúc hoa xoắn)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: lìiân có lông mềm Lá thuôn, tù ở 2 đầu, dài tới 9cm, rộng 2,5 - 3cm, hơi sần sùi hay có lông mềm ở mặt trên, mép có răng thưa

Chùy hoa ở nách lá mang nhiều hoa đầu gắn khít nhau, dày đặc, hoa đầu rộng

7 - 8mm, lá bắc hẹp, hoa cái ở ngoài hình lưỡi, nhỏ hơn, các hoa lưỡng tính ở trong

2.2.136 Laggera aỉata (D Don) Sch Bip ex Oliv (Cúc lục lăng)

* Mẫu cây; Khô

* Đặc điểm: Thân có cánh Lá thuôn dài tới 8cm, đầu tù, gốc thuôn dần, mép có răng nhỏ, có lông mịn Chuỳ hoa ở ngọn các nhánh, đầu hoa cao tới 6 - 7mm, lá bắc nhiều hàng nhọn, nhiều hoa cái, hoa lưỡng tính

2.2.1.37 Lycopus lucidus Turcz.

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá đơn, mọc đối, phiến lá hình mũi mác Cụm hoa đẩu có đường kính khoảng 2 cm Hoa hình ống có đài biến thành mào lông

2.2.1.38 Parthenium hysteropỉiorus L (Cúc liên chi dại)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá xẻ 2 lần lông chim, mép lá nguyên Cụm hoa đầu có 5 góc, đường kính 4 - 8mm xếp thành chuỳ thưa ở ngọn, hoa ở rìa có lưỡi hình thận, hoa ở giữa hình ống

2.2.139 Pỉuchea indicư (L.) Less (Cây cúc tần)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le, hình gần bầu dục, đầu hơi nhọn gốc thuôn dài, mép khía răng Cụm hoa hình ngù mọc ở ngọn các nhánh Hoa đầu có cuống ngắn, thường xếp 2 - 3 cái một, lá bắc 4 - 5 dãy, hoa cái xếp trên nhiều dãy, hoa lưỡng tính ở giữa

2.2.1.40 Pluchea pteropoda Hemsl (Lức)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le, hình thìa, mép có răng cưa, phiến lá dày Cụm hoa hình đầu, 4 - 5 hàng lá bắc, các hoa đầu họp thành 2 - 4 ngù, hoa hình ống Đài biến đổi thành mào lông

2.2.1.41 Solidago sp.

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc so le Cụm hoa đầu, hoa cái ở ngoài hình lưỡi, hoa lưỡng tính hình ống ở giữa, lá bắc xếp nhiều dãy Đài có mào lông, 5 thùy, nhị 5, bầu dưới

2.2.1.42 Stevia rebaudỉana ( Bert.) Hemsl (Cỏ neọt)

* Mẫu cây: Khô

* Đặc điểm: Lá mọc đối, thuôn hình ngọn giáo, có răng Hoa đầu rất nhỏ hình ống, xếp thành ngù Đài biến đổi thành mào lông, có gai Bao phấn không tai