Xác định một số đặc tính sinh học của vi khuẩn escherichia coli trong hội chứng tiêu chảy ở ngựa bạch nuôi tại huyện phú bình, tỉnh thái nguyên và biện pháp điều trị

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VŨ THỊ ÁNH HUYỀN XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở NGỰA BẠCH NI TẠI HUYỆN PHÚ BÌNH, TỈNH THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên, năm 2012 Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VŨ THỊ ÁNH HUYỀN XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở NGỰA BẠCH NI TẠI HUYỆN PHÚ BÌNH, TỈNH THÁI NGUN VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Quang Tuyên Thái Nguyên, năm 2012 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ quý báu thầy cô giáo khoa Sau Đại học, khoa Chăn nuôi Thú y, viện Khoa học sống – trƣờng Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, khoa Vi sinh – Bệnh viện Đa khoa Trung ƣơng Thái Nguyên, viện Công nghệ sinh học Hà Nội Bộ môn Vi trùng – Viện Thú y Quốc gia Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn GS.TS Nguyễn Quang Tuyên tạo điều kiện, giúp đỡ tận tình hƣớng dẫn để tơi hồn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn Ban chủ nhiệm Hợp tác xã chăn nuôi ngựa bạch huyện Phú Bình, tỉnh Thái Ngun; hộ chăn ni ngựa bạch thuộc xã Thanh Ninh, Kha Sơn Dƣơng Thành Tôi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới ngƣời thân gia đình, bạn bè, đồng nghiệp ln động viên giúp đỡ tơi q trình học tập nhƣ trình thực luận văn Thái Nguyên, tháng 10 năm 2012 Tác giả luận văn Vũ Thị Ánh Huyền LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn hoàn toàn trung thực, chưa sử dụng cho bảo vệ học vị Mọi thông tin, tài liệu trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Thái Nguyên, tháng 10 năm 2012 Tác giả luận văn Vũ Thị Ánh Huyền MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Chƣơng 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 MỘT SỐ HIỂU BIẾT CHUNG VỀ HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY 1.1.1 Khái niệm hội chứng tiêu chảy 1.1.2 Một số nguyên nhân gây tiêu chảy gia súc 1.1.3 Bệnh lý lâm sàng hội chứng tiêu chảy 10 1.1.4 Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy gia súc 13 1.1.5 Biện pháp phòng trị tiêu chảy cho gia súc 15 1.2 VAI TRÒ CỦA VI KHUẨN E COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY 19 1.2.1 Đặc điểm hình thái, cấu trúc vi khuẩn E coli 20 1.2.2 Đặc tính sinh vật học vi khuẩn E coli 23 1.2.3 Đặc tính gây bệnh vi khuẩn E coli 24 1.2.4 Khả kháng kháng sinh vi khuẩn E coli 30 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƢỚC 31 1.3.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 31 1.3.2 Tình hình nghiên cứu nƣớc 33 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 35 2.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 35 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 35 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 35 2.2 Nội dung nghiên cứu 35 2.2.1 Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ngựa bạch số xã ni huyện Phú Bình, tỉnh Thái Nguyên 35 2.2.2 Phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm ngựa bạch tiêu chảy 35 2.2.3 Xác định số đặc tính sinh học vi khuẩn E coli phân lập đƣợc ngựa bạch 36 2.2.4 Xác định serotype chủng E coli phân lập đƣợc 36 2.2.5 Xác định yếu tố gây bệnh chủng vi khuẩn E coli phân lập đƣợc 36 2.2.6 Xác định độc lực chủng E coli phân lập đƣợc động vật thí nghiệm 36 2.2.7 Xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng E coli phân lập đƣợc 36 2.2.8 Thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh tiêu chảy ngựa bạch 36 2.3 Nguyên vật liệu dùng nghiên cứu 36 2.3.1 Mẫu bệnh phẩm 36 2.3.2 Các loại mơi trƣờng, hố chất 36 2.3.3 Động vật thí nghiệm: 37 2.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 37 2.4.1 Phƣơng pháp điều tra dịch tễ học 37 2.4.2 Thu thập mẫu phân lập vi khuẩn 38 2.4.3 Xác định số lƣợng vi khuẩn E coli gam phân ngựa tiêu chảy ngựa bình thƣờng 40 2.4.4 Phƣơng pháp xác định serotype kháng nguyên O chủng E coli phân lập đƣợc 40 2.4.5 Phƣơng pháp xác định yếu tố gây bệnh chủng E coli phân lập đƣợc 41 2.4.6 Phƣơng pháp xác định độc lực chủng E coli phân lập đƣợc 45 2.4.7 Phƣơng pháp xác định khả mẫn cảm với kháng sinh chủng E coli phân lập đƣợc 46 2.4.8 Thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy ngựa bạch 47 2.4.9 Phƣơng pháp xử lý số liệu 48 Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 49 3.1 Kết nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy ngựa bạch 49 3.1.1 Tỷ lệ ngựa bạch mắc tiêu chảy chết số xã thuộc huyện Phú Bình, tỉnh Thái Nguyên 49 3.1.2 Tỷ lệ ngựa bạch mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 51 3.1.3 Tỷ lệ ngựa bạch mắc tiêu chảy chết theo lứa tuổi 53 3.1.4 Kết điều tra số triệu chứng lâm sàng ngựa bạch tiêu chảy 56 3.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm ngựa bạch tiêu chảy 57 3.2.1 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phân ngựa bạch tiêu chảy phân ngựa bạch bình thƣờng 57 3.2.2 Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu bệnh phẩm ngựa bạch chết tiêu chảy 59 3.2.3 Kết xác định số lƣợng vi khuẩn E coli phân ngựa bạch tiêu chảy ngựa bạch bình thƣờng 61 3.3 Kết xác định số đặc tính sinh học chủng E coli phân lập 63 3.4 Kết xác định serotype kháng nguyên O chủng E coli phân lập đƣợc 64 3.5 Kết xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E coli phân lập đƣợc 67 3.5.1 Kết xác định khả gây dung huyết 67 3.5.2 Kết xác định yếu tố bám dính chủng E coli phân lập đƣợc 68 3.5.3 Kết xác định độc tố đƣờng ruột (Entrotocin) chủng E coli phân lập đƣợc phản ứng PCR 69 3.6 Kết xác định độc lực số chủng E coli phân lập đƣợctrên động vật thí nghiệm 71 3.7 Kết kiểm tra khả mẫn cảm chủng E coli phân lập đƣợc với số loại kháng sinh 73 3.8 Kết số phác đồ điều trị tiêu chảy ngựa bạch 76 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 78 Kết luận 78 Đề nghị 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TRONG LUẬN VĂN AEEC BHI cs EHEC EMB EPEC ETEC HEM LT LT1 LT2 MR NB Nxb PCR SLT ST (a,b) ST1 Stx2e tr TT VP VT2e VTEC : Adhenicia Enteropathogenic Escherichia coli : Brain-heart infusion : Cộng : Entero haemarrhagic : Eosin Methylene Blue Agar : Enteropathogenic Escherichia coli : Enterotoxigenic Escherichia coli : Heamolysin : Heat-Labile toxin : Heat-Labile toxin : Heat-Labile toxin : Methyl Red : Ngựa bạch : Nhà xuất : Polymerase Chain Reaction : Shiga-like toxin : Heat- Slable toxin (a,b) : Heat- Slable : Shiga toxin 2e : trang : Thể trọng : Voges Pros Kaver : Verotoxin 2e : Verotoxigenic Escherichia coli DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Ký hiệu chuỗi ADN cặp mồi dùng để xác định số yếu tố độc lực vi khuẩn APEC kích cỡ sản phẩm sau trình điện di 43 Bảng 2.2: Tiêu chuẩn đánh giá mức độ mẫn cảm kháng kháng sinh theo NCCLS (1999) 47 Bảng 3.1: Tỷ lệ ngựa bạch mắc tiêu chảy chết số xã thuộc huyện Phú Bình, tỉnh Thái Nguyên 49 Bảng 3.2: Tỷ lệ ngựa bạch mắc tiêu chảy chết theo mùa vụ 51 Bảng 3.3: Tỷ lệ ngựa bạch mắc tiêu chảy chết theo lứa tuổi 54 Bảng 3.4: Kết điều tra số triệu chứng lâm sàng ngựa bạch tiêu chảy 56 Bảng 3.5: Kết phân lập vi khuẩn E coli từ mẫu phân ngựa bạch tiêu chảy ngựa bạch bình thƣờng 58 Bảng 3.6: Kết phân lập vi khuẩn E coli từ bệnh phẩm ngựa bạch chết tiêu chảy 59 Bảng 3.7: Kết xác định số lƣợng vi khuẩn E coli có gam phân ngựa bạch tiêu chảy ngựa bạch bình thƣờng 61 Bảng 3.8 Kết xác định số đặc tính sinh hóa chủng E coli phân lập đƣợc 64 Bảng 3.9: Kết quả xác đị nh serotype kháng nguyên O của các chủng vi khuẩn E coli phân lập đƣợc 65 Bảng 3.10: Xác định khả gây dung huyết chủng E coli phân lập đƣợc 67 Bảng 3.11: Kết xác định kháng nguyên bám dính chủng E coli phân lập đƣợc 68 Bảng 3.12: Kết xác định độc tố đƣờng ruột (Entrotocin) chủng vi khuẩn E coli phân lập đƣợc 70 Bảng 3.13: Kết kiểm tra độc lực số chủng E coli chuột bạch 72 Bảng 3.14: Kết xác định tính mẫn cảm với kháng sinh chủng E coli phân lập đƣợc 74 Bảng 3.15: Kết thử nghiệm số phác đồ điều trị tiêu chảy ngựa bạch 77 80 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng Việt Võ Thị Trà An, Đào Thị Phƣơng Lan, Lê Hữu ngọc, Nguyễn Ngọc Tuân (2010), “Đề kháng kháng sinh Escherichia coli phân lập từ vật nuôi diện β-Lactamse phổ rộng (ESBL)”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XVII (2), Tr.42-46 Archie H (2000), Sổ tay dịch bệnh động vật (Phạm Gia Ninh Nguyễn Đức Tâm dịch), NXB Bản đồ - Hà Nội Tr 53, 207 - 214 Đặng Xn Bình, Đỗ Văn Chung (2008), “Đặc tính sinh học vi khuẩn E.coli bệnh phân trắng lợn số tỉnh miền núi phía Bắc”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XV (4), tr 54-59 Lê Minh Chí (1995), “Bệnh tiêu chảy gia súc”, Hội thảo khoa học, Bộ Nông nghiệp công nghiệp thực phẩm, Hà Nội, Tr 20 – 22 Lê Xuân Cƣơng, Nguyễn Thạc Hòa, Nguyễn Thúy Hiên, Lê Văn Bào, Phạm Ngọc Minh (1986), “kết thí nghiệm dùng globulin miễn dịch phịng bệnh phân trắng lợn theo mẹ”, Tạp chí khoa học kỹ thuật Nông nghiệp (1), tr 36-40 Trần Thị Dân (2006), Sinh sản heo nái sinh lý heo con, Nxb Nơng nghiệp - Thành phố Hồ Chí Minh Tr 91 - 103 Đoàn Thị Kim Dung (2004), Sự biến động số vi khuẩn hiếu khí đường ruột, vai trò E.coli hội chứng tiêu chảy lợn phác đồ điều trị Luận án tiên sỹ Nông nghiệp, Viện Thú y Quốc Gia, Hà Nội, tr 55-86 Nguyễn Cảnh Dũng Cù Hữu Phú (2011), “xác định vai trò gây bệnh E.coli, salmonella hội chứng tiêu chảy lợn sau cai sữa số địa phƣơng tỉnh Lâm Đồng”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XVIII (1), tr 56-64 Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Văn Đức, Đặng Hồng Mai, Nguyễn Vĩnh Phƣớc (1976), Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật, tập I II, Nxb Khoa học kỹ thuật, Hà Nội 10 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phƣợng, (1986), Bệnh gia súc non, tập II, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, Tr 5- 30 11 Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phƣợng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (1996), Bệnh lợn nái lợn con, NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 57 - 147 12 Bùi Xuân Đồng (2002), “Bệnh phù đầu Escherichia coli gây lợn Hải Phòng biện pháp phòng chống”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập IX, Tr 98 - 99 81 13 Nguyễn Ngọc Hải, Amilon (2002), ứng dụng kỹ thuật PCR nghiên cứu vi khuẩn Escherichia coli gây phù lợn sau cai sữa, tạp chí nơng nghiệp phát triển nơng thôn, số 5, tr 412-413 14 Nguyễn Ngọc Hải (2010), “Vắc xin chuồng (autovaccine) phòng bệnh tiêu chảy E.coli heo theo mẹ”, Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập XVII (2), tr 47- 52 15 Đặng Đình Hanh, Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân (2002), kỹ thuật chăn ni phịng trị bệnh cho ngựa, Nxb Nông nghiệp Hà Nội 16 Trần Thị Hạnh, Đặng Xn Bình, Lƣu Quỳnh Hƣơng (2004), "Xác định vai trị vi khuẩn E.coli Cl.perfringens bệnh tiêu chảy lợn giai đoạn theo mẹ, chế tạo sinh phẩm phòng bệnh Viện thú y 35 năm xây dựng phát triển (1969 - 2004), NXB Nông nghiệp, Hà Nội, tr 393 405 17 Đậu Ngọc Hào, Nguyễn Thị Thuận, Đào Tú Khanh (1995), “Một số loài nấm mốc đƣợc phát thức ăn gia súc, gia cầm Đặc tính khả sản sinh Aflatoxin tự nhiên môi trƣờng chăn nuôi lồi Aspergillus Flavus ”, Cơng trình nghiên cứu khoa học, Viện Thú y, 1990- 1995 18 Đậu Ngọc Hào (2007), Độc chất học thú y (Giáo trình giảng dạy Đại học Cao học), Nxb Nông nghiệp - Hà Nội, Tr 86 - 87 19 Phạm Khắc Hiếu Bùi Thị Tho (1999), Một số kết nghiên cứu tính kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh thú y Kết nghiên cứu KHKT khoa CNTY (1996 – 1998), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, Tr 134 - 138 20 Vũ Khắc Hùng, Lê Văn Tạo, Pilipcinec (2005), “Xác định loại kháng nguyên bám dính thƣờng gặp vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn bị tiêu chảy phản ứng PCR” Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y,(3) tra 22-28 21 Vũ Khắc Hùng, Nguyễn Đức Tân, Nancy Cornick (2007), “Xác định tỷ lệ nhiễm phân tích yếu tố độc lực vi khuẩn E coli từ trâu bò khoẻ mạnh tỉnh miền Trung”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 14(2), tr 44- 50 22 Bùi Quý Huy (2003), Sổ tay phòng chống bệnh từ động vật lây sang người - Bệnh E.coli, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 30 - 34 23 Nguyễn Thị Khanh (1994), Chế phẩm sinh học Biolactyl khống chế hội chứng tiêu chảy lợn con, Luận án PTS khoa học Nông nghiệp, Viện KHKT Nông nghiệp Hà Nội 24 Phạm Văn Khuê, Phan Lục (1996), Giáo trình ký sinh trùng thú y, Nxb 82 Nông nghiệp - Hà Nội 25 Nguyễn Thị Kim Lan, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh (2006), “Một số đặc điểm dịch tễ hội chứng tiêu chảy lợn Thái Nguyên”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XIII (4), tr 92 - 96 26 Nguyễn Thị Kim Lan, La Văn Công, Nguyễn Thị Ngân, Lê Minh (2009), “Tình hình bệnh tiêu chảy lợn sau cai sữa tỷ lệ nhiễm giun sán lợn tiêu chảy Thái Nguyên”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XVI ( 1), tr 36- 41 27 Phạm Sỹ Lăng (2009), “Bệnh tiêu chảy vi khuẩn lợn biện pháp phòng trị”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XVI (6), tr 80- 85 28 Trƣơng Lăng (2004), Cai sữa sớm lợn con, Nxb Nông nghiệp - Hà Nội Tr 118 - 130 29 Hồ Văn Nam, Nguyễn Bá Hiên (1995), “Một số vi khuẩn thƣờng gặp trâu bò khỏe mạnh ỉa chảy viêm ruột vùng ngoại thành Hà Nội”, Kỷ yếu kết nghiên cứu khoa học chăn nuôi thú y (1991-1995), Nxb Nông nghiệp Hà Nội, Tr 140-145 30 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Trƣơng Quang, Phùng Quốc Chƣớng, Chu Đức Thắng, Phạm Ngọc Thạch (1997), “Bệnh viên ruột ỉa chảy lợn”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, (1), Tr 15 - 21 31 Hồ Văn Nam, Nguyễn Thị Đào Nguyên, Phạm Ngọc Thạch (1997), “Bệnh viêm ruột ỉa chảy gia súc”, Giáo trình bệnh nội khoa, Hà Nội, tr 200-210 32 Nguyễn Hữu Nam (1999), Một số tiêu biến đổi bệnh lý gà công nghiệp nhiễm độc Aflatoxin B1 thực nghiệm, Luận án tiến sỹ Nông nghiệp, trƣờng Đại học Nông nghiệp I, Hà Nội 33 Nguyễn Hữu Nam (2002), Giáo trình Bệnh lý học thú y, Nxb Nông nghiệp Tr 99 - 100 34 Nguyễn Ngã, Nguyễn Thiên Thu, Lê Lập, Lê Thị Thi, Vũ Khắc Hùng (2000), “Điều tra nghiên cứu hệ vi khuẩn hội chứng ỉa chảy bê, nghé khu vực miền Trung”, Kết nghiên cứu KHKT Thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 36-40 35 Vũ Văn Ngũ (1975), Loạn khuẩn đường ruột tác dụng điều trị Colisubtil, NXB Y học, Hà Nội 36 Nguyễn Nhƣ Pho (2003), Bệnh tiêu chảy heo, Nxb Nông nghiệp, TP Hồ Chí Minh 83 37 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Vũ Bình Minh Đỗ Ngọc Thuý (1999) “Kết phân lập vi khuẩn E.coli Salmonella lợn mắc tiêu chảy, xác định số đặc tính sinh vật hố học chủng vi khuẩn phân lập đƣợc biện pháp phịng trị”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tr 47 - 51 38 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thúy, Văn Thị Hƣờng, Phạm Quang Phúc (2002), “Kết xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli gây tiêu chảy bê, nghé Thái Ngun”, Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, số 8, trang 690-691 39 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Nguyễn Xuân Huyên, Âu Xuân Tuấn, Văn Thị Hƣờng, Đào Thị Hảo, Vũ Ngọc Quí , Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn theo mẹ số trại lợn miền bắc Việt Nam, xác định tỷ lệ kháng kháng sinh yếu tố gây bệnh chủng E coli phân lập Báo cáo khoa học CNTY (2002 - 2003) 40 Cù Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Đỗ Ngọc Thuý, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Xuân Huyên, Văn Thị Hƣờng, Đào Thị Hảo (2004), “Lựa chọn chủng E.coli để chế tạo Autovacxin phòng bệnh tiêu chảy cho lợn theo mẹ”, Viện thú y 35 năm xây dựng phát triển (1969 – 2004), Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 41 Phạm Quang Phúc (2003), Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ học, vai trò E coli gây tiêu chảy bê, nghé tỉnh Thái Nguyên biện pháp phòng trị, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Hà Nội 42 Nguyễn Vĩnh Phƣớc (1974), Vi sinh vật Thú y, tập I II, Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 43 Nguyễn Vĩnh Phƣớc (1976), Giáo trình bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nông nghiệp Hà Nội, Tr 377- 380 44 Nguyễn Vĩnh Phƣớc (1978), Bệnh truyền nhiễm gia súc, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 45 Phan Thanh Phƣợng (1988), Phòng chống bệnh phó thương hàn lợn, Nxb Nơng nghiệp - Hà Nội 46 Phan Thanh Phƣợng, Đặng Thị Thủy (2008), “Phòng bệnh kháng thể E.coli đƣợc chiết tách từ lịng đỏ trứng gà dạng bột”, Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập XV (5), tr 95-96 47 Trƣơng Quang (2007), “Kết nghiên cứu vai trò gây bệnh E.coli hội chứng tiêu chảy lợn - 60 ngày tuổi”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XII (1), tr 27 - 32 48 Trƣơng Quang, Trƣơng Hà Thái (2007), “Biến động số vi khuẩn 84 đƣờng ruột vai trò Salmonella hội chứng tiêu chảy lợn - tháng tuổi”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIV (số 6), Tr 52 - 57 49 Phạm Thế Sơn, Phạm Khắc Hiếu, Cù hữu Phú, Lê Văn Tạo (2008), “Đặc tính vi khuẩn E.coli, salmonella, Cl.perfringens gây bệnh lợn tiêu chảy”, Tạp chí khoa học kĩ thuật thú y, tập XV (1), tr 73-77 50 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên (2002), “ kết điều tra tình hình dịch tễ bệnh tiêu chảy bê, nghé số tỉnh miền núi phía Bắc”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, số 1,tr 60-67 51 Nguyễn Văn Sửu (2005), Nghiên cứu tình hình tiêu chảy bê, nghé tháng tuổi tỉnh miền núi phía Bắc xác định số yếu tố gây bệnh vi khuẩn Escherichia coli, Salmonella Clostridium perfringens phân lập được, Luận án tiến sĩ Nông nghiệp, Hà Nội 52 Nguyễn Văn Sửu, Nguyễn Quang Tuyên, Trần Thị Hạnh (2008), “Xác định tỷ lệ lợn tiêu chảy viêm ruột hoại tử số địa phƣơng - tỉnh Thái Nguyên”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XV (số 2) Tr 49 - 53 53 Lê Thị Tài (1997), Ô nhiễm thực phẩm với sức khoẻ người gia súc, Những thành tựu nghiên cứu phịng chống bệnh vật ni, Viện Thú y quốc gia, Tr 65- 66 54 Lê Văn Tạo (1997), Bệnh Escherichia coli gây Những thành tựu nghiên cứu phịng chống bệnh vật ni, tài liệu giảng dạy sau đại học cho bác sỹ thú y kỹ sư chăn nuôi, Viện Thú y quốc gia, Hà Nội, Tr 207 – 210 55 Lê Văn Tạo, Nguyễn Ngã, Nguyễn Thiên Thu, Đăng Văn Tuấn (2003), “Độc lực số yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli phân lập từ bê tiêu chảy tỉnh Nam Trung Bộ”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y (3), tr 17-21 56 Lê Văn Tạo (2005), Một số bệnh truyền nhiễm thường gặp lợn, Nxb Lao Động - Xã Hội Tr 56 - 57 57 Lê Văn Tạo (2006), “Bệnh vi khuẩn Escherichia coli gây lợn”, Tạp chí Khoa học Kỹ thuật Thú y, Tập XIII (số 3) Tr 75 - 84 58 Đoàn Thị Băng Tâm (1987), Bệnh động vật nuôi, Tập I, Nxb Khoa học Kỹ thuật - Hà Nội, Tr 119 - 135 59 Phạm Ngọc Thạch (1996), Một số tiêu lâm sàng, phi lâm sàng trâu viêm ruột ỉa chảy biện pháp phòng trị, Luận án tiến sỹ Nông nghiệp, Tr 20 – 32 60 Phạm Ngọc Thạch (2005), Hội chứng tiêu chảy gia súc, Trƣờng Đại học Nông nghiệp I Hà Nội – Khoa chăn nuôi thú y, Hà Nội, Tr – 85 61 Nguyễn Nhƣ Thanh, Nguyễn Bá Hiên, Trần Thị Lan Hƣơng (1997), Vi sinh vật thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, Tr 81 – 84 62 Nguyễn Nhƣ Thanh (2001), Dịch tễ học thú y, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội, tr 22 – 23 63 Nguyễn Văn Thiện (1997), Phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 64 Nguyễn Văn Thiện, Nguyễn Khánh Quắc, Nguyễn Duy Hoan (2002), Giáo trình phương pháp nghiên cứu chăn nuôi, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 65 Võ Thành Thìn, Ellen Ons, Nguyễn Viết Khơng, Bruno Goddeeris (2008),”Ứng dụng phƣơng pháp multiplex PCR để phát khả tranh giành sắt vi khuẩn E coli gây bệnh gà”, Tạp chí Khoa học kỹ thuật thú y, tập 15(4), tr 60- 65 66 Võ Thành Thìn, Lê Đình Hải, Vũ Khắc Hùng (2008), “Khả kháng kháng sinh vi khuẩn E.coli phân lập từ lợn mắc bệnh tiêu chảy”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y tập XVII (5), tr 5-10 67 Trịnh Văn Thịnh (1985), Bệnh lợn Việt Nam, NXB khoa học kỹ thuật, Hà Nội, tr 90 - 95 68 Nguyễn Thị Thanh Thủy, Trƣơng Quang (2008), “Xác định yếu tố gây bệnh vai trò vi khuẩn E.coli hội chứng tiêu chảy lợn ngoại hƣớng nạc ni tập trung”, Tạp chí nơng nghiệp phát triển nông thôn, số 4, tr 45-47 69 Hoàng Văn Tuấn, Lê Văn Tạo, Trần Thị Hạnh (1998), “Kết điều tra tình hình tiêu chảy lợn trại giống hƣớng nạc”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập V (4) 70 Nguyễn Quang Tuyên, Trần Văn Thăng (2007), Giáo trình sinh lý bệnh thú y, Nxb Nông Nghiệp, Tr 72 – 78, 141 71 Nguyễn Quang Tuyên (2008), Giáo trình vi sinh vật Thú y, Nxb Nông nghiệp, Tr 72- 81 72 Trịnh Quang Tuyên (2004), “Phân lập xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli từ lợn bị tiêu chảy nuôi trại lợn Tam Điệp”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y (4), tr 22 - 28 73 Trịnh Quang Tuyên, Nguyễn Ngọc Phụng, Lê Văn Tạo, Cù Hữu Phú, Lê Thế Tuấn (2004), “Phân lập xác định yếu tố gây bệnh vi khuẩn E.coli từ lợn bị tiêu chảy ni trại lợn Tam Điệp”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tr 22-28 86 74 Nguyễn Cảnh Tự, Trƣơng Quang (2009)[], “vai trò E.coli yếu tố gây bệnh hội chứng tiêu chảy lợn 60 ngày tuổi lợn nái nuôi Daklak”, Tạp chí khoa học kỹ thuật thú y, tập XVI (1), tr 19-24 II Tài liệu tiếng Anh 75 Blackwell.T E (1989), Enteritidis and diarrhoea, Veterinary climate North American large animal pract, p 547 – 575 76 Carter G.R., Chengapa.M.M., Rober T.S.A.W (1995), Essentials of veterinary Microbiology Awarerly Company, 1995, p 45-49 77 Cravioto A., Gross S J., Scotland M., and Rowe B (1979), An adhesive factor fould in strains of Escherichia coli belonging to the traditional infantile Lenteropathogenic serotypeees Curr Microbiol 3:95-99 78 Dakashinamurthy A and Shukla B D (1991), “Problem and perspectives of spoilage fungi and mycotoxin in India”, Fungi and mycotoxins in stored products Asias proceeding, p 213- 220 79 Dho- M M and Fairbrother J M (1999), “Avian pathogenic Escherichia coli (APEC)”, Vet Res 30, pp 299- 316 80 Do T.N., Cu H.P., Van H.T., Tran N.P.T & Trott D.J (2006), Virulence factors of E.coli isolates obtained from pigs with post-weaning diarrhoea or oedema disease in Vietnam In IPVS, p 336 Copenhagen, Denmark 81 Dolores G E., Doyle J E and Nathaniel F P (1973), “Differences in the response of rabbit small intestine to Heat-Labile and Heat-Stable enterotoxins of Escherichia coli” Infection and Immunity, p.873-880 82 DuPont H L., Formal R B., Hornick M J., Snyder J P., Libonati, D.G., Sheahan, LaBrec E H., and Kalas J P (1971), Pathogenesis of Escherichia coli diarrhea N Engl J Med 285:1-9 83 Elsinghorst E.A., Weit J.A., (1994), Epithelial cell invasion and adherence directed by the enterotoxigenic E.coli tib locus is asociated with a 104 kilodalton outer membreane protein Infect Immun, 62, pp.3463-3471 84 Fairbrother J.M (1992), Enteric colibacillosis Diseases of swine IOWA State University Press/AMES,IOWA U.S.A 7th Edition, 1992, p 489-496 85 Fairbrother J.M., Betschinger H U., Nielsen O N., Pohlenz J H (1992), “Escherichia coli Infections Diseases of Swine”, Seventh edition – Wolfe Publishing Ltd – Australian, pp 489-497 86 Falkow S (1975), Plasmid which contribute to pathogenity In infection multile drug resistance Pion Ltd London 87 87 Falkow S., Small P., Isberg R., Hayes S F., and Corwin D (1987), “A molecular stragety for the study of bacteria invastion”, Rev Infect Dis Pages 5450 - 5455 88 Feary D.J and Hassel D M (2006) Enteritis and colitis in horses Vet Clin North Am Equine Pract; 22:437–479 89 Giannella R.A., Rout W R., Formal S.P., Colling H (1976), “Role of plasma filtration in the intestinal fluid secretion medicated by infection with Salmonella typehymurium” Pages 470 - 474 90 Glenn S J (2007),The emergence of Clostridium difficile as a pathogen of food animals, Department of Veterinary Science and Microbiology, University of Arizona, Tucson, AZ 85721, USA 91 Gyles G L (1992) “Escherichia coli cytotoxins and enterotoxin”, Can J Microbiol 38 - Pages: 734 - 746 92 Gyles C.L., Fairbrother J.M (2004), Escherichia coli In: Gyles, C.L., Frescolt, J.F., Songer, J.G and Thoen, C.O (enditor), Pathogenesis of bacterial infections in animals Blackwell publishing Iowa, UAA: 192-223 93 James N and James B K (1998), Clinacal microbiology review P 142201 Vol 11, No 94 Jenkins M C., Fayer R., Tilley M., Upton F J (1993), “Cloning and expession of a cDNA encoding epitopes shared by 15 and 60 Kdalyon protein of Cryptosporidium parvum sporozoties”, Infection and Immunity (USA)), pp 2377-2382 95 Johnson P J (1995) Electrolyte and acid-base disturbances in the horse Vet Clin North Am Equine Pract;11:491–514 96 Jones G W., Rutter J M (1977), “Role of the K88 antigen in the pathogenesis of neonatal diarrhea caused by Escherichia coli in piglets”, Infection and immunity Pages 918 - 927 97 Ketyle I E., Kentrohrt (1975), Mouse lang Oedema caused by atoxin substance of Escherichia coli strains Acta Mcrobiol, A cad-Sci.Hung-25, P.307-317 98 Laval A (1997), Incidence des Enterites du porc, Báo cáo hội thảo thú y bệnh lợn Cục Thú y tổ chức, Hà Nội 99 Levine M M (1987), Escherichia coli that cause diarrhea: enterotoxigenic, enteropathogenic, enteroinvasive, enterohemorrhagic, and enteroadherent J Infect Dis 155: 377-389 100 Lindberg A.A., Jobertson J A (1983), “S.typhimurium infection in 88 calver”, Cell mediated and humoral Immune reaction before and affter challenge with Live virulent bacteriain calves give Live or inactivated vaccins, Infection and Immunity (41), pp 751-757 101 Mainil J G., Daube G., Jaequemin E., Kaukenbeck A., Pohl P (1995), Typing of E.coli isolated from the intestines of piglets in Belgium by colony hybridization with specific gene probes: enterotoxigenic, verotoxigenic or enteropathogenic isolate, Annales demedvet.1 pp.5-13 102 Morris I A., Wray C., Sojka W.J (1976), The effect of T and B lymphocyte depletion on the protection of mice vaccinated with a get E mutant of Salmonella typhymurium, Bristh J of Exp, Path 57 103 Nagy B., Fekete P.Z (1999), Enterotoxigenis E coli (ETEC) in farm animal,.Vet.Res, 30, pp.259-284 104 NCCLS (1999), Performance standards for antimicrobial disk and dilution susceptibility tests for bacteria isolated from animals; Approved Standard Pennsylvania, USA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards 105 Orskov F (1978) Vilurence Factor of the baterial cell surface J Infect., p 630 106 Polotsky Y E., Dragunskaya E M., Seliverstova V G., Avdeeva T A., Chakhutinskaya M G., Ke’tyi I., Verte’nyi A., Ralovich B., Emody L., Ma’lovics I., Safonva N V., Snigirevskaya E S., and Karyagina E I., (1977), Pathogenic effect of enterotoxigenic Escherichia coli and Escherichia coli causing infantile diarrhea Acta Microbiol Acad Sci Hung 24: 221-236 107 Purvis G M and Tremblay R R (1985), “Diseases of newborn”, Veterinary Microbiology, pp 192- 206 108 Radostits O M., Blood D C and Gay C C (1994), Veterinary medicine, the textbook of cattle, sheep, pigs, goats and horses Diseases caused by Escherichia coli London, Philadelphia, Sydney, Tokyo, Toronto, pp 703- 730 109 Radostits O M (1997), “Role of fimbriae F18 for actively acquired immunity againt porcine enterotoxigenic Escherichia coli”, Vet Microbiol, p 133 110 Riley L W., Remis R S., Helgerson S D., McGee H B., Wells J G., Davis B R., Hebert R.J., Olcott E S., Johnson L M., Hargrett N T., Blake P A., and Cohen M L (1983), Hemorrhagic colitis associated with a rare Escherichia coli serotypeee N EngI J Med 308: 68-685 89 111 Rippinger P., Bertschinger H U., Imberechts H., Nagy B., Sorg I., Stamm M., Wild P and Wittig W (1995), Designations F18ab and F18ac for the related fimbrial typees F107, 2134P and 8813 of Escherichia coli isolated from porcine postweaning diarrhoea and from oedema disease Veterinary Microbiology 45, 281-295 112 Russel A., William R., Monlux A (1991), Veterinary pathology, University press, Amess, lowa, USA, pp 638-642 113 Sarmiento J I., Dean E A and Moon H.W (1988), Effects a weaning on diarrhea caused by enterotoxigenic E.coli, Vet Microbiol, 54, pp.133-144 114 Sawsan T., Orjan Johanssona, Stephan Rivera Jonssona, Daniel Heimerb, Karel Krovaceka (2004), Toxin production by and adhesive properties of Clostridium difficile isolated from humans and horses with antibiotic-associated diarrhea,Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases, Volume 30, Issue 3, May 2007, Pages 163-174 115 Severtsova M K., Stanislayvsky E S (1979), “E coli bashir A.N, Laidner I.G Experimental study of vaccines against S.typhimurium infection of hygien, opidem”, Microbiol and immuno (23), pp 318-325 116 Smith H W (1963), “The haemolysins of Escherichia coli”, J Pathol Bacterial P 197 – 212 117 Smith H W., and Halls S (1967), “Observations by the ligated intestinal segment and oral inoculation methods on Escherichia coli infections in pigs, calves, lambs, and rabbits” J Pathol Bacteriol 93:499-529 118 Van T T H., Chin J., Chapman T., Tran L.T., Coloe P., (2008), An analysis of Escherichia coli islations for antibiotic resistance and virulence genes I.J.F Microbiology, 124, 217-223 119 Virginial W and Jorge H C (1991), “Colicin V virulence plasmid”, Microbiological Review Sept p 437 - 450 120 Weinstein D.L, Carsiotis M, Lisssner C.H.R, Osrien A.D (1984), “Flagella help Salmonella typehymirium survive within murine macrophages”, Infection and Immunity (No 46) p 819 - 825 121 www.petmd.com/horse/conditions/digestive/c_hr_endotoxemia 122 www.earthclinic.com/ pets/horse_e_coli ht/nl MỘT SỐ HÌNH ẢNH MINH HỌA CHO ĐỀ TÀI Ảnh số 1: Triệu chứng ngựa bạch tiêu chảy Ảnh số 2: Lấy mẫu phân ngựa Ảnh số 3: Hình thái khuẩn lạc vi khuẩn E coli môi trƣờng thạch DHL Ảnh số 4: Hình thái khuẩn lạc vi khuẩn E Ảnh số 5: Hình thái vi khuẩn E coli coli mơi trƣờng thạch máu dƣới kính hiển vi quang học Ảnh số 6: Một số phản ứng sinh hóa vi khuẩn E coli ẢnhẢnh số 7:sốKết thử kháng sinh đồ 7: Ảnh chuột thí nghiệm vi khuẩn E coli Ảnh số 8: Ảnh chuột thí nghiệm Ảnh số 9: Sản phẩm phản ứng PCR Phức hợp sau trình điện di Ảnh số 10: Kết thử kháng sinh đồ vi khuẩn E coli 93 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VŨ THỊ ÁNH HUYỀN XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở NGỰA BẠCH NUÔI TẠI HUYỆN PHÚ BÌNH, TỈNH THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên, năm 2012 94 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM VŨ THỊ ÁNH HUYỀN “XÁC ĐỊNH MỘT SỐ ĐẶC TÍNH SINH HỌC CỦA VI KHUẨN ESCHERICHIA COLI TRONG HỘI CHỨNG TIÊU CHẢY Ở NGỰA BẠCH NUÔI TẠI HUYỆN PHÚ BÌNH, TỈNH THÁI NGUYÊN VÀ BIỆN PHÁP ĐIỀU TRỊ” Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: GS.TS Nguyễn Quang Tuyên Thái Nguyên, năm 2012