bước đầu nghiên cứu xác định sự sai khác di truyền trên gen mc1r quy định màu sắc lông trên một số cá thể dê thuộc các giống dê alpine, dê beetal, dê boer, dê jamnapari

Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 I. Mở đầu 1.1. Đặt vấn đề. Khoa học di truyền đạt được những đỉnh cao ngay từ đầu thế kỷ 21, thế kỷ của sinh học với những thành tựu nổi bật của sinh học phân tử đặc biệt là công nghệ gen. Nhờ các kỹ thuật di truyền phân tử: kỹ thuật tách ADN, kỹ thuật nhân gen PCR (Polymeraza Chain Reaction), kỹ thuật cắt gen RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms) và giải trình tự gen cho phép chúng ta tiến hành xác định một kiểu gen nào đó và gọi tên chính xác kiểu gen có liên quan đến tính trạng mà ta cần nghiên cứu ở mức phân tử. Các nhà khoa học đã chứng minh sự biểu hiện của các tính trạng là do gen quy định. Mỗi tính trạng có thể do một hoặc nhiều gen tác động và từ đó tạo nên tính đa dạng cho quần thể. Sự đa hình của các nucleotit hay chính là sự sai khác về trình tự các nucleotit làm nên sự đa dạng di truyền của mỗi gen. Melanocortin receptor 1 (MC1R) là một gen được biết đến với vai trò điều khiển màu lông ở động vật có vú. Trên thế giới đã có những công trình nghiên cứu về gen quy định màu lông ở động vật có vú bao gồm nghiên cứu trên trâu bò (Klungland và cs, 1995), trên ngựa (Marklund và cs, 1996), cáo (Vage và cs, 1997), gà (Takeuchi và cs, 1997) cũng đã có nghiên cứu về MC1R trên dê (Li và cs, 2002). Tại Việt Nam, việc nghiên cứu và ứng dụng các kỹ thuật di truyền phân tử vào trong chăn nuôi đã và đang được triển khai rộng rãi. Tuy nhiên công việc này chủ yếu thực hiện trên lợn, bò và gia cầm. Chăn nuôi dê ở Việt Nam ngày càng phát triển với cả các giống dê nội và ngoại nhập. Các giống dê nhập ngoại hiện đang nuôi ở nước ta có đặc điểm ưu việt về tính trạng sản xuất sữa, thịt hoặc cả hai. Màu lông của chúng thường đồng nhất. Bộ lông là biểu hiện bên ngoài của một con vật. 1 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 Bộ lông óng mượt và có màu sắc đặc trưng của giống chứng tỏ con vật đó sinh trưởng phát triển tốt. Thậm chí màu sắc lông còn tham gia trong quá trình chọn lọc giống và định hướng sử dụng giống vật nuôi. Bộ lông mà con vật sở hữu có thể là kết quả tổng hợp của nhiều yếu tố như dinh dưỡng, môi trường chăn nuôi, khả năng thích ứng với môi trường sống và một yếu tố được coi là nguồn gốc làm nên màu sắc bộ lông giúp chúng ta phân biệt giống này với giống khác chính là gen MC1R. Nhằm hướng tới đánh giá sự đa dạng di truyền trong quần thể vật nuôi nói chung, loài dê nói riêng đồng thời để có định hướng trong chọn lọc và sử dụng một số giống dê ngoại nhập có năng suất cao cũng như góp phần làm phong phú đa dạng quỹ gen vật nuôi trên ngân hàng gen thế giới, việc tìm hiểu về MC1R, xem xét mối tương quan của MC1R với màu lông của dê là cần thiết. Sử dụng các kỹ thuật di truyền phân tử chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: “Bước đầu nghiên cứu xác định sự sai khác di truyền trên gen MC1R quy định màu sắc lông trên một số cá thể dê thuộc các giống dê Alpine, dê Beetal, dê Boer, dê Jamnapari nuôi ở Trung tâm nghiên cứu dê và thỏ Sơn Tây- Hà Nội”. 1.2. Mục tiêu của đề tài • Tìm hiểu vể gen MC1R • Hiểu và thao tác các kỹ thuật di truyền phân tử: phương pháp tách chiết ADN, phương pháp nhân gen PCR, phương pháp giải trình tự. • Xác định vị trí sai khác trên gen MC1R quy định màu sắc lông ở một số cá thể dê nhập ngoại nuôi ở Trung tâm nghiên cứu dê và thỏ Sơn Tây- Hà Nội. 2 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 II. Tổng quan tài liệu 2.1. Khái niệm về gen Tính trạng nếu được truyền từ thế hệ này sang thế hệ kế tiếp theo một phương thức nhất định được gọi là tính trạng di truyền. Toàn bộ tính trạng biểu hiện bên ngoài mà ta có thể quan sát hoặc đo đếm được gọi là kiểu hình, còn toàn bộ yếu tố di truyền tạo nên kiểu hình được tiềm ẩn bên trong được gọi là kiểu gen. Tác động kiểu gen lên kiểu hình thường rất khác nhau có những tính trạng được kiểm soát đơn giản, nhưng cũng có tính trạng lại chịu tác động phức tạp. Khái niệm về gen như một đơn vị di truyền tách biệt được phát hiện nhờ phép phân tích lai của Mendel được W.Johansen đưa ra vào năm 1900. Theo Johannsen tính trạng của cơ thể được xác định bởi mầm mống đặc biệt, tách biệt và độc lập, nói ngắn gọn hơn bởi cái chúng ta gọi là “gen”. Quan niệm đó về gen tồn tại suốt cả giai đoạn phát triển của di truyền học kinh điển. Từ đó đến nay bản chất của gen là vấn đề trung tâm của di truyền học, luôn luôn phản ánh ở dạng cô đọng nhất mức độ phát triển, thành tựu và những vấn đề chưa được giải quyết của di truyền học. Trong khoảng thời gian đó không những người ta tìm ra cơ sở vật chất của gen mà chính bản thân gen là một đoạn của phân tử ADN đã trở thành đối tượng và phương tiện kỹ thuật di truyền và công nghệ sinh học. Người ta giải mã được cấu trúc sơ cấp của hàng ngàn gen, làm sáng tỏ những đặc điểm cơ bản và tính đa dạng trong cấu tạo của chúng ở các đối tượng khác nhau. Ngày nay chúng ta biết rằng “gen không phải là đơn vị tái tổ hợp mà là đơn vị cấu trúc của thông tin di truyền không thể phân nhỏ hơn nữa về phương diện chức năng”. 3 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 Gen hiện nay được hiểu theo nghĩa đơn giản là một đoạn của phân tử ADN mã hoá cho phân tử ARN chức năng. Một gen là một thực thể hoàn chỉnh và bền vững nhưng cũng có thể bị thay đổi trong trình tự nucleotit, thay đổi đó được gọi là đột biến. Gen sắp xếp theo trình tự nối tiếp nhau trong nhiễm sắc thể. Năm 1910 Morgan đã phát hiện ra gen nằm trong nhiễm sắc thể. Trong thực tế số lượng gen của một cơ thể lớn hơn rất nhiều số lượng nhiễm sắc thể có trong tế bào. Nhiễm sắc thể chứa một phân tử ADN dài liên tục bao gồm những vị trí đột biến trên phân tử ADN làm cho trình tự nucleotit thay đổi. Vậy một nhiễm sắc thể phải chứa nhiều gen. Các gen được xắp xếp và tương tác với nhau. 2.2. Cấu trúc ADN Ở phần lớn sinh vật, vật chất di truyền là chuỗi xoắn kép ADN. ADN có những đặc điểm sau: Một là bền vững, vì thông tin di truyền cần hoạt động chức năng trong khoảng thời gian 100 năm hoặc hơn nữa. Hai là ADN có khả năng sao chép, đảm bảo thông tin di truyền trong các tế bào mới sinh ra được duy trì trong các quá trình sinh trưởng và phát triển. Ba là, vật chất di truyền có khả năng bị biến đổi chút ít (đột biến) điều này tạo điều kiện cho quá trình tiến hoá. Axit nucleic là các heteropolymer cấu thành từ các monomer là các nucleotit. Các monomer lại được cấu thành từ 3 thành phần: đường, nhóm photphat và bazơ nitơ. Hai loại axit nucleic (ADN và ARN) có sự khác nhau trong hai thành phần đường của nucleotit: một loại có đường deoxyribonucleic nên gọi là axit deoxyribonucleic (ADN); còn một loại có đường ribonucleic vì vậy gọi là axit ribonucleic (ARN). Các thành phần đường - photphat của nucleotit có tầm quan 4 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 trọng đối với việc xác định đặc điểm cấu trúc của polynucleotit, còn các bazơ nitơ thì quy định thông tin chứa trong chúng. Các nucleotit có thể được nối với nhau bằng mối liên kết photphodieste, làm cho polynucleotit mang tính định hướng. Như vậy, đầu 5’ của một phân tử sẽ có nhóm photphat tự do, còn đầu 3’ sẽ có nhóm hydroxyl. Trong phân tử mạch kép của ADN chuỗi đường photphat được sắp xếp theo kiểu đối song song với 2 sợi có định hướng ngược chiều nhau. Các bazơ nitơ là những thành phần quan trọng của axit nucleic do chức năng mã hoá của chúng. Trong ADN, các bazơ đó là Adenin (A), Guanin(G), Cytosin (C) và Thymin (T). Trong ARN, Thymin (T) được thay thế thành Uracil (U) là bazơ có chức năng tương đồng. Về phương diện hoá học, Adenin và Guanin thuộc nhóm purin, chúng có cấu trúc mạch vòng kép, trong khi Cytosin, Thymin và Uracil thuộc nhóm pyrimidin, chúng có cấu trúc mạch vòng đơn, và bởi cấu trúc không gian của phân tử ADN do vậy sự bố trí duy nhất thoả mãn mọi điều kiện là sự kết cặp các bazơ theo kiểu purin đi với pyrimidin. Các bazơ được duy trì vị trí của mình bởi các mối liên kết hydro, có 2 mối liên kết như thế trong cặp bazơ A-T và có 3 mối liên kết như thế trong cặp bazơ G-C. Phân tử ADN trong cơ thể thường tồn tại ở dạng chuỗi xoắn kép phải gọi là dạng B. Đó là cấu trúc do Watson và Crick tìm ra vào năm 1953. 5 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 Hình 1: Sơ đồ chuỗi xoắn kép ADN 2.3. Cấu trúc của gen Thuật ngữ gen được dùng như một đoạn của thông tin di truyền được phiên mã sang một phân tử ARN đơn lẻ, và tiếp đó thông tin di truyền từ phân tử này được dịch mã sang một polypeptit nhất định. Các gen nằm trên các nhiễm sắc thể, và vị trí trên nhiễm sắc thể nơi một gen định vị được gọi là locus của gen đó. Ở các sinh vật lưỡng bội, các nhiễm sắc thể sắp xếp thành các cặp tương đồng. Trên cặp nhiễm sắc thể tương đồng tại các vị trí tương ứng tồn tại các dạng khác nhau cùa cùng một gen gọi là các alen. Phân tử ADN mạch kép có thể mang thông tin di truyền ở cả 2 6 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 sợi. Hiện nay có khá nhiều thuật ngữ dùng để chỉ 2 sợi của ADN mạch kép ví dụ như sợi có nghĩa/ sợi đối nghĩa, sợi cộng/ sợi trừ, sợi phiên mã/ sợi không phiên mã, sợi khuôn / sợi không làm khuôn. Tuy nhiên theo hướng dẫn của Liên đoàn hoá sinh quốc tế (IUB) và Liên đoàn quốc tế về hoá học cơ bản và ứng dụng (IUPAC) thì các thuật ngữ nên dùng là sợi mã hoá/ sợi không mã hoá. Các thuật ngữ sợi khuôn/ sợi không làm khuôn được sử dụng để mô tả các sợi ADN khi không cần nói đến chức năng mã hóa. Như vậy thông tin di truyền được biểu hiện phiên mã sợi không mã hoá của ADN tức là sản sinh ra phân tử mARN. Có một khởi điểm để bắt đầu quá trình phiên mã, nằm cạnh vị trí mà ADN-polymeraza bám vào, gọi là khởi điểm (promoter), đó là điểm đặc hiệu để bắt đầu quá trình phiên mã. Đoạn từ điểm bắt đầu T C đến điểm kết thúc t C đôi khi được gọi là đơn vị phiên mã, tức là đoạn ADN dùng để làm khuôn sao chép ARN . Bên trong đơn vị phiên mã có những điểm điều hoà dùng cho quá trình dịch mã gọi là điểm bắt đầu T L và kí hiệu dừng t L . Các đoạn khác tham gia vào điều khiển sự biểu hiện của gen có thể nằm ở phía ngược dòng hoặc xuôi dòng của gen. 2.4. Khái niệm mã di truyền Nhóm phân tử nucleotit chịu trách nhiệm mã hoá cho một axit amin gọi là mã di truyền. Xác định số lượng nucleotit của một mã là một vấn đề được nghiên cứu và nhiều khó khăn. Ngay thời gian đầu người ta có thể phán đoán, suy luận được số lượng nucleotit trong mã căn cứ vào số lượng amino axit tìm thấy trong tự nhiên. Giả thiết nếu cứ hai nucleotit tạo thành một mã để mã cho một axit amin thì cứ hai nucleotit tạo thành một mã để mã hóa một axit amin thì số mã sẽ bằng tổ hợp 2 của 4 nucleotit (4 2 =16). So với tổng số 20 axit amin khác nhau biết được hiện nay trong tự nhiên thì số mã thiếu sẽ là 4. Trong trường hợp chúng tổ hợp 3 nucleotit cho một mã, số lượng mã thu được là 4 3 = 64, nhiều hơn số axit amin trong tự nhiên. Dự 7 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 đoán này có thể được nhiều người ủng hộ hơn. Năm 1981 Sydney và Francis Crick đã nghiên cứu một số lượng lớn các dạng đột biến của thực khuẩn thể T4 tạo ra qua việc thêm vào hoặc bớt đi từng cặp bazơ và rút ra kết luận mỗi một mã di truyền chứa 3 nucleotit. Như vậy ta biết rằng trình tự các bazơ nitơ trên ADN quyết định trình tự các axit amin trên polypeptit tương ứng. Tất cả có 20 loại axit amin trong các protein, nhưng chỉ có 4 bazơ nitơ trong ADN như vậy nếu hai bazơ xác định một axit amin thì số axit amin chỉ là 4 2 =16, còn thiếu 4 axit amin chưa được xác định. Vậy tối thiểu phải 3 bazơ nitơ xác định một axit amin như thế số tổ hợp bộ ba có thể có của 4 bazơ nitơ là 4 3 = 64. Vậy nếu mã di truyền là mã bộ 3 sẽ xảy ra trường hợp nhiều bộ ba xác định một axit amin. Mãi tới năm 1966 mã di truyền mới được khẳng định một cách đầy đủ khi Gobind Khorana tìm cách thiết kế các mã qua việc sử dụng sao chép trùng lặp: GUGUGU, AAGAAG và GUUGUU. Ông đã có một số kết luận về mã di truyền sau đây: • Tất cả các mã chứa ba nucleotit kế tiếp nhau là mã di truyền. • Mỗi amino axit có thể được mã hoá bởi hai hay nhiều mã di truyền. Trong trường hợp này gọi là thoái hoá mã di truyền. Trong tất cả 64 tổ hợp của ba nucleotit có 61 tổ hợp được sử dụng cho các amino axit. Có 3 mã không được mã hoá cho bất kỳ một axit amin nào cả, đó là UAA, UAG, UGA. Chúng chịu trách nhiệm cung cấp tín hiệu ngừng hoặc chấm dứt quá trình tổng hợp protein. Mã AUG mã hoá Methionin và cũng là mã cung cấp tín hiệu khởi đầu cho quá trình tổng hợp protein. 8 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 2.5. Phiên mã di truyền Phiên mã thông tin di truyền từ ADN sang phân tử ARN là nhờ sự xúc tác của một hệ thống Enzym quan trọng nhất là ARN-polymeraza và Trancriptaza. Quá trình phiên mã diễn ra nhiều công đoạn. Trước hết là sự gắn ARN-polymeraza vào phân tử ADN. Vị trí để ARN-polymeraza tiếp xúc với ADN gọi là Promotor. Vùng Promotor này chứa khoảng 20 - 30 cặp nucleotit và có một đặc điểm dễ nhận biết là tỷ lệ bazơ A và T cao (có 16 - 20 nucleotit loại này). Trên một đoạn gen bất kỳ thường bắt đầu bằng vùng khởi động rồi tiếp đến vùng điều khiển tiếp theo là vùng exon (vùng chưa mã hoá) và vùng intron (vùng không chứa mã di truyền) xen kẽ nhau. Sau khi ARN-polymeraza gắn xong, quá trình phiên mã diễn ra ở một trong hai chuỗi polynucleotit của ADN. Đồng thời men ADN-polymeraza hoạt động khôi phục tổng hợp lại phân tử ADN sau khi đã làm khuôn mẫu cho việc tổng hợp ARN. Trong quá trình tổng hợp ARN, ngoài sự tham gia của hệ thống enzym kể trên còn có các phân tử cao năng như ATP, GTP. Sự tổng hợp ARN được ARN-polymeraza dẫn dắt theo dọc chuỗi ADN, ARN- polymeraza kéo dài đến hai đầu chuỗi ADN tách ra. Sau khi ARN được tổng hợp, chúng lại khép lại ARN-polymeraza kéo trên băng ADN từ vị trí 3 ’ - 5 ’ và mARN được hình thành theo hướng ngược lại từ 5 ’ - 3 ’ . 2.6. Kỹ thuật PCR (Polymeraza Chain Reaction) 2.6.1. Khái niệm về PCR Công nghệ nhân gen PCR còn gọi là phản ứng PCR (Polymeraza Chain Reaction) là phản ứng chuỗi trùng hợp hay còn gọi là quá trình nhân gen, quá trình nhân ADN đặc hiệu do Kary Mulis phát minh vào giữa những năm 1980 (James và 9 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 cộng sự, 1993). Kỹ thuật này được xem là một trong những kỹ thuật quan trọng nhất trong việc nghiên cứu và phân tích gen. PCR là kỹ thuật invitro cho phép nhân một vùng ADN đặc biệt nằm giữa hai vùng sinh trình tự đã biết tạo ra một số lượng lớn bản sao của đoạn ADN cần lựa chọn mà không cần tách dòng và nhân dòng. Kỹ thuật PCR sử dụng các đặc điểm của quá trình sinh tổng hợp ADN. Hiện nay người ta dùng phương pháp PCR để có thể nhân bất kỳ đoạn gen trong cơ thể sinh vật, chỉ cần sử dụng hai đoạn nucleotit ở đầu 5 ’ - 3 ’ nếu gen đó đã biết trước được trình tự sắp xếp các nucleotit của nó, hoặc có thể dùng một đoạn mồi bất kỳ để nhân ngẫu nhiên bất kỳ một gen. Sau đó phân tách bằng điện di trên gel thạch rồi thanh lọc để sử dụng. Tóm lại PCR là một kỹ nghệ nhằm nhân bản phân tử ADN hoặc đoạn ADN nhất định lặp đi lặp lại qua nhiều chu kỳ trong ống nghiệm đến khi thu được một số lượng ADN mong muốn. 2.6.2. Nguyên lý kỹ thuật nhân gen PCR Phương pháp PCR cho phép khuếch đại một số lượng bản sao của gen (hay một đoạn ADN) trong thời gian ngắn. Nguyên tắc của phản ứng: Sử dụng enzyme ARN-polymeraza chịu nhiệt để tổng hợp trong ống nghiệm các đoạn ADN mới từ mạch khuôn trong môi trường có các deoxyribonucleotit triphotphat (dNTPs) và các cặp mồi đặc hiệu. Các đoạn ADN mới được hình thành lại được sử dụng làm khuôn. Sau nhiều chu kỳ, số lượng đoạn ADN khuôn được nhân lên gấp bội, nhờ vậy có thể đủ số lượng phục vụ cho những mục đích nghiên cứu tiếp theo. 10 [...]... truyền phân tử trên dê chưa được nghiên cứu nhiều đặc biệt là sử dụng các kỹ thuật di truyền phân tử trong nghiên cứu về gen quy định màu sắc lông (MC1R) trên dê Trên thế giới: Các nhà khoa học trên thế giới đã và đang tiếp tục nghiên cứu về MC1R ở động vật có vú Ở trên lợn nghiên cứu về màu sắc lông chỉ ra một chuỗi 3 alen tại locus E đã được củng cố tốt ở trên lợn nơi E (đối với màu lông đen đồng nhất)... trình tự phân tích các mẫu máu của các giống dê: dê Alpine, dê Beetal, dê Boer, dê Jamnapari nuôi tại Trung tâm nghiên cứu dê và thỏ Sơn Tây • Giải trình tự và so sánh với trình tự đã công bố trên ngân hàng gen thế giới NCBI (http://www.ebi.ac.uk/) để tìm ra các điểm sai khác trên gen quy định màu lông của 7 mẫu nghiên cứu 3.2.2 Phương pháp nghiên cứu 3.2.2.1 Phương pháp lấy mẫu máu của dê Mẫu máu được... Hồng Hạnh CNTYA - K50 III VẬT LIỆU PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Đối tượng, vật liệu, thời gian và địa điểm nghiên cứu 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu: • Gen MC1R của dê 3.1.2 Vật liệu nghiên cứu Mẫu máu của các giống dê: • Dê Alpine • Dê Beetal • Dê Boer • Dê Jampanari Mỗi giống dê lấy 20 mẫu máu của 20 cá thể dê Các cá thể này đều được nuôi ở Trung tâm nghiên cứu dê và thỏ Sơn Tây - thị xã Sơn Tây - Hà Nội... 2.8 Vai trò của màu lông ở động vật Màu lông là một trong những biểu hiện kiểu hình có thể quan sát dễ dàng ở các loài vật Màu lông của các loài khác nhau là khác nhau, thậm chí trong cùng một giống cũng có sự sai khác nhất định Sự sai khác này làm nên sự phong phú trong màu sắc các loài động vật Màu sắc lông còn có vai trò như dấu hiệu của tiến hóa Động vật có màu lông như hiện nay một phần là kết... 2000) Gen MC1R quy định sự hình thành chuỗi protein MC1R gồm 317 axitamin Dưới đây là hình ảnh chuỗi protein MC1R ở một số loài động vật Hình 3: Sơ đồ chuỗi protein MC1R ở một số loài động vật 20 Khoá luận tốt nghiệp Nguyễn Thị Hồng Hạnh CNTYA - K50 Tại các vị trí có các màu tô đậm khác nhau là vị trí có sự sai khác nhau trong cấu trúc gen MC1R ở các loài khác nhau Tuy nhiên, các đa hình trên MC1R. .. từ các nước khác về Chăn nuôi dê hiện nay không những theo hướng lấy thịt hoặc sữa mà còn để lấy lông Dê có một bộ lông tơ mịn bao phủ khắp thân Bộ lông có thể chỉ có một màu hoặc nhiều màu, thường là màu đen, xám, trắng, nâu Lông dê dài ngắn tùy theo loài và tùy theo các khu vực địa lý khác nhau mà chúng sống, ví dụ như những loài dê sống ở vùng nóng thì lông ngắn và thưa, còn những loài dê sống... thấy sự biến đổi sắc tố di n ra trực tiếp trong kén khi lông phát triển Hiểu rõ sự biến đổi cơ chế hình thành màu sắc giữa các loài có thể là chìa khóa để hoàn chỉnh quá trình tiến hóa khác nhau bao gồm tín hiệu màu sắc Trong chăn nuôi màu sắc lông có vai trò rất lớn Đó là tính trạng rất quan trọng được sử dụng trong chọn giống Ở gà, các giống gà siêu thịt thường có lông màu trắng, các giống gà đẻ trứng... với màu lông đỏ đồng nhất) (Olliver và cs, 1982) Các nghiên cứu về sự sai khác di truyền của gen MC1R ở trên chuột đã chỉ ra ở cả hai alen trội và lặn đều xuất hiện đột biến và thể hiện chức năng Alen quy định màu lông vàng (e) ở chuột mã hóa cho thụ thể không chức năng liên quan đến đột biến dẫn đến việc loại bỏ quá trình tổng hợp eumelanin Ngược lại alen trội (E) gây ra một dãy các kiểu hình lông màu. .. trên MC1R ở dê hiện vẫn chưa được công bố trên ngân hàng gen (Genbank) Với mục đích tìm ra mối liên quan giữa gen MC1R với màu lông trên dê, việc phân tích đa hình trên MC1R được tiến hành Sự đa dạng màu sắc đặc biệt phong phú ở động vật nuôi, trong cùng loài cũng như khác loài Đặc điểm này được ứng dụng trong các nghiên cứu cơ bản về sắc tố và mối liên quan giữa kiểu hình và kiểu gen trên mô hình... nghiên cứu trong và ngoài nước về gen MC1R Ở nước ta đã có nhiều công trình nghiên cứu về các đặc điểm sinh học, khả năng thích nghi, nghiên cứu khả năng sản xuất, chế độ dinh dưỡng thích hợp trong khẩu phần ăn của các loài vật nuôi trong đó có dê Di truyền phân tử trong chăn nuôi cũng đã được nghiên cứu và có những thành tựu đáng ghi nhận Tuy vậy việc sử dụng các kỹ thuật của di truyền phân tử trên . hiện đề tài: Bước đầu nghiên cứu xác định sự sai khác di truyền trên gen MC1R quy định màu sắc lông trên một số cá thể dê thuộc các giống dê Alpine, dê Beetal, dê Boer, dê Jamnapari nuôi. nhất định. Các gen nằm trên các nhiễm sắc thể, và vị trí trên nhiễm sắc thể nơi một gen định vị được gọi là locus của gen đó. Ở các sinh vật lưỡng bội, các nhiễm sắc thể sắp xếp thành các cặp. PCR, phương pháp giải trình tự. • Xác định vị trí sai khác trên gen MC1R quy định màu sắc lông ở một số cá thể dê nhập ngoại nuôi ở Trung tâm nghiên cứu dê và thỏ Sơn Tây- Hà Nội. 2 Khoá