Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử

Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử Nghiên cứu định lượng selen trong một số chế phẩm thuốc viên nang mềm bằng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử

Trang 1

TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HĂ NỘI

NGUYÍN THỊ THANH NHĂI

NGHIÍN CỮU ĐỊNH LƯƠNG SELEN

TRONG MỘT SỐ CHẾ PHẨM THUỐC VIÍN NANG MEM BANG PHƯƠNG PHÂP

QUANG PHO HAP THU NGUYEN TU

LUAN VAN THAC SY DUOC HOC

CHUVYÍN NGĂNH : HIỂM NGHIỆM THUỐC - ĐỘC CHẤT

MA SO: 60.73.15

Nguoi huĩng din Khoahoc:

Trang 2

huing dan, qgitp ae eha eae thay c6 gido, cĩe cin b6 ahaa viĩa phoug My

ty = Diin Kiim Aghiem Odi tang kinh tigng va biet on sau sĩ, tôi

win chan ihanh eam oa:

DPGES.FS Frinh Oin Liiu — Viĩn trưởng CUiện Kiếm (Nghiệm

ThS Bai Shi Fda — Crưởug phòeg My Pham

Oiin Kiim Vghiim

da trực tiếp hibag dĩn tu tinh co tôi troag suĩt qua trinh thực tiện va hoan thanh lade van

Foi cing xin bay tĩ loi cam ou chau thank tĩi:

PGS TFS Fran Fi An — Feubrig b6 min Fboa Dhar Fich = Fruong Dai hoe Duve Wa Vi,

DS: Vguyĩen Oan F6a va cĩe can b6 nhan niín phong My Pham

ent

NE a + ` g ae hha cổ GOS, wo atl 2 Bian gn gh we — 3 -

Da guip dĩ va đâng gop ahiing UYikita quy hau cho tĩi froug thoi qian thie hiĩn dĩ tai

~ * `" - ^ # ~ A ' ; 2 + _^ aL =, :

Whan dip nay tĩĩ aang xin tran trong cam ou cae thay ce: giao trong

Ban Gidm hita, phong Dad tao sau dai hoe tritĩng Pai hoe Duvĩ Tha

Wĩi dĩ tae moi diĩu kiĩn thuận loi để tôi hoan thanh [rận van nay: Wa W6i, agay 20 thang 17 nam 2004

Trang 3

Trang Lời cảm ơn Mục lục Danh mục câc ký hiệu, câc chữ viết tắt Danh mục câc bảng Danh mục câc hình vẽ, đồ thị ĐẶT VẤN ĐỀ 1

Chuong 1: TONG QUAN 3

1.1 VAI NET VE NGUYEN TO SELEN 3

1.1.1 Đặc điểm 3

L1, Phđn bố 4

1.13 Vai trò của Selen đối với cơ thể 5

1.1.4 Độc tính của Selen 9

1.15 Nhu cầu Selen của con người 10

1# CÂC DẠNG THUỐC CHỨA SELEN 10

La TÌNH HÌNH NGHIÍN GỨU VỀ SELEN TRONG NƯỚC 12

1.4 CÂC PHƯỜNG PHÂP:ĐỊNH LƯỢNG SELEN 13:

L5 PHƯƠNG PHÂP QUANG PHÔ HẤP THỰ NGUYÍN TỬ 16

L1; Cơ sở lý thuyết của phương phâp AAS J7

1542 Câc quâ trình thực hiện trong phĩp đo AAS 19

15:3: KY thuat nguyín tử hoâ mẫu bằng ngọn lửa 20

1.5.4 Câc yếu tố ảnh hưởng - 22

1.6 PHUONG PHAP VO CG HOA MAU 23

16.1 Phương phâp vơ cơ hô khơ 23

1.6.2 Phương phâp vô cơ hoâ ướt 23

l:6:3 Phương phâp vơ cơ hô trong lò yi sóng 23:

1.6.4 Phương phâp lín men 24

L6 Tâc nhđn vơ cơ hô 24

[.6.6 Xử lý mẫu để xâc định Selen trong một số đối tượng cu the 25

Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VĂ PHƯƠNG PHÂP NGHIÍN CỨU 27

%1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÍN CÚU 27:

g2 THIẾT BỊ VĂ HOÂ CHẤT 28°

23 PHƯƠNG PHÂP NGHIÍN CUU 29

Chương 3: THỰC NGHIỆM - KẾT QUÂ VĂ BĂN LUẬN : - 33

3.1, KHAO SAT, NGHIEN CUU DIEU KIEN VO CO HOA MAU 33,

14 KHẢO SÂT, NGHIÍN CÚU, XĐY DỤNG QUI TRÌNH ĐỊNH

LƯỢNG SELEN BẢNG PHƯƠNG PHÂP F- AAS,KỸ THUẬT 33:

Trang 4

W NNN bă i ta no eo 3252 FID di 3.2.5.4 SO: 3.3 3.5; 3.6 Tiến hănh Đânh giâ phương phâp

Khao sat khoảng tuyến tính giữa nồng độ vă dĩ hap thu cua Selen

Khao sat qui trinh vĩ co-hoa

Xâc định độ lặp lại của phương phâp

Xâc định độ đúng của phương phâp

So sânh phương phâp đường chuẩn vă phương phâp thím đường chuẩn

KHẢO SAT, NGHIÍN CÚU, XĐY DUNG QUI TRINH DINH LUGNG SELEN BANG PHUONG PHAP F - AAS, KY THUAT

HYDRID HOA

Khao sât câc điều kiện đo

Xđy dựng qui trình vơ cơ hô mẫu vă chiết Selen

Chuẩn bị dung dịch chuẩn vă thử

Tiến hănh

Đânh giâ phương phâp

"Khảo sât khoảng tuyến tính giữa nồng độ vă độ hấp thu của Selen

.Khảo sât gm trình vơ cơ hô

Xúc định độ lap lại của phương phâp

Xâc định độ đúng của phương phâp

ĐỊNH LƯỢNG SELEN PRONG CHE PHAM BẰNG PHƯƠNG PHAP QUANG PHO HAP THU UV - VIS

Trang 5

AAS: -Phuong phâp quang phổ hấp thụ nguyín tử

(Atomic Absorption Spectrophotometry)

F-AAS: Phĩp đo phổ hấp thụ nguyín tử trong ngọn lửa

(Flame - Atomic Absorption Spectrophotometry) ETA-AAS: Phĩp đo phổ hấp thụ nguyín tử không ngọn lửa

(Electro - Themal Atomic Absorption Specirophotometry)

HCL: Den catod rong (Hollow catĩd lamp) ' f-;- 2)

nt: như trín

USE: Dược điển Mỹ (United State:Pharmacopiea)

Trang 6

10

Bảng 1.1 Câc dạng thuốc chữa Sclen iccncinmmmenenareee II

Bảng 2.2 Công thức tính hăm lượng 30

SHG cic ggaddxopiogataoyai

Bang 3.3 Sự liín quan giữa nồng độ acid nín vă độ hấp thụ

trons plicit phap F - AAS qanacueeaeaeannadidniaaenaisoasrersoasseseeaa 34

Bảng 3.4 Sự phụ thuộc của độ hấp thụ văo nồng độ Selen trong

F-AA§ kỹ thuật hô hơi trực tIẾP¡rocoenoniooninnnianadnonno.aỷnae 29

Bảng 3.5 Kết quả khảo sât qui trình vơ cơ hô trong F -AAS

kỹ thuật hoâ hơi trực LIẾP - + că ssnshts+treetrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrrr 37 Bảng 3.6 Kết quả khảo sât độ lặp lại của F - AAS kỹ thuật hoâ

Hơi rựctiểh tren triệu GI 6l eceeiusddatiagdkiidlilkgttavixgdgis 38 Bảng 3.7 Kết quả khảo sât độ lặp lại của F - AAS kỹ thuật hoâ

hơi trực tiếp trín mẫu 38

si] 1v 1: T2 ST vn

Bảng 3:8: Kết quả khảo sât độ lặp lại của F - AA§ kỹ thuật hoâ

Hơi !TWGGEEYrếnTnrilani EFHẺ,eceeeeeeeaaoeaaasninnebiieropakoaudiokiissgaairditreti 38 Bảng 3.9 Kết quả khảo sât độ lặp lai cua F - AAS ky thuat hoa

hơi trực tiến trín riểu alice = Sti scsicercsavewswccevneeenccesseasareiainnesncocorexen 39 Bảng 3.10 Kết quả khảo sât độ lạp lại của E - AAS kỹ thuật hoâ

hơi trực tiếp trín mẫu BelaÍ: < - «55-3 veeexxerrerkrrrervrr 39 Bảng 3.1 1 Kết quả khảo sat d6 lap lai cua F - AAS kỹ thuật hoâ

hơi trực tiếp trín mau nguyín liệu nấm men Đức « «+2 39

Bang 3.12 Kĩt qua khao sat d6 lap lai cua F = AAS kỹ thuật hoâ

hơi trực tiếp trín mẫu nguyín liệu nấm men Việt Nam 40

Bảng 3.13 Kết quả khảo sât độ đúng của F - AAS kỹ thuật hoâ

hơi trực tip Wen MUM âacouesaaniiisaaseasaaaaaeeoaassuaassamasansss- TT Bảng 3.14 Kết quả khảo sât đỏ lặp lại của F- AAS kỹ thuật hoâ hơi trực tiếp với phương phâp định lượng thím đường chuẩn trín mẫuM, 4l Bảng 3.15 Kết quả sơ sânh phương phâp đường chuẩn vă thím

Trang 7

19 20 21 22 Bs

linthis0Hifl NGổ be csseandieniati80150006/00 0650840801020 A420/i2xi311080i50n0iengi068cgan 4?

Bang 3.19 Kết quả khảo sât độ lặp lại của F - AAS kỹ thuật hydrid

H6 trín riều Gi1BEETLON scăceaverienitisroanssseii51105910100615006 103601586 07556 48 Bảng 3.21 Kết quả khảo sât độ lặp lại của E - AAS kỹ thuật hydrid

hoâ trín mẫu nguyín liệu nấm men Việt NÑam - 5s 5< <2 48 Bang 3.20 Kĩt qua khao sat d6 ding cla F - AAS ky thuat

hydrid hoâ trín mẫu Cigelton ¡5-2 x22 xe re 49

Bảng 3.22 Qui trình dịnh lượng Selen theo phương phâp

quang phổ hấp thụ UV - VĨS -. -c Âc SA HAS C22530 056101606 2x8) 3l Bảng 3.23 Kết quả định lượng Selen trong mẫu Cigelton bằng

phương phâp quang phổ hấp thụ UV - VTS :¿ . 2555255: 52 Bảng 3.24 Kết quả định lượng Selen trong nguyín liệu nấm men

Việt Nam bằng phương phâp quang phổ hấp thụ UV - VỊS 52

Bang 3.25 Kết quả so sânh phương phâp phương phâp F - AAS kỹ thuạt hoâ hơi trực tiếp với phương phâp quang phổ hấp thụ UV - VIS 53

Bảng 3.26 Kết quả số sânh phương phâp phương phâp E - AĐ§ kỹ

Trang 8

Hình 3.3 Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc của độ hấp thụ văo nồng độ

Selen trong F - AAS kỹ thuật hô hơi trực tiếp -‹«s- s5

4 Hình 3.4 Đồ thị biểu điễn sự phụ thuộc của độ hấp thụ văo nồng độ

Trang 9

Selen lă nguyín tố vi lượng thiết yếu cho cơ thể sống (động vật vă thực vật) Nó đóng vai trò quan trọng trong tế băo vì liín quan đến sinh tổng hợp Co-enzym O(ubiquinon) lă thănh phần cấu tạo nín Glutathion peroxydase (GSH Px), một enzym chống lại quâ trình oxy hoâ lipid, bảo vệ tế băo Ngoăi ra, Selen cũng xúc tâc cho câc phản ứng chuyển hoâ trung gian, giải độc câc

nguyín tế độc như Asen, Chì, Thuỷ ngđn Cadimi Chính vì vậy, câc nhă bao

chế đê nghiín cứu vă sản xuất ra nhiều chế phẩm chứa Selen để sử dụng cho

phòng ngừa vă hỗ trợ điều trị câc bệnh tim mạch, viím khớp, ung thư, suy

giảm miễn dịch, suy thoâi võng mạc mắt, lêo hoâ Sự thiếu hụt Selen lă

nguyín nhđn gđy ra nhiều bệnh quan trọng nhưng quâ thừa Selen cũng rất

nguy hiểm, có thể dẫn tới nhiễm độc Vì vậy, để kiểm soât được lượng Selen

đưa văo cơ thể đòi hỏi phải có phương phâp chính xâc vă tin cậy để kiểm tra

hăm lượng Selen trong câc dạng thuốc Dược điển Mỹ (USP 24) sử dụng phương phâp quang phổ hấp thụ UV - VIS để xâc định hăm lượng Selen

Nhưng trín thị trường được phẩm hiện nay, câc thuốc chứa Selen đa số ở dạng

hỗn hợp đa thănh phần gồm một số vitamin tan trong dầu nín câc chế phẩm năy thường băo chế dưới dạng viín nang mềm Vì vậy, việc âp dụng phương phâp định lượng như Dược điển Mỹ 24 gặp khó khăn vă trở ngại

yíu cầu đối với việc xâc định chính xâc câc nguyín tố vi lượng trong câc đối

tượng sinh học, y học, môi trường, dược phẩm Dược điển Mỹ 24 cũng qui

định định lượng Selen trong câc dạng thuốc bằng phương phâp năy với nồng độ của Selen trong dung dich do nam trong khoảng 5 - 25Iip/ml, Nếu âp dụng

theo Dược điển Mỹ để định lượng câc chế phẩm thuốc viín nang mềm hiện có

trín thị trường nước ta thì cũng gặp khó khăn vì phải vô cơ hoâ lượng mẫu thử

Trang 10

với trang thiết bị hiện có tại cơ sở, chúng tôi tiến hănh đề tăi: "Nghiín cứu

định lượng Selen có trong câc chế phẩm thuốc viín nang mềm bằng

phương phâp quang phổ hấp thụ nguyín tử",

Mục tiíu của đề tăi:

se Xđy dựng được một phương phâp kiểm tra hăm lượng Selen khả thị,

có độ chính xâc vă độ đúng cao góp phần văo việc quản lý chất lượng

thuốc trín thị trường, giúp câc cơ quan kiểm nghiệm, sản xuất âp

dụng để kiểm tra, giâm sât cũng như xđy dựng tiíu chuẩn chất lượng cho câc sản phẩm thuốc chứa Selen

Trang 11

1.1 VAI NET VE NGUYEN TO SELEN

1.1.1.Đặc diĩm [4], [10], [16], [21], [26] [48] Tĩn quĩc tĩ: Selenium

Ki hiĩu hoa hoc: Se

Nguyín tử lượng: 78,90

Nguyín t6 Selen duoc Berzelius (1779 - 1848) nha hoâ học người Thuy Điển phât hiện nêm 1817 ở trong chất thải của quâ trình oxy hoâ SO; từ quặng đồng pyrit khi sản xuất H;SO,:

Selen lă nguyín tố hoâ học thuộc nhóm VỊ A trong bảng tuần hoăn câc nguyín tố, có số thứ tự 34, cấu hình electron lớp ngoăi cùng lă: 4s“4p” Câc

nguyín tố cùng nhóm với Selen lă: Oxy, Lưu huynh, Telu vă Poloni

Selen tồn tại ở một văi dạng thù hình: Selen đạng tỉnh thể có mău đỏ

đậm vă mău xâm; Selen đạng kim loại có mău xâm; Selen dạng vô định hình lă chất bột mău nđu hung Selen không có nhiệt độ nóng chảy xâc định, Ở

nhiệt độ 250°C, câc dạng thù hình của Selen đều chuyển sang dạng lỏng có

mău nđu đỏ, nhiệt độ sôi T; = 685 ”C vă chuyển sang dạng hơi có mău đỏ đậm

gdm những phđn tử Se;

Vạch phổ hấp thụ đặc trưng vă nhạy nhất của Selen lă vạch 196,lnm

duoc sit dung khi ding k¥ thuat F - AAS vA ETA - AAS [17], [37], [38], [39],

[49]

Tính chất hoâ học của Selen rất giống Lưu huỳnh, chúng đều thể hiện mức oxy hoâ -2; +4; +6 tương ứng với câc hợp chất Sulfid - Selenid; Sulfit -

Selenit; Sulfat - Selenat Với nhiều hợp chất hữu cơ của Lưu huỳnh , Selen có

thể thay thế vị trí của Lưu huỳnh cho những hợp chất tương tự như; Thioure vă

Selenoure; Cystein va Selenocystein, Methionin ya Selenomethionin, cac

Trang 12

tính khâ cao Hydro selenid không bền trong không khí, dễ bị phđn huỷ thănh

Selen vă nước

Ở mức oxy hoâ +4, Selen tồn tại dưới dạng Selen dioxyd (SeO;) acid

Selenơ (H,SeO.), Selen tetraclorid (SeCl,) vă muối Selenit (SeO;”) Selen dioxyd có tính oxy hoâ mạnh, tính khử yếu Acid selenơ lă một acid yếu tan nhiều trong nước vă bị phđn huỷ nhanh khi đun nóng tới nhiệt độ nóng chảy

Ở mức oxy hoâ +6, Selen tồn tại dưới dạng acid Selenic (H;SeO,) hoặc

muối Selenat (SeO¿?) Acid Selenic lă một acid manh, mău trắng, rất hút ẩm,

có tính oxy hoâ mạnh hơn acid Sulfuric

HA ed

cho ngọn lửa mău xanh sâng vă có mùi đặc trưng như mùi rau cải thối rữa do

tạo thănh dạng dioxyd Selen tâc dụng trực tiếp với hydrogen, câc halogen:

Oxy hoâ Selen bằng HNO; sẽ tạo ra H;SeO;, bằng H;SO, sẽ tạo ra H;SeO,

Selen khử dung dịch muối Văng vă Bạc sẽ tạo ra Bạc selenid vă kim loại Văng, tâc dụng được với nhiều kim loại khâc

1.1.2 Phđn bế [4], [22], [26]

Selen phđn bố khâp nơi ở trín vỏ trâi đất với những lượng nhỏ, lă thănh phần chính của 40 chất vă thănh phần phụ của 37 chất khâc Trữ lượng của

Selen ở trong vỏ trâi đất lă I.10% 'Ta thường gặp Selen trong câc loại đất đâ,

khoâng sản, câc vật liệu trín mặt trăng vă núi lửa, trong nhiín liệu hô thạch,

đơng thực vật vă nước Trong thiín nhiín, Selen thường ở chung với câc kim loại như Cu, Pb, Hg, As, Au Những khoâng vật riíng của Selen rất hiếm khi

øặp mă thường ở lẫn với những khoâng vật của Lưu huỳnh dưới dang tap chat

Nước khoâng ở một số vùng có hăm lượng Selen cao [22], [48]

Trang 13

khâc thường có lượng Selen nhỏ vă không ổn định

1.1.3 Vai trò của Selen đối với cơ thể [4] [5], [6] [9] [10] [22] [26], [27], [30], [4H]

Trước đđy, Selen được coi lă nguyín tố có độc tính cao vì ở những vùng

đất giău Selen thường gặp một số bệnh ở súc vật vă người như rụng lông, yếu

cơ Những năm đầu thế kỷ 20 chỉ thấy có những thông bâo về tâc hại của

hợp chất chứa Selen đối với sức khoẻ của con người vă động vật Thế nhưng

đến năm 1949, Claton vă Bauman đê nhđn thấy rằng hăm lượng Selen trong

khẩu phần ăn có tâc dụng ngăn chặn sự phât sinh ung thư ở chuột [22] Năm

1958, người ta đê nhận ra lợi ích của Selen đối với sức khoẻ con người vă động vật, khi mă Schwars chiết ra từ thận động vật một yếu tố chứa Selen có

tâc dụng cực mạnh trong điều trị thoâi hoâ vă hoại tử gan [22]; [26]: Năm

1971, vai tro cua nó trong Glutathion peroxydase được phât hiện đânh dấu một giai đoạn quan trọng trong lịch sử y học Ngăy nay, Selen được coi lă

nguyín tố vi lượng rất quan trọng, không thể thiếu được cho hệ thống bảo vệ

cơ thể chống gốc tự do vă có nhiều vai trò sinh học khâc [22], [23] [27]

Gốc tự do luôn tồn tại trong cơ thể, hình thănh do chính hoạt động sống

của mội tế băo vă do tâc động của mội trường sống Gốc tự dọ có thể tấn công

a sue

văo bất cứ co quđñ ñẵ của eỡ thể gđy Fa CAC ABI eØ sđu:

- Tấn công văo câc lipoprotein tỷ trọng thấp (LDL) lă nguyín nhđn hình thănh câc đâm tế băo bọt lắng đọng ở thănh mạch mâu tạo ra câc mảng xơ vữa gđy nín nhiều bệnh tim mạch

- Tấn công văo tổ chức măng, gđy tổn thương măng với quâ trình

peroxyd hoâ lipid (POL) gia tăng lă bước chuyển dịch đầu tiín của câc quâ trình viím

- Tấn công văo ADN gđy đột biến gen tế băo lă nguyín nhđn phât sinh

Trang 14

gia tăng sẽ dẫn đến dấu hiệu tuổi giă

- Ngoăi ra, gốc tự do còn lăm suy giảm hệ thống miễn dịch, thoâi hoâ

võng mạc, đục thuỷ tính thể

Câc chất chống oxy hoâ (antioxydant) lă những chất có khả năng ngăn ngừa, chống lại, loại bỏ vă lăm giảm tâc dụng độc hại của câc gốc tự do [22]

[23]: Selen lă nguyín tố cấu thănh của hệ enzym Glutathion peroxydase (GSH

Px) có vai trò cực kỳ quan trọng trong hệ thống chống gốc tự do, chống oxy

hoâ của cơ thể Nó có mặt trong mọi tế băo để cùng câc enzym Superoxyd

dismustase (SOD), Catalase loai bo gĩc tu do, dac biĩt la phâ huy

Hydroperoxyd vă câc peroxyd lipid khâc của acid bĩo (LOO, LOOH ) bảo

vệ măng tế băo vă ADN [22], [26], [46] Cơ chế loại bỏ peroxyd có thể biểu

diễn theo sơ đồ sau;

HO, + 26SH GSH-Px(chứaS GSSG + 2H,0

(peroxyd Glutathion “ Glutathion

khâc) (cơ chất dang khử) (cơ chất dạng oxy hoâ)

(Glutathion reductase)

Ngoăi ra Selen còn tham gia văo thănh phần của nhiíu chất hoạt động

sinh học chứa nhóm -SH, -SeH như Selenomethionin Tính chất antIoxydamt

của §elen không chỉ do bản thđn câc hợp chất có sản của Sclen mă còn do Selen xúc tâc cho sự tổng hợp Co - enzym Q một chất chống oxy hoâ chủ yếu

của cơ thể [22] [23], [26], [27]

Như vậy, câc gốc tự do, câc chất chống oxy hoâ nói chung hay Selen nói

riíng liín quan chặt chẽ tới nhiều quâ trình bệnh lý Sự thiếu hụt Selen trong

cơ thể có thể dđn đến một trong câc hội chứng: giảm khả năng sinh trưởng,

giảm trương lực cơ, tổn thương thần kinh, suy giảm miễn dịch bệnh tim mạch

Trang 15

Selen vă bệnh tim mạch: Selen lă chất antioxydant, có thể hạn chế sự

oxy hoâ câc LDL cholesterol nín ngăn chặn quâ trình tạo câc mảng xơ vữa

động mạch - nguyín nhđn của cao huyết âp, thiếu mâu cục bộ ở cắc cơ quan, thiểu năng tuần hoăn nêo Nhiều tâc giả đê chứng minh rõ tâc dụng hạ huyết âp của Co - enzym Q, do đó Selen cũng có tâc dụng hạ huyết âp, Năm 1965,

Godwin vă công sự đê lăm thí nghiệm trín động vật vă phât hiện sự thiếu hụt

Selen vă vitamin E gđy nín câc tổn thương cơ tim vă mạch mâu Nếu bổ xung thím Selen trong khẩu phần ăn thì có thể phòng ngừa được câc bệnh năy Bệnh Keshan - một chứng bệnh về cơ tim do thiếu Selen gđy ra, được phât hiện đầu tiín ở những người Trung Quốc sống trín vùng đất ngheo Selen [26],

[30] [41]

Selen vă bệnh ung thư: Khi khẩu phần Selen cao, hăm lượng Selen trong

mắu cũng cao sẽ ức chế quâ trình sinh ung thư Câc nhă nghiín cứu cho rang chính Selen có tâc dụng chống oxy hoâ, trung hoă gốc tự do, do đó lăm tăng

chức năng hoạt động miễn dịch của tế băo Ngoăi ra Selen còn ngăn chặn sự

tưới mâu cho khối u Người dđn sống ở những vùng đất trồng có hăm lượng Selen cao thì tỷ lệ tử vong do nhiều loại ung thư thấp, đặc biệt lă ung thư phổi, trực trăng, thực quản, băng quang, tuy, tuyến tiền liệt, vú, buồng trứng, cổ tử

cung Như vậy Selen có vai trò quan trọng trong phòng chống ung thư [22],

[26], [30], [40], [41], [46]

Selen va quâ trình viím: Selen đê được chứng mình lă có tâc dụng chống viím do nó có thể lăm ổn định Lysosom vì măng Lysosom không nguyín vẹn lă nguyín nhđn của quâ trình viím Tâc dụng của Selen tăng nhiều

khi phối hợp cùng với vitamin E [22] [26] [30] [41]

Trang 16

giảm sút khả năng thực băo, giảm lượng vă hoạt tính của tế bao lympho T

Đặc biệt, Selen có một mối liín hệ chặt chẽ với HIV - nguyín nhđn gđy ra

bệnh AIDS Sự suy giảm lượng Selen trong cơ thể phản ânh tiến triển của

bệnh Một số nghiín cứu đê chi ra răng HIV có khả năng đồng hoâ Selen cua

người nhiễm bệnh thănh câc Selenoprotein của viru( Hăm lượng Selen trong

dinh dưỡng ảnh hưởng đến hệ thống miễn dịch của cơ thể con người vă hoạt

tính của virut Sự thiếu hụt Selen lăm cho nhiều loại virut lănh tính trở nín có

độc lực (ví dụ như virut Coxsackie B;) [22], [26] [30] [41]

Selen trong nhan khoa: Nhiều tâc gia đê nghiín cứu vă thấy rằng hăm

lượng Selen trong võng mạc cao hơn trong câc tổ chức khâc của cơ thể Người

ta cho rằng Selen tham gia văo phản ứng quang hoâ xảy ra ở võng mạc Tâc

dụng lăm sâng mắt của Selen lă do sự điều hoă quâ trình sinh câc gốc tự do

trung võng mạc Ngoăi ra, Selen còn đảm bảo sự toăn vẹn của thuỷ tình thể

Chỉ có Selen mới ngăn chạn được bệnh đục thuỷ tinh thể còn vitaminE, vitamin A, vitamin € hay câc chất khâc như Kalisulfat, Ethoxy quinon đều không ngăn chặn được bính năy [22], [26], [30], [41]

Selen vă sự lao hoâ: Câc hợp chất của Selen vă của Co - enzym Q cố khả năng chống oxy hoâ câc lipit ở măng tế băo, phđn huỷ câc peroxyd đê tạo thănh trong tế băo nín Selen đảm bảo sư ven toăn của tế băo lăm chậm quâ

trình lêo hoâ của từng tế băo vă kết quả lă lăm chậm quâ trình lêo hoâ của toăn cơ thể Như vậy, câc hợp chất của Selen cũng như Co - enzym Q, vitamin A, vitamin E, vitamin C lă câc chất chống oxy hoâ, trung hoă câc gốc tự do

sinh ra hăng ngăy, hạn chế tốn thương do gốc tự do gđy ra, do đó lăm chậm

quâ trình loê hoâ, kĩo đăi tuổi thọ của con người [22], [26] [30] [41]

Trang 17

vitamin E để ngăn chặn stress oxy hoâ [30], [41], [45]

Ngoăi ra, Selen còn có tâc dụng khử độc Nó có khả năng liín kết với câc kim loại năng như Thuỷ ngđn vă đăo thải câc kim loại nang ra nước tiểu Selen

cũng bảo vệ cơ thể khỏi tâc hại của Bạc, Đồng, Chì, Cadimi, Arsen, Platin

[22] [41]

1.1.4 Độc tính của Selen

1.1.4.1 Đối với động vật [10], [26]

Độc tính của Selen trín động vật đê được nhiều tâc giả nghiín cứu Độc

tính phụ thuộc văo liều lượng, thời gian dùng vă loại súc vật Có ba loại ngộ độc lă ngộ độc cấp tính bân trường điín vă trường điín

Ngộ độc cấp tính được phât hiện ở động vật ăn có có hăm lượng Selen

cao hơn I00mg/kg với câc biểu hiện như: khó thở, cử động bất thường ia chảy

vă chết Khi mổ ra thấy xuất huyết đường tiíu hoâ, gan, thận, băng quang

Nếu xúc vật ăn cỏ có hăm lượng Selen từ văi chục đến 100mg/kg trong thời gian từ văi tuần đến văi thâng sẽ xảy ra hiện tượng ngộ độc bân trường

diễn với câc biểu hiện như: giảm thị giâc, suy hô hấp vă chết

Còn nếu súc vật thường xuyín ăn cỏ có hăm lượng Selen từ 5 đến

IÔmg/kg thì bị ngộ độc trường diễn với câc triệu chứng như dị đạng, sút cđn,

ring lĩng Cach diy ñhất lăm mất tâc dụng độe của Seleñ lă đi chuyển động

vật ra khỏi vùng cố hăm lượng Selen cao 1.1.4.2 Đối với ean người [10], [26]

Không thấy có bâo câo về tâc hại nghiím trọng do ngộ độc Selen gđy ra

Chỉ thấy có những thông bâo về những dấu hiệu mơ hồ như chân ăn, suy dinh dưỡng, hỏng răng, mất mău da mất móng chđn, móng tay, phù dưới da

Trang 18

ee ee T=——: 7=

chưa có bằng chứng cụ thể

1.1.5 Nhu cầu Selen của con người

Nhu cầu Selen ở người được xâc định dựa văo chế độ ăn có hăm lượng

Selen cần thiết để tăng tối đa hoạt tính của hệ enzym GSH-Px Năm 1980, câc

nhă khoa học Mỹ lăm thí nghiệm trín động vật vă đê xâc định hăm lượng

Selen cần thiết trong chế độ ăn dinh dưỡng của người lớn lă 50 - 200kg/ngăy

Hiện nay, một số quốc gia đê đưa ra những con số khâc nhau về nhu cầu

Selen ở con người Ví dụ ở Australia được khuyến dùng với liều 85ug/ngay đối với nam trưởng thănh vă 70ug/ngăy đối với nữ trưởng thănh; Hội đồng liín bang Hoa Kỳ đê chấp nhận lượng Selen đưa văo cơ thể hăng ngăy lă 100g đối với nam giới vă 70Hg đối với nữ giới I0 - I5tg/ngăy đối với trẻ em

tuỳ theo độ tuổi Phụ nữ có thai vă cho con bú nín tăng hăm lượng Selen trong

1.2 CÂC DẠNG THUỐC CHỨA SELEN [10] [22] [23] [26] [28], [34] Với vai trò quan trọng trong quâ trình chống lại gốc tự do, Selen trở

thănh một trong những ngôi sao mới của nhu cầu bổ xung muối khoâng Hiện

nay, có năm hoạt chất đê được nghiín cứu cơ bản vă thừa nhận lă có hoạt tính

chống oxy hoâ điển hình dùng cho băo chế câc dạng thuốc Đó lă vitamin C,

vitamin E, caroten, proanthocyanidin vă Selen [6],

Vận dụng những thănh quả nghiín cứu về chất chống gốc tự do đê được

thử nghiệm trín người, câc nhă băo chế vă công nghệ dược ngăy nay đê chế tạo thănh công những viín thuốc chứa bốn loại hoạt chất quan trọng nhất:

vitamin C, vitamin E, caroten (hoặc vitamin A) va Selen [22], [27], [41]

Trín thị trường Việt nam hiện nay có rất nhiều chế phẩm chống oxy hoâ

chứa Selen, chủ yếu ở dạng viín nang mềm Trong câc chế phẩm năy, Selen

Trang 19

với hăm lượng phổ biến khoảng 50ug Selen trong một viín Một số chế phẩm chứa Selen ở dạng võ cơ

Bảng 1.1: Câc dạng thuốc chứa Selen

TỊ BIET DUOC TƯ CC DĂNG BẢO CHẾ THĂNH PHẦN

1 Prucell Viín nang mềm | Men khô có Se hữu cơ tương đương với 50g Selen Crom dĩng khĩ: 100mg | Vitamin C; 50mg 2 Belaf Viín nang mĩm | Men khô có Se hữu cơ tương đương với 50Hg Selen Vitamin C: 500mg Vitamin E: 400U1 B caroten: 15mg 3 Youngton Viín nang mềm Men khô có 5e hữu cơ tương đương với 30g Selen Vitamin C: 500mg Vitamin E: 400UI Vitamin A: 5000UI

4 | Cigelton Viín nang mềm | nt

5 | Keromax Viĩn nang mĩm | nt

6 | Binacle Viĩn nang mĩm | nt

7 | Saylom Viĩn nang mĩm | nt

8 | Geriton Viĩn nang mĩm | Selen hitu co tuong duong 70pg Se

Dich chiĩt nhan sam

Hôn hợp câc vitamin

9 | Ginsomin Viĩn nang mĩm Selen hitu co tuong duong 35ug Se

Trang 20

i6 | Lycored Viín nĩn Selen dioxyd: 70g

Vitamin A: SOOOUI

Vitamin E: 4000UI

17 | Centovit Viĩn nĩn Selen hữu cơ: 70 ug tinh theo Selen

women Câc Vitamin vă khoâng chat

18 | Centovit Viĩn nĩn Selen hữu cơ: 50 kịp tính theo Selen

active 7 Cac Vitamin va khoang chat

19 | Plenyl Viín sủi Na;Se (0.02mg tính theo Selen)

Câc vitamin vă khoâng chất:

20 | My Vita Viĩn sui Selen 25g

Cac vitamin: C, B,, B,, Bs Bs, B,,

PP, Biotin, acid folic

- Câc khoảng chat Zn, Cu

Trang 21

¡.3 TÌNH HÌNH NGHIÍN CỨU VỀ SELEN TRONG NƯỚC

Năm 1992, Đăng Hồng Thuý - Đô Thu Huyền - Từ Minh Koóng nghiín

cứu nuôi cấy được nấm men chứa 126 - 171g Selen trong Igam sinh khối

khô [15]

Năm 1997, Lí Thị Hương Giang (Trường Đại học Tổng hợp) nghiín cứu

xâc định Selen bằng phương phâp cực phổ xung vi phan va Volt - ampe hoa tan [11]

Năm 2000, trung tđm phđn tích khoâng sản : địa chất đê nghiín cứu va

ban hănh qui trình phđn tích: Xâc định hăm lượng Selen trong câc loai mau

đất đâ, quặng từ 10% đến 0,1% bằng phương phâp quang phố hấp thụ

nguyín tử - kỹ thuật hydrid hoâ

Năm 2001, Lí Thị Uyển Chi (Trường Đại học Dược Hă nội) nghiín cứu

tính chất chống oxy hóa của một số chế phẩm chứa nấm men giău Selen [9]

Năm 2002, Tiến sĩ Nguyín Quang Thường công bổ công trình nghiín cứu sản xuất nấm men giău Selen ở qui mô phòng thí nghiệm vă xđy dựng

phương phâp định lượng Selen trong nấm men bằng phương phâp quang phố

hap thu UV - VIS theo USP 24; Nhĩm nghiín cứu của Phđn viện Khoa học

Vật liệu tại Nha Trang sử dụng Ni(NO;); để nđng cao độ nhạy vă độ chính xâc

của phương phâp quang phổ hấp thụ nguyín tử không ngọn lửa trong phđn

tích Selen [19]

Theo hồ sơ tiíu chuẩn chất lượng của một số chế phẩm thuốc do Hăn

Quốc sản xuất đang lưu hănh trín thị trường nước ta, Selen được định lượng

bằng phương phâp quang phổ hấp thụ UV - VIS (âp dụng theo Dược điển Mỹ

24)

Đến nay, ở Việt Nam chưa có tăi liệu phâp qui năo níu phương phâp định

lượng Selen trong câc dạng thuốc chế phẩm đa thănh phần ở dạng vi lượng

1.4 CÂC PHƯƠNG PHÂP ĐỊNH LƯỢNG SELEN

Trang 22

Nguyín tắc: chuyển những hợp chất Selenat (SeO,”), Selenit (SeO,*) trong câc mẫu thử về Selen nguyín tố kết tủa đỏ bằng câc chất khử nhự: SO;, Fe**, Cu*; Thioure; thu lay tủa, rửa tủa, sấy khô rồi đem cđn khối lượng vă tính kết quả Có thể cho Selen tấc dụng với thuốc thử O-diamino thợm tạo phức Piazoselenol kết tủa, thu lấy tủa, rửa tủa, sấy khô, cđn vă tính kết quả|[4]

[7], [26]

(Phương phâp năy chỉ âp dụng cho câc mẫu có nông độ SeÌen lớn vă nín mâu đơn giản)

1.4.2 Phương phâp quang phổ hấp thụ UV - VIS,

Nguyín tắc: Selen(IV) phản ứng nhạy vă chọn lọc với O- điamino thơm,

tạo phức Piazoselenol tan trong câc dung môi hữu cơ Phức năy cố cực đại hấp

thụ rất đặc trưng, có thể đo quang để xâc định hăm lượng Selen Thuốc thử

3,3' diaminobenzidin vă 2,3-điaminonaphtalen lă phổ biến nhất [18], [26] [32], [49]

- Với 2,3-điaminonaphtalen:: Mẫu thử được vơ cơ hô băng hôn hợp “:; HNO; va HCIO,, pha loang dung dich v6 cơ hoâ bằng nước cất, thím văo đó dung dịch chứa Dinatri edetat vă Hydroxylamin hydroclorid, điều chỉnh pH

đến 1,1 + 0,1 bang dung dich NH,OH Sau do, thĩm duag dich 2,3-diamino

naphtalen rĩi dun cach thuy hon hop trĩn 6 50°€ trong 30 phtit Chiĩt bang

Cyciohexan, do quang 6 budĩc sĩng 380nm dĩ dinh iuong Seien [48]

Ue diĩm cia phucng phap năy lă phản ứng tạo phức nhạy, chọn lọc, âp

dụng dược với câc mđu có hăm lượng Selen thấp nhưng hạn chế lớn nhất lă phúc piazoselenol dễ bị phđn huỷ ngoăi ânh sâng, câc chất oxy hoâ mạnh ngăn cẩn phản ứng tạo phức, câc chất măn ảnh hưởng đến mật độ quang, do đó dđn dĩn kĩt qua định lượng thiếu chính xâc Như vậy, nếu âp dụng phương

phâp năy để định lượng câc dạng viín nang mềm, viín nĩn, viín súi bọt có

Trang 23

1.4.3 Phuong phap huynh quang

Nguyín tắc: Phitc Piazoselenol tao thanh gitta Selen (IV) va cac O-

diamino thom phat huỳnh quang ở bước sóng nhất định Do đó, có thể đo cường độ huỳnh quang để định lượng Selen [26], [48]

- Với 3-3' diaminobezidin: Se(IV) sẽ tạo phức Monopiazoselenol Trong dung môi hữu cơ, phức năy phât huỳnh quang ở bước sóng 580nm với bước

sóng kích thích lă 436nm [26]

- Với 2,3-điaminonaphralen: Se(IV) sĩ tạo phức Piazoselenol phât huỳnh

quang ở bước sóng 520nm, với bước sóng kích thích lă 380nm trong dung môi

lă n-hexan hoặc Cyclohexan [26 |, [4S]

(Phương phâp năy nhạy nhưng nếu trong chế phẩm chứa nhiều nguyín tố

vỉ lượng thì kết quả có thể bị ảnh hưởng)

1.4.4 Phương phâp cực phổ

Nguyín tắc: Đưa Selen trong mđu về Se(V) rồi đem đo trín thiết bị giọt

thuỷ ngắn với dung dịch điện ly nín lă acid Dưới thế 0 - 1000mV, Selen bi khử ở catod cho hai thế bân sóng Đo cường độ dòng khuyếch tân giới hạn tại

thế bân sóng thứ hai sẽ xâc định được nồng độ Selen trong dung dịch đo [I I],

[12], [26], [30], [47]

(Trong phương phâp năy, sự có mặt của một số nguyện tố vă câc thănh phần có irong chĩ pham anh hưởng đến việc lựa chọn dung dịch nền ),

1.4.5 Phương phâp kích hoạt phóng xa

Nguyín tắc: Selen được chuyển về câc đồng vị do bắn phâ mẫu bằng chùm

nơtron, sau đố đo câc cường độ bức xạ của đồng vị mới tạo thănh [20], [26]

[41]

Trang 24

phương phâp năy đòi hỏi phải có thiết bị phúc tạp vă phương tiện chóng

nhiễm xạ)

1.4.6 Phương phâp quang phổ phât xạ nguyín tử

Nguyín tắc: Selen được nguyín tử hoâ chuyển thănh câc nguyín tử tự

do ở dạng hơi Câc nguyín tử tự do ở trạng thâi cơ bản được kích thích bằng năng lượng của ânh sâng, ngọn lửa, lò tia lửa điện hồ quang sẽ chuyển sang

trạng thâi kích thích Ở trạng thâi kích thích, câc nguyín tử sẽ phât ra câc bức

xạ có bước sóng Ă'= 196,Inm Hăm lượng Selen trong mẫu tỷ lệ với cường độ bức xa vă tuđn theo định luật Lambert - Beer - Buger [42]

1.4.7 Phương phâp quang phố hấp thụ nguyín tử

Nguyín tắc: Selen được nguyín tử hoâ chuyển thănh câc nguyín tử tự do

ở đạng hơi sẽ hấp thụ chùm tia sâng có bước sóng Ă'= 196,lnm Hăm lượng Selen trong mẫu tỷ lệ với cường độ hấp thụ vă tuđn theo dinh luat Lambert -

Beer - Buger [19], [36], [31], [43] [35], [43], [44] [49], [50], [51]

(Phương phâp năy có thể định lượng Selen đến khoảng nồng dĩ 10° ugiml

vă có it thế đổi với những mău có nền phức tạp như câc dạng viín nang mến

có chứa hôn hợp câc chất chống oxy hoâ)

I.5 PHƯƠNG PHÂP QUANG PHỔ HẤP THỤ NGUYÍN TỬI2], [13] [17]

[24], [25] [37], [38], [39]

Sự phât hiện hiệu ứng hấp thụ nguyín tử được công bố lần đầu tiín văo năm

1802 khi Wollaston nhận thấy những vạch tối trong phổ ânh sâng mặt trời Năm 1961, người ta bắt đầu sản xuất hăng loạt phổ kế hấp thụ nguyín tử có

ứng dụng phđn tích Trong những năm gần đđy, phương phâp AAS đê được

ứng dụng khâ rộng rêi để xâc định kim loại trong câc mẫu quặng, đất, đâ, nước, câc mẫu của y học sinh học, câc sản phẩm công nghiệp, rau quả, thực

phẩm; câc nguyín tố vi lượng trong phđn bón, thức ăn gia súc [19], [26]

Trang 25

số công trình nghiín cứu, ứng dụng phương phâp năy để xâc định câc kim loại

trong được chất, tâ được, được liệu

Phương phâp quang phổ hấp thụ nguyín tử có độ chính xâc vă độ nhạy

cao nín chúng tôi sẽ ứng dụng phương phâp năy để xâc định hăm lượng Selen

trong chế phẩm thuốc viín nang mềm vă nguyín liệu nấm men

Trong điều kiện bình thường, nguyín tử không thu vă cũng không phât ra

-®.

năng lượng dưới dạng câc bức xạ Ổ trang thấi năy, nguyín tử bẩn vững vă

nghỉo năng lượng nhất được gọi lă trạng thâi cơ bản của nguyín tử Nhưng khi

nguyín tử đang tồn tại ở trạng thâi hơi tự do, nếu kích thích nó bằng một chùm tia bức xạ đơn sắc có năng lượng phù hợp, có độ đăi sóng trùng với câc

vạch phổ phât xạ đặc trưng của nguyín tố đó thì câc nguyín tử sẽ hấp thụ năng lượng của bức xạ chiếu văo nó vă chuyển lín trạng thâi kích thích có

năng lượng cao hon trạng thâi co ban, sinh ra một loại phổ của nguyện tử Quâ

trình năy gọi lă quâ trình hấp thụ năng lượng của nguyín tử tự do ở trạng thâi

hơi vă tạo ra phổ hấp thụ nguyín tử của nguyín tố đó

Sự giảm cường độ ânh sâng do nguyín tử hấp thụ cũng tuđn theo định

luat theo dinh luat Lambert - Beer - Buger:

D= log(I/J) = 2,303.Ky.L.N¢ (1.1)

Trong đó:

I,; Cuong độ chùm sâng tới;

[: Cường độ chùm sâng sau khi đi qua môi trường hấp thụ D: Cường độ hấp thụ của một vạch phổ

Ky: lă một hằng số, được gọi lă hệ số hấp thụ của mỗi vạch phổ L: Bề đăy của môi trường hấp thụ chứa nguyín tố cần phđn tích

ở trạng thâi hơi,

Trang 26

N, va nĩng dĩ € của nguyín tố phđn tích trong mđu cố mối quan hệ rất

phức tạp, một câch tổng quât mối quan hệ giữa N¿ vă C được xâc định theo

công thức: N= KC (1.2)

Trong đó: Ki lă hằng số thực nghiệm được xâc định bởi câc điều kiện hoâ,

hơi vă nguyín tử hoâ mẫu phđn tích Trong những điều kiện nhất định, Ki lă

hảng số, b lă hang số bản chất, được quyết định bởi môi loạt nguyín tử vă

Kết hợp biểu thức (1.1) vă (1.2) có: D= k,C° (1.3) Trong một điều kiện thực nghiệm thì k = const, nín biểu thức (3) sẽ lă:

D=aC' (1.4)

Đđy lă phương trình cơ sở của phĩp định lượng câc nguyín tố theo AAS

Đường biểu diễn phương trình năy có hai đoạn (hình j.T): Ạ “ ==— Ee D0 | ——- 8 # D,, AA Cx ¡bă i \/ ' ` Ore Cl C2 C3 C4 C5 C6 Nĩng do (ppm)

Hình 1.1 Mối quan hệ giữa độ hấp thụ vă nông độ dung dịch

- Với mọi nồng độ C, < C¿, quan hệ giữa D vă C lă tuyến tính, b = L

(đoạn AB)

- Với mọi nồng độ C -> CC, quan hệ giữa D vă C lă không tuyín tinh,

b< I (đoạn BC)

Cụ được goi lă nồng độ giới hạn trín của vùng tuyến tính AB, Trong phđn

Trang 27

hănh pha loêng dung dịch về nồng độ nằm trong khoảng tuyến tính AB 1.5.2 Câc quâ trình thực hiện trong phĩp đo AAS

Muốn thực hiện được phĩp đo phổ hấp thụ nguyín tử của một nguyín tố

cần phải thực hiện câc quâ trình sau:

1 Quâ trình hoâ hơi vă nguyín tử hoâ mẫu: chuyển mẫu phđn tích từ

trạng thâi ban đầu (rắn hay dung dịch) thănh trạng thâi hơi của câc nguyín tử

tự do Đâm hơi năy chính lă môi trường hấp thụ bức xa Số nguyín tử tự do trong trạng thâi hơi quyết định cường độ vạch phổ hấp thụ Đo đó, quâ trình nguyín tử hoâ mđu ảnh hưởng trực tiếp đến kết quả phđn tích một nguyín tổ Mục đích của nguyín tử hoâ mđu lă tạo ra được đâm hơi câc nguyín tử tự do

từ mẫu phđn tích với hiệu suất cao vă ổn định để phĩp đo đạt kết quả chính Xâc Vă độ lặp lai cao

Hiện nay người ta thường dùng hai kỹ thuật để nguyín tử hoâ mẫu phđn tích Đó lă:

- Kỹ thuật nguyín tử hoâ mẫu bằng ngọn lửa tương ứng có phĩp đo phổ

hấp thụ nguyín tử trong ngọn lửa (F - AAS)

- Kỹ thuật nguyín tử hô khơng ngọn lửa tương ứng có phĩp đo phổ hấp

thụ nguyín tử không ngọn lửa (ETA - AAS)

2 Chiếu chùm tỉa sâng bức xạ đặc trưng của nguyín tố cần phản tích qua

đâm hơi nguyín tử vừa điều chế được ở trín Câc nguyín tử của nguyín tố cần xâc định trong đâm hơi đố sẽ hấp thụ một phần năng lượng của tia bức xa

Phần năng lượng của bức xa bị hấp thụ phụ thuộc văo nồng độ của câc nguyền tử tự do trong môi trường hấp thụ

3 Thu toăn bộ chùm sâng bằng một hệ thống mây quang phổ, phđn ly vă

Trang 28

Trong một giới hạn nhất định của nồng độ C, giâ trị cường độ năy phụ thuộc

tuyến tính văo nồng độ C của nguyín tố trong mẫu phđn tích theo phương

trình (1.4)

1.5.3 Kỹ thuật nguyín tử hoâ mđu bằng ngọn lửa

1.5.3.1 Nguyín tắc:

Dùng năng lượng nhiệt của ngọn lửa đỉn khí khi đốt chây một hôn hợp

khí để hoâ hơi vă nguvín tử hoâ mđu phđn tích

1.5.3.2 Đặc điểm:

Kỹ thuật năy ra đời đầu tiín, có thể xâc định nhanh, chính xâc khoảng 65

nguyín tố với độ nhạy hăng ppm Độ nhạy của kỹ thuật năy kĩm kỹ thuật

nguyín tử hô khơng ngọn lửa nhưng lại có độ ổn định cao hơn

Trong phĩp đo F - AAS, mọi quâ trình xảy ra trong khi nguyín tử hoâ mđu phụ thuộc văo câc tính chất vă đặc trưng của ngọn lửa đỉn khí, chủ yếu lă nhiệt độ của ngọn lửa Nhiệt đô của ngon lửa lại phụ thuộc rất nhiều văo bản chat, thanh phan của chất khí được đốt chây vă tốc độ dẫn khí văo để tạo ra ngọn lửa Điều đó có nghĩa lă ứng với mỗi hỗn hợp khí chây sẽ cho ngọn lửa có nhiệt độ khâc nhau Thănh phần của hôn hợp khí chây thay đối thì nhiệt độ của ngọn lửa cũng bị thay đổi Nói chung, nhiệt độ của câc loại đỉn khí đều

không cao, nó chỉ trong vùng từ 1900- 3300, Hai loại hôn hợp khí đê vă

đang được sử dụng phổ biến trong phĩp đo E - AAS lă hỗn hợp của không khí

nĩn vă acetylen hoặc nitơoxIt vă acety len 1.5.3.3 Cac qua trinh xay ra trong ngon lửa:

Đđy lă một quâ trình động gồm nhiều quâ trình xảy ra liín tiếp đồng thời

với nhau Mẫu phần tích đê chuẩn bị ở trạng thâi dung dịch (ví du dang dung dịch muối Me,X-), được trộn đều với khí mang vă khí chây tạo thănh câc hạt

sol khí (thể aerosol) Sau đó, dẫn hỗn hợp aerosol cùng hỗn hợp khí đốt văo

Trang 29

Cac hat Me,X, bi nĩng chay 6 nhiĩt 46 cao chiiyĩa sang dang Me,X, long

Tiếp theo lă quâ trình hoâ hơi vă nguyín tử hoâ với hai cơ chế chính sau xảy ra:

Co chĩ I: Nĩu E; < E,; tức lă năng lượng hoâ hơi E, nhỏ hơn năng lượng

nguyín tử hoâ E; thì câc phđn tử Me,X„ sẽ hoâ hơi Sau đó câc phđn tử khí

năy sẽ bị phđn ly (nguyín tử hoâ) thănh câc nguyín tử tự do Câc nguyín tử

năy sẽ hấp thụ bức xa tạo ra pho AAS cua no

Me,X (lỏng) -> Me,X„(khí -> nMef(khí) + mX(khí) nMe(kh) + n(hv) -> pho AAS

Câc muối halogenid, acetat vă một số muối nitrat của câc kim loại

thường xảy ra theo cơ chế năy Cơ chế năy cho phĩp đo có độ nhạy va độ ổn

định cao

Cơ chế II: nếu E¡ > E„, câc phđn tử Me,X.; sẽ bị phđn ly thănh nguyín tử

Sau đó, câc nguyín tử mới hoâ hơi vă hấp thụ tia bức xạ để tạo ra phổ AAS

của nó

Me,X„(ỏng) -> nMe(ắn, lỏng) + mX(ắn, lỏng) -> nMce” (khí) nMe (khí) + n(hv) -> phổ AAS

Muối sulfat, phosphat vă silicat của câc kim loại thường xảy ra theo cơ chế năy Cơ chế năy cho phĩp đo có độ nhạy vă độ ổn định kĩm co chĩ I

Bín cạnh quâ trình chính như trín, trong ngọn lửa còn có câc quâ trình phụ lăm ảnh hưởng đến kết quả của phĩp đo như:

- Quâ trình ion hoâ của nguyín tố phđn tích lăm giảm số nguyín tử tự đo trong ngọn lửa, do đó lăm giảm cường độ của vạch hấp thụ

- Quâ trình hấp thụ của câc phđn tử ở trạng thâi hơi hoặc của câc hạt mđu ran chưa bị hoâ hơi trong ngọn lửa gđy nín sự hấp thụ giả

Trang 30

- Sit phat xạ eủa một số nguyín tử eố vạeh phât xa gần với vaeh phất xạ:: :: của nguyín tố phđn tích sẽ sinh ra phổ nền vă sự hấp thụ giả

1.5.4 Câc yếu tố ảnh hưởng

Câc yếu tố ảnh hưởng đến kết quả phđn tích trọng phĩp do AAS rat da

dạng vă phức tạp, có khi xuất hiện, cũng có khi không xuất hiện, có ảnh

hưởng hay không lă tuỳ thuộc văo thănh phần của mẫu vă nền của nó Xĩt một câch toăn diện có thể chia thănh sâu nhóm yếu tố,

Nhóm I: lă câc thông số của hệ mây đo phổ Câc thông số năy cần được khảo sât vă lựa chọn cho từng trường hợp cụ thể Thực hiện công việc năy

chính lă tối ưu hoâ câc thông số của mây cho một đối tượng phđn tích

Nhóm 2: lă câc điều kiện nguyín tử hoâ mẫu Câc yếu tố năy thể hiện rất

khâc nhau tuỳ thuộc văo kỹ thuật được lựa chọn để nguyín tử hoâ mđu Nhóm 3: lă câc ảnh hưởng về phố như sự hấp thụ nền, sự chen lấn của

vạch phổ vă sự hấp thụ của câc hạt rắn

Nhóm 4: lă câc kỹ thuật vă phương phâp xử lý mđu Đđy lă một công việc quan trọng có thể lăm mất hay nhiễm bẩn thím nguyín tổ phđn tích văo

mẫu gđy cho kết quả phđn tích không đúng với thực tế của mẫu

Nhóm §: lă câc yếu tố vật lý như độ nhớt vă sức căng bề mặt dung dịch mẫu thường thể hiện nhiều trong phĩp đo E - AAS, nhất lă khi mẫu phđn tích

có nồng độ lớn Câc yếu tố khâc như sự ion hoâ vă kích thích phổ phât xạ chỉ có ý nghĩa khi phđn tích phổ hấp thụ của kim loại kiềm vă kiềm thổ

Nhóm 6: lă câc yếu tố hoâ học như nồng độ acid vă loại acid trong dung

địch mẫu, ảnh hưởng của câc cation vă anion khâc nhau trong dung dich, anh hưởng của thănh phần nín vă ảnh hưởng của dung môi hữu cơ Trong nhiều trường hợp, một trong những ảnh hưởng năy lại được lợi dụng để lăm tăng độ nhạy của vạch phổ

Vì vậy, để kết quả chính xâc vă tin cậy đòi hỏi người phđn tích phải biết xử lý hóa học, tâch loại, lăm giău, che trânh câc yếu tố ảnh hưởng về mặt hoâ

Trang 31

1.6 PHƯƠNG PHÂP VÔ CƠ HOÂ MẪU [1], [3] [8]

Câc nguyín tố trong mẫu phđn tích thường ở dạng hợp chất hữu cơ hoặc

hợp chất vô cơ nhưng có lẫn câc tạp chất hữu cơ Việc xâc định chúng đòi hỏi phải phả huỷ hoăn toăn phần hữu cơ trong mau Cac chất hữu cơ rất phong

phú vă đa dạng Trước khi phđn tích, mẫu thường được xử lý bằng một trong

câc phương phâp sau: Vơ cơ hô khơ, vơ cơ hô ướt, vơ cơ hoâ trong lò vi

sóng vă lín men,

1.6.1 Phương phâp vơ cơ hô khơ

Nguyín tắc: Đốt chây câc chất hữu cơ cố trong mđu phđn tích để giải

phóng kim loại ra dưới dạng oxit hoặc muối của chúng bằng nhiệt Sau đó,

hoă tan cắn trong acid để tạo dung dịch

Phương phâp năy thực hiện đơn giản vô cơ hoâ được triệt để nhưng có

nhược điểm chính lă nhiệt độ tro hoâ cao (khoảng 500 - 600°C) nín lăm mất

câc nguyín tố dí bị bay hơi như: Ph, Zn, Ag, $c, As , thời gian xử lý mđu

kĩo đăi Người ta khâc phục bảng câch cho thím chất bảo vệ như Mg(NO:), hoặc KNO: vă chọn nhiệt độ thích hợp

1.6.2 Phương phâp vơ cơ hô ướt

Ngun tắc: Oxi hoâ chất hữu cơ bằng một acid hoặc một hỗn hợp acid có tính oxy hoâ mạnh thích hợp

Phương phâp năy rút ngăn được thời gian phđn tích so với phương phâp vô cơ hô khơ, bảo toăn được chất phđn tích (vì nhiệt độ vơ cơ hô khơng cao)

nhưng phải dùng một lượng acid lớn (thường gấp 3 đến Š lần mđu) Vi vậy, phương phâp năy đòi hỏi câc acid sử dụng phải có độ tỉnh khiết cao va chi thích hợp với những mẫu có khối lượng nhỏ

1.6.3 Phương phâp vô cơ hoâ mđu trong lò vi sóng

Trang 32

độ cao lăm tăng tốc độ vơ cơ hô (Thực chất đđy lă quâ trình vô eở hoâ tiết

thực hiện trong lò vi sóng)

Đđy lă phương phâp xử lý mẫu hiện đại nhất hiện nay, lăm giảm đâng kể

thời gian xử lý mẫu, không mất mẫu vă vơ cơ hô triệt để, có thể vô cơ hoâ nhiều mẫu cùng một đối tượng Có thể điều khiển quâ trình vô cơ hoâ từ xa

băng một mây vi tính do đó lăm tăng độ an toăn cho người sử dụng vă độ tin

cậy của hệ thống Tuy nhiín, phương phâp năy đồi hỏi thiết bị đât tiền mă nhiều cơ sở phđn tích không đủ điều kiện trang bị

1.6.4 Phương phâp lín men

Nguyín tâc: Hoă tan mẫu thănh dung địch huyền phù, thím men xúc tâc vă lín men ở nhiệt độ 37 - 40°C trong thời gian 7 - I0 ngăy, Trong thời gian lín men, câc chất hữu cơ bị phđn huỷ thănh khí CO;; acid, nước vă giải phóng

kim loại trong hợp chất hữu cơ dưới dạng cation trong dung dịch nước

Phương phâp lín men lă phương phâp vơ cơ hô mđu ím dịu, khơng cần

hô chất, không lăm mất nguyín tố cần phđn tích rất thích hợp cho việc phan huỷ câc mẫu đường, nước ngọt, nước giải khât, tình bột nhưng thời gian xử lý mẫu lđu vă phải chọn được loại men thích hợp

1.6.5 Tac nhđn vo co hoa [1], [38]

Khi xử lý mẫu bằng phương phâp vô cơ hoâ ướt vă trong lò vi sóng thì

việc lựa chọn câc tâc nhđn xi hoâ phải căn cứ văo khả năng, đặc tính oxy hoâ

của thuốc thử vă đối trợng mẫu

Acid Nitric (HNO,): 14 tac nhđn oxy hoâ mạnh dùng để oxy hoâ câc chất hữu cơ, được sử đụng rộng rêi để giải phóng câc nguyín tố từ câc cốt sinh học

vă thực vật Nhiệt độ sôi Tị= 120C

Acid sulfuric (H;SO,): c6 tinh oxy hod manh, T.=339°C, c6 kha nang

pha huy hoan toan hau hĩt cdc chat hitu co, cĩ thĩ phĩi hop vGi HNO?

Acid percloric (HCIO,): c6 tinh oxy hoâ mạnh, có thể ăn mòn câc kim

Trang 33

HCIO, gay 6 manh khi tiếp xúc với nguyín liệu hữu cơ vă chất vô co dĩ bi oxy hoâ nín phải oxy hoâ bằng HN(- trước khi sử dụng HCIO, T.=200°C

Ngoăi ra, acid hydrocloric, acid hydrofluoric, hydroperoxyd cung được dùng lăm tâc nhđn oxy hoâ

Trong nhiều trường hợp, phải sử dụng hỗn hợp câc acid để đạt được mục đích vơ cơ hô Câc hôn hợp acid hay được sử dụng: acid sulfuric - hydro peroxyd; acid nitric - hydroperoxyd; acid sulfuric - acid nitric: acid sulfuric - acid nitric - acid percloric; acid nitric - acid percloric; acid sulfuric - acid nitric - acid hydrocloric; acid sulfuric - acid nitric - acid hydrofluoric

1.6.6 Xử lý mđu để xâc định Selen trong một số đối tượng cụ thể

Khi định lượng Selen, ngoăi nhiệm vụ vơ cơ hô Selen dạng hữu cơ thănh

dạng vô cơ, một số kỹ thuật định lượng đòi hỏi Selen phải ở mức oxy hoâ nhất

định (Se*! hoặc Se*') Do đó, khi xử lý mẫu, ta phải lựa chọn được phương

phâp vă tâc nhđn vộ cơ hoâ thích hợp để thu được dạng Selen có mức oxy hoâ đâp ứng được yíu cầu của kỹ thuật định lượng Ví dụ định lượng bằng phương

phâp quang phổ thụ UV - VIS, phuong phâp cực phổ vă phương phâp F - AAS

với kỹ thuật hydrid hoâ thì ở giai đoạn cuối cùng Selen nhất thiết phải ở dạng

nể, [3Ù]

Mđu đất, đâ, trầm tích: Định lượng bằng phương phâp F - AAS với kỹ

thuật hycrid hoa, su dung phuong phap v6 co hoâ ướt theo quy trình sau:

0,15ø mđu + 9ml HNO, 65% + 0.25ml HCI 10%, để yín 3 giờ Thím

2ml HCIO, 2ml H,SO, 10ml HE, duy trì nhiệt độ 125” trong 12 giờ Sau đó, lăm lạnh, thím tiếp 25ml HCI 6N, để 6 giờ [36]

Có thể chiết Selen lẫn trong đất bằng câc dung dịch sau (xắp xếp theo thứ

tự giảm dđn của khả năng chiết): HNO, 2M > KH,PO, 1M > KH,PO, + K;HPO, 0,1M > KH;PO, 0,1M > EDTA (pH 7) > CH,COOH 0,43M [31] Hôn hợp KH;PO,- K;HPO, 0,1M (pH 7) thích hợp nhất với câc loại mẫu

Mđu than vă thực vật: Định lượng bằng phương phâp F : AAS với kỹ

Trang 34

0,1g¢ mẫu + 20ml! HNO,, 2ml H,SO,, để yín trong 12 giờ Thím tiếp 3ml HCIO,, duy trì nhiệt độ 175°C trong 30 phút Sau đó tiếp tục tăng nhiệt độ

đến khi xuất hiện khói trắng [36]

250mg mẫu hoă tan trong hôn hợp HNO;-HE đặc (tỷ lệ 1:2 V/V), bốc

hoi dĩn khĩ @ 50 - 60°C Hoa tan can trong 15ml dung dich HCl 5M, dun

nóng ở 100°C trong 15 phit dĩ khir Se*® thanh Se**; lam lạnh vă thím I5ml

cột lă thiolcotton, dung dịch rửa giải lă dung dich HC] 2,5M Dung dich thu được đem phđn tích bằng phương phâp ETA - AAS Phương phâp năy âp dụng

với hầu hết câc mẫu địa chất [43]

Mẫu nước vă địch chiết: Định lượng bằng phương phâp F - AAS với kỹ

thuật hoâ hơi trực tiếp, sử dụng phương phâp vơ cơ hô ướt theo qui trình sau;

10g dung dịch + Iml K;S;O,, để yín Igiờ Thím Iml HCI đặc, đậy kín,

đun đến [10°C va duy tri trong | gid Sau dĩ, mở nắp vă đun đến khi dung

dịch còn 3 - 5ml [36]

Nấm men chứa Selen: Định lượng bằng phương phâp quang phổ UV - VIS, sử dụng phương phâp vơ cơ hô khơ bằng câch đết mẫu trong bình

oxygen [49]

Mau duoc pham (dạng viín nang, viín nĩn, dung dịch chứa hỗn hợp

câc vitamin tan trong nước - dầu vă muối khoâng):

Định lượng bằng phương phâp E - ĂĂS§ kỹ thuật hô hơi trực tiếp, sử

dụng phương phâp vơ cơ hô ướt: mđu + HNO;, đun sôi nhẹ khoảng 15 phút,

lăm lạnh, cho tiếp HCIO,, tiếp tục đun đến khi xuất hiện khói trắng [49]

Định lượng bằng phương phâp quang phổ hấp thu UY - VIS, st dung phương phâp vô cơ hoâ ướt: mẫu + HNO;, đun sôi nhẹ khoảng 1Š phút, lăm

lạnh cho tiếp HCIO; tiếp tục đun đến khi xuất hiện khói trắng thím tiếp

HNO, rồi đun đến mất mău Thím dung dịch HCI 10% vă đun sôi trong 3

Trang 35

2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÍN CỨU

Mẫu 1 (M,): Viín nang mềm Cigelton

Công thức: (xem bảng 1.1.) Số kiểm soât: 00003

Nơi sản xuất: Công ty Dược phẩm Chon Kun Dang-Korea,

Mđu 2 (M,): Viín nang mềm Selenans Công thức: (xem bảng 1.1.)

Số kiểm soât: 020403

Nơi sản xuất: Công ty Dược phẩm Chung Gei - Korea

Mđu 3 (M;): Viín nang mĩm Prucell

Công thitc: (xem bang 1.1.)

Nơi sản xuất: Công ty Dược phẩm Green-Korea

Mau 4 (M,): Viĩn nang mĩm Galic - Se Công thức: (xem bảng 1.1.)

Số kiểm soât; OỌ]

Nơi sản xuất: Công ty cổ phần Dược phẩm Hă tđy-Việt nam Mau 5 (M.): Viĩn nang mem Belaf

Công thức: (xem bảng Ï.l.)

Nơi sản xuất: Công ty Dược phẩm SuDo - Korea

Mđu 6 (M,): Nguyín liíu nấm men Đức (hăm lượng 2000ug/g)

Mau do cĩng ty TNHH SPM = Việt nam cụng cấp

Mau 7: Nguyĩn liệu nấm mẹn Việt nam (hăm lượng L800ug/g)

Trang 36

2.2 THIẾT BỊ VĂ HOÂ CHẤT

2.2.1 Hoâ chất vă thuốc thủ

Do yíu cầu nghiím ngặt của phĩp đo AAS nín nước cất vă hoâ chất sử

dụng phải có độ tình khiết rất cao, loại superpure hay tính khiết phđn tích, đê

được kiểm tra nồng độ nguyín tố bằng phương phâp AAS trước khi dùng Câc hoâ chất vă dung môi sử dụng dĩ nghiín cứu đều của hang Merck

gồm: - Dung dich HNO, 65%

- Dung dich HCIO, 70%

- Dung dich HCI 37% - Dung dịch amoniac 25% - Cyelohexan

Nước cất được lăm sạch bang phương phâp trao đổi ion

Câc thuốc thử của BDH-Laboratory- England gồm:

- Natri ethylendiamino tetraacetat (Natri edetat - Na EDTA) không có Se

- Hydroxylamin hydroclorid - 2,3 diaminonaphtalen

Dung dịch chuẩn: dung dich Selen 1000,ig/m1 cla hang J.T.Baker-USA 2.2.2 Trang thiĩt bi va dung cu

Mây quang phổ hấp thụ nguyín tử Z-5000 của hêng Hittachi-Nhật bản có

hệ tạo hydrid HFS-3

Mây quang phổ UV-VIS - HP 8453

Mây đo pH Metrohm - Swiss

Cđn phđn tích AA-200 có độ chính xâc 0,lmg của Denver Instrument

Company

Hệ thống lọc nước trao đổi ion

Câc dụng cụ thuỷ tỉnh, nồi câch thuỷ, bếp điện,

Trang 37

2.3, PHUONG PHAP NGHIEN CUU

2.3.1 Phương phâp xử lý mđu: phương phâp vơ cơ hô ướt

2.3.2 Phương phâp định lượng

2.3.2.1.Định lượng Selen trong mẫu bằng phương phâp F - AAS

Nguyín tử hoâ bằng ngọn lửa đỉn khí với hai kỹ thuật hoâ hơi: hoâ hơi trực tiếp vă hydrid hoâ

Nguyín tắc của kỹ thuật hoâ hơi irực tiếp: Dùng năng lượng nhiệt của

ngọn lửa đỉn khí khi đốt chây một hỗn hợp khí để hoâ hơi mẫu phđn tích (mục 1.5.3.3) Đối với kỹ thuật năy, chỉ cần đưa Selen về dạng vô cơ hoă tan trong

dung dịch mă không cần quan tđm Selen ở mức oxy hoâ năo

Nguyín tắc của kỹ thuật hydrid hoâ: Câc nguyín tố như Asen, Selen vă

Antimon trong mẫu dạng dung dịch được chuyển sang dạng hợp chất hydrid thể khí nhờ phản ứng với Hydrogen mới sinh do Natriborohydrid (NaBH,)

hoặc Thiếc clorid (SnCIl,) tâc dụng với Acid hydrocloric Hợp chất hydrid năy

được thổi liín tục bằng khí Argon vôo trong buồng nguyín tử hoâ Dùng năng lượng nhiệt của ngọn lửa đỉn khí khi đốt chây một hỗn hợp khí để nguyín tử hoâ hợp chất hydrid đó, tạo ra câc nguyín tử tự do của nguyín tố phđn tích

cho phĩp đo phổ AAS

Phĩp đo phổ F - AAS với kỹ thuật hydrid hoâ chỉ xâc định được một số

nguyĩn tO nhu Se, As, Sb nhung co do nhay cao hon (co ng/ml) phep do F -

AAS với kỹ thuật hoâ hơi trực tiếp Trong phĩp đo năy, mây hấp thụ nguyễn tử

đòi hỏi phải có thím một bộ phận tạo hydrid Câc điều kiện để tạo ra hợp chất

hydrid lă vấn đề quan trọng nhất vă chỉ khi có được câc điều kiện năy thích

hợp nhất thì ta mới thu được kết quả tốt vă chính xâc Đối với Selen, sau khi

vô cơ hoâ phải ở dạng có mức oxy hoâ +4 (H;SeO-), sau đó mới bị khử thănh

H;Se vă nhiệt độ của ngọn lửa để nguyín tử hoâ lă 2000°C

Trang 38

2.3.3 Phương phâp xử lý vă đânh giâ kết quả

Câc số liệu thực nghiệm được xử lý bằng toân thống kí theo chỉ đđn của câc

tăi liệu [2] [14]

e Công thức tính khối lượng dầu thuốc trung bình trong viín (0):

M,-M,

H.-=———

H (2.5) n: số lượng viín thuốc

M:: tổng khối lượng của n viín thuốc (g)

M,: tổng khối lượng vỏ của n viín thuốc (g)

e Công thức tính hăm lượng Selen:

Bảng 2.2 Công thức tính hăm lượng Selen

Trang 39

C”: nồng độ Selen trong dung dịch đo (ng/ml)

C3 nồng độ dung dịch Selen chuan (ug/ml)

m: khĩi luong dau thudc trung binh trong viĩn (g)

m,: khĩi lượng mẫu phđn tich (g)

L: dĩ pha loang cia maui thie

A,,: độ hấp thụ của dung dịch Selen chuẩn Aø: độ hấp thụ của dung dịch Selen thử

e_ Giâ trị trung bình: še a gj Xi; (2.12) e Do lĩch chuan: (2.13) Ss e Độ lệch chuẩn tương đối: RSD(%) = =.100 (2.14) x Khoảng tin ca 6-478 (2.15)

@ oang tin cay: —ae = JN

e So sânh độ chính xâc của hai phương phâp:

Fịy = : ‹ ( Sa > 5a) (2.16)

E, tra bảng voi bac tu do Kx = nx- | va Kp'= ng - 1 ở mức tim cậy 95% nghĩa thống kí

F,, > Fi;: Hai phương phâp có độ chính xâc khâc nhau có ý nghĩa thống kí e So sânh hai giâ trị trung bình:

5 = i -1).87 +(n, -1)S? (2.17)

Trang 40

ny Ap

Nĩu tz; < ty ¢ĩ., thi hai gid tri trung bình khâc nhau khong co y nghia thong kĩ

với độ tin cậy P < 0.95

Định dạng
Số trang	87
Dung lượng	29,87 MB