Xác định một số yếu tố gây bệnh của vi khuẩn escherichia coli và clostridium perfringens gây tiêu chảy ở dê nuôi tại thái nguyên và biện pháp phòng trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẶNG THỊ MAI LAN XÁC ĐỊNH MỘT SỐ YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI VÀ CLOSTRIDIUM PERFRINGENS GÂY TIÊU CHẢY Ở DÊ NUÔI TẠI THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP PHÒNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC S KHOA HC NễNG NGHIP Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - ĐẶNG THỊ MAI LAN XÁC ĐỊNH MỘT SỐ YẾU TỐ GÂY BỆNH CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI VÀ CLOSTRIDIUM PERFRINGENS GÂY TIÊU CHẢY Ở DÊ NI TẠI THÁI NGUN VÀ BIỆN PHÁP PHỊNG TRỊ Chuyên ngành: Mã số: Thú y 60 62 50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Cù Hữu Phú GS.TS Nguyễn Quang Tuyờn Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 S húa bi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn i LỜI CAM ĐOAN - Tôi xin cam đoan số liệu luận văn hồn tồn tơi nghiên cứu, phân tích, phản ánh trung thực nội dung đề tài Các số liệu chưa công bố cơng trình tác giả khác - Các thơng tin trích dẫn cụ thể, có nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Đặng Thị Mai Lan Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ii LỜI CẢM ƠN Trong q trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp-chuyên ngành Thú y, tơi ln nhận giúp đỡ tận tình, q báu nhà trường địa phương Nhân dịp hoàn thành luận văn xin trân trọng bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc tới: Lãnh đạo Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Lãnh đạo Viện thú y Quốc gia, Bộ môn Vi trùng-Viện Thú y Quốc gia, Khoa Chăn nuôi- Thú y Khoa Sau đại học Trường Đại học Nông Lâm Thái Ngun, tồn thể thầy giáo nhà trường Đặc biệt xin trân trọng cảm ơn quan tâm, giúp đỡ thầy giáo hướng dẫn: PGS.TS Cù Hữu Phú, PGS.TS Nguyễn Quang Tuyên trực tiếp hướng dẫn giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Nhân dịp tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới gia đình, bạn bè, đồng nghiệp động viên, chia sẻ khuyến khích tơi q trình học tập nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn trước giúp đỡ quý báu Thái Nguyên, tháng 10 năm 2010 Đặng Thị Mai Lan Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iii MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục chữ viết tắt luận văn vii Danh mục bảng số liệu viii Danh mục hình ix MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài NỘI DUNG Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Nguyên nhân chủ yếu bệnh tiêu chảy dê 1.2 Vi khuẩn E.coli bệnh tiêu chảy dê vi khuẩn E.coli gây 1.3 Vi khuẩn Clostridium perfringens bệnh tiêu chảy dê vi 13 khuẩn C.perfringens gây 1.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 19 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nước 19 1.4.2 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 23 1.5 Biện pháp phòng trị bệnh tiêu chảy dê 25 1.5.1 Biện pháp phòng bệnh 26 1.5.1.1 Phòng bệnh biện pháp quản lý chăm sóc ni dưỡng 26 1.5.1.2 Một số sinh chế phẩm dùng phòng bệnh tiêu chảy gia súc 27 1.5.1.3 Một số loại vacxin phòng tiêu chảy vi khuẩn gây 28 1.5.2 Biện pháp điều trị tiêu chảy gia súc 29 1.5.2.1 Những nguyên tắc chung 29 1.5.2.2 Một số loại kháng sinh hóa dược dùng điều trị tiêu chảy gia súc 30 1.5.2.3 Điều trị nước, điện giải tiêu chảy gia súc 31 1.5.2.4 Một số thuốc bảo vệ niêm mạc ruột 32 1.5.2.5 Một số loại thuốc thường dùng điều trị tiêu chảy gia súc 33 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn iv Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 35 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 35 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 35 2.1.3 Thời gian thực đề tài 35 2.2 Vật liệu dùng nghiên cứu 35 2.2.1 Mẫu nghiên cứu 35 2.2.2 Mơi trường, hố chất, dụng cụ máy móc động vật thí nghiệm 35 2.3 Nội dung nghiên cứu 36 2.3.1 Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiêu chảy dê nuôi tỉnh 36 Thái Nguyên với yếu tố: mùa vụ, lứa tuổi tới tỷ lệ mắc bệnh chết dê 2.3.2 Xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn E coli, C perfringens 36 dê bị tiêu chảy 2.3.3 Xác định độc lực khả sản sinh độc tố chủng 37 vi khuẩn: E coli, C perfringens phân lập 2.3.4 Biến đổi bệnh lý dê bị tiêu chảy 37 2.3.5 Xác định tính mẫn cảm chủng vi khuẩn phân lập 37 với số loại kháng sinh 2.3.6 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy cho dê 37 2.4 Phương pháp nghiên cứu 37 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu dịch tễ 37 2.4.2 Phương pháp nghiên cứu phân lập vi khuẩn 38 2.5 Giám định đặc tính sinh vật hoá học vi khuẩn 41 2.6 Phương pháp xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn phân 43 lập 2.6.1 Xác định khả dung huyết vi khuẩn E.coli phản ứng 43 gây dung huyết thạch máu cừu 5% 2.6.2 Xác định khả dung huyết vi khuẩn C.perfringens phản ứng gây dung huyết thạch máu cừu 5% Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 43 v 2.7 Phương pháp xác định độc lực chủng vi khuẩn chuột 43 2.8 Phương pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh vi 44 khuẩn phân lập 2.9 Phương pháp thử nghiệm phác đồ điều trị dê bị tiêu chảy nuôi 45 Thái Nguyên 2.10 3.1 Phương pháp xử lý số liệu 46 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 47 Kết nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy dê 47 tỉnh Thái Nguyên 3.1.1 Tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện, thành thị 47 địa bàn tỉnh Thái Nguyên 3.1.2 Tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi 50 3.1.3 Tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy mùa vụ năm 53 3.1.4 Các triệu chứng, bệnh tích đại thể chủ yếu dê mắc bệnh tiêu chảy 58 3.2 Kết phân lập vi khuẩn E.coli, C perfringens từ dê tiêu chảy 62 dê bình thường 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E.coli, C perfringens từ phân dê nuôi 62 địa bàn nghiên cứu 3.2.2 Kết phân lập vi khuẩn E.coli, C perfringens từ phủ tạng 64 dê chết tiêu chảy 3.2.3 Kết xác định số lượng vi khuẩn E coli, C perfringens 66 phân dê bệnh dê bình thường 3.2.4 Kết giám định đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn 70 E.coli, C perfringens phân lập từ dê tiêu chảy 3.2.4.1 Vi khuẩn E coli 70 3.2.4.2 Vi khuẩn C perfringens 71 3.2.5 Kết xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli 72 C perfringens 3.2.5.1 Kết xác định khả gây dung huyết chủng E coli 72 C.perfringens phân lập 3.2.5.2 Kết xác định độc lực vi khuẩn phân lập Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên 74 http://www.lrc-tnu.edu.vn vi 3.3 Kết xác định tính mẫn cảm chủng vi khuẩn phân lập 76 với số loại kháng sinh hoá dược 3.3.1 Vi khuẩn E coli 76 4.3.2 Vi khuẩn C.perfringens 78 3.4 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy cho dê 79 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 82 Kết luận 82 Đề nghị 83 TÀI LIỆU THAM KHẢO 84 I Tài liệu Tiếng Việt 84 II Tài liệu dịch 89 III Tài liệu tiếng nước ngồi 89 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HOẠ CỦA ĐỀ TÀI Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 92 vii DANH MỤC NHỮNG CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN E.coli Escherichia coli C.perfringens Clostridium perfringens ST Stabale Heat toxin LT Labale Heat toxin CFU Colonial Forming Unit TB Trung bình SL VK/gr Số lượng vi khuẩn/gram ∑VK/gr Tổng số vi khuẩn/gram TC/BT Tiêu chảy/Bình thường Tuổi g/s Tuổi gia súc PL Phú Lương ĐT Đại Từ ĐH1 Định Hoá ĐH2 Đồng Hỷ SC Sông Công PY Phổ Yên Độ PLCK Độ pha loãng canh khuẩn Tiêm Pm Tiêm phúc mạc Tiêm Nb Tiêm nội bì KH Ký hiệu XĐ Xác định Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn viii DANH MỤC CÁC BẢNG SỐ LIỆU Bảng Trang 3.1: Kết xác định tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy 3.2: Kết xác định tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy 48 51 lứa tuổi 3.3: Kết xác định tỷ lệ dê tiêu chảy mùa vụ năm 54 3.4: Kết xác định tỷ lệ dê chết tiêu chảy mùa vụ năm 57 3.5: Các triệu chứng dê mắc bệnh tiêu chảy 59 3.6: Các bệnh tích đại thể dê mắc bệnh tiêu chảy 61 3.7: Kết phân lập vi khuẩn E.coli, C Perfringens từ phân dê khoẻ dê bị tiêu chảy 63 3.8 Kết phân lập vi khuẩn E.coli, C perfringens từ phủ tạng 65 dê chết tiêu chảy 3.9 Biến động số lượng vi khuẩn E coli, C perfringens phân dê bệnh dê bình thường 67 3.10 Đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn E coli phân lập từ 70 dê tiêu chảy 3.11 Đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn C Perfringens phân lập từ dê tiêu chảy 71 3.12 Xác định khả dung huyết chủng E coli phân lập 72 3.13 Xác định khả dung huyết chủng C.perfringens 73 phân lập 3.14 Kết xác định độc lực chủng E coli phân lập 74 chuột bạch 3.15 Kết xác định độc lực chủng C.perfringens phân lập 75 chuột bạch 3.16 Kết xác định mẫn cảm chủng E coli phân lập 77 với kháng sinh hoá dược 3.17 Kết xác định mẫn cảm chủng vi khuẩn 78 C perfringens phân lập với kháng sinh hoá dược 3.18 Hiệu số phác đồ điều trị tiêu chảy dê 80 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 88 35 Nguyễn Như Thanh (1974), “Giáo trình thực tập vi sinh vật thú y”, Trường Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội, tr 85 36 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), “Vi sinh vật thú y”, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr.81-85 37 Tống Vũ Thắng, Đậu Ngọc Hào (2008), “Nghiên cứu mối quan hệ ô nhiễm nấm mốc, E.coli, Salmonella, C.perfringens thức ăn hồn hợp tỷ lệ lợn bị tiêu chảy mùa khô, mùa mưa sở chăn nuôi lợn sinh sản thành phố Hồ Chí Minh”, Tạp chí khoa học Kỹ thuật Thú y tập XV (1), tr.54-61 38 Lê Văn Tạo (2006), “Bệnh vi khuẩn Escherichia coli gây lợn”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y tập XIII (3) 39 Nguyễn Thiên Thu, Nguyễn Văn Quang, Đào Duy Hưng, Lê Lập, Lê Thị Thi, Lê Thị Mỹ, Nguyễn Thị Xuân Hằng (2002), “Nghiên cứu sản xuất kháng thể khác lồi từ lịng đỏ trứng gà phòng bệnh ỉa chảy E.coli Salmonella lợn con”, Các báo cáo khoa học trình bày Hội nghị Khoa học Bộ Nông nghiệp PTNT, Hà Nội 40 Võ Thành Thìn, Lê Đình Hải, Vũ Khắc Hùng (2010), “Khả kháng kháng sinh vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn mắc bệnh tiêu chảy”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y tập XVII (5), tr.5-10 41 Nguyễn Quang Tính, Hồng Đạo Phấn, Nguyễn Ngọc Nhiên Cù Hữu Phú (2004), “Xác định số lượng số đặc tính sinh hố học vi khuẩn Clostridium perfringens đường tiêu hoá dê khoẻ mạnh dê tiêu chảy”, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nông thôn (41) (Tháng 5/2004), tr 613-615 42 Nguyễn Quang Tính (2004), “Xác định vai trị vi khuẩn Clostridium perfringens hội chứng tiêu chảy dê”, Tạp chí chăn ni (11), tr 23-25 43 Nguyễn Quang Tính, Nguyễn Ngọc Nhiên, Hồng Đạo Phấn Cù Hữu Phú (2005), “Nghiên cứu số đặc tính sinh hoá học vi khuẩn Clostridium perfringens đường tiêu hoá bê, nghé khoẻ mạnh tiêu chảy”, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nơng thơn (Tháng 10/2005), tr 64-65 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 89 44 Nguyễn Quang Tính (2007), “Xác định vai trị gây bệnh đường tiêu hố vi khuẩn C.perfringens trâu, bị dê tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị”, Luận án Tiến sĩ Nơng nghiệp 45 Nguyễn Quang Tính, Nguyễn Viết Không (2009), “Kết nghiên cứu xác định type vi khuẩn C.perfringens gây bệnh bê nghé phương pháp PCR”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y tập XVI (5), tr.39-43 46 Tạ Thị Vịnh, Đặng Khánh Vân (1994), “Thử nghiệm chế phẩm huyết siêu mẫn lợn sinh để nâng cao khả phịng bệnh phân trắng lợn con”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y (3), tr 63-66 II Tài liệu dịch 47 Archie H (2001), “Sổ tay dịch bệnh động vật”, Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tâm dịch, Nxb Bản đồ, tr 207-214 III Tài liệu tham khảo nƣớc 48 Barnes D.M Scrensin D.K (1975), Salmonellosis Discases of Sune Fourth Edition, pp 554 - 564 49 Bormann E, Gunther H, Kohler H (2002), Effect of C.perfringens epsilon toxin on MDCK cells, Federal Institute for Health Protection of consumers and Veterinary Medicine, Division 4, Jena, Gemany (1) 50 Cadman H, Kelly P, Zhou R, Davelaar F and Mason P (1994), A serosurvey using enzyme-linked immunosorbent assay for antibodies against poultry pathogens in ostriches (Struthio camelus) from Zimbabwe Avian Diseases, pp.621-625 51 Eisenstein T.K, Angerman C.R, Odonell S, Specter S, Fiedman H (1980), Relationship between protective immuity, mitogenic and E.coli activation by Salmonella vaccines, Plenum publising coporation, pp 39-50 52 Evan.D.G, Evans.D.J, Gorbach.S.L (1973), Production of Vascular permeability factor by enterotoxigenic Escherichia coli isolated from man Infect Immun V8,pp.725-730 53 Fairbrother, J.M (1992), Entenc colibacillosis Doscares of Swines IOWA State University press/a mess, IOWA, th Edition 1992, pp 489 - 497 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 90 54 Garmory HS, Chanter N, French NP, Bueschel D, Songer JG (2000), Occurrence of C.perfringens beta 2-toxin amongst animals, deteminded using genoyping and subtyping PCR assays, Department of Biomedical Sciences, Defence Evaluation and research Agency, CBD Porton Down, Salisbury, Wiltshire SP4 OJQ, UK 55 Hatheway CL (1994), Toxigenic clostridia Clin Microbiol Rev 1990; (1): pp 66-98 56 Hogh.p (1974), Poreine insectious necrotizing enteritis cause by C.perfringens, Thesis, Copenhagen 57 Jacob.A.A.c and de Graaf.K.F (1985), Production of K88, K99 and F41 fimbriae in relation to growth phage and rapid procedure for adhesion purinfication FEMS Micribiol, lett (26), pp.15-19 58 Prescott J.F, Desmond Baggot J, Veterinary Antimicrobial Therapy Guide 93/94 Alfasan group of companies and Faculty of Veterinary Medicine Utrecht-The Netherlands Manufactures of Veterinary Medicines Iowa State University Press 59 Uzal F.A, Kelley W.R (1998), Enterotoxaemia in goats, Vet Res Comun, 20 (6), pp 481-492 60 Mariano E, Fernandez Miyakawa, Julian Saputo, Judy St.Leger, Birgit Puschner, Derek J Fisher, Bruce A McClane, Fancisco A.Uzal (2007), ”Necrotizing enterocolitis and death in a goad kid associated with enterotoxin (CPE) - producing Clostridium perfringens type A”, Can Vet J; 48, pp 1266-1269 61 NCCLS (1999), Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; Approved standard pennisylvania, USA: The national committee for climical Laborastory standards 62 Niilo.L, Harryes W.N, and Jones G.A (1874), C.perfringens type C in Haemorhagic entero toxemia of neonatal calvesin Alberta Can Vet.J.15 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 91 63 Quinn P.J, Carter M.E, Markey B.K, Carter G.R (1994), Clinical Veterinary Microbiology, pp 190-206 64 Radostits.O.M cộng (1997), Role of fimbriae F18 for actively acquired immunity against porcine enterotoxigenic Escherichia coli, Vet Microbiol, pp133 65 Sanderfur.P.D, Peterson.J W (1997), Newtralization of Salmonella toxin-induced of Chinese-hamster-ovary cells cholerae antitoxin, Ibih V 15, pp 972-988 66 Smith, H.W (1963), "The haemolysisns of Escherichia coli", J Pathol Bacterial, pp 197 - 212 67 Smith, H.W., Halls, S (1967), "The transmissible nature of the genetic factor in E coli that controls hemolysin production", J.Gen.Microbiol., (47), pp 153 -161 68 Songer JG, Miskimmins DW (2004), “Clostridium perfringens type E enteritis in calves: two cases and a brief review of the literature Anaerobe; 10 (4): pp.239-242 69 Taylor D.J, Bergeland M.E (1992), Clostridial infectious diseases of swine, IOWA State University Press/AMES U.S.A 7thEdition, pp 454-468 70 Tammy Dray (2004), “Clostridium perfringens type A and β2 toxin associated with enterotoxemia in a 5-week-old goad”, Can Vet J; 45, pp 251-253 71 Vaikosen.E.S, Ikhatua.U.J (2005), “Detection of higth level of enterotoxin of Clostridium perfringens types C and D in small ruminants in Nigeria”, Small Ruminants Research 58, pp 287-290 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 92 MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HOẠ CỦA ĐỀ TÀI Hình 3.6: Ảnh đàn dê ni huyện Đại Từ - tỉnh Thái Nguyên Hình 3.7: Ảnh đàn dê ni huyện Hình 3.8: Ảnh điều tra, theo dõi Phú Lƣơng - tỉnh Thái Nguyên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên dê mắc bệnh tiêu chảy huyện Định Hoá - tỉnh Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 93 Hình 3.9: Ảnh dê bị mắc bệnh tiêu chảy Hình 3.10: Ảnh trình thực tập Phịng thí nghiệm Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Đặt vấn đề Bệnh tiêu chảy bệnh gây thiệt hại lớn kinh tế cho người chăn nuôi, làm giảm số lượng chất lượng gia súc nói chung, dê nói riêng, bệnh xảy lứa tuổi dê Có nhiều yếu tố bất lợi như: thay đổi đột ngột điều kiện thời tiết khí hậu, vệ sinh chuồng trại, thức ăn, nước uống không đảm bảo vệ sinh thú y, loại vi khuẩn: Escheria coli hay vi khuẩn yếm khí Clostridium perfringens type A, C với vi khuẩn khác Salmonella, Lawsonia in terillulavis, Surpallina pilo sicoli Những virus gây tiêu chảy Rotavirus, viêm dày ruột truyền nhiễm loại ký sinh trùng gây bệnh tiêu chảy như: cầu trùng, giun đũa Bệnh tiêu chảy xảy quanh năm nhiều vào cuối Đông sang Xuân cuối Xuân sang Hè, sau đợt mưa khí hậu thay đổi đột ngột đồng thời có xuất vi khuẩn như: E.coli, C perfringens vai trò gây bệnh tiêu chảy dê gây chết cho dê theo thể nhiễm trùng, bại huyết Trên sở cần phải xây dựng phác đồ điều trị bệnh thích hợp hạn chế thấp thiệt hại bệnh gây nên Xuất phát từ lý tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn Escheria coli Clostridium perfringens gây tiêu chảy dê nuôi Thái Nguyên biện pháp phòng trị” Đối tượng, nội dung phương pháp nghiên cứu 2.1 Đối tượng nghiên cứu - Dê lứa tuổi, khỏe mạnh mắc tiêu chảy nuôi Thái Nguyên - Bệnh phẩm dê chết ốm mổ khám 2.2 Nội dung nghiên cứu 2.2.1 Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiêu chảy dê nuôi tỉnh Thái Nguyên với yếu tố: mùa vụ, lứa tuổi tới tỷ lệ mắc bệnh chết dê 2.2.2 Các triệu chứng bệnh tích chủ yếu dê mắc bệnh tiêu chảy 2.2.3 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy cho dê 2.3 Vật liệu dùng nghiên cứu 2.3.1 Mẫu nghiên cứu - Gan, lách, hạch màng treo ruột, hạch hàm, chất chứa ruột non dê - Phân dê khỏe mạnh tiêu chảy lấy trực tiếp từ trực tràng 2.3.2 Mơi trường, hố chất, dụng cụ máy móc động vật thí nghiệm 2.3.3 Dụng cụ, máy móc thí nghiệm Gồm trang thiết bị, máy móc, dụng cụ phịng thí nghiệm - Bộ đồ mổ phịng thí nghiệm, ống nghiệm đựng dung dịch bảo quản mẫu - Tủ lạnh thường (00C-40C) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn - Tủ ấm 370C, tủ CO2, buồng cấy vơ trùng, bình hút chân khơng - Buồng hấp ướt (Autoclave), máy lắc, kính hiển vi, cân điện tử - Các dụng cụ cần thiết: cốc đong, hộp lồng, ống nghiệm loại, phiến kính, lamen, đèn cồn, que cấy, pipetman, giá đựng ống nghiệm 2.3.4 Mơi trường, hóa chất - Các loại mơi trường, hố chất dùng ni cấy, phân lập giám định đặc tính sinh vật hoá học vi khuẩn E coli, C perfringens - Một số loại kháng sinh, Giấy tẩm kháng sinh loại hãng OXOID sản xuất - Kháng huyết chuẩn dùng định type vi khuẩn phân lập 2.3.5 Động vật thí nghiệm Chuột bạch khỏe mạnh, khơng mắc bệnh truyền nhiễm có trọng lượng 18 - 20 g/con 2.4 Phương pháp nghiên cứu Sử dụng phương pháp nghiên cứu dịch tễ học mô tả (Deceriptic study) dịch tễ học phân tích (Amaleytu study), Nguyễn Như Thanh (2001), Nguyễn Văn Thiện (2002) - Chọn mẫu điều tra theo dõi: Đến hộ gia đình chăn ni quan sát, theo dõi tình trạng tiêu chảy dê lấy mẫu - Thử nghiệm phác đồ điều trị đàn dê mắc bệnh Kết nghiên cứu thảo luận 3.1 Kết nghiên cứu đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy dê tỉnh Thái Nguyên 3.1.1 Tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy số huyện, thành thị địa bàn tỉnh Thái Nguyên Bảng 3.1 : Kết xác định tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy Huyện, Tổng số dê Tỷ lệ tiêu chảy Tỷ lệ chết tiêu chảy điều tra Số lượng (con) (con) Phú Lương 164 16 9,76 11 6,71 Đại Từ 258 27 10,47 21 8,14 Định Hoá 196 17 8,67 13 6,63 Đồng Hỷ 135 13 9,63 11 8,15 Sông Công 87 8,05 2,30 Phổ Yên 62 8,06 1,61 Tính chung 902 85 9,42 59 6,54 thành thị Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Tỷ lệ (%) Số lượng (con) Tỷ lệ (%) http://www.lrc-tnu.edu.vn Qua bảng 3.1 ta thấy: tỷ lệ dê mắc tiêu chảy huyện, thành thị thuộc tỉnh Thái Nguyên tương đối cao Trong 902 dê điều tra có tới 85 dê mắc bệnh tiêu chảy chiếm tỷ lệ 9,42%, số lượng dê chết mắc bệnh tiêu chảy 59 chiếm tỷ lệ 6,54% Trong huyện Đại Từ có tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy nhiều chiếm 10,47% số lượng dê chết tiêu chảy chiếm 8,14% Thấp thị xã Sơng Cơng có tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy chiếm 8,05%; tỷ lệ chết chiếm 2,30% huyện Phổ Yên có tỷ lệ dê mắc bệnh chiếm 8,06%; tỷ lệ chết chiếm 1,61% Các huyện khác dê mắc bệnh tiêu chảy chiếm tỷ lệ 8,67- 9,63% Sở dĩ đa số hộ chăn nuôi dê tỉnh Thái Nguyên gặp số hạn chế sau: - Do điều kiện thời tiết thay đổi bất thường, khắc nghiệt - Thức ăn, nước uống lấy từ nguồn tự nhiên không đảm bảo vệ sinh - Các hộ chăn nuôi hầu hết gia đình có hồn cảnh khó khăn, phải vay vốn để sản xuất Do điều kiện sở vật chất sơ sài, công tác vệ sinh chuồng trại chưa đảm bảo - Đặc biệt người dân chưa nắm biện pháp phòng chống bệnh tật điều trị bệnh triệt để Tuy nhiên, so với kết điều tra Nguyễn Quang Tính năm 2003 tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy chiếm 13,38%; tỷ lệ dê chết chiếm 8,59%; năm 2004 tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy chiếm 13,58%; tỷ lệ dê chết chiếm 11,26%; năm 2005 tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy chiếm 14,41%; tỷ lệ dê chết chiếm 9,00% [ ] cho thấy tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy dê chết mắc bệnh giảm rõ rệt Mà yếu tố quan trọng tác đọng tích cực tới thành vai trò ngành Thú y, Thú y viên sở Các kỹ thuật chăn ni, phịng bệnh phổ biến tiếp thu rộng rãi 3.1.2 Tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy chết tiêu chảy theo lứa tuổi Lứa tuổi gia súc có liên quan chặt chẽ đến độ mẫn cảm với yếu tố gây bệnh Các gia súc non giai đoạn bú sữa cịn nhỏ máy tiêu hố chưa hoàn thiện mặt cấu tạo chức hoạt động Dê sinh, cỏ tổ ong chiếm khoảng 30% dung tích dày, múi khế sách chiếm khoảng 70% Mặt khác giai đoạn bú sữa dê chịu ảnh hưởng chế độ dinh dưỡng, phần ăn mẹ, mẫn cảm với mầm bệnh bên ngồi mơi trường đặc biệt bệnh đường tiêu hoá Qua điều tra, theo dõi chúng tơi có kết tỷ lệ dê tiêu chảy dê chết tiêu chảy lứa tuổi Kết thể qua bảng 4.2 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Bảng 3.2: Kết xác định tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy lứa tuổi Huyện Phú Lương Đại Từ Định Hoá Đồng Hỷ Sông Công Phổ Yên Tuổi dê Số dê điều tra Dê Dê trưởng thành Dê già Dê Dê trưởng thành Dê già Dê Dê trưởng thành Dê già Dê Dê trưởng thành Dê già Dê Dê trưởng thành Dê già Dê Dê trưởng thành Dê già 74 35 55 111 58 89 92 41 63 60 29 46 39 19 29 32 22 408 190 304 Dê Tính chung Dê trưởng thành Dê già Số dê tiêu chảy 10 16 12 56 20 Tỷ lệ (%) 13,51 5,71 7,27 14,41 6,90 7,87 13,04 4,88 4,76 15,00 3,45 6,52 12,82 6,90 12,50 4,55 13,73 4,74 6,58 Số dê chết tiêu chảy 15 1 43 12 Tỷ lệ (%) 8,11 3,64 13,51 5,17 5,62 9,78 2,44 1,59 10,00 4,35 10,26 3,45 9,38 4,55 10,54 2,11 3,95 3.1.3 Tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy mùa vụ năm Bảng 3.3: : Kết xác định tỷ lệ dê tiêu chảy chết tiêu chảy mùa vụ năm Mùa vụ Tổng số dê Tỷ lệ tiêu chảy Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Tỷ lệ chết tiêu chảy http://www.lrc-tnu.edu.vn điều tra Số lượng (con) (con) Tỷ lệ (%) Số lượng (con) Tỷ lệ (%) Xn Hạ Thu Đơng Tính chung 3.1.4 Các triệu chứng, bệnh tích chủ yếu dê tiêu chảy Bảng 3.4: Các triệu chứng, bệnh tích dê tiêu chảy Các biểu lâm sàng bệnh tích Số dê Số dê có theo dõi biểu (con) (con) Tỷ lệ (%) Triệu chứng Bệnh tích Dê ăn, buồn bã, đau bụng Nhiệt độ thể tăng cao Giảm sản lượng sữa Dê giảm thể trọng Trợn, chớp mắt liên tục, co giật, cong lưng, nghiến răng, chảy nước dãi Phân lúc đầu nhão, sền sệt, sau trở nên lỏng nước, có mùi thối Ỉa chảy phân lỏng dính lẫn bọt, máu Máu loãng từ phủ tạng chảy nhiều Phân dính hậu mơn, có mùi thối khắm Dạ dày xuất huyết lấm Xuất huyết phần không tràng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Thận bể thận xuất huyết Gan sưng cứng to bình thường Tim sưng, xuất huyết, có bị nhão Phổi có tượng xuất huyết Trên thành ruột non thành bụng cắt có tượng khí thũng Màng treo ruột có nhiều hạch bạch huyết màu đỏ Xác chết gầy bị nước, chất điện giải bị nhiễm độc 4.1.5 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy cho dê Trên sở nghiên cứu tìm vai trị gây bệnh vi khuẩn, tiến hành thử nghiệm số phác đồ điều trị dê tiêu chảy Trong phác đồ điều trị, có kết hợp loại kháng sinh, chất điện giải thuốc trợ sức trợ lực Kết số phác đồ dùng điều trị dê tiêu chảy trình bày qua bảng 4.5 Bảng 3.5 Hiệu số phác đồ điều trị tiêu chảy dê Phác đồ Loại thuốc điều trị hoá dược I Phác đồ II Phác đồ III Phác đồ Oxytetracycline B.Complex Orezol Enrofloxacin B.Complex Orezol Colistin B.Complex Orezol Cách dùng liều lượng Tiêm bắp 1ml/10kg TT Tiêm bắp 1ml/10kg TT Uống 100gr/25kgTT Tiêm bắp 1ml/10kg TT Tiêm bắp 1ml/10kg TT Uống 100gr/25kgTT Tiêm bắp 1ml/10kg TT Tiêm bắp 1ml/10kg TT Uống 100gr/25kgTT Thời gian điều Số dê Số dê Tỷ lệ điều khỏi trị bệnh 3-5 ngày, lần/ngày 15 13 86,67 3-5 ngày, lần/ngày 15 12 80,00 3-5 ngày, lần/ngày 15 12 80,00 trị (ngày) (%) Qua bảng 3.5, với phác đồ dùng điều trị ta thấy có chênh lệch định phác đồ Kết điều trị phác đồ I với 13/15 dê khỏi bệnh Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn chiếm tỷ lệ 86,67% Phác đồ II phác đồ III có số dê khỏi bệnh 12/15 chiếm tỷ lệ 80,00% Như vậy, sở phác đồ điều trị sử dụng kháng sinh, chất điện giải Orezol thuốc trợ sức trợ lực có tác dụng rõ rệt việc điều trị bệnh tiêu chảy dê Từ phác đồ điều trị trên, xác định hiệu điều trị bệnh cao hiệu phác đồ I Do sử dụng phác đồ để điều trị gia súc mắc bệnh tiêu chảy, đặc biệt tiêu chảy vi khuẩn C.perfringens gây Kết luận, tồn kiến nghị Kết luận Từ kết điều tra nghiên cứu chúng tơi có số kết luận sau: - Tỷ lệ dê mắc bệnh tiêu chảy địa bàn nghiên cứu tương đối cao (%) chủ yếu tập trung lứa tuổi sơ sinh - tháng tuổi - Với tỷ lệ C perfringens đường ruột dê khỏe mạnh dê tiêu chảy 100% ta cho vi khuẩn ln tồn đường tiêu hóa dê cần gặp điều kiện thuận lợi chúng trỗi dậy tăng sinh, tiết độc tố, gây bệnh Kiến nghị Do thời gian có hạn nên nội dung nghiên cứu cịn chưa nhiều, để có kết luận xác cần phải tiếp tục nghiên cứu nhiều TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tham khảo nước Đặng Xuân Bình, Trần Thị Hạnh, Đậu Ngọc Hào (2001) “Kết phân lập xác định vai trò gây bệnh vi khuẩn Escherichia coli kết hợp với vi khuẩn yếm khí Clostridium perfringins bệnh phân trắng lợn trại giống Phú Lâm” Tạp chí Khoa học kỹ thuật Thú y số trang 19 - 23 Lê Minh Chí (1995) "Bệnh tiêu chảy gia súc", Tài liệu Cục thú y Trung ương Đào Trọng Đạt (1996), “Bệnh lợn ỉa phân trắng”, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 4.Trần Thị Hạnh cộng (1996) “Viêm ruột hoại tử hươu nai C.perfringens kết phòng bệnh giải độc tố” (TOXOLD), Báo cáo KHKT - Thú y 3/1996 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Lâm Thị Thu Hương (2004) “Tình hình nhiễm số lồi cầu trùng đường ruột lợn”, khoa học kỹ thuật thú y, Tập XI, số trang 26 - 32 Nguyễn Thị Kim Lan, Lê Minh, Nguyễn Thị Ngân “Vai trị ký sinh trùng đường tiêu hố hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa Thái Nguyên” Tạp chí KHKT - Thú y - Tập XIII - Số - 2006 Sử An Ninh (1993), “Kết bước đầu tìm hiểu nhiệt độ, độ ẩm thích hợp phịng bệnh lợn ỉa phân trắng”, Kết nghiên cứu khoa học, khoa Chăn nuôi thú y, Đại học Nông nghiệp I Hà Nội, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, tr 43 - 48 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Phạm Ngọc Thạch (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy gia súc”, Giáo trình bệnh nội khoa gia súc, Hà Nội, tr 200 - 210 Nguyễn Vĩnh Phước (1980), “Vi trùng học thú y”, Nxb Đại học trung học chuyên nghiệp 10 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh, Đỗ Ngọc Thuý (2000) “Kết phân lập vi khuẩn E.coli Salmonella lợn mắc bệnh tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh hố chủng vi khuẩn phân lập biện pháp phòng trị”, kết nghiên cứu khoa học kỹ thuật thú y, 1996 2000, NXB Nông nghiệp, Hà Nội tr 171 - 176 11 TS Nguyễn Văn Quang GS TSKH Đãi Duy Ban, Th.S Phạm Công Hoạt, HS Bái Thị Hằng Nga (2002) “Vi khuẩn E.coli - Cơ chế sinh bệnh số biện pháp phòng trị bệnh cho gia súc, gia cầm” Tuyển tập khoa học đại chúng phục vụ đại hố nơng nghiệp phát triển nơng thơn, - Nhà xuất Nông nghiệp - 2002 trang 23 - 27 12 PGS TS Phạm Văn Quân, PGS TS Nguyễn Thị Nội, PGS TS Lê Văn Tạo, TS Nguyễn Văn Lãm, TS Nguyễn Ngọc Nhiên, TS Cù Hữu Phú, BSTY Hoàng Bùi Tiến “Hành trình tìm vaccin nhà khoa học thú y Nhà nước trao giải cụm công trình” (nghiên cứu phát triển đổi cơng nghệ chế tạo vaccin vi khuẩn phịng bệnh, đóng dấu, tụ huyết trùng, tiêu chảy lợn nhóm nhà khoa học Viện Thú y Trung ương) 13 Nguyễn Như Thanh (1974), Giáo trình thực tập vi sinh vật thú y, Trường Đại học Nông nghiệp I Hà Nội, tr 85 14 Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật thú y, NXB Nông nghiệp, Hà Nội 15 Lê Văn Tạo “Bệnh vi khuẩn Escherichia coli gây lợn” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y - Tập XIII - số - 2006 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 16 Nguyễn Quang Tính, Hoàng Đạo Phấn, Nguyễn Ngọc Nhiên Cù Hữu Phú (2004), Xác định số lượng số đặc tính sinh hoá học vi khuẩn Clostridium perfringens đường tiêu hoá dê khoẻ mạnh dê tiêu chảy, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nơng thơn (41) (Tháng 5/2004), tr 613-615 17 Nguyễn Quang Tính (2004), Xác định vai trò vi khuẩn Clostridium perfringens hội chứng tiêu chảy dê, Tạp chí chăn ni, số 11 năm 2004, tr 23-25 18 Nguyễn Quang Tính, Nguyễn Ngọc Nhiên, Hoàng Đạo Phấn Cù Hữu Phú (2005), Nghiên cứu số đặc tính sinh hố học vi khuẩn Clostridium perfringens đường tiêu hoá bê, nghé khoẻ mạnh tiêu chảy, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nông thôn (Tháng 10/2005), tr 64-65 19 Trần Thị Hạnh cộng (1996), Viêm ruột hoại tử hươu nai C.perfringens kết phòng bệnh giải độc tố (TOXOLD), Báo cáo KHKT Thú y 3/1996 II Tài liệu tham khảo nước 20 Fairbrother, J.M Entenc colibacillosis Doscares of Swines IOWA State University press / a mess, IOWA, th Edition 1992 P 489 - 497 21 Barnes D.M Scrensin D.K Salmonellosis Discases of Sune Fourth Edition 1975, p 554 - 564 22 Hogh.p: Poreine insectious necrotizing enteritis cause by C.perfringens, Thesis, Copenhagen, 1974 23 Smith, H.W (1963), "The haemolysisns of Escherichia coli", J Pathol Bacterial, pp 197 - 212 24 Smith, H.W., Halls, S (1967), "The transmissible nature of the genetic factor in E coli that controls hemolysin production", J.Gen.Microbiol., (47), pp 153 -161 25 Niilo.L, Harryes W.N, and Jones G.A: C.perfringens type C in Haemorhagic entero toxemia of neonâtl calvesin Alberta Can Vet.J.15,1874 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn