Nghiên cứu nhân giống in vitro và bước đầu trồng thử nghiệm cây sùng thảo stachys affinis

SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC & CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ Tên đề tài: NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO VÀ BƯỚC ĐẦU TRỒNG THỬ NGHIỆM CÂY SÙNG THẢO (Stachys affinis) (Mã số: TN02/17-18) Đơn vị chủ trì nhiệm vụ: Phòng Thực nghiệm Cây Trồng Chủ nhiệm nhiệm vụ: CN Trịnh Bá Uy Cán tham gia: TS Hà Thị Loan ThS Phan Diễm Quỳnh KS Nguyễn Thị Ảnh KS Trần Nguyễn Lệ Quyên Thành phố Hồ Chí Minh, Tháng 03 năm 2019 MỤC LỤC TÓM TẮT PHẦN THÔNG TIN CHUNG VỀ NHIỆM VỤ PHẦN NỘI DUNG KHOA HỌC I ĐẶT VẤN ĐỀ Đặt vấn đề Ý nghĩa tính khoa học thực tiễn II Tổng quan tài liệu Giới thiệu Sùng Thảo (Stachys affinis) Các nghiên cứu Stachys affinis III VẬT LIỆU, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Vật liệu nghiên cứu 2.Phương pháp nghiên cứu 11 Nội dung 1: Khảo sát điều kiện nhân giống in vitro Sùng Thảo 11 Nội dung 2: Trồng khảo sát điều kiện chăm sóc Sùng Thảo điều kiện nhà màng 13 Nội dung 3: Trồng thử nghiệm Sùng Thảo vùng sinh thái khác 15 Nội dung 4: Phân tích số thành phần hóa học củ Sùng Thảo 16 IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 Nội dung 1: Khảo sát điều kiện nhân giống in vitro Sùng Thảo 17 Nội dung 2: Trồng khảo sát điều kiện chăm sóc Sùng Thảo điều kiện nhà màng 22 Nội dung 3: Trồng thử nghiệm Sùng Thảo vùng sinh thái khác 27 Nội dung 4: Phân tích số thành phần hóa học củ Sùng Thảo 29 V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 Kết luận 29 Đề nghị 30 PHẦN SẢN PHẨM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ 30 PHẦN TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 PHỤ LỤC 33 PHỤ LỤC 34 QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG CÂY SÙNG THẢO 34 PHỤ LỤC 36 THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG 36 PHỤ LỤC 37 XỬ LÍ THỐNG KÊ 37 DANH MỤC VIẾT TẮT MS: Murashige and Skoog BA: 6-benzylaminopurine NAA: Naphthalene Acetic Acid IBA: Indole-3-butyric acid KN: Kinetin TB: trung bình DANH MỤC HÌNH Hình Các phận Sùng Thảo (Nguồn: Trịnh Bá Uy) Hình Cây Sùng thảo trồng TTCNSH TP Hồ Chí Minh 10 Hình Mơ sẹo hình thành từ mẫu Sùng Thảo 18 Hình Sinh khối mơ sẹo sau tuần (a) tuần (b) 19 Hình Chồi hình thành sau tuần thí nghiệm 21 Hình Cây Sùng Thảo ni cấy môi trường tạo rễ sau tuần 22 Hình Cây Sùng Thảo sau tuần vườn ươm 23 Hình Cây Sùng Thảo trồng loại giá thể khác .25 Hình Củ Sùng Thảo sau tháng trồng loại giá thể khác 25 Hình 10 Cây Sùng Thảo sau tháng trồng sử dụng chế độ phân bón khác 26 Hình 11.Củ Sùng Thảo sau tháng trồng dùng chế độ phân bón khác .27 Hình 12.Cây Sùng Thảo trồng thử nghiệm địa điểm khác (3 tháng) 28 Hình 13 Củ Sùng Thảo thu hoạch địa điểm trồng thử nghiệm .28 Hình 14 Cây Sùng Thảo trồng Gia Nghĩa, TP Hồ Chí Minh (lụi tàn) Di Linh (sau tháng trồng) 28 Hình 15 Kết phân tích stachyose kỹ thuật HPLC-MS mẫu củ Sùng Thảo trồng Tp Hồ Chí Minh .29 DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng Khối lượng tươi mẫu thí nghiệm sau tuần nuôi cấy .18 Bảng Ảnh hưởng BA NAA đến tái sinh chồi từ mô sẹo từ Sùng Thảo .19 Bảng Ảnh hưởng BA đến hình thành chồi từ đốt thân 20 Bảng Ảnh hưởng IBA đến hình thành rễ 21 Bảng Tỉ lệ sống Sùng Thảo vườn ươm giá thể khác 23 Bảng Ảnh hưởng loại giá thể lên sinh trưởng Sùng Thảo sau tháng 24 Bảng Ảnh hưởng chế độ phân bón lên sinh trưởng Sùng Thảo 26 Bảng Tình hình sinh trưởng Sùng Thảo địa điểm trồng thử nghiệm 27 TÓM TẮT Cây Sùng Thảo (Stachys affinis) có nguồn gốc từ Trung Quốc Nhật Bản, sử dụng loại rau ăn củ có tác dụng chữa bệnh đáng ý Củ sử dụng từ lâu ăn Trung Quốc nhà hàng số nước châu Âu, củ Sùng Thảo giàu sắt (Fe2+) kali nên loại thực phẩm có lợi cho bệnh nhân tiểu đường tim mạch; đông y, Sùng Thảo sử dụng để làm thuốc trị nhiễm trùng, cảm lạnh, bệnh tim, lao viêm phổi Các nghiên cứu giới gần cho thấy củ Sùng Thảo chứa nhiều hoạt chất có hoạt tính sinh học, có tác dụng dược lí khả điều trị bệnh tiểu đường, chống ung thư, kháng viêm, kháng khuẩn, chống oxy hóa Nhiệm vụ: “Nghiên cứu nhân giống in vitro bước đầu trồng thử nghiệm Sùng Thảo (Stachys affinis)” thực nhằm hoàn thiện quy trình nhân giống chăm sóc dược liệu q này, nhiệm vụ đạt số kết sau: Đối với nhân giống in vitro: Mơi trường ½ MS bổ sung 2,5 mg/L BA thích hợp để tạo chồi từ đốt thân Sùng Thảo Môi trường ½ MS bổ sung IBA nồng độ mg/L thích hợp để tạo rễ cho Sùng Thảo in vitro Trồng Sùng Thảo nhà màng: Giá thể mụn dừa tốt để đưa in vitro vườn ươm Điều kiện trồng thích hợp cho Sùng Thảo nhà màng sử dụng giá thể 1/2 mụn dừa + tro trấu + 1/8 phân bị, sử dụng phân bón NPK 16 – 16 – Cây Sùng Thảo có khả thích nghi với khí hậu ba khu vực trồng thử nghiệm: TP Hồ Chí Minh, Gia Nghĩa – Đắk Nơng Di Linh – Lâm Đồng Kết hàm lượng stachyose phân tích 2,5 mg/g mẫu củ Sùng Thảo khơ PHẦN THƠNG TIN CHUNG VỀ NHIỆM VỤ Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu nhân giống in vitro bước đầu trồng thử nghiệm Sùng Thảo (Stachys affinis) Mã số: TN02/17-18 Đơn vị chủ trì: Phòng Thực nghiệm trồng Địa chỉ: 2374 Quốc lộ 1, phường Trung Mỹ Tây, Quận 12, Tp Hồ Chí Minh Điện thoại: 028 371596852 Đơn vị phối hợp chính: Chủ nhiệm nhiệm vụ: CN Trịnh Bá Uy Cán tham gia thực hiện: CN Trịnh Bá Uy ThS Phan Diễm Quỳnh (thành viên chính) KS Nguyễn Thị Ảnh (thành viên chính) KS Trần Nguyễn Lệ Quyên (thành viên) Cố vấn khoa học: TS Hà Thị Loan Thời gian thực hiện: 18 tháng (từ 07/2017 đến 12/2018) Kinh phí: - Tổng dự tốn: 500.000.000 VNĐ - Kinh phí sử dụng: 491.139.950 VNĐ Mục tiêu nhiệm vụ: Mục tiêu tổng quát: - Hoàn thiện quy trình nhân giống in vitro Sùng Thảo kỹ thuật canh tác điều kiện nhà màng Mục tiêu cụ thể: - Xác định điều kiện môi trường thích hợp cho q trình nhân giống in vitro Sùng Thảo - Xác định giá thể hàm lượng phân bón NPK thích hợp cho Sùng Thảo điều kiện nhà màng - Thu thập số liệu sinh trưởng phát triển Sùng Thảo vùng sinh thái khác Các nội dung công việc thực so với đăng kí: STT Nội dung đăng ký Thời gian (bắt đầu – kết thúc) Thực Đánh giá - Xác định điều kiện thích hợp nhân giống in vitro Sùng Thảo 7/2017 – 6/2018 Đã hoàn thành Đúng tiến độ - Cây vườn ươm - Xác định điều kiện thích hợp chăm sóc Sùng Thảo điều 6/2018 – 12/2018 Đã hoàn thành Đúng tiến độ kiện nhà màng Xác định khả thích nghi Sùng Thảo với vùng sinh thái 9/2018 - 02/2019 Đã hoàn thành Đúng tiến độ khác PHẦN NỘI DUNG KHOA HỌC I ĐẶT VẤN ĐỀ Đặt vấn đề Cây Sùng Thảo (Stachys affinis) loại có nguồn gốc từ Trung Quốc Nhật Bản, sử dụng loại rau ăn củ có tác dụng chữa bệnh đáng ý Củ sử dụng từ lâu ăn Trung Quốc nhà hàng số nước châu Âu giàu sắt (Fe2+) kali nên loại thực phẩm có lợi cho bệnh nhân tiểu đường tim mạch; đông y, Sùng Thảo sử dụng để làm thuốc trị nhiễm trùng, cảm lạnh, bệnh tim, lao viêm phổi Các nghiên cứu giới gần cho thấy củ Sùng Thảo chứa nhiều hoạt chất có hoạt tính sinh học, tác dụng dược lí khả điều trị bệnh tiểu đường, chống ung thư, kháng viêm, kháng khuẩn, chống oxy hóa Có thể thấy Sùng Thảo có nhiều tiềm ứng dụng, vừa làm thực phẩm có tác dụng chữa bệnh Tuy nhiên chưa trồng phổ biến Việt Nam, nguồn cung cấp giống hạn chế chưa có nghiên cứu nhân giống lồi Vì chúng tơi thực đề tài: “Nghiên cứu nhân giống in vitro bước đầu trồng thử nghiệm Sùng Thảo (Stachys affinis)” Ý nghĩa tính khoa học thực tiễn Cây Sùng Thảo có nhiều tiềm năng, sử dụng làm thực phẩm làm thuốc nhiên chưa nghiên cứu nhiều Từ kết nghiên cứu xây dựng quy trình nhân giống đảm bảo khả sản xuất cung cấp giống, thành phẩm cho thị trường chuyển giao cho đơn vị có nhu cầu II Tổng quan tài liệu Giới thiệu Sùng Thảo (Stachys affinis) Chi Stachys L với khoảng 300 loài, chi lớn họ hoa môi Chi phân bố rộng khắp giới, nhiều vùng địa lý từ Địa Trung Hải, Tây Nam Á, Bắc Nam Mỹ, Nam Phi phổ biển châu Âu Đơng Á Tên lồi bắt nguồn từ tiếng Hy Lạp có nghĩa “ Bơng trổ lúa” (an ear of grain) Nhiều loài chi sử dụng rộng rãi y học cổ truyền Bộ phận mặt đất nhiều loài sử dụng làm chất truyền nước sắc nhằm trị số bệnh viêm da, đau dày, loét, hen suyễn, đau thấp khớp ung thư (Gören, 2014) Nhiều loài chi Stachys dùng điều chế trà tự nhiên, biết đến “trà núi”, mà tin thuốc an thần, thuốc chống co thắt, thuốc lợi tiểu thuốc gây mê (Gören, 2014) Bên cạnh đó, nhiều lồi Stachys sử dụng làm thực phẩm, củ chúng nguồn carbohydrat quan trọng (Łuczaj, 2011) Trong thực tế, bột củ số lồi thêm vào bánh mì, lý nên gọi “mayday flour” Một số loài thuộc chi Stachys: Lồi S lavandulifolia Vahl Thành phần tinh dầu α-pinene, β-myrcene, 4hydroxy-4- methyl-2-pentanone, hexadecanoic acid Tác dụng dược lí Khu vực Trị bệnh dày, cảm lạnh Iran, Azerbaijan Iran S setifera C.A.Mey subsp setifera Pulegone, α-terpinyl acetate, piperitone oxide, tymol Chống viêm, ung thư, lở loét S schtschegleevii Sosn ex Grossh Germacrene D, valancene, Bicyclogermacrene, 6,10,14trimethyl pentadecanone Chống viêm, kháng khuẩn, chống Iran ung thư S byzantina K Koch S inflata Benth S officinalis (L.) Trevis Piperitenone,6,10,14,trimethyl pentadecan-2-one, tricosane Hexadecanoic acid, germacrene D, α-pinene, bicyclogermacrene, ∆-3- carene, limonene, linalool, spathulenol Germacrene D, γ-cadinene, δcadinene, caryophyllene Chống ung thư, kháng viêm Iran, Azerbaijan Chống viêm, trị nhiễm trùng thấp Azerbaijan khớp Kháng khuẩn, Serbia, Ai giảm đau đầu, căng Cập, thẳng thần kinh Montenegro Germacrene D , phenyl ethyl heptanoate, β-pinene, Z- βKháng viêm, Serbia, S germanica L Ocimene, Hexadecanoic acid, kháng khuẩn, chống Italia (Z,Z,Z)-9,12,15-ocatadecatrienoic ung thư acid Germacrene D , (+)-EKháng viêm, Serbia, caryophyllene, δ-cadinene, βS sylvatica L kháng khuẩn, chống Italia, calocerene, salvial-4(14)-en-1ung thư, co giật Kosovo, one α-pinene, β-pinene, abietatriene, S plumosa Griseb Kháng khuẩn Serbia dehydroabietane α-Phellandrene, β-Phellandrene, S yemenensis Kháng khuẩn, elemol, spathulenol, α-eudesmol, Yemen Hedge kháng nấm squalene S alopecuros (L.) (+)-caryophyllene oxide, (-) (E)- Kháng khuẩn, Hy Lạp Benth caryophyllene kháng nấm S cretica L subsp β-Caryophyllene, germacrene D, Kháng khuẩn, garana (Boiss.) Thổ Nhĩ Kỳ α-cadinene, spathulenol kháng nấm Rech.f β-Caryophyllene, germacrene D, S cretica L subsp Kháng khuẩn, α-cadinene, spathulenol, Thổ Nhĩ Kỳ lesbiaca Rech.f kháng nấm caryophyllene oxide Cây Sùng Thảo Stachys affinis Bunge (S sieboldii Miquel), biết đến “Atiso Trung Quốc”, dạng thảo mộc có nguồn gốc Trung Quốc Nhật Bản, nơi mà trồng rộng rãi để sử dụng củ làm thực phẩm Cây trồng châu Âu từ kỉ 19 (Łuczaj et al., 2011) Ở Italy, gọi “Tuberina” Ở Pháp biết đến với tên “Crosnes”, trồng tỉnh Essonne từ năm 1882 Vào cuối kỷ 20, Stachys affinis bị lãng quên châu Âu, gần lại trở nên thịnh hành trở lại theo xu hướng quốc tế nghiên cứu đánh giá lại này, lại bán rộng rãi thị trường sử dụng để chế biến ăn disorders in experimental diabetes mellitus, Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 144, 53-56 18 Xie Z Y, Qin M Z, Fang Y L, 2005, The pharmacological activity of 8-Oacetylharpagide, World Notes Plant Medica, 20, 56–58 19 Yamahara J, Kitani T, Kobayashi H, Kawahara Y, 1990, Studies on Stachys sieboldii MIQ II Anti-anoxia action and the active constituents, Yakugaku Zasshi, 110(12), 932-5 20 Zaidan M Z, Noor Rain A, Badrul A R, Adlin A, Norazah A, Zakiah I, 2005, In vitro screening of five local medicinal plants for antibacterial activity using disc diffusion method, Trop Biomed, 22 (2), 165-70 21 Ziba B, Mohammad H M and Ali S, 2015, In vitro callus induction and micropropagation of Thymus persicus (Lamiaceae), an endangered medicinal plant, Crop Breeding and Applied Biotechnology 16: 48-54 ………, ngày tháng năm 20 ………, ngày tháng năm 20 Đơn vị chủ trì thực KT Chủ nhiệm đề tài ………, ngày tháng năm 20 ………, ngày tháng năm 20 Phó Giám đốc phụ trách Phòng QLKH-HTQT ………, ngày tháng năm 20 Giám đốc 32 PHỤ LỤC TÌNH HÌNH SỬ DỤNG KINH PHÍ Đơn vị: đồng Kinh phí năm Tổng kinh phí Nội dung STT chi (1) Năm 2017 khoản (2) Công lao động Được giao Tỷ lệ giải Năm 2018 ngân (%) Đã sử dụng Được giao Đã sử dụng Được giao Đã sử dụng (5) (6) (7) (8) (3) (4) = (5) + (7) = (6) + (8) (9) 197.649.900 197.649.900 99.861.300 99.861.300 97.788.600 97.788.600 100 267.436.200 258.575.700 142.417.700 142.417.700 125.018.500 116.158.000 96,7 34.913.900 34.913.900 7.721.000 7.721.000 27.192.900 27.192.900 100 250.000.000 250.000.000 250.000.000 241.139.950 98,2 = (4) / (3) Nguyên, vật liệu, lượng Thiết bị, máy móc (nêu có) Chi khác Tổng cộng 33 PHỤ LỤC QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG CÂY SÙNG THẢO Từ kết thực đề tài “Nghiên cứu nhân giống in vitro bước đầu trồng thử nghiệm Sùng Thảo (Stachys affinis)”, chúng tơi tiến hành xây dựng quy trình nhân giống Sùng Thảo Quy trình nhân giống in vitro Sùng Thảo Đoạn thân có mang chồi nách - Khử trùng ethanol 70% 30 giây, rửa nước cất Lắc với javen loãng tỷ lệ javen:5 nước, rửa với nước cất - Cấy vào môi trường MS + 30g/L đường succrosose + 8,5 g/L a gar Cây in vitro Cây Sùng Thảo in vitro cắt thành đoạn nhỏ gồm đốt thân, cấy mơi trường ½MS bổ sung 2,5 mg/L BA, thời gian tuần Chồi Tạo rễ môi trường môi trường ½ MS bổ sung IBA nồng độ mg/L Thời gian tuần Cây hồn chỉnh 34 Quy trình trồng Sùng Thảo nhà màng Cây hoàn chỉnh - Để nhà màng (nơi mát) ngày - Loại bỏ agar, xử lý nấm, kích rễ - Giâm giá thể mụn dừa, sử dụng phân bón NPK 20 – 10 – 10 với liều lượng 3g/L, 10 ml/ cây/ ngày - Thời gian tuần Cây cao - cm, có đầy đủ rễ, thân, thật - Chuyển sang trồng chậu ϕ 12 cm, sử dụng giá thể 1/2 mụn dừa + tro trấu + 1/8 phân bò - Tưới nước lần/ ngày, 100 ml/ lần bơm - Phân bón NPK 16 – 16 – sử dụng 10 ngày/lần, lần 1g/ - Thời gian - tháng Thu hoạch củ - 35 PHỤ LỤC THÀNH PHẦN MÔI TRƯỜNG Khống vi lượng MS ½ MS mg/L mg/L CoCl2.6H2O 0,025 0,0125 CuSO4.5H2O 0,025 0,0125 FeNaEDTA 36,70 18,35 H3BO3 6,20 3,10 KI 0,83 0,415 16,90 8,45 Na2MoO4.2H2O 0,25 0,125 ZnSO4.7H2O 8,60 4,30 MnSO4.H2O Khoáng đa lượng mg/L mg/L CaCl2 332,02 166,01 KH2PO4 170,00 85,00 KNO3 1900,00 950,00 MgSO4 180,54 90,27 NH4NO3 1650,00 825,00 Vitamins mg/L Glycine mg/L 2,00 1,00 100,00 50,00 Nicotinic acid 0,50 0,25 Pyridoxine HCl 0,50 0,25 Thiamine HCl 0,10 0,05 myo-Inositol 36 PHỤ LỤC XỬ LÍ THỐNG KÊ Nội dung 1: Khảo sát điều kiện nhân giống in vitro Sùng Thảo Thí nghiệm 1: Khối lượng mô sẹo ANOVA KL Sum of Squares df Mean Square F Sig, Between Groups Within Groups Total 199,456 11 2,583 24 202,039 35 KL 18,132 168,499 ,108 Duncan Subset for alpha = 0,05 NT 11 10 12 Sig, N 3 3 3 3 3 3 ,6433 ,7000 ,7000 3,9233 4,0000 4,8900 4,9467 5,1033 5,3533 6,0067 7,0333 ,844 ,777 ,125 37 1,000 8,0500 1,000 1,000 ,000 Thí nghiệm 2a: Số chồi ANOVA SOCHOI Sum of Squares Between Groups Within Groups Total Duncan df 2071,220 53,760 2124,980 SOCHOI Mean Square 14 20 F 345,203 3,840 Sig, 89,897 ,000 Subset for alpha = 0,05 NT N 1,0000 8,4000 3 14,1000 16,6333 25,1333 28,0000 28,0000 29,9333 Sig, 1,000 1,000 ,136 ,095 ,247 Means for groups in homogeneous subsets are displayed, Khối lượng khô ANOVA Sinhkhoi Sum of Squares df Mean Square Between Groups Within Groups Total Duncan 2,914 ,026 2,940 Sinhkhoi 14 20 F Sig, ,486 259,510 ,002 Subset for alpha = 0,05 NT N ,5433 1,3133 1,4133 1,5167 3 1,5833 Sig, 1,000 1,000 1,000 ,080 Means for groups in homogeneous subsets are displayed, 38 1,5833 1,6500 ,080 1,7467 1,000 ,000 Thí nghiệm 3: Chiều cao ANOVA Chieucao Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df 7,461 ,338 7,799 Chieucao Mean Square 11 F Sig, 2,487 58,805 ,042 ,000 Duncan Subset for alpha = 0,05 NT N 5,6500 6,2000 3 6,9833 7,7333 Sig, 1,000 1,000 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed, Số rễ ANOVA So re Sum of Squares df Mean Square F Between Groups Within Groups Total Duncan So re 40,244 4,715 44,959 11 13,415 22,761 ,589 Subset for alpha = 0,05 NT N 3 7,6167 8,4500 3 10,2600 12,3833 Sig, ,220 1,000 1,000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed, 39 Sig, ,000 Chiều dài rễ ANOVA Dai re Sum of Squares Between Groups Within Groups Total 12,345 1,212 13,557 Mean Square df 11 4,115 ,151 F 27,169 Dai re Duncan Subset for alpha = 0,05 NT N 6,3333 3 8,1833 8,7833 8,8333 Sig, 1,000 ,085 Means for groups in homogeneous subsets are displayed, 40 Sig, ,000 Nội dung 2: Trồng khảo sát điều kiện chăm sóc Sùng Thảo điều kiện nhà màng Thí nghiệm 2: Tỉ lệ sống ANOVA SLCS Sum of Squares df Mean Square F Sig, Between Groups Within Groups Total Chiều cao ,405 ,678 1,083 ,202 1,791 ,113 ,246 ANOVA Chieucao Sum of Squares df Mean Square F Sig, Between Groups Within Groups Total 32,862 16,431 5,278 ,048 18,680 3,113 51,542 Multiple Comparisons Dependent Variable: Chieucao (J) (I) NT NT LSD Mean Difference (IJ) 95% Confidence Interval Std, Error * Lower Sig, Bound Upper Bound -4,26667 1,44068 ,025 -7,7919 -,7415 -,46667 1,44068 ,757 -3,9919 3,0585 * 4,26667 1,44068 ,025 ,7415 7,7919 * 3,80000 1,44068 ,039 ,2748 7,3252 ,46667 1,44068 ,757 -3,0585 3,9919 ,039 -7,3252 -,2748 * Số nhánh cấp -3,80000 1,44068 ANOVA Sonhanh Sum of Squares Between Groups Within Groups Total Mean Square df 11,287 1,973 13,260 F 5,643 17,159 ,329 41 Sig, ,003 Multiple Comparisons Dependent Variable:Sonhanh (I) NT (J) NT 95% Confidence Interval Mean Difference (I-J) Std, Error Lower Bound Sig, Upper Bound -1,16667 * ,46825 ,047 -2,3124 -,0209 1,56667 * ,46825 ,016 ,4209 2,7124 1,16667 * ,46825 ,047 ,0209 2,3124 2,73333 * ,46825 ,001 1,5876 3,8791 -1,56667 * ,46825 ,016 -2,7124 -,4209 -2,73333 ,46825 ,001 -3,8791 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, -1,5876 LSD 3 * Số củ ANOVA SOCU Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square F 617,242 308,621 10,665 173,633 28,939 790,876 Multiple Comparisons Sig, ,011 Dependent Variable:SOCU (I) NT LSD (J) NT Mean Std, Difference (I-J) Error 95% Confidence Interval Sig, Lower Bound Upper Bound -1,26667 4,39233 ,783 -12,0143 9,4810 16,90000* 4,39233 ,008 6,1523 27,6477 1,26667 4,39233 ,783 -9,4810 12,0143 18,16667* 4,39233 ,006 7,4190 28,9143 -16,90000* 4,39233 ,008 -27,6477 -6,1523 -28,9143 -7,4190 -18,16667* 4,39233 ,006 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, 42 Khối lượng củ ANOVA Khoiluong Sum of Squares Between Groups Within Groups Total Mean Square df 659,849 F 329,924 71,833 Sig, 27,557 ,001 11,972 731,682 Multiple Comparisons Dependent Variable:Khoiluong 95% Confidence Interval (J) Mean Std, Error Sig, NT Difference (I-J) Lower Bound Upper Bound LSD -8,06667* 2,82515 ,029 -14,9796 -1,1538 * 12,73333 2,82515 ,004 5,8204 19,6462 * 8,06667 2,82515 ,029 1,1538 14,9796 * 20,80000 2,82515 ,000 13,8871 27,7129 * -12,73333 2,82515 ,004 -19,6462 -5,8204 -20,80000* 2,82515 ,000 -27,7129 -13,8871 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, (I) NT Đường kính gốc ANOVA DK Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square ,327 ,163 ,353 ,680 ,059 F 2,774 Sig, ,140 Thí nghiệm 3: Tỉ lệ sống ANOVA TLCS Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 403,159 201,580 202,841 606,001 33,807 43 F 5,963 Sig, ,038 Multiple Comparisons Dependent Variable:TLCS (I) NT (J) NT 95% Confidence Interval Mean Difference (I-J) Std, Error Sig, Lower Bound Upper Bound -12,10887* 4,74741 ,043 -23,7254 -,4924 3,51693 4,74741 ,487 -8,0996 15,1334 12,10887 * 4,74741 ,043 ,4924 23,7254 15,62581* 4,74741 ,017 4,0093 27,2423 -3,51693 4,74741 ,487 -15,1334 8,0996 -15,62581* 4,74741 ,017 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, -27,2423 -4,0093 LSD Chiều cao ANOVA Chieucao Sum of Squares df Mean Square Between Groups Within Groups Total F 25,307 12,653 14,353 2,392 39,660 Multiple Comparisons Dependent Variable:Chieucao ,047 95% Confidence Interval (J) NT -3,13333* 1,26286 ,048 -6,2234 -,0432 ,73333 1,26286 ,583 -2,3568 3,8234 3,13333* 1,26286 ,048 ,0432 6,2234 3,86667* 1,26286 ,022 ,7766 6,9568 -,73333 1,26286 ,583 -3,8234 2,3568 -3,86667* 1,26286 ,022 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, Số nhánh cấp ANOVA sonhanh Sum of Squares df Mean Square -6,9568 -,7766 Between Groups Within Groups Total Std, Error 5,289 (I) NT LSD Mean Difference (I-J) Sig, Sig, Lower Bound Upper Bound 4,916 2,458 2,380 ,397 7,296 Multiple Comparisons 44 F 6,196 Sig, ,035 Dependent Variable:sonhanh (I) NT LSD (J) NT 95% Confidence Interval Mean Difference Std, (I-J) Error Sig, Lower Bound Upper Bound -1,80000* ,51424 ,013 -3,0583 -,5417 -1,06667 ,51424 ,083 -2,3250 ,1916 1,80000* ,51424 ,013 ,5417 3,0583 ,73333 ,51424 ,204 -,5250 1,9916 1,06667 ,51424 ,083 -,1916 2,3250 -1,9916 ,5250 -,73333 ,51424 ,204 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, Số lượng củ ANOVA SOCU Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square 86,087 49,753 135,840 F 43,043 8,292 Sig, 5,191 ,049 Multiple Comparisons Dependent Variable:SOCU (I) NT (J) Mean NT Difference (I-J) Std, Error Sig, 95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound * 2,35120 ,022 -12,9865 -1,4802 -5,56667 2,35120 ,056 -11,3198 ,1865 * 2,35120 ,022 1,4802 12,9865 1,66667 2,35120 ,505 -4,0865 7,4198 5,56667 2,35120 ,056 -,1865 11,3198 -1,66667 2,35120 ,505 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, -7,4198 4,0865 LSD -7,23333 7,23333 Khối lượng củ ANOVA khoiluong Sum of Squares Between Groups Within Groups Total 27,069 8,913 35,982 df Mean Square 45 13,534 1,486 F 9,111 Sig, ,015 Multiple Comparisons Dependent Variable:khoiluong LSD Mean Difference (I-J) Std, Error 95% Confidence Interval (I) NT (J) NT -4,16667* ,99517 ,006 -6,6018 -1,7316 -1,36667 ,99517 ,219 -3,8018 1,0684 3 Sig, Lower Bound Upper Bound 4,16667 * ,99517 ,006 1,7316 6,6018 2,80000 * ,99517 ,031 ,3649 5,2351 1,36667 ,99517 ,219 -1,0684 3,8018 -5,2351 -,3649 * -2,80000 ,99517 ,031 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, Đường kính gốc ANOVA DK Sum of Squares df Mean Square Between Groups Within Groups Total 1,269 ,373 1,642 Multiple Comparisons F ,634 ,062 10,196 Sig, ,012 Dependent Variable:DK Mean Difference (I-J) 95% Confidence Interval (I) NT (J) NT -,16667 ,20367 ,444 -,6650 ,3317 ,70000* ,20367 ,014 ,2016 1,1984 ,16667 ,20367 ,444 -,3317 ,6650 ,86667* ,20367 ,005 ,3683 1,3650 -,70000* ,20367 ,014 -1,1984 -,2016 -,86667* ,20367 ,005 *, The mean difference is significant at the 0,05 level, -1,3650 -,3683 LSD Std, Error 46 Sig, Lower Bound Upper Bound