Thiet bi va ktcnsh 8 elisa

Trang 1

KỸ THUẬT ELISA

(ENZYME LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY)

TS Huỳnh Văn Biết

Viện Nghiên cứu CNSH-MT

Trang 2

ELISA

(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)

Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme

– Kỹ thuật sinh hóa để phát hiện kháng thể hay kháng nguyên trong mẫu cần phân tích

– Phương pháp này được thiết kế cho việc phát hiện và định lượng vật chất như peptides, protein, antibodies, hormone…

– được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực nghiên cứu

Trang 3

- Sự kết hợp đặc hiệu giữa kháng nguyên và kháng thể, trong đó kháng thể được gắn với một enzyme

ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay)

- Cơ chất thích hợp (thường là nitrophenol phosphate) được cho vào phản ứng, enzyme sẽ thủy phân cơ chất thành một chất có màu

Trang 7

Ag Ag

Các dạng phản ứng gắn kết

1 ELISA trực tiếp 2 ELISA gián tiếp

3 Sandwich ELISA trực tiếp

Hai kháng thể DAS ELISA

Trang 10

Sandwich ELISA

1 Phủ kháng thể sơ cấp lên đĩa

Trang 11

Các yếu tố ảnh hưởng đến độ nhạy của phản ứng ELISA

Trang 12

Biện luận kết quả

- Các yếu tố ảnh hưởng đến kết quả ELISA

* Đối chứng âm xuất hiện màu

*Đối chứng dương không xuất hiện màu

*Nếu màu xuất hiện quá thấp đối với đối chứng dương và cả mẫu kiểm tra thì phải kiểm tra lại kháng thể được gắn enzyme và nồng độ của chất tạo màu

Trang 15

ELISA to test for GMOs

• ELISA can help farmers separate their GMO grain lots from non-GMO grain lots • ELISA tests are used to identify specific proteins

- Delta-endotoxin Cry1Ab from Bt11 - glyphosate from Round-up (RR)

“Genetically Modified Organism (GMO)"

an organism in which the genetic material has been altered in a way that does not occur naturally by mating and/or natural

recombination

Trang 16

How to test for

GMOs ELISA:

Test for presence of proteins expressed from genetic

modifications