Ngoài việc chiết xuất các hợp chất có trong cây Ncem làm thuốc trừ sâu thì Ncem còn được các người đân bản xứ đặc hiệt là Ấn Đô dùng để chữa một số bệnh ở người và vật nuôi.Chính vì vậy
Trang 1BỘ GIÁO DỤC VẢ ĐẢO TẠO ĐẠI HỌC QUỐC GIA TP HỖ CHÍ MINH
TRUONG DAI HOC SU PHAM KHOA HOA
or RRA
Luin vdu tét nghiép
BUGC DAU TIM HIEU THANH PHAN HOA HOC-UNG DUNG CUA CAY NEEM
Ở VIỆT NAM
$y
hư
Sinh viên thực hiện : Nguyễn Thị Ánh Tuyết
Giảng viên hướng dẫn : Trần Thị Tửu
Trang 2Loi cam on
Em xin chân thành cảm ơn :
® PTS Trần Thị Tửu đã tận tình hướng dẫn và tạo mọi diéu
kiện cho em hoàn thành luận văn này
* Ban chủ nhiệm khoa, cô Thảo, cô Tĩnh, cô Ngọc Anh cùng quá
thầy cô trong tổ Hóa hữu cơ và các tổ bộ môn khác đã nhiệt tình giúp đỡ, truyền đạt những kinh nghiệm quý báu giúp em hoàn thành
luận văn này
*® Tất cả thầy cơ đã tận tâm truyền đạt những trì thức khoa học và kinh nghiệm quí giá trong suốt những năm tháng học ở nhà
[rường
®# Cùng tồn thể bạn bè thân yêu luôn quan tâm giúp đỡ, động
viên trong quá trình thực hiện đê tài
Trang 3MỤC LỤC
“2Q 2o?
LỜI MỞ ĐẦU
PHAN TONG QUAN
LDAC TINH THUC VAT:
I.1.Mô tả thực vật
I.2.Nhân giống -Trồng trọt- Phân bố, -
IÍ.CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ 'TRƯỚC TRÊN CẤY NEEM:
II.1 Thành phần hóa học
[I.2.Hoạt tính sinh học của những chất trích từ Neem
III.MỘT SỐ ỨNG DỤNG THỰC TẾ CỦA CÂY NHEM:
[IH.l Tác đồng trên côn trùng IH.2.Trong lĩnh vực cơng nghiệp
LÍI 3 Trong linh vực y học, PHAN THUC NGHIEM
LDIEUCHE CAC LOAL CAO:
1.1 Diéu ché cao cter etylic
I.2 Điều chế cao n-hexan, cao n-BuOH
ILDINTE TING CAC THANE PHAN HOA HOC CO TRONG LA NEEM
[I.I.Định tính ankaloid.,
H.2.Định tính Tanin 11,3.Dinh tinh Flavon, 11.4.Dinh tinh Glicosid, 11.5.binh tinh Sterol
11.6.Dinh tinh Saponin
1L.CO LAP AZADIRACHTIN,
IV.XAC DINH SU HIEN DIEN CUA MOT HOP CHAT ANKALOID PHU LUC
Trang 4Bute ddu tim hen
tơi mở đầu
& >>
Các loại côn trùng phá hoại luôn luôn là mối quan tâm của ngành nông
nghiệp Thật vậy hàng năm, những thiệt hại vé mùa màng do côn trùng có hai gây ra thât đáng kể,
Nước ta là một nước nông nghiệp , khí hậu nóng ẩm tao điểu kiện tốt
cho côn trùng gây hại phát triển lo đó nguy cơ thiệt hại vẻ mùa màng tăng Mặc dù ở nước ta cũng như trên thể giới đã có rất nhiều thuốc trừ sâu họ nhưng việc sử dụng thuốc trừ sâu tổng hợp hên cạnh việc trừ sâu họ còn để lại những tác hai như : hủy hoại môi trường sinh thái, ảnh hưởng đến sức khỏe con ngudi ( nhu DDT ) Chinh vì vậy việc tìm kiếm các hợp chất tự nhiên
hiện điện wong thực vật có tính kháng lại sâu bọ nhưng không ảnh hươỏng
đến sức khỏe con người cũng như môi trường sinh thái là rất cần thiết
Và cây Neem là một trong những ứng cử viên hàng đầu đã đuợc các nhà khoa học trên thể giới nghuên cứu từ lâu Họ đã thông báo rằng cây Ncem có
chứa nhiều hoạt chất kháng lại sâu bọ nhưng không ảnh hưởng đến sức khỏc của con người Cây Ncem lại rất để trồng và phát triển Ngoài việc chiết xuất các hợp chất có trong cây Ncem làm thuốc trừ sâu thì Ncem còn được các
người đân bản xứ ( đặc hiệt là Ấn Đô) dùng để chữa một số bệnh ở người và vật nuôi.Chính vì vậy mà chúng tôi muốn tìm hiểu về thành phần hóa học - ứng dung của cây Ncem
Do thời gian có hạn, trang thiết bị phòng thí nghiệm còn hạn chế, hóa
chất chưa đủ cho nên trong luân văn này chúng tôi chỉ thực hiện các việc sau:
Trang 6Cute ddu từ “cế«
LDAC TINH THYUC VAT :
Cay Neem!" 6 tén khoa hoc 1a Azadirachta Indica AJuss thude ho
Meliaceac.Từ lâu nó đã dược biết đến bởi nhiều tên khác nhau: Niembaum
(thie), neem, nimb (Hindi); Kohomba (Srilanka); Kohumba, nimba
(Singapore), mindi (Indonesia), margosa, nim (T4ay Ban Nha) , dongoyaro
(Nigeria); Azadirach Inde, margousicr, azadira (Phap) 1L.1.Mô tả thực vật Í:
Cây Neem có đặc điểm như sau:
“Cây có thể cao 30m,chu vị 2,5m
=Nhánh cây có thể vươn ra 10m,thân cây thẳng = Fán lá rộng và xanh tươi quanh năm,
=Vỏ cây tương đối dày và có nhiều đường rãnh sâu
=Rẻ cây bám sâu vào lòng đất Khí thân hoặc nhánh cây bị gãy,
nú sinh ra những chỏi bên Chỗi bên có thể phát triển tại những vị trí khô ráo Khi cây bị cất ngọn, nó có thể sinh chổi một cách dé dàng và nhanh chóng Những chỗ bị gây hay bị cất gắn mặt đất, chổi có thể phát triển thành những bụi nhỏ
-Hoa: luỡng tính, màu trắng và nhỏ Hoa mọc thành từng cụm ở
nách lá Mùi thơm của hoa giống mùi mật và quyến rũ rất nhiều loài ong Mật
neem rất phổ biến, đặc biệt nó không chứa chất azadirachuin
“Trái: hình bau duc giống quả hach, dài khoảng 2cm Trái chín có màu vàng hoặc vàng lục Bên trong hạt có nhân được bao bọc bởi vỏ hạt
Lôi khi mỗi hạt có từ 2-3 nhân, Trọng lượng của nhân bằng 1/2 trọng lượng
của hai
Cây bất đầu ra quả sau 3-5 nam và ra quả nhiều nhất khi cây được 10 tuổi, Từ đó hàng năm có thể thu hoạch 50kg quả Cây có thể sống hơn 2 thể
kỷ
1.2.Nhân giống -Erồng trọt và sự phân bố Í'*!
Cay neem rat dé nhân giống Nó có thể được trồng bằng hạt, cây con,
chổi bên có rể Nhưng thường được trồng bằng hạt và cây conl!ÍCó một
phương pháp mới trồng neem, đó là giâm cànhÌ?!
Khi trồng nccm, năm đầu nó phát triển rất chậm.Cây con không chịu dược bóng râm,giá rét hoặc quá lạnh.Tuy nhiên so với các cây khác, cây neem non phát triển tốt hơn nhiều!?Í,
Cay neem phat triển ở hấu hết các loại đấtđất sét, mặn, kiểm ÈÌ, Nó
phát triển manh ở nơi nóng nhất, nhiệt độ có thể lên tới 50°CP!, Không giống
các cây khác, ncem phát triển manh ở vùng đất khô có đá, ngay cả dất sét, Nó có khả năng chịu đựng chất thải công nghiệp, sự ô nhiễm khí độc như : SO;,,CO¿ Cho nên người ta dùng neem để tạo nên các vành dai xanh trong công nghiệp, trồng dọc theo các đại lộ !°Ì
Trang 7
Bute dau tim hee Tuy nhiên cây ncem không chịu được bãng tuyết hay quá lạnh Ở những
vùng đất ướt, cây nccm sẽ chết nếu bị ngập
Cách đây một thể kỉ, ncem được tìm thấy ở nhiều quốc gia Trung va
Nam Mi Hién nay neem moe rất nhiều ở An Độ, phía nam và đồng nam Châu
A như: Pakistan, Srilanka,Thái lan, Malaysia, Indonesia Đặc biệt là các quốc
gia nằm ở khu vực dọc theo vùng ven phía nam của sa mạc Saharal!!,
Ở Việt Nam, cây neem mới được đưa vào trồng ở Bình Thuận vào nãm |981
Trang 8Cute dau tim hen ILCAC CONG TRINH NGHIEN CUU Vi TRUGE TREN CAY NEEM: 11.1 Thanh phan hóa học: hdd La:
Nam 1954,K.Dakshinamuri'®! da dùng sắc kí và tách được các amino acid tư do như: acid glutamic, tyrosin, acid aspartic, alanin, proline va glutamin với hàm lượng lần lượt là:73,3%;31 ,5%;18,4%; 6,43%; 3,98% và khoảng l!%
Nam 1967,D.E.U.E Kong! đã xác định được cấu trúc của nimbolid trong lá, Lá ncem tượi được trích trong ctcr dấu hỏa thu được hợp chất nimbolid (1) c6 cong thức C;;Hu/O›, nhiệt đô nóng chảy 245-247"C, dd quay
cue [aly = +206” va điểu chế được dẫn xuất của nimbolid là acid
deacetyldihidronimhie (H) có nhiệt độ nóng chảy 192-194°C, [ơ]›; = +207” ( trong pHidIn)., Hư Ti, — 0 HOC tờ H qc OH 0
(2) Nimbolid (@Acid dcacctyldihidronimbic Năm 1968,Basak và cơng sự”Ì đã tách được | hợp chất màu vàng có
công thức C¡;sH;¿O; , nhiệt độ nóng chảy 295-305°C Khi chất này được tính
chế lai có nhiệt độ nóng chảy 310-315°C., Chất này được nhận danh là qucrcetin Khi acctyl hóa hợp chất này trong pyridin và Ac;O cho hợp chất
acectat có công thức C;sH;yO;; , nhiệt độ nóng chảy là 199-200°C
Nam 1986, Siddiqui 2Ì cơ lập được 2 triterpenoid từ lá neem D6 1a
nimocinolide (IIL) va isonimocinolide (IV) OH
(111) Nimocinolide
Trang 9
Cute dau tim hee
lsonimocinolide LI.1.2 Trên nÌưứa cây neeim:
Năm 1967, từ nhựa cây ncem, S.Usha Lakshmi va T.N Pattabiraman !°Ì đã cơ lập dược I)-glucosamin với hàm lượng 2,94+0,28mg/ L00 g nhựa, đồng
thời cũng xác định được hàm lượng N và protein chứa trong nhựa cây lắn lượi lũ 3% và 19 85%,
Năm 1970,Bajpai va cOng su da dùng sắc kí cột cclluloz với dung dich tứa giải là EUOAc- AcOH-HCO¿H-H¿O (18:3: 1:4) và :LOAc- AcOl1-H;O (9:2:2) có lập được 2 acid aldotriouroic và aldobiouronic
Năm 1978, Nayak va cOng su 3Ì đã cơ lập được asparagin, scrim, threonin, argilin, prolin, phenilalanin và tyrosin từ nhựa cây neem
11.1.3.7rén hoa, quả, hat:
Nam1942, Siddiqui '*"! da phan tich tinh du neem Ong 6 lap dude 2
hợp chất đắng ở dạng tinh thể, đó là nimbin(V) va nimbinin(VI) Đồng thời
ông cô lâp được một chất vô định hình, đắng là nimbidin (VHH)
(VII) Nimbin,
Trang 10
ước ddu tim hed Q-~ "*OAc (VL) Nimbinin (Epoxyazadiradion ), (Nimolin ) (VH) Nhnbidin
Năm 1967, C.R Narayganowa K.N Iycr ™ da chiết xuất được
dcsacctylnimbin từ hạt ncem Quá trình chiết xuất như sau:
Từ cao thô ban đấu, sau khi chạy sắc kí cột với dung dịch rửa giải là
benzcn-acctat ctyl, thu được nimbin thô Khi chay sắc kí bản mỏng, tấc giả
thấy ngoài nimbin còn có một chất hiện lên ở phẩn rất phân cue Lay lg nimbin thô ( có nhiệt độ nóng chảy I88-192”C } hòa vào benzcn rồi cho vào đầu cột alumin (50g,16x320ml), sau đó rửa giải lần đầu với henzcn tổi với benzen hoà 10% acctat ctyl rửa giải lần thứ hai và lắn thứ ba thu được nimhìn
tỉnh khiết Triển khai trên sắc kí bản mỏng với hệ dung ly tolucn-acetat etyl-
etanol (9:6:1) thay nimbin có lRr = 0,67 và hai phần đoạn khác cho cùng một vết có R¿ = 0,63, Nhập chung hai phân đoạn này lại và để kết tỉnh thu được
dcsacctylnimbin ( 07mg) có nhiệt độ nóng chảy 208-210C, [œJ= +l I0” Cùng năm 1967,D.Lavic va cOng su #Ì đã tách mcliantriol từ hat necm
wi, Quad trình chiết xuất như sau:
Hạt neem tươi được ngâm và xử lí rong (loroform Sau đó chat trích thô
được chạy sắc kí cội với pha tĩnh là florisil Lấy phân đoạn rửa giải bằng
Clorolorm-aceton (9:1) chạy sắc kí cột lần thứ hai với pha tinh silica gel ue pur (hãng Merck).Trong phân đoạn accton - €loroform (3:7) thu được môi chất kết tỉnh có nhiệt độ nóng chay 176-178"C, [a], = -23, công thức phân tử
CauH+/O¿ Chất kết tỉnh này chính là meliantriol (XI) Trong quá trình chạy
Trang 11
ước đấu tư heed
sắc kí cột, ông và công sự cũng đã trích dược những chất đã biết trước đó
như: meclianol (VI, melanon (1X), melianodiol (X),( nhiệt độ nóng cháy 230- 232C, [œl›= -60”) và đã điều chế được các dẫn xuất (hợp chất (XI ), nhiệt độ ndéng chay 115 -118"Cfafy = -43°) va penta of (nhidt dé néng chủy 255 - 258C, |ưœ]u¿ = -42”) 0 H ä Ô 1L
(XI) Meliantriol R' = H, OH ; R? =H (VIL) Melianol R= H, OH,
(XI) R' =H, OH; R*=Me (IX) Melianol R=O (X) Melianodiol R' = O; R? = H HO tú H OH HO Penta ol
Năm 1968, T.H Butterworth va E.D Morgan °""! đã cô lập được
azadirachtin từ hat ncem Đây là chất có tính diệt côn trùng rất hữu hiệu Quá trình chiết xuất azadirachtin từ hat neem được tiến hành như sau:
Hat neem được ngâm với clanol trong môi trường lạnh, sau dó được đem chạy sắc kí cột với pha nh là alumin Sắc kí cột nhiều lần thu được môi
chất vô định hình không màu Chất này được xử lí nhiéu lan cho that tinh khiết bằng sắc kí lớp dày và sau khi cho kết tinh trong CCl, thu dude azadirachun, là một chất tỉnh thể ở dang bột, có nhiệt độ nóng chảy là 155 -
158°C, [a]p= -53”
Nam 1975, Nakanishi va Koju '''! da 6 lap dude azadirachtin va salanin
từ hạt cây neem và xác định được cấu trúc của hai hợp chất này dựa vào phổ
'C va pho NMR 'H
Trang 12Bate ddu tim hen a cạo a 0 Azadirachtin COOMe Salanin
Nam 1978, Siddiqui và công sự !*Ï đã cô lập một hợp chất mới có tên là
I7-hydroxyazadiradion từ hat cây necm
17- hydroxyazadiradion Nam 1973,Chiang va Chang '*! đã cô lập được Kulactone
Trang 13Bute ddu tim hen
>i
Kulacton
Nam 1991, Siddiqui °! da tim ra được các hợp chất limocinol,
Trang 15Cute dda tim hE
1I.1.4.frên rễ và thân cây:
Năm 1969, l Kong và cộng sự Ì!! đã tách từ thân ciy neem hai chat nimbolin A va B, fraxinellon, Nimbolin A cé nhiệt đồ nóng chảy 180
183°C, [a]}) = -38,6", Nimbolin B có nhiệt đô nóng chảy 243 -245"C, fa}p= - 93,3" Eraxinellon có nhiệt độ nóng chảy 108 -L1ÓC, [ơ] ; = -41,7” (trong CHC) ⁄ = Ae a a8 0 Acđ OCH =CHph 0 â Nimbolin A Eraxincllon OH Me = — Me Aco O, CCH = CH fh Me Nimbolin B, H.2.Hoạt tính sinh học của những chất trich t¥ neem:!!! II.2.1.Azaduwachun:
Đây là chất được cô lập đầu tiên và có hoạt tính chống lại côn trùng khi phun lên côn trùng, Nó không giết côn trùng ngay mà ngăn cản không cho chúng phát triển và sinh sản Azadirachun có cấu trúc tương tự như hocmon *ecdysones” của côn trùng Đó là loại hocmon điều khiển quá trình tiến hóa
của côn trùng tữ lúc còn là ấu trùng đến lúc trưởng thành Nó ngăn cản sự sinh
sản của côn trùng và sư tiết ra những hocmon cần thiết cho sư sống Côn trùng sẽ không lột xác được Điểu này làm cho chu trình sống của côn trùng bị gián
đoạn
Nhân hạt ncem chứa trung bình từ 2-4mg/lg hạt nhân Hàm lượng cao nhât dược biết đó là 9mg/lg nhân hạt necm Ngoài ra nó còn có trong các thành phần khác của neem như lá , thân
II.2.2.Meliantuiol:
Chất này cũng có hoạt tính chống lại côn trùng Meliantriol có thể ngăn
cản không cho côn trùng ăn ở nồng độ cực kì thấp Nó còn có khả năng ngăn cần châu chấu phá hoại mùa màng
Trang 16
ước dau tim hééu 11.2.3 Salanin:
Salammn là tritcrpenoid được cô lập từ neem.Hợp chất này cũng có tác
dung ngăn củn việc ăn của côn trùng rất mạnh nhưng không ảnh hưởng đến
sự lột xác của chúng Các cuộc thử nghiệm hoạt tính của Salanin trong phòng
thi nghém cũng như trên những cánh đồng cho thấy rằng nó ngăn chắn sự phá
loại của côn trùng và châu chấu Salanin có tác dụng ngăn không cho châu
chấu bám vào cây trồng , thậm chí ngay cả những cây mà chúng thường dâu
nhất Salanin ngăn chặn sự phát triển của một số côn trùng hiệu quả hơn chất
tổng hợp DEE'T (N,N-dictyl-m-1oluamid)
11.2.4.Nimbin va nimbidin:
Hai chat nay c6 kha nang chong lai virut X wén khoai tay và virut gây
bệnh đậu mùa ở gà Ngoài ra hai chất này còn góp phân vào việc chống lại một xổ virut khác gây hư hại mùa màng và gây bệnh ở một số vật nuôi
Trang 17Bute dau tim hen
HILMO'T SO UNG DUNG THYC TE CUA CAY NEEM:
III.L.'Fác động trên côn trùng |":
Cây Ncem chứa nhiều hoạt chất hoạt động dưới nhiều hình thức khác nhau trongahững trường hợp khác nhau Những hợp chất này thường không
chứa những chất hóa học có trong thuốcuừ sâu hiện nay VỀ mặt hóa học
chúng có liên quan đến stcroid.Chúng chứa hocmon chữa viêm và dị ứng, thuộc điểu khiển sự sinh sản và nhiều dược phẩm có giá trí khác Những hợp chất này chỉ có C,H,O nhưng lại không có CI,P,S,N (như chúng ta thấy phổ hiến trong các loại thuốc trừ sâu tổng hợp) I3 đó phương thức hoạt đông của chúng cũng hoàn Loàn kkác nhau,
Các sản phẩm của Neem không tiêu diệt ngay những côn trùng gây hại Nó chỉ làm cho côn trùng mất khả nắng ăn uống, sinh sắn hoặc ảnh hưởng đến
quá trình tiến hóa Và điều đặc biệt là các sản phẩm neem tạo thành rất ít hoặc
thậm chí không có chất độc đối với môi số đông vật có máu nóng
Sư tác dông của các chiết xuất khác nhau của neem trên côn trùng theo
các hình thức sau:
=Làm rối loạn hoặc ngăn cản sự phát triển của trứng, ấu trùng của côn trùng có hai
Ngăn chặn sự lột xác của ấu trùng, nhộng
Làm mất khả năng giao phổi và quan hệ giới tính ở côn trùng Ngăn không cho con cái dẻ trứng
Làm cho những con trưởng thành sống èo uột khé khan =Ngăn chặn không cho côn trùng ăn
Các chiết xuất của ncem có khả năng kháng lại côn trùng ở nông độ
khoảng Ippm.Dudi day là một số côn trùng mà các sản phẩm ncem có khả năng chống lai
H1.1.1,Chau chau: '**!
Dầu ncem có hoại tính ngăn cản châu chấu phá hoại mùa màng Những
con châu chấu khi tiếp xúc với tỉnh dầu ncem sẽ tách ra khỏi đàn, sống đơn độc và trở nên đờ đẫn Do đó chúng sẽ là mồi cho những động vật ăn thịt (
nhy chim) Dich chiết ancol từ neem có tác dụng làm rối loạn quá trình tiến hóa của châu châu hoặc ngãn chặn những con trưởng thành không cho chúng ăn hai mùa màng!!!
Tinh dau neem c6 kha nang lam cho rau của châu châu không còn tác
dung,
Azadirachun có tác dụng làm cho châu chấu, cào cào không ăn, chết, gây đột biến gen hoặc làm giảm những hoat động chung của châu chấu,cào cao,
Trong những mảnh đất trồng đã dược phun xịt tỉnh đầu ncem,cào cào và châu chau không ãn những phần trên của cây trồng, Một vài con ăn phần dưới của cây thảo mộc gắn mặt đất, nơi mà có rất ít những giọt tính dầu neem!?!
Trang 18
Cute dau tim Ácế& |
III.L.2 Gián:!
Neem ucu diệt những còn gián con và ngăn không cho những củn trưởng thành đẻ trứng Chất chiết xuất từ hat neem kìm hãm sự sinh trưởng
của chúng
III.I.3,ltẩy nâu:
Phần còn lại sau khí đã trích tỉnh đầu neem ra khoi hat nhan neem ( còn gui la banh neem } có khả năng chống lại rấy nâu ( và một số côn trùng hai
lúa).Khi phun xịt tỉnh đầu ncem trên các vụ lúa sẽ bảo vệ mùa vụ tránh khỏi
sư phá hoại của những con vật gây hại |"!
Ngoài ra dịch chiết nước từ nhãn hạt nccm cũng có tác dụng chống lại tủy nâu, Các sản phẩm của neem tác động trực tiếp lên thể mỡ hoặc làm cho sự trao đối chất của hocmon mất cân bằng, Do dé dan Wi ray nau bị giảm kích
thước và trọng lượng.Nãầo của rẩy nâu chịu ảnh hưởng rất mạnh của
azadirachtin.!°!
IHI.L.4 Sâu:
Azadirachtin cũng chống lai những con sâu ở nổng do cue ki thấp, IOmg2lhal'Í
Các chiết xuất mecltanol, ctcr dầu hỏa, nước từ nhân hạt Ncem và tinh dấu Necem có tác dụng chống lại sâu ãn lá cải bắp.Tỉnh đầu neem làm giảm
khả nàng nở trứng sâu, ngăn không cho sâu non phát triển Tỉ lệ sống xót của
con sau da lot xác 2 lần chỉ còn 10% khi phun xịt tính dầu ncem 2%.Hơn nữa dịch chiết nước từ nhân hat ncem và tỉnh dấu ncem rất rẻ Sự ứng dung tính
dầu ncem vào vụ mùa bắp cải không đem lai bất cứ mùi vị khó chịu nào cho
bap cải khi nấu Đồng thời tỷ lỆ lá hư hại giảm so với khi không dùng thuốc trừ
sâu hoặc dùng thuốc trừ sâu khác 1?!
[II.1.5.uổi trái c am
l3ãy là một trong những con vật phá hoại vườn trái cây nhiều nhất Ncem có tác dụng điểu khiển những con ruồi trái cây, Nó không những giết
những con ruồi này mà còn giết ngay cả những con vật kí sinh Khi bón neem
vào đất, nó ngăn chăn hoàn toàn sự sinh sản của côn trùng có hại
Ngoài ra ở Úc, người ta đã thử nghiệm các sản phẩm của nccm và thấy tầng chúng có hoạt tính chống lai ruồi xanh trên cừu Ấu trùng của loài ruối
này thâm nhập va dao khoét da cừu thành những lỗ.Từ đó cừu chết
Azadirachtin ngăn chặn không cho ruồi xanh đẻ trứng trên da cừu,
111 1.6,Sau duc xoai:!
Dau Neem có tác dụng chống lại sâu đục xoài Dịch chiết chứa tỉnh dầu
neem co tác dụng làm cho nhồng của sâu đục xoài chết 100% khi phun xịt lên xuài Sau 4 ngày phun xịt, tử lệ sâu đục xoài chết nhiều hơn so với khi mới phụn xịt Thâm chỉ một số con nhông còn sống sót nhưng khi nở ra thì cũng bi
chết,
1.1.7, uôc hộ cánh cứ AN
Trang 19
Suse dau tim hex
Cae luài sâu bọ thuộc bộ cáuh cứng( như bọ hung) rất nhạy cám với sản phẩm neem Khi cây trồng được phun xịt nccm, chúng không ãn và phát triển châm chạp Một số thì chết khi tiếp xúc với sản phẩm neem,
III.1.R,Giun won"!
Day cing la con vat pha hoai mda mang Phan đoạn limonoid thủ được
khi chiết xuất wr hat neem đã thể hiện khả năng chống lai giun tròn lập trung
tẻ cây trồng Limonoid ngăn chặn sự xuất hiện của ấu trùng và làm cho
trứng không nở Nó có hiệu quả tại những nơi có nống độ vài phần triệu, I3ịch chiết nước từ hạt ncem cũng là một loại thuốc diệt giun tròn,
III,I.9 Nấm: 9!
Neem chống lại một số bệnh ở cây trồng do nấm gây ra như: thối rữa,
héo cây nắm mốc, Nấm tấn công vào mùa màng với số lượng vô ké và hình thức đa dang Đặc biết là nấm Aspcrgillus flavus Nấm này sản sinh ra chal
hóa học gọi là aflatoxin chứa hàm ludng carcinogen cao, D6 1a chảt gây ung the Nam thường thường sản sinh ra 2% aflatoxin Điều kì lạ là neem không
giết chết nâm Aspcrgillus [lavus mà làm cho nó không sin sinh ra aflatoxin Những cuộc nghiên cứu trong nhà kính đã khẩng định rằng những chảt chiết xuất từ hạt necm ngân chăn sự hình thành chat goi la polyketide dé nim
chuyển đổi thành aflatoxin Enzyme cẩn cho quá trình chuyển đổi đó thì vẫn
còn, nhưng những chất hóa học cơ bản cấn thiết cho sự tổng hợp chất độc
allatoxin thì không còn nữa
Trong thực tế, lá nccm đã được nghiền nhỏ ngâm trong nước Lấy dịch chiết thô này dùng mà không can lọc, tỉnh chế kĩ Nó làm ngừng hẳn sư tạo ra
allatoxin,
I0.Những côn tring 6 hai khac:!'!
Cin tring Hoạt tính của neem đổi với côn trùng
Muối Ngừng ăn chết trong vòng 24*sau khi tiếp xúc với neem
Bum Ngan chin sự ăn uống, chăn đứng sự sinh trưởng
lìo cánh cứng dì hót mì Cần trở sự ãn uống,chăn đứng sự lột xác, ấu trùng bị ngô dộc Bo chet Đẩy lùi sự sinh trưởng, làm rối loan sự phát triển
cản trở việc ăn, làm cho trứng không nở
Chay ran Ciiết chết
Muôi gây sốt vàng da Tiêu diệt âu trùng,ngăn chăn sự lột xác
Kiến lửa Cần trở việc ăn, làm rổ loan sư sinh trưởng
Mot paw Cần trở việv ăn, làm rối loan sư sinh trưởng, gây ngô độc
Để tạo ra thuốc trừ sâu từ ncem về cơ bản rất đơn giản Lá và hạt của
Trang 20Agronecm có tác dung chống lại một số sâu bọ : rấầy nâu, rệp, xâu, tuổi
ước đầu tw điểể&
trên các cây trồng như: bông , cà chua, khoai tây, đậu, luá, Cây Sâu họ Agronccm Lifting nước trắng (ml)/0,4ha cần pha loãng (l) Bong Rép 400-500 80-100 Rudi trắng 800-1000 160-200 Sâu ăn lá §00- L000 160-200 Sau hong 800-1000 160-200 Ca chua Sâu xanh ở thuốc lá 800-1000 160-200 Ray ăn lá 800-1000 160-200 Rudi trang 800-1000 160-200 Khoai liệp 400-500 80-100 tầy Cải lệp 800-1000 160-200
bap, cdi Budm 800-1000 160-200
súp ld Sâu duc bắp cải 800-1000 160-200
Lua Sâu dục thân 600 - 100 420-160
Bướm ÍƠ0 -¿O00 | 2£0-200 Ray nau 800-1000 160-200 Bap Sâu đục thân 800- 1000 160-200 Sâu 800- L000 160-200 lệp 400-500 80-100 Mọi xám 800-1000 160-200 Dau Sau duc than 800-1000 160-200 nành Sâu dục lá 800-1000 160-200 Sâu xanh thuốc lá 800-1000 160-200 Bo nau 800-100 160-200 ltệp 400-500 80-100 Đâu Sâu khoang lá 800- L000 160-200 phong Sâu róm đỏ 800-1000 160-200 Sâu đục thân 800- L000 160-200 Tao Budm,sau dém 800-1000 160-200 Sâu đục thân 800-1000 160-200 Sâu cuốn lá Chanh Hướm 800- L000 160-200
cam Sâu khoang, 800-1000 160-200
bưởi Rudi tring 800-1000 160-200
Trang 21
ước đầu ttwc điể&
HI.2 Trong lĩnh vực công nghiệp: `Í
Ngồi việc dùng làm thuộc trừ sâu, ncem cung cấp nhiều nguyên liệu
thong thường và hữu ích cho các ngành công nghiệp
Trong các thành phần cia neem thi tinh dẫu ncem được sử dung nhiều nhật và kinh tế nhất, Nó cũng giống như mọi loại dẫu thực vật khác và được
điểu chế từ hạt Sản lượng dầu đôi khi đạt tới 50% trọng lượng của nhân, Tính dấu neem chứa acid olcic, stcaric, linolcic và acid palmitic, không chứa lưu huỳnh Nó có mùi hang hii dang, mau sim Dudi day la một số sản phẩm làm từ dẫu nccm và các hộ phân khác của nccm
III.2.1.Xà bông:
Xà bông được làm từ dấu ncem., Đầu ncem thô đã xà phòng hóa và
chưng cất acid héo, sau đó cho kiểm vào để được xà phòng tốt hơn, Xà phòng tu được không mùi, không màu thích hợp cho mội số công việc,
1II.2.2.Chất hồi trơn:
Dau ncem không khô và dễ bị phân hủy hơn các dầu thực vật khác Nó thường được dùng làm mỡ bồi trơn vào các bánh xc ngựa ở Ấn Độ
III.2.3.Phân bón:
Neem con có khả năng làm phân bón Đặc biết là lá ncem và bánh dấu
neem
¢Banh dau Neem:
Sau khi da tach dau neem ra, phan cin còn lai gọi là bánh đầu neem Nó bao gồm: Protcim thd 13-35%, Carbonhydrat 26 - 50% Sdi thé & - 26% Chat béo 2 - 13% Tro 5 - 18%
Tro khong tan trong axit | - 17%
Bánh dầu ncem quá đấng không thể làm thức ăn cho gia súc Nhưng nó là phân rất triển vọng Bánh dẫu ncem chứa nhiều N, P, K, Ca, Mg hơn phân bón thông thường Khi bón bánh dầu neem vào đất, nó bảo vệ cây khỏi giun tròn, kiến trắng ( có lẽ chứa limonoid ) và nó làm cho đất mẫu mỡ hơn Đó là vì các hợp chất có trong bánh dầu ncem ngan cin các vi khuẩn trong dất
chuyển các hợp chất nítơ thành khí nit0 Khí trộn bánh đầu ncem với ure, nd
làm giảm lượng ure chuyển thành khí nitơ Neem trộn với urc tỉ lệ 90 : 10 xẻ tiết kiệm được 30% lượng N cần cho vu mia’?!
*Ld neem : ;
Ngoai bank déu neem dong lam phan bón, nhiều người dân ở Áa Độ dã
dùng lá nccm xanh làm phân bón, Họ bón chúng vào các cánh đồng ngập nước trước khi gico trồng lúa Ngoài ra lá ncem còn dùng để bón cho các cánh
Trang 22
ước đấu tim hen
đóng thuốc lá, cà chua
LHH.3 Trong lĩnh vực y học:
Ngoai tic dung khang lai sau bo, neem còn có khả năng chữa môi số
hénh 6 nguch
Neem có tác dung chống lại một số nấm gây bênh ngoài da mà hiện nay một số thuốc trừ nấm tổng hợp rất ít khả nâng điểu trị Nghiên cứu trong
phòng thí nghiệm cho thấy rằng neem gây độc tính đổi với 14 loại nấm phổ biến như:
sTrichoplhiyto: nấm gây bệnh ở tóc , da, móng tay , móng chân
el:pidcrmophyton :ndm gay bénh hic lao, lan ra 6 da tay và móng chân eMicrosporum : nấm gây bệnh hấc lào, lan ra ở tóc , da đôi khi ở móng chan , tay,
Neccm cũng giông như các loại cây thuốc khác Các bô phận của nó như lá, hoa „ rẻ, hat vỏ đều đã được dùng làm nguyên liệu để bào chế thuốc
=Lá thì thường dược dùng dưới thức thuốc cao hoặc nước sắc để chữa
mọt số bệnh: như : bệnh ở mất, giun sắn ở trong ruột , biếng ăn, hủi lRiếng lá già
có thé chữa lành các chổ mưng mủ, nhiễm trùng, ung nhọt Dr Ekaid đã thí nghiệm lá neem va thay rằng lá có chứa những thành phấn dinh dưỡng hơn bất kì thực vật tương tứ mà đã dược phân tích hóa học từ trước Lá già cũng như những mầm xanh chứa nhiều protein, canxi, sắt, vitamin A
-Hua : dùng dé tay sạch giun sán ở ruột, sạch đờm ở cổ
=Nhánh non: chữa ho, suyễn trĩ, no hdi, san
“Trái : trái chưa chín có vị đắng và cay, Trái chín cũng có vị đắng nhưng
hơi ngọt Trái dùng để chữa một số bệnh như: chảẳy máu cam, đờm , một số
bệnh ở mất , lao phổi Hạt nhân của tdi neem có tác dung làm thuyên giảm bệnh hủi, giun sán ở trong ruột
Ngoài các bộ phận của necem dùng làm thuốc thì tính dấu nccm cũng có tác dụng tích cực trong việc chữa bệnh Thco sự phân tích hóa học của IDr
Roy và Chettcrji, tỉnh dầu ncem chứa 47% S, resin, glucosid, acid béo và môi lớp chất màu vàng vị đắng mà có thể là ankaloid.!*Ì
Tinh dau neem có thể chữa trị bênh ngoài da : hắc lào loét, hay những bénh 6 mat!” Va tỉnh đầu neem còn có khả năng tiêu diệt môt số vị khuẩn gây bệnh:
eStaphylococcus aurens: vi khuẩn này thường gây ngộ độc thức ăn, gây viêm màng bung, viên bọng đái , viêm màng não
eSalmoneclla typhosa : là ví khuẩn đắng sự, sống trong thực phẩm và nước , Nó gây ra sốt thương hàn „ ngô độc thức än!'!,
Iưới đây là mới số phương cách cụ thể để chữa một số bệnh
III.3.1 Ung nhọt trên da đầu: ”
Để chữa bênh này cách làm từng bước như sau:
Trang 23Cute dau lim hit Dau tiên gội dầu bằng nước sắc cla ld neem, Sau đó ta tán nhuyễn lá n„ccm với một ít nước để cho chúng hơi nhão Dùng miếng vải sạch vất lấy nước Sau đó ta thêm vào nước này một lượng dẫu mè hằng nhau rỗi dem dun
sôi cho đến khi nước bốc hơi chỉ còn lại dấu Lọc sạch bằng miếng vái thưa
Lay phần lọc thu được thoa lên chỗ ung nhọt Cuối cùng rắc tro của li neem lén
III.3.2.Sốt!'9!
Các chất chiết xuất từ lá ncem và hạt nccm có tác dung chông lại kí sinh trừng gây sốt, Nó có tác dụng lên các tế bào nhiễm sốt rét như là vật kí
sinh Tat cd các chiết xuất khác nhau được thử nghiệm có tác dụng kìm hãm
sư phát triển của kí sinh trong vòng 72 giờ Trong đó những chiết xuất bằng
ctanol cla lá neccm và những chiết xuất bằng các dung môi phân cực trung bình của hạt ncem là có hiệu quả nhất"!
be chiva sot mãn tính , ta có thể làm như sau
Dun soi 10g vd neem trong 500g nước Khi hỗn hợp còn lại 50g dưa chủ
người bệnh uống mỗi sáng Trong vòng vài ngày bệnh nhân sẻ khỏi sỏi Trong ưrường hợp bệnh nhân không chịu nổi thuốc kí ninh người bệnh có thể đùng thuốc được chế theo cách sau:
Đun sối 50g vỏ bên trong của cây ncem trong 700g nước trong vòng L§ phút Sau đó ta lọc rồi đưa phan nước cho người hệng uông 2-3 lần mỗi ngày với liều lượng 40-ROg trước khi cơn sốt ập đến
Đối với những người bị vàng da do sốt gây ra thì có thể dùng cách sau:
Tấn nhuyễn 0g ld neem và 6g hạt tiêu trong nước Sau đó vắt lấy nước
roi thém vao 30 grains NaHCO, đưa cho người bệnh uống ngày hai lần Bệnh sẽ khỏi trong vòng vài ngày, Hoặc tán nhuyễn IOg lá nccm và 4 hại tiêu trong nude lay nước đưa cho bệnh nhân uống vào mỗi sáng với một ít đường
III.3.3 Bệnh quáng 01
Tán nhuyễn lá neem trong cối Trong lúc tấn cho vào môt ít nước để hổn hợp hơi nhão Sau đó dùng miếng vải sạch vất lấy nước Người bệnh dùng nước này nhỏ vào mắt mỗi tối
H11.3.4.Ung nhotd ưong tại:!')
Lay nude cua ld neem trộn với mật ong nguyên chất ( lượng bằng
nhau) Dun lén cho 4m ấm r6i nhỏ vài giọt vào tại Sử dụng thường xuyên cách này thì bệnh sẽ khỏi trong vòng vài ngày
III.3.6,Chữa đau lợi răng:!""!
Súc miệng với nước sắc của lá ncem Sau đó lấy miếng giẻ tẩm tỉnh dầu
ncem rồi hôi lên lợi răng Phương cách này không chỉ làm giảm những bênh
Ở lợi răng mà còn giữ cho răng tránh khỏi những bệnh khác
III.3.7,Viêm phổi"!
Viêm phổi thường kèm theo sốt , ho và đau nhiều
Lấy lá neem vùi trong tro một lúc, Sau đó đem tán nhuyễn với nước âm
|I®1,
Trang 24
ước dau tim hen âm [Dùng miếng vải vắt lấy nước đưa cho người bệnh uống
III 3 8,Chữa wi f 5 nụ ở wong mat gay ra!" Lây một lượng lá neem vừa phải, phơi khô trong bóng mát, Sau dó cho vào lọ bằng đất và nung cho đến khi cháy,tán nhuyễn lá nccm cháy với nước
chanh Lấy nước này nhỏ vào mất mỗi sang và mỗi tối 11.3.9 Vet thugng loét mung ma:''*!
Khi vết thương đã có nhiều mủ trong mội thời gian dài rất khó làm sạch
Hiển hợp sau có thể làm vết thương sạch mủ:
Lá nccm , mè, mật ong nguyên chất tán nhuyễn chung với nhau Đắp
hon hợp này lên chỗ vết thương , vết thương sẽ sạch mủ và mau lành
IIL.3.10.f!'Ì
Lay 50g nhân hạt neem và camphor và làm thành bột thô Chiết xuât tinh đầu của nó Đừng tỉnh dấu này thường xuyên thì bệnh sẽ giảm và mau lành
LỊI.3.11.Đau bụng máu kinh nguyệt!”
‘Tan nhuyễn 7 lá neem trong nước gừng tôi đưa nước này cho người bệ nh uống Cách này sẽ giảm đau nbhụng mắấu kinh nguyệt ngay trong thời kì hành kinh
III.3,I2.Sưng viêm vú:!!9!
Cho vào dĩa sắt một íL lá ncem, dùng đĩa khác úp ngược lên DÐun cho
đến khi lá ở trong đĩa chuyển tro đen, lấy ra đem nghiền thành bột Sau đó lấy 50g dầu mù tạc đun sôi cho thật kĩ và trộn với 25g bột trên , ddng que ncem
lan ra
Dau tiên làm vệ sinh chỗ sưng viêm cho thất sạch bằng nước sắc của lá
neem, Ti€p theo 1A boi hỗn hộp trên vào, để yên 2-3 ngày rồi làm vệ sinh cho sạch, rồi tiếp tục bôi lên tương tự
Trang 25
Gute dau Lim hen |
Trang 26
Bute dd tim hen
La Necm duve thu hai ¢ Binh Thuan, La Neem tươi được phơi khô trong
bóng râm Sau đó dùng cõi tán nhuyễn lá Ncem thành bội
Hình: Lá Ncem khô 1.ĐIÊU CHẾ CÁC LOẠI CAO
I.1.Điều chế cao eter etylic:
Bột lá Nccm khô ( 20,53g ) được chiết trong Soxhlct bằng dung môi bao
gom 300ml ctanol 96” và 60ml acid acctic 95% trong 49 gid Sau thời gian này, dịch trích thu dược nằm trong bình cấu và được dem đi chưng cất ở áp
suất thấp, nhiệt độ thấp hơn 50C ta sẽ thu được cao Cao này đem tân trích vii eter elylic Dich ich eter ctylic thu được lần lượt rửa với nước, làm khan
bởi NagiSO,, lọc Cuối cùng dịch cter ctylic đem chưng cất ở áp suất thấp thì
thu duve cao eter etylic Qui trình điều ché cao cter ctylic được tóm tất ở sơ để
i
Trang 27
ước đấ« ta Ácữ& Sơ để I.ĐIỄU CHẾ CAO ETER ETYLIC Bột lá ncem khô(20,S3w) Chiết trong Soxhlet, 49 gids ba Dich trich Chưng cãt ở áp suất thấp ( < SŒC ) Cau Tan trích với ctcr elylic
Dich trich cter ctyltic Can
~ lửa với nước
—Lam khan bdi Na, (SQ, Âha~ Lục ~Chưng cất ở áp suất thấp ( <s0"C ) CAO ETER ETYLIC
11.2.Diéu ché cao n-hexan va cao n-BuOH:
Để diéu ché hai loại cao này thì cách làm đơn giản hưn
Bot li Neem khô(50g) được trích lần đâu với 350ml n-hexan trong bộ
chiết Soxhlet trong 28 giờ Dịch trích n-hexan thủ được đem chưng cất ở áp
suất thấp, nhiệt độ thấp hơn 50C thì thu được cao n-hexan Còn bã đem phơi khô, sau đó tiếp tục trích với 350ml n-BuOH trong b6 chiét Soxhlet trong 52
giờ, Quá trình được tóm tất ở sơ đồ 2
Trang 28
Sơ đỏ 2.Điều ché cao n-hexan va cao n-BuOH,
Saute dau tim hiéu Hột lá Ncem khô (50g) Trích với n-hexan trong Soxhlet, 28 giờ | Dich tich n-hexan Có ở áp suất thấp, Ứ< S0"C CAO n-HEXAN 4 a Trích vai n-BuOH trong Soxhlet, 52 giờ | 4
Ba Dich trich n-BuOH
Trang 29II.ĐỊNH TÍNH CÁC THANH PHAN HOA HOC CO TRONG LA NEEM: LI.1.Định tính ankaloid: Xác định sự hiện diện của ankaloid dựa vào các thuốc thử sau: tThuốc thử 3OUCHARI2AT:; =I; 2,58 -KL 5g =Nước cât 100ml Hòa KI và l; vào 100ml nước cất Thuốc thử cho kết tủa màu nâu hoặc vàng đâm với ankalod, +Thude tht MAYER: —HeCl, 0,082 -Kl 25g —Nuge cit 50ml
Hoa tan HgCl, vav 30mli nude cat va KI trong Smi nude cat Trén đều hai hỗn hợp
lai và thêm nước cất cho vừa đủ 50 ml Thuốc thử cho kết tủa màu trắng chuyển sang nâu nhạt +Thuốc thử HAGIR: Acid picric bão hoà ở trong nước Thuốc thử cho kết tủa màu vàng với ankaloid +Thuốộc thử I)RAGI:NIXR-L: =Bi(NO)), 10g “HNO›;d I5ml -KI 14g
Hoa tan Bi(NO,), vao HNO, dam dac , dem lọc, Hòa tan KI trong 30ml nước cất Trôn hai hỗn hợp trên vào nhau , dé yên qua đêm, cho thêm nước cất vào vừa đủ
125ml Thude thử cho kết tủa màu vàng cam với ankaloid
Thực nghiệm:
Mẫu ( cao n-hexan, cao cter ctylic, cao ancol ) hòa tan trong hệ dung môi ctcr ctylic-CHCH ( L:l) và HCI Dich acid làm dịch thử,
Còn bột lá khô hòa vào HCI 1% , dun nóng l giờ , để nguội, lọc Lấy dịch lọc
làm dịch thử, Kết quả định tính được trình bày trong bảng |
Bang 1.KET QUA BINH TINH ANKALOID CO TRONG LA NEEM KHO
Trang 30
liú Dang Thuốc thử Kết quả phân mau cay = Bouchardeat | Mayer | Hager DragendorlT " Cav n- Không có hexan ankalow La | Cao cter Không có ctylic ankaloid - Cao + + + + Có ankaloid ancol | Hỏi lá + + + + Có ankaloid khó " Kết luận:
Trong cao n-hexan , cao ctcr ctylc cuả lá không có alkaloid Trong cao ancol và lá khô có alkaloid.,
11.2.Dinh tinh Tanin:
Dinh tính tanin dựa vào các thuốc thử sau:
+Thuốc thứ SFYASNY:
~=Formol 36% Ont
-HCI dd LOml
Nhỏ thuốc thứ vào ống nghiệm chứa dịch thử, đun núng â Tanin s trim hién
thành khối vô định hình màu hồng dâm, nhạt
+Thude thif GELATIN:
=Gclatn 2p
—NaCl bao hoa 10m,
Thuốc thử sẽ cho trầm hiện màu vàng để lâu hóa nâu
+I3ung dịch acctat chì:
Cho trắm hiện màu vàng +Dung dich FeCl, 10%
Cho mau xanh den hoặc lục Thực nghiệm:
Lấy mẫu ( cao n-hcxan , cao clcr ctylic, cao anecol, bột lá khô ) cho vào nước cất
dun trong | gid, lay dich loc lam dịch thử Kết quả được trình bày trong bảng 2
Trang 31
Cute ddu tim hiéu BO phan Dang mau Thuốc thử Kết quả cây
Stiasny | Gelatin | Dung dịch Dung acctat chi dich FeCl, Cao n- hexan - - Không có lanin Lá Cao eter - Không có etylic lanin - Cao ancol + + + + Co tanin - Hột lá khô + + + + Có tanin Kết luận:
Cao n- hexan , cao ctcr c(yllc của lá neem khô không có tanin
Cao ancol , bóit lá khô có chứa tanin
11.3.Dinh tinh Flavon:
Dinh tinh Flavon duva vào phản dng XIANIDIN cia WILSTATER, Mg kim loai + HCI đậm đặc trong mỗi trường clanol, nhỏ thêm isoamylic, đun nóng Trac nghic¢m dương tính có màu hồng từ từ chuyển sang mầu cam hoặc đỏ
Thực nghiệm:
Mau ( cao n-hexan, cao ctcr ctyic , cao ancol, bột lá khô ) dude dun trong
nước cất | giờ, để nguội , lọc lấy dịch lọc làm dịch thử
-Ông nghiệm kiểm chứng : !- 2ml dung dịch mẫu
-Ong nghiệm phản ứng : 2ml dung dịch thử + 5ml HCI đậm đặc + khoảng 0,lp
Mg kim loại , để yên cho hết sủi bọt, dun nóng đồng thời nhỏ từ từ rượu isoamylic theo thành ống nghiệm Từ từ xuất hiện vòng màu hồng, dỏ hồng hoặc
ánh đỏ chứng tỏ có sư hiện diện của flavon Kết quả định tính flavon được trình bày trong bảng 3 Bang 3 KET QUA BINH TINH FLAVON CO TRONG LA NEEM
Bộ phân cây | Lạng mẫu | Phản ứng XIANIDIN Kết quả
Cao n-hexan : không có Ilavon
Củo ctcr ctylic - không có llavon
Lá Cao ancol + co flavon
Bột lá khô + có llavon
Kết luận :
Cao n-hexan , cao ctcr cíylc của lá không có l[lavon Cáo ancol, lá khô có chứa [lavon
Trang 32
ức đấu tù Kida
11.4.Dinh tinh Glicosid:
Xúc định sự liệt điện của pHcosid dựa vào các phan ting sau: +Phản ng BALIET:
~Acid picric 1.5% trong etanol 20% 20m
=NaOH 5% 10m
Trae nghiém dugng tinh cho mau cam hodc hong sim,
+Phan tog MOLISH:
— Thymol xanh 2% (trong nude) 1-2 giot
~H SO, dam đặc ImI
Trắc nghiệm dương tính cho màu đỏ túa
'Thực nghiệm:
Lay mau ( cao n-hexan, cao cicr ctylie , cao ancol ) ngam trong KIOH 20% dé qua dém.Loe lay dich ancol Ti€n hành định tính theo sở đổ 3 Kết quả định tính được trình bày ở bảng 4 Sơ đồ 3.QUI TRÌNH ĐỊNH TÍNH GICOSII3 Dich ancol —Dung dich AcO,)Pb 10% —Loe } | Dịch lọc ~l3ung dịch Na¿SO; bảo hòa -Lục Dich lọc = Tram hién Tram hién -C6 3 ap suat thudng —Hoa tan cin vao LtOH 95% Yeh LAO
Dich ctanol lim dich thử eeu LANs
Bang 4.KET QUA DINH TINH GLICOSID CO TRONG LA CAY NEEM lộ phân Dang mau Thuốc thử Kết quả cây Baljet Molish
Cao n-hexan + + có glicosid
Trang 33Butte dda tim Á(c£Ặ
Kết luận
Trong cao n-hexaân , cao ctcr cLylic, cao ancol của lá có chứa gÌicosid,
H.5.Xác định sự hiện diện của Sterol:
Định tính Stcrol dựa vào các phản ứng hiện màu với các thuốc thử sau: +Thude thi? LIEBERMANN BUCHARD:
Anhidric acctc 20m
H SO, | ImilL
Trắc nghiệm dương tính cho mầu xanh nhất , lục hồng cam hoặc đỏ Màu
nay vững bên sau một thời gian
+Phin ứng SAIf)WSKI: [I>SO; đâm đặc
rắc nghiệm đương tính là xuât hiện màu đỏ Thực nghiệm :
Lay mau ( cao cter etylic „ cao n-hexan, cao ancol, bột lá khô ) ngâm trong CHC|, sau | gid, loc lay dịch lọc làm dịch thử Kết quả định tính được trình bày ở bảng S Bang 5 KET QUA DINH TINH STEROL CO TRONG LA CAY NEEM B6 phan | Dang mau Thuốc thử Kết quả cây Lichermann Salkowski Buchard
Cao n-hexan + + Co sterol
La Cao cler + + C6 sterol
clylic
Cao ancol - - Không có stcrol
Lá khô - - C6 Sterol
Kết luận :
Trong cao n-hexan , cao eter etylic cda lá có chứa stcrol Trong cao ancol cuá lá không có chứa sterol
I1.6.Xác định sự hiện diện của Saponin:
Xác dịnh sư hiện diện của saponin dựa vào tính tao bot dac trưng của nó thông
qua chi s6 tao bot
Chỉ số tạo bọt là độ pha loãng nước sắc nguyên liệu có cột bọt 1cm khi lắc trong
ông nghiệm dược tiến hành theo những điều kiện dã qui định Thực nghiệm :
Lay !g mẫu ( cao n-hexan, cao cter ctylic, cao ancol, bột lá khô ) cho vào erlen
co chifa sin 100ml nude cất , giữ sôi nhẹ trong 30 phút, Lọc, để nguội, thêm nước vào chu dủ I00ml, Lấy 10 ống nghiệm ( 16x160mm) Cho vào các ống
nhiệm 1,2,13 10ml nước sắc Thêm nước cãi cho đú 10ml, lắc mạnh theo chiều
Trang 34
Vac aan Lem (tcc&
dọc của Gng nghiém trong 15 giây, để yên trong 15 phút, rồi do chiều cao cua cot
bot trong Ong nghiém
Nêu chiều cao cột bọt của tất cả các Ong nghiém dudi lem , tie chỉ số tạo bot dưới 100 Vậy mẫu bạn dầu khong c6 saponin
Nếu chiều cao cột bọt lem, chỉ số tạo bọt được tính như sau:
Chỉ số tạo bot gói 100 ” Vi du: Ong nghiém sé 5 e6 e6t bot cao Lem 1Ort Chỉ số tạo bọt là: —c— 100 = 200 Kết luận:
Củo n- hexan , cao cter ctylic của lá không có saponin
Cao ancol, lá khô có chứa saponin,
Trang 35
HWLLCO LAP AZADIRACHTIN:
Cao n-hexan hoa tan ted lai wong n-hexan Sau đó dem chạy sắc kí côi nhanh với dung môi rửa giải là n-hexan Phân doạn n-hexan thu được dem chưng
cất ở áp suất thấp Sau đó đem kết tỉnh thì thu được kết tủa vô định hình màu
trắng Sản phẩm được đo phổ hồng ngoại, !H RMN, ''C RMN (phổ được trình hay ở phụ luc)
LII.1 Phổ hồng ngoại:
Phổ hồng ngoại cho các mũi ( cm ') đặc trưng sau:
2917,2: dao động của OH
28492: dao đồng giãn đối xứng của CH;
1735.5 : dao đồng giần C=O của cslcr
I463,2 - dao đồng hóa trị của C=C,
I377,9 : dao đông biển dạng ð,-¡; của nhóm CH,
L169,1 > veg cua uncol bac ba
720,6 ; 719,7: dao động biến dạng không phẳng y‹-¡¡ của cis- CH=CH-
111.2 Pho 'H RMN:
Phổ 'H RMN cho các mũi ( ppm ) tập trung 0,8502 đến I,2739 Hai mũi cao
nhất | à 0.8549 va 1.2739
111.3.Ph6 °C RMN:
Phé ''C RMN cho băng gồm ba mii 77,6360; 77,0025; 76,3683 va ba mũi cao
nhat lan lugt la 14,0936; 22,7480; 31,7110
111.4.Xac dinh nhiét dO néng chay:
Sau khi lấy mẫu từ trung tâm phân tích vẻ Sản phẩm được làm lạnh , gan lấy kết tủa, xác dịnh nhiệt độ nóng chảy Kết quả là : Ú : 75- RÚC
Trang 36Cate dau Lim hidu,
IV XAC DINH SU HIRN DIEN CUA MOT HOP CHAT ANKALOID:
Theo phan IL), tong cao ancol có ankaloid Từ đó, chúng tôi lấy cao ancol
hòa tan trở lại trong mctanol, chạy sắc kí cột với silica gel trè pur hing Merck lung môi giải ly lần lượt là n- hexan, benzcn, accton, mectanol Trong các phân
doạn thủ được chỉ có phân đoạn accton là phản ứng với thuốc thử Dragendrol! Kiểm tra trên sắc kí bản mỏng hệ dung ly aceton:metanol (3:7) thấy có một vệt
dai ky, £ 7l ( xem hình }
Hình: Sắc ki bin mong
Như vậy phân đoan accton chưa tính khiết, Sau đó đem phân đoạn này chạy sắc
kí cột lần thứ hai với dung môi giải ly là accton Dung dịch giải ly thu được dem cô ở áp suất thấp cho bớt dung môi Xác định hàm lượng N, C, H bằng phương
Trang 37Kết quả phân tích cho chúng tôi kết luận rằng trong cao ancol của lá ncem có sự
hiện điện của một hợp chất ankaloid nào đó mà trong các tài liệu chưa thấy nói
tới
Trang 38ước đÁ« từm Á(ếu
KET LUAN
Trang 39'Trong luân văn này chúng tôi đã tiền hành :
1 Xác định sự hiện diện các thành phần hóa học có trong lá neem,
Kết quả là trong lá nccm có Stcrol, Tanin, Flavon, Ankaloid, Saponin, Glicosid
2.C6 lap azadirachtin:
Do thời gian hạn hẹp, một vài dụng cụ thí nghiệm chưa có, mẫu và một số hóa chất chưa đủ, Lượng sản phẩm thu được quá ít không thể tỉnh chế được I3o
đó nhiệt độ nóng chảy chênh lệch còn qua cao, 3 Xác định một hợp chất ankaloid:
Qua một số sách chúng tôi tìm hiểu về cây neem thì chưa thấy có sự trình bày nào về ankaloid Vì vậy mà chúng tôi muốn xác định một hợp chất ankaloid nào đó, Nhưng do thời gian có han, lượng sản phẩm thu được quá ít, Trong khi đó không có hình phun thuốc thử, Cho nên sản phẩm sau khi chạy sắc kí cột lần hai
không được kiểm tra bằng sắc kí bản mỏng cũng như thử với thuốc thử Do đó
chỉ xác định được hàm lượng N, C, H và cũng chỉ dám khẳng định là có một hợp chất ankaloid nào đó
Nếu có điều kiên vẻ thời gian cũng như mẫu, dụng cụ thí nghiệm thì hy vọng chúng tôi tiếp tục để tài này để hoàn tất những điều vừa nêu trên