Nghiên cứu bào chế nano berberin

KHOA Y-DƯỢC Ph arm ac y, VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI an d TRỊNH THỊ DUYÊN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ ol of M ed ici ne NANO BERBERIN Co p yr igh t@ Sc ho KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Hà Nội - 2019 KHOA Y-DƯỢC Ph arm ac y, VN U ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI an d TRỊNH THỊ DUYÊN NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ M ed ici ne NANO BERBERIN Sc ho ol of KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH DƯỢC HỌC Khóa: QH.2014 Y ThS NGUYỄN VĂN KHANH Co p yr igh t@ Người hướng dẫn: PGS.TS NGUYỄN THANH HẢI Hà Nội - 2019 Ph arm ac y, VN U LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, xin bày tỏ kính trọng biết ơn tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Thanh Hải (giảng viên môn Bào chế Công nghiệp Dược, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội), người thầy tận tình dạy bảo, hướng dẫn khơi gợi niềm đam mê nghiên cứu khoa học Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ThS Nguyễn Văn Khanh (cán bộ môn Bào chế Công nghiệp Dược, Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội), người thầy nhiệt tình tận tâm, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận an d Tơi xin chân thành cảm ơn tồn thể thầy giáo, giáo, anh, chị làm việc công tác Khoa Y - Dược, Đại học Quốc gia Hà Nội bảo, giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình học tập rèn luyện khoa Hà Nội, ngày 10 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Co p yr igh t@ Sc ho ol of M ed ici ne Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè người thân – người đồng hành Trịnh Thị Duyên BBR Berberin DĐVN Dược điển Việt Nam DSC Phân tích nhiệt vi sai Hydroxypropyl methylcellulose KTTP Kích thước tiểu phân NaLS Natri lauryl sulfat NSX Nhà sản xuất PVP Polyvinyl pyrrolidon ed ici ne an d HPMC Chỉ số phân bố kích thước tiểu phân PDI TKHH Tinh khiết hóa học M TT yr igh t@ Sc ho ol of w/v Co p Ph arm ac y, VN U DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Thuốc thử Khối lượng / thể tích Nội dung Trang Hình 1.1 Cơng thức hóa học berberin clorid Hình 1.2 Thiết bị nghiền bi Hình 2.1 Điều kiện quy trình bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 17 Hình 3.1 Đồ thị biểu diễn độ hấp thụ quang berberin theo nồng độ bước sóng 348 nm 20 Hình 3.2 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo loại polyme 21 Hình 3.3 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo nồng độ polyme 23 Hình 3.4 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo loại chất diện hoạt 24 Hình 3.5 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo nồng độ chất diện hoạt 26 Hình 3.6 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo kích cỡ bi 27 Hình 3.7 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền 28 Hình 3.8 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo thời gian nghiền 30 Hình 3.9 Sc ho Tên Ph arm ac y, VN U DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Sơ đồ bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 31 t@ ol of M ed ici ne an d 10 32 Hình 3.11 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin bột nano berberin 33 Co p yr igh Hình 3.10 Berberin nguyên liệu (bên trái) bột nano berberin (bên phải) Hình 3.12 Độ hịa tan berberin ngun liệu bột nano berberin 34 Tên Nội dung Trang Một số chế phẩm chứa berberin thị trường Bảng 2.1 Nguyên liệu hóa chất 15 Bảng 3.1 Độ hấp thụ quang theo nồng độ berberin bước sóng 348 nm 20 Bảng 3.2 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo loại polyme 21 Bảng 3.3 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo nồng độ polyme 22 Bảng 3.4 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo loại chất diện hoạt 24 Bảng 3.5 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo nồng độ chất diện hoạt 25 Bảng 3.6 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo kích cỡ bi 27 Bảng 3.7 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin theo tốc độ nghiền 28 Bảng 3.8 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo thời gian nghiền 29 ed ici ne M of ol Sc ho KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin bột nano berberin 32 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 33 yr igh t@ Bảng 3.10 an d Bảng 1.1 Bảng 3.9 Co p Ph arm ac y, VN U DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Ph arm ac y, VN U MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vài nét berberin an d 1.1.1 Cơng thức hóa học tên gọi 1.1.2 Tính chất lý, hóa ed ici ne 1.1.3 Định tính 1.1.4 Định lượng 1.1.5 Tác dụng dược lý 1.1.6 Dược động học M 1.1.7 Một số chế phẩm chứa berberin thị trường of 1.2 Tổng quan hạt nano thuốc ol 1.2.1 Vài nét công nghệ nano Sc ho 1.2.2 Ảnh hưởng kích thước nano đến sinh khả dụng thuốc 1.2.3 Các phương pháp bào chế hạt nano thuốc 1.2.4 Kỹ thuật nghiền bi t@ 1.2.5 Đông khô 11 igh 1.3 Một số nghiên cứu nano berberin 12 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 Co p yr 2.1 Nguyên liệu, thiết bị đối tượng nghiên cứu 15 2.1.1 Nguyên liệu, hóa chất 15 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ nghiên cứu 15 Ph arm ac y, VN U 2.1.3 Đối tượng nghiên cứu 16 2.2 Nội dung nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Xây dựng đường chuẩn phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS 16 2.3.2 Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 16 2.3.3 Phương pháp đánh giá số đặc tính nano berberin 18 2.4 Phương pháp xử lý số liệu 19 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 20 an d 3.1 Định lượng berberin phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS 20 3.2 Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 21 ed ici ne 3.2.1 Ảnh hưởng loại polyme tới kích thước tiểu phân 21 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ polyme tới kích thước tiểu phân 22 3.2.3 Ảnh hưởng loại chất diện hoạt tới kích thước tiểu phân 24 3.2.4 Ảnh hưởng nồng độ chất diện hoạt tới kích thước tiểu phân 25 M 3.2.5 Ảnh hưởng kích cỡ bi tới kích thước tiểu phân 26 of 3.2.6 Ảnh hưởng tốc độ nghiền tới kích thước tiểu phân 28 ol 3.2.7 Ảnh hưởng thời gian nghiền tới kích thước tiểu phân 29 Sc ho 3.3 Đánh giá số đặc tính bột nano berberin 32 3.3.1 Hình thức 32 3.3.2 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, zeta 32 t@ 3.3.3 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin 33 3.3.4 Kết phân tích nhiệt vi sai 34 igh 3.4 Bàn luận 34 Co p yr 3.4.1 Về phương pháp bào chế nano bererin 34 3.4.2 Về xây dựng quy trình bào chế nano berberin 35 3.4.3 Về đặc tính bột nano berberin thu 35 Ph arm ac y, VN U CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 37 4.1 Kết luận 37 4.2 Đề xuất 37 TÀI LIỆU THAM KHẢO Co p yr igh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d PHỤ LỤC Ph arm ac y, VN U ĐẶT VẤN ĐỀ Ngày nay, bên cạnh việc sử dụng dược chất có nguồn gốc hóa tổng hợp việc sử dụng hợp chất có nguồn gốc từ thiên nhiên ngày nhà khoa học quan tâm Berberin alcaloid thuộc nhóm isoquinolin, có rễ, thân rễ, vỏ thuộc chi Berberis, Hydrastis candensis, Coptis [4] Các nghiên cứu chứng tỏ berberin có nhiều tác dụng dược lý tốt chống viêm [32], chống nhiễm khuẩn [10], chống tiêu chảy có ảnh hưởng đáng kể đến bệnh đái tháo đường [16] Nó cho thấy tác dụng khác hệ thần kinh, tim mạch sử dụng phương pháp điều trị ung thư [12], [26], [28], [31] Mặc dù có nhiều ưu điểm, berberin lại bị hạn chế sử dụng an d lâm sàng Nguyên nhân chủ yếu berberin tan nước, khó hấp thu qua ruột, sinh khả dụng thấp khoảng 5% [25], [27] Bào chế berberin kích thước nano ed ici ne cải thiện độ tan tốc độ hịa tan, từ giúp nâng cao sinh khả dụng Có hai phương pháp để tạo hạt nano thuốc là: phương pháp từ lên (bottom-up) từ xuống (top-down) Trong đó, phương pháp bottom-up sử dụng thường phải hịa tan dược chất dung mơi hữu độc hại khó có M phân bố kích thước hẹp [23] Với phương pháp top-down sử dụng số of kỹ thuật nghiền bi, đồng hóa, đồng hóa áp suất cao Kỹ thuật nghiền bi Sc ho ol có nhiều ưu điểm nghiền hạt có kích thước tiểu phân bé trì trạng thái vơ khuẩn ngun liệu Chính vậy, tiến hành “Nghiên cứu bào chế nano berberin” với hai mục tiêu sau: t@ Bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Co p yr igh Đánh giá số đặc tính bột nano berberin Ph arm ac y, VN U Thế zeta: Giá trị tuyệt đối zeta mẫu lớn cho thấy hỗn dịch nano berberin có độ ổn định cao - Kết luận: Sử dụng 400g bi gồm: 04 bi loại 25g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại g, 50 bi loại 2g thu KTTP nhỏ nhất, nên lựa chọn dùng đồng thời nhiều cỡ bi để áp dụng cho nghiên cứu 3.2.6 Ảnh hưởng tốc độ nghiền tới kích thước tiểu phân Nano berberin bào chế theo quy trình mô tả mục 2.3.2 với an d thông số: - Công thức hỗn dịch: 20% berberin (1 g), 1% (0,05g) HPMC E6, 0,4% NaLS (0,02g) Thể tích nước khoảng 5ml - Bi zirconium oxid: khoảng 400 g gồm 04 bi loại 25g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại - ed ici ne g, 50 bi loại 2g Tần số: 25;30;35 Hz - Thời gian nghiền: 40 phút Hỗn dịch berberin thu sau nghiền đánh giá KTTP, số đa phân tán PDI, zeta Kết thể Bảng 3.7 Hình 3.7 Bảng 3.7 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền Thế zeta (mV) 29,4 ± 1,2 28,7 ± 0,8 25,3 ± 1,1 ol of M PDI 0,441 ± 0,009 0,543 ± 0,011 0,612 ± 0,015 0.7 Sc ho 0.6 0.5 0.4 igh yr Co p 0.3 0.2 0.1 25 30 Tần số (Hz) KTTP (nm) 35 PDI Hình 3.7 KTTP, PDI hỗn dịch berberin theo tốc độ nghiền 28 PDI 900 800 700 600 500 400 300 200 100 KTTP (nm) 648,5 ± 19,4 538,7 ± 20,6 846,1 ± 12,9 t@ KTTP (nm) Tần số (Hz) 25 30 35 Ph arm ac y, VN U Nhận xét: - KTTP: KTTP nhỏ 538,7 nm nghiền tần số 30Hz Điều giải thích tốc độ thấp (tần số 25 Hz) lực mài mịn chế gây gãy vỡ tiểu phân nên KTTP chưa giảm nhiều tốc độ cao (tần số 35 Hz) viên bi bị lực ly tâm ép vào thành, khơng có q trình mài mịn hay va đập xảy hiệu suất q trình giảm hay kích thước tiểu phân lớn - - PDI: Phân bố KTTP nghiền tần số 25; 30; 35 Hz có PDI 0,441; 0,543; 0,612 lớn 0,3 chứng tỏ KTTP có khoảng phân bố rộng Cơng thức nghiền tần số 25 Hz có khoảng phân bố nhỏ Thế zeta: Giá trị tuyệt đối zeta mẫu lớn cho thấy hỗn dịch an d nano berberin có độ ổn định cao Kết luận: Khi nghiền tần số 30 Hz thu KTTP nhỏ nên tần số 30 Hz ed ici ne lựa chọn 3.2.7 Ảnh hưởng thời gian nghiền tới kích thước tiểu phân Nano berberin bào chế theo quy trình mơ tả mục 2.3.2 với thông số: Công thức hỗn dịch: 20% berberin (1 g), 1% (0,05g) HPMC E6, 0,4% NaLS (0,02g).Thể tích nước khoảng 5ml M - Bi zirconium oxid: khoảng 400 g gồm 04 bi loại 25g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại g, 50 bi loại 2g - Tần số: 30Hz - Thời gian nghiền: 30; 40; 50; 60 phút Hỗn dịch nano berberin thu sau nghiền đánh giá KTTP, số đa phân Sc ho ol of - t@ tán PDI, zeta Kết thể Bảng 3.8 Hình 3.8 Bảng 3.8 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin theo thời gian nghiền Co p yr igh Thời gian (phút) 30 40 50 60 KTTP (nm) 925,8 ± 19,4 563,6 ± 10,9 618,5 ± 24,7 625,3 ± 9,3 PDI 0,823 ± 0,019 0,518 ± 0,012 0,707 ± 0,026 0,713 ± 0,021 29 Thế zeta (mV) -29,4 ± 1,2 -28,6 ± 0,7 -30,4 ± 1,3 -32,5 ± 0,8 0.9 Ph arm ac y, VN U 1000 900 0.8 800 0.7 0.6 600 0.5 500 0.4 400 PDI KTTP (nm) 700 0.3 300 0.2 200 0.1 100 0 40 50 Thời gian nghiền (phút) KTTP (nm) PDI 60 an d 30 Hình 3.8 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin theo thời gian nghiền ed ici ne Nhận xét: - KTTP: KTTP nhỏ 563,6 nm thời gian nghiền 40 phút Điều - M giải thích thời gian nghiền dài phân chia hạt tốt thời gian nghiền dài (50; 60 phút) tiểu phân nano có xu hướng kết tập lại với làm tăng kích thước PDI: Phân bố KTTP nghiền 30;40;50;60 phút 0,823; 0,518; Thế zeta: Giá trị tuyệt đối zeta mẫu lớn cho thấy hỗn dịch nano berberin có độ ổn định cao Sc ho - ol of 0,707; 0,713 lớn 0,3, chứng tỏ KTTP có khoảng phân bố rộng Trong đó, nghiền thời gian 40 phút có khoảng phân bố nhỏ Co p yr igh t@ Kết luận: Thời gian nghiền 40 phút cho KTTP PDI nhỏ nhất, nên thời gian nghiền 40 phút lựa chọn 30 - 20% Berberin nguyên liệu (1 g) - 1% HPMC E6 (0,05 g) - 0,4% NaLS (0,02 g) Ph arm ac y, VN U Từ kết khảo sát, chúng tơi đề xuất quy trình bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi sau: Nghiền ướt: - 400 g bi zirconium oxid an d gồm 04 bi loại 25 g, 10 bi loại 10 g, 20 bi loại 5g, 50 bi loại g M ed ici ne - Tần số: 30Hz - Thời gian: 40 phút Đông khô: of - Nhiệt độ: -850 C đến -800C igh t@ Sc ho ol - Thời gian: 24 yr Bảo quản bột nano berberin bình tránh ẩm nhiệt độ phịng Co p Hình 3.9 Sơ đồ bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi 31 Ph arm ac y, VN U 3.3 Đánh giá số đặc tính bột nano berberin ed ici ne an d 3.3.1 Hình thức Màu sắc: bột nano berberin có màu vàng giống nguyên liệu Hình 3.10 Berberin nguyên liệu (bên trái) bột nano berberin (bên phải) M 3.3.2 Kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, zeta Bột nano berberin (thu sau đơng khơ) đo kích thước tiểu phân phân bố kích thước tiểu phân, so sánh với hỗn dịch nano berberin (thu sau of nghiền bi), thu kết Bảng 3.9 Hình 3.11 Sc ho Loại ol Bảng 3.9 KTTP, PDI, zeta hỗn dịch nano berberin bột nano berberin t@ Hỗn dịch nano berberin PDI Thế zeta (mV) 563,4 ± 10,9 0,548 ± 0,029 -28,1 ± 1,5 570,7 ± 13,6 0, 576 ± 0,034 -28,6 ± 1,1 Co p yr igh Bột nano berberin KTTP (nm) 32 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 Hỗn dịch nano berberin PDI Ph arm ac y, VN U KTTP (nm) 1000 900 800 700 600 500 400 300 200 100 Bột nano berberin PDI an d KTTP (nm) Hình 3.11 KTTP, PDI hỗn dịch nano berberin bột nano berberin ed ici ne Nhật xét: Sau đơng khơ, bột nano berberin có KTTP 570,7 nm PDI 0,576 (> 0,3), chứng tỏ có phân bố KTTP rộng KTTP PDI bột nano berberin tăng lên không nhiều so với hỗn dịch nano berberin Cả hai mẫu có giá trị tuyệt đối zeta cao chứng tỏ có độ ổn định cao M 3.3.3 Độ hịa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin môi trường of pH=6,8 thể bảng Sc ho ol Bảng 3.10 Độ hòa tan berberin nguyên liệu bột nano berberin Thời gian (phút) Berberin nguyên liệu Bột nano berberin 10 15 30 60 16,22 19,17 19,98 20,76 20,87 26,31 29,57 29,86 30,39 30,92 Co p yr igh t@ Độ hòa tan (%) 33 Ph arm ac y, VN U Độ hòa tan (%) 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 10 20 30 40 Thời gian (phút) 60 Bột nano berberin an d Berberin nguyên liệu 50 Hình 3.12 Độ hịa tan berberin ngun liệu bột nano berberin ed ici ne Nhận xét: Độ hòa tan bột nano berberin tốt so với berberin nguyên liệu Sau phút, nano berberin hòa tan 26,31% cao gấp 1,6 lần so với berberin nguyên liệu Sau 60 phút, độ hòa tan nano berberin gấp khoảng 1,5 lần nguyên liệu Từ phút thứ M đến phút 60, độ hịa tan tăng lên khơng nhiều, nano berberin (từ 26,31% lên 30,92%) berberin nguyên liệu (từ 16,22% lên 20,87%) Sc ho ol of 3.3.4 Kết phân tích nhiệt vi sai Phổ DSC cho thấy berberin nguyên liệu có điểm chảy 72,4; 105,9; 206,2; 215,0 C (phụ lục 1), mẫu nano berberin có điểm chảy 69,2; 101,4; 205,4; 221,4 0C (phụ lục 2) thay đổi không nhiều so với berberin nguyên liệu Điều chứng tỏ nghiền bi không làm thay đổi trạng thái kết tinh nguyên liệu berberin ban đầu, t@ thay đổi nhỏ điểm chảy có mặt HPMC E6 NaLS có cơng thức igh 3.4 Bàn luận yr 3.4.1 Về phương pháp bào chế nano bererin Nghiên cứu sử dụng kĩ thuật nghiền bi để bào chế nano berberin, kĩ Co p thuật đơn giản, nhanh, mở rộng quy mơ cơng nghiệp Phương pháp sử dụng hexan độc hại phương pháp kết tủa bay dung môi 34 Sahibzada cộng áp dụng năm 2018 [22] Sau nghiền bi, hỗn dịch nano Ph arm ac y, VN U tiếp tục xử lý đông khơ để loại bỏ dung mơi thu chất rắn với hiệu suất cao 3.4.2 Về xây dựng quy trình bào chế nano berberin Qua tham khảo số tài liệu bào chế hạt nano phương pháp nghiền ướt, nồng độ polyme thường dùng 1-10% (w/v) [23], hay tỉ lệ dược chất/ polyme nằm khoảng 10:1 đến 1:0.8 (w/w) [34], nồng độ chất diện hoạt thường dùng nhỏ 1% [23], hay tỉ lệ dược chất/ chất diện hoạt 20/1 đến 1/0,5 [25] Nghiên cứu độc tính cho thể) tăng tính an tồn an d lựa chọn polyme HPMC E6 chất diện hoạt NaLS với nồng độ 1% 0,4%, nghiền bi cho nano berberin có KTTP bé Nồng độ chứng tỏ sử dụng tá dược, đặc biệt NaLS (một chất diện hoạt ion hóa dùng với nồng độ cao gây ed ici ne Một nghiên cứu sử dụng bi nhỏ thường có xu hướng dẫn đến hạt nano nhỏ tăng diện tích tiếp xúc[34] Kết nghiên cứu cho thấy, sử dụng đồng thời bốn loại bi 25; 10; 5; g cho KTTP khơng khác nhiều so với dùng bi nhỏ (thậm chí thu KTTP nhỏ hơn) of M 3.4.3 Về đặc tính bột nano berberin thu a) Về KTTP: Sc ho ol Với quy trình bào chế đưa hình 3.2.8, sau đơng khơ thu bột nano berberin có KTTP 570,7 ± 13,7 nm Nhận thấy, KTTP bào chế phương pháp nghiền bi có kích thước lớn nhiều so với nano berberin bào chế phương pháp khác, ví dụ phương pháp kết tủa bay (71,53 nm) [22], phương pháp kết tủa thay đổi dung môi (102,62 nm) [22], đồng hóa áp suất cao igh t@ (72,4 nm) [26] Phân bố KTTP điều chế phương pháp nghiền bi PDI= 0,576 chứng tỏ KTTP có khoảng phân bố rộng, cịn phương pháp đồng hóa có PDI= 0,3 chứng tỏ có khoảng phân bố hẹp Co p yr b)Về độ hòa tan Bột nano berberin điều chế phương pháp nghiền bi sau phút có % hịa tan khoảng 26, 31% cao gấp khoảng 1,6 lần berberin nguyên liệu Sau 60 phút, độ hòa tan nano berberin 30,92% So sánh với nano berberin điều chế phương 35 Ph arm ac y, VN U pháp kết tủa bay phương pháp kết tủa thay đổi dung môi (có độ hịa sau 15 phút 70%, hịa tan hết sau 60 phút), nhận thấy phương pháp nghiền bi giúp cải Co p yr igh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d thiện độ hòa tan berberin, mức độ cải thiện chưa cao 36 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ph arm ac y, VN U 4.1 Kết luận Sau thời gian nghiên cứu, rút kết luận sau: 1) Nghiên cứu bào chế nano berberin phương pháp nghiền bi Công thức hỗn dịch gồm 20% berberin, 1% HPMC E6, 0,4% NaLS nước Quy trình nghiền bi sử dụng bi zirconium oxid đồng thời bốn cỡ bi 25; 10; 2g, thời gian nghiền 40 phút, tần số nghiền 30 Hz Hỗn dịch nano berberin có KTTP trung bình 563,4 nm, PDI = 0,548, giá trị tuyệt đối zeta 28,1 mV Hỗn dịch đông khô nhiệt độ -85 C đến -80 C, 24 để thu bột nano berberin 2) Nghiên cứu đánh giá số đặc tính bột nano berberin hình an d thức, KTTP (570,7 nm), phân bố KTTP (0, 576), giá trị tuyệt đối zeta (28,6 mV), phân tích nhiệt vi sai, tốc độ hòa tan (khoảng 30,92% sau 60 phút) ed ici ne 4.2 Đề xuất Co p yr igh t@ Sc ho ol of M 1) Thử tác dụng sinh học bột nano berberin bào chế khả kháng nấm, kháng khuẩn,… 2) Ứng dụng bột nano berberin vào số dạng bào chế viên nén, viên nang cứng, viên nang mềm,… 37 Ph arm ac y, VN U TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt: Bộ Y tế (1994), Dược điển Việt Nam II, Nhà xuất Y học tr 71-74 [2] Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, Nhà xuất Y học Hà Nội tr 178179 [3] Bộ Y tế (2017), Dược điển Việt Nam V, Nhà xuất y học [4] Nguyễn Văn Dương (2017), "Nghiên cứu đánh giá viên bao bồi chứa berberin clorid", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội [5] Phạm Văn Giang (2013), "Nghiên cứu bào chế hệ tiểu phân nano curcurmin", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội [6] Đồng Quang Huy (2014), "Nghiên cứu chiết xuất berberin từ vàng đắng dung dịch kiểm", Luận văn thạc sĩ dược học [7] Từ Minh Koóng (2009), Kỹ thuật sản xuất dược phẩm, Nhà xuất y học tr 25 [8] La Vũ Thùy Linh (2010), Công nghệ nano – cách mạng khoa học kỹ thuật kỷ 21, Đại học Tôn Đức Thắng [9] Nguyễn Thị Thơi (2018), "Nghiên cứu tạo vi nang alginat chứa berberin", Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ, Đại học Dược Hà Nội Sc ho ol of M ed ici ne an d [1] Tài liệu tiếng nước ngoài: Amin A H, Subbaiah T V, Abbasi K M (1969), "Berberine sulfate: antimicrobial activity, bioassay, and mode of action", Canadian journal of microbiology, 15 pp 1067-1076 igh t@ [10] yr [11] Co p [12] Caruthers S D, Wickline S A, Lanza G M (2007), "Nanotechnological applications in medicine", Current opinion in Biotechnology, 18 (1), pp 26-30 Chun Y T, Yip T T, Lau K L, Kong Y C, et al (1979), "A biochemical study on the hypotensive effect of berberine in rats", Gen Pharmacol, 10 (3), pp 177182 Duroudier J (2016), Freeze-drying Heat Transfer in the Chemical, Food and Pharmaceutical Industries, pp 359–377 [14] Hayashi K, Minoda K, Nagaoka Y, Hayashi T, et al (2007), "Antiviral activity of berberine and related compounds against human cytomegalovirus", Bioorg Med Chem Lett, 17 (6), pp 1562-1564 [15] Kong W, Wei J, Abidi P, Lin M, et al (2004), "Berberine is a novel cholesterollowering drug working through a unique mechanism distinct from statins", Nat Med, 10 (12), pp 1344-1351 [16] Lee Y S, Kim W S, Kim K H, Yoon M J, et al (2006), "Berberine, a natural plant product, activates AMP-activated protein kinase with beneficial metabolic effects in diabetic and insulin-resistant states", Diabetes, 55 (8), pp 2256-2264 [17] Lin Y C, Kuo J Y, Hsu C C, Tsai W C, et al (2013), "Optimizing manufacture of liposomal berberine with evaluation of its antihepatoma effects in a murine xenograft model", Int J Pharm, 441 (1-2), pp 381-388 [18] Lin Y H, Lin J H, Chou S C, Chang S J, et al (2015), "Berberine-loaded targeted nanoparticles as specific Helicobacter pylori eradication therapy: in vitro and in vivo study", Nanomedicine (Lond), 10 (1), pp 57-71 [19] Malamatari M, Taylor K M G, Malamataris S, Douroumis D, et al (2018), "Pharmaceutical nanocrystals: production by wet milling and applications", Drug Discov Today, 23 (3), pp 534-547 [20] Peng W H, Lo K L, Lee Y H, Hung T H, et al (2007), "Berberine produces antidepressant-like effects in the forced swim test and in the tail suspension test in mice", Life Sci, 81 (11), pp 933-938 [21] Pragasam Viswanathan, Yuvashree Muralidaran, Ragavan G (2017), Challenges in oral drug delivery: a nano-based strategy to overcome Nanostructures for oral medicine, pp 173-201 igh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U [13] Co p yr [22] [23] Sahibzada M U K, Sadiq A, Faidah H S, Khurram M, et al (2018), "Berberine nanoparticles with enhanced in vitro bioavailability: characterization and antimicrobial activity", Drug Des Devel Ther, 12 pp 303-312 Vijaykumar Nekkanti, Vabalaboina V, Pillai R (2009), The Delivery of Nanoparticles pp 111-132 Wang T, Wang N, Song H, Xi X, et al (2011), "Preparation of an anhydrous reverse micelle delivery system to enhance oral bioavailability and antidiabetic efficacy of berberine", Eur J Pharm Sci, 44 (1-2), pp 127-135 [25] Wang Z, Wang Y S, Chang Z M, Li L, et al (2017), "Berberine-loaded Janus nanocarriers for magnetic field-enhanced therapy against hepatocellular carcinoma", Chem Biol Drug Des, 89 (3), pp 464-469 [26] Wang Z, Wu J, Zhou Q, Wang Y, et al (2015), "Berberine nanosuspension enhances hypoglycemic efficacy on streptozotocin induced diabetic C57BL/6 mice", Evid Based Complement Alternat Med, 2015 pp 239749 [27] Xue M, Zhang L, Yang M X, Zhang W, et al (2015), "Berberine-loaded solid lipid nanoparticles are concentrated in the liver and ameliorate hepatosteatosis in db/db mice", Int J Nanomedicine, 10 pp 5049-5057 [28] Ye M, Fu S, Pi R, He F (2009), "Neuropharmacological and pharmacokinetic properties of berberine: a review of recent research", J Pharm Pharmacol, 61 (7), pp 831-837 [29] Abdelwahed W, Degobert G, Stainmesse S, Fessi H (2006), "Freeze-drying of nanoparticles: formulation, process and storage considerations", Advanced drug delivery reviews, 58 (15), pp 1688-1713 [30] Junyaprasert V B, Morakul B (2015), "Nanocrystals for enhancement of oral bioavailability of poorly water-soluble drugs", asian journal of pharmaceutical sciences, 10 (1), pp 13-23 [31] Khemani M, Sharon M, Sharon M (2012), "Encapsulation of berberine in nanosized PLGA synthesized by emulsification method", ISRN Nanotechnology, 2012 [32] Kuo C-L, Chi C-W, Liu T-Y (2004), "The anti-inflammatory potential of berberine in vitro and in vivo", Cancer letters, 203 (2), pp 127-137 Sc ho t@ Loh Z H, Samanta A K, Heng P W S (2015), "Overview of milling techniques for improving the solubility of poorly water-soluble drugs", Asian journal of pharmaceutical sciences, 10 (4), pp 255-274 yr igh [33] ol of M ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U [24] Co p [34] Peltonen L (2018), "Design space and QbD approach for production of drug nanocrystals by wet media milling techniques", Pharmaceutics, 10 (3), pp 104 Co p yr igh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d Phụ lục 1: Phân tích DSC berberin nguyên liệu Ph arm ac y, VN U PHỤ LỤC Co p yr igh t@ Sc ho ol of M ed ici ne an d Ph arm ac y, VN U Phụ lục 2: Phân tích DSC bột nano berberin