BỆNH VÀNG LÁ GREENING HUANGLONGBING TRÊN CÂY CÓ MÚI TS.. Garnier INRAtháng 2, 1995, bệnh vàng lá Greening được xác định và tác nhân gây bệnh lá vi khuẩn gram âm Candidatus Liberibacter
Trang 1BỆNH VÀNG LÁ GREENING (HUANGLONGBING) TRÊN
CÂY CÓ MÚI
TS NGUYỄN VĂN HÒAVIỆN NC CĂQ MIỀN NAM
Trang 2Giả thuyết 2002: Huanglongbing và rầy chổng cánh
Diaphorina citri xuất hiện ở Nam Á — bao gồm Afghanistan,
Pakistan và Đông Bắc Ấn Độ — nhưng bệnh lần đầu tiên đượcghi nhận ở Đông Nam giáp biển của Trung quốc
Lan rộng sang hướng đôngcủa bệnh và của trung giantruyền bệnh sang vùng Đông
và Đông Nam Châu Á xãy ra
từ 100 đến 200 năm trước —phần lớn là do các hoạt độngcủa con người
Sự lây lan này tiếp tục lanrộng đến Indonesia hướng về
Úc Châu và quan đại dương
Graphic maps:
http://www.worldatlas.com Sự lây lan theo hướng đông đến to
Arabia và Réunion
Trang 3Sự tích lũy & Phát triển trong năm 2004:
Cây có múi xuất hiện cách đây 60 triệu năm ở vùng ĐôngGondwanan mà hiện nay là phần của bán đảo Arabian, Ấn
Glycosmis và Oxanthera là hai
loài thuộc cây có múi
Trang 42002: Rầy chổng cánh
Diaphorina citri xuất hiện ở
Nam Mỹ (từ thập niên1940) và ở Bắc Mỹ (từ năm
1998 ở Florida) – nhưngbệnh huanglongbing chưađược ghi nhận ở cả hai vùngnày
Trang 5Vùng canh tác Diện
tích (ha)
Giống
Đồng Bằng Sông Cửu Long 34.000 Cam mật, Cam sành, bưởi Năm roi,
quýt tiều, chanh tàu, tắc
Đồng Bằng Sông Đồng nai 400 Bưởi Tân Triều
Hương Thuỷ - Hương Trà- Huế 300 Bưởi Thanh Trà
Hương Sơn- Hà Tỉnh & Tuyên Hóa 2500 Bưởi Phú Trạch, Cam Bù
Hàm Yên - Bắc Giang (Tuyên Quang) Hà Giang 500 Cam Mật, Quýt Đường
Yên Bình, Đoan Hùng - YenSon 600 Bưởi Đoan Hùng
Viện Kế Hoạch và Thống kê., 1994
Những vùng cây có múi đặc sản của Việt Nam
Trang 6Diện tích (ha) Sản lượng (Ton) Năng suất (ton/ha)
1995 1998 % 1995 1998 % 1995 1998 %
Cả nước 55589 67465 121.36 362349 378957 104.58 6.51 5.61 86.17
Miền Bắc 14308 37985 265.48 57404 80428 140.10 4.01 2.12 52.89 Miền
Trang 7Từ cuối năm 1994, sau chuyến tham quan của Ts.Aubert (Cirad – Flhor) vào tháng 10 năm 1994 và của Gs Bove
và Ts Garnier (INRA)(tháng 2, 1995), bệnh vàng lá Greening được xác định và tác nhân gây bệnh lá vi khuẩn gram âm
(Candidatus Liberibacter asiaticus).
Trên thực tế, bệnh đã xãy ra từ thập niên 70 và tỷ lệbệnh từ 1 đến 5% Trong thời gian này, kỹ thuật ghép được
sử dụng để nhân giống Với kỹ thuật này mỗi năm 1 triệucây có múi sạch bệnh được sản xuất và cung cấp cho nôngdân, điều này dẫn đến 50-60% vườn cây có múi nhiễm bệnh(Vũ Khắc Nhượng, 1997)
Sau năm 1975, ở Miền Bắc Việt Nam, tỷ lệ bệnh chiếm
từ 60-100% Trong số đó, có khoản 30-40% vườn cây có múikhông mang trái
Trang 813.78114.680
16.85216.526
Diện
tích
(ha)
2000 1999
1998 1997
1996 1995
Bảng 2: Diện tích cây có múi ở tỉnh Cần Thơ từ 1995 đến 2000
Diện tích trung bình giảm xuống mỗi năm 1,000-2,000 ha
Diện tích cây có múi (ha) Năm
Trang 9Hồng, 2000 báo cáo rằng vi khuẩn gây thiếu dinh dưỡng khoángnhư giảm 70% kẽm so với cây khoẻ, Calcium giảm 29%
Shự thất thoát do bệnh chưa được tính toán kỹ lưỡng, tuynhiên, ước tính ở Cần thơ (tỉnh trồng cây có múi chủ yếu), thiệt hại lên đến 15 tấn/ha trên cam mật, 13 tấn/ha trêncam sành và 9 tấn/ha trên quýt đường (Châu và ctv, 2001)
Trang 10Chúng gây thiệt hạiđáng kể đến ngànhsản xuất cây có múi,
thống cây và gâythiệt hại đến mô libecủa cây, cản trở việc
Trang 1119,43 26,99
16,45
25,78
29,02 19,12
Trang 12Vào năm 1995, một đợt điều tra ở tỉnh Vĩnh long được Viện
NCCAQ Miền Nam kết hợp với cán bộ Sở NN tổ chức
Trong 300 vườn điều tra, có 288 vườn bị nhiễm (nhiễm 96%)
Có 18,4% vườn nhiễm 50% số cây,
Có 64,8% vườn nhiễm từ 5 đến 50% số cây,
Có 13,4% vườn nhiễm từ 1 đến 5% số cây và
Chỉ có 3,3% vườn chưa lộ triệu chứng
Vào năm 1996, một đợt điều tra nửa được thực hiện ở cam sành
tại huyện Tam Bình, tỉnh Vĩnh long ở những độ tuổi khác nhau:
Cây 4-5 năm tuổi: 80% cây nhiễm (trong 409ha điều tra)
Cây 5-8 năm tuổi: 20 -50% cây nhiễm (trong 276 ha điều tra)
Cây 8 năm tuổi: 1-5% cây nhiễm (trong 49 ha điều tra)
Trang 13Triệu chứng tiêu biểu đốm từng mảng do nhiểm
Greening
Lá cây khoẻ Mức đốm biến dộng của triệu chứng
đốm từng mảng (mottling)
Trang 14Lá bị vàng, gân xanh, lá nhỏ lại, mọc thành chùm thẳng đứng
Trang 16Cam m ật (Citrus sinensis)
Qu ýt: Citrus reticulata Blanco
B ưởi: Citrus grandis (L.)
Trang 17Trái bị lệch tâm do bệnh vàng lá Greening,
h ạt bị thui đen
Trang 18adaxial surface
abaxial surface
Trang 19Triệu chứng do Greening
Cây khoẻ
HLB
Trang 20Phản ứng Hypersensitive Reactions trên lá thuốc
lá
HR gây ra từ dịch trích từ cây bệnh
Không có hiện tượng HR
từ dịch trích từ cây khoẻ
Triệu chứng do HLB
Trang 21T ế bào mô libe
BLO
2 µm
Candidatus Liberibacter
asiaticus
Trang 22Rầy chổng cánh Diaphorina
citri – Tác nhân truyền bệnh
VLG
Trang 25Giám định bệnh Greening với mẫu được thu thập từ nhiều địa đIểm khác nhau, sử dung probe 2.6 kb trong
Lai Phõn Tử DNA-DNA
Giỏm định viruses, viroids và bacteria bằng lai phõn
tử DNA-DNA
Trang 26Lane 1 – 1kb DNA ladder Lane 2 – IARI isolate 1(ISRI)
Lane 3- IARI isolate 2(Vasant hostel) Lane 4 – IARI isolate 3(Glass house) Lane 5- Nagpur mandarin field isolate Lane 6 – Nagpur musambi field isolate Lane 7- Jalna moosambi field isolate Lane 8 – Buffer control
700bp
Thanh lọc các dòng cây có múi đối với
vi khuẩn gây bệnh VLG bằng PCR
Trang 27Candidatus Liberibacter asiaticus
Vi khuẩn Greening được giám định
từ dịch trích của cây nhiễm qua IF
Trang 28Multiplex PCR cho vi khuẩn & cho virus trên CCM
Greening
750 bp CYMV 680 bp
Greening +
CYMV
1000 bp
750 bp
250 bp
Trang 29Chiến lược phòng trừ
Kiểm soát bệnh thông qua biến
đổi đặc tính của truyền bệnh
của côn trùng?
Trang 30BIỆN PHÁP QUẢN L Ý
1.Cây giống được trồng phải là cây sạch bệnh sản xuất qua vi
ghép đỉnh sinh trưởng, được nhân trong nhà lưới hai cửa vàphải được chứng nhận
Tuy nhiên đây chỉ là
Trang 312 Trồng cây chắn gío chung quanh vườn để ngăn chặn sự tái nhiễm
do rầy truyền từ những cây bệnh xung quanh vườn
Trang 323 Điều khiển cây ra đọt non tập
trung 3-4 đợt/năm bằng cắt tỉa
cành, bón phân để phòng trừ
rầy hiệu quả hơn
4 Nên khử trùng dụng cụ cắt tỉa bằng nước Javel khi chuyển từ cây
này sang cây khác để tránh sự lây nhiễm
Trang 335 Giám định nhanh bằng phương pháp ID (do Viện NC CAQ Miền
Nam phát hiện) Phun thuốc trừ rầy trước khi nhổ bỏ những cây có triệuchứng bệnh và những cây bị nhiễm qua giám định, tiêu hủy để loại trừnguồn bệnh lây sang cây khỏe
6 Dùng bẩy màu vàng treo trong vườn để phát hiện sự xuất hiện của
rầy Thừơng xuyên kiểm tra vườn theo các đợt lá non để xác định sựxuất hiện của rầy và có biện pháp xử lý kịp thời
Trang 347 Quản lý vườn hợp lý để tạo điều kiện cho hai loài ong ký sinh
trên rầy chổng cánh Tamarixia radiata và Diaphorencyrtus aligarhensis phát triển, có thể nuôi kiến vàng trong vườn nhằm
góp phần hạn chế mật số sâu rầy
Trang 35Tamarixia radiata
Tamarixia radiata (FFTC,
2002)
Ấu trùng RCC bị tấn công bởi ong
ký sinh Tamarixia radiata (Knapp
et al., 2003)
Trang 36Diaphorencyrtus aligarhensis
Th ành trùng cái Diaphorencyrtus aligarhensis vùi kim đẻ
trứng vào RCCDiaphorina citri (Knapp et al., 2003)
Trang 37+ Rae et al (1997)
showed that HMOs
and machine oil
suppressed
oviposition.
+ Oils also kill nymphs
and adults (Rae et al
& Cen et al
từ 6-7 lần Thuốc có thể sửdụng để trừ rầy như Confidor(8ml/ bình 8 lít), Admire 050EC 8ml/bình 8lít hay 5ml Basssa 50EC + 20ml DC Tron Plus/bình 8 lít vào cácđợt lá non
Trang 38Bảng: Ký chủ của Diaphorian citri ở ĐBSCL
Giống Tên khoa học Mức độ phổ biến của D
+ ++
+
: Date has not been confirmed due to isolated area of Tri Tôn (An Giang)
Nhàn và Hòa, 2004
Trang 39Bảng: Kết quả điều tra khả năng chống chịu của giống/dòng cây có
múi thuộc họ Rutaceae đối với HLB ở phía Nam, Việt Nam
Tên khoa học Số cây quan
Sanh Mexican lime Eureka lemon Tau lemon Côn, chanh Tượng Bitter orange
Tac (hanh) Nguyet quoi Kim quit Can thang Quach
++/+ +++
++++ ++++ +/++ ++
Trang 40Bảng: Thử nghiệm khả năng kháng của bưởi và cam đối với
Huanglongbin khi chúng được ghép trên gốc ghép Feronia limonia ở điều
kiện vườn nông dân
Trang 41Bảng: Kết quả ban đầu truyền bệnh Huanglongbin trên họ
cây có múi Rutaceae sử dụng Diaphorina citri
Giám định bằng PCR Giống/dòng
Sweet Orange (C sinensis)
Nguyet quoi (Murraya paniculata)
Kim quit (Triphasia trifolia)
Canthang (Feronia limonia)
Quach (Feroneilla lucida)
Trang 42Bảng: Triệu chứng bệnh Huanglongbing trên một số loài thuộc họ
Rutaceae sau khi ghép truyền bệnh
Phản ứng PCR (Ngày sau khi chủng = DAI)
Nam roi Flying dragon Canthang Quach
+ + + + + + +
-
-
-
+ + + + + + +
-
-
-
+ + + + + + +
-
-
+ + + + + + +
-
- Not yet checked
Nhan and Hoa, 2004
Trang 43XIN CHÂN THÀNH
CẢM ƠN