các phương pháp định danh và định lượng trong HPLC

CAÙC PHÖÔNG PHAÙP ÑÒNH DANH ☯ SAÉC KYÙ NGUYEÂN THUÛY CHÆ LAØ PHÖÔNG PHAÙP TAÙCH, NOÙ KHOÂNG GIUÙP CHUÙNG TA NHAÄN DANH CUÏ THEÅ TÖØNG CHAÁT. ☯ TUY NHIEÂN KHI KEÁT NOÁI VÔÙI CAÙC ÑAÀU DOØ THÍCH HÔÏP NOÙ CHO PHEÙP CHUÙNG TA ÑO TÍN HIEÄU CUÛA MOÄT CHAÁT ÑI RA KHOÛI COÄT TAÙCH ☯THOÂNG QUA VIEÄC GHI NHAÄN TÍN HIEÄU GIUÙP CHUÙNG TA COÙ THEÅ NHAÄN DANH MOÄT HÔÏP CHAÁT NAØO ÑOÙ CAÙC PHÖÔNG PHAÙP ÑÒNH DANH ☯ NHÖ VAÄY VEÀ CAÊN BAÛN QUAÙ TRÌNH NHAÄN DANH CHUÛ YEÁU DÖÏA TREÂN 2 YEÁU TOÁ : ) THÔØI GIAN LÖU : DO MOÃI CHAÁT ÑEÀU COÙ TÖÔNG TAÙC KHAÙC NHAU GIÖÕA PHA TÓNH VAØ PHA ÑOÄNG NEÂN THÔØI GIAN LÖU CUÛA MOÃI HÔÏP CHAÁT SEÕ KHAÙC NHAU ÍT HAY NHIEÀU. ) ÑOÄ CHOÏN LOÏC CUÛA DETECTOR : COÙ NHÖÕNG LOAÏI DETECTOR ÍT CHOÏN LOÏC NHÖ FID, TCD NHÖNG CUÕNG COÙ NHÖÕNG DETECTOR COÙ ÑOÄ CHOÏN LOÏC CAO CHO NHÖÕNG NHOÙM CHAÁT NHAÁT ÑÒNH NHÖ FPD, ECD …. DÖÏA TREÂN TÍNH CHAÁT NAØY CHUÙNG TA COÙ THEÅ XAÙC ÑÒNH CHOÏN LOÏC VAØ CHÍNH XAÙC HÔN NHÖÕNG HÔÏP CHAÁT COÙ THÔØI GIAN LÖU TRUØNG NHAU

CÁC PHƯƠNG PHÁP

ĐỊNH DANH VÀ

ĐỊNH LƯỢNG TRONG SẮC KÝ KHÍ

TS NGUYỄN BÁ HOÀI ANH

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

☯SẮC KÝ NGUYÊN THỦY CHỈ LÀ PHƯƠNG PHÁP TÁCH, NÓ KHÔNG GIÚP CHÚNG TA NHẬN DANH CỤ THỂTỪNG CHẤT

☯TUY NHIÊN KHI KẾT NỐI VỚI CÁC ĐẦU DÒ THÍCH HỢP NÓ CHO PHÉP CHÚNG TA ĐO TÍN HIỆU CỦA MỘT CHẤT ĐI RA KHỎI CỘT TÁCH

☯THÔNG QUA VIỆC GHI NHẬN TÍN HIỆU GIÚP CHÚNG

TA CÓ THỂ NHẬN DANH MỘT HỢP CHẤT NÀO ĐÓ

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

☯NHƯ VẬY VỀ CĂN BẢN QUÁ TRÌNH NHẬN DANH CHỦ YẾU DỰA TRÊN 2 YẾU TỐ :

THỜI GIAN LƯU : DO MỖI CHẤT ĐỀU CÓ TƯƠNG TÁC KHÁC NHAU GIỮA PHA TĨNH VÀ PHA ĐỘNG NÊN THỜI GIAN LƯU CỦA MỖI HỢP CHẤT SẼ KHÁC NHAU ÍT HAY NHIỀU

ĐỘ CHỌN LỌC CỦA DETECTOR : CÓ NHỮNG LOẠI DETECTOR ÍT CHỌN LỌC NHƯ FID, TCD NHƯNG CŨNG CÓNHỮNG DETECTOR CÓ ĐỘ CHỌN LỌC CAO CHO NHỮNG NHÓM CHẤT NHẤT ĐỊNH NHƯ FPD, ECD … DỰA TRÊN TÍNH CHẤT NÀY CHÚNG TA CÓ THỂ XÁC ĐỊNH CHỌN LỌC VÀCHÍNH XÁC HƠN NHỮNG HỢP CHẤT CÓ THỜI GIAN LƯU TRÙNG NHAU

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

MỘT SỐ DETECTOR CÓ ĐỘ CHỌN LỌC RẤT CAO NHƯ AAS, ĐIỆN HÓA CHO PHÉP XÁC ĐỊNH RẤT CHỌN LỌC CÁC HỢP CHẤT NHƯ CÁC HỢP CHẤT ORGANO KIM LOẠI … NHƯNG LẠI BỊ GIỚI HẠN BỞI SỐ LƯỢNG CÁC HỢP CHẤT

CÁC DETECTOR CHO BIẾT CẤU TRÚC CỦA HỢP CHẤT NHƯ MS, NMR RẤT HỮU HIỆU TRONG VIỆC ĐỊNH DANH CŨNG NHƯ XÁC NHẬN LẠI CÁC HỢP CHẤT THƯỜNG CÁC DETECTOR NÀY CÓ ĐỘ CHÍNH XÁC CAO NHẤT TRONG VIỆC ĐỊNH DANH

TUY NHIÊN CÁC DETECTOR NÀY RẤT ĐẮT TIỀN VÀ CŨNG RẤT DỄ BỊ NHIỄM BẨN

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

ĐỂ ĐỊNH DANH VỚI CÁC ĐẦU DÒ THÔNG THƯỜNG TRƯỚC HẾT CẦN TÁCH HỢP CHẤT CẦN XÁC ĐỊNH RA KHỎI CÁC CHẤT KHÁC (DỰA VÀO THỜI GIAN LƯU)

SAU ĐÓ CẦN XÁC NHẬN LẠI THỜI GIAN LƯU VỚI CHẤT CHUẨN THỜI GIAN LƯU CỦA MẪU VÀ CHUẨN PHẢI GIỐNG NHAU KHI THAY ĐỔI:

-CHIỀU DÀI CỘT SẮC KÝ

-THÀNH PHẦN PHA TĨNH CỦA CỘT (TỪ RẤT PHÂN CỰC ĐẾN RẤT KHÔNG PHÂN CỰC)

-NẾU THÀNH PHẦN MẪU QUÁ PHỨC TẠP CẦN XÁC NHẬN LẠI BẰNG CÁC ĐẦU DÒ CHO BIẾT THÔNG TIN CẤU TRÚC NHƯ MS

TRƯỜNG HỢP SỬ DỤNG CÁC ĐẦU DÒ CÓ ĐỘ CHỌN LỌC CAO CÓTHỂ GIẢM THIỂU SAI SỐ DO ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT KHÁC

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

☯ VẤN ĐỀ THƯỜNG GẶP PHẢI TRONG VIỆC ĐỊNH DANH LÀCÁC HỢP CHẤT CÓ THỜI GIAN LƯU TRÙNG NHAU DẪN ĐẾN KHÔNG PHÂN BIỆT ĐƯỢC CÁC CHẤT

☯CÁCH GIẢI QUYẾT :

THAY ĐỔI CHƯƠNG TRÌNH CHẠY BAO GỒM:

- THAY ĐỔI CHƯƠNG TRÌNH NHIỆT ĐỘ : LÒ CỘT, INJECTOR

- THAY ĐỔI CHƯƠNG TRÌNH TỐC ĐỘ KHÍ : TỪ ĐẲNG DÒNG QUA CHƯƠNG TRÌNH HÓA TỐC ĐỘ DÒNG …

THAY ĐỔI CỘT :

- ĐỔI SANG CỘT CÓ KÍCH THƯỚC DÀI HƠN (CÙNG PHA TĨNH)

- ĐỔI SANG CỘT CÓ ĐỘ PHÂN CỰC KHÁC CỘT HIỆN DÙNG

- ĐỔI SANG CỘT CÓ CƠ CHẾ KHÁC (HẤP PHỤ …)

24.50 25.00 25.50 26.00 26.50 27.00 27.50 28.00 28.50 29.00 29.50 Time0

321.8936 6.30e8

THAY ĐỔI CỘT (TT) :

- NỐI HAI HOẶC NHIỀU CỘT CÓ ĐỘ PHÂN CỰC KHÁC NHAU ĐỂTĂNG KHẢ NĂNG TÁCH

XỬ LÝ MẪU TRƯỚC KHI PHÂN TÍCH :

- XỬ LÝ MẪU BẰNG PHƯƠNG PHÁP THÍCH HỢP ĐỂ LOẠI BỎCÁC TẠP CHẤT ẢNH HƯỞNG :

+ CHIẾT LỎNG LỎNG+ CHIẾT RẮN LỎNG (SPE)+ VI CHIẾT PHA RẮN (SMPE)

- DỰA VÀO TÍNH CHẤT HÓA LÝ CỦA CHẤT CẦN PHÂN TÍCH ĐỂTẠO DẪN XUẤT THÀNH NHỮNG HỢP CHẤT CÓ NHIỆT ĐỘ SÔI, ĐỘ PHÂN CỰC … KHÁC NHƯ SILAN HÓA, CHLOR HÓA …

Isothermal col ~ 0.8 m x 0.1mm x 0.1 μm

Temperatur programmed

col ~ 25m x 0.25mm x 0.25 μm

Moving Cold trap typ 4 Hz (ZOEX patented)

Conventional col

unpolar Fast short column polar

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

Components

in moving

cooled trap

Components released

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

KHI SỬ DỤNG ĐẦU DÒ MS ĐỂ ĐỊNH DANH CẦN LƯU Ý :

- MẶC DÙ ĐẦU DÒ CHO BIẾT CẤU TRÚC CỦA CHẤT NHƯNG NẾU CÓ HAI CHẤT TRỞ LÊN ĐI VÀO CÙNG LÚC THÌ KHÔNG THỂ SỬ DỤNG PHỔ CHUẨN ĐỂ SO SÁNH

- KHI NÀY PHẢI DỰA TRÊN CÁC PHÂN MẢNH ĐẶC TRƯNG ĐỂXÁC NHẬN LẠI CHẤT

-KHI ĐỊNH DANH CẦN SỬ DỤNG CHẾ ĐỘ FULL-SCAN ĐỂ CÓĐƯỢC THÔNG TIN ĐẦY ĐỦ HƠN VỀ CHẤT

-QUÁ TRÌNH XỬ LÝ MẪU ĐÓNG VAI TRÒ RẤT QUAN TRỌNG TRONG VIỆC THU ĐƯỢC PHỔ RÕ RÀNG VÀ GIÚP ĐỊNH DANH CHÍNH XÁC

-TRONG NHỮNG TRƯỜNG HỢP NGHI NGỜ CÓ THỂ DÙNG MSNHIỀU LẦN ĐỂ XÁC NHẬN LẠI

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

☯ VIỆC ĐỊNH DANH MỘT CHẤT TRÊN PHẦN MỀM ĐƯỢC THỰC HIỆN BẰNG CÁCH NHẬP THỜI GIAN LƯU CỦA CHẤT CHUẨN VÀO PHƯƠNG PHÁP CHẠY

☯THỜI GIAN LƯU NÀY CHỈ CÓ Ý NGHĨA VỚI MỘT ĐIỀU KIỆN CHẠY MẪU NHẤT ĐỊNH (CỘT, CHƯƠNG TRÌNH NHIỆT ĐỘ, TỐC ĐỘ DÒNG…) NẾU CÁC THÔNG SỐ CHẠY MẪU THAY ĐỔI SẼ DẪN ĐẾN NHẬN DANH SAI

☯CÁC THÔNG SỐ SỬ DỤNG ĐỂ NHẬN BIẾT 1 PEAK NHƯWIDTH, SLOPE … CŨNG ẢNH HƯỞNG ĐẾN VIỆC XÁC NHẬN TÍN HIỆU LÀ NHIỄU NỀN HAY LÀ PEAK

☯NGOÀI RA DO THỜI GIAN LƯU GIỮA CÁC LẦN CHẠY SẼ KHÁC NHAU CHÚT ÍT NÊN CŨNG CẦN THÔNG BÁO CHO CHƯƠNG TRÌNH XỬ LÝ VỀ KHOẢNG BIẾN ĐỘNG CHO PHÉP CỦA THỜI GIAN LƯU

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH DANH

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

☯CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CHÍNH TRONG SẮC KÝBAO GỒM :

PHƯƠNG PHÁP TÍNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÁC CHẤT (AREA NORMALIZATION) :

-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP TÍNH THÀNH PHẦN PHẦN TRĂM CỦA CÁC CHẤT HIỆN DIỆN TRONG MẪU, DỰA TRÊN TỈ LỆ DIỆN TÍCH CỦA CÁC CHẤT VỚI NHAU

-THƯỜNG SỬ DỤNG TRONG TÍNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CỦA CÁC MẪU RẤT NHIỀU THÀNH PHẦN NHƯ TINH DẦU, DỊCH CHIẾT THIÊN NHIÊN … VÀ KHÔNG CẦN BIẾT NỒNG ĐỘ CHÍNH XÁC CỦA MỖI CHẤT

-ƯU ĐIỂM LÀ DỄ SỬ DỤNG VÌ KHÔNG CẦN CHẤT CHUẨN NHƯNG ĐỘ CHÍNH XÁC KHÔNG CAO ÍT DÙNG TRONG PHÂN TÍCH ĐỊNH LƯỢNG

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP TÍNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÓ HIỆU CHUẨN (CORRECTED AREA NORMALIZATION) :

-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP BIẾN THỂ CỦA PHƯƠNG PHÁP TÍNH TỈLỆ PHẦN TRĂM CÁC CHẤT

-CHO PHÉP CHÚNG TA XÁC ĐỊNH TỈ LỆ PHẦN TRĂM CỦA MỘT NHÓM CHẤT QUAN TÂM

-PHẢI DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN CHO CÁC CHẤT QUAN TÂM NHƯNG ĐƠN VỊ CỦA NỒNG ĐỘ LÀ TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÁC CHẤT

-PHƯƠNG PHÁP HỮU HIỆU KHI CHỈ QUAN TÂM ĐẾN TỈ LỆ MỘT SỐ CHẤT NÀO ĐÓ NHƯ TỈ LỆ CÁC ĐỒNG PHÂN, CÁC HYDROCACBON GẦN GIỐNG NHAU

-TRONG THỰC TẾ HAY SỬ DỤNG TRONG DẦU KHÍ ĐỂ TÍNH THÀNH PHẦN % CỦA CÁC KHÍ ĐỐT NHƯ ETHAN, PROPAN, N-BUTAN, ISO-BUTAN …

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP NGOẠI CHUẨN (EXTERNAL STANDARD) :

-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP CHO PHÉP XÁC ĐỊNH CHÍNH XÁC NỒNG ĐỘ CỦA CHẤT QUAN TÂM

-ĐƠN VỊ CỦA NỒNG ĐỘ CÓ THỂ LÀ mg/L, ug/l, ppm, ppb …

-PHẢI LẬP ĐƯỜNG CHUẨN CHO CÁC CHẤT CẦN QUAN TÂM MỖI CHẤT CÓ 1 ĐƯỜNG CHUẨN RIÊNG (CHIỀU CAO HOẶC DIỆN TÍCH PEAK THEO NỒNG ĐỘ) VÀ KHÔNG LIÊN HỆ VỚI NHAU (KHÁC VỚI PHƯƠNG PHÁP TỈ LỆ PHẦN TRĂM CÓ HIỆU CHUẨN LÀ TỔNG THÀNH PHẦN % CỦA CÁC CHẤT QUAN TÂM SẼ PHẢI LÀ 100%)

-DO MỖI CHẤT CẦN MỘT ĐƯỜNG CHUẨN RIÊNG LẺ NÊN NẾU KHÔNG CÓ CHẤT CHUẨN CỦA CHẤT PHÂN TÍCH SẼ KHÔNG SỬDỤNG ĐƯỢC

-ĐỂ GIẢI QUYẾT KHÓ KHĂN NÀY NGƯỜI TA CŨNG CÓ THỂ SỬDỤNG NHỮNG CHẤT CÓ CẤU TRÚC VÀ TÍNH CHẤT RẤT GẦN VỚI TÍNH CHẤT CỦA CHẤT CẦN PHÂN TÍCH ĐỂ DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN THAY CHO CHẤT PHÂN TÍCH

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

VÍ DỤ VỀ SẮC KÝ ĐỒ VÀ ĐƯỜNG CHUẨN

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP NGOẠI CHUẨN (EXTERNAL STANDARD) (TT):

-NHƯỢC ĐIỂM CỦA PHƯƠNG PHÁP LÀ KHI TIÊM MẪU BẰNG TAY, THỂ TÍCH TIÊM MẪU GIỮA CÁC LẦN SẼ KHÁC NHAU NHIỀU

-THÔNG THƯỜNG GIỮA CÁC LẦN TIÊM MẪU BẰNG TAY, GIÁ TRỊ CÓ THỂ KHÁC NHAU TỪ VÀI CHỤC ĐẾN VÀI TRĂM %

-ĐIỀU NÀY LÀM CHO ĐƯỜNG CHUẨN TRỞ NÊN KHÔNG TUYẾN TÍNH, SAI SỐ CỦA KẾT QUẢ THU ĐƯỢC SẼ RẤT LỚN

-ĐỂ KHẮC PHỤC THÔNG THƯỜNG NGƯỜI TA SỬ DỤNG BỘ TIÊM MẪU TỰ ĐỘNG KHI DÙNG PHƯƠNG PHÁP NGOẠI CHUẨN

-SAI SỐ VỚI BỘ TIÊM MẪU TỰ ĐỘNG NHỎ HƠN 5% VÀ THƯỜNG TRONG KHOẢNG 2- 3%

-TUY NHIÊN KHÔNG PHẢI MÁY GC NÀO CŨNG ĐƯỢC TRANG BỊ BỘTIÊM MẪU TỰ ĐỘNG NÊN ĐỂ KHẮC PHỤC NHƯỢC ĐIỂM TRÊN, PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN ĐÃ ĐƯỢC ỨNG DỤNG

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN (INTERNAL STANDARD) :

-ĐÂY LÀ PHƯƠNG PHÁP CHO PHÉP XÁC ĐỊNH CHÍNH XÁC NỒNG ĐỘ CỦA CHẤT QUAN TÂM MÀ KHÔNG BỊ ẢNH HƯỞNG ĐÁNG KỂBỞI THỂ TÍCH MẪU GIỮA CÁC LẦN TIÊM

-ĐƠN VỊ CỦA NỒNG ĐỘ CÓ THỂ LÀ mg/L, ug/l, ppm, ppb …

-ĐỂ THỰC HIỆN CẦN TÌM MỘT CHẤT CÓ TÍNH CHẤT HÓA LÝ VÀCẤU TRÚC TƯƠNG TỰ VỚI CÁC CHẤT CẦN XÁC ĐỊNH, TRONG NHIỀU TRƯỜNG HỢP SỬ DỤNG ĐỒNG VỊ DETERIUM CỦA HYDRO THAY THẾ CHO CÁC NGUYÊN TỬ HYDRO TRONG PHÂN TỬ CHẤT CẦN XÁC ĐỊNH (KHI CẦN CÓ TÍNH CHẤT RẤT GẦN NHAU)

-CHẤT NÀY ĐƯỢC GỌI LÀ CHẤT NỘI CHUẨN VÀ ĐƯỢC THÊM VÀO TẤT CẢ CÁC DUNG DỊCH (MẪU, CHUẨN) VỚI NỒNG ĐỘ NHƯ NHAU.-KHI TIÊM MẪU VÀ DỰNG ĐƯỜNG CHUẨN NGƯỜI TA BIỂU DIỄN TỈLỆ DIỆN TÍCH (HOẶC CHIỀU CAO) CỦA CHẤT PHÂN TÍCH VỚI CHẤT NỘI CHUẨN THEO NỒNG ĐỘ C THAY VÌ BIỂU DIỄN TRỰC TIẾP DIỆN TÍCH HAY CHIỀU CAO CỦA CHẤT PHÂN TÍCH

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN (INTERNAL STANDARD) (TT) :

-TRONG MỖI DUNG DỊCH TỈ LỆ NỒNG ĐỘ GIỮA CHẤT PHÂN TÍCH VÀ NỘI CHUẨN LÀ HẰNG SỐ

-VÌ VẬY TỈ LỆ GIỮA CHIỀU CAO HAY DIỆN TÍCH PEAK CỦA 2 CHẤT NÀY Ở CÁC THỂ TÍCH KHÁC NHAU VẪN LÀ HẰNG SỐ

-ĐIỀU NÀY GIÚP KHI BƠM MẪU, THỂ TÍCH MẪU VÀO CỘT CÓ THỂKHÁC NHAU NHƯNG TỈ LỆ DIỆN TÍCH HOẶC CHIỀU CAO VẪN KHÔNG BỊ ẢNH HƯỞNG

-TRÊN THỰC TẾ KHI THỂ TÍCH THAY ĐỔI NHIỀU TỈ LỆ NÀY CŨNG THAY ĐỔI DÙ KHÔNG NHIỀU NÊN VIỆC BƠM MẪU LẶP LẠI CÀNG CAO CÀNG TỐT

-THỰC TẾ RẤT KHÓ TÌM RA CÁC CHẤT CÓ TÍNH CHẤT HOÀN TOÀN GIỒNG NHAU NÊN CÁC ĐỒNG ĐẲNG LIÊN TIẾP HOẶC ĐỒNG PHÂN HAY ĐƯỢC SỬ DỤNG

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN (INTERNAL STANDARD) (TT) :

-TRƯỜNG HỢP PHÂN TÍCH NHIỀU HỢP CHẤT CÓ TÍNH CHẤT KHÁC NHAU TRONG CÙNG MỘT LẦN TIÊM MẪU CÓ THỂ SỬ DỤNG NHIỀU CHẤT NỘI CHUẨN KHÁC NHAU

-DO CHẤT NỘI CHUẨN THƯỜNG CÓ NỒNG ĐỘ CỐ ĐỊNH NÊN TỈ LỆNỒNG ĐỘ TRONG DÃY CHUẨN TỪ DUNG DỊCH THẤP NHẤT ĐẾN CAO NHẤT CẦN TÍNH TOÁN LÀM SAO ĐỂ :

+ TỈ LỆ NỒNG ĐỘ GIỮA CHẤT XÁC ĐỊNH VÀ NỘI CHUẨN KHÔNG KHÁC NHAU QUÁ NHIỀU

+ TỈ LỆ NÀY VẪN NẰM TRONG KHOẢNG THAY ĐỔI TUYẾN TÍNH CỦA DIỆN TÍCH HOẶC CHIỀU CAO CỦA CHẤT PHÂN TÍCH VÀCHẤT NỘI CHUẨN THEO NỒNG ĐỘ

-ĐỂ NÂNG CAO ĐỘ ĐÚNG VÀ CHÍNH XÁC, NGAY CẢ KHI DÙNG PHƯƠNG PHÁP NỘI CHUẨN NGƯỜI TA VẪN CÓ KHUYNH HƯỚNG DÙNG BỘ TIÊM MẪU TỰ ĐỘNG

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN (STANDARD ADDITION) :

-TRONG THỰC TẾ NỀN CỦA MẪU RẤT PHỨC TẠP THÀNH PHẦN CỦA MẪU CÓ THỂ LÀM CHO TÍN HIỆU CỦA CÙNG NỒNG ĐỘ CHẤT SẼ LỚN HƠN HOẶC NHỎ HƠN ĐIỀU KIỆN CỦA DUNG DỊCH CHUẨN -ĐIỀU NÀY DẪN ĐẾN KẾT QUẢ PHÂN TÍCH CÓ THỂ KHÔNG ĐÚNG, VÀ RẤT KHÓ PHÁT HIỆN

-KHI TIẾN HÀNH XỬ LÝ MẪU, ĐỂ KIỂM TRA ĐỘ THU HỒI NGƯỜI TA THƯỜNG THÊM DUNG DỊCH CHUẨN VÀO MẪU TRƯỚC KHI XỬ LÝ(SPIKE)

-NẾU VIỆC XÁC ĐỊNH GẶP SAI SỐ SẼ DẪN ĐẾN ĐÁNH GIÁ SAI VỀQUI TRÌNH XỬ LÝ MẪU

-KHI QUI TRÌNH XỬ LÝ MẪU CÓ HIỆU SUẤT THU HỒI KHÔNG LỚN LẮM VIỆC XÁC ĐỊNH BẰNG ĐƯỜNG CHUẨN SẼ GÂY SAI SỐ LỚN

CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG

PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN (STANDARD ADDITION) (TT):

-ĐỂ KHẮC PHỤC NGƯỜI TA SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN -NGUYÊN TẮC CỦA PHƯƠNG PHÁP :

+ MẪU KHÔNG THÊM DUNG DỊCH CHUẨN (S1 – C THÊM = 0), VÀ ÍT NHẤT 2 MẪU (VÍ DỤ S2 VỚI C THÊM = 1, S3 VỚI C THÊM = 2) ĐÃ ĐƯỢC THÊM NHỮNG LƯỢNG CHÍNH XÁC, ĐÃ BIẾT TRƯỚC CỦA DUNG DỊCH CHUẨN ĐƯỢC ĐEM ĐI XỬ LÝ MẪU

+ QUI TRÌNH XỬ LÝ MẪU PHẢI THỰC HIỆN GIỐNG HỆT NHAU CHO CẢ 3 MẪU

+ SAU KHI ĐÃ XỬ LÝ, 3 MẪU ĐƯỢC TIÊM VÀO MÁY GC VÀTÍN HIỆU ĐƯỢC GHI NHẬN

+ LẬP ĐỒ THỊ CHUẨN VỚI TRỤC TUNG LÀ DIỆN TÍCH HOẶC CHIỀU CAO (NẾU DÙNG NỘI CHUẨN SẼ LÀ TỈ LỆ DIỆN TÍCH HOẶC

TỈ LỆ CHIỀU CAO) VÀ TRỤC HOÀNH LÀ C THÊM

STANDARD ADDITION METHOD

0 5000 10000 15000

PHƯƠNG PHÁP THÊM CHUẨN (STANDARD ADDITION) (TT):

+ SAU KHI CÓ PHƯƠNG TRÌNH ĐƯỜNG CHUẨN NGƯỜI TA TÍNH GIÁ TRỊ C THÊM TẠI ĐIỂM ĐƯỜNG CHUẨN CẮT TRỤC HOÀNH (TRỤC TUNG = 0), GỌI LÀ C XÁC ĐỊNH

+ GIÁ TRỊ NỒNG ĐỘ MẪU SẼ LÀ C MẪU = - C XÁC ĐỊNH (DO GIÁ TRỊ CỦA C XÁC ĐỊNH LÀ SỐ ÂM)

-BẰNG CÁCH NÀY CÓ THỂ LOẠI TRỪ DỄ DÀNG ẢNH HƯỞNG CỦA NỀN, CỦA QUÁ TRÌNH XỬ LÝ MẪU (HIỆU SUẤT THU HỒI KHÁC 100%)

-TUY NHIÊN NHƯỢC ĐIỂM LÀ MỖI MẪU PHẢI TIẾN HÀNH ÍT NHẤT

3 LẦN DO ĐÓ THỜI GIAN XÁC ĐỊNH SẼ LÂU, GIÁ THÀNH PHÂN TÍCH CAO