KỸ THUẬT DI TRUYỀN - PHẦN 2 ppt

ĐIỆN DI DNA TRÊN GEL AGAROSE- Điện di theo phương nằm ngang - Giá thể là gel agarose - Phát hiện với màu nhuộm ethidium bromide, ...… phát huỳnh quang dưới đèn tử ngoại - Khả năng phân g

PHÂN TÍCH ĐỊNH TÍNH VÀ ĐỊNH LƯỢNG

NUCLEIC ACID

1 ĐIỆN DI

- Gel agarose

- Gel polyacrylamide

2 QUANG PHỔ KẾ : Đo mật độ quang (OD – Optical

density)

ĐIỆN DI DNA TRÊN GEL AGAROSE

- Điện di theo phương nằm ngang

- Giá thể là gel agarose

- Phát hiện với màu nhuộm ethidium bromide, … phát huỳnh quang dưới đèn tử ngoại

- Khả năng phân giải trung bình, phụ thuộc vào nhiều yếu tố, đặc biệt là nồng độ agarose

15 ĐIỆN DI TRONG TRƯỜNG XUNG (PULSED-FIELD

ELECTROPHORESIS)

ĐIỆN DI TRÊN GEL POLYACRYLAMIDE

- Điện di theo phương thẳng đứng

- Giá thể là gel polyacrylamide

- Phát hiện với màu nhuộm Coomassie blue, nhuộm bạc, phát hiện trên phim tín hiệu đồng vị phóng xạ

- Khả năng phân giải cao, phân biệt được những trình tự chỉ cách nhau 1 nucleotide

17 ÑIEÄN DI PROTEIN TREÂN GEL

POLYACRYLAMIDE

ÑIEÄN DI 2 CHIEÀU PROTEIN TREÂN GEL

POLYACRYLAMIDE

KỸ THUẬT RFLP (RESTRICTION FRAGMENT LENGTH POLYMORPHISM – ĐA HÌNH KÍCH THƯỚC CÁC TRÌNH TỰ CẮT GIỚI HẠN

VNTR (VARIABLE NUMBER OF

TANDEM REPEATS)

Phân tích VNTR để nhận biết tính đa hình di truyền ở cá

thể Sử dụng mẫu dò kết hợp với RE để phân tích VNTR

ỨNG DỤNG KỸ

THUẬT ĐIỆN DI

TRONG NGHIÊN CỨU PHẢ HỆ

Ví dụ về việc sử dụng PCR và điện

di trong xác định phả hệ

Đây là phả hệ của Sa hoàng, vợ, 3 con, bác sĩ gia đình và các người hầu

KỸ THUẬT “ELECTROPHORETIC MOBILITY SHIFT

ASSAY : PHÁT HIỆN NHÂN TỐ TRANS

CÂU HỎI - PHẦN 2

1 Các điểm khác biệt trong phương pháp tiến hành điện di trên gel agarose và gel polyacrylamide

2 Các ứng dụng của điện di trên gel agarose, điện di trên gel polyacrylamide

3 Phương pháp đo mật độ quang (OD) :

- Nguyên lý và cách xác định hàm lượng nucleic acid

- Nguyên lý và cách xác định độ sạch của nucleic acid

4 Nguyên lý và cách tiến hành phương pháp RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism)

5 Nguyên lý và cách tiến hành phương pháp VNTR (Variable Number of Tandem Repeats)

6 Nguyên lý và cách tiến hành phương pháp Electrophoretic Mobility Shift Assay