_ * _ _ a' BỘ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN t ấ t t h n h KHOA DƯỢC 3Q0ANguyền Tất Thành, p, 13,0.4, TP.HCM VI SINH H O C ( S c h d ù n g đ o ta o d ợ c s ĩ đ i học) MÃ SỐ: Đ20Y03 NHÀ XUẤT BẢN Y HỌC HÀ NỘI - 2006 CHỈ ĐAO BIÊN SOẠN: Vụ khoa học Đào tạo, Bộ Y tế CHÙ BIÊN PGS TS Nguyễn Văn Thanh BAN BIÊN SOẠN: PGS TS Nguyễn Văn Thanh ThS Huỳnh Thị Ngọc Lan TS Trần Thu Hoa ThS Nguyễn Trọng Hiệp THAM GIA TỔ CHỨC BẢN THẢO: TS Nguyễn Mạnh Pha ThS Phí Văn Thâm © Bản quyền thuộc Bộ Y tế (Vụ Khoa học Đào tạo) LỜI GIỚI THIỆU Thực Nghị định 43/2000/NĐ-CP ngày 30/08/2000 Chính phủ quy định chi tiết hướng dẫn triển khai Luật Giáo dục, Bộ Giáo dục & Đào tạo Bộ Y tế phê duyệt, ban hành chương trình khung cho đào tạo Dược sĩ Đại học Bộ Y tế tổ chức thẩm định sách tài liệu dạy - học môn học sở chuyên môn theo chương trình nhằm bước xây dựng sách chuẩn công tác đào tạo Dược sĩ Đại học ngành Y tế Sách Khoa Dược Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh biên soạn dựa chương trình khung Bộ Giáo dục & Đào tạo Bộ Y tế ban hành Sách gồm ba phần chia làm 15 bài, trình bày bật nội dung: mục tiêu, nội dung chuyên môn, câu hỏi lượng giá tài liệu đọc thêm; đảm bảo yêu cầu kiến thức, tính xác khoa học, cập nhật tiến khoa học kỹ thuật vận dụng thực tiễn Nội dung tài liệu chủ yếu cung cấp kiến thức vi sinh gây bệnh, cụ thể chế chuyển hố q trình trao đổi chất, trình lên men vi sinh vật, sở tác dụng chế phẩm probiotic Ngồi cịn giới thiệu chất đường lan truyền chế gây bệnh nhiễm khuẩn thông thường bệnh hiểm nghèo SARS, AIDS Đối tượng sử dụng sách, chủ yếu sinh viên trường đại học Dược Ngoài ra, sinh viên trường đại học khác sử dụng tài liệu tham khảo Xin trân trọng giới thiệu bạn đọc Năm 2005 sách Hội đồng chuyên môn thẩm định sách giáo khoa tài liệu dạy - học chuyên ngành Dược Bộ Y tế thẩm định Bộ Y tế ban hành làm tài liệu dạy - học thức Ngành Y tế giai đoạn Trong thời gian từ đến năm, sách cần chỉnh lý, bổ sung cập nhật Vụ Khoa học Đào tạo xin chân thành cám ơn PGS TS Nguyễn Văn Thanh giảng viên Khoa Dược Đại học Y Dược thành phố Hồ Chí Minh bỏ nhiều cơng sức để biên soạn sách Vì lần đầu xuất nên chắn khơng tránh khỏi thiếu sót, chúng tơi mong nhận ý kiến đóng góp đồng nghiệp sinh viên để sách ngày có chất lượng tốt VỤ KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ MỤC LỤC ■ ■ Lời giới thiệu PHẦN I VI SINH HỌC ĐẠI CƯƠNG Bài Giới thiệu vi sinh vật học Đối tượng nhiệm vụ vi sinh học Lược sử phát triển ngành vi sinh học Phân loại vi khuẩn Bài Tê bào vi khuẩn Hình dạng cách xếp tế bào vi khuẩn Cấu trúc tế bào vi khuẩn Bài Dinh dưỡng tăng trưởng vi khuẩn Dinh dưỡng vi khuẩn Sự tăng trưởng vi khuẩn ứ n g dụng Bài Sự trao đổi chất vi sinh vật Đại cương Năng lượng q trình phân giải đường hexose Hơ hấp Q trình hóa thẩm thấu vi khuẩn Oxy hóa khơng hồn toàn Lên men Bài Di truyền vi khuẩn Vật liệu di truyền vi khuẩn Sự chép nhiễm sắc thể vi khuẩn Các kiểu chép ADN E coỉi Sự tái tổ hợp di truyền truyền tính trạng PHẦN II KHÁI NIỆM MIỄN DỊCH HỌC Bài Sự liên hệ vật chủ vi khuẩn 132 133 Đại cương 133 Năng lực phát sinh bệnh nhiễm 134 Bài Kháng nguyên - kháng thể 141 Kháng nguyên 141 Kháng thể 145 Bài Phản ứng huyết 152 Đại cương 152 Đặc điểm phản ứng huyết 152 Các loại phản ứng huyết 153 Kỹ thuật miễn dịch men (ELISA) 162 Bài Phản ứng mẫn 165 Quá mẫn miễn dịch 165 Phân loại 166 Phản ứng kiểu chậm 169 Bài 10 Sự đề kháng kháng sinh vi khuẩn 173 Phân loại 173 Cơ chế tác động kháng sinh tế bào vi khuẩn 174 Cơ chế đề kháng kháng sinh vi khuẩn 176 PHẦN III VI SINH VẬT GÂY BỆNH Bài 11 Vi khuẩn đường ruột 184 185 Phân loại 185 Đặc điểm nuôi cấy 186 Kháng nguyên 186 Độc tố 187 Vi khuẩn gây bệnh đường ruột 188 Bài 12 Vi khuẩn gây bệnh lây qua đường sinh dục 201 Vi khuẩn gây bệnh lậu: Neisseria gonorrhoeae 201 Vi khuẩn gây bệnh giang mai: Treponema pallidum 203 Vi khuẩn gây bệnh hạ cam mềm: Haemophilus ducreyi 207 Vi khuẩn gây viêm đường tiết niệu lậu cầu 208 Bài 13 Vi khuẩn gây bệnh qua đường khơng khí 212 Bệnh Streptococci 212 M ycobacterium tuberculosis 217 Vi khuẩn gây bệnh bạch hầu: Corynebacterium diphteriae 222 Não cầu khuẩn: Neisseria meningitidis 224 Phế cầu khuẩn: Streptococcus pneumoniae 226 Bài 14 Vi khuẩn gây bệnh da 230 Staphylococcus aureus 230 Vi khuẩn gây bệnh phong: Mycobacterium leprae 233 Bài 15 Virus gây bệnh 236 Cấu trúc 236 Phân loại 237 Quá trình nhân lên virus 239 Tác động virus nhiễm tế bào chủ 243 Chẩn đoán 244 Trị liệu 245 Những virus gây bệnh chủ yếu người 245 Đáp án 258 INDEX Tiếng Việt Tiếng Anh Aerobic chemotroph bacteria Vi khuẩn hố tự dưỡng hiếu khí AND Acid desoxyribnucleic Agglutination Sự ngưng đập Amphitrichaete Lưỡng mao Anatoxin Giải độc tố Antibiotic Kháng sinh Antibody Kháng thể Antigen Kháng nguyên Anti-serum Huyết kháng ARN Acid ribonucleic Atopy Tạng dị ứng Autotrophic bacteria Vi khuẩn quang tự dưỡng Bacteria pathogene opportunity Vi khuẩn gây bệnh hội Bacteria pathogene specific Vi khuẩn gây bệnh chuyên biệt Bacteriocidal agent Chất diệt khuẩn Bacteriophage Thực khuẩn thể Bacteriostatic agent Chất tẩy trùng Capsid Vỏ Cell membrance Màng tế bào chất Cell wall Thành tế bào Chancre Săng 10 Chemiosmosis Quá trình hố thẩm thấu Chemotroph Hố dưỡng Chromosome Nhiễm sắc thể Coevolution Đồng tiến hoá Commensal Vi khuẩn hội sinh Competence Khả dung nạp Complement Bổ thể Conjugation Tiếp hợp Contamination Sự nhiễm Delayed - type response Phản ứng kiểu chậm Detergent Chất tẩy Disinfection Sự tẩy trùng Donor Tế bào cho Electrochimic gradient Chênh lệch điện hoá Endogenose Gen nội sinh Endotoxin Nội độc tố Enzym Linked Immuno Sorbent Assay (ELISA) Định lượng miễn dịch liên kết men Eukaryote Tế bào nhân thật Exogenose Gen ngoại sinh Exotoxin Ngoại độc tố Faculative anaerobe Hiếu khí bắt buộc Ferment Lên men Flagella Tiêm mao 11 Flocculation Phản ứng kết Fluorescent antibody technique Kỹ thuật kháng thể huỳnh quang F - prime Hạt F Genotype Hệ gen Growth factor Yếu tố tăng trưởng Hemagglutination Phản ứng ngưng tập hồng cầu Heterofermentative Lên men dị hình Heterotrophic bacteria Vi khuẩn quang dị dưỡng Hfr Tần số tiếp hợp cao Hft Tần số tải nạp cao Homofermentative Lên men đồng hình Immediate - type reaction Phản ứng kiểu tức thời Immune Miễn dịch Insertion sequence Đoạn chèn Lagging template Mạch sau Lagging strand template Mạch khuôn sau Lagging template Mạch dẫn Leading strand template Mạch khuôn dẫn Lipophile Thân lipid Lophotrichaete Đa mao Matting force Lực tiếp hợp Membrance permeability Khả thấm qua màng Merozygote Hợp tử khơng hồn tồn Metabolism Quá trình trao đổi chất 12 Methyl Red (MR) ĐỎ methyl Microaerophile Vi hiếu khí Microbiology Vi sinh vật học Monocytic Đơn bào M onotrichaete Đơn mao M ultinucleate Cộng bào Nucleotid Thể nhân Obligate aerobe Hiếu khí bắt buộc Obligate anaerobe Kỵ khí bắt buộc Ori Origin of replication Periplasma Khoảng không quanh tế bào chất Peritrichaete Chu mao Phototroph Quang dưỡng Potential energy Thế Primer Mồi Prokaryote Tế bào nhân nguyên thủy Prostista Nguyên sinh vật Protoplast Thể nguyên sinh Radio Immuno Assay (RIA) Đinh lượng miễn dịch phóng xạ Receptor Nơi nhận Recipient Tế bào nhận Replicating fork Chạc ba chép Replication Sự tái Rolling circle mechanism Cơ chế lăn vòng 13 K gày bệnh Virus gây bệnh đậu mùa, bắt đầu sốt, sau biểu vết thương da Có hai dạng đậu mùa dạng nặng dạng nhẹ Bệnh truyền nhiễm từ người sang người tiếp xúc với chất tiết từ vết thương da hay qua đường hô hấp hay dụng cụ nhiễm Chẩn đốn Ni phơi gà (gây nốt bọc màng đệm) nhiều tế bào ni cấy in vitro khác Chẩn đốn soi kính hiển vi điện tử, thử kết tủa miễn dịch C hủng ngừa Do khơng có tác nhân đặc trị, nên chủng ngừa quan trọng Vaccin đậu mùa có từ lâu (Jenner 1798) Vaccin virus sống gây bệnh đậu bị, khơng gây bệnh người Vaccin cơng hiệu chủng ngừa tồn giới giúp tiêu diệt bệnh đậu mùa Virus sởi (measle virus) Đại cương Virus sởi thuộc họ Paramyxoviridae, chi M orbiỉlivirus Là virus ARN sợi đơn, âm, thẳng K gày bệnh Bệnh sởi dễ lây Biểu phản ứng viêm niêm mạc mắt, mũi, đường tiêu hoá mẩn Có thể gây biến chứng viêm não, bội nhiễm vi khuẩn đường hô hấp Bệnh thường gây sốt sau 10 ngày, mẩn sau 14 ngày Thông thường bệnh qua không biến chứng, bệnh miễn dịch suốt đời C hẩn đoán Dựa triệu chứng lâm sàng Chẩn đoán khẳng định cách phân lập virus từ họng nước tiểu thời gian bị nhiễm ngày Sau ni cấy tế bào đa nhân lớn Có thể áp dụng phương pháp kháng thể huỳnh quang trực tiếp cặn nước tiểu mẫu họng Chẩn đoán huyết dựa vào tạo phức hợp ức chế hemagglutin hóa kháng thể huỳnh quang gián tiếp Điều trị Không có thuốc đặc trị, chủ yếu trị triệu chứng, vệ sinh thân thể, dùng kháng sinh ngừa bội nhiễm C hủng ngừa với vaccin virus giảm độc cho kết tốt Virus quai bị (Rubulavirus) Đại cương Virus quai bị thuộc họ Paramyxoviridae, virus ARN sợi đơn, âm K gáy bệnh Virus gây bệnh quai bị, bệnh cấp tính Virus gây viêm tuyến nước bọt, có tuyến sinh dục, tụy màng não Bệnh lây qua đường hô hấp, nước bọt từ người bệnh sang người lành, thành dịch, thường nơi đơng người (trường học, trại lính ) Người mang mầm bệnh (đôi chiếm 25-30%) nguồn lây nhiễm Bệnh quai bị thường bệnh trẻ em từ 3-14 tuổi, niên 18-20 tuổi Miễn dịch sau mắc bệnh vững Thời gian ủ bệnh khoảng 15-21 ngày, virus nhân lên niêm mạc miệng, kết mạc, xâm nhập vào máu tỏa phát triển gây viêm quan màng não, tuyến 246 sinh dục, tuyến tụy, tuyến nước bọt từ virus lại xâm nhập lại vào máu gây đa dạng bệnh C hẩn đoán Phân lập sớm từ nước bọt, họng vị trí nhiễm khác (dịch não tủy, nước tiểu), nuôi cấy tế bào thận khỉ, phơi gà Chẩn đốn nhanh cách phát cặn nước tiểu họng miễn dịch huỳnh quang Chẩn đoán huyết cách dùng thử nghiệm ức chế ngưng kết hồng cầu, phản ứng ELISA kháng nguyên nucleocapsid s (solube) kháng ngun V (viral) Đ iều trị Khơng có thuốc đặc trị Điều trị triệu chứng C hủng ngừa Dùng vaccin virus sống giảm độc, bảo vệ kéo dài 5-10 năm, áp dụng tiêm chủng cho trẻ 5-10 tuổi chưa mắc bệnh Có thể kết hợp tiêm chủng với vaccin chống sởi, bại liệt, rubeole Virus thuỷ đậu - zona (Varicella-zoster virus) Đ ại cương: Virus thuỷ đậu thuộc họ Herpesviridae, có ADN sợi kép, xoắn thẳng Virus có tế bào chủ có chu kỳ nhân lên chậm K gây bệnh Virus gây bệnh hay gọi thủy đậu Đây bệnh có mẩn Thơng thường khơng nặng, biến chứng gây viêm não, với bệnh nhân bị ung thư máu mắc bệnh gây tử vong Bệnh dễ truyền nhiễm, phải cách ly bệnh nhân, vật dụng sử dụng phải khử trùng Chẩn đốn Tìm tế bào đa nhân lớn Virus ni cấy từ dịch mụn nước Nhuộm kháng thể miễn dịch huỳnh quang tìm kháng nguyên tế bào vết thương tróc Điều trị Khơng có thuốc đặc trị, nên phải cách ly, điều trị bệnh sởi P hòng bệnh Dùng vaccin sống 7.2 V iru s gây bệnh đường hô hấp V irus gây bệnh cảm Virus gây bệnh cảm gồm nhiểu loại: Rhinovirus, Adenovirus, Parainfluenza, Syncytial virus, Coxackie virus Thời gian ủ bệnh ngắn, từ 12-72 Truyền nhiễm tiếp xúc trực tiếp (khơng khí, nước bọt ) hay gián tiếp vật dụng Bệnh nhẹ, tự hết phải ngừa bội nhiễm vi khuẩn Khơng có miễn dịch đáng kể V irus cúm Đ ại cương Các virus cúm thuộc họ Orthomyxoviridae, có màng bao Genome ARN sợi đơn Phân thành ba nhóm huyết A, B c dựa vào khác kháng nguyên ribonucleoprotein Cúm A nghiên cứu nhiều có khuynh hướng thay đổi kháng nguyên đáng kể Cúm B có tính kháng ngun ổn định bùng phát có tính địa phương Cúm c gây bệnh 247 H ìn h 15.9 V iru s cúm A Virus cúm A B có nucleocapsid chứa tám mẩu ARN sợi đơn âm, bao màng glycolipid lấy từ màng ngun sinh tế bào chủ Phía màng có lớp protein đặc hiệu virus Hai glycoprotein đặc hiệu virus hemagglutinin neuraminidase gắn vào mặt màng bao “những gai” khắp bề mặt virion (hình 15.9) Cúm c khác có bảy mẩu ARN khơng có neuraminidase, có khả phá thụ thể khác Ngồi hemagglutinin cúm c gắn vào thụ thể tế bào khác với thụ thể virus cúm A cúm B Hemagglutinin có tên xuất phát có khả kết tập in vitro hồng cầu số loài chim gà, lợn Chức gắn vào vị trí thụ thể mucoprotein bề mặt tế bào hơ hấp người - bước khởi đầu để nhiễm vào tế bào Neuraminidase enzym thủy phân kháng nguyên, hoạt động thụ thể mucoprotein hemagglutinin cách cắt đầu acid neuraminic làm phá hủy hoạt tính thụ thể Một số chức neuraminidase: - Bất hoạt thụ thể mucoprotein tự tiết đường hô hấp, làm thụ thể không gắn vào hemagglutinin khơng ngăn q trình gắn vào tế bào virus - Dung hợp màng bao virus với màng tế bào chủ cần cho virus vào - Hỗ trợ giải phóng tiểu phần virus khỏi tế bào nhiễm, để nhiễm tế bào khác Kháng thể đặc hiệu với neuraminidase ức chế virus lan truyền tế bào chủ bị nhiễm hạn chế lượng virus phóng thích khỏi tế bào chủ Cúm A phân lập lần đầu năm 1933 nuôi cấy mũi chồn sương (chồn furô) gây bệnh hô hấp sốt Hiện virus thường nuôi túi màng ối phôi gà, tế bào thận khỉ P hát Dựa vào gắn hồng cầu với tế bào nhiễm chứa hemagglutinin ngưng kết tế bào hồng cầu virus phóng thích vào dịch ngoại bào Sau thêm kháng thể đặc hiệu trực tiếp hemagglutinin, phát kháng thể kháng hemagglutinin Đến phát cúm A có 15 loại hemagglutinin (H; -» H 15) loại neuraminidase (Nj —> N9) 248 P hòng bệnh Dùng vaccin virus chết từ chủng liên quan gần Vaccin chứa virion nguyên vẹn phần tách tiểu đơn vị kháng nguyên hemagglutinin Thường dùng hai liều cách tháng để tiêm cho trẻ em liều năm trước mùa cúm Hiệu vaccin thay đổi cần tiêm nhắc hàng năm có hiệu 70-85% Uống amantadin hydrochlorid, amin đối xứng có hiệu vài tuần, ức chế virus bỏ áo phiên mã ARN ban đầu virus Thuốc có tác dụng phụ nên cho bệnh nhân nguy cao dùng chờ vaccin gây cảm ứng miễn dịch Điểu trị Điều trị không đặc hiệu, chữa triệu chứng phòng biến chứng (đặc biệt bội nhiễm vi khuẩn) Liệu pháp amantadin uống: amantadin hydrochlorid sớm nghi ngờ bị cúm A cao 4-5 ngày 7.3 V iru s gây bệnh hệ thần kinh trung ương Virus gây bệnh dại (Rabies virus) Đ ại cương Virus dại thuộc họ Rhabdoviridae, có ARN sợi đơn K gáy bệnh Virus gây bệnh dại thú lây sang người bị súc vật cắn hay cào Súc vật hay mắc bệnh dại chó, mèo, sóc, chồn Virus sinh sản nơi xâm nhập, theo dây thần kinh đến hệ thần kinh trung ương C hẩn đốn Dùng miễn dịch huỳnh quang, soi kính hiển vi điện tử mô não Cấy mô não nhiễm vào chuột cịn bú Dương tính chuột chết 3-10 ngày Virus sinh sản não Đ iều trị Bệnh khơng có thuốc điều trị, tỉ lệ tử vong cao P hịng bệnh Chó phải tiêm phịng Sau bị súc vật cắn phải rửa vết thương ngay, phải bắt giữ súc vật lại để theo dõi 10 ngày xem có bị dại hay khơng Vì thời gian ủ bệnh dài nên tiêm vaccin từ lúc đầu để trị liệu Sau thời gian theo dõi súc vật mắc bệnh, phải tiêm huyết trị liệu Virus bại liệt (Poliovirus) Đ ại cương Virus bại liệt thuộc họ Picornaviridae Capsid 20 mặt đối xứng: protein capsid (VP1-4), protein capsid có 60 Có sợi đơn ARN dương, kích thước 7,5-8,0 kb K gây bệnh Virus bại liệt gây bại liệt, xâm nhập qua đường miệng, sinh sơi vượt tế bào tiêu hóa vào tủy sống, phá hủy nơron thần kinh gây bại liệt Đ iều trị Khơng có thuốc đặc trị Phịng bệnh Dùng vaccin loại hoạt tính IPV (cịn gọi vaccin Salk, dạng tiêm dưói da) vaccin uống OPV chứa virus sống giảm độc (vaccin Sabin, dạng uống) Tổ chức Y tế Thế giới (WHO) đặt mục tiêu năm 2005 tốn virus bại liệt tồn cầu Từ 2005 đến 2010 ngừng tiêm chủng bệnh bại liệt 249 7.4 V iru s g â y b ệ n h n ộ i tạ n g -m u -s in h d ụ c V irus viêm gan Các virus viêm gan gồm có: HAV (Hepatitis A virus) thuộc nhóm Enterovirus, HBV (Hepatitis B virus) thuộc họ Hepadnaviridae HCV (Hepatitis c virus) Flavivirus Ngồi cịn có HDV, HEV Đặc tính virus tóm tắt bảng 15.2 B ả n g 15.2 Đ ặ c tính virus gây viêm gan virus Tên Đường truyền Genome HAV Ruột ARN sợi đơn dương, thẳng HBV Ngoài ruột ADN sợi kép vịng HCV Ngồi ruột ARN sợi đdn dương, thẳng HDV Ngồi ruột ARN sợi đơn âm, vịng HEV Ruột ARN sợi đơn dương, thẳng H A V (Hepatitis A virus) Đặc điểm Virus khơng màng bao, hình khối đối xứng đường kính 27 nm, ARN sợi đơn, dương Người ký chủ tự nhiên HAV, số lồi linh trưởng nhạy với virus Khơng bị bất hoạt ether, ổn định -2 ° c pH thấp Khả gảy bệnh HAV thường gây viêm gan thể cấp vượt qua nghỉ ngơi bồi dưỡng Thời gian ủ bệnh ngắn loại viêm gan virus, trung bình từ 2-4 tuần Gây rối loạn tiêu hóa, đau bụng, nơn, sốt nhẹ sau dẫn đến vàng da Virus kháng số tác nhân lý hóa nồng độ clo thường dùng nước Bệnh nhiễm chủ yếu phân hay nước, thức ăn bị nhiễm, hoạt động tình dục Chẩn đốn Tìm IgM đặc hiệu với virus huyết giai đoạn bệnh cấp Soi kính hiển vi điện tử mẫu phân tế bào ni cấy Phịng bệnh Dùng ISG (Immune serum globulin) sản xuất từ huyết tương Điều trị không đặc hiệu Bồi dưỡng nghỉ ngơi H B V (H epatitis B virus) Đặc điểm Virus sợi kép ADN, có màng bao Virion hồn chỉnh (cịn gọi tiểu phần Dane) có hình cầu kích thước 42 nm, gồm hai phần có cấu trúc đồng tâm màng bao lõi Lõi nucleocapsid chứa genome ADN gồm kb Đặc biệt ADN HBV có kiểu chép qua giai đoạn trung gian ADN - ARN, điều khiển tổng hợp ARN polymerase virus Các kiểu gen HBV xác định ký hiệu từ A đến G Khả gây bệnh Virus lây nhiễm qua đường máu, sinh dục chủ yếu, truyền từ mẹ sang Thời gian ủ bệnh từ tuần đến tháng, số khơng có triệu chứng HBV dẫn đến xơ gan, hay ung thư gan Chẩn đốn Virus có kháng nguyên HBsAg, HBcAg HBeAg 250 HBsAg (hepatitis B surface antigen) kháng nguyên có bề mặt virus, tạo nhiều huyết thanh, dạng hạt hình ống hình cầu đường kính 22 nm HBcAg (hepatitis B core antigen) kháng nguyên lõi (lõi nucleocapsid) thấy nhân tế bào gan bị nhiễm phương pháp miễn dịch huỳnh quang HBeAg (hepatitis B e antigen) glycopeptid, Mr thấp Có liên quan đến kháng nguyên lõi, dùng dấu hiệu dịch tễ, quan sát HbsAg diẹn Anti-HBs kháng thể HBsAg, liên quan phòng vệ chống lại bệnh Anti-HBc kháng thể HBcAg, thấy nhiễm cấp tính mang virus mạn tính; dùng dấu hiệu nhiễm q khứ, khơng có vai trị quan trọng để chống lại bệnh Anti-Hbe kháng thể HBeAg Chẩn đoán dựa vào triệu chứng vàng da, chứng minh HBsAg huyết Giai đoạn phát HBsAg huyết ngắn Có thể dùng dấu hiệu huyết khác kháng thể kháng nguyên lõi (anti-HBc) Xác định nhiễm HBV khứ tốt phát anti -HBc, anti-HBs hai Phòng ngừa Tiêm chủng HBsAg tái tổ hợp sản xuất từ nấm men (EngerixB) tế bào động vật Tiêm lần cách tháng, nhắc lại sau năm Phòng trẻ sơ sinh bị nhiễm từ mẹ cần tiêm vào 24 giờ, tháng tháng sau sinh Điều trị Dùng interferon, dùng kháng thể kháng HBV phối hợp vaccin H C V (H epatitis c virus) Trước virus phân loại non -A non-B hepatitis Mới phân lập năm 1989 xác định đặc tính Virus có màng bao, đường kính 30 - 60 nm, có sợi đơn ARN dương thẳng khoảng 10.000 nucleotid Sao chép genome virus không qua ADN trung gian, khơng có hợp acid nucleic virus vào ADN tế bào chủ Bệnh nhân nhiễm HCV bị viêm gan điển hình trở thành nhiễm mạn tính (50% trường hợp viêm gan), gây ung thư gan nguyên phát qua xơ gan tái tạo tế bào gan HCV có khắp giới Chủ yếu bị mắc phải truyền máu lạm dụng ma túy qua tĩnh mạch, truyền qua đường tình dục Chẩn đốn Kháng ngun gốc phát qua kháng thể kháng HCV huyết tương bệnh nhân nhiễm ELISA Trình tự nucleotid HCV xác định nên dùng PCR (RT-PCR) để kiểm tra trực tiếp genome virus Vaccin Virus không nuôi cấy in vitro được, nhiên phát triển vaccin theo cách áp dụng với vaccin kháng Flaviviruses Pestivirusesa Vaccin tái tổ hợp gặp khó khán nhóm virus HCV có trình tự phong phú chủng phân lập khác nhiều vùng đầu amin E2 /NS Điều trị Dùng interferon H D V (Hepatitis D virus) Virus có sợi đơn ARN, kích thước nhỏ, cần HBsAg để truyền nhiễm Chỉ thấy bệnh nhân HBV cấp mạn tính Ngăn HBV ngăn HDV Chẩn đốn dựa 251 vào tìm IgM và/hoặc IgG kháng a-delta Ag huyết tương IgM xuất tuần tồn vài tuần, IgG vài năm Virus gây hội chứng suy giảm miễn dịch người (Human Immunodeficiency Virus, HIV) Đại cương HIV retrovirus có hai sợi đơn ARN Màng bao virus có chứa phức protein Env, phức gồm có chóp glycoprotein 120 (gpl20) nhơ ngồi cuống gp41 Trong màng bao virus có protein HIV p l7 (matrix), lõi (capsid) virus làm protein khác virus p24 (kháng nguyên lõi) Lõi virus chứa hai sợi đơn ARN HIV, protein p7 (nucleocapsid), ba protein enzym: p51 (reverse transcriptase), pi (protease) p32 (integrase) HIV có lực với thụ thể tế bào lympho T CD4 có g p l2 lớp màng bao, làm cho màng hòa lẫn vào ARN virus phóng thích vào với reverse transcriptase, sau virus sinh sơi Sau ADN virus tạo gắn vào ADN nhân tế bào lympho T khơng cịn khả sinh sơi Q trình phá hủy xảy chậm khoảng đến 10 năm, hoạt động hệ miễn dịch bị ngăn chặn, thể bị khả bảo vệ nhiễm trùng HIV sinh sản cho 80-90 virion Sau lympho T ly giải phân tánH IV Ớ người bình thường, CD4 chiếm khoảng 600-700 tế bào/|j.l Ở người bệnh, số CD4 giảm dần đến không màng V p l7 p24 protease reverse transcriptase RNA gp: glycoproteii p- Hình 15.10 Cấu trúc virus gây hội chứng suy giảm miễn dịch người (HIV) K gày bệnh Bản thân HIV không gây bệnh, bệnh nhiễm vi khuẩn hội xâm nhập hệ miễn dịch thể bị suy yếu Bệnh lây truyền đường máu, sinh dục hay từ mẹ truyền qua Dấu hiệu lâm sàng bắt đầu có số tế bào lympho cịn 200 microlit máu 252 Chẩn đoán Việc kiểm tra HIV tiến hành có hai triệu chứng giảm cân 10 %, tiêu chảy tháng, sốt kéo dài tháng, lao; triệu chứng phụ ho tháng, ngứa mẩn, tiền sử herpes hai năm cuối, nhiễm nấm miệng họng, herpes hạch lympho lớn Thử nghiệm sàng lọc ban đầu ELISA để phát protein vỏ (Env) Vì đơi có phản ứng dương giả, phân tích Western blot dùng để khẳng định diện kháng thể virus W estern blot tìm HIV tiến hành sau Chiết protein virus tinh khiết, phân tích SDS -PAGE, chuyển qua màng nitrocellulose, ủ với huyết bệnh nhân Nếu có kháng thể protein HIV -1, gắn xác vào protein tương ứng màng cho băng có trọng lượng phân tử thích hợp quan sát với thuốc thử kháng Ig Mới gần đây, người ta dùng RT -PCR để phát gen ARN hạt virus tự máu RT -PCR tiến hành sau Trước hết phiên mã ngược ARN thành ADN, sau ADN tạo thành khuếch đại Phương pháp phát nhiễm HIV trước có kháng thể sinh ra, quan trọng dùng để theo dõi bệnh thành cơng trị liệu (dùng real time PCR) Đ iều trị Chưa có thuốc đặc trị, virus trốn tế bào nhiễm, tế bào thần kinh, não Việc nghiên cứu vào hướng: ức chế virus vào tế bào, ức chế integrase, dùng nucleosid ức chế reverse transcriptase (NRTI), ức chế reverse transcriptase nucleosid (NNRTT), ức chế protease (PI) Việc trị liệu gồm nhiều hướng khác nhau, cần phối hợp từ hai thuốc kháng retrovirus (ARV) trở lên Các thuốc không chữa trị HIV/AIDS ngăn chặn nhân lên HIV, cho phép hệ miễn dịch hồi phục Nếu ngưng dùng thuốc ARV, bệnh HIV tiến triển - Các nucleosid ức chế reverse transcriptase (NRTI): azidothymidin (AZT), dideoxyinosin (ddl), dideoxycitidin (ddC), d4T, 3TC, ABC, FTC - Các chất ức chế protease (PI): SAQ1, IND, RTV, NFV, SAQ2, AMP, KAL, ATV, FOS - Các chất ức chế reverse transcriptase nucleosid: NVP, DLV, EFV - ứ c chế virus vào tế bào: CD4 hoà tan - Interferon: Giảm đâm chồi HIV, chống sarcomaKaposi (Intron-A) - Ngăn ngừa bệnh nhiễm hội: Kháng sinh nhiễm khuẩn, thuốc kháng virus nhiễm virus P hòng ngừa Sản xuất vaccin gặp nhiều trở ngại Trước hết lý nêu phần điều trị Ngồi ra, HIV có nhiều thay đổi yếu tố bề mặt giúp hệ thống miễn dịch thể nhận biết, nên vaccin chưa hiệu 253 Các vaccin có chất gp l2 có khả tạo đáp ứng thể dịch, ức chế virus xâm nhập, cạnh tranh dung hợp màng bao, tương tác với tê bào bạch cầu Các vaccin genome virus vaccin dùng hệ vectơ khác để biểu gag, pol, env, nef Các vaccin kích thích đáp ứng CTL, có hiệu phịng vệ phần cho khỉ khơng bị nhiễm virus lai SIV-HIV (SHIV) 7.5 V irus gây ung thư Có hai loại virus gây ung thư virus ADN gây u có genome ADN sợi đơi retrovirus có genome ARN sợi đơn Hai loại virus chuyển tế bào bình thường thành tế bào ác tính theo cách khác nhau, chế chép nhiễm chúng khác Các virus gây u thuộc họ re tro v iru s Đặc tính chung Các virus khơng có tính độc tế bào, chúng khỏi màng tế bào mà khơng giết tế bào bị nhiễm Có thể truyền ARN theo đường ngang tác nhân nhiễm kinh điển, hay truyền dọc theo dòng, hay từ mẹ qua đường cho bú Có thể chia thành hai nhóm chính: - Virus ung thư ác tính Gây ung thư bạch cầu, u rắn, tiềm ẩn ngắn động vật Làm chuyển thể tế bào in vitro, thường gây chép khiếm khuyết - Virus gây ung thư bạch cầu u lympho tế bào B, tiềm ẩn lâu Không chuyển thể tế bào in vitro Sao chép cạnh tranh Virus nhiễm tế bào in vitro cho ba loại kết quả: (1) Tế bào chuyển thể sản xuất virus, ví dụ virus sarcoma khơng khiếm khuyết; (2) Tế bào chuyển thể khơnệ sản xuất virus, ví dụ virus sarcoma khiếm khuyết (3) Tế bào không chuyen thể, sản xuất virus, ví dụ virus leukemia Các retrovirus (cả gây u không) dùng chế chép ngược genome ARN chúng thành ADN hợp ADN virus vào gen tế bào chu K nãng gây bệnh 254 - Nhóm 1-Retrovirus chuyển thể cấp tính, gây bệnh tạo thêm gen (v-onc) genome tế bào chủ Người ta biết nhiều v-onc, chúng mã hóa cho chức khác nhau, biến thể trội Vì có nhiều v-onc khác nên chế sinh hóa chuyển thể tế bào virus khác - Nhóm 2-Retrovirus khơng mang v-onc (các virus gây ung thư bạch cầu u lympho) Gây u từ từ cách chèn promoter, làm hoạt hóa biểu oncogen tế bào gần vị trí chúng hợp vào gen tế bào chủ Cũng có số chế khác như: tương tác kích thích thụ thể erythropoietin (EPO) trường hợp protein màng bao virus leukemia Friend gây erythroleukemia, hay kích thích biểu IL -2 thụ thể IL -2 làm chuyển thể tế bào T HTLV (human T-lymphotropiv virus) Có hai loại HTLV -I HTLV -II, liên quan đến ung thư máu u lympho Lây qua đường sinh dục truyền máu bị nhiễm Kết khảo sát Nhật cho thấy nhiễm HTLV khơng đủ để tạo nên ung thư C ác virus ADN gáy u Trong virus ADN, đến có ba nhóm thấy có liên hệ gây u người virus Epstein -Barr (EBV), virus viêm gan B (HBV) virus papilloma người (HPV) E B V Gây tăng đơn nhân nhiễm trùng có liên quan đến hai loại ung thư Burkitt’s lymphoma châu Phi ung thư vùng mũi hầu H B V Gây ung thư tế bào nguyên phát Nhiễm HBV mạn thường gây xơ gan Người ta tìm thấy ADN HBV HbsAg tế bào ác tính Cơ chế ADN HBV hợp vào gây đột biến gen, làm hoạt hóa oncogen tế bào HPV Virus nhỏ khơng bao, ADN sợi kép, hình khối 20 mặt, đường kính khoảng 55 nm Gây bệnh u nhú biểu bì mụn cóc Có 60 loại huyết HPV HPV -1 đến HPV -6 gây mụn cóc bàn chân, HPV -6 đến HPV -11 gáy mụn cóc hậu môn - sinh dục u nhú quản HPV -16 đến HPV -18 gây ung thư cổ tử cung C hẩn đoán Dùng kỹ thuật sinh học phân tử 7.6 Các prion Từ “prion” Prusiner đặt để protein nhiễm, viết gọn “protein infective agent” Prusiner nhận giải thưởng Nobel năm 1997 cho việc đưa giả thiết prion chứng minh xác diện Khái niệm prion quan tâm tranh cãi tác nhân nhiễm chất protein, có khả tự chép, khơng có ARN ADN Nhóm bệnh thối hóa nặng dần lên CNS (bệnh não xốp bán cấp tính) gây prion, cho “các virus bất thường” Prion protein đơn (PrP, prion protein) tồn hai dạng đồng đẳng khác Trong mô khỏe PrPc (dạng tế bào bình thường) PrP 50 (dạng scrapie nhiễm) Hai dạng có tính nhạy cảm khác với protease: PrPc (còn gọi PrPscn) protein 33-35 kDa dễ bị protease K phân giải, PrP^ (hoặc P rF es) tạo lõi 27-30 kDa (còn gọi PrP27 -30) để kháng với protease Khi có chất tẩy, PrPc tan, PrP27-30 polyme hóa thành amyloid fibril (sợi dạng tinh bột) Bệnh truyền PrP 50 tinh khiết, protein chuyển PrPc thành dạng PrP 50 dạng chuyển prion tế bào thành dạng scrapie theo kiểu phản ứng dây chuyền Các bệnh prion gồm scrapie, bệnh não xốp bán cấp bò (“bệnh bò điên”) bệnh não chồn vizon truyền động vật, bệnh Creutzfeldt -Jakob (CJD), hội chứng Gerstmann -Straussler-Scheinker (GSS) người Các bệnh có thời gian ủ bệnh dài (đơi tới 30 năm), triệu chứng biểu bệnh diễn tiến nhanh hậu chết 255 Bảng 15.3 Bệnh não xốp bán cấp tính Bệnh Các bệnh người Kuru (bệnh run, ảnh hưởng tới dân tộc Fore Tân guinea -b ị thối hóa tể bào hệ TKTW, đặc biệt vùng não có nhiệm vụ kiểm sốt hoạt động) Bệnh Creutzfeldt -Jakob dùng thuốc Bệnh Creutzfeldt -Jakob biến thể Bệnh Creutzfeldt -Jakob không thường xuyên Bệnh tương tự Creutzfeldt -Jakob Bệnh Gerstmann -Straussler-Scheinker Mất ngủ gia truyền dẫn đến chết Bệnh ỏ động vật Scrapie (cừu) Bệnh não xốp bò (gia súc) Bệnh não chồn vizon truyền (chồn vizon) Bệnh lãn mạn tính (hươu nai) Nguồn gốc công nhận Nhiễm tục ăn thịt người (nay bị tuyệt chủng) Nhiễm từ hGH nhiễm, ghép giác mạc, thiết bị y tế nhiễm, Nhiễm prion bò Đột biến hoán chuyển tự phát PrPc thành PrPSc Các đột biến tế bào mầm (germline) gen PrP Các đột biến tế bào mầm gen PrP Đột biến tế bào mầm gen PrP Nhiễm cừu dễ bị tổn thương có tính chất di truyền Nhiễm ăn thức ăn nhiễm prion Nhiễm prion từ cừu gia súc Chưa biết T ự L Ư Ợ N G G IÁ : C họn câu tr ả lời Đặc tính khơng cho virus: a Ký sinh nội bào bắt buộc b Tùy thuộc hoàn toàn vào máy tổng hợp protein tế bào chủ c Lấy nguồn lượng tế bào chủ d Chứa ARN ADN (sợi đơn sợi đôi) e Là tế bào Retrovirus có khả tạo dây ADN xoắn kép nhờ enzym: a ATP synthetase d ADN synthetase b Reverse transcriptase e Helicase c ADN polymerase Genome virus có chứa: a Capsid d ADN ARN b Envelop (bao) e a, c c ADN ARN Virus vào tế bào chủ theo chế sau: a Thực bào d Bơm b Dung hợp e Tất c Chuyển vị 256 Kiểu tác dụng tế bào chủ virus nhiễm: a Nhiễm dai dẳng d Tiềm ẩn b Ly giải e Tất c Chuyển thể tế bào bình thường thành tế bào u Phát nhiễm virus dùng: a Nuôi cấy trực tiếp phôi mô nuôi cấy b Quan sát kính hiển vi điện tử c Quan sát kính hiển vi phản pha d Tìm kháng thể kháng virus e Phản ứng cố định bổ HIV có lực đặc biệt với tế bào thể người: a Bạch cầu d Lympho B b Đại thực bào e Lympho T c Lympho A Virus gây viêm gan B lây nhiễm qua đường: a Sinh dục d Tiêu hoá b Máu e a d c Hô hấp Virus dại thường gây tổn thương quan: a Da d Thần kinh trung ương b Màng nhày e Tất c Thần kinh thực vật 10 AZT tác động lên HIV theo chế: a Giảm nhân lên HIV b Ngăn HTV bám vào tế bào lympho c Ngăn vi khuẩn gây bệnh hội d ứ c chế reverse transcriptase e Làm HIV vỏ T À I L IỆ U Đ Ọ C T H Ê M Madigan, Martinko and Parker B rock Biology o f M icroorganism s 9lh edition, 2000 J c Sherris M edical International Inc., 1994 M icroorganism s yẽ edition, Prentice-Hall 257 ĐÁP ÁN B ài T ế b o v i k h u ẩ n la 4c 7a 2e 5b 8a 3e 6d 9c 10 c B ài D in h d ỡ n g tă n g trư n g c ủ a v i k h u ẩ n la 4d 7a 2b 5e 8c 3e 6c 9e B ài S ự t r a o đ ổ i c h ấ t c ủ a v i s in h v ậ t la 4d 7c 2b 5e 8b 3c 6a 9b 10 c B ài Di tr u y ề n v i k h u ẩ n la 4b 7b 2b 5d 8e 3d 6c 9c lO e B ài Sự liê n hệ g iữ a v ậ t c h ủ v i k h u ẩ n 1b 2e 3b B ài K h n g n g u y ê n - k h n g th ể ld 3a 2a 4c 5b B ài P h ả n ứ n g h u y ế t th a n h 1d 3d 2c 4c 5b B ài P h ả n ứ n g q u m ẫn 1d 3d 2a 4c 5e 4c 5a B ài 10 S ự đề k h n g k h n g sin h v i k h u ẩ n 1c 3a 2e 4a c B ài 11 Vi k h u ẩ n đ n g ru ộ t 1b 4c 7b 2c 5c 8c 3a 6c 9c 10 d B ài 12 Vi k h u ẩ n gâ y b ệ n h lâ y q u a đ n g s in h d ụ c 1c 3e 2c 4a 5e B ài 13 Vi k h u ẩ n gâ y b ệ n h qu a đ n g k h n g khí le 3a 2d 4d 5d Bài 14 Vi k h u ẩ n g â y b ệ n h n g o i da la 3e 2b 4c 5a B ài 15 V iru s g â y b ệ n h le 4e 7e 2b 5e 8e 3d 6c 9d 10 d 259 NHÀ XUẤT BẢN Y HỌC VI SINH HỌC ■ Chịu trách nhiệm x u ấ t HOÀNG TRỌNG QUANG Biên tập: DS PHƯƠNG THẢO Sửa in: BS HẢI YẾN Trình bày bìa: CHU HÙNG K T vi tính: HUỆ CHI In 1.000 cuốn, khổ 19 X 27cm, Xưởng in Nhà xuất Y học Giấy phép xuất số: 23-2006/CXB/106- 271/YH In xong nộp lưu chiểu quý II năm 2006