Ảnh hưởng của nhiễm giun lươn giun đũa chó mèo và giun móc của thai phụ trên phản ứng lao tố của con 6 tháng tuổi

MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU TÓM TẮT CHƯƠNG I: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG II: MỤC TIÊU Mục tiêu tổng quát Mục tiêu chuyên biệt CHƯƠNG III: TỔNG QUAN TÀI LIỆU I ĐẠI CƯƠNG VỀ KÝ SINH TRÙNG GÂY BỆNH 5 II CHẨN ĐOÁN BỆNH NHIỄM KÝ SINH TRÙNG: THU THẬP MẪU, PHƯƠNG PHÁP KHẢO SÁT KÝ SINH TRÙNG Mẫu phân Mẫu cấy Mẫu máu 10 11 III KÝ SINH TRÙNG THƯỜNG GẶP TẠI VIỆT NAM Giun lươn Giun móc Giun đũa chó mèo 12 12 15 19 IV CÁC NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN ĐẾN VACXIN PHÒNG BỆNH LAO (BCG) VÀ BỆNH NHIỄM KÝ SINH TRÙNG Tình hình nghiên cứu nước Tình hình nghiên cứu nước 21 CHƯƠNG IV: PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU I THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU 21 24 28 29 II CỢ MẪU 29 III PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Xác định tình trạng nhiễm giun lươn, giun đũa chó mèo giun móc thai phu Khảo sát phản ứng lao tố trẻ sau tháng tiêm vacxin BCG 31 31 34 Phân tích thống kê 3.1 Tình trạng nhiễm giun mẹ 3.2 Phản ứng lao tố lúc tháng tuổi 3.3 Phân tích ảnh hưởng nhiễm giun lươn, giun đũa chó mèo giun móc mẹ thai kỳ phản ứng lao tố 3.4 Các nội dung thực bổ sung để loại trừ yếu tố gây nhiễu CHƯƠNG V: KẾT QUẢ I TÌNH TRẠNG NHIỄM GIUN CỦA THAI PHỤ 34 34 34 34 35 36 37 Thai phụ nhiễm giun 37 Thai phụ đồng nhiễm giun 38 Hiệu giá kháng thể thai phụ nhiễm giun 38 Tỉ lệ, số lượng bạch cầu toan tính nhóm thai phụ nhiễm giun nhóm không nhiễm giun 39 II PHẢN ỨNG LAO TỐ CỦA CON LÚC THÁNG TUỔI 43 III PHÂN TÍCH ẢNH HƯỞNG CỦA TÌNH TRẠNG NHIỄM GIUN CỦA MẸ TRÊN PHẢN ỨNG LAO TỐ CỦA CON LÚC THÁNG TUỔI Nhận xét tình trạng nhiễm giun mẹ phản ứng lao tố lúc tháng tuổi Nhận xét hiệu giá kháng thể thai phụï phản ứng lao tố lúc tháng tuổi Các nội dung thực bổ sung để loại trừ yếu tố gây nhiễu 46 CHƯƠNG VI: BÀN LUẬN I TÌNH TRẠNG NHIỄM GIUN CỦA THAI PHỤ 46 52 54 55 Tình trạng nhiễm giun 56 Hiệu giá kháng thể thai phụ nhiễm giun 56 Sự khác biệt tỉ lệ bạch cầu toan tính nhóm thai phụ 56 nhiễm giun nhóm thai phụ không nhiễm giun Nhận xét tình trạng nhiễm giun so với số nghiên cứu khác II ẢNH HƯỞNG CỦA TÌNH TRẠNG NHIỄM GIUN CỦA MẸ TRÊN PHẢN ỨNG LAO TỐ CỦA CON LÚC THÁNG TUỔI 57 57 Phản ứng lao tố lúc tháng tuổi 57 Nhận xét tình trạng nhiễm giun mẹ phản ứng lao tố lúc tháng tuổi 57 2.1 Nhiễm giun 2.2 Đồng nhiễm giun Nhận xét hiệu giá kháng thể thai phụï phản ứng lao tố lúc tháng tuổi CHƯƠNG VII: KẾT LUẬN & ĐỀ NGHỊ PHỤ LỤC TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 57 60 61 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Tình hình nhiễm tử vong ký sinh trùng toàn cầu Bảng 5.1 Thai phụ nhiễm giun Bảng 5.2 Thai phụ đồng nhiễm giun Bảng 5.3 Hiệu giá kháng thể thai phụ nhiễm giun Bảng 5.4 Tỉ lệ (%) bạch cầu toan tính (BCTT) nhóm thai phụ nhiễm giun không nhiễm giun Bảng 5.5 Số lượng bạch cầu toan tính (BCTT) nhóm nhiễm không nhiễm giun Bảng 5.6 Phản ứng lao tố trẻ nhóm thai phụ có nhiễm giun không nhiễm giun Bảng 5.7 Tình trạng nhiễm giun mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.8 Tình trạng nhiễm giun lươn mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.9 Tình trạng nhiễm giun đũa chó mèo mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.10 Tình trạng nhiễm giun móc mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.11 Tình trạng đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.12 Tình trạng đồng nhiễm giun lươn – giun móc mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.13 Tình trạng đồng nhiễm giun đũa chó mèo – giun móc mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.14 Tình trạng đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc mẹ phản ứng lao tố Bảng 5.15 Hiệäu giá kháng thể thai phụï phản ứng lao tố DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT VIẾT TẮT THUẬT NGỮ TIẾNG VIỆT BCG Bacille Calmette et Gueùrin COV Cut off value ES IDR Intradermo reaction IFNγ Interferon gamma IgG Immunoglobulin G OD Optic density PBS PPD Purified Protein derivated TMB Th1 T helper Th2 T helper TNFα Tumor necrosis factor alpha CHƯƠNG I ĐẶT VẤN ĐỀ Lao vấn đề sức khỏe toàn cầu với 1/3 dân số bị nhiễm lao triệu người tử vong hàng năm 80% trường hợp mắc bệnh lao, 99% tử vong bệnh lao xảy nước phát triển: Đông Nam Á Phi Châu (2, 21) Bệnh nhân lao đa kháng thuốc cao, 50 triệu người, có khoảng 400.000 ca mắc nhiễm vi khuẩn kháng thuốc (thống kê hàng năm) Đại dịch HIV/AIDS làm tăng tỉ lệ nhiễm lao trầm trọng thêm biểu lâm sàng bệnh Các trường hợp đồng nhiễm lao – HIV chiếm tỉ lệ 0.18% 8% bệnh nhân lao có kèm theo nhiễm HIV (2) Mặc dù bệnh lao nhiễm HIV mối đe dọa sức khỏe toàn cầu, đến nay, có vacxin phòng bệnh lao BCG sử dụng để phòng bệnh (8) Vacxin BCG (Bacille Calmette – Guérin) loại vacxin sử dụng rộng rãi toàn cầu Vacxin BCG có nguồn gốc từ vi khuẩn lao bò – Mycobacterium bovis, Albert Calmette Guérin tìm từ 1921 qua 230 lần nuôi cấy môi trường mật bò để làm giảm độc lực chế tạo vacxin (8, 26) Mặc dầu mũi tiêm tạo phản ứng mẫn muộn da invitro có xuất đáp ứng tế bào T kháng nguyên tinh chế nhóm Mycobacteria hiệu bảo vệ vacxin BCG bệnh lao lại không ổn định thay đổi từ 0-80% (8, 26) Từ kết khác thực địa, có nhiều lý để giải thích tính chất không ổn định vacxin sau: • Sự khác chất chủng BCG dùng để sản xuất vacxin • Độc lực khác vi khuẩn Mycobacterium tuberculodsis gây bệnh • Tính sinh miễn dịch kháng nguyên phù hợp tổ chức HLA cá thể tiêm chủng • Hiện tượng đồng nhiễm Mycobacterium khác Khi phân tích hiệu bảo vệ vacxin BCG thực địa người ta thấy vùng ôn đới vacxin bảo vệ tốt vùng nhiệt đới Hiện tại, chưa thể giải thích tượng này, nhiên, điểm đáng lưu ý tỉ lệ nhiễm giun sán vùng nhiệt đới cao Từ yếu tố dịch tễ này, có giả thuyết cho có liên hệ nhiễm giun sán hiệu vacxin BCG cá thể tiêm chủng (4, 12) Nghiên cứu súc vật thí nghiệm cho thấy chuột nhắt bị nhiễm Schistosoma mansoni hoạt hóa tế bào T đặc hiệu với kháng nguyên tiết Interleukin chuột chưa bị nhiễm tiết Interferon γ Interleukin (4, 5) Y văn ghi nhận phát tế bào lympho từ cuống rốn trẻ sơ sinh có mẹ bị nhiễm giun sán tiết Interleukin 4, Interleukin 5, IgE Interferon γ Điều này, chứng tỏ hệ miễn dịch có nhạy cảm với kháng nguyên giun sán thời kỳ bào thai (12) Một nghiên cứu Kenya cho thấy trẻ có mẹ bị nhiễm giun sán máng mang thai giảm hẳn đáp ứng với phản ứng lao tố sau tiêm vacxin BCG so với nhóm trẻ có mẹ không bị nhiễm (12) Theo dõi tình hình nhiễm giun sán toàn cầu cho thấy 1/3 dân số bị nhiễm giun sán vùng nhiễm giun sán có phân bố dịch tễ học với vùng bị nhiễm lao (6) Do đó, có tượng giảm đáp ứng miễn dịch tịêm chủng BCG vùng nhiễm giun sán vấn đề báo động vùng nhiễm giun sán vùng nhiễm lao vậy, việc tiêm chủng vacxin BCG hiệu (6) Tùy theo địa dư, nhóm giun thường gặp giun đũa, giun móc, giun lươn, giun Riêng Việt Nam, nhóm giun đặc hiệu người thường gặp giun kim, giun đũa, giun móc nhóm giun có khả gây hại có biến chứng nặng giun lươn, giun đũa chó mèo (31, 33 36) Nghiên cứu khảo sát nhạy cảm với giun thời kỳ bào thai có ảnh hưởng đến đáp ứng tuberculin (một biểu đáp ứng miễn dịch tế bào) sau tiêm chủng vacxin BCG hay không? Nhóm giun khảo sát giun móc, giun lươn giun đũa chó mèo ký sinh trùng thường gặp Việt Nam nói chung Củ Chi nói riêng, có khả gây biến chứng nặng cho người bệnh (23, 27, 31, 35) CHƯƠNG II MỤC TIÊU Mục tiêu đề tài: Mục tiêu tổng quát: Khảo sát ảnh hưởng tình trạng nhiễm giun móc, giun lươn giun đũa chó mèo mẹ thai kỳ đáp ứng miễn dịch với vacxin ngừa lao Mục tiêu chuyên biệt: 2.1 Xác định tình trạng nhiễm giun móc, giun lươn giun đũa chó mèo phụ nữ có thai 2.2 Khảo sát phản ứng lao tố lúc tháng tuổi (đường kính phản ứng lao tố, tỉ lệ phản ứng dương tính âm tính) 2.3 Phân tích ảnh hưởng tình trạng nhiễm giun mẹ thai kỳ phản ứng lao tố lúc tháng tuổi o Con có phản ứng lao tố âm tính: § Mẹ có nhiễm giun móc: 33 (23.74%) § Mẹ không nhiễm giun móc: 106 (76.26%) o Con có phản ứng lao tố dương tính: § Mẹ có nhiễm giun móc: 26 (14.13%) § Mẹ không nhiễm giun móc: 158 (85.87%) o Nhận xét: tỉ lệ nhiễm giun móc mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 23.74%, cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 14.13% (U=2.21> C0.05 =1.64; p-value=0.013) 1.1.5 Tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo mẹ phản ứng lao tố con: Bảng 5.11 Tình trạng đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo mẹ phản ứng lao tố Mẹ đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo Mẹ không nhiễm giun Tổng cộng Phản ứng lao tố âm tính Số ca Tỉ lệ % 10 7.19 129 139 92.81 Phản ứng lao tố dương tính Số ca Tỉ lệ % 1.63 181 184 98.37 o Con có phản ứng lao tố âm tính: § Mẹ đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo: 10 (7.19%) § Mẹ không nhiễm giun: 129 (92.81%) o Con có phản ứng lao tố dương tính: § Mẹ đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo: (1.63%) § Mẹ không nhiễm giun: 181 (98.37%) o Nhận xét: tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 7.19%, cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 1.63% (U=2.51> C0.05 =1.64; p-value=0.006) 55 1.1.6 Tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn – giun móc mẹ phản ứng lao tố con: Bảng 5.12 Tình trạng đồng nhiễm giun lươn – giun móc mẹ phản ứng lao tố Mẹ đồng nhiễm giun lươn – giun móc Mẹ không nhiễm giun Tổng cộng Phản ứng lao tố âm Phản ứng lao tố tính dương tính Số ca Tỉ lệ % Số ca Tỉ lệ % 2.16 0.54 136 139 97.84 183 184 99.46 o Con có phản ứng lao tố âm tính: § Mẹ đồng nhiễm giun lươn – giun móc: (2.16%) § Mẹ không nhiễm giun lươn – giun móc: 136 (97.84%) o Con có phản ứng lao tố dương tính: § Mẹ đồng nhiễm giun lươn – giun móc: (0.54%) § Mẹ không nhiễm giun lươn – giun móc 183 (99.46%) o Nhận xét: tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn – giun móc mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính âm tính khác biệt (U=1.29 C0.05 =1.64; p-value=0.037) 1.1.8 Tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc mẹ phản ứng lao tố con: Bảng 5.14 Tình trạng đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc mẹ phản ứng lao tố Mẹ đồng nhiễm giun lươn giun đũa chó mèo - giun móc Mẹ không nhiễm giun Tổng cộng Phản ứng lao tố âm tính Số ca Tỉ lệ % 0.72 138 139 99.28 Phản ứng lao tố dương tính Số ca Tỉ lệ % 0 184 184 100 o Con có phản ứng lao tố âm tính: § Mẹ đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc: (0.72%) § Mẹ không nhiễm giun: 138 (99.28%) o Con có phản ứng lao tố dương tính: § Mẹ đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc: (0%) § Mẹ không nhiễm giun: 184 (100%) o Nhận xét: tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 0.72% Ở nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính, không phát trường hợp mẹ đồng nhiễm giun lươn - giun đũa chó mèo – giun móc Không so sánh khác biệt trường hợp có giá trị 57 Kết từ bảng 5.1-5.13 cho thấy tình trạng nhiễm giun mẹ lúc mang thai có ảnh hưởng đến chuyển dương tính phản ứng lao tố lúc tháng tuổi Kết xác định mẹ bị nhiễm loại giun sau: o Nhiễm giun lươn o Nhiễm giun móc o Đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo o Đồng nhiễm giun đũa chó mèo – giun móc o Đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo – giun móc Nhận xét hiệu giá kháng thể thai phụï phản ứng lao tố lúc tháng tuổi: Bảng 5.15 Hiệäu giá kháng thể thai phụï phản ứng lao tố Kháng thể giun lươn Kháng thể giun đũa chó mèo IDR≥6mm IDR C0.05 =1.64; p-value=0.0004 § Nhóm nhiễm giun lươn có số lượng bạch cầu toan tính cao nhóm không nhiễm giun lươn: T=2.90 > C0.05 =1.64; p-value=0.0020 ∗ Nhóm nhiễm giun móc § Nhóm nhiễm giun móc có tỉ lệ bạch cầu toan tính cao nhóm không nhiễm giun móc: T=2.94> C0.05 =1.64; p-value=0.0018 § Nhóm nhiễm giun móc có số lượng bạch cầu toan tính cao nhóm không nhiễm giun móc: T=2.52 > C0.05 =1.64; p-value=0.0062 ∗ Nhóm nhiễm giun đũa chó mèo: không tìm thấy khác biệt tỉ lệ số lượng bạch cầu toan tính nhóm thai phụ có nhiễm không nhiễm giun đũa chó mèo 62 Như vậy, tình trạng nhiễm giun lươn, nhiễm giun móc nhiễm chung loại giun cho phản ứng tăng tỉ lệ bạch cầu toan tính máu thai phụ Kết phù hợp với lý thuyết bệnh nhiễm ký sinh trùng có tượng tăng tỉ lệ bạch cầu toan tính máu ký chủ bị nhiễm giun sán Tuy nhiên, quan sát với nhóm nhiễm giun đũa chó mèo, không thấy tượng Điều y văn ghi nhận không bắt buộc nhiễm giun đũa chó mèo bạch cầu toan tính phải cao Tỉ lệ bạch cầu toan tính thay đổi tùy theo thời điểm lấy mẫu II ẢNH HƯỞNG CỦA TÌNH TRẠNG NHIỄM GIUN CỦA MẸ TRÊN PHẢN ỨNG LAO TỐ CỦA CON LÚC THÁNG TUỔI: Phản ứng lao tố lúc tháng tuổi: - Nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính: 184/323 (56.96%) - Nhóm trẻ phản ứng lao tố âm tính: 139/323 (43.03%) Nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 56.96% (184/323) cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 43.03% (139/323), p-value = 0.0004 Nhận xét tình trạng nhiễm giun mẹ phản ứng lao tố lúc tháng tuổi: 2.1 Nhiễm giun: ∗ Tỉ lệ nhiễm giun lươn mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 10.79% (15/139), cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 5.43% (10/184), p- value=0.037 ∗ Tỉ lệ nhiễm giun móc mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 23.74% (33/139), cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 14.13% (26/184), p-value=0.013 2.2 Đồng nhiễm giun: ∗ Tỉ lệ nhiễm loại giun mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 59.72% (83/139), cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 50% (92/184), p-value=0.041 ∗ Tỉ lệ đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 7.19% (10/139), cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 1.63% (3/184), p- value=0.006 ∗ Tỉ lệ đồng nhiễm giun đũa chó mèo – giun móc mẹ nhóm trẻ có phản ứng lao tố âm tính 10.79% (15/139), cao nhóm trẻ có phản ứng lao tố dương tính 5.44% (10/184), p-value=0.037 63 Kết nghiên cứu cho thấy tình trạng nhiễm giun mẹ lúc mang thai có làm giảm đến chuyển thành phản ứng dương tính phản ứng lao tố lúc tháng tuổi Kết xác định mẹ bị nhiễm loại giun sau: o Nhiễm giun lươn o Nhiễm giun móc o Đồng nhiễm giun lươn – giun đũa chó mèo o Đồng nhiễm giun đũa chó mèo – giun móc o Đồng nhiễm - giun lươn – giun đũa chó mèo – giun móc Kết phù hợp với kết luận nghiên cứu sau: ∗ Indu Malhotra et al (1999) (12) nhận thấy mẹ bị nhiễm giun sán máng thời kỳ mang thai ảnh hưởng đến khả tạo miễn dịch vacxin BCG sau sinh Tác giả khảo sát 16 thai phụ không nhiễm giun sán máng 17 thai phụ có nhiễm hai loại ký sinh trùng (nghiên cứu Kenya) Sau sinh vòng 24 giờ, đứa trẻ tiêm vacxin BCG 10 tháng năm sau sinh, đứa trẻ khảo sát phản ứng lao tố khả tiết Interferon gamma bị kích thích với kháng nguyên PPD Tác giả thấy có giảm đáp ứng khả tạo phản ứng lao tố khả tiết Interferon gamma nhóm trẻ có mẹ bị nhiễm giun sán máng so với nhóm trẻ có mẹ không bị nhiễm (p