bao cao sinh te bao(co Minh)

TẾ BÀO HỌCV Mục đích, yêu cầu: − Biết cấu tạo của tế bào cần được quan sát − So sánh được sự khác nhau giữa tế bào động vật và thực vật VI Vật liệu: − Kính hiển vi quang học, lam, lamen,

Mục Lục

HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG KÍNH HIỂN VI

TẾ BÀO HỌC

SỰ THẨM THẤU Ở TẾ BÀO

SỰ HÔ HẤP Ở TẾ BÀO THỰC VẬT VÀ CÁC CHẤT CHUYỂN HOÁ

HOẠT ĐỘNG CỦA ENZYME

− Dùng giấy mềm và dai lau nhẹ thị kính, vật kính, bộ phận đèn, gương bàn kính

− Đặt kính hiển vi lệch về bên trái nếu thuận tay phải và ngược lại

− Cho dòng điện đi qua kính hiển vi, ánh sáng sẽ phát ra

− Đặt 2 mắt vào thị kính đồng thời tay vặn đinh ốc thứ cấp lên cho đến khi nhìn

rõ ảnh.Chú ý khi vặn đinh ốc thứ cấp thì vật kính phải ở E4

− Để có ảnh rõ thì sử dụng đinh ốc vi cấp

− Sau khi quan sát xong ta xoay vật kính về E4, hạ đinh ốc thứ cấp xuống, mở kẹp lấy mẫu ra khỏi kính hiển vi, lau khô bàn kính, tắt đèn và đậy kính hiển vi lại

TẾ BÀO HỌC

V) Mục đích, yêu cầu:

− Biết cấu tạo của tế bào cần được quan sát

− So sánh được sự khác nhau giữa tế bào động vật và thực vật

VI) Vật liệu:

− Kính hiển vi quang học, lam, lamen, dao lam, ống nhỏ giọt, nước cất, tăm

− Hóa chất:dung dịch xanh methylen

− Tế bào thực vật: hành tím, lá lẻ bạn, lá sống đời

− Tế bào động vật:tế bào má miệng người

VII) Cách tiến hành và kết quả:

1. Tiến hành:

− Ta dùng dao lam lấy lớp mỏng của vảy hành tím

− Cho vảy hành lên lam có sẵn 1 giọt nước cất sau đó lấy lamen đậy lên

− Đưa lamen lên ống nghiệm để quan sát ta thấy các tế bào vảy hành lần lượt ở vật kính từ E4, E10,E40,E100 và điều chỉnh ốc vi cấp để nhìn rõ ảnh

Vảy hành tím

2. Lá lẻ bạn:

− Ta dùng dao lam cắt đôi lá lẻ bạn

− Dùng dao lam cắt lá lẻ bạn theo chiều ngang từ trên xuống sao cho lát cắt thật mỏng

− Cho 1 giọt nước cất lên lam, cho lé lẻ bạn lên và đậy lamen lại sau đó đặt lên kính hiển vi quan sát lần lượt ở vật kính từ E4, E10,E40,E100 và điều chỉnh ốc

vi cấp để nhìn rõ ảnh của vật

Lá lẻ bạn

3. Lá sống đời:

− Với cách làm tương tự như lá lẻ bạn, ta có 1 tiêu bản của lá sống đời

Lá sống đời

4. Tế bào má miệng người:

− Dùng tăm khui nhẹ bên trong má để lấy tế bào

− Nhỏ 1 giọt xanh mêthylen 0.5% lên miếng lam Sau đó chà cây tăm đã lấy tế bào lên dung dịch xanhmethylen, lấy lamen đậy lên sao cho không thấy bọt khí

− Đặt lam lên kính hiển vi quan sát ở vật kính lần lượt ở E4, E10,E40,E100 và điều chỉnh ốc vi cấp để nhìn rõ ảnh của vật– Tế bào má miệng bắt màu xanh

SỰ THẨM THẤU Ở TẾ BÀO

VIII) Mục đích,yêu cầu:

− Quan sát sự co nguyên sinh, phản co nguyên sinh, sự trương

nước ở tế bàothực vật và động vật, tính thấm của màng

IX) Nguyên, vật liệu:

− Kính hiển vi, lam, lamen, nước cất

− Tế bào máu gà, củ hành tím, củ dền

X) Kết quả:

1. Đối với tế bào vẩy hành:

Bóc biểu bì của củ hành tím, chú ý lấy ởphần có màu tím đậm

Dùng ống nhỏ giọt , nhỏ từ từ 1-2 giọt nước muối 10% ở góc đậy của kínhQuan sát sự co nguyên sinh

Sau đó dùng giấy thấm hết dung dịch nước muối rồi nhỏ nước cất vào quan sát sự phản co nguyên sinh

Tiếp tục nhỏ nước cất vào tiêu bản hành tím thì ta sẽ quan sát được sự trương nước của tế bào củ hành tím

2. Đối với tế bào máu gà:

− Ta lấy máu gà cho vào ống nghiệm 1 chứa dung dịch NaCl

0.9% với thể tích là 1ml và ống nghiệm thứ 2 chứa 1ml dung

dịch NaCl 1.8% (chú ý sau khi lấy máu gà xong cho vào dung

dịch NaCl ngay để tránh máu bị đông)

− Sau 3 phút dùng ống nhỏ giọt rút từ ống nghiệm 1 quan

sát( trộn đều trước khi rút) Lấy một giọt dung dịch ống

nghiệm 2 quan sát (chú ý sau khi lấy một giọt lên kính, phần

còn thừa trong ống nhỏ giọt sẽ bơm trả lại ống nghiệm)

+ Quan sát ống 1: ta thấy các tế bào hồng cầu gà rất rõ ràng

+ Quan sát ống 2: sự co nguyên sinh

− Sau khi quan sát xong, ta cho thêm 1ml nước cất vào ống 2

làm cho nồng độ máu gà giảm xuống còn 0.9% sau 3 phút lấy

1 giọt lên kính mang vật quan sát.Đó là sự phản co nguyên

sinh

Hình dạng một số tế bào hồng cầu phản co nguyên sinh ở ống nghiệm 2 sau khi cho thêm vào ống nghiệm này 1ml nước cất, nông độ dung dịch khoảng 0.9%

− Tiếp tục thêm 2ml nước cất làm cho nồng độ máu gà từ 0.9%

0.45%, sau 3 phút đưa ống nghiệm lên quan sát, chúng ta sẽđược một dung dịch có màu hồng cam Lấy 1 giọt dung dịch

đưa lên kính mang vật quan sát, ta không thấy hồng cầu đâu

Những mảnh hồng cầu bị vỡ sau khi nồng độ của ống

nghiệm 2 còn khoảng 0.45%

3. Tính thấm của màng:

a) Tác dụng của nhiệt độ:

− Cắt củ dền thành 4 miếng có kích thước đều bằng nhau

(0,5x0,5x2)cm Rửa các miếng dền dưới vòi nước (rồi ngâm

khoảng 5’ trong becher hoặc đĩa petri) để loại bỏ hết các sắc tố

của các tế bào bị bể, sau đó ngâm trong nước lọc

− Chuẩn bị 4 ống nghiệm chứa 15ml nước lọc ở các nhiệt độ

− Cho vào mỗi ống 1 miếng dền Khoảng 30 phút sau gắp miếng

dền ra khỏi ống nghiệm, dung ngón tay bịt kín ống nghiệm lắc

đều

 Kết quả: Ở nhiệt độ càng cao lượng sắc tố khuếch tán càng

protein Khi nhiệt độ cao tính lỏng quá cao làm thay đổi cấu trúc của màng làm cho màng mất các chức năng sinh lý

Dung dịch chứa các miếng dền đặt ở các nhiệt độ khác nhau: nhiệt độ phòng,40,60,100 o C (từ trái qua)

b) Tác dụng của dung môi hữu cơ:

− Cắt củ dền thành 2 miếng có kích thước đều bằng nhau

(0,5x0,5x2)cm Rửa các miếng dền dưới vòi nước (rồi ngâm

khoảng 5’ trong becher hoặc đĩa petri) để loại bỏ hết các sắc tố

 Kết quả: Sau 30phút ta thấy ống nghiệm 2 có màu đậm hơn

ống 1 Do alcolmethylic tác dụng vào sắc tố và khả năng thấm của dền nhiều hơn nước lọc bình thường

Dung dịch chứa các miếng dền đặt: trong nước lọc ở

nhiệt độ phòng và dung môi hữu cơ

SỰ HÔ HẤP Ở TẾ BÀO THỰC VẬT VÀ CÁC

CHẤT CHUYỂN HOÁ

XI) Mục đích,yêu cầu:

− Quan sát sự hô hấp của 1 số enzyme, các chất chuyển hóa dụ

trữ

XII) Dụng cụ:

− Ống nghiệm, cối, chày, dao lam, lam,lamen, giấy lọc, kính

hiển vi, đĩa petri dung dịch xanh methylen 1%, KI, KOH 50%,

H2O2, benzidin, CuSO4, axit citric 5%, fehling, sudan III, dầu

− Cắt mỏng khoai tây, xuyên ngang qua chồi (nếu có thể) rồi cho

vào becher nhỏ, dùng ống nhỏ giọt nhỏ lên mặt miếng khoai

tây dung dịch gum-resin 2% pha với rượu Quan sát không

thấy phản ứng gì

− Cắt lát mỏng khoai tây, sau đó đem ngâm trong nước sôi 15’,

lấy ra cho vào becher nhỏ, dùng ống nhỏ giọt nhỏ lên mặt

miếng khoai tây dung dịch gum-resin 2% pha với rượu Quan

sát vẫn không thấy hiện tượng

 Đối với miếng khoai tây chưa lên mầm thì không có

oxidaza Nếu là miếng khoai tây đã lên mầm rồi thì hàm lượng enzyme oxidaza mới có nhiều để làm xuất hiện màu xanh

24h trước) Úp các mặt cắt lên tờ giấy lọc, ép nhẹ, nhỏ

benzidin 1% trong rượu vài giọt H2O2, sẽ thấy màu xanh hiện

lên, chứng tỏ có mặt peroxidaza trong đậu sống

− Làm lại thí nghiệm trên đối với đậu tương đã luộc chín thì

không thấy màu xanh xuất hiện

 Vậy peroxidaza chỉ có trong dịch đậu khi còn sống (khi

luộc chín hệ thống enzyme peroxidaza bị mất đi ) và màu xanh chỉ xuất hiện khi peroxidaza tác dụng với H2O2

3 Dehydrogenaza:

− Cắt những khoanh củ cải đỏ cho vào ống nghiệm lớn (chú ý không

để chồng lên nhau)

xanh methylen 0.1% cao hơn củ cải

dehydrogenaza Dehydrogenaza tác dụng với O2 trong không

khí sẽ làm chuyển màu của dung dịch xanh methylen

4 Saccaroza:

(a) Cho 5 ml dung dịch saccaroza 5% vào 5ml dung dịch fehling

đựng trong 1 ống nghiệm đun sôi cách thủy 5’ Không thấy

hiện tượng gì xảy ra

(b) Cho 5ml dung dịch saccaroza 5% vào 3ml dung dịch acid

citric 5% (C6H8O7) trong 1 ống nghiệm đun cách thủy đun

cách thủy vài phút để nguội, thêm vào ống dung dịch fehling

rồi đun cách thủy 5’ Ta thấy có Cu2O xuất hiện

 Phản ứng thủy giải saccaroza:

C12H22O11 + H2O → 2C6H12O6 (Glucôzơ)hay C12H22O11 + H2O → C6H12O6 (Glucôzơ)+ C6H12O6

(Fructôzơ)

− Đâm nhiều lát củ cải đỏ trong cối, lọc lấy nước và xử lý giống

(a) và (b) thay 5ml dung dịch saccaroza bằng 5ml dịch lọc Ta

thấy lượng Cu2O xuất hiện ở trường hợp (b) nhiều hơn Vì (b)

có thêm acid citric nên lượng Cu2O xuất hiện dễ dàng hơn

Củ cải đỏ xử lý giống (a) Củ cải đỏ xử lý giống (b)

5. Tinh bột:

Tinh bột khoai tây

Cắt lát mỏng1 miếng khoai tây , đâm với ít nước trong 1 cái cối.Đợi khi các mảnh khô vừa lắng,dùng ống hút lấy 1 giọt nước đục

để lên kính mang vật và đậy lamen Quan sát với số bội giác lớn 40.Ta thấy tinh bột khoai tây với tế bào và phiến

− Đâm tiếp gạo, đậu xanh làm tương tự như trên ta được tinh bột

gạo, đậu xanh

Tinh bột gạo Tinh bột đậu xanh

 Lấy dịch khoai tây, gạo, đậu xanh thử với dung dịch I/KI

Ta thấy từ màu trắng đục chuyển sang màu xanh đậm

Chứng tỏ trong khoai tây, gạo, đậu xanh có tinh bột

− Đặt 1 lát cắt dày của hột đậu trắng (đã ngâm nước đến mềm để

dễ cắt) trên kính mang vật.Nhỏ lên đó ài giọt dung dịch CuSO4

5%.Đậy lamen lại,để ở nơi mát ẩm sau 30’,bỏ lamen ra, rửa lát

cắt nhiều lần với nước lọc.Dùng miếng giấy thấm nhỏ, hút cho

ráo nước

− Sau đó thêm vào 1 giọt dung dịch KOH 50% Quan sát thấy

prôtêin nhuộm màu tím của nối peptid

Nối peptid trong Prôtêin

HOẠT ĐỘNG CỦA ENZYME

XIV) Mục đích,yêu cầu:

− Quan sát hoạt tính của các enzyme như enzyme proteaza,

amylaza, prosthetic

XV) Dụng cụ:

− Thơm, lòng trắng trứng, dậu xanh lên mầm, khoai tây

− Toluen, tinh bột, KI, KCN, nước cất, H2O2 1%, cối, chày, giấy

− Lấy 2 ống nghiệm cho vào mỗi ống 10ml dịch thơm Ống 1 để

ở nhiệt độ phòng, ống 2 đem đun cách thủy 15’ rồi để nguội

− Sau đó cho vào 1 khối vuông lòng trắng trứng (khoảng 3mm)

đã luộc chín, vài giọt toluen rồi đậy kín, lắc đều

 Sau 48 giờ ta thấy ống nghiệm 1 ở nhiệt độ phòng khối

vuông lòng trắng trứng vẫn còn nguyên.Còn ở ống nghiệm

2 khối vuông trứng đã tan hết

Ống 1 và 2 (lúc đầu)

 Giải thích:

+ Trong trứng có protein vì thế nó tạo liên kết peptid, enzyme bromelin trong dịch thơm là một enzyme thủy phân có khả năng cắt các mối liên kết peptid trong trứng

+ Ở ống nghiệm 2 dưới tác dụng của nhiệt độ enzyme bromelin bị mất đi vì thế quá trình cắt đứt liên kết peptid diễn ra chậm Nên khối vuông lòng trắng trứng vẫn còn nguyên Còn ống nghiệm 1 khối vuông trứng bị mất đi do trong dịch thơm có enzym bromelin đã đẩy nhanh quá trình cắt đứt các liên kết peptid

2. Chứng minh hoạt tính enzyme amylaza:

− Giã 20 hạt đậu lên mầm trong 20ml nước cất lọc ta được dung

dịch amylaza

− Cho vào 4 ống nghiệm mỗi ống 1ml dung dịch tinh bột rồi đặt

trong các môi trường khác nhau

 Nước đá (5oC)

 Đun cách thủy

− Sau 15’ đặt các ống vào nước để làm nguội rồi nhỏ vài giọt KI

Quan sát thấy các ống đều có màu tím đen.Vì có thể xảy ra

theo 2 trường hợp sau:

+ TH1: do ta bỏ tinh bột nhiều hơn lượng cần thiết, trong khi

đó các điều kiện khác như đun, cho amylaza đúng lượng nên lượng amylaza không đẻ để thủy phân tinh bột nên vẫn còn tinh bột tác dụng với KI

+ TH2: do ta giã đậu xanh chưa nhuyễn, nên hàm lượng

amylaza quá ít trong khi đó tinh bột lại đủ lượng nên amylaza không phân giải hết được tinh bột

3. Chứng minh sự cần thiết của nhóm prosthetic (porhyron – Fe) cho hoạt tính catalase:

− Nghiền 10g khoai tây trong 10ml nước cất rồi lọc ta được

dung dịch chứa catalase

 Chứng tỏ enzyme catalase có hoạt tính xúc tác rất cao