Độc tố trên động vật nhuyễn thể

Sự nở hoa bùng phát của tảo -> dòng tảo phù du có chất độc -> tích tụ trong các loài nhuyễn thể thông quá quá trình lọc thức ăn hút nước-ngậm- ép nuớc ra -> gây ngộ độc thực phẩm cho co

BÁO CÁO CHUYÊN ĐỀ VỆ SINH AN TOÀN

THỰC PHẨM

1

CÁC LOẠI ĐỘC TỐ HIỆN DIỆN TRONG ĐỘNG VẬT

NHUYỄN THỂ

Giảng viên hướng dẫn Nhóm học viên thực hiện PGS.TS Nguyễn Ngọc Tuân Ngô Đức Vũ

Nguyễn Thị Thi Đặng Quỳnh Như Lớp cao học thú y 2013

vong

Hiện tượng “ thủy triều đỏ ”.

Sự nở hoa bùng phát của tảo -> dòng tảo phù du

có chất độc -> tích tụ trong các loài nhuyễn thể thông quá quá trình lọc thức ăn (hút nước-ngậm-

ép nuớc ra) -> gây ngộ độc thực phẩm cho con người

Hiện tượng tảo “nở hoa” sẽ tạo ra các vùng nước màu nâu, cam, tím, vàng hay đỏ

TỔNG QUAN VỀ LOÀI NHUYỄN THỂ

120 200-3.000m dưới

đáy biển

Aplacophora (Không vỏ) Những loài thân mềm dạng giun 200

200-3.000m dưới đáy biển

Polyplacophora (Nhiều tấm vỏ) Ốc song kinh (chitons) 1.000

vùng đá thuỷ triều

và đáy biển Monoplacophora

(Vỏ một tấm) Dạng ốc nón (limpet-like) 31

1.800-7.000m dưới đáy biển.

Gastropoda (Chân bụng)

Bào ngư, ốc nón, ốc xà cừ, sên biển, thỏ biển, bướm biển, ốc sên, ốc nước ngọt, sên trần 70.000

biển,nước ngọt, trên cạn

Cephalopoda (Chân đầu) Mực ống, bạch tuộc, mực nang, ốc anh vũ 900 biểnBivalvia

(Vỏ 2 tấm) Hến, hàu, sò, trai 20.000 biển, nước ngọt

Rostroconchia Hoá thạch; dạng vỏ 2 tấm đã tuyệt chủng biển

Helcionelloida Hoá thạch; dạng ốc (snail-like) đã tuyệt chủng biển

TỔNG QUAN VỀ LOÀI NHUYỄN THỂ

7

 Ước tính số loài còn sống đã miêu tả được chấp nhận trong nhóm động vật thân mềm dao động từ 50.000 đến tối đa 120.000 Năm 2009, Chapman ước tính số loài còn sinh tồn đã được miêu tả là 85.000 Nhuyễn thể là nhóm xếp thứ 2 sau arthropoda (chân khớp) về số lượng loài còn sinh tồn.

Bigfin reef squid (Sepioteuthis

lessoniana)

Phân loại khoa học

Giới (regnum) Animalia

Ngành (phylum) Mollusca

Lớp (class) Cephalopoda

"Acephala“

Phân loại khoa học

Giới (regnum) Animalia

Ngành (phylum) Mollusca

Lớp (class) Bivalvia

Linnaeus , 1

ASP (amnesic shellfish poisoning).

Loại độc tố: acid domoic-> gây đãng trí

Triệu chứng ngộ độc: ban đầu rối lọan tiêu hóa khỏang 3-5 giờ -> giai đọan cấp tính với những triệu chứng dữ dội: bệnh nhân đau đớn, mặt nhăn nhó, càu nhàu, ảo giác, mất trí nhớ tạm thời và hô hấp trở nên khó khăn, có thể tử vong do liệt hô hấp

11

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

Các loài tảo Vùng địa lý Loài nhuyễn thể chịu

ảnh hưởng Pseudo-nitzschia

pungens

Vịnh Maine, Washington,

Massachusetts

Con trai, sò, điệp

Pseudo-nitzschia australis

Washington, Oregon Con trai Bắc Mỹ,

cua Dungeness

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

12

DSP (Diarrhetic shellfish poisoning)

Lọai độc tố: acid okadaic-> gây tiêu chảy

Triệu chứng: trong vòng 30’-12 giờ sau khi ăn, nạn nhân bị đau bụng, buồn nôn, ói mửa, tiêu chảy, ớn lạnh Ít có trường hợp tử vong và nếu bài thải hết chất độc ra ngoài thì sẽ hồi phục sau 2 - 3 ngày mà không cần dùng thuốc can thiệp

Trường hợp nặng: nạn nhân thấy ngứa, tê môi, cảm giác khó thở và có thể chết vì liệt hô hấp trong vòng 2 - 24 giờ sau khi ăn phải chất độc.

Các loài tảo Vùng địa lý Loài nhuyễn thể

chịu ảnh hưởng Prorocentrum, Dinophysis

fortii, Dinophysis acuminate, Dinophysis acuta.

Tây Bắc và Đông Bắc nuớc Mỹ và những vùng có khí hậu tương tự

vẹm, hàu, điệp,

sò, nghêu

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

13

NSP (neurotoxin shellfish poisoning)

Loại độc tố: brevetoxins-> gây độc thần kinh

Triệu chứng: tính độc của NSP gần giống như ciguatera hoặc PSP Triệu chứng xuất hiện sau khi ăn khoảng 3 giờ, ban đầu có cảm giác ngứa râm ran cả người, căng thẳng, lúc nóng lúc lạnh, dãn đồng tử, mất phương hướng Nạn nhân đau đớn, sau đó buồn nôn, tiêu chảy kéo dài và có cảm giác nóng rát ở trực tràng.

Loài tảo sinh độc tố

Vùng địa lý Các loài nhuyễn thể bị

nhiễm Gymnodinium

breve

Vịnh Mexico, bờ biển Nam Atlantic, New Zealand

Điệp, trai, hàu, nghêu, một

số loài nhuyễn thể khác

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

Một số ít có biến chứng làm liệt hô hấp và có thể gây tử vong.

Loài tảo sinh độc tố

Vùng địa lý Các loài nhuyễn thể bị

nhiễm

Alexandrium, Pyrodinium Gymnodinium

Bắc Atlantic và bờ biển Thái Bình Dương của Bắc Mỹ

Vẹm, sò Điệp, hàu, nghêu

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

15

Độc tố Yessotoxins-> gây liệt cơ

Triệu chứng: tê ở mặt, miệng, sau đó tê cóng ở tay và chân, các biểu hiện rõ sau khi ăn 30 phút: khó nuốt, khó nói, chóng mặt, đau vùng trán và có thể tử vong do suy hô hấp.

Loài tảo sinh độc tố Vùng địa lý Các loài nhuyễn

thể bị nhiễm

Polyedrum lingulodinium, Gonyaulax spinifera,

Protoceratium reticulatum

Bắc California

Trai, hến, sò

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

16

Ngộ độc kim loại nặng

Quá trình công nghiệp hóa-> nhiều nhà máy sản xuất mọc lên và xả nước thải ra sông, biển ->ô nhiễm môi trường nước.

bẫy bắt phù du mà không thể di chuyển đi nơi khác được)-> người tiêu thụ.

nghèo calcium, nghèo protein, ít chất béo và ít chất sắt, có khuynh hướng kích thích cơ thể hấp thụ nhiều cadmium hơn bình thường.

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

17

tiêu chảy

 Tích tụ vào thận -> sạn thận.

 Calcium và phosphore bị bài tiết theo nước tiểu

ra ngoài -> bệnh lý về xương: yếu xương, biến

dạng xương, hủy mô xương (osteomalacia), gây

ra chứng loãng xương (osteoporosis) và kéo theo

những cơn đau nhức xương dữ dội

Nhiễm cadmium lâu ngày sẽ gây ra triệu chứng mất máu, tổn hại đến hệ thần kinh trung ương, hệ miễn dịch, hệ sinh dục.

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

18

*Chì

 Ngộ độc cấp tính:

yếu cơ và đôi khi có các triệu chứng liên quan đến viêm não

 Đau bụng, buồn nôn, nôn, tiêu chảy và táo bón Tán huyết

do ngộ độc cấp tính có thể gây ra thiếu máu,

 Ngộ độc mãn tính:

phối hợp và tê và ngứa ran ở các chi Mệt mỏi, khó ngủ, nhức đầu, nói lắp và thiếu máu, da xanh xao Một sọc màu xanh dọc theo nướu răng, với viền đen hơi xanh ở răng, được gọi

là dòng Burton là một dấu hiệu của nhiễm độc chì mãn tính

Trẻ em bị ngộ độc mãn tính có thể lười vận động hoặc hiếu động hoặc thậm chí có những hành vi giận dữ bất thường.

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

 Nhiễm độc ở những cơ quan khác: đục thủy tinh thể, viêm cơ tim, suy thận và ở máu gây thiếu máu tán huyết

Phân loại độc tố có trong nhuyễn thể

20

*Thủy ngân

 Thủy ngân tồn tại nhiều dạng khác nhau trong

tự nhiên: thủy ngân kim loại, hợp chất thủy ngân

vô cơ, metyl thủy ngân, dimetyl thủy ngân.

 Metyl thủy ngân là một chất độc thần kinh, ngay ở nồng độ thấp có thể gây ra các triệu chứng bất lợi về phản xa, vận động của hệ thần kinh như: dị cảm, thất điều, suy nhược thần kinh, giảm thính giác, loạn ngôn, thu hẹp thị trường, rối loạn tâm thần, run cơ, rối loạn cử động, bí tiểu và có thể tử vong.

Tiêu chuẩn Việt Nam về các loại độc tố (Theo TCVN 8681:2011)

Tiêu chuẩn Việt Nam về các loại độc tố (Theo TCVN 8681:2011)

Các phương pháp nhận diện chất độc

23

Các bước chung để chuẩn bị mẫu

 Rửa sạch vỏ nhuyễn thể trước khi mở để lấy phần thịt,

 Rửa nhanh thịt nhuyễn thể trong nước cất để loại bỏ cát sạn và các tạp chất khác,

 Cân khoảng 150g thịt nhuyễn thể và cho lên rây cỡ số 5, để yên trong 5 phút để loại bỏ hết nước (hoặc dùng giấy lọc sạch thấm khô kiệt hết nước bám bên ngoài),

 Mẫu được nghiền trong máy nghiền cho đến khi đồng nhất hoàn toàn,

 Sấy khô mẫu ở 700C đến khối lượng không đổi,

 Bảo quản mẫu trong lọ polyetylen để trong bình hút ẩm,

 Cân mẫu trước và sau khi sấy khô.

 Bơm các dung dịch mẫu đã chuẩn bị như trên vào HPLC Mỗi dung dịch mẫu được bơm 2 lần Tính độ hấp thụ trung bình cho mỗi dung dịch mẫu theo diện tích pic tương ứng.

 Bơm các dung dịch chuẩn vào HPLC với tần số 2 giờ bơm 1 lần.

Các phương pháp nhận diện chất độc

26

1: Bình chứa pha động.

2: Bộ phận khử khí 3: Bơm cao áp

4: Bộ phận tiêm mẫu 5: Cộ sắc ký (pha tĩnh) 6: Đầu dò

7: Hệ thống máy tính có phần mềm ghi nhận tín hiệu, xử lý dữ liệu và điều khiển hệ thống.

8: In dữ liệu

Hệ thống HPLC

Các phương pháp nhận diện chất độc

27

Phương pháp nhận diện kim lọai nặng

Hai phương pháp vô cơ hóa mẫu: xử lý ướt và xử lý khô.

 Kỹ thuật xử lý mẫu khô : xử lý mẫu trong lò nung ở nhiệt độ thích hợp (4500C-7000C) để đốt cháy hoàn toàn các chất hữu cơ của mẫu thành CO2 và H2O, sau đó hòa tan mẫu bằng dung dịch muối hay acid phù hợp

 Kỹ thuật xử lý mẫu ướt: dùng acid đặc có tính oxi hóa mạnh (HNO3, HClO4 hay HNO3+ HClO4) hoặc hỗn hợp một axit mạnh và một chất oxi hóa mạnh ( HNO3 + H2O2 ) để phân hủy hết chất hữu cơ

và chuyển các kim loại ở dạng hữu cơ về dạng các ion trong dung dịch muối vô cơ.

=>Kỹ thuật xử lý mẫu ướt được dùng phổ biến hơn.

Các phương pháp nhận diện chất độc

28

Phương pháp Von-ampe kết hợp xung vi phân

Các phương pháp nhận diện chất độc

29

Xác định đặc hiệu đối với hầu hết các nguyên tố kim loại và có độ nhạy rất cao (mức ppb)

Nguyên tắc của phép đo: dùng năng lượng nhiệt của dòng điện rất cao (300-500A) để đốt nóng tức khắc cuvet graphite chứa mẫu phân tích để thực hiện nguyên tử hóa mẫu cho phép đo quang phổ Gồm các bước:

 Mẫu để trong cuvet graphite (Lượng mẫu nhỏ (10-50 µl) cho mỗi phép đo)

 Quá trình nguyên tử hóa diễn ra theo 3 giai đoạn chính kế tiếp: sấy mẫu, tro hóa luyện mẫu (2000- 33000C) và nguyên tử hóa để đo phổ trong môi trường khí trơ Argon, Nitơ, Heli

Nguyên tử hóa để đo phổ là tức khắc (chỉ xảy ra từ 3- 5 giây)

Các phương pháp nhận diện chất độc

30

Cuvet graphite Hệ thống máy hấp thụ nguyên tử AAS-6300

KẾT LUẬN

31

dùng cả thế giới ưa chuộng.

độc ảnh hưởng đến sức khỏe con người, có thể dẫn đến

tử vong,

ngộ độc cho con người,

sinh học, AAS để xác định kim loại nặng.

CHÂN THÀNH CẢM ƠN THẦY VÀ

CÁC BẠN ĐÃ LẮNG NGHE!

32