nghiên cứu đặc điểm thực vật thành phần hoá học và một số tác dụng sinh học của loài muồng lùn chamaecrista pumila lam k larsen

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI VŨ THANH BÌNH NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA LOÀI MUỒNG LÙN [Chamaecrista pumi

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

VŨ THANH BÌNH

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC

VÀ MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA LOÀI MUỒNG LÙN [Chamaecrista pumila

(Lam.) K.Larsen]

LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC

HÀ NỘI, 2023

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI

VŨ THANH BÌNH

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT, THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ

MỘT SỐ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA LOÀI MUỒNG LÙN [Chamaecrista pumila

(Lam.) K.Larsen] LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC

CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC HỌC CỔ TRUYỀN MÃ SỐ: 62720406

Người hướng dẫn khoa học:

HÀ NỘI, 2023

LỜI CAM ĐOAN

Tôi xin cam đoan luận án này là công trình khoa học của riêng tôi dưới sự hướng dẫn của PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển và PGS TS Nguyễn Thùy Dương Kết quả được trình bày trong luận án là trung thực, khách quan và chưa từng được ai công bố trong bất kỳ công trình nào khác

Tác giả luận án

NCS Vũ Thanh Bình

LỜI CẢM ƠN

Trong quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận án, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ quý báu từ các Thầy Cô giáo, các Nhà khoa học từ nhiều đơn vị, cùng đồng nghiệp, gia đình và bạn bè

Đầu tiên, tôi xin bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc tới PGS.TS Nguyễn Mạnh Tuyển và PGS TS Nguyễn Thùy Dương, hai người thầy đã trực tiếp hướng dẫn, hết lòng chỉ bảo tận tình và động viên tôi trong suốt quá trình học tập và nghiên cứu khoa học

Tôi cũng xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Phương Thảo, TS Bùi Thị Thúy Luyện, TS Hà Vân Oanh cùng các thầy cô giáo, các nhà khoa học công tác tại Trường Đại học Dược Hà Nội và Viện Hàn lâm Khoa học và Công nghệ Việt Nam đã giúp đỡ và đóng góp ý kiến cho tôi trong suốt quá trình thực hiện nghiên cứu

Nhân dịp này, tôi cũng xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Ban Giám hiệu, Khoa Dược liệu-Dược học cổ truyền, Khoa Dược lý-Dược lâm sàng, Phòng Quản lý Đào tạo, và Trung tâm Thông tin-Thư viện Trường Đại học Dược Hà Nội đã tạo mọi điều kiện thuận lợi để tôi hoàn thành luận án này

Lời sau cùng, tôi xin được bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới gia đình và bạn bè đã luôn động viên và chia sẻ giúp tôi đạt được kết quả ngày hôm nay

Tôi xin chân thành cảm ơn!

NCS Vũ Thanh Bình

1.2 Tổng quan về loài Muồng lùn 32

1.2.1 Đặc điểm thực vật của loài Muồng lùn 32

1.2.2 Thành phần hóa học của Muồng lùn 33

1.2.3 Tác dụng và công dụng của Muồng lùn 34

CHƯƠNG 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35

2.1 Đối tượng nghiên cứu, hóa chất, thiết bị, dụng cụ 35

2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 35

2.1.2 Động vật thực nghiệm 35

2.1.3 Thuốc thử, hóa chất, dung môi 35

2.1.4 Máy móc, thiết bị 37

2.1.5 Địa điểm nghiên cứu 38

2.2 Phương pháp nghiên cứu 38

2.2.1 Thu thập, xử lý mẫu nghiên cứu 38

2.2.2 Phương pháp nghiên cứu thực vật học 38

2.2.3 Phương pháp nghiên cứu thành phần hóa học 39

2.2.4 Phương pháp nghiên cứu một số tác dụng sinh học 40

2.2.5 Phương pháp xử lý số liệu 53

CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 54

3.1 Kết quả nghiên cứu đặc điểm thực vật 54

3.1.1 Mô tả đặc điểm hình thái thực vật và giám định tên khoa học cây Muồng lùn 543.1.2 Đặc điểm vi học và cấu tạo giải phẫu 57

3.2 Kết quả nghiên cứu thành phần hóa học 62

3.2.1 Hợp chất TB5.5 65

3.2.2 Hợp chất TB6.4 68

3.2.3 Hợp chất TB3.10 71

3.3 Kết quả nghiên cứu tác dụng sinh học 93

3.3.1 Kết quả nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa in vitro 93

3.3.2 Kết quả nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan, chống oxy hóa in vivo 95

3.3.3 Kết quả nghiên cứu tác dụng chống viêm 100

3.3.4 Các tác dụng khác 106

4.1 Về thực vật 111

4.2 Về hóa học 111

4.3 Về tác dụng sinh học 115

4.3.1 Tác dụng chống oxy hóa in vitro 115

4.3.2 Tác dụng bảo vệ gan, chống oxy hóa in vivo 117

DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ 128

TÀI LIỆU THAM KHẢO 129

DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT

EtOH Cồn ethanol

FBS Fetal bovine serum (Huyết thanh bào thai bò) Glc β-ᴅ-glucopyranosyl

HDL High density lipoprotein (lipoprotein tỷ trọng cao)

HMBC Heteronuclear Multiple Bond Correlation (Phổ tương quan dị nhân đa liên kết)

1H-NMR Proton Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton)

HSQC Heteronuclear Single Quantum Coherence (Phổ tương tác dị nhân lượng tử đơn)

LDL Low density lipoprotein (lipoprotein tỷ trọng thấp) LPS Lipopolysaccharid, chất kích thích gây viêm

MDA Malondialdehyd

MET Cao phân đoạn ethyl acetat Muồng lùn MMP Matrix metallopetidase

mRNA Acid ribonucleic thông tin

MS Mass spectrometry (Phổ khối lượng) MTP Cao toàn phần Muồng lùn

MTT [3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl) 2,5- diphenyl-tetrazolium bromid] n Số lần lặp lại thí nghiệm

NF-κB Nuclear factor kappa B (yếu tố nhân kappa B) NO Nitric oxid

STT Số thứ tự

TLTK Tài liệu tham khảo

TNF Tumor necrosis factor (yếu tố hoại tử khối u)

Bảng 3.13 Kết quả tác dụng dọn gốc tự do DPDH của mẫu thử Muồng lùn 93

Bảng 3.14 Kết quả tác dụng dọn gốc tự do SOD của mẫu thử Muồng lùn 94

Bảng 3.15 Tác dụng của các cao Muồng lùn đến hoạt độ ALAT, ASAT huyết thanh chuột bị gây độc gan bằng paracetamol 96

Bảng 3.16 Kết quả sàng lọc hoạt tính ức chế sản sinh NO trên tế bào RAW264.7 của cao Muồng lùn 100

Bảng 3.17 Kết quả thử sàng lọc hoạt tính ức chế sự sản sinh nitric oxide (•NO) của các mẫu trên dòng tế bào RAW264.7 102

Bảng 3.18 Giá trị IC50 ức chế sản sinh NO của 08 mẫu 103

Bảng 3.19 Ảnh hưởng của cao toàn phần Muồng lùn lên mức độ phù chân chuột theo thời gian 104

Bảng 3.20 Ảnh hưởng của cao toàn phần Muồng lùn lên khối lượng u hạt 106

Bảng 3.21 Kết quả hoạt tính ức chế enzyme α-amylase của các hợp chất phân lập được từ phân đoạn ethyl acetat 108Bảng 3.22 Kết quả hoạt tính ức chế enzyme α-glucosidase của các hợp chất phân lập dược từ phân đoạn ethyl acetat 109

DANH MỤC CÁC HÌNH

Hình 2.1 Công thức cấu tạo các hợp chất anthraquinon được tìm thấy từ một số loài

thuộc chi Chamaecrista 11

Hình 2.2 Công thức cấu tạo các hợp chất flavonoid được tìm thấy từ một số loài thuộc chi Chamaecrista 14

Hình 2.3 Công thức cấu tạo các hợp chất khác được tìm thấy từ một số loài thuộc chi Chamaecrista 19

Hình 3.1 Cơ quan sinh dưỡng của cây Muồng lùn - Chamaecrista pumila (Lam.) K.Larsen 55

Hình 3.2 Cơ quan sinh sản của cây Muồng lùn - Chamaecrista pumila (Lam.) K.Larsen 56

Hình 3.3 Tiêu bản cây muồng lùn – Chamaecrista pumila (Lam.) K.Larsen 57

Hình 3.4 Vi phẫu thân cây Muồng lùn 58

Hình 3.21 Ảnh hưởng của các cao muồng lùn đến hàm lượng MDA trong gan chuột bị gây độc gan bằng paracetamol 97Hình 3.22 Ảnh hưởng của các cao muồng lùn đến hàm lượng GSH trong gan chuột bị gây độc gan bằng paracetamol 98Hình 3.23 Ảnh hưởng của các cao muồng lùn đến hoạt độ SOD trong gan chuột bị gây độc gan bằng paracetamol 99Hình 3.24 Tác dụng chống viêm cấp của cao toàn phần Muồng lùn trên mô hình gây phù bàn chân 105

DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ

Sơ đồ 3.1 Sơ đồ chiết xuất các phân đoạn từ phần trên mặt đất loài Muồng lùn 63Sơ đồ 3.2 Sơ đồ phân lập các chất tinh khiết từ phân đoạn ethyl acetat của loài Muồng lùn 64

1

ĐẶT VẤN ĐỀ

Muồng lùn (hay là Me đất) có tên khoa học là Chamaecrista pumila (Lam.) K.Larsen (tên đồng danh là Cassia pumila Lam., Cassia prostrata Roxb hay Senna prostrata Roxb.), họ Đậu (Fabaceae) [1, 2, 143] Cây mọc hoang nhiều nơi như Hà Nội, Ninh Bình, Thanh Hóa, Gia Lai, Đắc Lắc, Đồng Nai…[2] Trên thế giới, các nghiên cứu đã chứng minh cây Muồng lùn có các hợp chất thuộc nhóm anthranoid, flavonoid bao gồm chrysophanol (1), emodin (2), physcion (3), rhein-8-O-glucosid (10), sennosid A (35), sennosid B (36), sennosid C (37), sennosid D (38) [112], [39]; kaempferol (41), quercetin (43), kaempferol-7-O-glucosid (42) [38]; 8-hydroxy-7-(3-hydroxypropyl)-2′-methoxyflavon (45), 8-hydroxy-7-(2-hydroxyethyl)-2'-methoxyflavon (46) [73] Theo kinh nghiệm dân gian, phần trên mặt đất của cây Muồng lùn thường được đun nước uống giúp mát gan, giải độc trong một số bệnh như xơ gan, viêm gan và được sử dụng trong các bài thuốc chữa bệnh về gan (ở Hòa Bình), bệnh đau cơ xương khớp (ở Quảng Ninh) Trên thế giới, các nghiên cứu đã chứng minh cây Muồng lùn có tác dụng kháng khuẩn ) [95] Theo Võ Văn Chi, hạt của cây Muồng lùn gây xổ như nhiều loài khác thuộc chi này [2] Ở Ấn Độ, lá cây Muồng lùn dùng kèm sữa để chữa đau mắt [89]

Trên thế giới một số loài trong chi Chamaecrista đã được nghiên cứu sâu về thành phần hóa học và tác dụng sinh học Tuy nhiên đối với loài Chamaecrista pumila, cho đến nay hầu như mới có rất ít các nghiên cứu được báo cáo Từ thực tế trên, để góp phần làm rõ hơn giá trị làm thuốc của loài Muồng lùn, xây dựng cơ sở dữ liệu phục vụ nghiên cứu phát triển sản phẩm từ loài cây này, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài “Nghiên cứu đặc điểm thực vật, thành phần hóa học và một số tác dụng sinh học loài Muồng lùn [Chamaecrista pumila (Lam.) K.Larsen]”

Đề tài được thực hiện với 3 mục tiêu chính:

Giới: Thực vật (Plantae)

Ngành: Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa hồng (Rosidae) Liên bộ Đậu (Fabanae)

Bộ: Đậu (Fabales) Họ: Đậu (Fabaceae)

Phân họ: Vang (Caesalpinioideae) Tông: Cassieae

Chi: Chamaecrista Moench Một số loài trong chi Chamaecrista Moench

Theo một số hệ thống phân loại, hiện nay, chi Chamaecrista có những loài như sau:

 Theo Danh lục các loài thực vật Việt Nam của tác giả Nguyễn Tiến Bân [1] và “Từ điển cây thuốc Việt Nam” của tác giả Võ Văn Chi [2], chi Chamaecrista có 04 loài bao gồm:

4

- Chamaecrista absus (L.) H.S.Irwin & Barneby (Tên đồng danh: Cassia absus L , Senna absus (L.) Roxb., Senna exigua Roxb., Cassia thonningii DC., Cassia viscida Zoll.; Tên thường gọi: Muồng trĩn, Muồng dính)

- Chamaecrista leschenaultiana (DC.) Degener (Tên đồng danh: Cassia auricoma Steyaert, Cassia wallichiana DC., Cassia mimosoides L var wallichiana (DC.) Baker; Tên thường gọi: Muồng cô binh, Muồng lá ngắn)

- Chamaecrista mimosoides (L.) Greene (Tên đồng danh: Cassia mimosoides L., Cassia angustissima Lam., Cassia sensitiva Roxb.; Tên thường gọi: Muồng trinh nữ, Trà tiên, Mắc cỡ đất, Sơn biển đậu, Muồng đậu, Hàm tu thảo quyết minh)

- Chamaecrista pumila (Lamk.) K.Larsen (Tên đồng danh: Cassia pumila Lam , Senna prostrata Roxb., Cassia prostrata Roxb.; Tên thường gọi: Muồng lùn, Me đất)

 Theo phân loại của Thực vật chí Trung Quốc [144], chi Chamaecrista gồm có 03 loài sau:

- Chamaecrista leschenaultiana (Candolle) O Degener - Chamaecrista mimosoides (Linnaeus) Greene

- Chamaecrista pumila (Lamarck) V Singh

 Theo phân loại của Thực vật chí Đài Loan [57], chi Chamaecrista có 05 loài sau:

- Chamaecrista garambiensis (Hosok.) Ohashi - Chamaecrista leschenaultiana (DC.) Degener - Chamaecrista mimosoides (L.) Green

- Chamaecrista nictitans subsp patellaria (Vagel) Irwin & Barneby - Chamaecrista nomame (Sieb.) Ohashi

 Theo phân loại của Thực vật chí Missouri [145], chi Chamaecrista có 02 loài sau:

- Chamaecrista nictitans (L.) Moench

Theo thực vật chí Trung Quốc [144], khóa phân loại chi Chamaecrista Moench như sau:

1a Tuyến cuống lá có chân rõ rệt……….C pumila

1b Tuyến cuống lá không có chân, hình đĩa, nhô cao hoặc hơi phẳng

2a Cuống lá không có rãnh; lá chét 20–50 đôi, 3–4 mm; bầu nhụy có lông ngắn, cứng, ép chặt; cây họ đậu có lông rải rác, ép chặt………C mimosoides

2b Cuống lá có nhiều rãnh dọc; lá chét 10–25 đôi, 8–13 mm; bầu nhụy có lông tơ dài và ngắn, mỏng; cây họ đậu có lông dài và ngắn, không ép

leschenaultiana

1.1.1.3 Sự phân bố của chi Chamaecrista Moench

Chi Chamaecrista hiện có khoảng hơn 300 loài, được phân bố nhiều nơi trong các vùng nhiệt đới, chủ yếu ở và khu vực Nam Mỹ, châu Á, châu Phi Trong đó, có hơn 200 loài ở khu vực Nam Mỹ, khoảng 30 loài ở vùng nhiệt đới châu Á [143, 144]

Ở châu Á, các loài thuộc chi Chamaecrista Moench hầu hết sống ở các vùng có khí hậu nhiệt đới như Ấn độ, Trung Quốc, Indonexia, Malaixia, Thái

6

Lan, Lào, Campuchia Ở Việt Nam các loài thuộc chi Chamaecrista Moench là cây bụi hoặc cây thân gỗ nhỏ, mọc hoang ở nhiều nơi như bãi cát, bìa rừng, trong các rừng cây rậm trên khắp cả nước như Yên Bái, Lào Cai, Thanh Hóa, Huế, Gia Lai, Kom Tum, Bình Dương… [1]

1.1.2 Thành phần hóa học

1.1.2.1 Nhóm hợp chất anthraquinon

Anthraquinon trong chi Chamaecrista là các dẫn chất 9, anthracendion Tính đến hiện tại, đã có hơn 30 dẫn chất anthraquinon được phân lập và báo cáo từ các bộ phận khác nhau của các loài Chamaecrista khác nhau Tổng hợp các hợp chất anthraquinon có trong chi Chamaecrista được thể biện ở bảng 2.1 và hình 2.1

10-7

Bảng 2.1 Các hợp chất anthraquinon được tìm thấy từ các loài thuộc chi Chamaecrista

STT

phân tử

1 Chrysophanol C15H10O4C absus C mimosoides C gregii C nomame

Rễ

Phần trên mặt đất Rễ và vỏ cây Hạt, phần trên mặt đất

[117] [99] [27] [67]

C mimosoides C nigricans C nomame

Lá Hạt

Lá, Toàn cây Phần trên mặt đất

[115] [116] [46, 103, 120] [67] 4 Emodic acid C15H8O7C nigricans

C mimosoides

Lá Hạt

[46] [116] 5

Physcion

C16H12O5C mimosoides C nigricans C gregii C nomame

Hạt Lá

Rễ và vỏ cây Hạt, phần trên mặt đất

[116] [120] [27] [67]

6 methoxy-2-methyl anthraquinon

1,8-dihydroxy-6-C16H12O5C mimosoides Phần trên mặt đất [99]

7 methoxy-3-methyl anthraquinon

1,8-dihydroxy-6-C16H12O5C mimosoides Phần trên mặt đất [99]

8

STT

phân tử

8 tetramethoxy-

5-Hydroxy-1,4,6,7-2-methylanthraquinon

9 trimethoxy-2-

tetramethoxy-2-C19H18O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

12 trimethoxy-2-

4,7-dihydroxy-1,5,6-methylanthraquinon

C19H18O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

13 trihydroxy-2-

5,6-dimethoxy-1,4,7-methylanthraquinon

C17H14O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

14 trimethoxy-2-methylanthraquinon

1,5-dihydroxy-4,6,7-C18H16O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

15 pentamethoxy-2-methylanthraquinon

1,4,5,6,7-C20H20O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

16 trimethoxy-2-methylanthraquinon

4,6-dihydroxy-1,5,7-C18H16O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

17 hydroxy-5,6-methylendioxy-2-methylanthraquinon

1,7-dimethoxy-4-C18H14O7C gregii Rễ và vỏ cây [27]

9

STT

phân tử

18 hydroxymethyl-1,5,6,7-

4-hydroxy-2-tetramethoxyanthraquinon

C19H18O8C gregii Rễ và vỏ cây [27]

19 hydroxymethyl-1,5,7-trimethoxyanthraquinon

4,6-dihydroxy-2-C18H16O8C gregii Rễ và vỏ cây [27]

20 hydroxymethyl-1,5,6-trimethoxyanthraquinon

4,7-dihydroxy-2-C18H16O8C gregii Rễ và vỏ cây [27]

21 dimethoxy-2-methylanthraquinon

4,6-dihydroxy-5,7-C17H14O6C gregii Rễ và vỏ cây [27]

22 trimethoxy-2-

4-hydroxy-5,6,7-methylanthraquinon

C18H16O6C gregii Rễ và vỏ cây [27]

23 dimethoxy-2-

1,5,7-trihydroxy-4,6-methylanthraquinon

24 trimethoxy-

5,6-Dihydroxy-1,4,7-2-methylanthraquinon

25 dimethoxy-5,6-methylendioxy-2-methyl- anthraquinon

10

STT

phân tử

26 trimethoxy-2-hydroxy methylanthraquinon

27 dimethoxy-

5,6-Dihydroxy-4,7-2-methylanthraquinon

28

4-Hydroxyanthraquinon-2-carboxylic acid

C26H32O6 C kleinii Phần trên mặt đất [21]

33 Kleinioxanthron-2 (1,8-dihydroxy-3-methyl-9(10H)-anthracenon-10-oxytetradecanoat)

C29H38O5C kleinii Phần trên mặt đất [21]

34 bianthron

42

Kaempferol-7-O-glucosid C21H20O11 C pumila Hoa [113] 43 Quercetin C15H12O7 C absus Lá [117] 44 Rutin C27H30O16 C absus Lá [117] 45 8-hydroxy-7-(3-

methoxy flavon

hydroxypropyl)-2′-C19H18O5 C pumila Toàn cây [73]

46 hydroxyethyl)-2'-methoxy flavon

7,4'-dimethoxy-5-6-methyl flavon

C pumila

Toàn cây

49 trans-tephrostachin C22H22O5 C pumila Toàn cây [73]

50 Desmodol C21H18O6 C pumila Toàn cây [73]

14

Hình 2.2 Công thức cấu tạo các hợp chất flavonoid được tìm thấy từ một số loài thuộc chi Chamaecrista

15

1.1.2.3 Nhóm hợp chất khác

Các hợp chất khác được báo cáo từ một số loài thuộc chi Chamaecrista bao gồm alcaloid, phytosterol, pentacyclic triterpen, diterpenoid, acid hữu cơ, Tổng hợp các hợp chất khác có trong chi Chamaecrista được thể biện ở bảng 2.3 và hình 2.3

52 Piceatannol C14H12O4 C greggii Rễ và vỏ thân

[27]

53 Resveratrol C14H12O3 C greggii Rễ và vỏ thân

[27]

Dẫn xuất của acid benzoic

54 Syringic acid C9H10O5 C absus Hạt [63] Phytosterol

55 Stigmasterol C29H48O C absus Hạt [63] 56

β-Sitosterol C29H50O

C kleinii

Phần trên mặt đất [21] 57 Cholesterol C27H46O C absus Hạt [63] Pentacyclic triterpen

58 β-Amyrin C30H50O C absus Hạt [63] 59 Betulinic acid C30H48O3 C greggii Rễ và vỏ

thân

[27]

60 3-O-betulinic acid coumarat

p-C39H54O5 C greggii Rễ và vỏ thân

[27]

Acid hữu cơ và ester

61 9-ketooctadec-cis-15-enoic

17 62

Stearic acid (Octadecanoic

C absus C

nigricans

Hạt Lá

[53] [120] 63 Oleic acid C18H34O2 C absus Hạt [53] 64 Linoleic acid C18H32O2 C absus Hạt [53] 65 Eicosanoic acid (Arachidic

2-Methyl-butanoic acid C5H10O2

C

nigricans Lá [120] 68 n-Hexadecanoic acid

(Palmitic acid) C16H32O2

C

nigricans Lá [120] 69 Diisooctyl ester 1, 2-

benzendicarboxylic acid C24H38O4

C

nigricans Lá [120] 70

Nitric acid nonyl este C9H19NO3

C

nigricans Lá [120] Diterpenoid

71 acecoxy-12-oxocassan-8(14)-en-17-oat (Chamaegreggan)

18

Chromon

76 dimethyl-8-(2-

7-hydroxy-2-methyl-5-(2-C13H12O4 C pumila Toàn cây

81 oxopropyl)benzo[b]oxepin-5(2H)-on

6-methoxy-3-methyl-8-(2-C15H16O4 C pumila Toàn cây

83 dimethyl-2H-furo[3,4-g]chromen-6(8H)-on

9-(2-hydroxyethyl)-2,2-C15H16O4 C pumila Toàn cây [142]

19 51

52

Hình 2.3 Công thức cấu tạo các hợp chất khác được tìm thấy từ một số loài thuộc chi Chamaecrista

21

Hình 2.3 Công thức cấu tạo các hợp chất khác được tìm thấy từ một số loài thuộc chi Chamaecrista (tiếp)

22 67

23

Hình 2.3 Công thức cấu tạo các hợp chất khác được tìm thấy từ các loài thuộc chi Chamaecrista (tiếp)

24

1.1.3 Tác dụng sinh học, độc tính, công dụng và sử dụng

Các nghiên cứu đã được công bố cho thấy, các loài thuộc chi Chamaecrista có tác dụng chống viêm, chống oxy hóa, bảo vệ gan, kháng vi sinh vật, chống đái tháo đường, chống loét và một số tác dụng khác

1.1.3.1 Tác dụng chống viêm

Trên mô hình gây viêm cấp toàn thân ở chuột cống Wistar, cao chiết nước lá của loài C mimosoides thể hiện hoạt tính chống viêm đáng kể khi so sánh với lô chứng (p <0,05) Cơ chế tác dụng của cao chiết có thể thông qua ức chế tổng hợp prostaglandin và chống kết tập tiểu cầu [44]

1.1.3.2 Hoạt tính chống oxy hóa

Paolo Gomes và cộng sự đã đánh giá khả năng hấp gốc tự do (ORAC) của cao chiết ethanol, các phân đoạn làm giàu và các hợp chất phân lập từ lá của loài Chamaecrista diphylla (L.) Greene Kết quả nghiên cứu cho thấy cao chiết phân đoạn ethylacetat có tác dụng chống oxy hóa tốt hơn so với cao toàn phần với giá trị ORAC đạt 9,4 (mmol TE/g) so với giá trị ORAC của cao chiết ethanol đạt 4,3 (mmol TE/g) Các hợp chất aloesol (9), 7-hydroxy-2,5-dimethyl-4H-chromen-4-on (12) và carviolin (24, 33; đồng phân isomer) cho thấy khả năng chống oxy hóa tốt, vượt trội hơn so với cao chiết ethanol và các phân đoạn làm giàu với giá trị ORAC đạt được lần lượt là 13,6; 18,0; 11,4 và 10,9 (mmol TE/g) [47]

Nghiên cứu của Khaled Sabei và cộng sự năm 2014 đánh giá hoạt tính chống oxy hóa của cao chiết từ hạt của loài C absus thông qua việc đánh giá khả năng bắt giữ gốc tự do DPPH cho kết quả giá trị IC50 đạt mức 16,78 µg/mL [63]

Bên cạnh đó, loài C repens thể hiện hoạt tính bảo vệ chống lại quá trình oxy hóa trong thử nghiệm mất màu β-caroten ở nồng độ 10,0 mg/ml Kết quả của nghiên cứu cho thấy tác dụng chống oxy hóa đầy hứa hẹn của loài này [40]

25

1.1.3.3 Tác dụng bảo vệ gan

Tác dụng bảo vệ gan của emodin (một anthraquinon chiết được từ các loài thuộc chi Chamaecrista) được thực hiện trên mô hình gây xơ hóa gan chuột bằng CCl4 40% Kết quả thu được cho thấy, chuột được điều trị bằng emodin thể hiện (1) chức năng gan được cải thiện, alanine transaminase (ALAT) và phosphatase kiềm (AKP) giảm rõ rệt, đồng thời tổng lượng protein (TP) và albumin (ALB) tăng lên đáng kể ; (2) axit hyaluronic huyết thanh và laminin giảm rõ rệt; (3) hydroxyprolin ở gan giảm đáng kể; (4) mức độ xơ hóa đã giảm Sự thay đổi của các thông số nêu trên có ý nghĩa thống kê (P < 0,05 hoặc P < 0,01) [135]

Nghiên cứu của Yan Ding và cộng sự năm 2018 đã cho thấy cơ chế phân tử có thể có và tác dụng bảo vệ của emodin đối với tổn thương gan cấp tính (ALI) do lipopolysacarit (LPS) gây ra thông qua con đường truyền tín hiệu thụ thể Toll-like 4 (Toll-like receptor 4 - TLR4) trong dòng tế bào Raw264.7 và ở chuột Balb/c Kết quả thu được cho thấy emodin làm giảm mức độ protein và/hoặc mRNA của TLR4 và các phân tử tiếp theo của nó do LPS gây ra trong tế bào Raw264.7 và trong mô hình động vật Ngoài ra, emodin ngăn chặn sự biểu hiện của TNF-α và IL-6 trong huyết thanh và dịch nổi nuôi cấy tế bào Ngoài ra, ARG1 và CD206 cũng tăng cao trong nhóm sử dụng emodin Emodin cũng làm giảm nồng độ ALAT và ASAT trong huyết thanh và làm giảm tổn thương mô bệnh học ở gan do LPS gây ra Kết quả của nghiên cứu cho thấy tác dụng bảo vệ gan đầy tiềm năng của emodin chống lại tổn thương gan cấp tính do LPS gây ra, có thể bằng cách ức chế đường truyền tín hiệu TLR4 [41] 1.1.3.4 Hoạt tính kháng vi sinh vật

Cao chiết ethanol của hạt loài C absus và các phân đoạn n-butanol, cloroform, n-hexan và nước đã được đánh giá hoạt tính kháng khuẩn bằng phương pháp khuếch tán giếng thạch và phương pháp vi pha loãng, sử dụng

26

ceftriaxon là kháng sinh đối chứng Kết quả thu được cho thấy C absus có hoạt tính kháng khuẩn vừa phải đối với tất cả các chủng vi khuẩn được thử nghiệm (bao gồm các chủng: Klebsiella pneumonia, Shigella dysenteriae, Salmonella typhi, Bacillus subtilis, Corynebacterium striatum, Pseudomonas aeroginosa và Staphylococcus aureus) Phân đoạn n-hexan và cao chiết ethanol thô thể hiện hoạt tính kháng khuẩn mạnh nhất đối với chủng S aureus với các giá trị MIC50

lần lượt là 145 và 171 µg/mL Kết quả đo đường kính vòng vô khuẩn bằng phương pháp khuếch tán trên giếng thạch cho kết quả phân đoạn n-hexan cho vùng ức chế cao nhất (19mm) đối với S aureus [17]

Emodin được phân lập từ cao chiết ethyl acetat của lá loài C nigricans được đánh giá tác dụng kháng khuẩn đối với các chủng Staphylococcus aureus, Corynebacterium pyogenes, Streptococcus pyogenes, Bacillus subtilis, Salmonella typhi, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Candida albicans, Neisseria gonorrhoea và Klebsiella pneumonia bằng kỹ thuật khoanh giấy kháng sinh khuếch tán Giá trị MIC thu được là 2×103 µg/ml đối với các chủng S aureus và C pyogenes, trong khi đối với các chủng S pyogenes, B subtilis, S typhi và E coli, giá trị này là 3×103 µg/ml Đối với các chủng P aeruginosa, C albicans và N.gonorrhoea, giá trị MIC là 4×103 µg/ml, trong khi đối với chủng K pneumonia là 5×103 µg/ml Đường kính vùng ức chế đạt từ 17-31 mm (vùng ức chế lớn nhất đạt được với chủng S aureus) [23]

Cao chiết cloroform của vỏ quả loài C pumila và năm hợp chất được phân lập gồm rhein-8-O-glucosid, sennosid A, sennosid B, sennosid C và sennosid D đã được nghiên cứu về hoạt tính kháng khuẩn, kháng nấm (trên các chủng vi khuẩn Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella typhi, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Streptococcus pneumoniae, và nấm Aspergillus niger, Aspergillus flavus, Rhizoctonia bataticola) bằng phương pháp vi pha loãng với các đối chứng dương bao gồm tetracylcin, gentamycin và nystatin Kết quả tất cả các hợp chất phân lập được thể hiện mức hoạt tính

27

hoạt tính kháng khuẩn và kháng nấm trung bình, trong đó sennosid D thể hiện hoạt tính kháng khuẩn tốt nhất đối với chủng Streptococcus pneumoniae (MIC = 140 µg/ml) và sennosid B thể hiện hoạt tính kháng nấm tốt nhất đối với chủng Rhizoctonia bataticola (MIC = 170 µg/ml) [112]

Ba hợp chất flavonoid (gồm quercetin, kaempferol và glucosid) được phân lập từ các bộ phận khác nhau của loài C pumila đã được đánh giá tác dụng kháng khuẩn kháng nấm (trên các chủng vi khuẩn gồm Staphylococcus aureus, Salmonella typhyi, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa và nấm Aspergillus flavus, A niger, Fusarium monilliformae, Rhizoctonia bataticola) Kết quả thu được cho thấy các flavonoid được phân lập có hiệu quả chống lại tất cả các vi khuẩn và nấm thử nghiệm trong đó quercetin có hiệu quả hơn đối với các chủng E coli, A flavus, A niger, F moniliformae và R bataticola, với giá trị MIC = 2×103 mg/đĩa và giá trị MIC của quercetin đối với vi khuẩn và nấm khác là 3×103 mg/đĩa Kaempferol thể hiện hiệu quả tốt hơn đối với các chủng A flavus, A niger, F moniliformae và R bataticola, với giá trị MIC = 2×103 mg/đĩa Giá trị MIC của kaempferol-7-O-glucosid đạt 2×103 mg/đĩa đối với các chủng E coli, A flavus và A niger trong khi giá trị MIC đối với các chủng S aureus, P aeruginosa và S typhi đạt được là 3×103 mg/đĩa [113]

kaempferol-7-O-Nghiên cứu của Herrero Uribe L và cộng sự (2004) cho thấy, cao chiết của loài C nictitans có hoạt tính kháng virus Herpes simplex Cao chiết thô từ loài C nictitans được chiết xuất bằng hỗn hợp diclorometan/metanol, và được phân đoạn tiếp theo quy trình hướng dẫn thử nghiệm sinh học bằng cách sử dụng kết hợp sắc ký cột và sắc ký lớp mỏng điều chế Kết quả thu được cho thấy cao chiết ức chế cả sự gắn kết của virus vào tế bào và sự phiên mã thứ cấp của virus trong tế bào [51]

Ba hợp chất chromon được phân lập từ loài C pumila gồm