CHẤT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
CHẤT LIỆU NGHIÊN CỨU
Viên nang Tiền iệt HV, được cung cấp bởi Viện Nghiên cứu Tuệ Tĩnh, đáp ứng tiêu chuẩn cơ sở Mỗi viên nang chứa thành phần 500mg với công thức đặc biệt.
Hình 2.1 Viên nang Tiền liệt HV
Bảng 2.1 Công thức viên nang Tiền liệt HV hàm ượng 500mg
Tên thuốc Tên khoa học Hàm lƣợng
Tỳ giải Rhizoma Dioscoreae 500mg Ô dược Radix Linderae 350mg Ích trí nhân Fructus Alpiniae oxyphyllae 350mg
Rhizoma Acori gaminei macrospadici 350mg
Bạch phục linh Poria 500mg
Cam thảo Radix Glycyrrhizae 100mg
Hoàng kỳ Radix Astragali membranacei 700mg
Bán hạ chế Rhizoma Typhonii trilobati 250mg
Trần bì Pericarpium Citri reticulatae perenne 100mg
Hoài sơn Tuber Dioscoreae persimilis 450mg
Kim anh Fructus Rosae laevigatae 450mg
Khiếm thực Semen Euryales 350mg
Viễn chí Radix Polygalae 150mg
Tiểu hồi hương Fructus Foeniculi 250mg
Phụ liệu: Tá dược vừa đủ
Công dụng của sản phẩm bao gồm ích khí, kiện tỳ, bổ thận, hành khí, hóa ứ và lợi niệu Đối tượng sử dụng chủ yếu là những người mắc tăng sản lành tính tuyến tiền liệt, viêm tuyến tiền liệt, và nhiễm khuẩn tiết niệu.
Liều dùng: Ngày 10 viên chia 2 lần, mỗi lần 5 viên, uống sáng, chiều sau ăn no hoặc lúc no
Nơi sản xuất: Công ty TNHH Bách Thảo Dược Địa chỉ: Lô Q-6, Khu công nghiệp Tràng Duệ, thuộc Khu kinh tế Đình
Vũ - Cát Hải, xã An Hòa, huyện An Dương, Thành phố Hải Phòng, Việt Nam
Chú ý: Không dùng cho người mẫn cảm với bất kỳ thành phần nào của chế phẩm
Liều dùng thuốc trên động vật thực nghiệm được tính bằng mg bột thuốc trong viên nang Bột thuốc được hòa tan hoàn toàn trong nước cất để tạo thành dung dịch thuốc thử với nồng độ xác định theo liều dùng Chuột được cho uống dung dịch này bằng kim cong đầu tù chuyên dụng Để quy đổi liều từ người sang động vật, liều trên chuột cống tương đương với liều điều trị trên người được xác định bằng hệ số ngoại suy.
Thể tích tối đa cho phép sử dụng trên chuột cống là 10 ml/kg trọng lượng cơ thể Từ đó, hàm lượng bột thuốc tương ứng với thể tích dung dịch thuốc thử được tính là 70 mg/m cho chuột cống, dựa trên công thức 700/10.
ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU
Chuột cống trắng đực 12 tuần tuổi, dòng Wistar, đạt tiêu chuẩn thí nghiệm, do ban cung cấp động vật thí nghiệm, Học viện Quân y cung cấp
Chuột được nuôi trong phòng thí nghiệm từ 5 đến 10 ngày trước khi tiến hành nghiên cứu, trong suốt thời gian này, chúng được cung cấp thức ăn chuẩn dành riêng cho chuột và có nước uống tự do.
2.3 MỘT SỐ HÓA CHẤT, DỤNG CỤ SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU
- Kim đầu tù cho chuột uống
- Cốc chia vạch, bơm kim tiêm 1m
- Các dụng cụ mổ chuột
- Các kit xét nghiệm Interleukin- (IL-) 8, Tumor Necrosis Factor (TNF)
- Hóa chất xét nghiệm mô bệnh học (Hematoxylin, Eosin).
PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.1 Nghiên cứu tác dụng chống viêm của viên Tiền liệt HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
Nghiên cứu của Sik Shin và cộng sự đã chỉ ra tác dụng chống viêm và chống oxy hóa của viên tiền liệt HV trên chuột cống trắng đực, góp phần vào việc làm giảm sự tăng sinh của tiền liệt tuyến.
Chuột cống trắng đực được chia thành 5 ô, mỗi ô gồm 10 con, trong đó 4 ô được tiêm dưới da testosterone propionate (TP) với liều 3mg/kg/24h trong 28 ngày để gây tăng sản ành tính tiền liệt tuyến, và 1 ô chứng sinh ý tiêm dầu thực vật thay cho TP Tất cả các ô chuột đều được cho uống thuốc nghiên cứu, thuốc tham chiếu và nước muối sinh lý với thể tích 5mL/kg/24h, cùng với tiêm dưới da TP hoặc dầu thực vật với thể tích 1mL/kg/24h trong suốt 28 ngày.
+ Lô 1 (chứng sinh ý): tiêm dầu thực vật, uống nước muối sinh ý
+ Lô 2 (chứng bệnh): tiêm TP, uống nước muối sinh ý
+ Lụ 3 (thuốc tham chiếu): tiờm TP, uống Dutasteride iều 25àg/kg/24h
+ Lô 4 (thuốc thử iều 1): tiêm TP, uống thuốc thử, iều 700mg/kg/24h + Lô 5 (thuốc thử iều 2): tiêm TP, uống thuốc thử, iều 1400mg/kg/24h
Trước khi tiến hành nghiên cứu, sau 1, 2, 3 và 4 tuần nghiên cứu, tất cả chuột được theo dõi cân nặng
Sau 4 tuần uống thuốc, tất cả các chuột được mổ ấy tuyến tiền iệt Sau đó đem cân tươi tiền iệt tuyến, và một phần đem đi àm mô bệnh học
Tác dụng chống viêm được đánh giá thống qua các chỉ số sau
The article discusses the examination of inflammatory cytokines, specifically Interleukin-8 (IL-8) and Tumor Necrosis Factor-alpha (TNFα), in serum and prostate tissue using the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method with an ELISA kit.
- Đánh giá trọng ượng và mô bệnh học tuyến tiền liệt
Mức độ ức chế tăng trọng lượng tuyệt đối và tương đối của tiền liệt tuyến, được tính trên 100g trọng lượng cơ thể, là tiêu chí quan trọng để đánh giá hiệu quả của thuốc nghiên cứu.
Phần trăm ức chế sự tăng trọng ượng tiền iệt tuyến (hay phần trăm ức chế tăng sinh) được tính theo công thức sau:
- I (%) à tỷ ệ phần trăm ức chế sự tăng trọng ượng tiền iệt tuyến
- à trọng ượng tiền iệt tuyến trung bình của ô chứng bệnh ý
- T à trọng ượng tiền iệt tuyến trung bình của ô dùng thuốc
- S à trọng ượng tiền iệt tuyến trung bình của ô chứng sinh ý
Tiền liệt tuyến của chuột nghiên cứu được xử lý bằng cách đúc paraffin, sau đó cắt thành các tiêu bản dày 4μm và nhuộm Hematoxylin-Eosin (HE) để tiến hành đánh giá mô bệnh học của tuyến tiền liệt.
2.4.2 Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa của viên Tiền liệt HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
Chuột cống trắng đực 12 tuần tuổi, dòng Wistar, đạt tiêu chuẩn thí nghiệm, được chia thành 5 lô ngẫu nhiên, mỗi lô 10 con Trong đó, 4 lô được tiêm dưới da testosterone propionate (TP) với liều 3mg/kg/24h trong 28 ngày để gây tăng sản lành tính tiền liệt tuyến, và 1 lô chứng sinh lý được tiêm dầu thực vật thay cho TP Các lô chuột được cho uống thuốc nghiên cứu.
Sử dụng thuốc B - S và nước muối sinh lý với thể tích 5mL/kg/24h, tiêm dưới da (TP, dầu thực vật) với thể tích 1mL/kg/24h liên tục trong 28 ngày.
+ Lô 1 (lô chứng): tiêm dầu thực vật, uống nước muối sinh lý
+ Lô 2 (mô hình): tiêm TP, uống nước muối sinh lý
+ Lụ 3 (Finasteride): tiờm TP, uống Dutasteride iều 25àg/kg/24h
+ Lô 4 (trị 1): tiêm TP, uống thuốc thử, iều 700mg/kg/24h
+ Lô 5 (trị 2): tiêm TP, uống thuốc thử, iều 1400mg/kg/24h
Tác dụng chống oxy hóa được đánh giá trên các chỉ tiêu:
- Hoạt độ SOD (Superoxide Dismutase) trong máu và trong tiền liệt tuyến
- Nồng độ Malondialdehyde (MDA) trong máu và trong tiền liệt tuyến
2.5 PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ SỐ LIỆU
Các số iệu được xử ý thống kê theo thuật toán thống kê T-test Student bằng phần mềm Microsoft Exce Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê khi p < 0,05
2.6 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU DỰ KIẾN
- Thời gian tiến hành: từ tháng 3/2020 đến tháng 07/2020
- Địa điểm: Tại Bộ môn Dược Lý - Học viện Quân y.
THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU
3.1 Kết quả nghiên cứu tác dụng chống viêm của viên Tiền liệt HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
3.1.1 Kết quả xét nghiệm Interleukin-(IL-)8
Bảng 3.1 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV lên hàm ượng IL-8 trong huyết thanh chuột (Mean ± SD, n = 10)
Hàm ượng IL-8 trong huyết thanh chuột Hàm ượng (ng/ml) % so với (2)
Chuột trong ô mô hình có nồng độ IL-8 trong huyết thanh cao gấp hơn hai lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hàm ượng IL-8 trong huyết thanh giảm so chuột lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p 3-1 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hàm ượng IL-8 trong huyết thanh giảm so với lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p4-1 < 0,01, p5-1 < 0,01.
KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
Kết quả nghiên cứu tác dụng chống viêm của viên Tiền liệt HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
3.1.1 Kết quả xét nghiệm Interleukin-(IL-)8
Bảng 3.1 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV lên hàm ượng IL-8 trong huyết thanh chuột (Mean ± SD, n = 10)
Hàm ượng IL-8 trong huyết thanh chuột Hàm ượng (ng/ml) % so với (2)
Chuột trong ô mô hình có nồng độ IL-8 trong huyết thanh cao hơn gấp đôi so với lô chứng, và sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p < 0,01.
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hàm ượng IL-8 trong huyết thanh giảm so chuột lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p 3-1 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hàm ượng IL-8 trong huyết thanh giảm so với lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p4-1 < 0,01, p5-1 < 0,01
Hàm ượng IL-8 trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4,
5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng IL-8 trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
Khi so sánh hai nhóm chuột sử dụng tiền liệt HV, hàm lượng IL-8 trong huyết thanh ở nhóm liều cao thấp hơn so với nhóm liều thấp, nhưng sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Bảng 3.2 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV ên hàm ượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột (Mean ± SD, n = 10)
Hàm ượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột Hàm ượng (pg/mg protein) % so với (2)
Theo Bảng 3.2, mức độ IL-8 trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở ô mô hình cao gấp hơn hai lần so với nhóm chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột được điều trị bằng thuốc Dutasteride có hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt giảm so với chuột trong nhóm mô hình, và sự khác biệt này đạt ý nghĩa thống kê với p < 0,01.
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 cho thấy hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt giảm so với lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô
3, 4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai lô dùng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp; tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
3.1.2 Kết quả xét nghiệm TNFα
Bảng 3.3 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV ên hàm ượng TNFα trong huyết thanh chuột (Mean ± SD, n = 10)
Hàm ượng TNFα trong huyết thanh chuột Hàm ượng (ng/ml) % so với (2)
Chuột trong ô mô hình có hàm lượng TNFα trong huyết thanh cao gấp hơn hai lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hàm ượng TNFα trong huyết thanh giảm so chuột lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p 3-1 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hàm ượng TNFα trong huyết thanh giảm so với lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p4-1 < 0,01, p5-1 < 0,01
Hàm ượng TNFα trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4,
5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng TNFα trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh hai lô chuột sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng TNFα trong huyết thanh ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Bảng 3.4 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV ên hàm ượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt chuột (Mean ± SD, n = 10)
Hàm ượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt chuột Hàm ượng (pg/mg protein) % so với (2)
Bảng 3.4 chỉ ra rằng, chuột trong ô mô hình có hàm lượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt cao gấp hơn hai lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Trong nghiên cứu, chuột được điều trị bằng thuốc Dutasteride cho thấy hàm lượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt giảm so với nhóm chuột mô hình Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p < 0,01.
Trong nghiên cứu, hàm lượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 giảm so với lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Hàm ượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô
3, 4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai lô sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p 4-5 > 0,05).
3.1.3 Kết quả trọng lƣợng tuyến tiền liệt
* Kết quả về trọng ượng tuyến tiền iệt của các ô chuột nghiên cứu được trình bày ở bảng 3.5
Bảng 3.5 Ảnh hưởng viên Tiền liệt HV lên trọng ượng tuyệt đối tuyến tiền liệt chuột nghiên cứu (Mean ± SD, n = 10)
Trọng ượng tuyệt đối Trọng ượng
Bảng 3.5 cho thấy, so với lô chứng, trọng ượng tuyệt đối tuyến tiền liệt chuột ở lô mô hình tăng có ý nghĩa thống kê với p < 0,01
So với lô mô hình, trọng lượng tuyệt đối của tuyến tiền liệt ở nhóm chuột sử dụng Dutasteride 25 àg/kg/24h và 2 lô dựng tiền liệt HV có sự giảm đáng kể với p < 0,01.
Bảng 3.6 Ảnh hưởng viên Tiền liệt HV lên trọng ượng tuơng đối tuyến tiền liệt chuột nghiên cứu (Mean ± SD, n = 10)
Trọng ượng tương đối Trọng ượng
0,05 Bảng 3.6 cho thấy, so với lô chứng, trọng ượng tương đối tuyến tiền liệt chuột ở lô mô hình tăng có ý nghĩa thống kê với p < 0,01
So với lô mô hình, trọng lượng tương đối tuyến tiền liệt của chuột ở nhóm dùng Dutasteride 25 mg/kg/24h và 2 lô dựng tiền liệt HV đã giảm một cách có ý nghĩa thống kê với p < 0,01.
Trọng lượng tuyệt đối và trọng lượng tương đối của tuyến tiền liệt ở nhóm chuột sử dụng Dutasteride và hai nhóm sử dụng thuốc tiền liệt có mức cao hơn không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) so với nhóm chứng sinh lý.
3.1.4 Kết quả đánh giá mô bệnh học tuyến tiền liệt
Kết quả nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa của viên Tiền liệt HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
3.2.1 Kết quả đo hoạt độ SOD (Superoxide Dismutase)
Bảng 3.7 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV lên hoạt độ SOD trong huyết thanh chuột (Mean ± SD, n = 10)
Lô thí nghiệm Hoạt độ SOD trong huyết thanh chuột
Hoạt độ SOD (U/l) % so với (2)
Theo Bảng 3.7, chuột trong lô mô hình có hoạt độ SOD trong huyết thanh giảm xuống dưới 2 lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hoạt độ SOD trong huyết thanh tăng so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 3-2 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hoạt độ SOD trong huyết thanh tăng so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p4-2 < 0,01, p5-2 < 0,01
Hoạt độ SOD trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc ( ô 3, 4, 5) tăng nhưng còn thấp hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng SOD trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV cao hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh hai lô chuột sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng SOD trong huyết thanh ở lô dùng liều cao cao hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Bảng 3.8 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV lên hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt chuột (Mean ± SD, n = 10)
Lô thí nghiệm Hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt chuột
Hoạt độ SOD (U/g protein) % so với (2)
Theo Bảng 3.8, hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô mô hình giảm xuống dưới 2 lần so với lô chứng, cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,01.
Chuột được điều trị bằng thuốc Dutasteride cho thấy hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt tăng cao hơn so với chuột trong nhóm mô hình Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p < 0,05.
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 cho thấy hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt tăng đáng kể so với chuột ở lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01 cho cả p4-2 và p5-2).
Hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4,
5) tăng nhưng còn thấp hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng SOD trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV cao hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai nhóm chuột sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng SOD trong mô tuyến tiền liệt ở nhóm dùng liều cao cao hơn so với nhóm dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p 4-5 > 0,05).
3.2.3 Kết quả đo hàm lƣợng Malondialdehyde (MDA)
Bảng 3.9 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV ên hàm ượng MDA trong huyết thanh chuột (Mean ± SD, n = 10)
Lô thí nghiệm Hàm ượng MDA trong huyết thanh chuột
Hàm ượng MDA (nmol/l) % so với (2)
Chuột trong lô mô hình có hàm lượng MDA trong huyết thanh cao hơn 3 lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hàm ượng MDA trong huyết thanh giảm so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 3-2 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hàm ượng MDA trong huyết thanh giảm so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 4-2 < 0,01, p 5-2 < 0,01
Hàm ượng MDA trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng MDA trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai lô chuột được điều trị bằng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng MDA trong huyết thanh ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Bảng 3.10 Ảnh hưởng của viên Tiền liệt HV ên hàm ượng MDA trong mô tuyến tiền liệt chuột (Mean ± SD, n = 10)
Lô thí nghiệm Hàm ượng MDA trong mô tuyến tiền liệt chuột
Hàm ượng MDA (pmol/g protein) % so với (2)
Chuột trong lô mô hình có hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt tăng cao hơn 3 lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Sử dụng thuốc Dutasteride ở chuột đã dẫn đến sự giảm hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt so với chuột ở lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p3-2 < 0,01).
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 cho thấy hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt giảm so với chuột ở lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0.05).
Hàm ượng MDA trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3,
4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng MDA trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai lô sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Tăng sản lành tính tuyến tiền liệt là bệnh phổ biến ở nam giới trung niên, ảnh hưởng đến chất lượng cuộc sống và có thể dẫn đến các biến chứng nghiêm trọng như bí tiểu cấp tính, nhiễm trùng đường tiết niệu, sỏi bàng quang và suy thận Điều trị có thể bao gồm cả phương pháp nội khoa và phẫu thuật, nhưng do bệnh tiến triển từ từ, việc theo dõi và điều trị nội khoa đóng vai trò quan trọng Nhiều bệnh nhân ưu tiên phương pháp nội khoa để tránh phẫu thuật, đặc biệt khi sức khỏe giảm sút và có bệnh lý kèm theo Các thuốc kháng α1-adrenegic và ức chế 5α-reductase được sử dụng rộng rãi, nhưng đi kèm với nhiều tác dụng phụ như tụt huyết áp, chóng mặt, và thay đổi nồng độ PSA, gây khó khăn trong việc theo dõi bệnh Hiện nay, việc sử dụng thuốc thảo dược để giảm triệu chứng và hạn chế tác dụng phụ của thuốc hóa dược đang được ưu tiên bởi cả bệnh nhân và bác sĩ.
Tăng sản ánh tính tuyến tiền liệt theo biện chứng của Y học cổ truyền có nguyên nhân từ thận hư và đàm trọc huyết ứ kết ở hạ tiêu, là gốc của bệnh Biểu hiện điển hình của bệnh là tiểu tiện không thông, được xem là ngọn của bệnh Do đó, pháp điều trị cần chú trọng đến hoạt huyết, trừ đàm, thông âm tán kết và bổ thận.
Viên nang Tiền liệt HV, được cung cấp bởi Viện nghiên cứu Tuệ Tĩnh thuộc Học viện Y Dược học cổ truyền Việt Nam, đáp ứng tiêu chuẩn cơ sở Các thành phần thuốc sử dụng trong sản xuất viên nang này đều đạt tiêu chuẩn Dược điển Việt Nam V.
BÀN LUẬN
Kết quả nghiên cứu tác dụng chống viêm của viên Tiền liệt HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
Tăng sinh ác tính tuyến tiền liệt gây ra triệu chứng rối loạn tiểu tiện và viêm nhiễm đường tiết niệu, tạo ra những vấn đề khó chịu cho người bệnh Do đó, nghiên cứu này không chỉ nhằm đánh giá hiệu quả giảm kích thước tuyến tiền liệt mà còn tập trung vào việc cải thiện tình trạng viêm nhiễm liên quan.
Mô hình gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt trên thực nghiệm cần phải phản ánh đúng cơ chế bệnh sinh của bệnh này ở người Nghiên cứu trước đây đã áp dụng phương pháp của Dorfman, tiêm testosteron (1mg/kg) dưới da chuột cống đực trong 1 tuần, nhưng kết quả cho thấy tuyến tiền liệt tăng sinh chủ yếu ở mô đệm, trong khi tế bào biểu mô chỉ tăng sinh ít, chưa tương đồng với hình ảnh vi thể của tăng sản lành tính tuyến tiền liệt ở người Hơn nữa, việc sử dụng testosteron trong thời gian ngắn (1 tuần) không phù hợp với cơ chế bệnh sinh của bệnh này, thường diễn ra trong thời gian dài hơn.
Trong nghiên cứu này, chúng tôi áp dụng mô hình gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt của Jing Li và cộng sự (2018) bằng cách tiêm testosterone propionate (TP) với liều 3mg/kg/24h trong 28 ngày liên tục Kết quả cho thấy mô hình này có cơ chế bệnh sinh tương tự như bệnh tăng sản lành tính tuyến tiền liệt ở người, với trọng lượng tuyến tiền liệt ở nhóm thí nghiệm tăng rõ rệt so với nhóm chứng sinh lý (p 0,05).
Bảng 3.2 cho thấy hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở ô mô hình tăng hơn hai lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột được điều trị bằng thuốc Dutasteride cho thấy hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt giảm so với chuột trong nhóm mô hình Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p < 0,01.
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 cho thấy hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt giảm so với lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Hàm ượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô
3, 4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
Khi so sánh hai lô sử dụng tiền liệt HV, hàm lượng IL-8 trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Viên nang Tiền liệt HV đã chứng minh khả năng giảm hàm lượng IL-8 trong huyết thanh và mô tuyến tiền liệt của chuột thí nghiệm, tương đương với Dutasteride ở liều 25 mg/kg/24h Bên cạnh đó, hàm lượng IL-8 trong huyết thanh và mô tuyến tiền liệt của chuột ở nhóm dùng Tiền liệt HV liều cao thấp hơn so với nhóm dùng liều thấp, nhưng sự khác biệt này không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Điều này gợi ý về liều tác dụng lý tưởng của Tiền liệt HV trong ứng dụng lâm sàng.
4.1.2 Bàn về kết quả xét nghiệm TNFα
Chuột trong ô mô hình có hàm lượng TNFα trong huyết thanh cao gấp hơn hai lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hàm ượng TNFα trong huyết thanh giảm so chuột lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p 3-1 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hàm ượng TNFα trong huyết thanh giảm so với lô mô hình, sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p 4-1 < 0,01, p5-1 < 0,01
Hàm ượng TNFα trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4,
5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng TNFα trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
Trong nghiên cứu so sánh hai lô chuột sử dụng tiền liệt HV, hàm lượng TNFα trong huyết thanh ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Chuột trong ô mô hình có hàm lượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt cao gấp hơn hai lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Nghiên cứu cho thấy, ở chuột được điều trị bằng thuốc Dutasteride, hàm lượng TNFα trong mô tuyến tiền liệt giảm so với chuột trong lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p3-1 < 0,01).
Bàn về kết quả nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa của viên Tiền liệt
HV trên chuột cống trắng gây tăng sản lành tính tuyến tiền liệt
4.2.1 Bàn về kết quả đo hoạt độ SOD (Superoxide Dismutase)
Bảng 3.7 chỉ ra rằng chuột trong lô mô hình có hoạt độ SOD trong huyết thanh giảm hơn 2 lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hoạt độ SOD trong huyết thanh tăng so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 3-2 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hoạt độ SOD trong huyết thanh tăng so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 4-2 < 0,01, p 5-2 < 0,01
Hoạt độ SOD trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc ( ô 3, 4, 5) tăng nhưng còn thấp hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng SOD trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV cao hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
Khi so sánh hai lô chuột sử dụng tiền liệt HV, hàm lượng SOD trong huyết thanh ở lô dùng liều cao cao hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p4-5 > 0,05).
Bảng 3.8 chỉ ra rằng hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô mô hình giảm xuống thấp hơn 2 lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột được điều trị bằng thuốc Dutasteride cho thấy hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt tăng lên đáng kể so với chuột ở lô mô hình Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với giá trị p < 0.05.
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 cho thấy hoạt độ enzyme SOD trong mô tuyến tiền liệt tăng cao so với chuột ở lô mô hình, với sự khác biệt thống kê có ý nghĩa (p4-2 < 0,01, p5-2 < 0,01).
Hoạt độ SOD trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4,
5) tăng nhưng còn thấp hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng SOD trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV cao hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai lô chuột sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng SOD trong mô tuyến tiền liệt ở lô dùng liều cao cao hơn so với lô dùng liều thấp Tuy nhiên, sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Viên nang Tiền liệt HV cho thấy khả năng giảm hàm lượng SOD trong huyết thanh và mô tuyến tiền liệt của chuột thí nghiệm, tương đương với Dutasteride ở liều 25 mg/kg/24h Bên cạnh đó, hàm lượng SOD ở lô chuột sử dụng Tiền liệt HV liều cao thấp hơn so với lô sử dụng liều thấp, tuy nhiên sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
4.2.2 Bàn về kết quả đo hàm lƣợng Malondialdehyde (MDA)
Bảng 3.9 chỉ ra rằng chuột trong lô mô hình có hàm lượng MDA trong huyết thanh cao hơn 3 lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Chuột ở lô dùng thuốc Dutasteride có hàm ượng MDA trong huyết thanh giảm so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p 3-2 < 0,01
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 có hàm ượng MDA trong huyết thanh giảm so với chuột ở lô mô hình, sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p4-2 < 0,01, p5-2 < 0,01
Hàm ượng MDA trong huyết thanh chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3, 4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng MDA trong huyết thanh chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh hai nhóm chuột điều trị bằng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng MDA trong huyết thanh ở nhóm dùng liều cao thấp hơn so với nhóm dùng liều thấp, nhưng sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Chuột trong lô mô hình có hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt cao hơn gấp ba lần so với lô chứng, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01).
Sử dụng thuốc Dutasteride ở chuột đã cho thấy hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt giảm so với nhóm chuột mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p3-2 < 0,01).
Chuột ở lô trị 1 và lô trị 2 cho thấy hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt giảm so với chuột ở lô mô hình, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0.05).
Hàm ượng MDA trong mô tuyến tiền liệt chuột ở các lô dùng thuốc (lô 3,
4, 5) giảm nhưng còn cao hơn so với ở lô chứng (p< 0,01 và p < 0,05)
Hàm ượng MDA trong mô tuyến tiền liệt chuột ở hai lô dùng tiền liệt HV thấp hơn so với ở lô dùng Dutasteride, có ý nghĩa thống kê với p < 0,05
So sánh giữa hai lô sử dụng tiền liệt HV cho thấy hàm lượng MDA trong mô tuyến tiền liệt của chuột ở lô dùng liều cao thấp hơn so với lô dùng liều thấp, tuy nhiên sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Viên nang Tiền liệt HV có tác dụng làm giảm hàm lượng MDA trong huyết thanh và mô tuyến tiền liệt của chuột thí nghiệm, tương đương với Dutasteride ở liều 25 mg/kg/24h Ngoài ra, hàm lượng MDA trong huyết thanh và mô tuyến tiền liệt của chuột ở nhóm dùng Tiền liệt HV liều cao thấp hơn so với nhóm dùng liều thấp, nhưng sự khác biệt này không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05).
Cần phải nói thêm, DHT, được chuyển hóa từ testosterone nhờ enzym
5 α-reductase là một yếu tố quan trọng trong sự phát triển của tăng sản lành tính tuyến tiền liệt, với DHT có khả năng liên kết với thụ thể androgen, kích thích sự tăng trưởng của các tế bào mô tuyến và tế bào cơ trơn DHT chịu trách nhiệm cho sự tăng sản của tế bào biểu mô và tế bào tuyến tiền liệt Dutasteride ức chế 5 α-reductase, giúp giảm nồng độ DHT trong huyết thanh và tuyến tiền liệt ở bệnh nhân tăng sản lành tính tuyến tiền liệt Tuy nhiên, do hạn chế về thời gian và kinh phí, nghiên cứu này chưa thể đánh giá tác dụng của Tiền liệt HV trên các chỉ số này.