BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC MỞ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH --- ∞0∞--- NGUYỄN THỊ THU NGÂN ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ PHỐI HỢP CỦA CÁC NGUỒN THỨC ĂN ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ NHIỆT ĐỘ ĐẾN TỒN TRỮ BỌ
TỔNG QUAN
TỔNG QUAN VỀ BỌ XÍT MẮT TO Geocoris spp
Hình 1: Bọ xít mắt to Geocoris spp
Bọ mắt to Geocoris spp (Hemiptera: Geocoridae) là loài côn trùng ăn tạp, phổ biến, chúng có thể ăn thực vật câu hỏi đặt ra liệu chúng có lợi hay gây hại cho cây trồng Tuy nhiên, một số nghiên cứu đã cho biết tiềm năng của Geocoris spp đóng vai trò là tác nhân kiểm soát sinh học trong nông nghiệp và tầm quan trọng của chúng như tác nhân bảo vệ gián tiếp thực vật trong tự nhiên Những nghiên cứu này đã chứng minh rằng Geocoris spp làm giảm hiệu quả quần thể động vật ăn cỏ và tăng năng suất cây trồng (Schuman và Baldwin, 2013)
Bọ xít mắt to Geocoris spp thuộc họ Geocoridae, bộ Hemiptera là loại côn trùng ăn tạp xuất hiện trên toàn thế giới (Tamaki và Weeks, 1972) Chúng là loài côn trùng có lợi cho cây trồng, nó ăn vô số những con côn trùng gây hại trên cây trồng như: cây công nghiệp, cỏ Một số loài côn trùng gây hại cũng được cho là ăn hạt và các bộ phận của thực vật (Eubank & Denno, 1999, và Sweet, 2000) Geocoris spp là một trong những côn trùng được chú ý nghiên cứu ở Florida và một số nơi khác vì chúng là loài thiên địch ăn thịt có lợi ích to lớn cho cây trồng (Mead, 2001)
Theo Ramirez R và Patterson R (2011) Geocoris spp là loài côn trùng săn mồi chúng ăn những côn trùng nhỏ như: Ve, rệp, sâu bướm nhỏ,… Những con bọ này có thể được tìm thấy trong cảnh quan, khu vườn, nhiều loại rau và đồng ruộng hoa màu
1.2 Sự phân bố của bọ xít mắt to Geocoris spp.
Những con bọ mắt to Geocoris spp (Hemiptera: Geocoridae) là động vật ăn tạp, có thể ăn một số loài côn trùng và bọ ve (Schuman et al 2013 ) Bọ xít mắt to Geocoris spp phân bố ở các vùng Assam., Borneo, Burma, Ceylon, China, Formosa, India, Sumatra (Slater 1964); Ấn Độ, Lào, Malaysia, Thái Lan, Việt Nam (Kobor 2018); Trung Quốc, Đài Loan, Khu vực Phương Đông (Péricart 2001) Bọ mắt to Geocoris spp Có khoảng 19 loài được tìm thấy ở Mỹ và Canada
Chú thích: A: Loài Geocoris bullatus,
B: Loài Geocoris uliginosus, C: Loài Geocoris punctipes, D: Loài Geocoris ochropterus Trong đó, Loài Geocoris bullatus phân bố rộng rãi tại Hoa Kỳ và Canada và có rất nhiều ở phía Nam Florida Loài Geocoris uliginosus phân bố khắp Hoa Kỳ và phía Nam Canada chúng thường xuất hiện ở các bãi cỏ Loài Geocoris punctipes xuất hiện ở khắp Florida và nhiều nơi khác như: phía Tây New Jersey, miền Nam Indiana, phía Nam Colorado, Tây Nam Texas, Arizona, California và Mexico Loài Geocoris punctipes cũng được tìm thấy trong vườn cây cảnh, vườn rau và dâu tây hệ thống nhà kính (Mead, 2001) Ngoài ra, Geocoris ochropterus là một loài rất phổ biến được tìm thấy trong bông, linh lăng, ngô, hướng dương, chè, và các loại thực vật có hoa và ăn quả khác Geocoris ochropterus được phân bố rộng rãi khắp mọi nơi và tập trung chủ yếu ở Iran, Tây Azarbaijan, Trung Quốc, Ấn Độ, Pakistan, Việt Nam,…
1.3 Các ảnh hưởng tích cực mà bọ xít mắt to Geocoris spp mang lại
Chúng có lợi vì chúng có thể ăn vô số côn trùng gây hại trong nông nghiệp Bọ mắt to Geocoris spp là loài côn trùng nhận được sự quan tâm nghiên cứu ở Florida và
Hình 2: Một số loài Geocoris spp
16 các nơi khác vì những lợi ích mà nó mang lại cho cây trồng (Mead, 2001) Tiềm năng cho Geocoris spp Là có các biện pháp kiểm soát sinh học được thành lập tốt Con trưởng thành và con non có thể tiêu thụ hàng chục con mồi mỗi ngày (Hagler và Cohen 1991) Tuy nhiên, do kích thước nhỏ nên việc định lượng động vật ăn thịt trên đồng ruộng rất khó khăn (Hagler và Naranjo 1994) Các loại cây che phủ như cỏ ba lá và đậu tằm có thể tăng cường quần thể bọ mắt to và cải thiện khả năng săn mồi chống lại sâu bệnh ở một số loại cây trồng (Bugg et al 1991) Các nghiên cứu khác đã chứng minh tiềm năng hiệu quả của bọ mắt to đối với các loài gây hại khác nhau trên cây trồng trong nhà kính (Tamaki và Weeks 1972, Pendleton 2002).
BỌ XÍT MẮT TO Geocoris ochropterus
Hình 3: Bọ xít mắt to Geocoris ochropterus
(Dưới kính soi nổi LABOMED vật kính 3.5X)
Geocoris ochropterus là một loài phổ biến sống kí chủ hoa hướng dương, bông, hoa màu… (Kapadia và Puri, 1991), linh lăng, ngô và chè (Sannigrahi và Mukhopadhyay, 1992) Ở Việt Nam, bọ thường xuất hiện ở cây hoa màu, ké hoa đào, cúc nhám…
2.1 Đặc điểm về hình thái
Trứng rầy nâu có hình trụ, thường được đẻ riêng lẻ trên bề mặt lá hoặc cành Khi mới đẻ, trứng có màu vàng nhạt nhưng sẽ chuyển sang màu sẫm hơn khi gần nở Sau một vài ngày, một điểm mắt đỏ tươi sẽ xuất hiện và phát triển bên trong trứng Trứng có chiều dài và chiều rộng trung bình lần lượt là 0,90 mm và 0,35 mm Ấu trùng của rầy nâu có hình bầu dục, thân xám đen Đầu bọ xít bắt mồi có đôi mắt to, rộng, nhô lên và một cái miệng giống như kim giấu bên dưới đầu và cơ thể.
17 đưa ra phía trước bắt mồi rất linh hoạt Ấu trùng phát triển vào kích thước khác nhau qua từng ngày Ấu trùng được phân ra 5 tuổi: ấu trùng tuổi 1, 2, 3, 4 và 5 Khi chuyển từ tuổi 5 sang trưởng thành cơ thể bọ xít bắt mồi mắt to có màu nâu đỏ và chuyển thành màu xám đen hoặc màu nâu sẫm sau đó 1 ngày
Trưởng thành: Con cái có kích thước lớn hơn con đực, con đực có phần cuối bụng nhỏ và dài hơn con cái Trưởng thành có hình dạng thuôn nhỏ tương tự như ấu trùng, có thêm hai cánh, hình elip Đầu của chúng có chiều ngang lớn hơn chiều dọc và nổi bật với đôi mắt hình lồi phía sau chỗ tiếp nối giữa đầu và mảnh lưng (đây là đặc điểm hình thái đặc trưng) Bọ xít bắt mồi mắt to trưởng thành có màu nâu đỏ
Râu đầu: Hình gậy có 4 đốt, chân ngắn nhất, cuống râu dài nhất, đốt ngoài cùng to nhất và có màu vàng (phần còn lại có màu nâu sẫm), trên râu đầu có nhiều nhánh lông nhỏ
Vòi hút: Vòi hút của bọ xít bắt mồi mắt to có 5 đốt, vòi hút có kích thước nhỏ dần từ trong ra ngoài, đốt thứ tư có kích thước dài nhất, đốt thứ năm có chiều dài ngắn nhất và nhỏ nhất dùng để chích vào con mồi hút dịch
2.2 Đặc tính sinh học của bọ mắt to Geocoris ochropterus
Quá trình sinh trưởng và phát triển của bọ xít thuộc kiểu biến thái không hoàn toàn (trứng-ấu trùng-thành trùng) Bọ xít mắt to Geocoris ochropterus sinh sản nhiều thế hệ trong năm Vào mùa xuân thành trùng bắt đầu đẻ trứng trên các đọt lá non trên cây kí chủ
Theo Schuman và Baldwin (2013) Tốc độ phát triển từ trứng thành con trưởng thành tương quan thuận với nhiệt độ từ 21 o C đến 37 o C; ngoài phạm vi này, trứng không thể sống được Ngoài ra chu kỳ chiếu sáng cũng làm ảnh hưởng đến sự phát triển của bọ xít
Theo James Hagler và Nicole Sanchez (2011), trứng được đẻ đơn lẻ trên lá hoặc thân cây và nở trong khoảng một tuần Ấu trùng có 5 tuổi (James Hagler và Nicole Sanchez, 2011; trường Đại học Arizona, 2011)
Thành trùng sống khoảng một tháng, từ lúc thành trùng vũ hóa đến chết con cái có thể đẻ 300 trứng (James Hagler và Nicole Sanchez, 2011) Nhiệt độ và độ dài ngắn của ngày đêm cũng ảnh hưởng rất lớn đến quá trình và thời gian sinh sản của bọ mắt to (Mead, 2001)
Theo McGregor và McDonough (1917), bọ xít mắt to có thời gian phát triển trung bình từ trứng đến thành trùng khoảng 30 ngày
2.3 Một số khả năng kiểm soát phòng trừ sinh học của bọ xít mắt to Geocoris ochropterus
Bọ xít mắt to Geocoris ochropterus là loài côn trùng nhận được nhiều sự quan tâm, nghiên cứu ở Florida và các nơi khác bởi lợi ích mà loài thiên địch này mang lại cho cây trồng (Mead, 2001) Bọ mắt to là loài có phổ ăn mồi rất rộng (Ricardo Ramirez, 2011), kiểm soát sinh học hiệu quả, giúp duy trì quần thể dịch hại dưới ngưỡng thiệt hại (Funderbuck, 2003) Bọ mắt to sinh trưởng và phát triển trong các đám cỏ, bụi hoa dại, bụi rậm Thành trùng cái bọ mắt to đẻ trứng trên lá, chồi của cây chủ Việc ứng dụng bọ mắt to trong phòng trừ sinh học sâu hại trong thời gian lâu dài là hết sức cần thiết
Sâu bọ cánh cứng vừa là loài săn mồi và thiên địch quan trọng của sâu hại cây trồng, ăn đa dạng các loài côn trùng như sâu, bướm nhỏ, trứng sâu, nhện, bọ trĩ, rầy mềm Chúng cũng có khả năng ăn hạt giống khi thiếu thức ăn nhưng không gây hại cho cây trồng Sâu bọ cánh cứng chủ yếu xuất hiện trong các khu vực cây trồng và đóng vai trò rất có lợi trong nền nông nghiệp.
Theo Addotn, Lingren và cộng sự, (1968) ghi nhận rằng ấu trùng bọ xít mắt to có thể ăn trung bình 47 con nhện và bọ mắt to trưởng thành ăn khoảng 83 con nhện đỏ mỗi ngày Nghiên cứu cho rằng chúng có thể ăn khoảng 1600 con nhện từ giai đoạn ấu trùng phát triển cho đến khi trưởng thành.
CÁC NGUỒN THỨC ĂN CỦA BỌ XÍT MẮT TO Geocoris ochropterus
Trong 100g nhộng tằm có 79,7g nước, 13g protein; 6,5g lipid và cung cấp tới
206 calo Bên cạnh đó, nhộng tằm còn là một loại thức ăn nhiều vitamin (vitamin A, B1, B2, PP, C Đặc biệt, thực phẩm này còn có nhiều acid amin thiết yếu như valin, tyrosin, tryptophan và các chất khoáng, nhất là canxi (40mg) và photpho (109mg) (WU, Xuli, et al (2021) Food Science & Nutrition)
Hạt hướng dương chứa rất nhiều các chất vitamin và chất khoáng bổ dưỡng bao gồm axit amin, axit folic, sắt, canxi, và các vitamin E, B1, B5 Là nguồn cung cấp lành mạnh các axit béo thiết yếu ở dạng linoleic
Trong hạt hướng dương còn có chứa magie giúp phát triển xương làm cho xương chắc khỏe và hoạt động linh hoạt hơn Là nguồn cung cấp lành mạnh các axit béo thiết yếu ở dạng linoleic axit Ngoài ra, hạt hướng dương có chứa các chất xơ, axit amin đặc biệt là tryptophan Tryptophan là một loại axit amin giúp sản xuất serotonin – một chất dẫn truyền thần kinh quan trọng Serotonin làm giảm căng thẳng và thúc đẩy thư giãn
Một nghiên cứu bởi tiến sĩ Valerie Stull, tại Đại học Wisconsin-Madison thuộc Viện nghiên cứu môi trường Nelson (Mỹ) là việc ăn dế đã được chứng minh là rất tốt cho đường ruột
Dế được xem là nguồn cung cấp protein, vitamin, khoáng chất và chất béo khá tốt Ngoài ra, dế cũng có chứa chất xơ, chitin (kitin) Loại chất xơ này rất khác so với chất xơ trong trái cây và rau quả Chất xơ này đóng vai trò nuôi dưỡng hệ vi sinh đường ruột, thậm chí một số loại chất xơ ví dụ như probiotics còn thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn có lợi trong hệ tiêu hóa (Valerie Stull, tạp chí Scientific Report, 2018)
Nhộng kiến là nguồn dinh dưỡng to lớn chứa nhiều protein và carbohydrate Protein trong nhộng kiến giúp cho bọ Geocoris spp có sức mạnh và tăng trưởng nhanh do kiến chúa lấy nguồn dinh dưỡng protein từ các động vật không xương sống Carbohydrate trong nhộng kiến giúp bọ Geocoris spp phát triển tốt đường tiêu hóa được lấy từ mật ong, đường, mứt trái cây, quả, hạch…
Trong nhộng kiến còn chứa 42-67% đạm, có hơn 28 loại axit amin tự do và 8 loại axit amin không thay thế Ngoài ra còn có chứa nhiều nguyên tố vi lượng rất tốt cho cơ thể
Rệp còn được gọi là bọ rầy, chúng là loài côn trùng rất nhỏ, sống trên cây và thu thập các chất lỏng giàu đường từ cây ký chủ bằng vòi hút của mình Bao gồm rệp vừng và rệp sáp
Rệp cũng là mối đe dọa của nhà nông trên toàn thế giới, chúng được biết đến là kẻ hủy diệt cây trồng Rệp phải tiêu thụ một lượng lớn thực vật để đạt được nguồn dinh dưỡng thích hợp.
LỊCH SỬ NGHIÊN CỨU
Nhiều nghiên cứu đã chứng minh bọ xít mắt to Geocoris spp có thể nuôi bằng thức ăn nhân tạo có hiệu quả như côn trùng ăn thịt trong tự nhiên (Hagler và Cohen, 1991; Cohen, 2000; Pendleton, 2002)
Tác giả Sannigrahi và Mukopadhyay (1992) đã nghiên cứu và đánh giá hiệu quả ăn thịt bọ trĩ hại chè của loài Geocoris ochropterus Fieber tại Srilanka, ông cho biết chúng có mối tương quan nghịch chặt chẽ, Geocoris ochropterus Fieber có khả năng phòng trừ bọ trĩ hại chè đạt hiệu quả cao
Mukhopadhyay và Sannigrahi (1993) đã nuôi thành công động vật ăn thịt Geocoris ochropterus trên nhộng kiến được bảo quản Và ông cũng đánh giá khả năng săn mồi và vòng đời của Geocoris ochropterus bằng cách sử dụng rệp (Toxoptera aurantia) làm con mồi Và ông cho rằng bọ xít mắt to Geocoris ochropterus có hiệu quả như một tác nhân kiểm soát sinh học đối với rệp
Meredith C Schuman, Danny Kessler và Ian T Baldwin (2013) đã nói Geocoris spp là loài côn trùng ăn tạp, xuất hiện nhiều trên thế giới Tốc độ phát triển từ trứng đến trưởng thành tương quan thuận với nhiệt độ từ 21°C đến 37°C; ngoài phạm vi này, trứng không sống được Trứng nở tùy thuộc vào nhiệt độ (nhiệt độ cao hơn = phát triển nhanh hơn)
Theo Ricardo Ramirez (2011), đã đưa ra kết quả rằng thành trùng và ấu trùng của bọ mắt to có thể ăn con mồi có kích thước nhỏ như rầy mềm, nhện, trứng côn trùng, ấu trùng nhỏ, sâu non, …Chúng dùng vòi chích đâm xuyên qua cơ thể và hút dịch cơ thể của con mồi Ở việt nam, các nhà nghiên cứu đã cố gắng nhân lên quần thể Geocoris sp trong phòng thí nghiệm và nghiên cứu đặc tính sinh học của nó với một quy mô lớn mà không đòi hỏi quá nhiều chi phí trong việc phát triển mô hình nuôi và nguồn thức ăn cho chúng Năm 2007, lần đầu tiên nông dân ở Gia Lâm - Hà Nội đã thử nghiệm thả bọ xít bắt mồi vào ruộng dưa chuột, kết quả thu được rất khả quan, gần như toàn bộ bọ trĩ hại dưa đều bị diệt hết, dưa ngon hơn và rất xanh sạch, an toàn Sử dụng các thiên địch bắt mồi A
21 swirskii, Orius spp., Geocoris spp trong phương pháp phòng trừ sinh học có thể thay thế thuốc trừ sâu, trừ nhện hóa học trong phòng trừ bọ trĩ, bọ phấn, rệp đào và nhện đỏ gây hại trên cây dưa và các cây trồng trong hệ thống nhà kính nhà lưới trong sản xuất nông nghiệp hữu cơ, nông nghiệp xanh
Trong đề tài sinh viên nghiên cứu khoa học trường Đại học Mở Thành phố Hồ Chí Minh của Lê Thụy Tố Như và Nguyễn Thị Mỹ Hằng (2021) cũng đã nhắc đến việc nhân nuôi bọ mắt to bằng các nguồn thức ăn nhân tạo khác nhau (nhộng kiến, dế và hạt hướng dương) để theo dõi các chỉ tiêu Nghiên cứu cho thấy khi bọ mắt to Geocoris ochropterus ăn các loại thức ăn khác nhau sẽ ảnh hưởng đến tỷ lệ đực – cái, sự phát triển các giai đoạn tuổi và nhiệt độ thích hợp để tồn trữ bọ mắt to
Trong bài báo được đăng trên tạp chí quốc tế của Nguyễn Ngọc Bảo Châu và Lê Thụy Tố Như (2019) cũng đã thảo luận về một số khẩu phần ăn ảnh hưởng đến tổng số trứng, tỷ lệ trứng nở và tỷ lệ sống sót của G ochropterus Nghiên cứu cũng cho thấy rằng tất cả nhộng kiến Oecophylla smaragdina (AP), nhộng tằm Bombyx mori (BM) có thể được sử dụng cho việc áp dụng nuôi đại trà Geocoris spp và nghiên cứu đặc điểm sinh học của bọ mắt to để đáp ứng yêu cầu của động vật ăn thịt đối với việc phóng sinh Bên cạnh đó cũng ứng dụng các nghiên cứu chế phẩm, các loài thiên địch để phòng trừ côn trùng gây hại cho cây trồng hướng tới nền nông nghiệp đảm bảo năng suất, chất lượng, hạn chế tối đa việc sử dụng thuốc bảo vệ thực vật hóa học hướng tới nền nông nghiệp bền vững
Nguyễn Thị Phương Thảo và Nguyễn Thị Hồng Vân (2013) đã nghiên cứu các ngưỡng nhiệt độ ảnh hưởng đến một số đặc điểm sinh học của loài bét bắt mồi
Amblyseius longispinosus.Kết quả đã chỉ ra rằng, nhiệt độ ảnh hưởng rất lớn đến các đặc tính sinh học cũng như thời gian sống của A longispinosus Khi nhiệt độ tăng từ 25 đến 35°C, vòng đời của cả con đực và cái A longispinosus, thời gian trước đẻ trứng, thời gian đẻ trứng, thời gian sau đẻ trứng cũng như tuổi thọ của con cái càng ngắn lại
VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM THỰC HIỆN
- Địa điểm: Đề tài được thực hiện từ tháng 3/2021 đến tháng 9/2022 tại phòng thí nghiệm trường đại học Mở TP Hồ Chí Minh cơ sở 3 Bình Dương.
VẬT LIỆU VÀ DỤNG CỤ THÍ NGHIỆM
2.2.1 Thiết bị và dụng cụ
- Thước kẻ, thước đo kỹ thuật Mitutoyo 505 – 683
- Hộp nhựa trên nắp hộp nhựa được đục lỗ dán tấm lưới mỏng để thoáng khí
2.2.2 Các loại thức ăn được sử dụng
Quy trình làm bột nhộng tằm
1 Mua nhộng tằm tại các cửa hàng
2 Cắt vỏ nhộng, lấy con tằm bên trong vỏ
3 Bỏ vào ngăn đông tủ lạnh 15 phút để nhộng chết
4 Sau đó đem ra ngoài rã đông, rửa sạch
5 Đun nhộng với nước sôi 100 o C, 15 phút cho nhộng chín
6 Lấy nhộng ra để ráo nước
7 Đem sấy ở 100 o C trong 2 giờ (sấy 2 lần) trong tủ sấy
8 Sau khi sấy khô, đem xay nhuyễn bằng máy xay Nếu thấy bột nhộng còn chưa khô thì sấy bột ở 90 o C trong 1 giờ
9 Sau khi bột nhộng đã khô thì thì đem bảo quản trong ngăn mát tủ lạnh
Quy trình làm bột dế
1 Mua dế tại cửa hàng bán mồi chim cảnh, cá cảnh
2 Bỏ vào ngăn đông tủ lạnh 15 phút để dế chết
3 Sau đó đem ra ngoài rã đông, rửa sạch
4 Đun dế với nước sôi 100 o C, 15 phút cho dế chín
5 Lấy dế ra để ráo nước
6 Đem sấy ở 100 o C trong 2 giờ (sấy 2 lần) trong tủ sấy
7 Sau khi sấy khô Đem xay nhuyễn bằng máy xay và bảo quản trong ngăn mát của tủ lạnh
- Hạt hướng dương xay nhuyễn
Quy trình xay hạt hướng dương
1 Mua hạt hướng dương tại các cửa hàng
3 Xay nhuyễn bằng thiết bị xay, xay đến khi nhẵn mịn
4 Bảo quản trong ngăn mát tủ lạnh khi không sử dụng
- Bông gòn, dưa chuột, vỏ nhộng.
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
Quá trình nghiên cứu sẽ sử dụng các phương pháp như: Thu thập mẫu, nuôi bọ, quan sát, khảo sát, phân tích dữ liệu, thống kê, …
▪ Geocoris ochropterus được thu thập ở huyện Củ Chi, Tp.HCM Sau đó nhân nuôi trong phòng thí nghiệm Động vật học, Khoa Công nghệ Sinh học, cơ sở 3 Bình Dương
▪ Tiến hành nuôi bọ, tách bọ từ trừng mới nở ra và quan sát tách bọ theo từng độ tuổi khác nhau Đối với bọ thành trùng nuôi bọ theo từng cặp (đực-cái)
▪ Cho bọ ăn theo các nguồn thức ăn: Bột dế, bột nhộng tằm sẽ được phối trộn với hạt hướng dương xay nhuyễn theo tỉ lệ 1:1, trứng kiến và ghi nhận số liệu thống kê
▪ Quan sát tỷ lệ đẻ trứng và trứng nở
Trong nghiên cứu này, trứng bọ xít mắt to được bảo quản ở bốn nhiệt độ khác nhau: 10°C, 20°C, nhiệt độ phòng Mỗi ngày, trứng được kiểm tra để đánh giá khả năng bảo quản Sau mỗi đợt thí nghiệm, trứng từ các nhiệt độ được chuyển về nhiệt độ phòng để theo dõi quá trình nở và tỷ lệ sống sót của bọ xít con.
▪ Cho bọ từ tuổi 1 đến trưởng thành (đực-cái) ăn rệp sáp ở các nhiệt độ 20 0 C, 30 0 C và nhiệt độ phòng trong 7 ngày, ghi nhận số liệu và đánh giá hiệu suất ăn rệp sáp của bọ xít mắt to
Chuẩn bị thí nghiệm
- Nguồn bọ xít mắt to Geocoris ochropterus được thu thập và lưu trữ tại phòng thí nghiệm Động vật học, Khoa Công nghệ Sinh học, cơ sở 3 Bình Dương
- Chuẩn bị các dụng cụ cần thiết cho suốt quá trình làm nghiên cứu
- Chuẩn bị các loại thức ăn, bông thấm nước, dưa chuột trong suốt quá trình nuôi.
Tiến hành thí nghiệm
- Thí nghiệm được bố trí trong phòng thí nghiệm: thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên (CRD)
- Cách nuôi bọ xít mắt to Geocoris ochropterus
1 Chuẩn bị hũ nhựa, trên nắp đục lỗ và dán lưới để giúp thoáng khí
2 Để bông gòn (dài khoảng 3cm, rộng 2cm) và dưa leo (cắt lát tròn rồi cắt làm bốn) cho vào hũ
3 Tiếp theo cho các loại thức ăn vào
4 Để bông gòn (cắt khoảng 1,5cm) vào hũ để bọ đẻ trứng lên
5 Thả bọ mắt to vào hũ
- Cứ 48 giờ thay thức ăn, bông ẩm và dưa leo Quan sát và ghi nhận số liệu
Thí nghiệm 1: Khảo sát các nguồn thức ăn dạng bột có ảnh hưởng tới tuổi thọ, khả năng đẻ trứng và quá trình lột xác của bọ mắt to Geocoris ochropterus
- Thí nghiệm được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên, gồm 5 nghiệm thức và 3 lần lặp lại, Mỗi lần lặp lại bố trí 3 hộp (mỗi hộp chứa 3 con), tổng 9 con/lần lặp lại và thức ăn theo 5 nghiệm thức
- Bột nhộng tằm, bột dế sẽ được phối trộn lần lượt với hạt hướng dương xay nhuyễn theo tỉ lệ 1:1, mỗi loại thức ăn tương ứng với 1 nghiệm thức
- Thức ăn được bỏ vào tủ lạnh bảo quản từng loại Cách hai ngày bọ sẽ được cho ăn một lượng thức ăn tương ứng với mỗi nghiệm thức
Chú thích: A: Bột nhộng tằm
B: Bột nhộng tằm trộn bột hạt hướng dương C: Bột dế
D:Bột dế trộn bột hạt hướng dương ĐC: Nhộng kiến vàng
- Thí nghiệm được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên, gồm 5 nghiệm thức và 3 lần lặp lại:
• Nghiệm thức 1: 5g bột dế + dưa leo
• Nghiệm thức 2: 5g bột nhộng tằm + dưa leo
• Nghiệm thức 3: 5g bột nhộng tằm trộn bột hạt hướng dương theo tỉ lệ 1:1 theo gram + dưa leo
• Nghiệm thức 4: 5g bột dế trộn bột hạt hướng dương theo tỉ lệ 1:1 theo gram + dưa leo
Hình 4: Thức ăn của bọ xít mắt to
• Nghiệm thức 5: 5g nhộng kiến + dưa leo (đối chứng)
Chú thích: A: Bột nhộng tằm;
B: Bột nhộng tằm trộn bột hạt hướng dương;
D: Bột dế trộn bột hạt hướng dương ĐC: Nhộng kiến vàng
Bảng 1: Bố trí nghiệm thức phối trộn thức ăn
Nghiệm thức 1 A (NT) 9 bọ + bột nhộng tằm xay nhuyễn / 1 lần lặp lại
Nghiệm thức 2 B (NT trộn HHD) 9 bọ + bột nhộng tằm trộn bột hạt hướng dương xay nhuyễn với tỉ lệ 1:1 theo gram / 1 lần lặp lại
Nghiệm thức 3 C (Dế) 9 bọ + bột dế xay nhuyễn / 1 lần lặp lại
Nghiệm thức 4 D (D trộn HHD) 9 bọ + bột dế trộn bột hạt hướng dương xay nhuyễn với tỉ lệ 1:1 theo gram / 1 lần lặp lại
Nghiệm thức 5 ĐC (Nhộng kiến) 9 bọ + nhộng kiến vàng / 1 lần lặp lại
- Thí nghiệm được tiến hành trong hộp nhựa trong suốt có nắp đậy (trên nắp có đục lỗ và dán lưới thoáng khí)
❖ Chỉ tiêu theo dõi (ghi nhận chỉ tiêu sau 48h/ lần)
Hình 5: Bố trí thí nghiệm với 5 nghiệm thức
- Thời gian phát triển qua các độ tuổi
- Tỉ lệ trứng đẻ ra
- Kích thước của trưởng thành cái và đực (chiều dài cơ thể, chiều rộng cơ thể, dài cánh, trọng lượng)
Kích thước bọ xít mắt to trưởng thành: Kích thước được đo bằng thước đo kỹ thuật
Cách đo kích thước thành trùng
▪ Chiều dài cơ thể (Body length): Được tính bằng khoảng cách từ điểm đầu tiên của đầu tới điểm cuối cùng của bụng
▪ Chiều rộng đầu (Head width): Là khoảng cách giữa 2 mắt kép
▪ Chiều dài cánh (Forewing length): Được tính từ điểm tiếp xúc của cánh và thân cho tới điểm cuối cùng của cánh
Khối lượng bọ xít mắt to:
▪ Con đực và con cái sau khi hóa trưởng thành khoảng 2 - 3 ngày được đem cân bằng cân phân tích
▪ Thời gian phát dục ở giai đoạn ấu trùng của bọ xít mắt to (ngày)
Kích thước bọ xít mắt to trưởng thành: Kích thước được đo bằng thước đo kỹ thuật
- Chiều dài cơ thể (Body length): Được tính bằng khoảng cách từ điểm đầu tiên của đầu tới điểm cuối cùng của bụng
- Chiều rộng đầu (Head width): Là khoảng cách giữa 2 mắt kép
Hình 7: Cách đo chiều rộng đầu của con đực và cái Thí nghiệm 2: Khảo sát tỷ lệ tăng tự nhiên của bọ xít mắt to Geocoris ochropterus
- Thí nghiệm được bố trí trong phòng thí nghiệm với 2 nghiệm thức và 3 lần lặp lại Sau đó lấy giá trị trung bình của mỗi nghiệm thức
Mỗi lần lập lại gồm 30 con bọ xít cái Geocoris ochropterus được cung cấp 2 loại thức ăn (nhộng kiến và nhộng tằm trộn hạt hướng dương) tương ứng với 2 nghiệm thức.
Bảng 2: Bố trí thí nghiệm khảo sát khả năng tăng tự nhiên của bọ
Nghiệm thức Kí hiệu Nhiệt độ
1 A (Nhộng kiến vàng) 30 cá thể cái bọ xít mắt to / 1 lần lặp lại
Hình 6: Cách đo chiều dài cơ thể của con đực và cái
2 B (Nhộng tằm trộn hạt hướng dương)
30 cá thể cái bọ xít mắt to / 1 lần lặp lại
- Ghi nhận các chỉ tiêu sau 48 giờ
- Chỉ tiêu theo dõi: Tổng số trứng thành trùng cái đẻ, tỉ lệ trứng nở, tỉ lệ đực – cái
Công thức tính tỷ lệ tăng sinh tự nhiên:
Trong đó: rm: Tỷ lệ tăng tự nhiên
R0: Là tổng số con cái thế hệ sau được sinh ra từ một cá thể mẹ
T: Thời gian của một thế hệ
Khả năng sinh sản của bọ xít mắt to: Số trứng đẻ / ngày, tổng số trứng đẻ, tỷ lệ trứng nở (%), tỷ lệ đực cái
Thí nghiệm 3 : Khảo sát sự ảnh hưởng của các nhiệt độ đến tỷ lệ trứng nở của bọ xít mắt to Geocoris ochropterus
Chú thích: a Trứng bọ vừa đẻ b Trứng bọ sau 3 ngày xuất hiện điểm mắt đỏ c Trứng bọ sắp nở sau 9 ngày d Trứng bọ chuẩn bị nở sau 15 ngày Hình 8: Các giai đoạn phát triển trứng bọ xít mắt to Geocoris ochropterus a b c d
- Thí nghiệm được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên, gồm 3 nghiệm thức với 3 lần lặp lại
▪ Nghiệm thức 1: 10 trứng bọ xít mắt to vừa đẻ bảo quản với nhiệt độ 10 o C /
▪ Nghiệm thức 2: 10 trứng bọ xít mắt to vừa đẻ bảo quản với nhiệt độ 20 o C /
▪ Nghiệm thức 3: 10 trứng bọ xít mắt to vừa đẻ bảo quản với nhiệt độ phòng (đối chứng) / 1 lần lặp lại
❖ Thí nghiệm được tiến hành trong hộp nhựa trong suốt có nắp đậy (trên nắp có đục lỗ và dán lưới thoáng khí) Bên trong hộp có bông gòn khô chứa trứng bọ Trứng sau khi được đẻ trên bông di chuyển trứng sang hộp mới sao cho đủ 10 trứng/hộp Gồm 9 hộp, mỗi hộp 10 trứng đem bảo quản ở 3 nhiệt độ: 10 o C,
20 o C, nhiệt độ phòng và theo dõi nhằm đánh giá khả năng bảo quản của trứng bọ xít mắt to
Bảng 3: Bố trí thí nghiệm nhiệt độ
Nghiệm thức Kí hiệu Nhiệt độ
1 T1 (10 0 C) 10 trứng bọ xít mắt to bảo quản với nhiệt độ 10 o C /
2 T2 (20 0 C) 10 trứng bọ xít mắt to bảo quản với nhiệt độ 20 0 C / 1 lần lặp lại
10 trứng bọ xít mắt to bảo quản với nhiệt độ phòng / 1 lần lặp lại
❖ Chỉ tiêu theo dõi: Ghi nhận chỉ tiêu sau 48h/ lần
▪ Theo dõi thời gian trứng nở từ lúc bắt đầu bảo quản cho đến khi nở
▪ Ghi nhận tỷ lệ trứng nở và trứng không nở
▪ Khả năng sống sót và số ngày lột xác của bọ xít mắt to ở mỗi độ tuổi, tuổi thọ của trưởng thành đực và cái khi trứng lưu ở các nhiệt độ và thời gian lưu trữ khác nhau
▪ Số trứng đẻ của bọ cái ở các nhiệt độ khác nhau
Thí nghiệm 4: Khảo sát khả năng tiêu diệt rệp sáp của bọ xít mắt to Geocoris ochropterus ở các nhiệt độ khác nhau
(Dưới kính soi nổi LABOMED vật kính 3.5X)
Hình 10: Rệp sáp sau khi bị bọ mắt to hút chích (Dưới kính soi nổi LABOMED vật kính 3.5X)
- Thí nghiệm được bố trí theo thể thức hoàn toàn ngẫu nhiên nhằm khảo sát khả năng ăn rệp của bọ xít mắt to từ tuổi 1 đến tuổi trưởng thành (đực – cái) được tiến hành trong hộp nhựa trong suốt có nắp đậy (trên nắp có đục lỗ và dán lưới thoáng khí) Bên trong mỗi hộp có 1 bọ mắt to và bổ sung thêm 10 con rệp sáp vào mỗi hộp (đếm và bổ sung số lượng rệp đủ 10 con mỗi ngày) Sử dụng 3 bọ xít mắt to ở mỗi độ tuổi (3 lần lặp lại) đem bảo quản ở 3 nhiệt độ: 20 o C, 30 o C, nhiệt độ phòng và theo dõi trong 7 ngày sau khi thả nhằm đánh giá khả năng ăn rệp sáp của bọ xít mắt to
Hình 11: Bố trí thí nghiệm khảo sát khả năng ăn rệp Bảng 4: Bố trí thí nghiệm tiêu diệt rệp sáp
Nghiệm thức Kí hiệu Nhiệt độ
1 X1 (20 0 C) 3 bọ xít mắt to ở mỗi độ tuổi (từ tuổi 1 đến trưởng thành) + rệp sáp bảo quản với nhiệt độ 20 o C / 1 lần lặp lại
2 X2 (30 0 C) 3 bọ xít mắt to ở mỗi độ tuổi (từ tuổi 1 đến trưởng thành) + rệp sáp bảo quản với nhiệt độ 30 o C / 1 lần lặp lại
3 bọ xít mắt to ở mỗi độ tuổi (từ tuổi 1 đến trưởng thành) + rệp sáp bảo quản với nhiệt độ phòng (đối chứng) / 1 lần lặp lại
- Đánh giá khả năng ăn mồi của bọ xít mắt to theo công thức Abbot (1925):
𝐶 × 100 Trong đó: H (%) là hiệu suất ăn mồi của bọ mắt to
C là số rệp sáp còn sống ở nghiệm thức đối chứng
T là số rệp sáp còn sống ở nghiệm thức thí nghiệm nhiệt độ
Xử lý số liệu: tất cả số liệu của thí nghiệm được thống kê bằng phần mềm EXCEL và xử lý thống kê bằng phần mềm STATGRAPHICS Plus
❖ Chỉ tiêu theo dõi (ghi nhận chỉ tiêu trong 7 ngày)
▪ Hiệu suất ăn mồi của bọ xít mắt to ở các nhiệt độ khác nhau
Xử lý số liệu, thống kê
- Xử lý số liệu bằng phần mềm EXCEL
- Xử lý thống kê bằng phần mềm Statgraphics
