Nghiên cứu công nghệ chế tạo các hệ nano chứa cao dược chất ứng dụng làm thuốc chống ung thư hướng đích

ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN KHOA HỌC VẬT LIỆU ỨNG DỤNG CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU CÔNG NGHỆ CHẾ TẠO CÁC HỆ NANO CHỨA CAO DƢỢC CHẤT ỨNG DỤNG LÀM THUỐC CHỐNG UNG THƢ HƢỚNG ĐÍCH Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: VIỆN KHOA HỌC VẬT LIỆU ỨNG DỤNG Chủ nhiệm nhiệm vụ: GS TS Nguyễn Cửu Khoa Thành phố Hồ Chí Minh - 2022 ỦY BAN NHÂN DÂN THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN KHOA HỌC VẬT LIỆU ỨNG DỤNG CHƢƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU CÔNG NGHỆ CHẾ TẠO CÁC HỆ NANO CHỨA CAO DƢỢC CHẤT ỨNG DỤNG LÀM THUỐC CHỐNG UNG THƢ HƢỚNG ĐÍCH (Đã chỉnh sửa theo kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày 30/06/2022) Chủ nhiệm nhiệm vụ Nguyễn Cửu Khoa Cơ quan chủ trì nhiệm vụ Thành phố Hồii Chí Minh- 2022 VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN KHOA HỌC VẬT LIỆU ỨNG DỤNG CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc TP HCM, ngày 26 tháng 09 năm 2022 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu công nghệ chế tạo hệ nano chứa cao dƣợc chất ứng dụng làm thuốc chống ung thƣ hƣớng đích Thuộc: Chương trình/lĩnh vực (tên chương trình/lĩnh vực): Y dược; Kỹ thuật Công nghệ Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: Nguyễn Cửu Khoa Ngày, tháng, năm sinh: 30/04/1960 Nam/ Nữ: Nam Học hàm, học vị: Giáo sư, Tiến sĩ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên cao cấp Điện thoại: Tổ chức: (028)3-838919922 Chức vụ: Nhà riêng: Mobile: 0903866634 Fax: (028)3-838919995 E-mail: nckhoavnn@yahoo.com Tên tổ chức công tác: Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng Địa tổ chức: 01B TL29, phường Thạnh Lộc, quận 12, TP Hồ Chí Minh Địa nhà riêng: 68/10A Trần Quang Khải, quận 1, TP Hồ Chí Minh Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng Điện thoại: (028).38243507 Fax: (028)3-838919995 E-mail: vanthu@iams.vast.vn iii Website: http://www.iams.ac.vn Địa chỉ: 01B đường TL29, phường Thạnh Lộc, quận 12, TP Hồ Chí Minh Họ tên thủ trưởng tổ chức: PGS.TS Trần Ngọc Quyển Số tài khoản: 3713.1.1056841.00000 Kho bạc: Kho bạc Nhà nước Quận 1, TP Hồ Chí Minh Cơ quan chủ quản đề tài : Viện Hàn lâm Khoa học Cơng nghệ Việt Nam II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: từ tháng 12 năm 2019 đến tháng 12 năm 2021 - Thực tế thực hiện: từ tháng 12 năm 2019 đến tháng 06 năm 2022 - Được gia hạn: - Lần từ tháng 12 năm 2021 đến tháng 06 năm 2022 Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 7.163,966 tr.đ, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 6.480 tr.đ + Kinh phí từ nguồn khác: 683,966 tr.đ b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Theo kế hoạch Thời gian Kinh phí Số (Tháng, (Tr.đ) TT năm) 12/2019 3.240 01/2021 2.592 12/2021 648 Thực tế đạt Thời gian Kinh phí (Tháng, năm) (Tr.đ) 12/2020 5/2022 5/2022 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với đề tài: iv 3.240 2.592 565,7529 Ghi (Số đề nghị tốn) 2.592 565,7529 Đơn vị tính: Triệu đồng Số TT Nội dung khoản chi Trả công lao động (khoa học, phổ thông) Nguyên, vật liệu, lượng Dịch vụ thuê ngồi phục vụ nghiên cứu Văn phịng phẩm, in ấn Chi hội đồng tư vấn Theo kế hoạch Tổng Nguồn khác NSKH Tổng NSKH Nguồn khác 1.763,93383 1.479,96783 283,966 1.763,93383 1.479,96783 283,966 3.900,585 3.900,585 3.787,2879 3.787,2879 1.244,08 844,08 400 1.244,08 844,08 400 10,01717 10,01717 10,01717 10,01717 5,35 5,35 5,35 5,35 0 0 0 0 0 0 40 40 40 40 200 200 200 200 7.163,966 6.474,65 683,966 7.050,6689 6.366,7029 683,966 Thiết bị, máy móc Xây dựng, sửa chữa nhỏ Chi khác Chi quản lý chung nhiệm vụ KH&CN Tổng cộng Thực tế đạt - Lý thay đổi (nếu có): Các văn hành q trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ công đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) Số TT Số, thời gian ban hành văn Quyết định số 1301/QĐ-SKHCN ngày 25 tháng 12 năm 2019 Hợp đồng số 123/2019/HĐQPTKHCN ngày 26 tháng 12 năm 2019 Tên văn Quyết định Sở Khoa học Công nghệ việc phê duyệt nhiệm vụ khoa học công nghệ Hợp đồng thực nhiệm vụ nghiên cứu khoa học công nghệ Quỹ phát triển khoa học công nghệ thành phố Hồ Chí Minh Viện Khoa học Vật liệu Ứng dụng việc thực v Ghi nhiệm vụ nghiên cứu khoa học công nghệ ―Nghiên cứu công nghệ chế tạo hệ nano chứa cao dược chất ứng dụng làm thuốc chống ung thư hướng đích‖ Cơng văn số Cơng văn việc gia hạn thời gian 2172/SKHCNthực nhiệm vụ khoa học công QLKH ngày 19 nghệ tháng 10 năm 2021 Phụ lục Số: Phụ lục Hợp đồng thực nhiệm vụ 101/2021/PLHĐNghiên cứu khoa học công nghệ QKHCN Số: 101/2021/PLHĐ-QKHCN Công văn số Công văn v/v đề nghị nộp hồ sơ 123/QKHCNnghiệm thu nhiệm vụ khoa học HCTH công nghệ Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức Tên tổ chức Nội dung Sản phẩm Ghi đăng ký theo tham gia tham gia chủ chủ yếu đạt chú* Thuyết minh thực yếu Công ty TNHH Công ty Công nghệ cao TNHH Công Nội dung Nội dung Sinh Hóa Dược nghệ cao Sinh 1,2,3,4,6,8,10 1,2,3,4,6,8,10 Hóa Dược - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, không 10 người kể chủ nhiệm) vi Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Tên cá nhân Nội dung tham gia Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi tham gia chú* thực Nguyễn Nguyễn Cửu Cửu Khoa Khoa Nguyễn Đại Hải Nguyễn Đại Hải Võ Nguyễn Đăng Khoa Nguyễn Võ Nguyễn Đăng Khoa Nguyễn - Tách chiết, nâng cao hàm lượng dược chất cao nguyên liệu - Nghiên cứu chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) - Khảo sát khả hướng đích nano cao dược liệu - Nâng cấp xây dựng quy trình cơng nghệ quy mơ pilot - Báo cáo tổng kết nghiệm thu đề tài - Khảo sát khả hướng đích nano cao dược liệu - Đánh giá độ ổn định thời gian bảo quản sản phẩm phương pháp lão hóa cấp tốc - Báo cáo tổng kết nghiệm thu đề tài Quy trình tách chiết, nâng cao hàm lượng dược chất cao nguyên liệu, quy trình chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA), báo cáo khả hướng đích, quy trình quy mô pilot viết báo cáo nghiệm thu Báo cáo khả hướng đích, thời gian bảo quản thuốc viết báo cáo nghiệm thu Quy trình cơng nghệ - Nâng cấp xây dựng quy mô pilot quy trình cơng nghệ quy mơ pilot - Đánh giá độ ổn định Báo cáo tuổi thọ cua vii Thị Thịnh Thị Thịnh Hoàng Hoàng Ngọc Ngọc Anh Anh thời gian bảo quản sản phẩm phương pháp lão hóa cấp tốc - Xây dựng hồ sơ tiêu chuẩn sở cho sản phẩm - Khảo sát khả hướng đích nano cao dược liệu - Sản xuất lô số Nguyễn Công Hào Nguyễn Cơng Hào Đặng Chí Hiền - Nghiên cứu chế tạo hệ Đặng nano liposome hướng Chí Hiền đích với tác nhân Folic acid (FA) Lê Tiến Dũng Lê Tiến Dũng - Tách chiết, nâng cao hàm lượng dược chất cao nguyên liệu Nguyễn Thị Kim Phượng Nguyễn Thị Kim Phượng - Nghiên cứu điều chế hệ hệ Nano từ cao dược liệu 10 Huỳnh Ngọc Trinh Huỳnh Ngọc Trinh - Nghiên cứu chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) - Xác định thành phần cấu trúc, tính chất hóa lý, độc tính cấp, độc tính bán cấp nano cao dược liệu 11 Nguyễn Ngọc Vinh Nguyễn Ngọc Vinh thuốc Bộ hồ sơ tiêu chuẩn sở sản phẩm Báo cáo khả hướng đích viên nang sản xuất lơ số - Bản báo cáo quy trình chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) - Bản báo cáo quy trình Tách chiết, nâng cao hàm lượng dược chất cao nguyên liệu - Quy trình điều chế hệ hệ Nano từ cao dược liệu Quy trình chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA), báo cáo thành phần cấu trúc, tính chất hóa lý, độc tính cấp, độc tính bán cấp nano cao dược liệu - Khảo sát độc tính - Báo cáo kết in tế bào ung thư in vitro, vitro, in vivo in vivo hệ nano hệ nano liposome, viii 12 13 Nguyễn Phương Dung Trần Mạnh Hùng Nguyễn Phương Dung Trần Mạnh Hùng 14 Trần Thị Trần Thị Thùy Thùy Linh Linh 15 Nguyễn Minh Hiền Nguyễn Minh Hiền Nguyễn Thị Phương Phạm Nguyên Nguyễn Thị Phương Phạm Nguyên 16 17 liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu - Khảo sát độc tính tế bào ung thư in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu - Nghiên cứu chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) - Xác định thành phần cấu trúc, tính chất hóa lý, độc tính cấp, độc tính bán cấp nano cao dược liệu - Khảo sát độc tính tế bào ung thư in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu - Khảo sát độc tính tế bào ung thư in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu - Nghiên cứu điều chế hệ hệ Nano từ cao dược liệu - Xây dựng hồ sơ tiêu chuẩn sở cho sản ix liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu - Báo cáo kết in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu Quy trình chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA), báo cáo thành phần cấu trúc, tính chất hóa lý, độc tính cấp, độc tính bán cấp nano cao dược liệu Báo cáo kết in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu Báo cáo kết in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu Báo cáo quy trình điều chế hệ hệ Nano từ cao dược liệu Bộ hồ sơ Tiêu chuẩn sở sản 18 19 20 21 22 23 Đông Yên Đông Yên Nguyễn Nguyễn Vũ Duy Vũ Duy Khang Khang Nguyễn Nguyễn Thị Thị Phương Phương Anh Anh Lê Nguyễn Tường Vi Lê Nguyễn Tường Vi Đặng Thị Lệ Hằng Đặng Thị Lệ Hằng Nguyễn Xuân Cường Quách Tòng Hưng Nguyễn Xuân Cường Quách Tòng Hưng phẩm phẩm - Xây dựng hồ sơ tiêu chuẩn sở cho sản phẩm - Nghiên cứu chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) Bộ hồ sơ Tiêu chuẩn sở sản phẩm Quy trình chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) Báo cáo quy trình tách chiết, nâng cao hàm lượng dược chất cao nguyên liệu kết tuổi thọ thuốc phương pháp lão hóa cấp tốc - Tách chiết, nâng cao hàm lượng dược chất cao nguyên liệu - Đánh giá độ ổn định thời gian bảo quản sản phẩm phương pháp lão hóa cấp tốc - Nghiên cứu chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA) - Xác định thành phần cấu trúc, tính chất hóa lý, độc tính cấp, độc tính bán cấp nano cao dược liệu - Khảo sát khả hướng đích nano cao dược liệu - Nâng cấp xây dựng quy trình cơng nghệ quy mơ pilot - Nghiên cứu điều chế hệ hệ Nano từ cao dược liệu x Quy trình chế tạo hệ nano liposome hướng đích với tác nhân Folic acid (FA), báo cáo thành phần cấu trúc, tính chất hóa lý, độc tính cấp, độc tính bán cấp khả hướng đích nano cao dược liệu Quy trình cơng nghệ quy mơ pilot Quy trình điều chế hệ hệ Nano từ cao dược liệu viên nang liệu tinh chế cho tính ổn định sinh lý hóa cao an tồn thử nghiệm độc tính cấp, bán cấp Khảo sát độc tính tế bào ung thư in vitro, in vivo hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu Kết in vitro cho thấy mẫu NLG NLG-FA biểu hoạt tính dòng tế bào ung thư gan (HepG2) Mẫu NLR NLR-FA biểu hoạt tính dịng tế bào ung thư phổi (A549) Mẫu NLC NLC-FA biểu hoạt tính dịng tế bào ung thư vú (MCF-7) Kết nghiên cứu sàng lọc tác dụng chống ung thư mẫu thử MF, MS, MQ uống 14 tuần liên tục mơ hình gây ung thư DMBA liều mg/tuần uống tuần cho thấy: trọng lượng tất lơ nghiên cứu có gia tăng so với thời điểm trước phơi nhiễm với DMBA, khác biệt chưa có ý nghĩa thống kê so sánh lô nghiên cứu Tỷ lệ chuột xuất tổ chức nghi ngờ khối u lô chuột uống thuốc thử có xu hướng giảm so với lơ mơ hình So sánh với tỷ lệ chuột xuất u lơ mơ hình 6/13 (46,15%), tỷ lệ thấp lô uống NLG, cụ thể tỷ lệ lô NLG liều thấp 20%, giảm 2,3 lần so với lơ mơ hình, số 0% nghĩa khơng có chuột bị phát có khối u lơ uống NLG liều cao Bên cạnh việc làm ngăn chặn xuất u, mẫu thuốc thử làm giảm tổng số lượng u cá thể bị ung thư Quan sát đại thể mổ chuột lô mơ hình nghi ngờ 06 tổ chức khối u, hình ảnh vi thể xác định có 03 mẫu bệnh phẩm ung thư Ở lô uống thuốc thử, ngoại trừ lơ uống NLG khơng có tổ chức nghi ngờ khối u, số lượng mẫu bệnh phẩm cần làm xét nghiệm vi thể để xác định ung thư dao động từ 03 đến 07, kết phát 01 tổ chức ung thư giải phẫu bệnh phần lớn lô trị Từ kết nghiên cứu nhận thấy, mẫu thuốc thử uống liên tục 14 tuần bắt đầu thể tác dụng chống ung thư chuột nhắt trắng bị gây ung thư DMBA liều mg/tuần uống tuần thông qua khả làm giảm tỷ lệ chuột chết, giảm tỷ lệ chuột 327 xuất khối u số lượng tổ chức nghi ngờ khối u cá thể phơi nhiễm với tác nhân gây ung thư Mẫu thử NLG (nano liposome cao gừng tinh chế) thể hiệu tốt so với mẫu thuốc thử khác - Khảo sát khả hướng đích tới tế bào ung thư hệ nano liposome, liposome-FA hướng đích chứa cao dược liệu:  Dùng nồng độ DIlC18 mg/mL liposome để nhuộm hạt liposome  Tỷ lệ sống MCF7 điều kiện nuối cấy 2D đạt 90% so sánh với dòng MCF7 ni cấy mơi trường DMEM  Liposome-Tween-EDA-FA hướng đích cho thấy khả xâm nhập vào tế bào MCF7 tốt so với Liposome - Nâng cấp xây dựng quy trình cơng nghệ quy mơ pilot Các quy trình có tính ổn định ứng dụng quy mô công nghiệp - Đánh giá độ ổn định thời gian bảo quản sản phẩm phương pháp lão hóa cấp tốc Kết đạt cho thấy bảo quản điều kiện thử nghiệm không làm thay đổi kết định lượng hợp chất sản phẩm Các sản phẩm có tuổi thọ cao, sản phẩm viên nang sau đóng gói vào lọ kín bảo quản nhiệt độ phòng - Xây dựng hồ sơ tiêu chuẩn sở cho 11 sản phẩm dựa theo Dược điển Việt Nam V thông tư 27/2007-BKHCN hướng dẫn xây dựng tiêu chuẩn - Sản xuất lô số với sản phẩm thử nghiệm 180.000 viên nang 4.2 KIẾN NGHỊ Kết thực từ đề tài cho thấy hạt nano liposome có kích thước trung bình từ 100-200 nm hiệu mang cao dược liệu cao Quan trọng hơn, nghiên cứu thành công nâng quy mô kg/mẻ thử nghiệm in vivo động vật Trong đó, độc tính cấp bán cấp sản phẩm nằm ngưỡng an toàn, mẫu thử hệ nano liposome/nano liposome gắn tác nhân hướng đích mang cao dược liệu tinh chế khơng gây độc 328 tính cấp chuột nhắt trắng theo đường uống liều tối đa 8000 mg/kg chuột với mẫu nano liposome/nano liposome-FA hướng đích mang cao rong nâu tinh chế liều tối đa 1200 mg/kg chuột với mẫu nano liposome/nano liposome-FA hướng đích mang cao gừng tinh chế mẫu cao cần tây tinh chế Cả mẫu thử nghiệm không ảnh hưởng đến phát triển trọng lượng chuột, không biến đổi số huyết học hồng cầu, tiểu cầu hàm lượng Hemoglobin, số đánh giá chức gan, thận giới hạn bình thường Các mẫu thử nghiệm không gây biến đổi tổ chức học tế bào gan, thận chuột nghiên cứu Như vậy, sản phẩm có tác dụng in vitro, in vivo mơ hình nghiên cứu khơng có biểu độc tính cấp, độc tính bán cấp đường uống Đồng thời đề tài xây dựng hồ sơ tiêu chuẩn sở cho sản phẩm Tuy nhiên, để đánh giá đầy đủ hiệu nhằm ứng dụng điều trị lâm sàng, nhóm nghiên cứu xin đề xuất nội dung sau: - Nghiên cứu khả chọn lọc hệ chất mang gắn tác nhân hướng đích số dòng tế bào ung thư khác Hela Hep2 - Nghiên cứu tác dụng hướng đích hệ nano liposome mang cao dược liệu tinh chế - Mẫu nano liposome mang cao gừng tinh chế liều 100-200 mg/kg có tác dụng giảm glucose máu sau tháng mẫu nano liposome/nano liposome-FA hướng đích chứa cao cần tây bổ sung quercetin liều 300-400 mg/kg làm giảm triglyceride điển hình so chứng sau tháng so với nhóm chứng, nằm ngưỡng bình thường chuột Do đó, chúng tơi đề xuất nghiên cứu hệ nano liposome mang cao dược liệu bệnh đái tháo đường tim mạch - Tiến hành thêm nghiên cứu đánh giá tác dụng chống ung thư mẫu thuốc thử in vitro in vivo dòng tế bào ung thư cụ thể để xác định hiệu chế phẩm với loại ung thư khác 329 - Trên sở kết đề tài lựa chọn hoàn thiện 01 hồ sơ để tiến hành nghiên cứu sâu hơn, từ bổ sung hoàn thiện hồ sơ thử nghiệm tiền lâm sàng Trong đó, nội dung in vivo khơng có chuột bị phát có khối u lơ uống nano liposome cao gừng tinh chế liều cao Từ nhận thấy, mẫu nano liposome cao gừng tinh chế uống liên tục 14 tuần bắt đầu thể tác dụng chống ung thư chuột nhắt trắng bị gây ung thư DMBA liều mg/tuần uống tuần thông qua khả làm giảm tỷ lệ chuột chết, giảm tỷ lệ chuột xuất khối u số lượng tổ chức nghi ngờ khối u cá thể phơi nhiễm với tác nhân gây ung thư Vì mẫu thử nano liposome cao gừng tinh chế thể hiệu tốt so với mẫu thuốc thử khác, nên đề xuất tiến hành nghiên cứu sâu hệ nano liposome cao gừng tinh chế hệ nano liposome-FA hướng đích mang cao gừng tinh chế 330 TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Deepika S., Vaseem A (2016) Development of liposomal cosmeceuticals, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 8(2), 834-838 [2] Thu Thao Nguyen Thi, Tuong Vi Tran, Ngoc Quyen Tran, Cuu Khoa Nguyen, Dai Hai Nguyen (2017) Hierarchical self-assembly of heparin-PEG end-capped porous silica as a redox sensitive nanocarrier for doxorubicin delivery Materials Science and Engineering: C, 70, 947-954 [3] Zylberberg, C., & Matosevic, S (2016) Pharmaceutical liposomal drug delivery: a review of new delivery systems and a look at the regulatory landscape, Drug Delivery, 23(9), 3319-3329 [4] Nafise Olov, Shadab Bagheri-Khoulenjani, Hamid Mirzadeh (2018) Combinational drug delivery using nanocarriers for breast cancer treatments: A review Journal of Biomedical Materials Research Part A, 106(8), 2272-2283 [5] Manzano, Miguel, and María Vallet‐Regí (2020) Mesoporous silica nanoparticles for drug delivery, Advanced Functional Materials, 30(2) [6] Manzano, Miguel, and María Vallet‐Regí "Mesoporous silica nanoparticles for drug delivery." Advanced Functional Materials 30.2 (2020): 1902634 [7] Wei Yang, Fang Xiang Song, Shuai Wang, Li Zhang, Xian Zeng, Yan Li (2020) Multifunctional mesoporous silica nanoparticles with different morphological characteristics for in vitro cancer treatment, Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 610, 125717 [8] Ahmadi, Amirhossein, et al (2020) Recent advances in ultrasoundtriggered drug delivery through lipid-based nanomaterials, Drug discovery today, 25(12), 2182-2200 [9] Mu, Weiwei, et al (2020) A review on nano-based drug delivery system for cancer chemoimmunotherapy, nano-Micro Letters, 12(1), 1-24 331 [10] Li, T and S Takeoka, (2018) Smart Liposomes for Drug Delivery, in Smart nanoparticles for Biomedicine, Elsevier, 31-47 [11] Tehrany, E.A., et al (2012) Elaboration and characterization of nanoLiposome made of soya; rapeseed and salmon Lecithins: Application to cell culture Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 95, 75-81 [12] Zawada, Z.H (1012) Liposomes from hydrogenated soya Lecithin formed in sintered glass pores, Acta poloniae pharmaceutica, 69(1), 107-111 [13] Jieqing Ma, R.G., Chang Ri, Mingqi Liu, Xingqian Ye and Jiaxin Jiang (2012) Response Surface Methodology for the Optimization of Lactoferrin nano-Liposomes, Advance Journal of Food Science and Technology, 4, 249256 [14] Isailović, B.D., et al (2013) Resveratrol loaded Liposomes produced by different techniques, Innovative Food Science & Emerging Technologies, 19, 181-189 [15] Xie, M., Y Chen, and L Wu (2013) Preparation of Doxorubicinhydrochloride nano Liposomes by ethanol injection-pH gradient method and their safety evaluation, Journal of nanoscience and nanotechnology, 13(1), 216-221 [16] Shahab, B and F Parisa (2015) Nanoliposomal formulation of Agrostemma githago aqueous extract shows enhanced cytotoxyc effect on gastric cancer cell line, Nanomedicine Journal, 2(1), 21-28 [17] Haeri, A., et al (2014) Preparation and Characterization of Stable nano liposomal Formulation of Fluoxetine as a Potential Adjuvant Therapy for Drug-Resistant Tumors Iranian Journal of Pharmaceutical Research: IJPR, 13(Suppl), 3-14 [18] Aisha, A.F., A.M.S.A Majid, and Z Ismail (2014) Preparation and characterization of nano Liposomes of Orthosiphon stamineus ethanolic extract in soybean Phospholipids BMC biotechnology, 14(1), 23 332 [19] Chung, S.K., et al (2014) Factors influencing the physicochemical characteristics of cationic polymer-coated Liposomes prepared by highpressure homogenization Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 454(0), 8-15 [20] Ando, h., et al (2015) Advanced therapeutic approach for the treatment of malignant pleural mesothelioma via the intrapleural administration of liposomal Pemetrexed Journal of Controlled Release, 220, 29-36 [21] Xu, h., et al (2015) Design and evaluation of pH-sensitive Liposomes constructed Doxorubicin by poly(2-ethyl-2-oxazoline)-Cholesterol delivery European Journal of hemisuccinate Pharmaceutics for and Biopharmaceutics, 91, 66-74 [22] Kaul, A., et al (2016) Targetherd theranostic Liposomes: Rifampeakin and Ofloxacin loaded pegylated Liposomes for theranostic application in Mycobacterial infections, RSC Advances, (6), 28919 [23] Varshosaz, J., M.A Davoudi, and S Rasoul-Amini (2018) Docetaxelloaded nanostructured lipid carriers functionalized with trastuzumab (Herceptin) for HER2-positive breast cancer cells, Journal of Liposome Research, 28(4), 285-295 [24] P akdaman Goli, P., Bikhof Torbati, M., Parivar, K., Akbarzadeh Khiavi, A., & Yousefi, M (2021) Magnetic-fluorescent nanoliposomes decorated with folic acid for active delivery of cisplatin and gemcitabine to cancer cells Process Biochemistry, 110, 201–215 [25] Khánh, T.N (2012) Nghiên cứu bào chế Liposome Doxorubicin, Y Dược học Quân sự, 2, 1-5 [26] Nguyễn, T.L and B.M Bùi (2013) Nghiên cứu phương pháp liposome hoá Doxorubicin kỹ thuật chênh lệch nồng độ amoni sulfat, Tạp chí Dược học, 441, 34-37 333 [27] Nguyễn, T.L (2014) Nghiên cứu giảm kích thước đồng hóa tiểu phân liposome Doxorubicin phương pháp đẩy qua màng, Tạp chí Dược học, 456, 16-20 [28] Nguyễn, V.L., P.L Lê, and T.M.H Phạm (2014) Nghiên cứu ảnh hưởng phương pháp đồng hóa đến kích thước hiệu suất Liposome hóa Liposome Doxorubicin, Tạp chí Dược học, 458, 10-13 [29] Nguyễn Quang Trị (2016) Điều chế phân tích tính chất hệ phân tán nanoLiposome Paclitaxel, Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Việt Nam, 10B, 11-15 [30] Lê Nhật Minh (2020) Đánh giá khả nhắm đích in vitro tế bào ung thư đại tràng từ hệ vận chuyển nano Tb 3+ - Monoclonal antibody (RT), Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, 56(1), 95 – 99 [31] Thi, T.T.N., Tran, T V., Tran, N Q., Nguyen, C K., & Nguyen, D H (2017) Hierarchical self-assembly of heparin-PEG end-capped porous silica as a redox sensitive nanocarrier for Doxorubicin delivery, Materials Science and Engineering: C, 70, 947-954 [32] Vo, U.V.; Nguyen, C.K.; Nguyen, V.C.; Tran, T.V.; Thi, B.Y.T.; Nguyen, D.H (2019) Gelatin-poly (ethylene glycol) methyl ether-functionalized porous nanosilica for efficient Doxorubicin delivery, Journal of Polymer Research, 26, [34] Vy, V.U (2017) Effective pH-responsive hydrazine-modified silica for Doxorubicin delivery, Asian J Med Health, 4, 32253 [34] Nguyen, D.T.D.; Bach, L.G.; Nguyen, T.H.; ho, M.H.; ho, M.N.; Nguyen, D.H.; Nguyen, C.K.; Thi, T.T.H (2019) Preparation and characterization of oxaliplatin drug delivery vehicle based on PEGylated half-generation PAMAM Dendrimer, Journal of Polymer Research, 26, 116 [35] Ho, M.N.; Bach, L.G.; Nguyen, T.H.; ho, M.H.; Nguyen, D.H.; Nguyen, C.K.; Nguyen, C.H.; Nguyen, N.V.; Thi, T.T.H (2019) PEGylated poly (amidoamine) Dendrimers-based drug loading vehicles for delivering 334 carboplatin in treatment of various cancerous cells, Journal of nanoparticle Research, 21, 43 [36] Ho, M.N.; Bach, L.G.; Nguyen, D.H.; Nguyen, C.H.; Nguyen, C.K.; Tran, N.Q.; Nguyen, N.V.; hoang Thi, T.T (2019) PEGylated PAMAM Dendrimers loading oxaliplatin with prolonged release and high payload without burst effect, Biopolymers, e23272 [37] Nguyen, T.T.C., Nguyen, C K., Nguyen, T H., & Tran, N Q (2017) Highly lipophilic pluronics-conjugated polyamidoamine Dendrimer nanocarriers as potential delivery system for hydrophobic drugs, Materials Science and Engineering: C, 70, 992-999 [38] Nguyen, D.H.; Lee, J.S.; Bae, J.W.; Choi, J.H.; Lee, Y.; Son, J.Y.; Park, K.D (2015) Targetherd Doxorubicin nanotherapy strongly suppressing growth of multidrug resistant tumor in mice, International journal of pharmaceutics, 495, 329-335 [39] Thi Lan Nguyen, Thi Hiep Nguyen, and Dai Hai Nguyen (2017) Development and In Vitro evaluation of Liposomes using soy Lecithin to encapsulate Paclitaxel, International journal of biomaterials, 2017, 1-7 [40] Samadian, h., hosseini-Nami, S., Kamrava, S K., Ghaznavi, h., & ShakeriZadeh, A (2016) Folate-conjugated gold nanoparticle as a new nanoplatform for targetherd cancer therapy, Journal of Cancer Research and Clinical Oncology, 142, 2217–2229 [41] Wu, Y., Zhang, Y., Zhang, W., Sun, C., Wu, J., & Tang (2016) J Reversingof multidrug resistance breast cancer by co-delivery of P-gp siRNAand Doxorubicin via Acid folic-modified core-shell nanoMicelles, Colloids and Surfaces, B: Biointerfaces, 1, 60–69 [42] Huang, Y., Mao, K., Zhang, B., & Zhao, Y (2017) Superparamagnetic iron oxyde nanoparticles conjugated with Acid folic for dual target-specific 335 drug delivery and MRI in cancer theranostics, Materials Science & Engineering, C: Materials for Biological Applications, 70, 763–771 [43] Lv, L., Zhuang, Y X., Zhang, h W., Tian, N N., Dang, W Z., & Wu, S Y (2017) Capsaicin-loaded Acid folic-conjugated lipid nanoparticles for enhanced therapeutic efficacy in ovarian cancers Biomedicine & Pharmacotherapy, 91, 999–1005 [44] Saikia, C., Das, M K., Ramteke, A., & Maji, T K (2017) Evaluation of Acid folic tagged aminated starch/ZnO coated iron oxyde nanoparticles as targetherd curcumin delivery system, Carbohydrat Polymers, 157, 391–399 [45] Zhao, Q S., hu, L L., Wang, Z D., Li, Z P., Wang, A W., & Liu, J (2017) Resveratrol-loaded Acid folic-grafted dextran stearate submicron particles exhibits enhanced antitumor efficacy in non-small cell lung cancers, Materials Science and Engineering: C, 72, 185–191 [46] Wang, Wen-Yan; Cao, Yun-Xia; Zhou, Xiao; Wei, Bing (2019) Delivery of folic acid-modified liposomal curcumin for targeted cervical carcinoma therapy, Drug Design, Development and Therapy, 13, 2205–2213 [47] Priti Tagde, Giriraj T Kulkarni, et al (2020) Recent advances in folic acid engineered nanocarriers for treatment of breast cancer, Journal of Drug Delivery Science and Technology, 56, 1016-1013 [48] Selvaraj Kunjiappan, Saravanan Govindaraj, Pavadai Parasuraman, Murugesan Sankaranarayanan, Sankarganesh Arunachalam, Ponnusamy Palanisamy, Uma Priya Mohan, Ewa Babkiewicz, Piotr Maszczyk, Sivakumar Vellaisamy (2020), Nanotechnology, 31(15) [49] Risako Onodera, Shunsuke Morioka, Shinshu Unida, Keiichi Motoyama, Kohei Tahara, Hirofumi Takeuchi (2021) Design and evaluation of folatemodified liposomes for pulmonary administration in lung cancer therapy, European Journal of Pharmaceutical Sciences, 168, 1-11 336 [50] Lamprou, E.; Mourtas, S.; Mantzari, M.; Maraziotis, A.; Gkartziou, F.; Antimisiaris (2021) S.G Folic Acid—Targeted Doxorubicin Drug Delivery System for Triple-Negative Breast Cancer Treatment, Proceedings, 78, [51] Hu R, Zhou P, Peng YB, Xu X, Ma J, Liu Q, et al (2012) 6-Shogaol induces apoptosis in human hepatocellular carcinoma cells and exhibits antitumor activity In Vivo through endoplasmic reticulum stress, PLoS One, 7(6), 1-11 [52] Nazim UM, Park SY (2019) Attenuation of autophagy flux by 6-Shogaol sensitizes human liver cancer cells to TRAIL-induced apoptosis via p53 and ROS, Int J Mol Med, 43(2), 701-708 [53] Kiran Kemkar, Sathiyanarayanan L., Arulmozhi Sathiyanarayanan, Kakasaheb Mahadik (2018) Journal of Applied Pharmaceutical Science, 8(02), 001-010 [54] Yang, Chunhua; Zhang, Mingzhen; Lama, Sudeep; Wang, Lixin; Merlin, Didier (2020) Natural-lipid nanoparticle-based therapeutic approach to deliver 6-shogaol and its metabolites M2 and M13 to the colon to treat ulcerative colitis, Journal of Controlled Release, 323, 293–310 [55] Lee h, Kim JS, Kim E (2012) Fucoidan from seaweed Fucus vesiculosus inhibits migration and invasion of human lung cancer cell via PI3K-Akt-mTOR pathways, PloS ONE, 7(11), e50624- [56] Alwarsamy M, Gooneratne R, Ravichandran R (2016) Effect of Fucoidan from Turbinaria conoides on human lung adenocarcinoma epithelial (A549) cells, Carbohydr Polym, 152, 207–213 [57] Hsu hY, Lin TY, hu CH, Shu DTF, Lu MK (2018) Fucoidan upregulates TLR4/CHOP-mediated Caspase-3 and PARP activation to enhance Cisplatininduced cytotoxycity in human lung cancer cells, Cancer Lett, 432, 112–120 [58] Lai, Yen-Ho; Chiang, Chih-Sheng; Hsu, Chin-Hao; Cheng, Hung-Wei; Chen, San-Yuan (2020) Development and Characterization of a Fucoidan- 337 Based Drug Delivery System by Using Hydrophilic Anticancer Polysaccharides to Simultaneously Deliver Hydrophobic Anticancer Drugs, Biomolecules, 10(7), 970 [59] Xiaohui Yan, Miao Qi, Pengfei Li, Yihong Zhan, and Huanjie Shao (2017) Apigenin in cancer therapy: anti-cancer effects and mechanisms of action, Cell Biosci, 7(1), 50- [60] Birt DF, Walker B, Tibbels MG, Bresnick E (1986) Anti-mutagenesis and anti-promotion by Apigenin, robinetin and indole-3-carbinol, Carcinogenesis, 7, 959–963 [61] Huang C, Wei YX, Sen MC, Tu YH, Wang CC, huang hC (2016) Chrysin abundant in Morinda citrifolia fruit water-EtOAc extracts, combined with Apigenin synergistically induced apoptosis and inhibited migration in human breast and liver cancer cell, J Agric Food Chem, 64, 4235–4245 [62] Lee YM, Lee G, Oh TI, Kim BM, Shim DW, Lee KH, Kim YJ, Lim BO, Lim JH (2016) Inhibition of glutamine utilization sensitizes lung cancer cells to Apigenin-induced apoptosis resulting from metabolic and oxydative stress, Int J Oncol, 48, 399–408 [63] Zhao G, han X, Cheng W, Ni J, Zhang Y, Lin J, Song Z (2017) Apigenin inhibits proliferation and invasion, and induces apoptosis and cell cycle arrest in human melanoma cells, Oncol Rep, 37, 2277–2285 [64] Gupta S, Afaq F, Mukhtar h (2002) Involvement of nuclear factor-kappa B, Bax and Bcl-2 in induction of cell cycle arrest and apoptosis by Apigenin in human prostate carcinoma cells Oncogene, 21, 3727–3738 [65] Angulo P, Kaushik G, Subramaniam D, Dandawate P, Neville K, Chastain K, Anant S (2017) Natural compounds targeting major cell signaling pathways: a novel paradigm for osteosarcoma therapy, J hematol Oncol, 10(1), 10- 338 [66] Lee Y, Sung B, Kang YJ, Kim DH, Jang JY, hwang SY, Kim M, Lim hS, Yoon JH, Chung hY, Kim ND (2014) Apigenin-induced apoptosis is enhanced by inhibition of autophagy formation in hCT116 human colon cancer cells, Int J Oncol, 44, 1599–1606 [67] Sen, Kacoli; Banerjee, Shubhadeep; Mandal, Mahitosh (2019) Dual drug loaded liposome bearing apigenin and 5-Fluorouracil for synergistic therapeutic efficacy in colorectal cancer, Colloids and Surfaces B: Biointerfaces, 180, 9–22 [68] Domazou A S., Luisi P L (2002) Size distribution of spontaneously formed Liposomes by the alcohol injection method, Journal of Liposomes Research, 22(1), 205 – 220 [69] Bangham AD, hornre RW (1964) Negative staining of Phospholipid and their structural modification by surface – active agents as observed in the electron microscope, J Mol Biol, 8, 660-668 [70] Ansari, Vaseem & Singh, Satya Prakash & Srivastava, Deepika & Ali, Sameer & Akhtar, Juber (2016) Development of liposomal cosmeceuticals, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 8(2), 834-838 [71] Prathyusha, Muthukumaran M., Krishnamoorthy B (2013) Liposomes as targetted drug delivery systems present and future prospectives: a review, Journal of Drug Delivery & Therapeutics, 3(4), 195-201 [72] Nguyen, D.H., et al (2015) Targetherd Doxorubicin nanotherapy strongly suppressing growth of multidrug resistant tumor in mice, International journal of pharmaceutics, 495(1), 329-335 [73] NikitaLomis, Susan W., et al (2016) Human Serum Albumin nanoparticles for Use in Cancer Drug Delivery: Process Optimization and in vitro cheracterization, nanomaterials, 6, 1-16 [74] Olga P., Jana S., Zoran K., Vesna R (2013) Methods for Preparation and Characterization of Liposomes as Drug Delivery Systems, Int J Pharm 339 Phytopharmacol Res, (3), 182-189 [75] Yaganesh V., Marcus A (2012) Nanomedicine for glaucoma: Liposomes provide sustained release of Latanoprost in the eye, International Journal of nanomedicine, 123 -131 [76] Bộ Y tế (2015), Hướng dẫn thử nghiệm tiền lâm sàng lâm sàng thuốc đông y, thuốc từ dược liệu, Cục Khoa học công nghệ Đào tạo [77] Đỗ Trung Đàm (2014), Phương pháp xác định độc tính thuốc, Nxb Y học, Hà Nội, tr 11-28 [78] OECD (2008), OECD Guideline for Testing of Chemicals N°407: Repeated dose 28-day oral toxicity study in rodents [79] Ian A Cree (ed.), Cancer Cell Culture: Methods and Protocols, Second Edition, Methods in Molecular Biology, vol 731, DOI 10.1007/978-1-61779080-5_20, @ Springer Science+Business Media, LLC 2011 [80] Mosman, T (1983) Rapid colorimetric assay for cellular growth and survival: application to proliferation and cytotoxicity assay, J Immunol Method., 65, 55-63 [81] Yang, L., Tu, D., Zhao, Z., Cui, J (2017) Cytotoxicity and apoptosis induced by mixed mycotoxins (T-2 and HT-2 toxin) on primary hepatocytes of broilers in vitro, Toxicon, 129, 1-10 [82] Zhang, J., Ma, L., Wu, Z-F., Yu, S-L., Wang, L., Ye, W-C., Zhang, Q-W., Yin, Z-Q (2017) Cytotoxic and apoptosis-inducing activity of C21 steroids from the roots of Cynanchum atratum Steroid, 122, 1-8 [83] Liu Y, Yin T, Feng Y, et al (2015) Mammalian models of chemically induced primary malignancies exploitable for imaging-based preclinical theragnostic research, Quant Imaging Med Surg, 5(5), 708–729 [84] Qingliang Qiao; Qizhen Du (2011) Preparation of the monomers of gingerols and 6-shogaol by flash high speed counter-current chromatography, 1218(36), 6187–6190 340 [85] Van Loo, P.; Bruyn, A.D.; Budě ínský, M (1986) Reinvestigation of the structural assignment of signals in the 1H and 13C-NMR spectra of the flavone apigenin, Magn Reson Chem., 24(10), 879-882 [86] Bharathi Sambandam; Devasena Thiyagarajan; Arivarasan Ayyaswamy; Pachaiappan Raman (2016) Extraction and isolation of flavonoid quercetin from the leaves of Trigonella foenum-graecum and their anti-oxidant activity, Int J Pharm Pharm Sci, 8(6), 120-124 [87] Liu Y, Yin T, Feng Y, et al (2015) Mammalian models of chemically induced primary malignancies exploitable for imaging-based preclinical theragnostic research Quant Imaging Med Surg, 5(5), 708–729 [88] Ni Y, Wang H, Chen F, et al (2009) Tumor models and specific contrast agents for small animal imaging in oncology Methods, 48(2), 125-38 [89] Zhang Y, Dong S, Wang H, et al (2016) Biological impact of environmental aromatic hydrocarbons (ePAHs) as endocrine disruptors Environ Pollut, 213, 809-824 [90] Navale AM (2013) Animal Models of Cancer: A Review IJPSR, Vol 4(1), 19-28 [91] Dipple A (1995) DNA adducts of chemical carcinogens Carcinogenesis, 16(3), 437–441 [92] Hernández‐Caselles, T., J Villalain, and J C Gómez‐Fernández (1990) Stability of liposomes on long term storage Journal of pharmacy and pharmacology, 42(6), 397-400 [93] Sopyan, Iyan, and Dolih Gozali (2020) A Review: A Novel of Efforts to Enhance Liposome Stability as Drug Delivery Approach Systematic Reviews in Pharmacy, 11(6) 341