Nghiên cứu tạo và ghép tấm tế bào từ tế bào gốc trung mô mô cuống rốn người và giá thể lunagel trên mô hình chuột sau nhồi máu cơ tim

ỦY BAN NHÂN DÂN SỞ NN & PTNT TP.HCM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU TẠO VÀ GHÉP TẤM TẾ BÀO TỪ TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ MÔ CUỐNG RỐN NGƯỜI VÀ GIÁ THỂ LUNAGEL TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT SAU NHỒI MÁU CƠ TIM Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Công nghệ Sinh học Tp HCM Chủ nhiệm nhiệm vụ: TS Phạm Lê Bửu Trúc Thành phố Hồ Chí Minh – 2023 ỦY BAN NHÂN DÂN SỞ NN & PTNT TP.HCM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU TẠO VÀ GHÉP TẤM TẾ BÀO TỪ TẾ BÀO GỐC TRUNG MÔ MÔ CUỐNG RỐN NGƯỜI VÀ GIÁ THỂ LUNAGEL TRÊN MƠ HÌNH CHUỘT SAU NHỒI MÁU CƠ TIM Chủ nhiệm nhiệm vụ: Cơ quan chủ trì nhiệm vụ Thành phố Hồ Chí Minh- 20… _ TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ CỘNG HỒ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM SINH HỌC TP.HCM Độc lập - Tự - Hạnh phúc _ ., ngày tháng năm 20… BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu tạo ghép tế bào từ tế bào gốc trung mô mô cuống rốn người giá thể LunaGel mơ hình chuột sau nhồi máu tim Thuộc: Chương trình KH&CN mục tiêu nghiên cứu ứng dụng tế bào gốc TP HCM Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Phạm Lê Bửu Trúc Ngày, tháng, năm sinh: 10/10/1982 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Tiến sĩ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên Chức vụ: phó trưởng phịng CNSHĐV Điện thoại: Tổ chức: Nhà riêng: Mobile: 0856554655 Fax: E-mail: buutruc@gmail.com Tên tổ chức công tác: Trung tâm Công nghệ Sinh học Tp HCM Địa tổ chức: 2374 QL1, Khu phố 2, Phường Trung Mỹ Tây, Q.12, Tp.HCM i Địa nhà riêng: B3-05-04, Block B3, Chung cư The Art, Phước Long B, Q 9, Tp.HCM Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học Tp Hồ Chí Minh Điện thoại: (84-28) 37 153 792 Fax: (84-28) 38 91 69 97 E-mail: ttcnsh.snn@tphcm.gov.vn Website: https://www.hcmbiotech.com.vn/vi/ Địa chỉ: 2374 Quốc lộ 1, Khu phố 2, Phường Trung Mỹ Tây, Quận 12, Tp Hồ Chí Minh, Việt Nam Họ tên thủ trưởng tổ chức: TS Hà Thị Loan Số tài khoản: 9527.2.1007645 Kho bạc Nhà nước/Ngân hàng: Kho bạc Nhà nước Thành phố Hồ Chí Minh Tên quan chủ quản đề tài: Sở Nông nghiệp Phát triển Nông thôn Tp HCM II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ : - Theo Hợp đồng ký kết: Từ tháng 10 năm 2019 đến tháng 04 năm 2023 - Thực tế thực hiện: Từ tháng 10 năm 2019 đến tháng 04 năm 2023 - Được gia hạn (nếu có): - Lần : Từ tháng 10 năm 2019 đến tháng 04 năm 2023 Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 3.807 tr.đ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 3.807 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: tr.đ ii b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt Ghi Thời gian Kinh phí Thời gian Kinh phí (Số đề nghị (Tháng, năm) (Tr.đ) (Tháng, năm) (Tr.đ) toán) Đợt 1900 2020 1908 Đợt 1525 2021 1313 Đợt 382 2023 565 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với đề tài: Đơn vị tính: Triệu đồng Số TT Theo kế hoạch Nội dung khoản Tổng Thực tế đạt Nguồn NSKH chi Tổng NSKH khác khác Trả công lao động (khoa học, 972,668 972,668 972,668 972,668 phổ thông) Nguyên, vật liệu, 2.591,023 2.591,023 2.590,552 2.590,552 lượng Thiết bị, máy móc 0 0 0 0 243,309 243,309 222,808 222,808 Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác iii Nguồn Tổng cộng 3.807 3.807 3.786,028 3.786,028 - Lý thay đổi (nếu có): Đối với dự án: Đơn vị tính: Triệu đồng Số Nội dung TT khoản chi Theo kế hoạch Tổng NSKH Nguồn Thực tế đạt Tổng NSKH khác Nguồn khác Thiết bị, máy móc mua Nhà xưởng xây dựng mới, cải tạo Kinh phí hỗ trợ cơng nghệ Chi phí lao động Nguyên vật liệu, lượng Thuê thiết bị, nhà xưởng Khác Tổng cộng - Lý thay đổi (nếu có): Các văn hành q trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ công đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) iv Số Số, thời gian ban TT hành văn Tên văn Số 268/QĐ-SKHCN Về việc thành lập Hội đồng tư vấn Ngày 11/04/2019của tuyển chọn/ giao trực tiếp cho tổ chức, Sở Khoa học Cơng cá nhân chủ trì thực nhiệm vụ khoa nghệ TP.HCM học công nghệ Số 925/QĐ-SKHCN Về việc phê duyệt nhiệm vụ nghiên cứu Ngày 02/10/2019của khoa học công nghệ Sở Khoa học Công nghệ TP.HCM Số 85/2019/HĐ- Hợp đồng thực nhiệm vụ nghiên QPTKHCN ngày cứu khoa học công nghệ 08/10/2019 Sở KH CN TT CNSH TP HCM Số 1155/QĐ-SKHCN Về việc phê duyệt lựa chọn nhà thầu ngày 19/11/2019 của nhiệm vụ “Nghiên cứu tạo ghép Sở Khoa học Công tế bào từ tế bào gốc trung mô mô nghệ TP HCM cuống rốn người giá thể Lunagel mô hình chuột sau nhồi máu tim” Số 310/QĐ-CNSH Về việc Phê duyệt dự tốn đặc tính ngày 02/12/2019 kĩ thuật cho gói thầu cung cấp vật tư, Trung tâm CNSH TP nguyên vật liệu, kit phục vụ nhiệm vụ, HCM nhiệm vụ: “Nghiên cứu tạo ghép tế bào từ tế bào gốc trung mô mô cuống rốn người giá thể Lunagel mô hình chuột sau nhồi máu tim” v Ghi Số 323/QĐ-CNSH Về việc phê duyệt hồ sơ yêu cầu cho gói ngày 10/12/2019 thầu cung cấp vật tư, nguyên vật liệu, Trung tâm CNSH TP kit phục vụ nhiệm vụ, nhiệm vụ: HCM “Nghiên cứu tạo ghép tế bào từ tế bào gốc trung mô mô cuống rốn người giá thể Lunagel mô hình chuột sau nhồi máu tim” Số 395/QĐ-CNSH Về việc phê duyệt kết lựa chọn nhà ngày 30/12/2019 thầu gói thầu cung cấp vật tư, nguyên Trung tâm CNSH TP vật liệu, kit phục vụ nhiệm vụ, nhiệm HCM vụ: “Nghiên cứu tạo ghép tế bào từ tế bào gốc trung mô mô cuống rốn người giá thể Lunagel mơ hình chuột sau nhồi máu tim” Số LS150- Gói thầu: Cung cấp vật tư, nguyên vật 2019/HĐTM ngày liệu, kit phục vụ nhiệm vụ, nhiệm vụ: 31/12/2019 “Nghiên cứu tạo ghép tế bào từ tế bào gốc trung mô mô cuống rốn người giá thể Lunagel mơ hình chuột sau nhồi máu tim” Số 257/QPTKHCN- Về việc đề nghị nộp hồ sơ giám định HCTH ngày nhiệm vụ KH CN 24/11/2020 Quỹ phát triển KH CN 10 Số 318/QĐ-SKHCN Về việc điều chỉnh Điều Quyết định ngày 29/04/2022 số 925/QĐ-SKHCN Ngày 02/10/2019 Sở Khoa học Công Sở Khoa học Công nghệ nghệ TP HCM TP.HCM vi 11 Số 31/2022/PLHĐ- Về việc thực nhiệm vụ nghiên cứu QKHCN ngày 29 khoa học công nghệ, thống điều tháng 04 năm 2022 chỉnh khoản 1, 5, Điều Quỹ Phát triển KH Hợp đồng số 85/2019/HĐ-QPTKHCN CN 12 13 ngày 08/10/2019 Số 55/QĐ-CNSH ngày Về việc thành lập Hội đồng Khoa học 24 tháng 03 năm 2023 nghiệm thu Quy trình thuộc nhiệm vụ Trung tâm CNSH nghiên cứu khoa học công nghệ cấp TP HCM Sở Khoa học Công nghệ TP.HCM Số 57/QĐ-CNSH ngày Về việc thành lập Hội đồng Khoa học 27 tháng 03 năm 2023 nghiệm thu cấp sở nhiệm vụ nghiên Trung tâm CNSH cứu khoa học công nghệ TP HCM 14 Số 228/CNSH-ĐV Về việc đề nghị đánh giá, nghiệm thu ngày 18 tháng 04 năm nhiệm vụ KH&CN cấp Thành Phố 2023 Trung tâm Công nghệ Sinh học TP HCM 15 Số 326/ QĐ – SKHCN Về việc thành lập hội đồng tư vấn ngày 27 tháng 04 năm nghiệm thu khoa học công nghệ 2023 Sở Khoa học Công nghệ TP HCM 16 Số 382/CNSH-ĐV Về việc đề nghị giao quyền tài ngày 07 tháng 06 năm sản hình thành từ nhiệm vụ KH&CN sử 2023 Trung tâm dụng NSNN Công nghệ Sinh học TP HCM Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: vii - Lý thay đổi (nếu có): Số TT Tên tổ chức Tên tổ chức đăng ký theo tham gia thực Thuyết minh Nội dung Sản phẩm tham gia chủ chủ yếu đạt yếu Viện Sinh học Viện Sinh học - Nghiên cứu - Tạo mẫu cấy tế bào S2 dạng Nhiệt đới Nhiệt đới gốc trung mơ trịn dạng mô cuống rốn dẹt lên giá - Đánh giá thể LunaGel khả - Đánh giá sống khả mẫu S2 sống tế - Đánh giá bào giá khả thể tăng sinh - Đánh giá mẫu S2 khả tăng Vi- sinh tế Cell bào giá WST thể Công ty CP Cơng ty Hố-Dược Hố-Dược phẩm phẩm CP Cung mẫu dây rốn Mekophar/Ngân Mekophar/Ngân hàng tế bào gốc hàng tế bào gốc Mekostem cấp Mẫu dây rốn Mekostem Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: viii đạt chuẩn Ghi chú* [34] Liao H.-T., Chen C.-T and Chen J.-P (2011), "Osteogenic differentiation and ectopic bone formation of canine bone marrow-derived mesenchymal stem cells in injectable thermo-responsive polymer hydrogel", Tissue Engineering Part C: Methods, 17(11), pp.1139-1149 [35] Abd Halim, S A S., GHAFAR, N A., Jubri, Z., & Das, S (2018) Induction of myocardial infarction in experimental animals: A review Journal of Clinical & Diagnostic Research, 12(11) [36] Shin, H S., Shin, H H., & Shudo, Y (2021) Current status and limitations of myocardial infarction large animal models in cardiovascular translational research Frontiers in Bioengineering and Biotechnology, 9, 673683 [37] Cooke, K.R., Kobzik, L., Martin, T.R., Brewer, J., Delmonte, J., Crawford, J.M., Ferrara, J.L., 1996 An experimental model of idiopathic pneumonia syndrome after bone marrow transplantation: I The roles of minor H antigens and endotoxin Blood 88, 3230–9 [38] Covassin L, Laning J, Abdi R, et al., Human peripheral blood CD4 T cellengrafted non-obese diabetic-scid IL2ry null H -Ab tm1Gru Tg (human leucocyte antigen D-related 4) mice: a mouse model of human allogeneic graftversus- host disease Clinical and Experimental Immunology, 2011 doi:10.1111/j.1365-2249.2011.04462.x [39] Bui QT, Sakamoto H, Matsushita S, Hiramatsu Y, A convenient mouse model of myocardial infarction for developing countries IFMBE Proceedings 63, 2018 doi.org/10.1007/978-981-10-4361-1_10 [40] Pham LBT, Nguyen TPD, Nguyen TKO, et al., Mouse model for myocardial injury caused by ischemia BMRAT, 2014 1(5): 152-166 [41] Li Y, Higashi Y, Itabe H, Song YH, Du J, Delafontaine P Insulin-like growth factor-1 receptor activation inhibits oxLDL-induced cytochrome c release and apoptosis via the phosphatidylinositol 3-kinase/Akt signaling pathway Arterioscler Thromb Vasc Biol 2003; 23:2178–2184 146 [42] Dominici M, le Blanc K, Mueller I, Slaper-Cortenbach I, Marini FC, Krause DS, Deans RJ, Keating A, Prockop DJ, Horwitz EM (2006) Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells The International Society for Cellular Therapy position statement Cytotherapy 8:315–317 [43] Quality of biotechnological products: derivation and characterisation of cell substrates used for production of biotechnological/biological products (1998) ICH Harmonised Tripartite Guideline Developments in biological standardization, 93, 223–234 [44] lo Surdo J, Bauer SR (2012) Quantitative Approaches to Detect Donor and Passage Differences in Adipogenic Potential and Clonogenicity in Human Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells Tissue Eng Part C Methods 18:877–889 [45] Cadena-Herrera D, Esparza-De Lara JE, Ramírez-Ibez ND, LópezMorales CA, Pérez NO, Flores-Ortiz LF, Medina-Rivero E (2015) Validation of three viable-cell counting methods: Manual, semi-automated, and automated Biotechnology Reports 7:9–16 [46] Bakirci E, et al., Cell sheet based bioink for 3D bioprinting applications Biofabrication, 2017 9(2): p 024105 [47] Stefanska, K., Ozegowska, K., Hutchings, G., Popis, M., Moncrieff, L., Dompe, C., et al (2020) Human Wharton’s Jelly-cellular specificity, stemness potency, animal models, and current application in human clinical trials J Clin Med 9:1102 [48] Watson, N., Divers, R., Kedar, R., Mehindru, A., Mehindru, A., Borlongan, M C., et al (2015) Discarded Wharton jelly of the human umbilical cord: a viable source for mesenchymal stromal cells Cytotherapy 17, 18–24 147 [49] Haynesworth SE, Baber MA, Caplan AI (1996) Cytokine expression by human marrowderived mesenchymal progenitor cells in vitro: effects of dexamethasone and IL-1 alpha J Cell Physiol 166:585–592 [50] Leri A, Kajstura J, Anversa P (2005) Cardiac stem cells and mechanisms of myocardial regeneration Physiol Rev 85:1373–1416 [51] Berry MF, Engler AJ, Woo YJ, Pirolli TJ, Bish LT, Jayasankar V, Morine KJ, Gardner TJ, Discher DE, Sweeney HL (2006) Mesenchymal stem cell injection after myocardial infarction improves myocardial compliance Am J Physiol Heart Circ Physiol 290:H2196–H2203 [52] Koblizek, T I., Weiss, C., Yancopoulos, G D., Deutsch, U., & Risau, W (1998) Angiopoietin-1 induces sprouting angiogenesis in vitro Current Biology, 8(9), 529–532 doi:10.1016/s0960-9822(98)70205-2 [53] Suri, C (1998) Increased Vascularization in Mice Overexpressing Angiopoietin-1 Science, 282(5388), 468–471 doi: 10.1126/science.282.5388.468 [54] Kumamoto M, Nakashima Y, Sueishi K Intimal neovascularization in human coronary atherosclerosis: its origin and pathophysiological significance Hum Pathol 1995; 26: 450–456 [55] Bornfeldt KE, Arnqvist HJ, Norstedt G Regulation of insulin-like growth factor-I gene expression by growth factors in cultured vascular smooth muscle cells J Endocrinol 1990; 125: 381–386 [56] Nakao-Hayashi J, Ito H, Kanayasu T, Morita I, Murota S Stimulatory effects of insulin and insulin-like growth factor I on migration and tube formation by vascular endothelial cells Atherosclerosis 1992; 92: 141–149 [57] Nicosia RF, Nicosia SV, Smith M Vascular endothelial growth factor, platelet-derived growth factor, and insulin-like growth factor-1 promote rat aortic angiogenesis in vitro Am J Pathol 1994; 145: 1023–1029 148 [58] Jayasankar V, Woo YJ, Bish LT, Pirolli TJ, Chatterjee S, Berry MF, Burdick J, Gardner TJ, Sweeney HL (2003) Gene transfer of hepatocyte growth factor attenuates postinfarction heart failure Circulation 108(Suppl 1):II230– II236 149 PHỤ LỤC Bảng 0.1 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp nhuộm trypan blue Số TB Thời gian 0h 2h 4h 6h 8h 10h 12h 14h Giếng buồng Số TB buồng đếm đếm Số tế bào trung bình 6 6 6 7 7 7 7 10 7 7 9 8 10 10 9 8 150 18667 24000 26000 32000 30000 34000 34000 33333 16h 18h 20h 22h 24h 26h 28h 30h 9 8 10 10 10 10 9 8 10 7 8 6 5 6 6 4 151 35333 36667 30667 29333 28667 24667 22667 20667 Bảng 0.2 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp theo dõi trực quan hệ thống INCell Analyzer 2500 dãy giếng C Thời Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Số tế bào gian C3 C4 C5 C6 C7 C8 C9 C10 trung bình 0h 42 51 52 52 51 52 54 51 51 2h 45 54 55 56 53 53 56 54 53 4h 46 56 56 58 55 56 59 58 56 6h 49 62 57 59 56 59 62 61 58 8h 54 64 58 61 58 63 65 59 60 10h 57 65 60 63 60 65 67 59 62 12h 58 65 62 63 60 67 69 62 63 14h 59 66 64 67 61 69 71 61 65 16h 60 67 67 69 63 70 73 63 67 18h 67 81 71 73 65 75 71 60 70 20h 57 74 58 64 54 58 65 55 61 22h 57 74 55 62 50 55 62 52 58 24h 56 72 53 60 49 49 61 51 56 26h 54 63 51 60 47 47 60 51 54 28h 52 62 51 58 38 46 53 48 51 30h 47 57 49 54 34 43 52 47 49 Bảng 0.3 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp theo dõi trực quan hệ thống INCell Analyzer 2500 dãy giếng D Thời Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Số tế bào gian D3 D4 D5 D6 D7 D8 D9 D10 trung bình 52 54 55 53 54 56 48 52 53 152 63 58 58 57 58 59 52 57 58 65 64 61 64 61 62 54 62 62 68 68 67 68 64 64 63 64 66 71 72 68 72 68 67 65 65 69 10 73 76 68 74 70 64 67 67 70 12 75 78 69 76 74 66 67 67 72 14 79 80 71 76 74 69 68 63 73 16 82 83 76 77 75 63 68 67 74 18 89 86 78 80 74 66 70 64 76 20 79 79 73 70 64 54 60 57 67 22 77 77 68 67 60 52 58 53 64 24 75 76 65 66 58 50 50 52 62 26 73 70 62 65 54 50 46 51 59 28 70 68 58 63 45 43 44 49 55 30 68 65 56 57 43 41 42 48 53 Bảng 0.4 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp theo dõi trực quan hệ thống INCell Analyzer 2500 dãy giếng E Số tế bào ThờI Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng trung gian E3 E4 E5 E6 E7 E8 E9 E10 bình 0h 47 44 52 55 48 49 50 42 48 2h 51 46 54 58 51 56 53 43 52 4h 53 50 56 64 56 61 57 44 55 6h 58 53 57 69 60 64 61 46 59 8h 59 56 59 70 61 66 63 45 60 10h 63 57 61 74 65 66 63 46 62 12h 65 59 63 73 62 65 64 47 62 153 14h 66 61 66 76 64 67 66 53 65 16h 65 65 67 77 65 64 65 52 65 18h 59 66 66 80 76 70 67 58 68 20h 53 58 54 71 63 60 66 56 60 22h 50 55 52 70 58 62 65 53 58 24h 49 53 50 67 55 57 64 53 56 26h 45 52 48 66 59 58 60 52 55 28h 42 50 47 62 57 59 55 51 53 30h 41 48 45 57 55 61 54 50 51 Bảng 0.5 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp theo dõi trực quan hệ thống INCell Analyzer 2500 dãy giếng F Số tế bào Thời Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng Giếng trung gian F3 F4 F5 F6 F7 F8 F9 F10 bình 0h 53 43 45 48 46 45 53 48 48 2h 55 48 48 56 47 49 55 50 51 4h 57 49 51 57 49 53 56 53 53 6h 58 50 54 63 53 59 55 55 56 8h 60 53 57 65 59 65 60 56 59 10h 61 55 62 67 61 66 61 54 61 12h 64 54 63 69 61 65 63 52 61 14h 65 50 62 70 63 67 64 55 62 16h 63 53 58 68 66 72 70 59 64 18h 66 57 59 63 68 76 68 57 64 20h 63 48 52 62 63 64 66 52 59 22h 57 47 50 59 63 63 62 50 56 24h 56 44 49 60 58 61 62 46 55 154 26h 55 44 48 58 54 60 60 45 53 28h 52 42 48 57 56 58 59 45 52 30h 50 40 46 54 51 53 57 42 49 Bảng 0.6 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp theo dõi trực quan hệ thống INCell Analyzer 2500 Số TB Số TB Số TB Số TB trung bình trung bình trung bình trung bình dãy giếng dãy giếng dãy giếng dãy giếng Số tế bào Số C D E F trung bình 0h 51 53 48 48 50 2h 53 58 52 51 54 4h 56 62 55 53 57 6h 58 66 59 56 60 8h 60 69 60 59 62 10h 62 70 62 61 64 12h 63 72 62 61 65 14h 65 73 65 62 66 16h 67 74 65 64 68 18h 70 76 68 64 70 20h 61 67 60 59 62 22h 58 64 58 56 59 24h 56 62 56 55 57 26h 54 59 55 53 55 28h 51 55 53 52 53 30h 49 53 51 49 51 155 Bảng 0.7 Số liệu đánh giá đường cong tăng trưởng dòng tế bào hUCMSC khảo sát phương pháp đếm tế bào tự động máy đếm tế bào sử dụng kit Vi-Cell Số tế bào (x10^6) Thời Số tế bào gian Giếng Giếng Giếng trung bình 0h 0.10 0.1 0.089 96000 24h 0.2 0.25 0.25 233000 48h 0.45 0.27 0.34 353000 72h 0.43 0.41 0.43 423000 96h 0.28 0.43 0.36 357000 120h 0.53 0.5 0.45 493000 144h 0.4 0.34 0.45 397000 156 Hình 0.1 Đánh giá mức độ nhiễm khuẩn mẫu đối chứng âm Hình 0.2 Đánh giá mức độ nhiễm khuẩn mẫu đối chứng dương 157 Hình 0.3 Đánh giá mức độ nhiễm khuẩn mẫu giá thể Luna Hình 0.4 Đánh giá mức độ nhiễm khuẩn mẫu tế bào 158 Bảng 0.8 Bảng tổng hợp kết đánh giá mức độ nhiễm khuẩn Tổng C albicans P aeruginosa S aureus _ _ _ _ + + + + _ _ _ _ _ _ _ _ khuẩn ĐCA ĐCD Giá thể Luna Tấm tế bào Luna Bảng 0.9 KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG NỒNG ĐỘ cDNA ( 10/3/23) 7/3/23 GA GA 1.05 1.43 0.754 1.31 0.877 1.07 1.4 0.787 1.36 0.869 0.822 1.02 0.62 1.128 0.56 0.0306 0.02682 0.0354 0.0408 0.01221 0.03 0.02727 0.0363 0.0414 0.01374 0.02325 0.01905 0.02934 0.0324 0.00783 0.01557 0.00798 0.00474 0.01017 0.00771 0.01461 0.0078 0.00447 0.01011 0.0078 ( đợt 1) VE VE IG 159 IG SD SD AN AN NO NO HG HG GM (b) CS (b) 0.00903 0.0036 0.002127 0.00537 0.00438 0.02379 0.01965 0.01731 0.02229 0.01191 0.02259 0.01869 0.0168 0.02073 0.01278 0.0123 0.00987 0.00648 0.01044 0.00567 0.01638 0.00711 0.00528 0.0132 0.01218 0.01608 0.00765 0.00477 0.01305 0.01203 0.0117 0.00345 0.002133 0.00696 0.00555 0.01743 0.0174 0.02022 0.01596 0.00861 0.01788 0.01737 0.01959 0.01659 0.00786 0.01335 0.01071 0.01449 0.01026 0.00411 0.000582 0.000399 0.0001869 0.0002094 0.00036 0.000489 0.000462 0.0001644 0.000375 0.000363 1.368E-05 0.00001668 0.000001281 6.18E-07 2.262E-06 0.000432 0.00000801 3.45E-09 0.0000876 2.901E-05 0.0002733 0.00001983 3.45E-09 0.0000426 0.0000255 0.000318 0.00000711 3.45E-09 0.0000981 0.000051 0.000423 0.00000909 7.05E-08 0.0001008 0.0001014 0.000465 0.00000345 3.45E-09 0.0001212 0.0001017 0.000447 0.00000747 9.54E-08 0.0001182 0.0000858 160