Thiet bi va ktcnsh 8 elisa

ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết với enzyme — Kỹ thuật sinh hóa đệ phát kháng thê hay kháng nguyên mẫu cân phân tích — Phương pháp thiết kế cho việc phát định tượng vật chất peptides, protein, antibodies, hormone — sử dụng rộng rãi nhiêu lĩnh vực nghiên cứu y học, thực phầm, nông nghiệp ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) - Sự kết hợp đặc hiệu kháng nguyên va khang thé, kháng thê găn với enzyme - Cơ chất thích hợp (thường x AA! IAA +substrate| |) cs * *% * nitrophenol phosphate) duoc cho vao phan tng, enzyme sé thủy phân chất thành chất có màu - Sự xuất màu chứng tỏ xảy phản ứng đặc hiệu g1ữa kháng thê với kháng nguyên Cơ chất 4) học: KN + KT Kháng thể phát (3) gan - Phan enzyme ung hoa enzyme xúc tác làm giải phóng oxy nguyên tử [O] (2) từ H2O2 đề oxy hóa chất thị màu Kháng thê bắt hoc: (1) Direct ELISA Indirect ELISA AAAAA Ww ⁄2 Sandwich ELISA (VY YY Pa 1111 411117 tị cà + =substrate crit a x eR wo J tí (a) Indirect ELISA —_> wash Antigencoated well —_> wash Add specific antibody to be measured ; Add enzymeconjugated secondary antibody (b) Sandwich ELISA —> wash Antibodycoated well (c) Competitive ELISA VỆ Y bšE ncubate antibody with — wash Add antigen to be measured ow A liều antigen to be measured => wash AŠ Add Ag-Ab mixture to antigen-coated well Add substrate (S) and measure color — wash Add enzymeconjugated secondary antibody wash Add substrate and measure color wash Add enzymeconjugated secondary antibody Add substrate and measure color —`®-®_—— sa Sandwich ELISA trực tiếp Hai kháng thể DAS ELISA —-© Sandwich ELISA gián tiếp Ba kháng thể TAS ELISA Sandwich ELISA Thêm kháng nguyên (mẫu dịch thực vật cân xét nghiệm) vào đĩa Thêm chất, để phản ứng điên ra, thay đôi màu Dừng phản ứng, đọc kết băng mặt thường Máy đo quang phô ELISA k\ fx Phủ kháng thê sơ cấp lên đĩa - Số lượng kháng thê thứ gan vào đáy giếng - AI lực kháng thê thứ nhât đôi với kháng nguyên - AI lực kháng thê thứ hai đôi với kháng nguyên Biện luận kết - Các yêu tô ảnh hưởng đên kêt qua ELISA * Đôi chứng âm xuât màu *Đôi chứng dương không xuât màu *Nêu màu xuât thâp đôi với đôi chứng dương mâu kiêm tra phải kiêm tra lại kháng thê găn enzyme va nong cua chat tao mau - Lap đường chuẩn ELISA định lượng “= a eres (8 ®@/& C89 ) oe Be Pe ae nà Soi ~ {909G | | ARCS | (Oey £ C06 Aa | Agricultural Uses Real-world Applications of Antibodies Applications — Dipstick tests/ELISA — Immunostaining — Western blotting — Crop-specific disease diagnosis — Animal disease diagnosis — Detection of GM crops — Basic research Bio-Rad’s TSE ELISA Kit “Genetically Modified Organism (GMO)" ELISA to test for GMOs DNA — RNA -—— Protein an organism in which the genetic material has been altered in a way that does not occur naturally by mating and/or natural recombination e ELISA can help farmers separate their GMO grain lots from non-GMO grain lots e ELISA tests are used to identify specific proteins - Delta-endotoxin Cry1Ab from Bt11 - glyphosate from Round-up (RR) Fiow to test for GMOs ELISA: Test for presence of proteins expressed from genetic modifications Pro: Quick, inexpensive, low tech Con: Crop specific, protein stability PCR: Test for presence DNA of inserted foreign Pro: ID different GM stability Con: Expensive, crops, timely DNA