(TIỂU LUẬN) NGHIÊN cứu ẢNH HƯỞNG của một số yếu tố đến KHẢ NĂNG LOẠI bỏ NITƠ, PHỐTPHO TRONG nước THẢI CHĂN NUÔI BẰNG sự kết hợp VI tảo CHLORELLA VULGARIS và VI KHUẨN AZOSPIRILLUM BRASILENSE

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KHOA SINH – MƠI TRƯỜNG ĐỀ CƯƠNG KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN KHẢ NĂNG LOẠI BỎ NITƠ, PHỐTPHO TRONG NƯỚC THẢI CHĂN NUÔI BẰNG SỰ KẾT HỢP VI TẢO CHLORELLA VULGARIS VÀ VI KHUẨN AZOSPIRILLUM BRASILENSE CHUYÊN NGÀNH: CÔNG NGHỆ SINH HỌC SINH VIÊN THỰC HIỆN: PHẠM THÙY DUYÊN LỚP: 16CNSH GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN: TS PHẠM THỊ MỸ Đà Nẵng, 6/2019 Tieu luan MỤC LỤC MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu đề tài .5 Ý nghĩa đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học .5 3.2 Ý nghĩa thực tiễn CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU .7 1.1 Khái quát chung vi tảo Chlorella vulgaris .7 1.1.1 Sơ lược vi tảo Chlorella vulgaris .7 a) Phân loại khoa học lịch sử phát .7 b) Đặc điểm hình thái .7 c) Cơ chế hình thành tế bào d) Các thành phần hóa học tảo Chlorella vulgaris e) Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh khối thành phần hóa học tảo 11 1.1.2 Ứng dụng tảo Chlorella vulgaris 11 a) Thực phẩm, sức khỏe lượng sinh học 11 b) Xử lý nước thải 12 1.2 Khái quát chung vi khuẩn Azospirillum brasilense 13 1.2.1 Sơ lược vi khuẩn Azospirillum brasilense 13 a) Phân loại khoa học lịch sử phát .13 b) Đặc điểm hình thái .13 c) Khả hoạt động 14 1.2.2 Ứng dụng vi khuẩn Azospirillum brasilense xử lý môi trường 14 1.3 Một số nghiên cứu nước việc xử lý nước thải vi tảo 15 1.3.1 Một số nghiên cứu nước .15 1.3.2 Một số nghiên cứu giới .16 CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 19 Tieu luan 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu .19 2.2 Nội dung nghiên cứu 19 2.3 Phương pháp nghiên cứu 19 2.3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 19 2.3.2 Hóa chất mơi trường 21 a) Môi trường nuôi cấy sinh khối vi khuẩn 21 b) Môi trường nuôi cấy sinh khối vi tảo 21 2.3.3 Phương pháp khảo sát nồng độ tối ưu vi khuẩn, vi tảo, alginate CaCl2 21 a) Nuôi cấy sinh khối vi sinh vật 21 b) Cố định vi khuẩn, vi tảo vào Alginate 22 c) Đếm Azospirillum brasilense Chlorella vulgaris 22 2.3.4 Phương pháp khảo sát khả hấp thụ nitơ phôtpho nước thải vi tảo Chlorella vugaris kết hợp vi khuẩn Azospirillum brasilense Alginate 23 a) Chuẩn bị nước thải nhân tạo .23 b) Phân tích hàm lượng nitơ phôtpho 23 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu .23 CHƯƠNG III: KẾT QUẢ DỰ KIẾN 23 CHƯƠNG IV: KẾ HOẠCH THỰC HIỆN .24 TÀI LIỆU THAM KHẢO 26 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Hiện nay, phát triển kinh tế, q trình cơng nghiệp hóa, đại hóa kéo tình trạng nhiễm mơi trường gây cân sinh thái tác động xấu đến sức khỏe người vô nghiêm trọng Bên cạnh hiểm họa nóng lên Trái Đất, hoang mạc hóa tình trạng nhiễm nguồn nước vấn đề nghiêm trọng cần quan tâm [1] Nguồn nước mặt châu lục bị ô nhiễm hữu nghiêm trọng nước thải từ khu công nghiệp, đô thị, nhà máy…với nhiều loại chất hữu phức tạp, độc hại, ảnh hưởng đến loại thủy sinh Đặc biệt năm gần đây, lượng nước thải chứa hàm lượng lớn ion amoni ion photpho từ hoạt động sinh hoạt hay nông nghiệp với xu hướng sử dụng thuốc bảo vệ thực vật diện rộng ngày tăng cao, gây mối nguy hại lâu dài đến sức khỏe người [2] Với mục đích hướng đến mơi trường sinh thái bền vững năm gần việc xử lý nước thải vi sinh vật đươc nhiều nhà khoa học quan tâm Nguyên lý phương pháp sử dụng chất khoáng chất hữu có sẵn nước thải tạo mơi trường sống cho vi sinh vật biến đổi hợp chất khó phân giải thành chất đơn giản [3] Trong trình vi sinh vật tiếp thu chất làm vật liệu để xây dựng tế bào, từ phát triển sinh sản làm cho sinh khối tăng lên Trong số vi tảo đối tượng ứng dụng rộng rãi [4] Phương pháp xử lý sinh học vi tảo ý đặc biệt nhờ vào khả quang hợp nó, chuyển đổi lượng mặt trời vào q trình tích lũy sinh khối sử dụng hợp chất dinh dưỡng nito phốt để sinh trưởng [5] Các hệ thống xử lý nước thải vi tảo nghiên cứu nhằm xử lý chất thải sinh hoạt, nước Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE thải chăn nuôi, nước thải nông nghiệp nước thải từ nhà máy chế biến thực phẩm [6] Trong tất loài tảo Chlorella vugaris (C vugaris) khai thác nhiều Ngồi có nghiên cứu kết hợp Chlorella vulgaris với việc thúc đẩy tăng trưởng vi khuẩn Azospirillum brasilense làm tăng đáng kể sinh khối sản xuất sắc tố vi tảo [7] Sự kết hợp vi khuẩn nội sinh Azospirillum sp vi tảo Chlorella sp công cụ việc tạo phương pháp xử lý nước thải Tương tác vi khuẩn vi tảo làm kích thích phát triển vi tảo Chlorella sp nhờ phytohormone chủng vi khuẩn Azospirillum sp tiết Từ đó, làm tăng khả loại bỏ nitơ (chủ yếu amoni) photpho xử lí nước thải Điều thực hướng tới phát triển phương pháp xử lý nước thải phong phú nitơ photpho nước thải nông nghiệp… Xuất phát từ lí luận thực tiễn trên, tiến hành thực tiểu luận với đề tài: “Nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố đến khả loại bỏ nitơ, phốtpho nước thải chăn nuôi kết hợp vi tảo Chlorella vulgaris vi khuẩn Azospirillum brasilense” Mục tiêu đề tài Xác định điều kiện ảnh hưởng đến hiệu việc xử lý nitơ, phôtpho nước thải kết hợp vi khuẩn Azospirillum brasilense vi tảo Chlorella vulgaris hạt Alginate Từ tạo liệu khoa học chủng vi khuẩn, vi tảo đồng cố định ứng dụng thực tiễn địa phương Ý nghĩa đề tài 3.1 Ý nghĩa khoa học Tối ưu hóa điều kiện đồng cố định vi khuẩn vi tảo hiệu xử lý nitơ, phơtpho nước thải mơ hình tạo liệu khoa học có tính hệ thống để phục vụ cho nghiên cứu ứng dụng sau Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE 3.2 Ý nghĩa thực tiễn Việc đồng cố định vi khuẩn Azospirillum brasilense vi tảo Chlorella vugaris hạt alginate tiền đề cho việc nghiên cứu, khảo sát khả chúng xử lý chất dinh dưỡng nước thải ứng dụng thực tiễn địa phương Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Khái quát chung vi tảo Chlorella vulgaris 1.1.1 Sơ lược vi tảo Chlorella vulgaris a) Phân loại khoa học lịch sử phát Chlorella vulgaris loài tảo xanh cây, thuộc phân loại khoa học sau đây: tên miền: Eukaryyota, giới: Protista, nhóm: Chlorophyta, lớp: Trebouxiophyceae, bộ: Chlorellales, họ: Chlorellaceae, chi: Chlorella, lồi: Chlorella vulgaris [8] Hình 1: Vi tảo Chlorella vulgaris Chlorella vulgaris Martinus Willem Beijerinck nhà nghiên cứu Hà Lan phát vào năm 1890 vi tảo có nhân xác định rõ Chloralla xuất phát từ “Cholos” có nguồn gốc tiếng Hy Lạp, có nghĩa màu xanh hậu tố “ella” tiếng La Tinh nghĩa có kích thước nhỏ Đây loài vi tảo đơn bào phát triển nước có mặt từ thời kỳ tiền Cambri cách 2,5 tỷ năm [9] b) Đặc điểm hình thái Chlorella vulgaris tế bào hình cầu có đường kính từ 2-10 µm có nhiều quan có cấu trúc tương tự thực vật Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE Thành tế bào : độ cứng bảo tồn tính tồn vẹn tế bào bảo vệ chống lại kẻ xâm lược môi trường khắc nghiệt Nó thay đổi theo giai đoạn tăng trưởng Thành tế bào tế bào tăng dần độ dày đạt 17-21nm sau trưởng thành Trong giai đoạn trưởng thành, độ dày thành tế bào thành phần tế bào không thay đổi theo điều kiện khác môi trường [10][11] Tế bào chất: Giống gel bị nhốt hàng rào màng tế bào bao gồm nước, protein hòa tan chất khoáng Là nơi lưu trữ quan nội tạng Chlorella Vulgaris ty thể, nhân nhỏ, không bào [12], lục lạp đơn máy Golgi [13] c) Cơ chế hình thành tế bào Hình 2: Hình ảnh cho thấy giai đoạn khác hình thành tế bào Chlorella Vulgaris: (a) giai đoạn phát triển tế bào sớm; (b) giai đoạn tăng trưởng tế bào muộn; (c) lục lạp giai đoạn phân chia; (d) giai đoạn phân chia tế bào trầm sớm; (e) giai đoạn phân chia tế bào trần muộn; (f) giai đoạn trưởng thành tế bào (g) giai đoạn nở Chlorella vulgaris sinh sản không di động, sinh sản vơ tính nhanh chóng Do đó, vòng 24 giờ, tế bào Chlorella Vulgaris phát triển điều kiện tối ưu nhân lên cách tự động tổng hợp, sinh sản vô tính phổ biến tảo Theo cách này, bốn tế bào có thành tế bào riêng hình thành bên thành tế bào tế bào mẹ [10][11] Sau tế bào trưởng thành, vách tế bào tế bào mẹ vỡ ra, cho phép giải phóng tế bào mảnh vụn lại tế bào mẹ tiêu thụ làm thức ăn tế bào hình thành Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE d) Các thành phần hóa học tảo Chlorella vulgaris Protein: có tầm quan trọng trung tâm hóa học thành phần vi tảo Nó có vai trị tăng trưởng, sửa chữa bảo trì tế bào phục vụ hoạt động tế bào, liên kết hóa học, điều tiết hoạt động tế bào bảo vệ chống lại kẻ xâm lược nước [13] Tổng hàm lượng protein Chlorella Vulgaris trưởng thành chiếm 42% 58% trọng lượng khô sinh khối [14][15], thay đổi tùy vào điều kiện phát triển Protein có nhiều vai trị khác nhau, gần 20% tổng số protein sử dụng để liên kết với thành tế bào, 50% protein tế bào 30% di chuyển vào khỏi tế bào [16] Chất lượng dinh dưỡng protein xác định axit amin nó, giống phần lớn vi tảo, axit amin Chlorella Vulgaris đánh giá thuận lợi chí tốt với so với hồ sơ tiêu chuẩn dinh dưỡng người Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) Tổ chức Nơng nghiệp Thực phẩm đề xuất (FAO), tế bào Chlorella Vulgaris tổng hợp axit amin thiết yếu axit amin không thiết yếu Lipid: Trong điều kiện tăng trưởng tối ưu, Chlorella Vulgaris đạt từ 5% đến 40% lipid trọng lượng khô sinh khối [14] chủ yếu bao gồm glycolipids, sáp, hydrocarbon, phospholipid lượng nhỏ axit béo tự do[17] [18] Các thành phần tổng hợp lục lạp nằm thành tế bào màng bào quan (màng lục lạp màng ty thể) Tuy nhiên, điều kiện tăng trưởng không thuận lợi, hàm lượng lipid (chủ yếu bao gồm triacyglycerol) đạt tới 58% [19][14][20] Carbohydrate: Tinh bột loại polysacarit dồi C Vulgaris Nó thường nằm lục lạp bao gồm amyloza amylopectin, với đường, chúng đóng vai trị dự trữ lượng cho tế bào Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE Cellulose polysacarit cấu trúc có sức đề kháng cao, nằm thành tế bào Chlorella Vulgaris hàng rào sợi bảo vệ Ngoài ra, polysacarit quan trọng có Chlorella Vulgaris β1-3 glucan [21], có nhiều lợi ích sức khỏe dinh dưỡng Sắc tố: Các sắc tố phong phú Chlorella Vulgaris chất diệp lục đạt 1%-2% trọng lượng khơ khô nằm màng lục lạp Chlorella Vulgaris chứa lượng carotenoids quan trọng hoạt động sắc tố phụ kiện cách bắt ánh sáng Ở thực vật cạn, số sắc tố hoạt động chất bảo vệ quang cách bảo vệ phân tử diệp lục khỏi xuống cấp tẩy trắng tiếp xúc mạnh với xạ oxy [13] Những sắc tố có nhiều đặc tính trị liệu, hoạt động chống oxy hóa [22], tác dụng bảo vệ chống thối hóa võng mạc [23], điều hịa cholesterol máu, phịng ngừa bệnh mãn tính (ung thư tim mạch ruột kết) củng cốhệ thống miễn dịch [24] Khống chất: Chúng đóng vai trị chức quan trọng người Ví dụ, cation kali cho dinh dưỡng người, có liên quan với cân chất lỏng nội bào, chuyển hóa carbohydrate, protein tổng hợp xung thần kinh Ngồi ra, sử dụng làm hóa chất phân bón nơng nghiệp dạng clorua (KCl), sunfat (K2SO4) nitrat (KNO3) Magiê quan trọng việc trì hoạt động thần kinh bình thường, liên tục co cơ, thiếu magiê thể người dẫn đến trầm cảm triệu chứng hành vi tự tử Kẽm thành phần thiết yếu enzyme, tham gia vào trình trao đổi chất trình bao gồm tổng hợp carbohydrate, lipid protein đồng yếu tố enzyme superoxide effutase, có liên quan đến việc bảo vệ chống lại q trình oxy hóa giảm mức độ nghiêm trọng tiêu chảy Vitamin: phân loại hịa tan nước (C B) khơng tan chất béo (A, D, E K) Chlorella Vulgaris có chứa nhiều vitamin quan trọng 10 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE màu dao động từ 41,8% đến 50,0%, giảm NH4 –N (44,4-45,1%), PO4 –P (33,1 -33,3%) COD (38,3 -62,3%) [54] Việc hấp thụ kim loại nặng vi tảo tạo bước khả thi xử lý nước thải ô nhiễm kim loại nặng báo cáo rằng, quang hợp trực tiếp vi tảo có vai trị việc loại bỏ kim loại nặng nước thải dầu mỏ Bên cạnh vi tảo cịn báo cáo có khả việc tích lũy Cu 2+, Pb2+ Cr3+ Ni2+, Cd2+, Co2+, Fe2+ Mn2+ Vi tảo chứng minh làm giảm hydrocarbon chứa dầu thải [4] Năm 2013 Farooq Ahmad tiến hành sử dụng Chlorella vulagris xử lý nước thải đô thị sản xuất dầu diesel sinh học, kết phân tích thơng số thực bước thí nghiệm cho thấy tỷ lệ phần trăm loại bỏ tối đa COD (99,9%), BOD (100%), NO3-(99,98%), PO42-(99,96%) tổng colifrom (100%) nước thải [55] 18 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng phạm vi nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu Chủng vi khuẩn Azospirillum brasilense từ Phịng vi sinh, Khoa Sinh-Mơi trường, ĐH Sư Phạm Đà Nẵng Chủng vi tảo Chlorella vulgaris từ Phịng cơng nghệ tảo, Khoa Sinh-Mơi trường, ĐH Sư Phạm Đà Nẵng Hạt alginate đồng cố định vi khuẩn vi tảo 2.1.2 Phạm vi nghiên cứu Địa điểm thu thập nước thải ngồi thực địa Phịng TN vi sinh, Phịng xử lý mơi trường Phịng cơng nghệ tảo thuộc khoa Sinh - Môi trường trường Đại học Sư Phạm, Đại học Đà Nẵng 2.2 Nội dung nghiên cứu - Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến khả sinh IAA vi khuẩn Azospirillum brasilense - Khảo sát khả sinh trưởng vi tảo Chlorella vulgaris đồng cố định với vi khuẩn Azospirillum brasilense hạt alginate - Đánh giá ảnh hưởng nồng độ nitơ, phôtpho nước thải chăn nuôi kết hợp vi khuẩn vi tảo 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Sơ đồ bố trí thí nghiệm Các thí nghiệm nghiên cứu bố trí theo sơ đồ sau đây: 19 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE CHỦNG VI KHUẨN AZOSPIRILLUM BRASILENSE CHỦNG VI TẢO CHLORELLA VULGARIS KS MÔI TRƯỜNG, pH, NỒNG ĐỘ TRYPTOPHAN, NHIỆT ĐỘ KHẢO SÁT KHẢ NĂNG SINH TRƯỞNG CỐ ĐỊNH TRONG ALGINATE pH, NHIỆT ĐỘ, CƯỜNG ĐỘ ÁNH SÁNG XỬ LÝ MƠI TRƯỜNG TRONG PTN %N, %P QUY TRÌNH TỐI ƯU XỬ LÝ NƯỚC THẢI NÔNG NGHIỆP 20 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE 2.3.2 Hóa chất mơi trường a) Môi trường nuôi cấy sinh khối vi khuẩn Môi trường Dobereiner cộng (1976) (g/l) Acid malic 5,0 K2HPO4 0,4 MgSO4.7H20 0,2 CaCl2.7H2O 0,02 NaCl 0,1 FeCl3.6H2O 0,01 NaMoO4 0,002 Bromothymol blue (0.5%) 2ml KOH 4,0 Agar 1,75 pH 6,8 b) Môi trường nuôi cấy sinh khối vi tảo Môi trường C30 (g/l): Vi chất dinh dưỡng (µg/l) KNO3  25 H3BO3  2,86 MgSO4 .7H2O 10 MnCl2.4H2O 1,81 KH2PO4  ZnSO4 .7H2O, 0,11 K2HPO4  CuSO4 .5H2O, 0,09 FeSO4 .7H2O NaMoO4 , 0,021 2.3.3 Phương pháp khảo sát nồng độ tối ưu vi khuẩn, vi tảo, alginate CaCl2 a) Nuôi cấy sinh khối vi sinh vật Chlorella vulgaris nuôi mơi trường khống vơ trùng (BBM) ngày 21 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE Azospirillum brasilense nuôi môi trường lỏng LB 30±20℃ trong 17 giờ, máy lắc tốc độ 150 vòng/phút b) Cố định vi khuẩn, vi tảo vào Alginate Ly tâm 100ml dịch nuôi cấy vi tảo Chlorella vulgaris (6.106 tế bào/ml) 50ml dịch nuôi Azospirillum brasilense (109 CFU/ml) 4000 vòng 20 phút Sau ly tâm, rửa lần nước muối NaCl 0,85% Sau đó, giữ lại 20ml dung dịch nước muối bình tam giác [56] Vi sinh vật cố định phương pháp mô tả Bashan [56]: Trộn lẫn 10ml dịch nước muối chứa vi tảo Chlorella vulgaris 10ml dịch nước muối chứa vi khuẩn Azospirillum brasilense với 80ml dung dịch alginate 2% vô trùng (dung dịch alginate sau hấp khủ trùng làm giảm độ nhớt chút) khuấy chậm 15 phút Nhỏ giọt hỗn hợp vào dung dịch CaCl2 2% vô trùng khuấy chậm Ủ 1h nhiệt độ phịng để bảo dưỡng sau rửa dung dịch nước muối NaCl 0,85% vô trùng Vi khuẩn vi tảo sau cố định alginate nuôi môi trường BBM nhiệt độ phịng thí nghiệm 10 ngày Bởi cố định thường làm giảm số lượng vi sinh vật hạt nên cần bước ủ thứ hai: ủ qua đêm mơi trường khống ni dưỡng vi khuẩn vi tảo Sau đó, rửa hạt lần dung dịch muối NaCl 0,85% vơ trùng Nếu cần thiết lưu trữ hạt 40C ngày Hòa tan hạt cách ngâm hạt 1ml dung dịch NaHCO3 4% 30 phút đếm vi tảo vi khuẩn c) Đếm Azospirillum brasilense Chlorella vulgaris Đếm Azospirillum brasilense cách cấy chang loạt dịch pha loãng nước muối NaCl 0,85% nồng độ đĩa thạch dinh dưỡng tạo khuẩn lạc có màu hồng đến đỏ đặc trưng Chlorella vulgaris đếm cách sử dụng buồng đếm hồng cầu 22 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE 2.3.4 Phương pháp khảo sát khả hấp thụ nitơ phôtpho nước thải vi tảo Chlorella vugaris kết hợp vi khuẩn Azospirillum brasilense Alginate a) Chuẩn bị nước thải nhân tạo Chuẩn bị nước thải nhân tạo, vô trùng [56] (mg / L): NaCl CaCl2 MgSO4.7H2O K2HPO4 21.7 KH2PO4 8.5 Na2HPO4 33.4 NH4Cl 19.1 b) Phân tích hàm lượng nitơ phơtpho Phân tích hàm lượng nitơ phơtpho cách sử dụng máy đo quang phổ NH4- phân tích phương pháp Nessler, PO43- phân tích phương pháp sử dụng thuốc thử Sunfo-molypdic 2.3.5 Phương pháp xử lý số liệu Các thí nghiệm lặp lại lần Số liệu phân tích từ thí nghiệm tính tốn thống kê chương trình excel ANOVA CHƯƠNG III: KẾT QUẢ DỰ KIẾN Xác định khả hấp thụ nitơ phôtpho nước thải vi tảo Chlorella vugaris đồng cố định vi khuẩn Azospirillum brasilense Alginate 23 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE CHƯƠNG IV: KẾ HOẠCH THỰC HIỆN STT Thời gian Nội dung Kết dự kiến 06/2019 Xây dựng đề cương nghiên cứu Đề cương nghiên cứu hoàn chỉnh 07/2019 Nhân sinh khối vi khuẩn Sinh khối vi Azospirillum brasilense vi tảo khuẩn, vi tảo Chlorella vulgaris phục vụ cho việc đồng cố định 8/2019 Cố định vi khuẩn Azospirillum Vi khuẩn, vi tảo brasilense vi tảo Chlorella phát triển vulgaris vào hạt Alginate Alginate 9/2019- Khảo sát nồng độ tối ưu vi Tìm nồng độ 11/2019 khuẩn, vi tảo, alginate CaCl2 tối ưu thực đồng cố định phục vụ cho việc xử lý nước thải 1/2020-3/2020 Khảo sát khả loại bỏ nito Xác định photpho khỏi nước thải vi khả loại 24 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE khuẩn Azospirilium brasilense bỏ nito kết hợp với vi tảo Chlorella photpho 4/2020- 5/2020 vulgaris Alginate nước thải Viết báo cáo tổng kết Báo cáo tổng kết hoàn thành 25 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Khánh Ly (TH theo Khotailieu), “Thực trạng nhiễm mơi trường tồn cầu.” 2015 [2] “Hiện trạng ô nhiễm amoni nguồn nước cách xử lý.” 2010 [3] K Đ M C ThS Lê Thị Siêng, PGS.TS Lương Văn Thanh, “Ứng dụng công nghệ lọc sinh học vật liệu để xử lý nước thải nhà máy chế biến thủy sản,” Tạp chí KH&CN Thủy lợi [4] L E González, R O Cañizares, and S Baena, “Efficiency of ammonia and phosphorus removal from a colombian agroindustrial wastewater by the microalgae,” Bioresour Technol., vol 60, pp 259–262, 1997 [5] N Abdel-Raouf, A A Al-Homaidan, and I B M Ibraheem, “Microalgae and wastewater treatment,” Saudi J Biol Sci., vol 19, no 3, pp 257–275, 2012 [6] et al NGUYỄN, Thị Đông Phương, “Nghiên cứu ảnh hưởng hệ vi sinh vật lên trình sinh trưởng tảo Chlorella vulgaris nước thải thủy sản.,” B2017-DN06-04 [7] L E de-Bashan, Y Bashan, M Moreno, V K Lebsky, and J J Bustillos, “ Increased pigment and lipid content, lipid variety, and cell and population size of the microalgae Chlorella spp when co-immobilized in alginate beads with the microalgae-growth-promoting bacterium Azospirillum brasilense ,” Can J Microbiol., vol 48, no 6, pp 514–521, 2002 [8] wikipedia, “Chlorella vulgaris.” 2019 [9] C Safi, B Zebib, O Merah, P Y Pontalier, and C Vaca-Garcia, “Morphology, composition, production, processing and applications of Chlorella vulgaris: A review,” Renew Sustain Energy Rev., vol 35, no October 2017, pp 265–278, 2014 [10] K S Yamamoto M, Fujishita M, Hirata A, “Regeneration and maturation of 26 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE daughter cell walls in the autospore-forming green alga Chlorella vulgaris (Chlorophyta, Trebouxiophyceae),” J Plant Res 2004;117257–64 [11] K S Yamamoto M, Kurihara I, “Late type of daughter cell wall synthesis in one of the Chlorellaceae, Parachlorella kessleri (Chlorophyta, Trebouxiophyceae),” Planta 2005;221:766–75 [12] M S Kuchitsu K, Oh-hama T, Tsuzuki M, “Detection and characterization of acidic compartments (vacuoles) in Chlorella vulgaris 11 h cells by 31P-in vivo NMR spectroscopy and cytochemical techniques.,” Arch Microbiol 1987;14883–7 [13] M D Solomon EP, Berg LR, “Biology 5th ed.,” in Fort Worth: Saunders College Publishing; 1999, [14] B EW, “Microalgae: biotechnology and microbiology,” Cambridge; New York Cambridge Univ Press 1994 [15] A K Z Seyfabadi J, Ramezanpour Z, “Protein, fatty acid, and pigment content of Chlorella vulgaris under different light regimes,” J Appl Phycol 2011;23721–6 [16] Berliner MD., “Proteins in Chlorella vulgaris.,” Microbios 1986;46:199–203 [17] Lee RE., “Phycology 4th ed.,” in Cambridge, England; New York: Cambridge University Press, 2008 [18] et al Hu Q, Sommerfeld M, Jarvis E, Ghirardi M, Posewitz M, Seibert M, “Microalgal triacylglycerols as feedstocks for biofuel production: perspectives and advances,” Plant J 2008;54621–39 [19] C N Mata TM, Martins AA, “Microalgae for biodiesel production and other applications: a review,” Renew Sustain Energy Rev 2010;14217–32 [20] S A Stephenson AL, Dennis JS, Howe CJ, Scott SA, “Influence of nitrogenlimitation regime on the production by Chlorella vulgaris of lipids for biodiesel feedstocks.,” Biofuels 2009;1:47–58 27 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE [21] T V.-D Yeoh H-H, “Protein contents, amino acid compositions and nitrogen-to-protein conversion factors for Cassava roots.,” J Sci Food Agric 1996;7051–4 [22] E J Gouveia L, Raymundo A, Batista AP, Sousa I, “Chlorella vulgaris and Haematococcus pluvialis biomass as colouring and antioxidant in food emulsions,” Eur Food Res Technol 2005;222362–7 [23] G E Fernandez-Sevilla JM, Fernandez FG, “Obtaining lutein-rich extract from microalgal biomass at preparative scale.,” Methods Mol Biol 2012;892 307–14 [24] L D Cha KH, Koo SY, “Antiproliferative effects of carotenoids extracted from Chlorella ellipsoidea and Chlorella vulgaris on human colon cancer cells,” J Agric Food Chem 2008;5610521–6 [25] S A Becerra G, Menolasina S, “Supercritical fluid extraction and supercritical fluid chromatography of Vitamin E in pharmaceutical preparations.,” J High Resolut Chromatogr 1999;22300–2 [26] D G Brown MR, Jeffrey SW, Volkman JK, “Nutritional properties of microalgae for mariculture.,” Aquac 1997;151315–31 [27] N K Konishi F, Tanaka K, Himeno K, Taniguchi K, “Antitumor effect induced by a hot water extract of Chlorella vulgaris (CE): resistance to MethA tumor growth mediated by CE-induced polymorphonuclear leukocytes.,” Cancer Immunol Immunother CII 1985;1973–8 [28] C H Lv JM, Cheng LH, Xu XH, Zhang L, “Enhanced lipid production of Chlorella vulgaris by adjustment of cultivation conditions.,” Bioresour Technol 2010;101:6797–804 [29] D B M Converti A, Casazza AA, Ortiz EY, Perego P, “Effect of temperature and nitrogen concentration on the growth and lipid content of Nannochloropsis oculata and Chlorella vulgaris for biodiesel production.,” 28 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE Chem Eng Process Process Intensif 2009;481146–51 [30] J Y.-H Widjaja A, Chien C-C, “Study of increasing lipid production from fresh water microalgae Chlorella vulgaris,” J Taiwan Inst Chem Eng 2009;4013–20 [31] Z B Liu ZY, Wang GC, “Effect of iron on growth and lipid accumulation in Chlorella vulgaris,” Bioresour Technol 2008;99:4717–22 [32] K R Richmond A, Boussiba S, Vonshak A, “A new tubular reactor for mass production of microalgae outdoors,” J Appl Phycol 1993;5327–32 [33] Venkataraman LV, “Spirulina platensis (Arthrospira): physiology, cell Biology and biotechnology,” in J Appl Phycol 1997;9:295–6., [34] R A Fradique M, Batista AP, Nunes MC, Gouveia L, Bandarra NM, “Incorporation of Chlorella vulgaris and Spirulina maxima biomass in pasta products.,” in Part 1: preparation and evaluation J Sci Food Agric 2010;90:1656–64., [35] S J.-P González-Fernández C, Sialve B, Bernet N, “Impact of microalgae characteristics on their conversion to biofuel,” in Part I: focus on cultivation and biofuel production Biofuel Bioprod Biorefin 2012;6:105–13., [36] W M Tran NH, Bartlett JR, Kannangara GSK, Milev AS, Volk H, “Catalytic upgrading of biorefinery oil from micro-algae,” Fuel 2010;89265–74 [37] B U Banerjee A, Sharma R, Chisti Y, “Botryococcus braunii: a renewable source of hydrocarbons and other chemicals,” CRC Crit Rev Biotechnol 2002;22245–79 [38] et al Ghirardi ML, Zhang L, Lee JW, Flynn T, Seibert M, Greenbaum E, “Microalgae: a green source of renewable H(2),” Trends Biotechnol 2000;18: 506–11 [39] C G Lorenz RT, “Commercial potential for Haematococcus microalgae as a 29 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE natural source of astaxanthin,” Trends Biotechnol 2000;18:160–7 [40] K G Keffer JE, “Use of Chlorella vulgaris for CO(2) mitigation in a photobioreactor.,” J Ind Microbiol Biotechnol 2002;29275–80 [41] K I Aslan S, “Batch kinetics of nitrogen and phosphorus removal from synthetic wastewater by algae.,” Ecol Eng 2006;2864–70 [42] Y J.-W Yun Y-S, Lee SB, Park JM, Lee C-I, “Carbon dioxide fixation by algal cultivation using wastewater nutrients,” J Chem Technol Biotechnol 1997;69 451–455 [43] O P Brennan L, “Biofuels from microalgae – a review of technologies for production, processing, and extractions of biofuels and co-products.,” Renew Sustain Energy Rev 2010;14557–77 [44] B Y de-Bashan LE, Moreno M, Hernandez JP, “Removal of ammonium and phosphorus ions from synthetic wastewater by the microalgae Chlorella vulgaris coimmobilized in alginate beads with the microalgae growthpromoting bacterium Azospirillum brasilense.,” Water Res 2002;362941–8 [45] B S González LE, Cañizares RO, “Efficiency of ammonia and phosphorus removal from a colombian agroindustrial wastewater by the microalgae Chlorella vulgaris and Scenedesmus dimorphus.,” Bioresour Technol 1997;60: 259–62 [46] B R (1999-04-07) Holguin, G.; Patten, C L.; Glick, “‘Genetics and molecular biology of Azospirillum,’” Biol Fertil Soils 29 10–23 doi10.1007/s003740050519 ISSN 0178-2762 [47] H D (May 1979) Tien TM, Gaskins MH, “‘Plant Growth Substances Produced by Azospirillum brasilense and Their Effect on the Growth of Pearl Millet (Pennisetum americanum L.)’ Applied and Environmental,” Microbiol 37 1016–24 PMC 243341 PMID 16345372 Retrieved 2013-0730 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE 18 [48] N R and J D (1984) Krieg, ““Genus Azospirillum in Bergey’s manual of Systematic Bacteriology 1, N R.,” in Krieg and J G Holt Eds”, Williams and Wilkins, Baltimore 690 pp, [49] B M Boddey, “‘Biological nitrogen fixation m sugarcane: a key to energetically biofuel producation’,” Crit Rev Plant Sci, pp.263-279., 1995 [50] Y .Bashan, “‘Alginate beads as synthetic inoculant carriers for the slow release of bacteria that affect plant growth’,” Appl Environ Microbiol 51 1089–1098., 1986 [51] Luz E Gonzalez1 and Yoav Bashan., “‘Increased Growth of the Microalga Chlorella vulgaris when Coimmobilized and Cocultured in Alginate Beads with the Plant-Growth-Promoting Bacterium Azospirillum brasilense,’” pp 1527-1531, 2000 [52] L E Gonzalez-Bashan, V K Lebsky, J P Hernandez, J J Bustillos, and Y Bashan, “ Changes in the metabolism of the microalga Chlorella vulgaris when coimmobilized in alginate with the nitrogen-fixing Phyllobacterium myrsinacearum ,” Can J Microbiol., vol 46, no 7, pp 653–659, 2011 [53] L E De-Bashan, J P Hernandez, T Morey, and Y Bashan, “Microalgae growth-promoting bacteria as ‘helpers’ for microalgae: A novel approach for removing ammonium and phosphorus from municipal wastewater,” Water Res., vol 38, no 2, pp 466–474, 2004 [54] S S Wang, K G., Brown, R C., Homsy, S., Martinez, L., & Sidhu, “‘Fast pyrolysis of microalgae remnants in a fluidized bed reactor for bio-oil and biochar production’,” Bioresour Technol 127 494–499, 2013 [55] R Singh, A., Singh, S., & Bamezai, “‘Inhibitory potential of Chlorella vulgaris (E-25) on mouse skin papillomagenesis and xenobiotic detoxication system,’” Anticancer Res 19 1887–1891, 1999 31 Tieu luan (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE (TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE(TIEU.LUAN).NGHIEN.cuu.ANH.HUONG.cua.mot.so.yeu.to.den.KHA.NANG.LOAI.bo.NITO PHOTPHO.TRONG.nuoc.THAI.CHAN.NUOI.BANG.su.ket.hop.VI.tao.CHLORELLA.VULGARIS.va.VI.KHUAN.AZOSPIRILLUM.BRASILENSE