Trang 1 TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINHKHOA KHOA HỌC SINH HỌCTHIẾT BỊ VÀ KĨ THUẬT CNSHGiảng viên: PhD Huỳnh Văn BiếtThành viên: Phạm Thảo Nhiên - 21126448 Trang 2 ĐỊNH TÍN
TRƯỜNG ĐẠI HỌC NƠNG LÂM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH KHOA KHOA HỌC SINH HỌC THIẾT BỊ VÀ KĨ THUẬT CNSH Giảng viên: PhD Huỳnh Văn Biết Thành viên: Phạm Thảo Nhiên - 21126448 Nguyễn Thị Ngọc Bích - 21126284 ĐỊNH TÍNH SALMONELLA TRONG SẢN PHẨM THUỶ SẢN BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR ĐỊNH TÍNH SAMONELLA TRONG SẢN PHẨM THUỶ SẢN BẰNG PHƯƠNG PHÁP PCR 1.KHÁI NIỆM PHƯƠNG PHÁP PCR 2.VI KHUẨN SALMONELLA LÀ GÌ ? 3.ĐỊNH TÍNH SALMOMELLA BẰNG PCR 4.TÀI LIỆU THAM KHẢO 1.KHÁI NIỆM PHƯƠNG PHÁP PCR Nguồn gốc • PCR (polymerase chain reation- phản ứng tổng hợp dây chuyền nhờ pokymerase) phương pháp sử dụng rộng rãi lỉnh vực Sinh học phân tử • Là kỹ thuật nhân (khuyếch tán) – tạo nhiều đoạn DNA riêng biệt Bản chất PCR phản ứng chép “ in vitro” • PCR có nhiều ứng dụng nhiều lĩnh vực, bao gồm xác định gen bệnh, quan hệ di truyền, diện loài vi khuẩn, nhiều nghiên cứu thử nghiệm di truyền khác 1.2 Nguyên tắc -Phân đoạn mẫu DNA -Chu kỳ gia nhiệt -Sao chép (Denaturation) -Ghép sở (Annealing) -Sao chép (Extension) -Lặp lại chu kỳ -Kết 2.Vi Khuẩn Salmonella gì? Khái niệm Salmonella loại vi khuẩn đường ruột không hình thành bào tử, chủ yếu di chuyển bằng roi quanh thân Nhóm sinh vật hóa dưỡng chủ yếu thu lượng từ phản ứng oxy hóa khử, có khả tạo ATP bằng oxy có sẵn dùng chất nhận điện tử hay lên men oxy sẵn Vi Khuẩn Salmonella gì? Biểu Khi sử dụng sản phẩm thuỷ sản mà có dấu hiệu sau có nguy dùng sản phẩm có nhiệm Samonella: o Tiêu chảy o Đau quặn bụng o Sốt o Buồn nôn o Nôn mửa o Đau đầu o Xuất máu phân Vi khuẩn Salmonella gì? Chuẩn đốn Các trường hợp nhiễm khuẩn salmonella thường chẩn đoán dựa triệu chứng bệnh Ngồi ra, bác sĩ cũng có thể định thực thêm số xét nghiệm sau để có kết luận xác nhất: o Xét nghiệm mẫu phân o Xét nghiệm máu Một số loại bệnh thủy sản nhiễm Salmonella Bệnh đốm trắng Tôm( WSSV) Bệnh viruss cá Koi: Koi Herpes Viruss (KHV) Bệnh vi bào tử trùng tôm(EHP) Bệnh hoại tử tôm ( IMNV) Bệnh vi khuẩn cá rô phi: Francisella (FLB) Dựa vào dấu hiệu lâm sàng dấu hiệu đặc trưng bệnh thận lách sưng to (a), xuất vết viêm hạt tràn lan thận lách (b), (c) 10 Các bước để thực PCR để xác định Salmonella thuỷ sản Chuẩn bị mẫu Tăng sinh Xử lý mẫu giải phóng ADN Khuếch đại Điện di Nhuộm ADN, quan sát sản phẩm khuếch đại Đọc kết 11 TÀI LIỆU THAM KHẢO https://www.google.com/url?sa=i&url=https%3A%2F%2Ftepbac.com%2Fdisease%2Ffull%2F74%2Fbenh-moi-tren-ca-ro-phi htm&psig=AOvVaw2ZgMXaqszwoM4Su-0DAhQL&ust=1698127781602000&source=images&cd=vfe&opi=89978449&ved =0CBEQjRxqFwoTCLCi3ovBi4IDFQAAAAAdAAAAABAF https://tamanhhospital.vn/nhiem-vi-khuan-salmonella/ Rapid Identification of Salmonella serovars in feces by specific detection of virulence gens, invA and spvC, by an Enrichment broth culture multiplex PCR combination assay (CHENG HSUN CHIU AND JONATHAN T.OU – Journal of Clinical microbiology, p.2619-2622 Oct 1996) Specific detection of Salmonella spp by multiple Polymerase Chain Reaction (JS WAY, KL JOSEPHSON, SD PILLAI, M ABBASZADAGAN, CP GERBA AND IL PEPPER.– Appl Environ Microbiol., 59 (5):1473–1479, 1993) Detection of Salmonella spp. and Listeria monocytogenes in Suspended Organic Waste by Nucleic Acid Extraction and PCR (CAROLA BURTSCHER, PAPA A FALL, PETER A WILDERER, AND STEFAN WUERTZ – Appl Environ Microbiol 65 (5): 2235 – 2237, 1999) Nordic commitees on food analysis (NMKL) No 71, 5th ed., 1999, Salmonella–Detection in foods https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=&cad=rja&uact=8&ved=2ahU KEwiX-oyIr46CAxXgcvUHHa9vAu4QFnoECAkQAQ&url=http%3A%2F%2Fwww.tbr.vn%2Fvi%2Ftechnical -support%2F907-dinh-tinh-salmonella-trong-san-pham-thuy-san-bang-phuong.html&usg=AOvVaw2RN EtbLeRMEyzYcgqiog5c&opi=89978449 12 CÁM ƠN THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN LẮNG NGHE Ạ 13