(Tiểu luận) seminar thí nghiệm vi sinh baì 1 những dụng cụ, thiết bị cơ bản và môi trường nuôi cấy vi sinh vật

TỔNG LIÊN ĐOÀN LAO ĐỘNG VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC TƠN ĐỨC THẮNG KHOA KHOA HỌC ỨNG DỤNG SEMINAR THÍ NGHIỆM VI SINH NHÓM 8-4 Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS Phạm Minh Tân 1/ Nguyễn Ngọc Khánh Nghi - 62101147 2/ Dương Minh Châu - 62101089 3/ Huỳnh Gia Tuệ - 62101207 4/ Nguyễn Thị Cẩm Vy 6210055 5/ Nguyễn Thị Thanh Vy 62100555 Khóa :25 TP HỒ CHÍ MINH, THÁNG 04 NĂM 2023 TỔNG LIÊN ĐỒN LAO ĐỘNG VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC TƠN ĐỨC THẮNG KHOA KHOA HỌC ỨNG DỤNG SEMINAR THÍ NGHIỆM VI SINH NHÓM 8-4 Giảng viên hướng dẫn: Sinh viên thực hiện: TS Phạm Minh Tân 1/ Nguyễn Ngọc Khánh Nghi - 62101147 2/ Dương Minh Châu - 62101089 3/ Huỳnh Gia Tuệ - 62101207 4/ Nguyễn Thị Cẩm Vy 6210055 5/ Nguyễn Thị Thanh Vy 62100555 Khóa :25 TP HỒ CHÍ MINH, THÁNG 04 NĂM 2023 i CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC TƠN ĐỨC THẮNG Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng nhóm tơi hướng dẫn khoa học thầy Phạm Đình Chương Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa cơng bố hình thức trước Những số liệu bảng biểu phục vụ cho việc phân tích, nhận xét, đánh giá tác giả thu thập từ nguồn khác có ghi rõ phần tài liệu tham khảo Ngoài ra, luận văn sử dụng số nhận xét, đánh số liệu tác giả khác, quan tổ chức khác có trích dẫn thích nguồn gốc Nếu phát có gian lận nhóm tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung báo cáo Trường đại học Tôn Đức Thắng không liên quan đến vi phạm tác quyền, quyền gây q trình thực (nếu có) TP Hồ Chí Minh, ngày tháng năm Tác giả ii LỜI MỞ ĐẦU iii LỜI CẢM ƠN Trước tiên với tình cảm sâu sắc chân thành nhất, cho phép em bày tỏ lòng biết ơn đến tất cá nhân tổ chức tạo điều kiện hỗ trợ, giúp đỡ em suốt trình học tập nghiên cứu đề tài Trong suốt thời gian từ bắt đầu học tập trường đến nay, em nhận nhiều quan tâm, giúp đỡ q Thầy Cơ bạn bè Với lịng biết ơn sâu sắc nhất, em xin gửi đến quý Thầy Phạm Minh Tân Khoa Khoa học Ứng dụng truyền đạt vốn kiến thức quý báu cho chúng em suốt thời gian học tập trường Nhờ có lời hướng dẫn, dạy bao thầy cô nên đề tài nghiên cứu em hoàn thiện tốt đẹp Một lần nữa, em xin chân thành cảm ơn thầy – người trực tiếp giúp đỡ, quan tâm, hướng dẫn em hoàn thành tốt báo cáo thời gian qua Bài báo cáo thực tập thực khoảng thời gian gần tuần Bước đầu vào thực tế em hạn chế cịn nhiều bã ngỡ khơng tránh khỏi thiếu sót, em mong nhận ý kiến đóng góp q báu q Thầy Cơ để kiến thức em lĩnh vực hồn thiện đồng thời có điều kiện bổ sung, nâng cao ý thức Em xin chân thành cảm ơn! iv MỤC LỤC Nội dun g LỜI MỞ ĐẦU LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH ẢNH 13 Bài 1: NHỮNG DỤNG CỤ, THIẾT BỊ CƠ BẢN VÀ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT 15 1.1 Chuẩn bị môi trường dinh dưỡng để nuôi cấy vi sinh vật 15 1.2 Thực hành 16 1.3 Kết 25 Bài 2: NUÔI CẤY VI SINH VẬT 26 2.1 Định nghĩa 26 2.3 Điều kiện thực 26 2.4 Phương pháp cấy 27 2.5 Mối quan hệ vi khuẩn với oxi 28 2.6 Vật liệu: 29 2.7 Thực hành 30 2.8 Báo cáo 32 Bài QUAN SÁT NẤM MỐC 41 3.1 Sơ lược nấm mốc 41 3.2 Báo cáo 43 BÀI : QUAN SÁT NẤM MEN 46 4.1 v Sơ lược nấm men 46 4.2 Thực hành 47 BÀI : QUAN SÁT VI KHUẨN 54 5.1 Sơ lược vi khuẩn 54 5.2 Vật liệu 54 5.3 Quan sát vi khuẩn sống 55 BÀI PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN VI SINH VẬT 63 6.1 Nội dung thực hành 63 6.2 Vật liệu 63 6.3 Thực hành 64 6.4 Kết 65 BÀI 7: CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VI SINH VẬT 69 7.1 Nguyên tắc 69 7.2 Vật liệu 70 7.3 Thực hành 71 7.4 Báo cáo 74 BÀI SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI KHUẨN 78 8.1 Khái niệm 78 8.2 Vật liệu : 79 8.3 Thực hành 79 8.4 Báo cáo kết 80 BÀI : BIẾN DƯỠNG Ở VI SINH VẬT 82 9.1 Khái niệm 82 9.2 Vật liệu 84 9.3 Thực hành 84 9.4 Bài 10 vi Kết luận 90 ĐỊNH DANH VI KHUẨN 92 10.1 Khái niệm 92 10.2 Vi khuẩn acetic 93 10.3 Vật liệu 94 10.4 Báo cáo 95 vii DANH MỤC HÌNH ẢNH Nội dung BAÌ 1: NHỮNG DỤNG CỤ, THIẾT BỊ CƠ BẢN VÀ MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY VI SINH VẬT .12 Hình 1.1 : Đầu tip trước vơ trùng 13 Hình 1.2 Mơi trường cao thịt - pepton lỏng ống nghiệm .15 Hình 1.3 Mơi trường thạch - cao thịt - pepton ống nghiệm chuẩn bị hấp khử trùng 16 Hình 1.4 Mơi trường thạch - cao thịt - pepton erlen .17 Hình 1.5 Mơi trường thạch - cao thịt - pepton đĩa petri đông 18 Hình 1.6 Mơi trường Hansen thạch ống nghiệm trước khử trùng 19 Hình 1.7 Môi trường Hansen lỏng ống nghiệm 20 Hình 1.8 Môi trường PGA trước đem hấp khử trùng 22 BÀI 2: NUÔI CẤY VI SINH VẬT 23 Hinh 2.2 Bacillus cấy vào môi trường cao thịt - pepton lỏng sau 24h 34 Hinh 2.1 E.coli cấy vào môi trường cao thịt - pepton lỏng sau 24h .34 Hinh 2.5 Bacillus cấy vào môi trường cao thịt - pepton đứng sau 24h 35 Hinh 2.4 Bacillus cấy vào môi trường cao thịt - pepton nghiêng sau 24h .35 Hinh 2.3 E.coli cấy vào môi trường cao thịt - pepton đứng nghiêng sau 24h 35 Hinh 2.6 E.coli cấy vào môi trường cao thịt - pepton đĩa sau 24h 36 Hinh 2.7 Bacillus cấy vào môi trường cao thịt - pepton đĩa sau 24h .36 Hinh 2.8 Nấm mốc cấy vào môi trường thạch PGA nghiêng sau 24h 36 Hinh 2.9 Nấm men cấy vào môi trường thạch Hansen nghiêng sau 24h .37 BÀI QUAN SÁT NẤM MỐC .38 Hình 3.1: Penicillium vật kính 40X 41 Hình 3.3 : Aspergillus vật kính 40X 42 Hình 3.2: Aspergillus vật kính 10X 42 BÀI : QUAN SÁT NẤM MEN 43 Hình 4.1 Tế bào nhuộm màu hồng bào tử nhuộm màu xanh nhờ thuốc nhuộm 48 Hình 4.2 Tế bào Saccharomyces cerevisiae .49 BÀI : QUAN SÁT VI KHUẨN 51 Hình 5.2 : Tế bào vi khuẩn Bacillus subtilis 53 Hình 5.1 : Tế bào vi khuẩn E.coli 53 Hình 5.4 : B.subtilis nhuộm đơn 54 Hình 5.3 : E.coli nhuộm đơn 54 viii Hình 5.5 : E.coli nhuộm gram 56 Hình 5.6 : B.subtilis nhuộm gram 56 Hình 5.7 : B.subtilis nhuộm bào tử 58 Hình 5.8 : E.coli nhuộm bào tử 58 BÀI PHƯƠNG PHÁP PHÁT HIỆN VI SINH VẬT 60 Hình 4.1 Môi trường Czapek - Dox sau 24 63 Hình 4.2 Mơi trường thạch cao thịt - pepton sau 24 63 Hình 4.4 Mơi trường Hansen sau 24 64 Hình 4.3 Mơi trường CaCO3 sau 24 64 Hình 4.5 Mơi trường Ashby sau 24 65 BÀI 7: CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VI SINH VẬT .66 Hinh 7.3 Petri pha loãng 0,6x10-5 71 Hinh 7.2 Petri pha loãng 0,4x10-5 71 Hinh 7.1 Petri pha loãng 0,2x10-5 71 Hình 7.4 Mơi trường LSB trước ủ 73 Hinh 7.5: ống môi trường LSB sau ủ 37℃ 48 .73 Hinh 7.6 ống môi trường BGBL trước ủ 74 Hinh 7.6: ống môi trường BGBL sau ủ 37℃ 48 74 BÀI : SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI KHUẨN 75 BÀI : BIẾN DƯỠNG Ở VI SINH VẬT .79 Hình 9.1: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis môi trường thạch cao thịt peptone 82 Hình 9.2: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis sủi bọt nhỏ giọt dung dịch H2O2 3% lên huyền phù vi khuẩn môi trường thạch cao thịt peptone ( có hoạt tính catalase) .83 Hình 9.3: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis môi trường chứa gelatin 84 Hình 9.4: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis sau nhỏ HgCl2 lên toàn bề mặt thạch, để yên 10 – 15 phút 85 Hình 9.5: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis môi trường chứa tinh bột 86 Hình 9.6: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis môi trường chứa tinh bột nhỏ thuốc thử lugol lên toàn bề mặt thạch( mặt trên) 86 Hình 9.7: vi khuẩn Escherichia coli Bacillus subtilis môi trường chứa tinh bột nhỏ thuốc thử lugol lên toàn bề mặt thạch( mặt dưới) 87 Bài 10 : ĐỊNH DANH VI KHUẨN 89 Hình 10.2: Cao nấm men sau ủ ngày 92 Hình 10.1 Cao nấm men trước ủ 92 Hình 10.3 : mơi trường gelatin sau ủ có thuốc thử HgCl2 92 Hình 10.4: mơi trường dextrin sau ủ có mặt thuốc thử lugol 93