TRƯỜNG ĐẠ Ọ ỘI H C BÁCH KHOA HÀ N I LUẬN VĂN THẠC SĨ Nghiên cứu phương pháp xác định đa dư lượng kháng sinh trong th ng k thuịt bằ ỹ ật s c ký l ng ghép 2 l n kh i ph ắ ỏ ầ ố ổ (LC MS/MS) PHẠ ỮM H U H[.]
TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ Nghiên cứu phương pháp xác định đa dư lượng kháng sinh thịt kỹ thuật sắc ký lỏng ghép lần khối phổ (LC-MS/MS) PHẠM HỮU HOÈ Ngành: Công nghệ thực phẩm Giảng viên hướng dẫn: TS Vũ Hồng Sơn Viện: Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm HÀ NỘI, 2020 Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! 17061132045491000000 TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI LUẬN VĂN THẠC SĨ Nghiên cứu phương pháp xác định đa dư lượng kháng sinh thịt kỹ thuật sắc ký lỏng ghép lần khối phổ (LC-MS/MS) PHẠM HỮU HOÈ Ngành: Công nghệ thực phẩm Giảng viên hướng dẫn: TS Vũ Hồng Sơn Viện: Chữ ký GVHD Công nghệ sinh học Công nghệ thực phẩm HÀ NỘI, 2020 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN XÁC NHẬN CHỈNH SỬA LUẬN VĂN THẠC SĨ Họ tên tác giả luận văn: Phạm Hữu Hoè Đề tài luận văn: Nghiên cứu phương pháp xác định đa dư lượng kháng sinh thịt kỹ thuật sắc ký lỏng ghép lần khối phổ (LC-MS/MS) Ngành: Công nghệ thực phẩm Mã số SV: CA170327 Tác giả, Người hướng dẫn khoa học Hội đồng chấm luận văn xác nhận tác giả sửa chữa, bổ sung luận văn theo biên họp Hội đồng ngày 03/7/2020 với nội dung sau: - Bổ sung địa điểm, thời gian thực nghiên cứu vào phần nội dung phương pháp nghiên cứu - Bổ sung danh mục chữ viết tắt - Rà soát kết quả, thống sử dụng dấu “,” để ngăn cách phần nguyên phần thập phân số liệu - Chỉnh sửa lỗi trình bầy, lỗi tả Chỉnh sửa cách trích dẫn tài liệu tham khảo theo quy định - Bổ sung giấy xác nhận tham gia đề tài nghiên cứu, bổ sung nội dung lời cam đoan, lời cảm ơn Ngày tháng năm 2020 Giáo viên hướng dẫn Tác giả luận văn Phạm Hữu Hoè Vũ Hồng Sơn CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG Nguyễn Thị Minh Tú LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan nội dung luận văn “Nghiên cứu phương pháp xác định đa dư lượng kháng sinh thịt kỹ thuật sắc ký lỏng ghép lần khối phổ (LC-MS/MS)” kết đề tài nghiên cứu cấp sở Viện Dinh dưỡng mà tơi thành viên nhóm nghiên cứu Các số liệu kết luận văn hoàn tồn trung thực, tơi phép sử dụng, khơng vi phạm quyền tác giả khác Mọi tham khảo dùng luận văn trích dẫn nguồn gốc rõ ràng Tác giả luận văn Phạm Hữu Hòe LỜI CẢM ƠN Qua thời gian cố gắng, nỗ lực phấn đấu, với giúp đỡ Thầy Cơ, đồng nghiệp, tơi hồn thành đề tài Qua xin gửi lời cảm ơn đến Thầy Cô Viện Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm, Thầy Cô Bộ môn Quản lý chất lượng tạo điều kiện giúp đỡ suốt trình học tập thời gian thực đề tài Tôi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Dinh dưỡng, Khoa Hóa Thực phẩm, nhóm nghiên cứu Viện Dinh dưỡng đặc biệt TS Nguyễn Văn Sỹ chủ nhiệm đề tài cấp sở Viện Dinh dưỡng tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Tơi xin tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến TS Vũ Hồng Sơn tận tình truyền đạt kiến thức trình học tập trực tiếp hướng dẫn, bảo kinh nghiệm quý báu đồng thời ln ln động viên để tơi hồn thành tốt đề tài Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả luận văn Phạm Hữu Hòe MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan chung kháng sinh 1.1.1 Kháng sinh nhóm quinolone [12] 1.1.2 Kháng sinh nhóm penicillin [13] 1.1.3 Kháng sinh nhóm sulfonamide [14] 1.1.4 Kháng sinh nhóm macrolin [15] 1.2 Nghiên cứu tồn dư kháng sinh thực phẩm 1.2.1 Tình hình sử dụng kháng sinh chăn ni 1.2.2 Các nghiên cứu tồn dư kháng sinh thực phẩm 10 1.3 Tác hại tồn dư kháng sinh thực phẩm sức khỏe người 13 1.4 Các phương pháp xác định dư lượng kháng sinh thực phẩm 13 1.5 Một số quy định giới hạn tồn dư kháng sinh thực phẩm 15 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 2.1 Vật liệu nghiên cứu 18 2.2 Chỉ tiêu phân tích 18 2.3 Thiết bị, dụng cụ , hóa chất 18 2.3.1 Thiết bị, dụng cụ 18 2.3.2 Thuốc thử, hóa chất 19 2.4 Nội dung phương pháp nghiên cứu 19 2.4.1 Nghiên cứu xây dựng phương pháp phân tích 19 2.4.2 Ứng dụng quy trình để xác định dư lượng kháng sinh số mẫu thực tế 26 2.5 Xử lý đánh giá kết 26 2.5.1 Xử lý kết 26 2.5.2 Đánh giá kết 27 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 3.1 Xây dựng phương pháp phân tích 28 3.1.1 Xác định điều kiện LC-MS/MS 28 i 3.1.2 Quy trình xử lý mẫu 32 3.2 Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp 34 3.2.1 Độ đặc hiệu/độ chọn lọc 34 3.2.2 Khoảng tuyến tính đường chuẩn 35 3.2.3 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 39 3.2.4 Độ chụm (độ lặp lại) 39 3.2.5 Độ phương pháp (độ thu hồi) 41 3.2.6 Độ không đảm bảo đo 44 3.3 Phân tích mẫu thực tế 45 3.4 Thảo luận 46 3.4.1 Xây dựng quy trình phân tích 46 3.4.2 Xác nhận giá trị sử dụng phương pháp 48 3.4.3 Hàm lượng kháng sinh số mẫu thịt Hà Nội 49 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 52 PHỤ LỤC : 57 ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT AOAC (Association of Official Analytical Chemists): Hiệp hội nhà hố phân tích thức LC-MS (Liquid Chromatography Mass Spectrometry): Sắc ký lỏng khối phổ LOD (Limit of Detection): Giới hạn phát LOQ (Limit of Quantification): Giới hạn định lượng HPLC (High performance liquid chromatography): Sắc ký lỏng hiệu cao MRL (Maximum residue Limits): Giới hạn tối đa cho phép S/N (Signal to noise ratio): Tỷ lệ tín hiệu nhiễu iii