Báo cáo đề tài trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường chất lượng 3

SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Đo lường Chất lượng Báo cáo Trung tâm Tiêu chuẩn MỤC LỤC Tran g MỞ ĐẦU CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TRUNG TÂM 3 1.1 Lịch sử hình thành phát triển Trung Tâm Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 1.2 Chức nhiệm vụ Trung Tâm Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng khu vực 1.3 Quá trình hoạt động Trung Tâm Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 1.4 Sơ đồ tổ chức bố trí nhân 1.5 Sơ đồ bố trí mặt Trung Tâm Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 1.6 Xử lý nước thải 1.7 Môi trường phòng thí nghiệm 1.8 Thiết bị chất chuẩn CHƯƠNG II: QUẢN LÝ MẪU THỬ 2.1 Khái niệm 2.2 Lấy mẫu 2.3 Lưu giữ mẫu thử nguy hiểm 2.4 Quản lý mẫu thử 2.5 Thủ tục CHƯƠNG III: CÁC TIÊU CHUẨN KIỂM TRA CHẤT LƯNG SỬ DỤNG TRONG NGÀNH THỰC PHẨM 3.1 Các phương pháp thử nước 3.2 Các phương pháp thử Tiêu chuẩn Việt Nam CHƯƠNG IV: PHÂN TÍCH CÁC CHỈ TIÊU TRONG NGÀNH THỰC PHẨM 4.1 Phân tích giá trị cảm quan sản phẩm 4.2 Phân tích tiêu hóa lý 4.3 Phân tích tiêu vi sinh CHƯƠNG V: KẾT LUẬN CHƯƠNG VI: PHỤ LỤC Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế 18 20 22 22 26 26 26 26 27 29 38 49 51 89 109 SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng Trang 2/156 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng LỜI CẢM ƠN   Sau ba tháng làm luận án tốt nghiệp, xin chân thành cảm ơn: Các Ban lãnh đạo Trung tâm Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng tạo điều kiện thuận lợi hoàn thành tốt luận văn Các anh chị đồng nghuiệp truyền đạt kinh nghiệm quý báu Cô Tôn Nữ Minh Nguyệt tận tình hướng dẫn bảo Các bạn giúp đóng góp ý kiến - Sinh viên Hồ Thị Minh Vân Trang 3/156 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng MỞ ĐẦU Quản lý chất lượng nguyên liệu sản phẩm theo tiêu chuẩn nước chức quan trọng Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng (gọi tắt Trung tâm Kỹ thuật 3) Đây nơi ban hành hiệu chuẩn tiến hành kiểm tra chất lượng nguyên vật liệu sản phẩm công nghiệp nói chung, sản phẩm thực phẩm nói riêng Trải qua nhiều năm tháng, hoạt động Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng ngày vào nề nếp, phương tiện, phương pháp kiểm tra đại hơn, phù hợp với yêu cầu khách hàng, góp phần ổn định chất lượng cho sản phẩm công nghiệp Nhằm tìm hiểu kỹ hoạt động kiểm nghiệm, quản lý chất lượng Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 3, em nhận đề tài ‘’Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 3’’ Bên cạnh việc trình bày tổ chức hoạt động kiểm nghiệm, có sở vật chất Trung tâm, em tổng hợp tiêu chuẩn kiểm tra chất lượng thực phẩm sử dụng Trung tâm tập trung trình bày tiêu chuẩn kiểm tra nguyên liệu sản phẩm từ sữa Do khả có giới hạn em mong thầy cô bảo thêm Trang 4/156 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HOÀ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng CHƯƠNG I TỔNG QUAN TRUNG TAÂM 1.1 1.2 1.3 1.4 1.5 1.6 1.7 1.8 Lịch sử hình thành phát triển Chức nhiệm vụ Quá trình hoạt động Sơ đồ tổ chức bố trí nhân Sơ đồ bố trí mặt Xử lý nước thải Môi trường phòng thí nghiệm Thiết bị – Chất chuẩn Trang 5/156 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 1.1 LỊCH SỬ VÀ HÌNH THÀNH PHÁT TRIỂN: 1.1.1 Giới thiệu: Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 3(gọi tắt Trung tâm Kỹ Thuật 3), tên giao dịch tiếng Anh Quality Assurance & Testing Centre – QUATEST đơn vị trực thuộc Tổng Cục tiêu Chuẩn Đo lường Chất lượng, Bộ Khoa học Công nghệ Trung tâm Kỹ thuật thành lập theo định số 1275/ QĐ ngày 5/11/1994 Bộ Khoa học Công nghệ Môi trường (nay Bộ Khoa học công nghệ), cấu tổ chức Trung tâm theo Quyết định số 124/ QĐ-TĐC ngày 26/04/1999 Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 1.1.2 Lịch sử Trung tâm 3: Năm 1979, quan Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng miền Bắc Viện Định Chuẩn miền Nam kết hợp với Cục Tiêu Chuẩn Đo lường Chất lượng Vào đầu năm 1984, lập thành Tổng Cục Tiêu Chuẩn Đo lường Chất lượng Cũng từ Viện Định Chuẩn miền nam đổi tên Trung tâm Tiêu Chuẩn Đo lường Chất lượng (gọi tắt Trung tâm 3) văn phòng lúc dời 49 Pasteur, Q.1, TP Hồ Chí Minh Từ năm 1994 Trung tâm đổi tên thành Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng (gọi tắt Trung tâm Kỹ thuật 3) - Văn phòng đặt 49 Pasteur, Nguyễn Thái Bình, Q.1, TP Hồ Chí Minh Điện thoại: (848) 8294274 Fax: (848) 8293012 Website: www.quatest3.com.vn - Khối thí nghiệm Biên Hòa nằm khu Công nghiệp Biên Hòa 1, Đồng Nai Điện thoaïi: 8461 - 836212 Fax: 8461 - 836298 Email: Testing@quatest3.com.vn - Xưởng thiết bị đo lường số 62 Lê Hồng Phong, Q.5, TP Hồ Chí Minh - Bộ phận dịch vụ phòng thí nghiệm: số 79 Trương Định, Q.3, TP Hồ Chí Minh 1.1.3 Nguồn nhân lực: Trung tâm có nguồn nhân lực hùng hậu 200 kỹ sư cán kỹ thuật có khả thực hoạt động kỹ thuật Trung tâm nhö: Trang 6/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng  Các cán với nhiều năm kinh nghiệm lónh vực Tiêu chuẩn-Đo lường-Chất lượng  Các cộng tác viên có chuyên môn kỹ thuật giỏi ngành công nghiệp, viện nghiên cứu, trường đại học  Các chuyên gia, tổ chức nước có uy tín Ngoài nhiều cán thuộc Trung tâm học tập chuyên môn nước Trung tâm Kỹ thuật có đội ngũ nhân viên có trình độ cao, đồng thời Trung tâm Kỹ thuật có hội tốt giúp nhân viên học tập thăng tiến 1.2 CHỨC NĂNG NHIỆM VỤ CỦA TRUNG TÂM 1.2.1 Nhiệm vụ:  Tiến hành thử nghiệm phân định, giám định chất lượng hàng hóa đo lường phục vụ cho công tác Nhà nước Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng yêu cầu quản lý quan Hải quan, Môi trường, Quản lý thị trường Công nghệ, Tư pháp Ngoài ra, Trung tâm Kỹ thuật phép khai thác lực đo lường, thử nghiệm để phục vụ yêu cầu sở sản xuất kinh doanh  Bảo quản sử dụng thiết bị đo lường tiến hành kiểm định tiêu chuẩn theo phân cấp tổng cục TĐC chi cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng tỉnh, thành phố trực thuộc trung ương, sở sản xuất, kinh doanh  Tham gia xây dựng tiêu chuẩn Việt Nam, tiêu chuẩn quốc tế  Tổ chức công tác thông tin, đào tạo, hợp tác Quốc tế địa bàn theo phân công tổng cục  Quản lý cán bộ, tài sản, tài theo quy định 1.2.2 Quyền hạn:  Cấp phiếu kết thử nghiệm, giấy chứng nhận chất lượng, chứng thư giám định chất lượng sản phẩm, hàng hóa, giấy chứng nhận kiểm định thiết bị theo quy định  Ký hợp đồng kiểm định thí nghiệm, dịch vụ khác nội dung khác theo yêu cầu sở sản xuất kinh doanh, tổ chức cá nhân  Thu lệ phí kiểm tra, kiểm định, thử nghiệm theo định Nhà nước.Phạm vi hoạt động trung tâm bao gồm nhiều lónh vực, trung tâm Trang 7/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng vừa phải thực nhiệm vụ Tổng cục Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng giao, vừa cung cấp dịch vụ kỹ thuật sở tận dụng lực có theo nhu cầu kinh tế Nhiều đơn vị trung tâm lúc thực nhiệm vụ khác thuộc trình khác đạo thống theo thủ tục điều hành o Phạm vi áp dụng chuẩn mực quản lý chất lượng lónh vực hoạt động sau:  Kiểm tra chất lượng sản phẩm, hàng hóa xuất nhập theo danh mục phủ ban hành theo qui trình Tổng cục TĐC  Thẩm định kỹ thuật liên quan đến tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng theo yêu cầu quan quản lý Nhà nước  Thử nghiệm chất lượng sản phẩm, hàng hóa thiết bị, công trình theo yêu cầu công tác quản lý Nhà nước Doanh nghiệp  Hiệu chuẩn phương tiện đo theo yêu cầu tổ chức doanh nghiệp, kiểm định phương tiện đo công tác chuẩn đo lường theo qui định pháp lệnh đo lường  Hướng dẫn xây dựng hệ thống quản lý, đào tạo chuyên môn, nghiệp vụ liên quan đến tiêu chuẩn hóa, đo lường chất lượng theo yêu cầu  Nghiên cứu chế tạo thử thiết bị thử nghiệm, phương tiện đo công tác chuẩn phục vụ cho công tác kiểm định, hiệu chuẩn đo lường công nghiệp 1.2.3 Hoạt động Trung tâm Kỹ thuật 3:  Kiểm tra nhà nước chất lượng hàng hóa xuất nhập khẩu, thẩm định kỹ thuật tiêu chuẩn, đo lường, chất lượng  Thử nghiệm đánh giá chất lượng nguyên liệu, vật liệu, sản phẩm hàng hóa thuộc lónh vực khí thử nghiệm không phá hủy, sản phẩm tiêu dùng, xây dựng, điện – điện tử, hóa, môi trường, dầu khí, thực phẩm  Kiểm định hiệu chuẩn phương tiện đo phương tiện chuẩn lónh vực: khối lượng, độ dài, lực, độ cứng, điện, nhiệt, dung tích, lưu lượng, áp suất, chân không, hóa lý Trang 8/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng  Đánh giá phù hợp theo tiêu chuẩn (Việt Nam, nước ngoài)  Đào tạo tư vấn hoạt động liên quan đến tiêu chuẩn, đo lường chất lượng 1.3 QUÁ TRÌNH HOẠT ĐỘNG CHÍNH: - Trung tâm Kỹ thuật xây dựng hệ thống quản lý chất lượng phù hợp với yêu cầu tiêu chuẩn TCVN ISO 9001:2000 có kết hợp hợp lý với tiêu chuẩn khác TCVN ISO/ IEC 17025:2001  Yêu cầu chung lực phòng hiệu chuẩn thử nghiệm TCVN ISO/ IEC 17020:2001  Các chuẩn mực chung cho tổ chức giám định - Trong phòng thử nghiệm phòng Đo lường Vietnam Laboratory Accreadation schemes (VILAS)–Tổ chức công nhận phòng thử nghiệm công nhận xây dựng hệ thống quản lý chất lượng phù hợp với tiêu chuẩn TCVN ISO/ IEC 17025 - Phòng nghiệp vụ đơn vị hướng dẫn xây dựng áp dụng hệ thống quản lý chất lượng cho doanh nghiệp, chứng nhận có hệ thống quản lý chất lượng phù hợp với tiêu chuẩn TCVN ISO 9001:2000 Các phòng nghiệp vụ ,2 ,3, 5, giai đoạn xây dựng để tiến đến cuối năm 2006 tiến hành đăng ký xin công nhận phù hợp với TCVN ISO/ IEC 17020 - Hoạt động trung tâm bao gồm mảng sau: 1.3.1 Thẩm định kỹ thuật: - Trung tâm định quan kiểm tra chất lượng sản phẩm hàng hóa buộc phải kiểm tra nhà nước chất lượng - Thực thẩm định kỹ thuật yêu cầu quan quản lý nhà nước chuyên ngành yêu cầu khác thuộc lónh vực: Thiết bị công nghệ, Cơ khí – Luyện kim, Vật liệu Xây dựng công trình xây dựng, sản phẩm tiêu dùng, nông sản – Thực phẩm, Hóa chất – Vật liệu, Dầu khí 1.3.2 Thử nghiệm: Thử nghiệm, phân tích chất lượng, yêu cầu vệ sinh, an toàn sản phẩm, hàng hóa công trình Trung tâm Kỹ thuật có hệ thống phòng thử nghiệm theo chuyên nghành sau:  Cơ khí – NDT: Vật liệu kim loại, thiết bị, kiểm tra không phá hủy  Hàng tiêu dùng: vải sợi, may mặc, giấy, cao su, chất dẻo,sơn, đồ chơi trẻ em Trang 9/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng  Xây dựng: vật liệu xây dựng, công trình xây dựng giao thông, nhựa đường  Điện: sản phẩm điện – điện tử: dây cáp điện, dụng cụ điện dân dụng, cấu đóng ngắt, thiết bị điện  Hóa – Môi trường: phân bón, hóa chất bản, vật liệu, khoáng sản, mỹ phẩm, nước sinh hoạt, nước thải, chất thải rắn, khí  Hóa hữu cơ: hợp chất thiên nhiên, hương liệu, phẩm màu, độc chất hữu cơ, thuốc trừ sâu, thuốc kháng sinh, thuốc bảo vệ thực vật  Dầu khí: xăng, xăng máy bay, dầu bôi trơn, nhiên liệu, khí hóa lỏng  Thực phẩm: nông sản, ngũ cốc, thực phẩm, thủy sản, trà, cà phê, thuốc lá, đường, mật, bánh, kẹo, thức ăn gia súc, nước giải khát 1.3.3 Đo lường:  Kiểm định phương tiện đo: thuộc danh mục bắt buộc phải kiểm định Nhà nước  Hiệu chuẩn phương tiện đo chuẩn đo lường lónh vực độ dài, lực, độ cứng, áp suất, chân không, khối lượng, điện, nhiệt, đại lượng, hóa lý  Tư vấn trang bị, lắp đặt vận hành dụng cụ đo lường thử nghiệm thiết bị, chế tạo, lắp đặt chuẩn, dụng cụ đo lường khối lượng, áp suất, sung tích, lưu lượng, điện 1.3.4 Hướng dẫn – Đào tạo: - Hướng dẫn cho tổ chức, doanh nghiệp việc xây dựng áp dụng hệ thống về:  Quản lý chất lượng theo ISO 9000  Quản lý chất lượng theo ISO 14000  An toàn vệ sinh thực phẩm theo HACCP, GMP  Quản lý phòng thí nghiệm theo ISO 17025 - Tổ chức khóa đào tạo nâng cao theo nội dung:  Hệ thống quản lý: ISO 9000, ISO 14000, SA 8000, ISO/ IEC 17025  Các công cụ quản lý chất lượng  Kỹ thuật thống kê  Công tác tiêu chuẩn hóa, đo lường, quản lý chất lượng doanh nghiệp  Kỹ thuật thử nghiệm theo lónh vực: lý, hóa học, vi sinh Trang 10/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 8,5 1000 Cách pha chế: Đun sôi để hoà tan chất Để nguội đến 305oC Điều chỉnh pH dung dịch NaOH 0,1 N cho sau tiệt khuẩn pH = 7,0 0,2 Rót vào bình dung tích 250 ml bình 90 ml, vào ống nghiệm ống ml môi trường Tiệt khuẩn nồi hấp nhiệt độ 120oC 15 phút Môi trường không dùng ngay, cần bảo quản nơi khô ráo, bóng tối, nhiệt độ từ đến oC không 30 ngày c) Môi trường thạch thường: Pepton, NaCl, g Cao thịt Glucoza, Thạch, Nước g ,g g g cất, mL 10 5 15-20 1000 Trang 142/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng d) Môi trường thạch thường: Trypton, g Cao men, Glucoza, g Thạch, g Nước g cất, mL 2,5 15-20 1000 Cách pha chế: Đun nhỏ lửa, quyấy để hòa tan chất đến sôi Để nguội môi trường đến 555oC, điều chỉnh pH cho sau tiệt khuẩn pH = 7,0 0,2 Rót vào bình thủy tinh lượng môi trường không 1/ dung tích bình Tiệt khuẩn nồi hấp nhiệt độ 120 oC 15 phút Nếu môi trường sử dụng ngay, để nguội đến 451oC nồi cách thủy, chưa sử dụng cần bảo quản nơi khô ráo, bóng tối với nhiệt độ từ đến oC không 30 ngày Trước nuôi cấy đun cách thủy cho môi trường nóng chảy để nguội đến 451oC 4.3.3.5 Các bước nuôi cấy: 4.3.3.5.1 Pha loãng mẫu: Pha loãng mẫu có đậm độ pha loãng cần thiết đủ đếm số khuẩn lạc đóa theo dự tính 4.3.3.5.2 Đỗ đóa:  Đối với mẫu kiểm nghiệm phải nuôi cấy đậm độ, đậm độ dùng đóa petri pipet vô khuẩn riêng  Lấy 1ml sản phẩm (lỏng) dung dịch pha loãng đậm độ khác cho vào đóa petri  Rót vào đóa 12-15 ml môi trường thạch c d, trộn đảo dung dịch mẫu môi trường cách lắc sang phải sang trái chiều lần  Để đóa thạch đông tự nhiên mặt ngang  Thời gian từ bắt đầu pha loãng mẫu đến rót môi trường không 30 phút  Nếu dự đoán sản phẩm có chứa vi sinh vật mọc lan bề mặt thạch sau môi trường đông đổ tiếp 4ml thạch màng lên mặt 4.3.3.5.3 Ủ ấm  Khi thạch đông, lật sáp đóa petri để vào tủ ấm nhiệt độ 301oC từ 48 đến 72  Sau 48 tính kết sơ cách đếm khuẩn lạc mọc đóa nuôi cấy, sau 72 tính kết thức 4.3.3.6 Tính kết Chọn tất đóa có không 300 khuẩn lạc để tính kết Sự phân bố khuẩn lạc Trang 143/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đóa nuôi cấy phải hợp lý: độ pha loãng cao số khuẩn lạc kết không hợp lý, phải tiến hành lại bước nuôi cấy Tính trung bình cộng tổng số khuẩn lạc đóa theo công thức sau: N= Trong đó: C: số khuẩn lạc đếm đóa chọn n1, n2: số đóa đậm độ pha loãng liên tiếp chọn thứ 1, thứ d hệ số pha loãng đậm độ pha loãng chọn thứ 4.3.5 Phát Listeria monocytogen theo phương pháp TCVN 6401-98: 4.3.5.1 Phạm vi áp dụng: Tiêu chuẩn qui định phương pháp phát Listeria monocytogens sữa sản phẩm sữa 4.3.5.2 Định nghóa:  Listeria spp: vi sinh vật tạo thành khuẩn lạc đặc trưng môi trường đặc chọn lọc cho thấy rõ đặc tính hình thái học, sinh lý sinh hóa mô tả, tiến hành thử theo tiêu chuẩn  Listeria monocytogen: loài Listeria gây bệnh phân biệt với loài Listeria không gây bệnh khác có mặt sữa sản phẩm sữa đặc tính sinh hóa định  Phát Listeria monocytogen: việc xác định có mặt hay không vi sinh vật khối lượng hay thể tích qui định, tiến hành thử theo tiêu chuẩn 4.3.5.3 Nguyên tắc:  Tăng sinh môi trường lỏng chọn lọc: cấy phần mẫu vào môi trường chọn lọc nuôi ấm 30 oC 48h  Phân lập nhận dạng sơ bộ: cấy từ mẫu thử môi trường tăng sinh vào môi trường phân lập, nuôi ấm 37oC sau 48h kiểm tra có mặt khuẩn lạc coi Listeria spp giả định theo dáng vẻ bên  Khẳng định: cấy truyền khuẩn lạc Listeria spp giả định lên môi trường đặc không chọn lọc khẳng định thử nghiệm hình thái, sinh lý sinh hoùa Trang 144/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 4.3.5.4 Môi trường chọn lọc (môi trường tăng sinh): a) Môi trường bản:  Thành phần Canh thang tripton đậu Cao men, g Nước, mL tương, g 30 1000  Chuẩn bị: Hòa tan thành phần khô môi trường hoàn chỉnh khô nước cách đun sôi Nếu cần, chỉnh pH cho sau khử trùng pH 7,3 nhiệt độ 25oC Phân phối lượng 225 ml vào bình thí nghiệm dung tích 500ml (hoặc bội số 225ml vào bình thí nghiệm có dung tích thích hợp) Khử trùng 15 phút nồi hấp áp lực 121oC Trang 145/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HOÀ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng b) Phần bổ sung 1: Thành phần: Chuẩn bị: Acriflavin hidroclorua 23 mg Hòa tan Acriflavin hidroclorua nước Nước 10 mL Khử trùng qua lọc c) Phần bổ sung 2: Thành phần: Chuẩn bị: Axit nalidixic (muối 46 mg Hòa tan Axit nalidixic natri) dung dịch natri hidroxit Khử trùng qua lọc Natri hidroxit (0,05 10 mL mol/l) d) Phần bổ sung 3: Thành phần: Chuẩn bị: Xicloheximid 57,5 mg Hòa tan Xicloheximid hỗn hợp Etanol/ nước Etanol mL Khử trùng qua lọc Nước mL e) Môi trường hoàn chỉnh: Bảo quản riêng môi trường phần bổ sung chuẩn bị chỗ tối nhiệt độ từ 2oC đến 5oC Chuẩn bị môi trường hoàn chỉnh cách thêm: 1ml phần bổ sung 1; 2ml phần bổ sung 2ml phần bổ sung vào 225 ml môi trường 4.3.5.5 Môi trường phân lập (thạch Oxford): a) Môi trường bản: Thành phần: Môi trường thạch columbia 39 g Aesculin 1g Amoni saét (III) xitrat 0,5 g Liti clorua 15 g Nước 1000 mL Chuẩn bị: Hòa tan thành phần rắn nước cách đun sôi b) Môi trường bản: Thành phần: Chuẩn bị: Xicloheximid:200 Fosfomixin : Hòa tan thành mg mg phần rắn hỗn hợp etanol/ nước Colistin sunfat: Etanola : 2,5 Khử trùng qua lọc 10mg mg Acriflavin : Nước : 2,5 2,5mg mL Xefotetan : 1mg c) Môi trường hoàn chỉnh: Lấy 5ooml môi trường thạch Khử trùng 15 phút nồi hấp nhiệt độ 121oC Làm nguội 50oC, vô trùng Độ ph môi Trang 146/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HOÀ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng trường 7,0 25oC 4.3.5.6 Thuốc thử: dung dịch hidro peroxit, 3% (v/v) Trang 147/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HOÀ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 4.3.5.7 Cách tiến hành: a) Cấy vào môi trường tăng sinh: Cho phần mẫu vào môi trường tăng sinh  Sữa bột: cân 25 ml mẫu thử cách vô trùng cho vào bình thí nghiệm có nút, chứa 225 ml môi trường tăng sinh Lắc để hòa tan  Nuôi ấm: môi trường tăng sinh cấy mẫu tủ ấm 30oC -48h  Phân lập nhận dạng sơ bộ:  Dùng que cấy vòng, ria cấy mẫu nuôi lên bề mặt đóa thạch Oxford để thu khuẩn lạc tách biệt rõ ràng  Lật sấp đóa đặt vào tủ ấm để 37 oC 48h  Kiểm tra đóa cấy có mặt khuẩn lạc listeria spp đặc trưng  Khẳng định:  Chọn khuẩn lạc để khẳng định: Từ đóa môi trường phân lập chọn năm khuẩn lạc điển hình có nghi ngờ, có năm khuẩn lạc tất để thử khẳng định  Nuôi ấm: Ria cấy khuẩn lạc chọn lên bề mặt đóa thạch TSYEA cho khuẩn lạc mọc phân tách rõ đặt đóa tủ ấm 37oC 24h, có khuẩn lạc mọc Độ dày lớp môi trường thạch (15ml/đóa) quan trọng độ rọi Herry tốt b) Diễn giải đặc tính hình thái sinh lý phản ứng sinh hóa: tất chủng listeria spp trực khuẩn nhỏ, gram dương (chỉ với mẫu cấy 24h tuổi) có tính chuyển động tiêu ướt môi trường di động Chúng chủng listeria spp, catalaza dương tính, L.monocytogens chuyển hóa ramnoza không chuyển hóa xyloza, L.monocytogens, L.ivanovii L seeligeri (phản ứng yếu) tạo tan máu  cấy thạch máu lấy khuẩn lạc để kiểm tra tính tan máu mặt khuẩn lạc Trong ba chủng listeria spp làm tan máu, chí có L.monocytogens không chuyển hóa xyloza dương tính với ramnoza (bảng 4.3.5) Bảng 4.3.5 phản ứng nhận biết Listeria spp Các loại Sinh axit Thử CAMP Ramno Xyloza S aureus R equi za Trang 148/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng L.monocytogens + L innocua v L.ivanovii + L seeligeri + L.welshimeri v + L.murrayi v v = phản ứng thay đổi (+) = phản ứng yếu + = phản ứng dương tính - = không phản ứng Trang 149/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế + (+) - + - SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 4.3.5.8 Biểu thị kết quả: báo cáo có mặt hay không listeria monocytogens phần mẫu thử, ghi rõ mẫu thử theo khối lượng gam, theo thể tích mililit 4.3.5.9 Báo cáo kết : báo cáo ghi rõ, phương pháp lấy mẫu, phương pháp sử dụng, kết thu 4.3.6 Xác định tổng số vi khuẩn hiếu khí theo phương pháp TCVN 5165-90: 4.3.6.1 Phạm vi áp dụng: phương pháp định lượng coliform kỹ thuật nuôi cấy môi trường lỏng tính số có xác suất lớn (MPN) sau nuôi cấy 30 oC áp dụng cho sữa bột, sản phẩm sữa đông lạnh, sữa dạng lỏng 4.3.6.2 Định nghóa: Coliform vi khuẩn nhiệt độ 30oC tạo thành khuẩn lạc đặc trưng lên men lactoza kèm theo sinh điều kiện 4.3.6.3 Nguyên tắc:  Nuôi cấy phần mẫu thử lượng từ loạt mẫu thử pha loãng theo hệ thập phân vào dãy ba ống môi trường nuôi cấy lỏng chọn lọc qui định có chứa ống Durham  Nuôi ấm ống nghiệm 30 oC 48h  Lấy từ ống nghiệm coi dương tính nghóa ống cho thấy có sinh ống Durham canh thang lục sáng mật lactoza,cấy truyền lên bề mặt thạch eosin xanh metylen  Nuôi ấm 30oC 24h 4.3.6.4 Chất pha loãng môi trường 4.3.6.4.1 Nguyên liệu chính: Để làm tăng độ tái lập kết quả, nên sử dụng thành phần khô môi trường hoàn chỉnh khô để chuẩn bị chất pha loãng môi trường nuôi cấy Các hóa phẩm phải đạt chất lượng phân tích Nước sử dụng phải nùc cất dung cụ thủy tinh nước khử ion Nước không chứa chất ức chế sinh trưởng vi sinh vật điều kiện thử 4.3.6.4.2 Chất pha loãng:  Dung dịch pepton/ muối: Thành phần Pepton, g Natri clorua (NaCl), Nước, mL g Trang 150/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng 1,0 8,5 1000 Chuẩn bị: Hoà tan thành phần nước, đun nóng cần Điều chỉnh pH cho sau o khử trùng, pH 7,0 0,1 25 C Trang 151/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng  Dung dịch pepton: Thành phần Pepton, g Nước, mL 1,0 1000 Chuẩn bị: Hoà tan pepton nước Điều chỉnh pH cho sau khử trùng, pH 7,0 0,1 o 25 C 4.3.6.5 Phân phối, khử trùng bảo quản chất pha loãng: Phân phối chất pha loãng dùng cho độ pha loãng ban đầu vào bình lọ, phân phối chất pha loãng dùng cho độ pha loãng vào ống nghiệm lọ nhỏ Lượng phân phối sau khử trùng chứa bình lọ phải 90 ml chất pha loãng bội số 90 ml ống nghiệm lọ nhỏ phải chứa 9,0 ml chất pha loãng Đậy nắp ống nghiệm, bình lọ 4.3.6.6 Cách tiến hành: 4.3.6.6.1 Chuẩn bị mẫu thử dung dịch pha loãng ban đầu: Để tránh làm ảnh hưởng vi sinh vật thay đổi nhiệt độ đột ngột, nhiệt độ chất pha loãng suốt trình thao tác:  Sữa sản phẩm sữa dạng lỏng:  Trộn mẫu thử thật kỹ cho vi sinh vật phân bố tốt cách đảo chiều lọ chứa liên tục 25 lần Cần phải tránh tạo bọt để bọt tan hết Khoảng thời gian từ trộn đến lấy phần mẫu thử không phút  Dùng pipet lấy 1ml mẫu thử cho vào ml chất pha loãng Lắc dung dịch pha loãng ban đầu Như thu dung dịch pha loãng 10-1 4.3.6.6.2 Dung dịch pha loãng thập phân tiếp theo:  Dùng pipet lấy ml dung dịch pha loãng ban đầu cho vào ống nghiệm khác chứa ml chất pha loãng vô trùng, không để pipet tiếp xúc với chất pha loãng Mỗi lần phải sử dụng pipet  Trộn kỹ cách dùng pipet hút thả 10 lần để thu dung dịch pha loãng 10-2  Nếu thấy cần, lặp lại thao tác sử dụng dung dịch pha loãng 10-2 dun dịch pha loãng để nhận dung dịch pha loãng 10-3, 10-4  Khi lấy tỉ lệ 10ml cộng 90ml, 11ml cộng 99ml 1ml cộng 99ml lắc tay Trang 152/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng  Pha đủ số lượng dung dịch pha loãng để đảm bảo tất ống nghiệm tương ứng với độ pha loãng cuối cho kết âm tính 4.3.6.6.3 Thời gian thao tác: Khoảng thời gian từ lúc bắt đầu cân đo phần mẫu thử từ lúc kết thúc việc chuẩn bị dung dịch pha loãng ban đầu trộn dung dịch cấy với môi trường không 15 phút, trừ có qui định khác 4.3.6.7 Cấy mẫu:  Lấy ba ống nghiệm đựng canh thang nồng độ kép dùng pipet cho vào ống 10 ml mẫu thử dạng lỏng 10ml dung dịch pha loãng ban đầu  Lấy ba ống nghiệm đựng canh thang nồng độ đơn dùng pipet cho vào ống ml mẫu thử dạng lỏng 1ml dung dịch pha loãng ban đầu  Đối với dung dịch pha loãng (10 -1 10-2, tùy theo trường hợp) lấy ba ống nghiệm canh thang nồng độ đơn Cho vào ống 1ml dung dịch pha loãng thích hợp Đối với độ pha loãng dùng pipet Trộn cẩn thận chất nuôi cấy với môi trường  Nuôi ấm ống nghiệm canh thang nồng độ đơn o 30 C1oC 24h2h  Nuôi ấm ống nghiệm canh thang nồng độ kép o 30 C 1oC 24h2h  Cấy truyền từ ống nghiệm canh thang nồng độ kép nuôi ấm: Từ ống nghiệm canh thang nồng độ kép nuôi ấm dùng que cấy vòng cấy vào ống nghiệm canh thang nồng độ đơn Nuôi ấm 30oC 1oC 48h2h  Thử khẳng định:  Từ ống nghiệm nuôi ấm cho thấy có sinh ống Durham, cấy vòng đầy lên thạch eosin xanh metylen Nuôi ấm 30oC 1oC 24h2h  Các khuẩn lạc mọc có màu đỏ/ hồng, ánh kim đục coi đặc trưng cần khẳng định thêm nữa, nuôi cấy khuẩn lạc vào ống nghiệm chứa canh thang nồng độ đơn kiểm tra sinh sau nuôi ấm  Ghi lại số ống khẳng định dương tính độ pha loãng 4.3.6.8 Biểu thị kết quả:  Lựa chọn độ pha loãng  Xác định số MPN Trang 153/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng  Tính số xác suất lớn (MPN) Độ xác 4.3.6.9 Báo cáo kết quả:  Báo cáo phương pháp xác định sử dụng kết thu được, rõ phương pháp biểu thị dùng Nó phải đề cập đến tất chi tiết thao tác không qui định phần tiêu chuẩn  Trang 154/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng CHƯƠNG V: KẾT LUẬN  Trung tâm Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng đơn vị nghiệp khoa học phục vụ cho công tác quản lý Nhà nước tiêu chuẩn, đo lường, chất lượng Bao gồm chức nhiệm vụ Trung tâm là:  Kiểm tra nhà nước chất lượng hàng hóa xuất nhập  Thẩm định kỹ thuật thiết bị công nghệ hàng hóa  Kiểm định, hiệu chuẩn phương tiện đo kiểm  Thử nghiệm chất lượng sản phẩm (hàng hóa) hệ thống quản lý  Hướng dẫn, đào tạo, tư vấn tiêu chuẩn, đo lường quản lý chất lượng  Cung cấp thông tin tiêu chuẩn hóa, đo lường quản lý chất lượng  Nghiên cứu, chế tạo chuẩn đo lường phương tiện đo  Trung tâm định quan kiểm tra sản phẩm hàng hóa bắt buộc phải kiểm tra Nhà nước chất lượng  Hiện nay, Trung tâm xây dựng nhà thử nghiệm sóng điện từ (EMC) với hệ thống công nghệ cao Nhật đảm nhiệm, lắp ráp thiết bị  Các hệ thống tiêu chuẩn:  Phần lớn tiêu chuẩn có thời gian ban hành lâu theo thống kê Trung tâm Tiêu chuẩn có khoảng 40% số lượng tiêu chuẩn không phù hợp với xu Điều bất lợi lớn trình hội nhập với giới thông qua WTO, AFTA  Giải pháp cho tiêu chuẩn là: Các quan quản lý có chức đưa khoảng thời gian định, để định kỳ xem xét lại hệ thống tiêu chuẩn phù hợp với nhịp độ phát triển xã hội nhằm nâng cao chất lượng sản phẩm Đây khó khăn lớn tốn nhiều chi phí, nguồn lực để thực phải có phối hợp tốt, quán Bộ, Ngành liên quan  Ngoài ra, tiêu chuẩn Việt Nam (TCVN) sử dụng nước, trung tâm thực phép thử theo Trang 155/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế SVTH: HỒ THỊ MINH VÂN Báo cáo Trung tâm Kỹ thuật Tiêu chuẩn Đo lường Chất lượng phương pháp khác như: AOAC,AOCS, AACC, BS, CODEX STAN, FAO FNP, ISO, IS, EEC, GAFTA, ICUMSA  Sản phẩm sữa có nhiều tiêu phương pháp thử khác nhau:  Phần hóa lý: phân tích hàm lượng béo, đạm, casein, số acid, canxi, lactose, chất khô  Phần vi sinh: tổng số vi sinh vật, men, mốc  Hiện nay, sữa có nhiều tiêu cần thử nghiệm quan chưa có đủ thiết bị để thử nghiệm hết tiêu như: vitamin B5, B12, màng béo sữa, số thông minh A+ DHA, WG3 Trang 156/109 Báo cáo thực tập Ngành Kinh tế