Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 92 NGHIÊN CỨU THAY THẾ THỨC ĂN SELCO BẰNG MEN BÁNH MÌ TRONG NUÔI LUÂN TRÙNG (Brachionus plicatilis) THÂM CANH Dương Thị Hoàng Oanh, Trần Công Bình và Trần Tấn Huy 1 ABSTRACT This study investigated the possibility to use yeast as a cheap food in intensive and recirculating culture system of rotifer (Brachionus plicatilis). The first experiment was done to compare the growth rate of rotifers fed with Culture Selco 3000 ® and yeast. The production and quality of rotifers were determined in the second experiment with 3 different treatments: 1/yeast only; 2/ yeast combined 3% Chlorella and 3/ yeast combined 5% Chlorella. Rotifer with stocking density of 250 ind/mL and 3.000 ind/mL was maintained in the first and second experiment, respectively. The results indicated that rotifers fed with Culture Selco 3000 ® and yeast had the same growth rate. In diets of yeast combined 3-5% Chlorella, rotifers presented higher and more stable harvested productivity than those fed with Selco 3000 ® . Moreover, the supplimentation of 5% Chlorella to yeast diet increased significantly LNA and total HUFA contents of cultured rotifers. Keywords: Brachionus plicatilis, recirculating, intensive, yeast Title: Study on the replacement of Selco by yeast in feeding diet of rotifer (Brachionus plicatilis) in intensive culture system TÓM TẮT Nghiên cứu nhằm đánh giá khả năng sử dụng men bánh mì như nguồn thức ăn rẻ tiền để nuôi luân trùng trong hệ thống thâm canh tuần hoàn. Thí nghiệm 1 được thực hiện nhằm so sánh tăng trưởng của luân trùng giữa 2 nghiệm thức thức ăn là Culture Selco 3000® và men bánh mì. Sức sản xuất và chất lượng của luân trùng được xác định trong thí nghiệm thứ 2 với các nghiệm thức là: 1/men bánh mì; 2/ men bánh mì kết hợp với 3% tảo Chlorella và 3/men bánh mì kết hợp với 5% tảo Chlorella. Mật độ luân trùng trong thí nghiệm 1 là 250 ct/mL và thí nghiệm 2 là 3.000 ct/mL. Kết quả cho thấy luân trùng được cho ăn bằng men bánh mì có sức tăng trưởng tương đương với luân trùng nuôi bằng Selco 3000®. Luân trùng được cho ăn bằng men bánh mì có bổ sung 3-5% tảo Chlorella cho năng suất thu hoạch cao và ổn định tương đương với luân trùng được nuôi bằng Selco®. Hơn nữa, việc bổ sung 5% tảo vào thức ăn men bánh mì giúp làm tăng một cách có ý nghĩa hàm lượng LNA và HUFA tổng cộng của luân trùng. Từ khóa: Brachionus plicatilis, tuần hoàn, thâm canh, men bánh mì 1 GIỚI THIỆU Hệ thống nuôi luân trùng thâm canh tuần hoàn sử dụng thức ăn nhân tạo đầu tiên được phát triển tại Đại Học Gent (Suantika et al., 2000). Thức ăn nhân tạo được sử dụng cho hệ thống nuôi này là các loại Culture Selco (Culture selco High, Culture selco 2000, Culture selco 3000) do công ty INVE (Bỉ) cung cấp. Ưu điểm của kỹ thuật này là sử dụng thức ăn nhân tạo được chế tạo công nghiệp và cho năng suất luân trùng rất cao và ổn định hơn so với nuôi từng đợt. Tuy nhiên, thức ăn này lại 1 Bộ môn T huỷ Sinh Học Ứng Dụng, Khoa Thuỷ Sản, Đại Học Cần Thơ Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 93 rất đắt tiền nên không thích hợp với điều kiện sản xuất tại Việt Nam. Việc nghiên cứu thay thế thức ăn này bằng men bánh mì trong nuôi luân trùng tuần hoàn là rất cần thiết nhằm sử dụng ưu thế của hệ thống tuần hoàn với men bánh mì sẵn có và rẻ tiền để hạ giá thành sản xuất luân trùng trong các tại sản xuất giống hải sản ở Việt Nam. 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng thí nghiệm Luân trùng nước lợ (Brachionus plicatilis) có nguồn gốc từ Bỉ được nuôi và giữ giống tại phòng thí nghiệm nuôi thức ăn tự nhiên thuộc Bộ môn Thủy sinh học ứng dụng. Quá trình nhân giống được tiến hành trong hệ thống nước tĩnh. Mật độ ban đầu là 50 ct/mL. Khi luân trùng đạt đến mật độ 300-500 ct/mL thì có thể thu hoạch để làm thí nghiệm 2.2 Bố trí thí nghiệm 2.2.1 Thí nghiệm 1: So sánh tăng trưởng của quần thể luân trùng trong hệ thống thâm canh tuần hoàn được nuôi bằng Culture Selco 3000 ® và men bánh mì Thí nghiệm được thực hiện trong phòng điều hoà nhiệt độ ở 25°C. Mật độ thả luân trùng ban đầu 250 ct/mL. Thí nghiệm gồm 2 nghiệm thức, mỗi nghiệm thức có 3 lần lặp lại. - Nghiệm thức 1 (CS3000): sử dụng thức ăn Culture Selco3000 ® - Nghiệm thức 2 (Men): sử dụng men bánh mì. Các yếu tố thủy hóa được theo dõi hàng ngày bao gồm TAN và N-NO 2 - Thức ăn được cho luân trùng ăn bằng máy cho ăn tự động và được tính theo công thức do Suantika et al. (2000) đề nghị áp dụng cho thức ăn nhân tạo Culture Selco® trong hệ thống nuôi luân trùng mật độ cao (3000 ct/mL) có thu hoạch hàng ngày: - m(g) = 0.035D t 0,415 * V - m : lượng men bánh mì cho bể luân trùng trong một ngày (g) - D t : Mật độ luân trùng tại thời điểm t (ct/mL). - V: Thể tích bể nuôi (L). 2.2.2 Thí nghiệm 2: Xác định sức sản xuất và chất lượng của luân trùng sử dụng thức ăn rẻ tiền là men bánh mì và tảo cho hệ thống nuôi luân trùng thâm canh tuần hoàn Mục tiêu của thí nghiệm nhằm tìm ra tỉ lệ cho ăn kết hợp giữa men bánh mì và tảo thích hợp nhất đế có thể ứng dụng nuôi luân trùng trong hệ thống tuần hoàn kết hợp với bể cá-tảo sau này, trên cơ sở so sánh năng suất, chất lượng của luân trùng khi ăn men bánh mì và tảo ở các tỉ lệ kết hợp khác nhau. Bố trí thí nghiệm Ba nghiệm thức được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên, mỗi nghiệm thức có 3 lần lặp lại. Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 94 Luân trùng được bố trí trong bể 25 lít với mật độ 3.000 cá thể/mL, luân trùng được cho ăn tảo cô đặc và men bánh mì bằng máy cho ăn tự động theo tỉ lệ ở từng nghiệm thức (Bảng 1). Nước từ bể nuôi luân trùng sẽ qua lưới lọc chảy vào bể lắng, từ đây nước được bơm sang thiết bị tách đạm để loại bỏ ra khỏi hệ thống một số protein không tan trong nước, xác tảo chết và cặn bã trước khi nước đi vào bể lọc sinh học và quay trở lại bể luân trùng.Mật độ luân trùng được theo dõi hàng ngày và một phần luân trùng sẽ được thu hoạch để đưa mật độ của chúng trở lại mức duy trì (3000ct/mL). Bảng 1: Mô tả tóm tắt thí nghiệm 2 Tên nghiệm thức Mật độ luân trùng duy trì Mô tả nghiệm thức NT Men (đối chứng) Cho luân trùng ăn hoàn toàn bằng men bánh mì NT 3% tảo Cho luân trùng 3% tảo + 97% men bánh mì Thí nghiệm 2 (thực hiện trong phòng, ăn tảo cô đặc) NT 5% tảo 3000 ct/mL Cho luân trùng 5% tảo + 95% men bánh mì 2.3 Phương pháp thu thập số liệu 2.3.1 Thủy lý - Nhiệt độ và ánh sáng được đo 2 lần/ngày vào 8 giờ sáng và 2 giờ chiều bằng nhiệt kế thủy ngân và light meter LT lutron (LX-103, Taiwan). - pH (đo bằng máy pH Scan2, Eutech, Singapore) được đo 1 lần/ngày vào buổi sáng - Nồng độ muối: đo 1 lần/ngày bằng salinometer lúc 8 h. 2.3.2 Thủy hóa Các chỉ tiêu thủy hóa được thu 1 ngày/lần vào buổi sáng. Chỉ tiêu Phương pháp phân tích TAN Indo-phenol blue N-NO 3 - Salicilate N-NO 2 - 1-naphthylamine TKN (tổng đạm Kjedahl) Kjedahl so màu bằng Indo- phenol blue P-PO 4 3- Molibden blue TP (tổng lân) Kjedahl so màu bằng molibden blue. 2.3.3 Sinh học - Mật độ tảo được xác định hàng ngày bằng buồng đếm Burker - Số tế bào/mL = ((n1 + n2)/160) * 10 6 * d n1: số tế bào tảo ở buồng đếm thứ nhất n2: số tế bào tảo ở buồng đếm thứ hai d : hệ số pha loãng - Mật độ luân trùng: được xác định hằng ngày vào buổi sáng Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 95 - Hệ số trứng: HST(%) = n/N n: Số cá thể luân trùng mang trứng N: Tổng số luân trùng đếm được - Tốc độ tăng trưởng tương đối (SGR-Specific growth rate) của luân trùng được tính theo công thức: SGR = (ln Nt – ln No)/t SGR: Tốc độ tăng trưởng tương đối của luân trùng Nt: Mật độ luân trùng, tảo tại thời gian t (ct/mL) No: Mật độ luân trùng, tảo ban đầu. t: Thời gian nuôi (ngày) - Phân tích HUFA mẫu luân trùng: thu 2 mẫu ở thí nghiệm 2, 1 mẫu khi bắt đầu thu hoạch (thu vào ngày thứ 4) và 1 mẫu khi kết thúc thí nghiệm (ngày thứ 16). Mẫu HUFA được gửi phân tích tại Đại Học Gent, Bỉ. 2.3.4 Xử lý số liệu Số liệu được xử lý với chương trình Excel và xử lý thống kê bằng phần mềm Statistica, version 6. Tất cả các số liệu đều được kiểm tra tính đồng nhất và phân phối chuẩn trước khi đưa vào xử lý one-way ANOVA. Sự khác biệt giữa các nghiệm thức được kiểm tra bằng Tukey HSD test. 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Các yếu tố thủy lý hóa Thí nghiệm kéo dài trong khoảng 14 ngày (thí nghiệm 2) đến 16 ngày (thí nghiệm 1). Giá trị trung bình của các yếu tố thủy lý hóa ở hai thí nghiệm được trình bày trong Bảng 1 và 2. Giá trị pH trung bình trong các thí nghiệm thấp hơn khoảng tối thích cho sinh trưởng của luân trùng (pH = 7,5-8,5) nhưng vẫn còn trong khoảng thuận lợi cho đời sống của chúng (pH = 5-10). Các yếu tố thủy lý khác của cả hai thí nghiệm đều nằm trong khoảng thích hợp cho sự phát triển của luân trùng Bảng 2: Giá trị trung bình các yếu tố thủy lý ở thí nghiệm 1 và 2 Chỉ tiêu Thí nghiệm 1 Thí nghiệm 2 Nhiệt độ (°C) 25,0 ± 0,0 25,95 ± 0,68 PH 7,19 ± 0,51 7,40±0,81 Độ mặn (‰) 25,0 ± 0,0 25,2±0,9 Giá trị trung bình của các yếu tố thủy hóa đều nằm trong khoảng thích hợp của luân trùng và không có sự khác biệt có ý nghĩa giữa các nghiệm thức (P>0,05) (Bảng 3). Hàm lượng các chất dinh dưỡng gốc đạm đều có khuynh hướng tăng theo thời gian nuôi do sự tích tụ chất thải và thức ăn dư thừa trong hệ thống tuần hoàn vượt quá khả năng của lọc sinh học. Với điều kiện pH và nhiệt độ của các thí nghiệm này (Bảng 2), nồng độ NH 3 độc hại không vượt quá 0,096ppm (1,92% của tổng lượng TAN), nằm trong khoảng an toàn cho sự phát triển của luân trùng. Như Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 96 vậy, hoàn toàn không có sự khác biệt về chất lượng nước ở các nghiệm thức nuôi luân trùng với các khấu phần ăn khác nhau trong hệ thống tuần hoàn. Bảng 3: Hàm lượng trung bình của các yếu tố thủy hóa ở thí nghiệm 1 và 2 Thí nghiệm 1 Thí nghiệm 2 Chỉ tiêu NT men NT CS3000 NT men NT 3% tảo NT 5% tảo TAN (ppm) 1,19 ± 0,57 1,19 ± 0,57 1,99 ± 0,20 a 1,88 ± 0,17 a 1,87 ± 0,18 a N-NO 2 - (ppm) 1,08 ± 0,76 0,93 ± 0,49 0,47 ± 0,04 a 0,52 ± 0,06 a 0,52 ± 0,11 a N-NO 3 - (ppm) 2,26 ± 0,19 a 2,42 ± 0,04 a 2,53 ± 0,06 a Ghi chú: các trị số trên cùng một hàng của cùng một thí nghiệm với ký tự gi ống nhau để chỉ sự sai biệt không có ý nghĩa thống kê (P>0,05, Tukey HSD test) 3.2 Sự phát triển của luân trùng Ở thí nghiệm 1, sự phát triển của luân trùng gia tăng liên tục trong 16 ngày nuôi (Hình 1). Mật độ luân trùng sau 16 ngày nuôi của NT Men và NT CS3000 lần lượt là 8.467 ± 126 ct/mL và 8.550 ± 85 ct/mL. Hệ số trứng trung bình trong suốt thời gian thí nghiệm của NT men và NT CS3000 lần lượt là 18,4 ± 5,4% và 18,5 ± 5,1%. Phân tích thống kê cho thấy không có sự khác biệt có ý nghĩa (P> 0,05) giữa 2 nghiệm thức cả về mật độ luân trùng hàng ngày, hệ số trứng trung bình và tốc độ tăng trưởng đặc thù (Bảng 4). 0 2000 4000 6000 8000 10000 12345678910111213141516 Ngày Mật độ (ct/ml) 0 5 10 15 20 25 30 35 Hệ số trứng (%) Mật độ Men Mật độ CS3000 HST Men HST CS3000 Hình 1: Sự phát triển quần thể luân trùng trong thí nghiệm 1 (HST: hệ số trứng) Trong thí nghiệm 2, mật độ và năng suất thu hoạch luân trùng hàng ngày trong suốt thời gian nuôi ở từng nghiệm thức được trình bày trong Hình 2. Sau khi thả ở mật độ 3000 ct/mL, luân trùng phải mất khoảng 3 ngày để thích nghi với môi trường và ổn định quần thể. Quần thể luân trùng ở cả 3 nghiệm thức đạt và vượt mật độ duy trì 3000 ct/mL vào ngày thứ 3 và cho thu hoạch tương đối ổn định kể từ ngày thứ 4 trở đi với tỉ lệ thu hoạch trung bình hàng ngày là 14,4 ± 6,2%, 19,9 ± 4,2% và 21,0 ± 0,8% sinh khối quần thể lần lượt cho NT Men, NT 3% tảo và NT 5% tảo (Bảng 3). Kết quả từ Bảng 3 cho thấy năng suất thu hoạch, tốc độ tăng trưởng và hệ số trứng trung bình của luân trùng cao nhất ở NT 5% tảo và thấp nhất ở NT Men. Tuy nhiên sự khác biệt này chưa có ý nghĩa thống kê trừ hệ số trứng trung bình của NT Men thấp hơn có ý nghĩa so với các NT 3% tảo và NT 5% tảo. Một điểm cần lưu ý là ở nghiệm thức cho ăn men bánh mì, luân trùng bị nhiễm trùng tiêm mao sớm làm cho quần thể luân trùng tàn nhanh hơn các nghiệm thức khác (Hình 2) Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 97 Hình 2: Mật độ và năng suất luân trùng ở thí nghiệm 2 Bảng 3: Các chỉ tiêu năng suất và tăng trưởng của luân trùng ở thí nghiệm 2 Thí nghiệm 1 Thí nghiệm 2 Các chỉ tiêu NT Men NT CS3000 NT Men NT 3% tảo NT 5% tảo Năng suất trung bình hàng ngày (ct/mL/ngày) 433±185a 596±125a 630±23a Tỉ lệ thu hoạch (%) 14,4±6,2a 19,9±4,2a 21,0±0,8a S G R 0,198±0,004a 0,191±0,004a 0,12±0,07a 0,18±0,04a 0,19±0,01a Tổng năng suất (ct/mL) 5.130±2.062a 6.557±1.375a 6.953±271a Mật độ cuối TN (ct/mL) 8.467±126a 8.550±85a Hệ số trứng trung bình (%) 18,4±5,4a 18,5±5,1a 18,5±0,4a 20,2±1,1b 21,0±0,1b Ghi chú: các trị số trên cùng một hàng của cùng một thí nghiệm với ký tự gi ống nhau để chỉ sự sai biệt không có ý nghĩa thống kê Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 98 3.3 Chất lượng luân trùng Hàm lượng acid béo của luân trùng ở đầu (ngày thứ 4, bắt đầu thu hoạch luân trùng) và cuối chu kỳ nuôi (ngày thứ 14 trước khi kết thúc thí nghiệm) của các nghiệm thức được trình bày ở Bảng 4. Hàm lượng của các acid béo thiết yếu và ∑HUFA ở NT Men là thấp nhất trong các nghiệm thức trong cả hai đợt thu mẫu và sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê (P<0,05) ở ngày thứ 14. Tuy nhiên, ở ngày thứ 4 sự khác biệt về mặt thống kê chỉ thấy ở LA, LNA, ARA và ∑HUFA nhưng chưa thấy ở EPA và DHA. Nhìn chung, có sự ảnh hưởng rõ rệt của tảo đến hàm lượng các acid béo (n-6), LNA và ∑HUFA. Tỉ lệ DHA/EPA cao nhất ở NT Men và thấp nhất ở NT 5% tảo và sự khác biệt có ý nghĩa giữa hai nghiệm thức này xảy ra ở ngày thứ 14. Hàm lượng các acid béo, ∑HUFA và tỉ lệ DHA/EPA của luân trùng giữa NT 3% tảo và NT 5% tảo không có sự khác biệt trừ trường hợp của LNA. Hàm lượng LNA cao nhất ở NT 5% tảo và có khác biệt có ý nghĩa giữa các nghiệm thức ở cả hai đợt thu mẫu. Bảng 4: Hàm lượng một số acid béo thiết yếu, tổng HUFA, tỉ lệ DHA/EPA của luân trùng ở những ngày đầu và cuối thí nghiệm 2 NT Men NT 3% tảo NT 5% tảo Acid béo Ngày 4 (mg/g DW) Ngày 14 (mg/g DW) Ngày 4 (mg/g DW) Ngày 14 (mg/g DW) Ngày 4 (mg/g DW) Ngày 14 (mg/g DW) LA (18:2n-6) 2,86±0,38 a 3,25±0,18 a 4,46±0,08 a 5,01±0,60 a 5,05±0,33 a 5,61±0,73 a LNA (18:3n-3) 0,08±0,01 a 0,21±0,11 a 0,77±0,06 a 1,07±0,14 b 1,14±0,05 a 1,51±0,06 b ARA (20:4n-6) 0,34±0,06 a 0,19±0,13 a 0,54±0,05 a 0,58±0,11 a 0,56±0,05 a 0,60±0,07 a EPA (20:5n-3) 0,18±0,02 a 0,14±0,06 a 0,21±0,04 a 0,28±0,12 a 0,20±0,10 a 0,40±0,05 b DHA (22:6n-3) 0,27±0,06 a 0,29±0,09 a 0,28±0,07 a 0,47±0,05 b 0,27±0,06 a 0,37±0,06 a ∑HUFA 2,90±0,16 b 2,17±0,36 a 3,62±0,16 a 4,21±0,51 a 4,00±0,26 a 4,94±0,20 b DHA/EP A 1,53±0,49 a 2,16±0,37 a 1,31±0,19 a 1,87±0,75 a 1,72±1,18 a 0,93±0,25 a Ghi chú: Các trị số trên cùng một hàng của cùng 1 nghiệm thức với ký tự gi ống nhau để chỉ sự sai biệt không có ý nghĩa thống kê (P>0,05, Tukey HSD test) LA: linoleic acid; LNA: linolenic acid; ARA: arachidonic acid; EPA: eicosapentaenoic acid; DHA: docosahexaenoic acid; HUFA: highly unsaturated fatty acid. Ở NT Men, hàm lượng các acid béo thiết yếu không có sự khác biệt ở luân trùng thu hoạch vào ngày thứ 4 và ngày thứ 14 trong cùng một nghiệm thức. Ở NT 3% và NT 5% tảo, hàm lượng các acid béo và ∑HUFA có khuynh hướng tăng từ ngày thứ 4 đến ngày thứ 14 nhưng sự gia tăng này hầu hết không có ý nghĩa thống kê (Bảng 4). ∑HUFA tăng theo mức độ tảo cho ăn và thời gian sử dụng tảo trong khi hàm lượng EPA, DHA và tỉ lệ DHA/EPA biến động không rõ ràng so với mức độ tảo cho ăn trong các nghiệm thức. Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 99 3.4 Thảo luận Việc dùng thức ăn có thành phần chính là men bánh mì để thay thế thức ăn công nghiệp đặc chế cho luân trùng (nhằm mục tiêu hạ giá thành sản xuất luân trùng) cần phải được xem xét về mặt năng suất và chất lượng luân trùng. Năng suất nuôi luân trùng phụ thuộc nhiều vào chất lượng môi trường nuôi và chất lượng thức ăn trong khi chất lượng luân trùng lại phụ thuộc hoàn toàn vào chất lượng thức ăn của chúng. Kết quả thí nghiệm đã khẳng định rằng sự phát triển của luân trùng không chỉ phụ thuộc vào chất lượng thức ăn mà phụ thuộc rất nhiều vào chất lượng nước trong các hệ thống nuôi. Trong thí nghiệm 1, luân trùng ăn hoàn toàn bằng men bánh mì tăng trưởng không sai khác gì so với luân trùng nuôi bằng thức ăn đặc chế Culture Selco3000 ® . Thí nghiệm được thực hiện trong phòng điều hoà nhiệt độ với các yếu tố thủy lý được giữ ổn định, hệ thống lọc sinh học tuần hoàn có kết hợp với bộ tách bọt và ozone hoạt động tốt nên TAN và N-NO 2 - được giữ ở mức rất thấp, các chất cặn bả lơ lững được loại thải hiệu quả nên chất lượng nước trong bể nuôi luân trùng của NT Men và NT CS3000 đều tốt và không có sự khác biệt. Đây có lẽ là lý do làm cho tốc độ phát triển của luân trùng ở 2 nghiệm thức tương đương nhau trong suốt 16 ngày nuôi (Hình 2). Tương tự, ở thí nghiệm 2, chất lượng nước tốt trong các bể nuôi luân trùng ở cả 3 nghiệm thức dẫn đến năng suất thu hoạch luân trùng sau 14 ngày nuôi không có sự khác biệt có ý nghĩa (Bảng 3). Tuy nhiên, vào cuối chu kỳ nuôi, chất lượng nước trong các bể luân trùng của NT Men suy giảm nhanh hơn các bể nuôi thí nghiệm khác, trùng tiêm mao xuất hiện nhiều hơn trong các bể ở NT Men làm luân trùng của nghiệm thức này suy tàn nhanh hơn các nghiệm thức có bổ sung tảo (Hình 3). Điều này phù hợp với nhận định của Hirayama (1987) và Komis (1992) cho rằng nếu chỉ cho luân trùng ăn hoàn toàn bằng men bánh mì thì năng suất không ổn định và quần thể luân trùng mau tàn mà nguyên nhân chủ yếu là do khó quản lý chất lượng nước nuôi. Hoff & Snell (2004) cũng cho rằng cho luân trùng ăn bằng men bánh mì rất khó giải quyết việc dư thừa thức ăn làm cho thành bể nuôi có độ nhớt cao, nước có mùi hôi và thức ăn dư đóng thành cục trôi nổi trong nước. Mặc dù hệ thống tuần hoàn với tốc độ tuần hoàn 500%/ngày có thể loại bỏ tương đối hiệu quả chất thải và thức ăn thừa trong bể luân trùng nên không có hiện tượng thức ăn dư đóng thành cục trôi nổi trong nước như mô tả, nhưng lượng thức ăn dư thừa nhiều hơn trong NT Men của thí nghiệm 2 có lẽ là nguyên nhân làm cho trùng tiêm mao phát triển nhiều hơn trong nghiệm thức này. Ngoài chất lượng nước nuôi, chất lượng và số lượng thức ăn cũng đóng vai trò quan trọng quyết định sự tăng trưởng của luân trùng. Việc bổ sung thêm tảo vào thành phần thức ăn chính là men bánh mì ở thí nghiệm 2 có khuynh hướng ổn định lượng thu hoạch hàng ngày, cải thiện được năng suất nuôi luân trùng (Hình 3), nhưng sự khác biệt này không có ý nghĩa thống kê. Trong khi đó, hệ số trứng trung bình của luân trùng ở các nghiệm thức có bổ sung tảo cao hơn có ý nghĩa so với NT Men (P<0,05). Như vậy, năng suất luân trùng trong hệ thống thâm canh tuần hoàn này có thể được cải thiện tốt hơn nếu tỉ lệ bổ sung tảo cao hơn 5%. Năng suất thu hoạch trung bình hằng ngày của NT 3% tảo và 5% tảo lần lượt là 596±125 ct/mL và 630±23 ct/mL chiếm 19,9% và 21% quần thể luân trùng duy trì Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 100 và kéo dài trong 14 ngày. Kết quả này tương đương với kết quả được Suantika et al. (2000) công bố, với mật độ ban đầu là 500 ct/mL và mật độ duy trì 3000 ct/mL, cho ăn hoàn toàn bằng thức ăn Culture Selco High (gọi tắt là CSH – tên ban đầu của thức ăn đặc chế cho nuôi luân trùng thâm canh CS3000), thí nghiệm kéo dài 32 ngày (trong đó có 27 ngày thu hoạch) với năng suất thu hoạch trung bình hằng ngày là 605±285 ct/mL chiếm khoảng 20% quần thể luân trùng duy trì. Như vậy, năng suất thu hoạch hàng ngày của luân trùng được cho ăn bằng men bánh mì có bổ sung thêm 3-5% ở thí nghiệm này không thấp hơn năng suất nuôi hoàn toàn bằng CSH trong thí nghiệm của Suantika et al. (2000). Nói cách khác, về mặt năng suất, có thể sử dụng men bánh mì có bổ sung ít nhất 3-5% tảo Chlorella để thay thế thức ăn luân trùng đặc chế đắc tiền trong nuôi luân trùng thâm canh tuần hoàn. Thời gian sản xuất của hệ thống hay tính ổn định của hệ thống có lẽ phụ thuộc nhiều vào việc duy trì chất lượng nước trong hệ thống hơn là chất lượng thức ăn cho luân trùng. Bên cạnh năng suất nuôi, chất lượng dinh dưỡng của luân trùng mà chủ yếu là hàm lượng HUFA cũng là yếu tố rất quan trọng. Theo Watanabe et al. (1983), luân trùng chỉ được cho ăn bằng men bánh mì có chất lượng kém, không thể dùng nuôi phần lớn ấu trùng cá biển. Vì vậy, các tác giả này đề nghị là khi nuôi luân trùng bằng men bánh mì nên kết hợp với tảo nhằm giúp nâng cao chất lượng luân trùng bằng các acid béo cao không no (HUFA) từ tảo. Trong thí nghiệm 2, hàm lượng acid béo của luân trùng tăng theo mức độ tảo cho luân trùng ăn. Luân trùng được cho ăn men bánh mì kết hợp tảo Chlorella nước ngọt mặc dù với các mức độ tảo cho ăn không cao (3-5%) cũng cải thiện một cách có ý nghĩa hàm lượng một số acid béo thiết yếu, đặc biệt là LNA, nhóm (n-6) gồm LA và ARA, và ∑HUFA so với luân trùng chỉ cho ăn toàn men bánh mì. Mặc dù ∑HUFA tăng lên có ý nghĩa nhưng sự gia tăng hàm lượng DHA và EPA lại không rõ ràng. Kết quả này cho thấy tảo Chlorella nước ngọt rất giàu LNA, giàu (n-6) PUFA và HUFA nhưng nghèo DHA và EPA. Điều này phù hợp với nhận xét của Hoff và Snell (2004), luân trùng ăn tảo Chlorella nước ngọt có sinh trưởng tốt nhưng chất lượng dinh dưỡng không cao và đặc biệt hàm lượng các acid béo thiết yếu (HUFA) của tảo Chlorella nước ngọt thấp hơn so với tảo nước mặn Nannochloropsis và Isochrysis. Một khảo sát của Takeuchi (1997) cho thấy sự biến thái của ấu trùng ghẹ xanh được cho ăn luân trùng nuôi bằng tảo Chlorella nước ngọt không tốt bằng ấu trùng cho ăn luân trùng nuôi bằng tảo Nannochloropsis vì tảo Chlorella nước ngọt chứa nhiều LNA nhưng thiếu EPA. Mặc dù LNA là tiền chất để tổng hợp nên EPA và DHA cần thiết cho sinh vật biển nhưng đối với giáp xác và các loài cá biển, sự tổng hợp này ít hoặc không xảy ra được vì thiếu enzym ∆-5-desaturase (Sargent et al., 1989). Một ưu điểm của luân trùng trong các nghiệm thức có bổ sung tảo là có hàm lượng ARA tăng cao có ý nghĩa so với luân trùng trong NT Men. Hàm lượng ARA trong luân trùng ở NT Men giảm từ ngày thứ 4 đến ngày thứ 14. Điều này cho thấy, men bánh mì rất thiếu hụt ARA trong khi tảo Chlorella nước ngọt lại giàu ARA, một trong ba loại acid béo thiết yếu quan trọng nhất. Như vậy, bổ sung tảo Chlorella nước ngọt vào khẩu phần ăn chính là men bánh mì cho luân trùng mặc dù với tỉ lệ thấp (5%) vẫn có thể cải thiện được năng suất và chất lượng luân trùng. Tuy nhiên, việc cải thiện chất lượng này còn hạn chế do đặc tính sinh hóa của tảo Chlorella nước ngọt là thiếu DHA và EPA. Kết quả thí Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 101 nghiệm khẳng định rằng với hệ thống tuần hoàn hoạt động tốt (nhằm duy trì chất lượng nước), có thể nuôi luân trùng hoàn toàn bằng men bánh mì hoặc men bánh mì có bổ sung thêm ít nhất 5% tảo với năng suất cao không thua kém so với nuôi bằng thức ăn đặc chế. Việc bổ sung tảo này có thể cải thiện đáng kể chất lượng luân trùng so với chỉ nuôi bằng men nhưng đối với ấu trùng một số loài thủy sản nước lợ mặn có yêu cầu cao về HUFA, việc giàu hóa luân trùng này là cần thiết. 4 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT - Đối với hệ thống nuôi luân trùng thâm canh tuần hoàn, luân trùng được cho ăn bằng men bánh mì có sức tăng trưởng tương đương với luân trùng nuôi bằng thức ăn nhân tạo Selco ® . Luân trùng được cho ăn bằng men bánh mì có bổ sung 3-5% tảo Chlorella cho năng suất thu hoạch cao và sự ổn định tương đương với luân trùng được nuôi bằng thức ăn luân trùng đặc chế đắc tiền. - Khi nuôi luân trùng trong hệ thống thâm canh tuần hoàn với thành phần thức ăn chính là men bánh mì, việc bổ sung 5% tảo vào thức ăn men bánh mì giúp làm tăng LNA và ∑HUFA của luân trùng một cách có ý nghĩa so với luân trùng chỉ cho ăn toàn men bánh mì. - Tiếp tục nghiên cứu chất lượng luân trùng với các mức độ cho ăn tảo khác nhau trong hệ thống nuôi luân trùng thâm canh tuần hoàn kết hợp với bể cá-tảo. TÀI LIỆU THAM KHẢO Hàn Thanh Phong, 2002. Nuôi luân trùng (Brachionus plicatilis) trong hệ thống nuôi kết hợp tảo - cá rô phi. Chuyên đề tốt nghiệp, Khoa Thủy Sản, Đại học Cần Thơ. Hirayama, K., 1987. A consideration of why mass culture of the rotifer Brachionus plicatilis with baker's yeast is unstable. Hydrobiologia 147, pp: 269-270. Hoff, H. and T. W. Snell (2004). Plankton culture manual. The 6 th edition. Florida Aqua Farms, Florida,126 p. Komis, A., 1992. Improve production and ultilization of the rotifer Brachionus plicatilis Muller. in European sea bream (Sparus aurata Linnaeus) and sea bass (Dicentrachus labrax Linnaeus) larviculture. PhD Thesis. University of Gent. Sargent, J.R., R.J. Henderson and D.R. Tocher, 1989. The lipids. In: J. Halver (eds). Fish nutrition, 2 nd edition, Acadermic Press, NY, pp: 152-219. Suantika, G., 2001. Development of a recirculation systemfor the mass culturing of the rotifer (Brachionus plicatilis). PhD. thesis. Gent University, Gent, Belgium. Suantika, G., P. Dhert, M. Nurhudah, P. Sorgeloos, 2000. High-density production of the rotifer Brachionus plicatilis in a recirculation system: consideration of water quality, zootechnical and nutritional aspects. Aquaculture Engineering 21, pp 201-214. Takeuchi, T., 1997. Essential fatty acid requirements of aquatic animals with emphasis on fish larvae and fingerlings. Reviews in Fisheries Science 5(1), pp: 1-25. Watanabe, T., C. Kitajima and S. Fujita, 1983. Nutritional values of live organism used in Japan for mass propagation of fish. A review. Aquaculture 34, pp: 115-143. Trần Sương Ngọc (2003), “ Bước đầu tìm hiểu khả năng thu sinh khối tảo- luân trùng (Brachionus plicatilis) trong hệ thống nuôi kết hợp luân trùng, tảo và cá rô phi”, luận văn thạc sĩ năm 2003 chuyên ngành nuôi trồng thủy sản. . nuôi luân trùng thâm canh tuần hoàn, luân trùng được cho ăn bằng men bánh mì có sức tăng trưởng tương đương với luân trùng nuôi bằng thức ăn nhân tạo Selco ® . Luân trùng được cho ăn bằng men. Tạp chí Nghiên cứu Khoa học 2006: 92-101 Trường Đại học Cần Thơ 92 NGHIÊN CỨU THAY THẾ THỨC ĂN SELCO BẰNG MEN BÁNH MÌ TRONG NUÔI LUÂN TRÙNG (Brachionus plicatilis) THÂM CANH Dương. tại Việt Nam. Việc nghiên cứu thay thế thức ăn này bằng men bánh mì trong nuôi luân trùng tuần hoàn là rất cần thiết nhằm sử dụng ưu thế của hệ thống tuần hoàn với men bánh mì sẵn có và rẻ tiền