trichobakin và immunotoxin tái tổ hợp

[...]... để xác định và thu nhận một số dạng protein tự nhiên và tái tổ hợp có khả năng ứng dụng trong YDược" và giai đoạn 2003-2004 “Tạo và thử nghiệm độc tố miễn dịch tái tổ hợp trên các dòng tế bào ung thư “ Cuốn sách "Trichobakin và immunotoxin tái tổ hợp" được viết dưới dạng sách chuyên khảo, trình bày chủ yếu về các khái niệm, cách tiếp cận và tập hợp các kết quả thu được của các đề tài kể trên Sách có... Trung tâm Khoa học Tự nhiên và Công nghệ Quốc gia (nay là Viện KH&CN VN): (i) Triển khai Công nghệ Protein để xác định và thu nhận một số dạng protein tự nhiên và tái tổ hợp có khả năng ứng dụng trong Y - Dược (2001- 2002); (ii) Tạo và thử nghiệm độc tố miễn dịch tái tổ hợp trên các dòng tế bào ung thư (2003 - 2004), do PGS.TS Phan Văn Chi làm Chủ nhiệm vii LỜI NÓI ĐẦU Immunotoxin (ITs) được xác định... (G4S)3 với vùng biến đổi nhẹ (VL) lần lượt được dung hợp với PE38 Độc tố miễn dịch tái tổ hợp RFB4 (dsFv)-PE38 (BL22) chứa VI từ MAb RFB4 được liên kết bằng cầu disulfide tạo thành protein dung hợp của VH với PE38 Cầu nối disulfide nối VH và VL được hình thành giữa 2 gốc cysteine thay thế Arg44 của VH và VL và Gly100 của VL Đối với các độc tố tái tổ hợp chứa DT, chất gắn ở vị trí đầu carboxyl ít hơn... lai (ITs) và các vector tái tổ hợp biểu hiện chúng ở E coli Để có thể thử nghiệm và khẳng định các đặc tính của các ITs tái tổ hợp, cũng như tìm các dạng thiết kế tối ưu cho những phân tử protein lai kể trên cho mục đích tiêu diệt các tế bào ung thư, chúng tôi đã được Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam cho phép thực hiện đề tài nghiên cứu 20012002 "Triển khai Công nghệ Protein để xác định và thu nhận... vùng gắn urokinase và saporin (Fabbrini MS et al, 1997) và loại chứa yếu tố sinh trưởng tế bào sợi người và saporin (Tetzke TA et al, 1997) Đối với các phân tử này người ta vẫn còn chưa rõ: (i) độc tố tái tổ hợp đi vào trong cytosol của các tế bào đích một cách nguyên vẹn hay không?; (ii) chất gắn không bền sau khi xâm nhập vào tế bào, cho phép chỉ riêng vùng xúc tác chuyển vị trí vào cytosol? Người... chỉ chứa vùng A Toàn bộ Ricin chứa các nhóm carbohydrate và đa gốc hóa học trong cả hai chuỗi A và B được gắn vào gan và các mô bình thường khác Sự khử liên kết disulfide làm cho chuỗi A của Ricin vẫn có thể gắn vào các mô bình thường Các thông số để khử việc gắn mô bình thường là tạo RTA tái tổ hợp ở E coli (rRA), khử glycosyl hóa RTA (dgA) và carbohydrate được phong tỏa bằng phương pháp hóa học trong... trường hợp có hiệu lực mạnh hơn và dẫn đến cả các tổn thương không đặc hiệu hơn các hạt phóng xạ Các ví dụ minh họa là gemtuzumab ozogamicin, một dạng kết hợp giữa anti-CD33 MAb và calcheamicin (Nabhan C & Taliman MS, 2002) đối với leukemia cấp dòng tủy (acute myelogenous leukemia, AML) và auristan E monomethyl –anti CD30 kết hợp với cAC10-vcMMAE đối với bệnh Hodgkin (Hodgkin‘s disease, HD) và bệnh... được coi là có triển vọng nhằm tạo ra những sản phẩm là độc tố miễn dịch tái tổ hợp (recombinant immunotoxin) đặc hiệu phục vụ cho việc trị liệu không chỉ cho một số dạng ung thư mà còn cho một số bệnh tự miễn và AIDS Dựa trên các kết quả nghiên cứu và phân tích các trình tự gen mã hoá protein bất hoạt ribosome -Trichobakin (TBK) và các peptide hướng đích có nguồn gốc từ người, tập thể khoa học tại Phòng... RJ et al, 1992) Trong việc thiết kế một protein dung hợp chứa chuỗi A của Ricin người ta sử dụng 10 Phan Văn Chi, Nguyễn Bích Nhi interleukin-2 (IL-2) được dung hợp với chuỗi A của Ricin tái tổ hợp thông qua một đoạn liên kết (linker) bao gồm vị trí liên kết proteolytic đối với DT hoặc yếu tố Xa (Cook JP et al, 1993) Mặc dù phân tử độc tố tái tổ hợp có thể bị phân tách bên trong tế bào, nhưng nó chỉ... đến tế bào đích khi phần chất gắn và độc tố không còn gắn kết với nhau Tiếp đó, IL-2 đã được dung hợp với một dạng đột biến của PAP, nhưng độc tố dung hợp này không độc lắm đối với tế bào (Dore JM et al, 1997) Các chất gắn được dung hợp với các độc tố thực vật tạo các độc tố tái tổ hợp có hoạt tính gây độc tế bào tăng lên rõ rệt, gồm loại chứa kháng thể mạch đơn CD40 và bryodin I (Francisco JA et al, . trong Y- Dược" và giai đoạn 2003-2004 “Tạo và thử nghiệm độc tố miễn dịch tái tổ hợp trên các dòng tế bào ung thư “. Cuốn sách " ;Trichobakin và immunotoxin tái tổ hợp& quot; được viết. TRÌNH TỰ AMINO ACID VÀ ÁI LỰC CỦA TRICHOBAKIN TÁI TỔ HỢP VÀ CÁC DẪN XUẤT ĐỐI VỚI CM-SEPHAROSE 133 6.1. Mức độ biểu hiện của TBK và các dẫn xuất 133 6.2. Ái lực của Trichobakin và các dẫn xuất. TÁI TỔ HỢP-DẪN XUẤT TỪ TRICHOBAKIN (TBK) 103 5.1. Tạo độc tố miễn dịch tái tổ hợp trên cơ sở gen mã hóa cho protein bất hoạt ribosome (RIPs) 103 5.2. Tạo các độc tố miễn dịch tái tổ hợp