Tách chiết, phân tích aflatoxin trong thực phẩm và dược liệu bằng cột sắc ký ái lực miễn dịch kết hợp sắc ký lỏng hiệu năng cao

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC – HÀ NỘI -oOo - NGUYỄN THỊ NGUYỆT THU TÁCH CHIẾT, PHÂN TÍCH AFLATOXIN TRONG THỰC PHẨM VÀ DƯỢC LIỆU BẰNG CỘT SẮC KÝ ÁI LỰC MIỄN DỊCH KẾT HỢP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI - 2011 Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC – HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGUYỆT THU TÁCH CHIẾT, PHÂN TÍCH AFLATOXIN TRONG THỰC PHẨM VÀ DƯỢC LIỆU BẰNG CỘT SẮC KÝ ÁI LỰC MIỄN DỊCH KẾT HỢP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO Chuyên ngành: Kiểm nghiệm thuốc Mã số: 62.73.15.01 LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trịnh Văn Quỳ PGS.TSKH Nguyễn Lê Trang HÀ NỘI - 2011 -i- LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Nguyễn Thị Nguyệt Thu - ii - LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới: PGS.TS Trịnh Văn Quỳ, nguyên Viện Trưởng Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương PGS.TSKH Nguyễn Lê Trang, nguyên Trưởng phịng Hóa Miễn dịch Viện Pasteur TP.HCM, tận tình hướng dẫn, giúp đỡ cho nhiều kiến thức q báu để tơi hồn thành luận án Ban Giám đốc Viện Pasteur TP.HCM tạo điều kiện thuận lợi cho tơi hồn thành luận án thời gian quy định PGS.TS Trương Thị Xuân Liên, nguyên Viện phó Viện Pasteur TP.HCM đóng góp ý kiến, dẫn động viên suốt thời gian thực luận án Các anh chị Viện Vệ sinh Y tế Công cộng, Khoa Y học cổ truyền trường Đại học Y Dược, Trung tâm Kiểm nghiệm Dược phẩm TP.HCM cung cấp mẫu thực phẩm, dược liệu thuốc đông dược để thực đề tài Các thầy, anh chị Bộ mơn Hóa phân tích Trường Đại học Dược Hà Nội giúp đỡ q trình học tập trường Và cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn anh chị phịng Hóa lý phịng Hóa Miễn Dịch - Viện Pasteur TP.HCM động viên, giúp đỡ chia sẻ khó khăn với công việc Nguyễn Thị Nguyệt Thu - iii - MỤC LỤC Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục .iii Danh mục chữ viết tắt viii Danh mục hình x Danh mục bảng xiv ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ AFLATOXIN 1.1.1 Phát aflatoxin 1.1.2 Aspergillus flavus aflatoxin 1.1.3 Tính chất hóa, lý aflatoxin 1.1.4 Độc tính aflatoxin 1.1.5 Giới hạn aflatoxin thực phẩm 10 1.1.6 Giới hạn aflatoxin dược liệu 12 1.2 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG AFLATOXIN 12 1.2.1 Lấy mẫu 12 1.2.2 Chuẩn bị mẫu 12 1.2.3 Phân tích mẫu 16 - iv - 1.3 NHỮNG NGHIÊN CỨU CHẾ TẠO CỘT SẮC KÝ ÁI LỰC MIỄN DỊCH CHO AFLATOXIN 23 1.3.1 Kháng thể 23 1.3.2 Cộng hợp kháng nguyên aflatoxin – BSA 24 1.3.3 Tạo kháng thể kháng aflatoxin 26 1.3.4 Tinh chế kháng thể 30 1.3.5 Cố định kháng thể vào pha rắn 31 1.3.6 Các đặc tính chiết xuất pha rắn chất hấp thụ lực miễn dịch 34 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 38 2.1 VẬT LIỆU 38 2.1.1 Thiết bị 38 2.1.2 Hóa chất 38 2.2 PHƯƠNG PHÁP 40 2.2.1 Phương pháp gây miễn dịch tạo kháng thể kháng aflatoxin 40 2.2.2 Phương pháp khuếch tán kép thạch 41 2.2.3 Phương pháp tinh chế kháng thể dùng muối amoni sulfat 42 2.2.4 Phương pháp thẩm tích (đưa protein dạng tủa trở lại dạng dung dịch)42 2.2.5 Phương pháp điện di gel polyacrylamid có natri dodecyl sulfat 43 2.2.6 Xác định nồng độ protein phương pháp Bradford 45 2.2.7 Cộng hợp protein vào gel sepharose CL-4B hoạt hóa với CNBr 45 -v- 2.2.8 Phương pháp nén cột 45 2.2.9 pháp sắcaflatoxin ký lựcchuẩn miễn dịch…………………………………… 46 2.2.10.Phương Pha dung dịch 46 2.2.11 Phương pháp chiết aflatoxin từ mẫu cần phân tích cột IAC 47 2.2.12 Phương pháp chiết aflatoxin từ mẫu cần phân tích cột SPE C18 47 2.2.13 Phương pháp làm giả mẫu nhiễm aflatoxin 48 2.2.14 Phương pháp tạo dẫn xuất aflatoxin 48 2.2.15 Phương pháp sắc ký lỏng pha đảo phân tích aflatoxin 48 2.2.16 Phương pháp khảo sát thông số kỹ thuật cột sắc ký lực bắt aflatoxin 48 2.2.16.1 Độ lặp lại cột 48 2.2.16.2 Dung lượng cột 49 2.2.16.3 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng 49 2.2.16.4 Xác định độ tuyến tính 50 2.2.16.5 Xác định hiệu suất thu hồi 50 2.2.16.6 Theo dõi độ ổn định cột 51 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 52 3.1 CHẾ TẠO CỘT SẮC KÍ ÁI LỰC CHO AFLATOXIN 52 3.1.1 Sản xuất kháng thể kháng aflatoxin 52 3.1.1.1 Gây miễn dịch thỏ 53 3.1.1.2 trasắc đápkýứng miễn ………………………………………… 54 3.1.2 ChếKiểm tạo cột lực bắtdịch aflatoxin 58 3.1.2 Chế tạo cột sắc ký lực bắt aflatoxin…………………………………… 59 - vi - 3.1.2.1 Chọn nồng độ kháng thể liên kết với gel lực 59 3.1.2.2 Khảo sát thông số kỹ thuật cột IAC Pasteur 63 3.2 ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG CỘT IAC-PASTEUR CHO PHÂN TÍCH AFLATOXIN TRONG THỰC PHẨM VÀ DƯỢC LIỆU 68 3.2.1 Khảo sát mẫu thực phẩm 68 3.2.1.1 Khảo sát mẫu ngô 68 3.2.1.2 Khảo sát mẫu lạc 76 3.2.2 Khảo sát mẫu dược liệu 81 3.2.2.1 Khảo sát mẫu cam thảo 81 3.2.2.2 Khảo sát mẫu gừng 87 3.3 SO SÁNH CÁC PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ MẪU KHÁC 92 3.3.1 So sánh với phương pháp xử lý mẫu cột SPE C18 92 3.3.1.1 Trên mẫu thực phẩm 92 3.3.1.2 Trên mẫu dược liệu 96 3.3.2 So sánh với phương pháp xử lý mẫu cột sắc ký lực hãng Vicam 99 3.3.2.1 So sánh mẫu cộng chuẩn 99 3.3.2.2 So sánh mẫu thực 103 3.4 ÁP DỤNG CỘT IAC-PASTEUR LÀM SẠCH MẪU ĐỊNH LƯỢNG AFLATOXIN TRÊN MỘT SỐ NỀN MẪU THỰC PHẨM VÀ DƯỢC LIỆU 105 3.4.1 Trên số mẫu thực phẩm 105 - vii - 3.4.2 Trên số mẫu dược liệu 106 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 107 4.1 BÀN LUẬN VỀ CHẾ TẠO CỘT SẮC KÝ ÁI LỰC CHO AFLATOXIN 107 4.1.1 Về sản xuất kháng thể kháng aflatoxin 107 4.1.1.1 Về gây miễn dịch thỏ…………………………………………….107 4.1.1.2 Về kiểm tra đáp ứng miễn dịch 109 4.1.2 Về chế tạo cột sắc ký lực bắt aflatoxin 111 4.1.2.1 Về chọn nồng độ kháng thể liên kết vào gel lực 111 4.1.2.2 Về khảo sát thông số kỹ thuật cột IAC Pasteur ………… 112 4.2 BÀN LUẬN VỀ KHẢ NĂNG ỨNG DỤNG CỘT IAC-PASTEUR CHO PHÂN TÍCH AFLATOXIN TRONG THỰC PHẨM VÀ DƯỢC LIỆU 114 4.3 BÀN LUẬN VỀ SO SÁNH CÁC PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ MẪU KHÁC 118 4.3.1 Với phương pháp xử lý mẫu cột SPE C18 118 4.3.2 Với phương pháp xử lý mẫu cột IAC hãng Vicam 121 4.4 BÀN LUẬN VỀ ÁP DỤNG CỘT IAC-PASTEUR ĐỂ XÁC ĐỊNH AFLATOXIN TRONG MỘT SỐ THỰC PHẨM VÀ DƯỢC LIỆU 122 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 125 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 127 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC - viii - DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AFB1 Aflatoxin B1 AFB2 Aflatoxin B2 AFG1 Aflatoxin G1 AFG2 Aflatoxin G2 AFM1 Aflatoxin M1 AOAC Association of Official Analytical Chemists BSA Bovine serum albumin (Albumin huyết bò) CD Cyclodextrin CNBr Cyanogen bromide EU European Union (Liên minh châu Âu) FDA US Food and Drug Administration (Cơ quan quản lý thuốc thực phẩm Hoa Kỳ) Fab Antigen binding fragment (Mảnh gắn kháng nguyên) Fc Crystalizable fragment ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay HPLC High-performance liquid chromatography HCC Hepatocellular carcinoma HBV Hepatitis B virus HCV Hepatitis C virus HBsAg Hepatitis B surface Antigen IAC Immuno Affinity Chromatography (Sắc ký lực miễn dịch) IARC International Agency for Research on Cancer (Cơ quan nghiên cứu ung thư quốc tế) IUPAC International Union of Pure and Applied Chemistry (Liên đồn quốc tế hố học túy ứng dụng) Phụ lục 21: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFB1 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur - Trên mẫu ngô: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 89211 185608 362671 699497 1403150 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 84908 95,18 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 80630 90,38 92686 168938 198335 403912 363435 760076 103,90 91,02 106,86 111,37 100,21 108,66 103363 193489 197373 405480 415989 798829 115,86 104,25 106,34 111,80 114,70 114,20 820063 1398301 1483614 117,24 99,65 105,73 796047 1470880 1479560 113,80 104,83 105,45 - Trên lạc: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 71782 138348 303025 649139 1413150 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 64395 89,71 89605 125,83 146977 106,24 149580 108,12 346418 114,32 376907 124,38 723424 111,44 748982 115,38 1338065 94,69 1452560 102,79 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 83944 116,94 76039 105,93 162523 117,47 167285 120,92 370114 122,14 370287 122,20 780424 122,22 756631 116,56 1372670 97,14 1394950 98,71 Phụ lục 21: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFB1 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur (tt) - Trên cam thảo Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 80688 206794 423616 739953 1403150 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 135622 168,08 141566 175,45 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 83581 103,59 158821 196,83 189583 91,68 142268 68,80 165783 251691 80,17 59,41 134817 237142 65,19 55,98 247612 474836 58,45 64,17 238291 355314 56,25 48,02 441982 804125 741548 59,73 57,31 52,85 387269 737989 779012 52,34 52,60 55,52 - Trên gừng: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 89211 160994 311791 645236 1403150 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 96967 108,69 101716 114,02 179932 111,76 174735 108,54 391985 125,72 392575 125,91 785630 121,76 773675 1310043 1332465 119,91 93,36 94,96 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 99769 111,83 99719 111,78 192984 119,87 170327 105,80 417838 134,01 402959 129,24 750378 116,30 814844 1307180 1257690 126,29 93,16 89,63 Phụ lục 22: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFB2 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur - Trên mẫu ngô: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 335294 737517 1635610 3408650 5748380 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 272685 81,33 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 258133 76,99 226689 608052 630976 1547094 1420123 2806895 67,61 82,45 85,55 94,59 86,83 82,35 289815 694118 721548 1438300 1467730 2935970 86,44 94,12 97,83 87,94 89,74 86,13 2867690 5402348 5582314 84,13 93,98 97,11 2980050 5446150 5596100 87,43 94,74 97,35 - Trên lạc: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 300502 549879 1341960 2871630 5748380 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 166758 55,49 286958 95,49 527344 95,90 525482 95,56 1064051 79,29 1225084 91,29 2338226 81,43 2256623 78,58 4597851 79,99 4732160 82,32 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 276430 91,99 227670 75,76 562920 102,37 618740 112.52 1258950 93,81 1338040 99,71 2842560 98,99 2677880 93,25 4958050 86,25 5169700 89,93 Phụ lục 22: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFB2 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur (tt) - Trên cam thảo Lượng qua cột (ng) Diện tích pic trước qua cột 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 245736 715792 1571270 3281621 5748380 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 0 0 0 526594 698876 1681547 1921547 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 16,05 21,30 29,25 33,43 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 87042 295237 111772 158431 520096 346115 796760 944772 2371123 2045510 35,42 120,14 15,62 22,13 33,10 22,03 24,28 28,79 41,25 35,58 - Trên gừng: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 335294 758116 1579340 3255990 5748380 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 351255 104,76 356731 106,39 622946 82,17 605613 79,88 1334916 84,52 1258012 79,65 2719710 83,53 2778053 85,32 4768720 82,96 4956132 86,22 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 361648 107,86 367520 109,61 692913 91,40 607389 80,12 1533651 97,11 1403835 88,89 2485256 76,33 2845632 87,40 4498680 78,26 4652810 80,94 Phụ lục 23: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFG1 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur - Trên mẫu ngô: Lượngqua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 291151 714091 1288570 2461920 4922740 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 308076 105,81 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 297174 102,07 367710 600783 697466 1395991 1317050 2706178 126,30 84,13 97,67 108,34 102,21 109,92 383955 686804 693448 1364953 1430461 2513350 131,87 96,18 97,11 105,93 111,01 102,09 2855441 5423871 5096532 115,98 110,18 103,53 2937061 5082690 4987403 119,30 103,25 101,31 - Trên lạc: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 371515 618186 1099150 2337950 4922740 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 233635 62,89 344880 92,83 557053 90,11 519167 83,98 1134681 103,23 1186075 107,91 2404623 102,85 2345671 100,33 4768910 96,88 4984520 101,25 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 323567 87,09 297619 80,11 614468 99,40 778105 125,87 1313020 119,46 1309670 119,15 2468620 105,59 2555990 109,33 4755320 96,60 4612300 93,69 Phụ lục 23: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFG1 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur (tt) - Trên cam thảo Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 321076 721817 1549142 2715741 4922740 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 0 128323 91623 247001 338616 1127561 1117352 2229410 2114302 0,00 0,00 17,78 12,69 15,94 21,86 41,52 41,14 45,29 42,95 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 193586 416995 414557 415680 667421 728010 1423230 1626490 3031420 2802471 60,29 129,87 57,43 57,59 43,08 46,99 52,41 59,89 61,58 56,93 - Trên gừng: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 291151 791357 1611840 3209430 4922740 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 334892 115,02 272120 93,46 595252 75,22 602597 76,15 1261990 78,29 890723 55,26 2635074 82,10 2545836 79,32 3951246 80,27 4146920 84,24 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 326524 112,15 310101 106,51 507376 64,11 422776 53,42 1304761 80,95 1156432 71,75 2468980 76,93 2504970 78,05 4371532 88,80 4135860 84,02 Phụ lục 24: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFG2 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur - Trên mẫu ngô: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 148083 352151 703540 1442830 2593860 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 0,00 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 105431 71,20 128490 73711 0,00 36,49 20,93 149824 232946 236657 101,18 66,15 67,20 145511 160666 356720 355374 20,68 22,84 24,72 24,63 600437 607052 1154852 1259183 85,35 86,29 80,04 87,27 786142 631267 30,31 24,34 2126350 2067231 81,98 79,70 - Trên lạc: Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 111397 267329 582683 1374630 2593860 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 0,00 73860 66,30 107299 40,14 123844 46,33 188514 32,35 232433 39,89 289931 21,09 241543 17,57 657412 25,34 728526 28,09 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 133967 120,26 103287 92,72 262614 98,24 256463 95,94 529755 90,92 517989 88,90 1072130 77,99 1014610 73,81 2085520 80,40 2134900 82,31 Phụ lục 24: Số liệu thu khảo sát khác hiệu suất thu hồi AFG2 hai phương pháp qua cột Vicam cột Pasteur (tt) - Trên cam thảo Lượng qua cột (ng) 1,3 1,3 2,6 2,6 5,2 5,2 10,4 10,4 20,8 20,8 Diện tích pic trước qua cột 171962 303560 701952 1304223 2593860 Cột Vicam Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 0 0 82925 0 305213 452684 0,00 0,00 0,00 0,00 11,81 0,00 0,00 0,00 11,77 17,45 Cột Pasteur Hiệu suất Diện tích pic qua cột thu hồi (%) 155960 172019 150050 132227 260177 234385 476989 558132 893180 791141 90,69 100,03 49,43 43,56 37,06 33,39 36,57 42,79 34,43 30,50 - Trên gừng: Cột Vicam Cột Pasteur Hiệu suất Hiệu suất Diện tích pic Diện tích pic qua cột qua cột thu hồi (%) thu hồi (%) 0,00 146862 99,18 1,3 148083 0,00 114528 77,34 1,3 56845 17,45 212216 65,15 2,6 325738 54067 16,60 156083 47,92 2,6 136951 21,90 514206 82,22 5,2 625383 66193 10,58 496365 79,37 5,2 240957 18,85 900225 70,43 10,4 1278180 391628 30,64 1049960 82,14 10,4 910347 35,10 1882130 72,56 20,8 2593860 Phụ lục 25: Số liệu thu kiểm tra AF 74 mẫu1999640 thực phẩm nông sản 965602 37,23 77,09 20,8 Lượng qua cột (ng) Diện tích pic trước qua cột Phụ lục 25: Kết kiểm tra AF 74 mẫu thực phẩm nông sản Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp STT Mẫu AF (ppb) Peak nhiễu G1 B1 G2 AF B2 tổng số (ppb) Mẫu bột điều x 0,15 0,7 0,16 1,01 Bột điều - 0,3 0,16 0,19 0,65 Bánh hạt điều Bã dầu Nam Dương x Dầu lạc - 18,6 Lạc sống - 0,5 0,5 Lạc rang - 0,66 0,66 Kẹo lạc x 3,55 3,55 Lạc da cá - 2,94 2,94 10 Cơm dừa sấy - 11 Bột ngũ cốc gold ngày - 12 Đậu ván - 13 Bã đậu nành x 14 Khoai mì lát x 0,16 15 Tinh bột khoai mì - 2,31 16 Cháo bị ăn liền -Vifon - 0,36 0,36 17 Bột bánh xèo - Tài Ký - 0,43 0,43 18 Bột ngô - Tài Ký - 0,36 0,36 19 Cháo thịt băm -Vifon - 0,39 0,39 20 Cháo cá lóc - Vifon - 0,38 0,38 21 Gạo - 22 Bột gạo - 0,44 0,44 0,22 1,2 19,8 0,38 2,31 Phụ lục 25: Kết kiểm tra AF 74 mẫu thực phẩm nông sản (tt) Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp STT Mẫu AF (ppb) Peak nhiễu G1 B1 G2 AF B2 tổng số (ppb) 23 Gạo Việt Nam giống Nhật - 24 Gạo thơm Việt Nam - 25 Gạo thơm Việt Nam - 26 Bánh tráng - 27 Bánh tráng muối tơm - 28 Mì trứng x 29 Hạt sen sấy - 30 Hạt sen khô - 31 Bột gia vị - 32 Kẹo dừa- nâu x 0,39 0,39 33 Kẹo dừa- vàng - 0,36 0,36 34 Kẹo dừa- cam - 35 Kẹo chuối - 36 Sữa đậu nành Tribeco x 37 Mẫu nước Lavie - 38 Trà xanh - 39 Chè xanh x 40 Trà hòa tan - 41 Trà hòa tan - 42 Cà phê - 43 Cà phê - 44 Cà phê- nâu - 0,61 1,81 0,12 0,4 2,94 0,85 6,81 0,62 3,23 4,08 6,81 0,62 Phụ lục 25: Kết kiểm tra AF 74 mẫu thực phẩm nông sản (tt) Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp STT Mẫu AF (ppb) Peak nhiễu G1 B1 G2 AF B2 tổng số (ppb) 45 Cà phê- đen x 46 Cà phê hột - 47 Cà phê - 48 Cà phê Thu Hà - 49 Cà phê loại - 50 Cà phê cao cấp số - 51 Cà phê cao cấp *** - 52 Cà phê thượng hạng - 53 Cà phê đặc biệt thượng hạng - 54 Cà phê đặc biệt thượng hạng - 55 Cà phê Thu Hà spedial (diet - 10,8 10,8 0,27 0,27 coffee) 56 Cà phê Thu Hà lớn pride - 57 Cà phê hòa tan in - 58 Cà phê giảm béo x 59 Cà phê bột x 60 Cà phê bột - 2,44 61 Bánh thỏ chăn nuôi x 2,28 0,16 2,24 62 Bánh dầu - 0,07 0,01 0,1 63 Bánh thỏ kiểm định x 64 Cám x 65 Cám x 0,02 2,44 3,07 9,93 0,47 13,47 Phụ lục 25: Kết kiểm tra AF 74 mẫu thực phẩm nông sản (tt) Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp STT Mẫu AF (ppb) Peak nhiễu G1 B1 G2 AF B2 tổng số (ppb) 66 Cám x 8,56 0,31 1,33 10,2 67 Cám x 9,12 0,27 1,01 10,4 68 Thức ăn cá - 17,9 2,5 20,4 69 Thức ăn cá tra - 23,9 2,5 26,4 70 Thức ăn cá - 71 Thức ăn cá - 72 Thức ăn cá - 73 Men - 74 Bột màu vàng - 3,48 25,6 0,23 1,79 31,1 Phụ lục 26: Kết kiểm tra AF 25 mẫu dược liệu 29 mẫu thuốc đông dược Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp Ý dĩ - AF tổng số (ppb) Hoài sơn - Kê nội kim - Mạch môn - Bán hạ chế - Hà thủ ô - Bột nghệ Remedica - STT Mẫu Peak nhiễu AF (ppb) G1 0,82 B1 G2 B2 3,18 3,18 4,75 5,58 Imexpharm Hương phụ - Cam thảo x 10 Bạch bì x 1,60 1,60 11 Ích mẫu - 1,34 1,34 12 Nhân trần nam - 13 Phục linh - 14 Cam thảo chích x 15 Bạch truật x 16 Hà thủ ô chế - 17 Hương phụ chế - 18 Mã tiền - 19 Sài hồ - 20 Sơn thù - 21 Trạch tả - 22 Gừng - 0 2,13 24,66 4,20 2,13 28,86 Phụ lục 26: Kết kiểm tra AF 25 mẫu dược liệu 29 mẫu thuốc đông dược Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp (tt) 23 Bột diệp hạ châu - AF tổng số (ppb) 24 Bột nghệ Viện Y học dân tộc - 25 Thục địa - 26 Tiểu nhi bá bổ tinh x 27 Mát gan phong ngứa linh - 28 Song long vị tố - 29 Ngũ tạng tinh - 30 Nhi chí bửu - 31 Sâm qui yến - 32 Tô diệp khái thủy x 33 Trị gan cao - 34 An thần dưỡng tâm tố - 35 Thiên môn Bổ phổi x 36 Long đởm giải độc gan - 37 Thuốc bột trị đau bao tử Thái - STT Mẫu Peak nhiễu AF (ppb) G1 B1 G2 B2 Điền 38 Tỷ tất x 39 Dưỡng vị tán x 40 Hóa ban bích ngọc đơn - 41 Thuốc bột Đức quốc vị tán - 42 Thuốc cốm – Cinitrol - 43 Trà tiểu đường - 44 Trà thấp khớp - 0,11 0,32 0,71 1,14 Phụ lục 26: Kết kiểm tra AF 25 mẫu dược liệu 29 mẫu thuốc đông dược Ký hiệu (-): sắc ký đồ khơng có peak tạp, (x) sắc ký đồ có peak tạp (tt) STT Mẫu Peak nhiễu AF (ppb) G1 B1 G2 B2 AF tổng số (ppb) 45 Kakama - 46 Bát trân nang x 0,08 0,08 47 Giải nhiệt tiêu ban tán x 0,35 0,35 48 Ban nóng ho - 49 Vạn an tỷ viêm - 50 Ơ kim hồn - 51 Chi tử đan - 52 Đại bổ thận hồn - 53 Phụ khoa kim hồn - 54 Benedyn - 0 2,919 2,919