Đề tài thực hành môn công nghệ sản xuất đồ uống trường đh công nghiệp TP hồ chí minh 2010 luận văn, đồ án, đề tài tốt nghiệp

Luận văn, khóa luận tốt nghiệp, báo cáo là sản phẩm kiến thức, là công trình khoa học đầu tay của sinh viên, đúc kết những kiến thức của cả quá trình nghiên cứu và học tập một chuyên đề, chuyên ngành cụ thể. Tổng hợp các đồ án, khóa luận, tiểu luận, chuyên đề và luận văn tốt nghiệp đại học về các chuyên ngành: Kinh tế, Tài Chính Ngân Hàng, Công nghệ thông tin, Khoa học kỹ thuật, Khoa học xã hội, Y dược, Nông Lâm Ngữ... dành cho sinh viên tham khảo. Kho đề tài hay và mới lạ giúp sinh viên chuyên ngành định hướng và lựa chọn cho mình một đề tài phù hợp, thực hiện viết báo cáo luận văn và bảo vệ thành công đồ án của mình

Trang 1

_ : HÔNG Ẫ neal TRUONG DAT HOGCO NG NGHIỆP †

Vién: Cong Nghé Thuc Pham & Sinh Học

Môn thực hành: CNSX Đồ Uống Báo cáo thực hành:

Côn, Rượu, Bia, Nước Giải Khát

GVHD: Th.s Trần Thị Mai Anh

SVTH : Tổ 5 Nhóm3 LỚP :DHTP3

NIÊN KHĨA : 2007 - 2011

TP.Hà Chi Minh,ngay 18 thang10 nam 2010

Trang 2

Bao Cao: Thuc Hanh CNSX Đồ Uống GVHD: Th.S Tran Thi Mai Anh

Danh Sach Sinh Vién

HO VA TEN MSSV

Vii Thi Sinh 07720861

Nguyễn Thị Thu Thảo 07713321

Trang 3

Trang 4

Muc Luc

Dam 0 2 ¡b0 0 {084850 ï9 1 3 Bài 1: Rượu Truyền thống 2-2: ¿+ t+EE+EE£EE22E22 122171 2122121 re 5 Bài 2: Sản Xuất Rượu chưng cất theo phương pháp EnZyme 18 Bài 3: Xác định độ rượu của dịch giắm ¿©c2 z+ctcEE zEzzrxerxerrrrex 26

Bài 4: sản Xuất nước trích Ìy - s-©sc+Se+EkeEkeEEeEEE E2 etrrkrrreee 28

Bài 5: Nấu môi trường dinh đưỡng nắm men .-2- 2222 +zzzszzxezszzss 37

Bài 6: Sản Xuất Nước giải Khát Lên Men

Bài 7-8: Cơng nghệ sản Xuất Bia ©22-©2222Ec2EEEEECEE 22tr crrrrrree 48

Bài 9: Sản Xuất nước giải khát pha chế

Trang 5

Bail: SAN XUAT RUQU THEO PHUONG PHAP TRUYEN THONG

1.Téng quan vé nguyén liéu và sản phẩm Rượu là một loại đồ uống có lịch sử hàng ngàn năm, nó có mặt trong hầu hết| các lễ nghi và phong tục của hầu hết các nước trên thế giới, mỗi nước mỗi vùng lại có một loại rượu đặc trưng và là niềm tự hào của các vùng Thành phần chính của rượu là: rượu etylic (etanol: C2H5OH), nước, và các cấu tử khác tuỳ thuộc vào cách sản xuất, loại nguyên liệu, cách pha chế, tàng trữ chính các cấu tử khác này tạo

nên nét đặc trưng của mỗi loại rượu, mỗi địa phương mà nơi khác khó có thé bắt chước được vì phần lớn nó được các gia đình giữ kín, khơng truyền cho người ngoài

1.1.Giới thiệu về bánh men sử dụng trong lên men rượu truyền thống ớ Việt Nam

1.1.1.Sơ lược về bánh men

e Bánh men là hỗn hợp VSV có sự tác động tương hỗ trong quá trình lên men

e Cac loại bánh men

o_ bánh men có thuốc bắc o_ bánh men khơng có thuốc bắc 6 bánh men lá

Trang 6

Báo Cáo: Thực Hành CNSX Đồ Uống GVHD: Th.S Tran Thi Mai Anh

¢ GO nwéc ta, mdi ving déu cé cdc bai thuéc lam men khac nhau tao nén nhiéu loại rượu đặc sản của từng vùng, được nhiêu người biêt đên như rượu Bâu

Đá (Bình Định), rượu Gò Đen (Long An), rượu Làng Vân, rượu cần

1.1.2.Hệ VSV có trong bánh men

Trong bánh men có 100 — 300 triệu tế bào VSV/gr

" Nắm mốc: Mucor sp, Rhizopus sp, Aspergillus ozyzae, Asp niger, A awamori, Asp sp, Penicillium sp

= Nam men: Saccharomyces sp va Candida sp * Vi khuan lactic va VK acetic

= Ngodai ra con cé giả nắm men Endomycopsis Aspergillus oryzae

Thuong co mau vang khi gia nén con được gọi là nắm màu vàng hoa cau Khi mới phát triển, hệ sợi có màu trắng, sau đó chuyển dần sang màu lục và khi già chuyển hăn sang màu vàng

Phát triển trong khoảng nhiệt độ rất

rong (15-40°C), nhiệt độ tối ưu 1a 30-32°C

Khả năng sinh enzyme rất mạnh, trong đó chủ yếu là các loại enzyme amylase, protease, maltase

Aspergillus niger

Khi mới phát triển, sợi nắm màu trắng, sau đó

sẵm lại nhưng khơng hồn toàn đen Bào tử của chúng

Trang 7

là có màu đen tuyên

Từ một sợi đầu tiên, chúng phân nhánh tạo ra 2-4 nhánh sợi nhỏ Từ các nhánh này sẽ phát triển thành những đỉnh bào tử và từ đó sẽ phát triển thành những bào tử màu đen

Nấm sợi này có khả năng tạo ra rất nhiều enzyme khác nhau như: amylase, invertase, maltase, protease, pectinase va cellulase

Penicillium sp (Nam chdi)

B6 phan mang bao tir cé dang phan nhanh hinh chdi

Cuống có thể phân nhánh 1,2, 3 tầng, trên đó là các thể bình rồi đến bào tử đính Các bộ phận

của thê chổi có thé phat triển đều, đối xứng với trục cuống hoặc không

Co kha nang sinh cellulase Mucor:

Mau trang, boc bao tir hinh câu màu trăng hoặc nhạt màu

Mucor có hệ sợi hình ống, dạng nhung hoặc len, khơng có

thân bị (Stolon) cuống bọc bào tử đựng đứng, luôn luôn tận cùng bằng bọc bào tử, đơn độc hoặc phân nhánh

Trang 8

Mucor moc 6 cac hạt, thức ăn gia súc, thực phẩm bị ẩm tạo thành một lớp lông tơ màu xám Một số loài Mucor có khả năng lên men và oxy hoá

Kha năng sinh enzyme protease, amilase

Chúng được dùng trong sản xuất axit hữu cơ, rượu và các chế phẩm enzyme

Rhizopus sp

Màu trắng xám, rễ giả màu vàng, bọc bào tử hình cầu, bào tử kín, phân nhánh

Phân bố rộng: đất, ngũ cốc, rau quả Khả năng sinh enzyme protease, amilase Endomycopsis

La loai nam men rat giàu amylase và

glucoamylase

Nee

Co tinh chat tuong tu nhu Sac cerevisiae Z

Tế bào Emcomycopsic có hình dài nối tiếp nhau ““

Sinh sản dinh dưỡng bằng nảy chồi

Vừa có khả năng đường hố vừa có khả

năng rượu hố (lên men Glucose, maltose) Enzyme glucoamylase từ nắm men Endomycopsis filligenes có pH hoạt động là 4,8; enzyme này bền ở vùng pH 4-

5, nhiệt độ thích hop cho enzyme này hoạt động là 509C

Trang 9

Saccharomyces cerevisae

La loài nắm men lên men nổi, ky khí khơng bắt buộc Sinh sản theo kiểu nảy

chồi, phân đôi, bào tử

Trong điều kiện có oxy, phát triển sinh khối

Trong điều kiện khơng có oxy,chuyền đường thành rượu

Có khả năng lên men nhiều loại đường khác nhau (glucose, saccharose, fructose, mantose )

Nhiệt độ tối ưu:25-30ĐC, nhiệt độ tối thiểu 2-39C, Ở 40°C ngimg sinh

trưởng và men bị chết

Vĩ khuẩn

Chủ yếu là VK lactic và VK acetic thường làm chua môi trường trong dịch lên men có oxy,

1.1.3.Vai trò của bánh men rượu

e _ Hệ VSV trong bánh men tham gia các q trình chun hóa cơ chất

¢ Giai doan dau VK phat triển hình thành các acid hữu cơ

e pH môi trường giảm xuống tạo điều kiện thuận lợi cho các loài nấm mốc phát triển Nắm men cũng bắt đầu phát triển (tốc độ yếu hơn nắm mốc)

Trang 10

các loài thuộc Endomycopsis vừa có khả năng chuyên hóa tỉnh bột thành đường, vừa có khả năng chuyển hóa đường đề tạo thành cồn

1.2.Thành phẳng gạo

Lúa gạo 69.2 11 7.3 1.2 0.5 0.9

2 Quy trình cơng nghệ sản xuất 2.1.Sơ đồ quy trình

Trang 11

Bao Cao: Thuc Hanh CNSX Đồ Uống GVHD: Th.S Tran Thi Mai Anh Xử lí ' Nấu chín ' Dé ngudi, rai men en ướt: 10g kg - 2l nước en khô: 10g kg Ủ 2 ngày, bố sung 2l nước ——*> Lên men |£«——— L Lọc Bã Chưng cất

Trang 12

Xử lí: loải bỏ tạp chất (đất, cát ), sau đó đem cân

Nấu chín: phá vở các tế bào của hạt tinh bột, giúp cho en zym amylase tiếp xúc được với tỉnh bột, tạo điều kiện đưa tinh bột về trạng thái hòa tan trong dung dịch Chú ý: tránh nâu quá nhão hay quá khô và cháy khét giúp tạo môi trường lên men tốt sau này

Để nguội: Đánh tơi cơm sau đó để nguội nhằm giảm nhiệt độ của khối hạt xuống tạo điều kiện thích hợp để rắc men nếu nhiệt độ cao các vi sinh vật trong bánh men sẽ chết

Khi nhiệt độ hạ xuống 30-32 ° C ta tiến hành rắc men, lượng men giống, tạo

điều kiện thích hợp cho vi sinh vật hoạt động: độ âm 80-85%, nhiệt độ : 30-32 ° C, thống gió

e_ Đối với men ướt : bố sung 10g/kg tương ứng với 2l nước, sau đó lên men e_ Đối với men khô: bé sung 10g/kg, trộn đều men rồi tiến hành ủ 2 ngày

Mục đích ủ: tạo điều kiện cho vi sinh vật có trong nắm men phát triển, tăng

sinh khối, chuyển hóa đường thành rươu

Biến đổi sau khi ủ: dưới tác dụng của enzym amylase có sẵn trong bánh men hay do nắm mốc tiết ra chuyền hóa tỉnh bột thành đường làm cơ chất cho nắm men sử dụng lên men chuyên hóa đường thành rượu

Sau khi ủ: Ta bỗ sung nước và để yên trong 2,5 đến 3 ngày ở nhiệt độ 25-30 ° C Đây là quá trình ngâm, trong quá trình này các loại vi sinh vật hoạt động tạo ra các sản phẩm trao đôi chất: axit hữu cơ, este, rượu, các cầu tử thơm Tới đây sản phẩm gồm 2 pha rắn và lỏng:

« _ Rắn: Vỏ, tinh bột chưa thuỷ phân - > cần loại bỏ

Trang 13

* Long: Rugu etylic, nudéc, các cấu tử khác: rượu bậc cao, andehyt,

este

Lên men: tiến hành lên men ở nhiệt độ thường Thời gian này sẽ có ba quá trình song song xảy ra, tất nhiên lả mức độ của các quá trình này có khác nhau Ba q trình đó là q trình tăng sinh khối của vi sinh vật, q trình đường hóa và q trình rượu hóa Sự kết hợp của ba quá trình này tạo cho rượp màu sắc, mùi, vị rất đặc trưng

Quá trình tăng sinh khối của vi sinh vật:

s* Quá trình này xảy ra rất nhanh ở giai đoạn đầu lên man, khi ta cho bánh men vào nguyên liệu Sư phát triển mạnh của vi khuẩn ở giai đoạn này kéo theo sự tạo thành một số acid hữu cơ Kế quả là Ph môi trường giảm xuống tạo điều kiện thuận lợi cho các loải nam, mốc phát triển Song song đó các loài nắm men bắt đầu phát triển, tuy sự phát triển của chúng có yếu hơn sự phát triển của nắm mốc

oy % Các loại nấm mốc chi phat triển trong giai đoạn đường được tạo thành hay là cuối giai đoạn nắm mốc phát trién

Q trình sinh hóa:

Trang 14

Do sự phát triển của nấm mốc và nam men Endomycopsis, tỉnh bộ được chuyển hóa thành đường Các loài nắm mốc và nắm men này trong quá trình phát triển tạo ra rất nhiéu enzym amylase va glucoamylase Các enzym này hoạt động rất thuận lợi trong giai đoạn đầu và được kéo dài suốt thời gian này Bản chất của các enzym này là các enzym cảm ứng, do đó nguyên liệu là loại có chứa nhiều tỉnh bột, kích thích quá trình sinh tổng hợp rất mạnh mẽ Điểm quan trọng thứ hai cần đề cập đến là các enzym này chịu sự điều khi63n bởi sản phẩm cuối cùng là glucose Bình thường thì glucose sẽ ức chế quá trình thủy phân tinh bột Nhưng các loài nắm méc Mucor rouxei, Rhizopus delemar, các loại nấm men thuộc Endomycopsis vừa có khả năng sinh tổng hợp enzym amylase, glucomylase vừa có khá năng chuyển hóa đường thành cồn Mặt khá các loài nắm men Saccharomyces cũng rất tích cực chuyển hóa đường glucse thành cồn Kế quả là lượng đường glucose chyên hóa thành bao nhiêu, ngay lập tức được chuyên hóa thành cồn, một phần phục vụ cho sinh sản và phát triển của chính các lồi vi sinh vật đó Do đó trong khối lên men này thường không xảy ra cơ chế kìm hãm ngược boi glucose

Q trình chuyển hóa đường thành cồn: e Quá trình này được thực hiện bởi:

* Saccharomyces sp * Mucor va Rhizoup sp * Endomycopsis sp

«Trong đó các loài nấm men Saccharomyces dong vai tro cơ bản, chuyển hóa đường để tạo thành rượu etylic và CO; CO; sinh ra trong quá trình lên men sẽ tạo thành bọt khí bám vào bề mặt nắm men và làm các tế bào nắm men nổi lên trên, khi lên đến bề mặt, bọt khí vỡ ra và tế bào nấm men lại chìm xuống tạo ra sự đảo trộn giúp quá trình lên men được tốt hơn

Trang 15

e Song song véi qua trinh nay 1a cdc quá trình chuyển hóa đường, các acid hữu cơ thành các sản phâm phụ khác

e_ Điều đặc biệt lưu ý là tất cả các q trình chuyển hóa được xảy ra xen kẽ, hỗ trợ nhau và tạo nên một quá trình chung hài hòa., đề cuối cùng ta tạo ra sản phẩm không chỉ có nước và cồn mà là hỗn hợp sản phẩm bao gồm nhiều thành phần khác nhau

e_ Sản phâm sau quá trình lên men: cồn là chủ yếu ngoài ra cịn có aldehyd, acid lactic, acid acetic, các rượu cao phân tu( propanol, isopropanol ) Lọc:

Hỗn hợp sau khi lên men tồn tại theo 3 pha: Rắn, lỏng, khí (pha khí chiếm rất ít, khơng đáng kế) Mục đích của giai đoạn này là tách pha lỏng (rượu là chủ yếu, các cầu tử thơm, este, axit hữu cơ, .) ra khỏi pha rắn (bã, vỏ quả, vỏ hạt )

Chưng cất: mục đích thu được rượu có độ cồn cao hơn, loại bỏ tạp chất Chưng cắt dựa trên nguyên tắc độ bay hơi của các chất khác nhau thì khác nhau Đầu tiên là sự bay hơi của aldehyt, este sau đó đến côn rồi acid hữu cơ và cuối cùng là các rượu cao phân tử

Trang 16

15/09 3.31 7 16/09 3.34 6 5Ö - Sử dụng men khô Ngày pH Độ brix 11/09 3.25 13.2 12/09 3.58 10.5 15/09 3.67 6 16/09 3.69 6.5 « _ Men khơ : thể tích V=1510ml * Men wot: thể tích V=1750ml s* Độ côn: e men khô: 10% e _ men ướt: 9,7% 4 Nhận xét

Từ kết quả theo dõi qua các ngày ta thấy * Dung men ướt:

e Độ Brix của dung dịch lúc đầu thấp sau đó tăng lên từ từ rồi giảm xuống Điều này có thể giải thích do tác dụng của enzym amylase phân cắt tinh bột thành đường làm cho nồng độ chất khô trong dung dich tang lên, sau là quá trình lên men chuyển hóa đường thành rượu dưới tác dụng của nắm men nên nồng độ chất khô lại giảm xuống

e_ Về pH: lúc đầu pH có xu hướng giảm xuống do sự phát triển mạnh của vi khuận ở giai đoạn này tạo thành một số acid hữu cơ như acid acetic,

Trang 17

acid lactic dẫn đến kết quả pH giảm xuống tạo điều kiện thuận lợi cho các nắm men, nắm mốc phát triển Sau giai đoạn này pH có xu hướng tăng lên do sự tạo thành rượu

* Dung men khô:

e_ Độ Brix của dung dịch lúc đầu cao do chỉ bổ sung men khơ khơng có nước nên nồng độ chất khô cao, rồi sau đó có sự tạo thành của rượu nên nồng độ chất khô giảm xuống và sau khi châm nước nồng độ chất khô ngày càng giảm do sự tạo thành rượu ngày càng nhiều

Trang 18

Bai 2: SAN XUAT RUQU CHUNG CAT- SU DUNG ENZYME THUC HIEN QUA TRINH DUONG HOA

1.Téng quan

1.1 Tổng quan về nguyên liệu 1.11 Gạo

Gạo là một sản phẩm lương thực thu từ

cây lúa Hạt gạo thường có màu trắng, nâu hoặc

đỏ thẫm, chứa nhiều dinh dưỡng Hạt gạo chính là nhân của thóc sau khi xay để tách bỏ vỏ trấu Hạt gạo sau khi xay được gọi là gạo lứt hay gạo lật, nếu tiếp tục xát để tách cám thì gọi là gạo xát hay gạo trắng Gạo là lương thực phổ biển của gần một nửa dân số thế giới

Gạo trắng hạt dài, đều, thô, không làm giàu

Giá trị dinh dưỡng trên 100 g (3,527 oz) Năng lượng 370 kcal 1530 k] Cacbohydrat 79g - Đường 0.12 g

- Xơ tiêu hóa l.3 g

Trang 19

Bao Cao: Thuc Hanh CNSX Đồ Uống GVHD: Th.S Tran Thi Mai Anh Sat 0.80 mg 6% Magié 25 mg 7% Phốtpho 115 mg 16% Kali 115 mg 2% Kém 1.09 mg 11%

_ Cac phan tram 1a theo khuyên cáo của Mỹ cho người lớn

1.1.2 Enzyme

Cac enzyme su dung trong q trình đường hóa

- Enzyme a- amylase (enzyme dich hda): Enzyme a-Amylase 1a protein có phân tử lượng thấp, thường nằm trong khoảng 50.000 đến 60.000 Dal Có tác dụng lên nối ø- 1,4 glucozit ở vị trí bất kì, nhưng tập trung vào giữa mạch amyloza và amylopctin Dưới tác dụng của enzyme, tỉnh bột chuyển hóa thành dextrin + maltoza + I ít glucoza Lúc này độ nhớt của tinh bột giảm nhanh

Nhiệt độ hoạt động của enzyme:

Y a-amylase cua vi khuan hoat dong tốt ở nhiệt độ t6i wu = 95-100 °C *_ z- amylase của mầm thóc hoạt động tốt ở nhiệt độ tối ưu = 73-76°C Y z- amylase của Asp.ozyzae hoạt động tốt ở nhiệt độ tối ưu =50-55 °C => pH của môi trường và nhiệt độ tối ưu cũng phụ thuộc vào nhau: nhiệt độ tăng

Trang 20

- Enzyme B- amylase (enzyme đường hóa): có tác dụng lên nối z- 1,4 glucozit, nhưng bắt đầu từ vịng khơng có nhóm khử và cắt theo hai gốc glucoza một trong phân tử của amyloza và amylopectin Sản phẩm tạo thành là maltoza, có khả năng biến đổi amyloza hoàn toàn thành maltoza, còn với amylopectin chỉ cắt được 50- 55%

pH tối ưu = 4.8 (/đ- amylase của mầm thóc)

- Enzyme glucose amylase: cũng là một exoenzyme, cắt liên kết 1,4-glucoside va 1,6-glucoside, mỗi lần phân cắt tạo một phân tử glucose

1.1.3 Men giống

Saccharomyces cerevisiae la một chỉ nam men được sử dụng rộng rãi trong ngành thực phẩm như làm bánh mì, sản xt cơn Saccharomyces có nghĩa là nám đường và là loại vị sinh vật duy nhất được sản xuất với

quy mô rất lớn trên thế giới Nguyên liệu chính dùng

để sản xuất men là mật rỉ, ngoài ra một số hóa chất khác sẽ được cung cấp trong q trình ni cấy men đề bổ sung các chất dinh dưỡng mà mật ri không đủ

Đa số các tế bào có hình ovan, kích thước (3 - 8) x (5 — 12) um, sinh san theo lối nay chồi và tạo thành bào tử Saccharomyces cerevisiae sinh ra enzyme invectara có khả năng khử đường sacaroza thành fructoza và glucoza Nguồn dinh dưỡng cacbon của S.cerevisiae là đường, cồn và acid hữu cơ, những tác nhân sinh trudng la acid pantotinic, biotin, mezoinozit, thiamin va piridoxin

S.cerevisiae có đặc tính riêng về khả năng tạo cồn, chịu sunfit, tổng hợp các cấu tử bay hơi và các sản phẩm thứ cấp tạo ra cho sản phẩm có mùi vị đặc trưng riêng biệt

G giai doan cudi lén men Saccharomyces cerevisiae két lang nhanh va lam trong dịch rượu

Trang 21

Báo Cáo: Thực Hành CNSX Đô Uống GVHD: Th.S Trần Thị Mai Anh

Giai đoạn cuối cùng của quá trình lên men các tế bào Šaccharomyces cerevisiae thường bị già, không tiếp tục chuyển đường thành cồn và bị chết rất nhanh

1.2 Tổng quan về sản phẩm

Rượu được chiết xuất từ gạo hoặc tinh bột, điều đó sẽ giúp ích cho cuộc sống của chúng ta và đồng thời cũng giúp ích rất nhiều cho những ứng dụng trong công nghệ chế biến thức ăn và được phẩm

Công nghệ sản xuất rượu đã và đang là một công nghệ chuyên nghiệp lâu

đời ở nhiều nước trên thế giới Phương pháp truyền thống là dựa vào kinh nghiệm

và kỹ thuật thủ công Nhưng ngày nay, những thiết bị tự động hoá và sử dụng enzyme công nghiệp đang dần thay thế và đồng thời kiểm soát được chất lượng cũng như cải thiện được vấn đề vệ sinh trong quá trình sản xuất

Trang 22

2.2 Thuyét minh quy trinh

Gạo được xay nghiền có đường kính khoảng Imm, quá trình này nhằm phá vỡ cấu trúc màng tế bào thực vật, tạo điều kiện giải phóng hạt tinh bột khỏi các mô, dé khi đưa vào nấu với nhiệt độ phù hợp biến tinh bột thành đạng hòa tan

Nấu với tỉ lệ nước:gạo(4,5:1), mục đích của q trình nấu là phá vỡ màng tế bào của các hạt tinh bột, giúp cho amylase tiếp xúc được với tỉnh bột, tạo điều kiện đưa tinh bột về trạng thái hòa tan trong dung dịch

Trước khi nấu ta bổ sung enzyme øz - amylase (termamyl) 0.3ml/kg và gia nhiệt đến 83°C, giữ nhiệt trong 40-45 phút với mục đích là hồ hóa tinh bột, sau đó nâng nhiệt lên 95°C, giữ nhiệt trong 5 — 10 phút để enzyme øz - amylase hoạt động (Ủ„=95 °C) (quá trình dịch hóa) Sau đó hạ nhiệt xuống 60-67 °C, cho enzyme glucose amylase (saczyme) 0.5ml/kg, giữ nhiệt trong 60 phút, để cho enzyme này thực hiện q trình đường hóa đưa về dudng glucose cho nam men sử dụng

(„60-67 °C) (quá trình đường hóa)

Thơng thường ta hồ hóa xong mới cho enzyme ø- amylase vào để dịch

hóa, nhưng nếu làm như vậy, dịch cháo sẽ rất đặc, khó khuấy trộn, dễ bị hồ hóa

cục bộ, q trình đường hóa sẽ không đều Nhưng cho vào trước khi gia nhiệt sẽ dẫn đến một phần enzyme sẽ mất hoạt tính

Làm nguội nhanh về nhiệt độ thường (30°C) đề tạo điều kiện sốc nhiệt, có

thể tiêu diệt thêm một phần vi sinh vật cịn sơng sót sau quá trình nấu

Sau khi làm nguội ta cho men giống vào (không cho khi nóng vì nhiệt độ q cao sẽ tiêu diệt nam men) đề thực hiện quá trình lên men

Hàm lượng men giống cho vào phải đủ mật độ là 10 — 12*10Êtb/ml 3 Kết quá

> Nguyên liệu (gạo) : 0.5kg

Trang 23

Nước : 2,25 lít

Hàm lượng tỉnh bột tối đa là 75%

Enzyme a - amylase: 0.1125 ml Enzyme glucose amylase: 0.1875ml

Thể tích dịch: V=2.6 lít =2600ml

Lượng men giống cho vào:

VV

WV

C4n 0.005g nam men + 50ml H,O đem đi đếm số tế bao

Số tế bào trung bình đếm được trong 4 ô lớn pe SAO =84 tb

X

> Số tế bào nấm men đếm được trong Iml: a(tb/ml)=b.25.10°= 84.25 10*=tb/ml

> Số tế bào nắm men có trong 0.005g : a.50= 21 50= 1,05 10'° tb > Số tế bào nắm men có trong 1g : 1,05 10'°/ 0.005 = 2,1 10" tb

> Số tế bào nắm men cần có trong 2,6 lít dịch thu duge: 12 10°.2600=3,12 10'° tb

Vậy số lượng men giống cần cho vào là:

Y 3,12 10'°/2,1 10’? = 0.1486g Kết quả theo dõi pH và độ Brix của sản phẩm

Trang 24

Biểu Đồ Thay đổi Độ Brix va pH trong qua

trình lên men 18 16 14 12 10 EIpH Độ Brix 1 2 3 4 5 6 Ngay

D6 con chung cất được là: 4% vol 4 Nhận xét

Qua các ngày theo đối độ pH và độ brix của sản phẩm ta thấy rằng độ pH và độ Brix đều giảm Độ brix giảm là do nắm men trong quá trình lên men đã sử dụng

cơ chất là đường pH giảm là do khi lên men bên cạnh sản phâm chính là rượu thì

cịn có sản phẩm phụ là các axit như axit acetic, lactic, citric, pyruvic nên sẽ làm cho pH giảm Ta cũng nhận thấy rằng những ngày đầu độ brix sản phẩm giảm nhưng ít chứng tỏ giai đoạn đầu nắm men mới chỉ tiếp nhận lượng đường có trong dịch, sự lên men xảy ra rất chậm, lượng đường sử dụng lên men không đáng kế Giai đoạn tiếp theo là giai đoạn lên men chính, sự phát triển của nắm men và sự lên men tăng nhanh và đạt cực đại nên độ brix giảm mạnh Giai đoạn sau thì cơ chất cịn ít nên q trình lên men xảy ra chậm

5 Tài liệu tham khảo

1 Giáo trình thực hành Cơng nghệ sản xuất đô uống, Trường DHCN TP HCM 2 Giáo trình Cơng nghệ đồ uống, trường ĐH Công Nghiệp TP HCM, 2008

3 http://vi wikipedia.org

Trang 25

Trang 26

Bài 3: xác định độ cồn của dịch giấm chín Ta sử dụng cồn kế

Côn kế đo dựa trên tỉ trọng của dung dịch

Trong dịch giắm chín ngồi cồn cịn có đường sót, tinh bột sót, sản phâm phụ của quá trình lên men nên việc xác định độ cồn bằng cồn kế chỉ mang tính tương

đối Cách đo độ cồn: 100ml dịch giấm chín Chưng cất ' 100 dịch cất ' Lam lanh 20°C Do d6 cén

Chú ý lấy chính xác 100 mi dịch giấm chín rồi thêm 100 ml nước rồi lắp vào

hệ thống chưng cất tiến hành chưng cất Sau đó lấy chính xác 100 ml địch cất ( có

Trang 27

thé lấy 80 ml địch cất và bổ sung thêm nước đến 100 ml vì trong quá trình chưng cất cũng chỉ được khoảng 80 ml cồn nếu tiếp tục chưng cắt cũng chỉ được nước) Sau đó làm lạch địch này xuống 20°C đề đo độ cồn (cồn kế được đo & 20°C)

e_ Kết quả: men khô: 10%

e men ướt: 9,7%

e _ Bài đường hoá bằng enzym: Độ cồn chưng cất được là: 4% vol Cách nấu syrup:

Cho nước và đường vào nồi gia nhiệt đến sôi (chú ý chỉ sôi nhẹ, nếu sơi mạnh

sẽ có hiện tương đường bám quanh thành nồi gây hao hụt) Sau đó cho acid citric

vào, đậy nắp bắt xuống bếp, giữ nhiệt 85-90°C trong 45 phút Nếu không giữ ồn

Trang 28

Bai 4: NUOC GIAI KHAT TRICH LY ( Tra xanh)

1.Téng quan

1.1 Tổng quan về nguyên liệu 1.1.1 Lá trà xanh

Phân loại khoa học

Gidi (regnum): Plantae

(khéng phan hang): Angiospermae (không phan hang): Eudicots

- B6 (erdo): BO (ordo)

- Ho (familia): Theaceae La ché Camellia sinensis - Chi (genus): Camellia

- Loai (species): C sinensis

Cây trà hay cây chè có tên khoa học là Camellia sinensis 1a loai céy ma lá và chồi của chúng được sử dụng để sản xuất trà Các danh pháp khoa học cũ còn có Thea bohea va Thea viridis

giới, trong các khu vực nhiệt đới và cận nhiệt đới Nó là loại

cây xanh lưu niên mọc thành bụi hoặc các cây nhỏ, thông thường

được xén tỉa để thấp hơn 2 mét khi được trồng đề lấy lá Nó có

rễ cái dài Hoa của nó màu trắng ánh vàng, đường kính từ 2,5—

4 em, với 7 - 8 cánh hoa Hạt của nó có thể ép để lấy dầu

Lá của chúng dài từ 4-15 cm và rộng từ 2-5 cm Lá tươi chứa khoảng 4% caffein Lá non và còn các lá có xanh lục nhạt được thu hoạch để sản xuất chè khi mặt bên dưới của chúng còn các sợi lông tơ ngắn màu trắng Các lá già có màu lục sim Cac độ tuôi khác nhau của lá chè tạo ra các sản phẩm chè khác nhau về chất lượng, do thành phần hóa học trong các lá này là khác nhau Thông thường, chỉ có

Trang 29

lá chồi và 2 đến 3 lá mới mọc gần thời gian đó được thu hoạch dé chế biến Việc thu hoạch thủ công bằng tay diễn ra đều đặn sau khoảng 1 đến 2 tuần

4 Một số các biến thể khác nhau cúa C sinensis được sứ dụng để sản xuất - Biến thể Assam

Phần lớn chè được sản xuất từ biến thể này (đôi khi nó được gọi là C

sinensis assamica hay C assamica) Nó là loại cây nhỏ (thân đơn) với lá to Trong tự nhiên, nó cao tới 6 - 20 mét (20-65 ft); trong các khu vực trồng đề lấy lá người ta xén tỉa nó xuống chỉ cịn cao trên hơng người Ở những vùng đất trũng, yêu cầu của nó là có độ ẩm cao (mưa nhiều) nhưng thoát nước tốt Những cây trồng này không có khả năng chống chịu được điều kiện quá nóng Cây chè Assam được phát hiện năm 1823 (mặc dù nó đã được người dân địa phương sử dụng làm đồ uống từ trước đó) là một trong hai cây chè gốc Tat cả các cây chè Assam và phần lớn chè Ceylon (Tích Lan, nay là Sri Lanka) có nguồn gốc từ cây này Chè Assam tạo ra hương vị ngọt của đồ uống, không giống như hương vị của các loại chè Trung Hoa khác

- Biến thể Trung Quốc

Chè Trung Quốc (đôi khi gọi là C sinensis sinensis) 1a loài cây lá nhỏ, nhiều thân mọc thành bụi rậm cao tới 3 mét Đây là loại chè đầu tiên được phát hiện, ghi chép lại và sử dụng để sản xuất chè có từ hơn 3000 năm trước, nó dùng để sản xuất nhiều loại chè nỗi tiếng

- Bién thé Cam pu chia

Chè Cam pu chia đôi khi được gọi là C sinensis parvifolia La cia ching về kích thước nằm giữa kích thước của lá chè Assam và lá chè Trung Quốc; nó là một

loại cây nhỏ với một số thân Đôi khi người ta coi biến thể này là sản phẩm lai

Trang 30

hai là chè đồn điền, cây thấp, lá nhỏ, thường phải ủ rồi mới nấu nước Hạng nhất là chè búp, có khi gọi văn vẻ là "chè bạch mao" hay "chè bạch tuyết" nếu búp có lơng tơ trắng Hạng nhì là hai lá chè kế Lá thứ tư, thứ năm là chè hạng ba Những lá dưới nữa thì dùng làm chè mạn, rẻ hơn cả

Thời Pháp thuộc vào thập niên 1930 chè được đem trồng một cách quy mô trên cao nguyên vùng B'lao và Djiring và vùng này sau chiếm địa vị là vựa chè

Tính đến năm 1960, Việt Nam xuất cảng 2.000 tấn chè mỗi năm Đến năm 2007 thì sản lượng chè của Việt Nam đã vượt một triệu tn, canh tác trên 125.000 hecta

% Tác dụng của trà xanh

Trà nói chung, và Trà xanh (green tea) nói riêng, khơng những là một thứ thức

uống để giải khát, mà còn là một y-dược rất hữu ích để bảo vệ sức khỏe của con

người với các công dụng sau:

e_ Trà xanh có tác dụng điều trị các bệnh viêm khớp và bệnh tim

e_ Những chất Polyphennol có trong trà xanh có vai trị quan trọng trong việc phòng chống bệnh ung thư

e Catechin hợp chất tạo nên vị đắng của trà xanh có cơng dụng hữu hiệu trong việc tiêu diệt hầu hết các những loại vi khuẩn gây ngộ độc thực phẩm và giải trừ luôn những độc tố đo vi khuẩn tiết ra cụ thể đây là độc tố Veratoxin của Ecoli -157, giảm nguy cơ đột biến gen giảm cholesterol ¢ Caffeine giip ban tinh táo giảm mỗi mệt, buồn ngủ, dùng như chất lợi tiểu e Vitamin C giảm stress, ngừa cảm cúm

e Acid Gama-AminoBityric(GABA) ha huyét áp

e Flavomoid tăng cường sức khoẻ thành động mạch, ngừa hôi miệng e Polysaccharide ngira tang duong mau Fluoride ngtra sau rang ¢ Vitamin E như là chất chống oxy hoá duy trì tuổi xuân

e Theanine tăng cường khâu vị

e Giảm bớt rủi ro về đột qụi (Reducing the risk of stroke)

Trang 31

e _ Ngăn ngừa binh xdép xuong (Preventing osteoporosis) e Giảm bớt DNA bị hư hai (Reducing DNA damage)

e Ngăn ngừa sự hiểm nguy đo máu déng cuc (Preventing dangerous blood clotting)

+ Một vài hình ánh về chè

Trái cây chè xanh Nước chè xanh 1.1.2 Acid citric (CsHs07) hodc acid limonic

Trong tự nhiên, chúng có nhiều trong quả chanh, lựu, cam, thơm hiện dùng là sản phẩm tổng hợp sinh học.Được ứng dụng trong công nghệ thực phẩm nói chung và ngành đồ uống nói riêng, trong nhiếp ảnh, y học, nghề in

Acid citric đùng trong thực phẩm phải ở dạng kết tinh khan hoặc ngậm một phân tử nước, không màu, không mùi Loại khan phải chứa khơng ít hơn 99, 5% acid citric, 1g acid citric tan trong 0, 5ml nước hoặc trong 2ml ethanol

Khi hòa tan trong nước cất dung dịch phải trong suốt, vị chua tinh khiết, khơng có vị lạ

Khả năng tan trong 100ml HạO

T° H,0 (°C) 0 12 | 20 | 40 | 60 | 100

Luong acid citric tan 190 | 200 | 210 | 225 | 242 | 282 được (g/100ml)

Trang 32

- _ Tách từ phế thái của công nghệ sản xuất nicotin - _ Tách từ rau quả như: cam, chanh

1.1.3 Dịch syrup

Đường là một trong những thành phần chủ yếu nhất của nước giải khát, nó

điều chỉnh và làm hài hòa giữa vị chua, độ ngọt và mùi thơm của nước uống Tùy thuộc vào loại nước giải khát mà lượng đường cho vào có thể khác nhau

Đường trước khi pha vào nước giải khát nấu thành dạng syrup đạt độ Brix

1a 64-65 “Bx

Syrup được chuẩn bị bằng cách hòa đường với lượng nước xác định rồi đem đun tới sôi Quá trình nấu syrup gồm 3 giai đoạn:

-_ Hòa tan đường trong nước - Đun Sơi

- _ Chuyến hóa đường thành syrup

Khi đun sôi sẽ tiêu diệt được lượng vi sinh vật có trong đường và nước, mặt khác tạo điều kiện tốt để biến saccharoza thành glucoza va fructoza

Q trình chuyển hóa saccharoza thành đường chuyển hóa dựa trên phản ứng thủy phân khi đun nóng dịch trong môi trường axit yếu:

Ci2H2011 + HạO — C¿H¡¿O¿ + C¿H¡2O¿

Muốn nhận được syrup có chất lượng cao và bảo quản được lâu ta cần biến sacchroza thành đường chuyên hóa thì sau khi nấu sơi tìm khoảng 10-15ph ta cho Acid citric 0,01% Sau đó giữ ở 85-90 °C trong 45ph

Sau đó ta để nguội và đem cất lạnh đề hạn chế sự tổn thất, giữ được hương thơm

1.2 Tổng quan về sản phẩm

Nhu cầu nước uống ngày một tăng theo sự tiến bộ và phát triển của xã hội loại người vì thế mà mặt hàng nước giải khát đang là mặt hàng cạnh tranh trên cả nước, nhiều nhà máy sản xuất nước giải khát lần lượt được hình thành và tung ra thị trường nhiều sản phẩm đa dạng và phong phú Nước giải khát cũng có nhiều loại trên thị trường như nước giải khát trích ly, nước giải khát lên men, nước giải

Trang 33

Bao Cao: Thyc Hanh CNSX Đô Uống GVHD: Th.S Tran Thi Mai Anh

khát pha chế Trong đó nước giải khát trích ly đang là mặt hàng thu hút một lượng lớn người tiêu dùng ở mọi lứa tuổi đo nó tạo cảm giác mát, sảng khoái khi dùng mà cịn có nhiều cơng dụng phịng chữa bệnh vì được trích ly từ các loại nguyên liệu tự nhiên

Trên thị trường hiện nay có rất nhiều loại nước giải khát trích ly như trà xanh O”, trà bí đao, nước sâm, rong biển Có nhiều phương pháp trích ly khác nhau nhưng chủ yếu là sử dụng nhiệt

Trong đó trà là nước giải khát thông dụng của mọi người nhất ở Đông Nam Á vì những lợi ích của trà mang lại cho sức khỏe con người lẫn về y học Trà có thể được trích ly bằng phương pháp đun sơi sau đó được pha chế khá đơn giản với syrup va acid citric dé tao vi ngọt, chua thích hợp cho san phẩm theo tỉ lệ thích hợp Nước trà xanh được sử dụng nhiều trong những ngày hè nóng bức đem lại sự

mát mẻ, dễ chịu khi thưởng thức

2 Quy trình công nghệ 2.1 Sơ đồ quy trình Xử lý '

Tríchly |q—— Đun sôi I0ph

: ' '

C chủ Rửa | „| Làmkhô Chiết chai

Đóng nắp

Trang 34

2.2 Thuyết mình quy trình

> Lá trà xanh sau khi mua về ta xử lý bỏ cọng, rửa sạch rồi đem cân để tính lượng nước cho vào trích ly Lượng nước cho vào trích ly với tỉ lệ là 100g nguyên liệu : 2 lít nước

Trích ly : khi nước sơi ta vị nát lá trà cho vào rồi tiến hành đun sôi trong khoảng 10 phút đề trích ly hương cũng như các chất có trong tra

Sau khi đun sôi ta đem đi lọc đề thu lay dịch trong, loại bỏ bã Sau đó đo độ

Brix của dịch thu được đề tiến hành phối ch

Phối chế : bổ sung dich syrup va acid citric dé tạo vị ngọt và chua hài hòa cho sản phâm Qúa trình phối chế tiến hành nhiều lần để tìm ra cơng thức pha chế thích hợp cho sản phẩm Độ Brix thích hợp cho các sản phẩm nước

giải khát thường là 8-9 ”Bx hoặc 13-14 °Bx

Chiết chai : chai phải được rửa sạch và làm khô rồi mới rót nước sau khi đã

pha chế vào để đảm bảo tính vệ sinh và không nhiễm vi sinh vật

Sau đó tiến hành đóng nắp, cần đảm báo nắp thật chặt để không khí cũng như vi sinh vật không nhiễm vào

Trang 35

> Thanh trùng : ở nhiệt độ 100 °C trong vong 40 — 50 ph nhằm mục đích tiêu diệt vi sinh vật giúp bảo quản sản phẩm được lâu

3 Kết quả

4 * Khối lượng lá trà xanh ban đầu là 200g — lượng nước trích ly là 4 ae

lít

oy % Độ Brix ban đầu của dịch tra: 1°Bx Độ Brix của dịch Syrup: 66 °Bx

oe %

oy

% Do Brix mong muốn của sản phẩm là: 9 °Bx Ta có:

N⁄ 57

6“ N

Mỗi lần pha chế với 100ml dịch trà— lượng địch syrup cần sử dụng là:

100 57 100x8

— =— >V=

V 8 = 14,035 ml

Acid citric được pha loãng để phối chế dễ dàng hơn vì chỉ cần một lượng acid nhỏ, nếu nồng độ quá cao thì rất khó khống chế độ chua của sản phẩm

s* Sau nhiều lần pha chế ta có được cơng thức như sau:

Pha loãng dịch theo tỉ lệ 3:1 (75 mI dịch : 25ml nước) do nước trà đậm đặc, vị đắng còn nhiều nên pha lỗng đề giảm bớt Vì vậy tỉ lệ nước trích ly lúc đầu sẽ tăng lên 100g nguyên liệu : 2,3 lít nước

Với 100ml dịch ta phối chế với 13ml dịch syrup + 0,07g Acid citric Độ

Trang 36

chứng tỏ ta không cần sử dụng chất bảo quản vẫn có thể giữ sản phẩm không bị hư hỏng Sau khi nếm thử thấy sản phẩm vẫn đạt yêu cầu, có vị chát, đắng của trà, vị chua, ngọt vừa phải nhưng có thêm vị nấu (do quá trình thanh trùng ) làm cho sản phâm có vị khác hơn so với ban đầu ban đầu

5 Tài liệu tham khảo

1 Giáo trình thực hành Công nghệ sản xuất đô uống, Trường DHCN TP HCM Giáo trình Cơng nghệ đồ uống, trường ĐH Công Nghiệp TP HCM, 2008

http:/vi.wikipedia.org

http:/www.vietgiaitri.com/suc-khoe/2009/1 1/tac-dung-cua-la-che-xanh/

http://www.saga.vn/view.aspx?id=689

http://www.khoahoc.net/baivo/buithetruong/timhieuvetraxanh.htm

http://www bacninh gov vn/Story/XaHoiPhatTrien/SucKhoe/2010/9/22446.html

Trang 37

Bài 5: Chuân bị môi trường nhân giông nam men Bia

* Quy trình san xuất môi trường dinh dưỡng cho nắm men

Nguyên liệu (matl dai mach 100g)

=e Xay, nghién 52-53°C;10 phut 65-63°C:30 phut 72-75°C:20 phút 76-78°C Nau (NL/nước:1/5) Lọc Chỉnh độ Brix = ( 14-14,5) Phân phôi vào dụng cụ tb Bao gói Hập tiệt trùng (121°C, 20 phut)

* thuyét minh quy trinh

Trang 38

- Nau: qua trinh nau malt được chia thành 3 giai đoạn:

+ Giai đoạn 1: nâng nhiệt độ nồi malt lên 52-53°C và giữ ở nhiệt độ này

trong 10 phút Đây là nhiệt độ thích hợp cho q trình đạm hóa nhằm phân hủy protein thành các acid amin cung cấp chất dinh đưỡng cho nắm men hoạt động sau này

+ Giai đoạn 2: nâng nhiệt độ lên 63-65°C và giữ trong 30 phút Mục đích của quá trình này là tạo điều kiện tốt cho enzym ƒ-amylase hoạt động thủy phân tinh bột thành đường cho nắm men sử dụng vào hoạt động sống của chúng sau này

+ Giai đoạn 3: nâng nhiệt độ lên 76-78°C và giữ ở nhiệt độ này trong 20 phút Đây là nhiệt độ lí tưởng cho enzym ơ-amylasa trong malt hoạt động để thủy phân tinh bột trong malt thành đường

Sau quá trình nấu như trên, tiếp tục nâng nhiệt độ lên 76-78°C rồi đem đi lọc

- Lọc: nhiệt độ mang đi lọc là 76-78°C nhằm mục đích thúc đây nhanh quá trình lọc và đồng thời cũng giúp các enzym trong mail tiếp tục thủy phân tỉnh bột sót thành đường Tuy nhiên nhiệt độ lọc khơng được q 80°C vì sẽ vô hoạt enzym

Sau khi lọc xong sẽ điều chỉnh Brix của dung dịch đến 14-14,5 dé tạo điều

kiện thuận lợi cho nắm men hoạt động Nếu Brix thấp hơn thì khơng đú chất dinh

dưỡng cho nắm nmen sử dụng còn nếu cao hơn sẽ ức chế hoạt động của nắm men - Phân phối vào dụng cụ chứa: dung dịch sau khi lọc được phân phối vào hai ống nghiệm, mỗi ống chúa 10 ml và một erlen dung tích 250 ml chứa 100ml dung dịch

- Tiệt trùng: các dụng cụ chứa sau khi bao gói được mang đi tiệt trùng nhằm mục đích tiêu diệt tất cả các vi sinh vật còn lại trong môi trường, đảm bảo

Trang 39

điều kiện vô trùng để không làm hư hỏng môi trường, giúp cho nắm men hoạt

Trang 40

Bai 6: NUOC GIAI KHAT LEN MEN

1 Téng quan

1.1 Téng quan vé nguyén liéu > Nho

Nho là một cây dạng dây leo thân gỗ Các loài cây này thuộc về họ Vitaceace, được trồng nhiều ở các nước Châu Âu nhất là ở Pháp và Mĩ Ở nước ta nho cũng đã được trồng ở một số tỉnh miền Trung Quả

nho mọc thành chùm từ 6 đến 300 quả,

chúng có màu đen, lam, vàng, lục, đỏ-tía

hay trắng Khi chín, quả nho có thể ăn tươi hoặc được sấy khô để làm nho khô, cũng như được dùng đề sản xuất các loại rượu vang, thạch nho, nước quả, dầu hạt nho

Hiện có rất nhiều loài nho đang tồn tại, chúng bao gồm:

- Vitis vinifera, loài nho dùng để sản xuất rượu vang ở châu Âu, có nguồn gốc ở châu Âu lục địa

- Vitis labrusca, loài nho dùng để ăn tươi và sản xuất nước nho tại Bắc Mỹ, có nguồn gốc ở miền đông Hoa Kỳ và Canada

- Vitis riparia, loài nho hoang đại ở Bắc Mỹ, có nguồn gốc ở miền đông Hoa

Kỳ kéo dai về phía bắc tới Quebec

- Vitis rotundifolia, nho xa, duge str dung lam mitt va rugu vang Co nguồn gốc ở miền đông nam Hoa Kỳ

- Vitis aestivalis gisng Norton (AKA Cynthiana) duge ding dé sản xuất rượu vang

- Vitis Lincecumii, Vitis berlandieri, Vitis cinerea, Vitis rupestris: Được sử dung dé lai ghép nhằm tạo ra các giống nho chống chịu bệnh, dưới dạng thân ghép

(thân rễ)

Định dạng
Số trang	89
Dung lượng	17,29 MB