Nghiên cúu thành phần hóa học cao ethylacetate của cây bướm bạc đài cong mussaenda recurvata

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Thị Mai Trâm NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY BƯỚM BẠC ĐÀI CONG MUSSAENDA RECURVATA LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT Thành phố Hồ Chí Minh - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Trần Thị Mai Trâm NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CAO ETHYL ACETATE CỦA CÂY BƯỚM BẠC ĐÀI CONG MUSSAENDA RECURVATA Chuyên ngành: Hóa Hữu Cơ Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC VẬT CHẤT NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS MAI ĐÌNH TRỊ Thành phố Hồ Chí Minh - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi tên Trần Thị Mai Trâm, học viên cao học chuyên ngành Hóa hữu trường Đại học sư phạm TP Hồ Chí Minh Tơi xin cam đoan luận văn thạc sĩ ngành hóa hữu với đề tài “Nghiên cứu thành phần hóa học cao ethyl acetate bướm bạc đài cong Mussaenda recurvata” cơng trình khoa học thực hướng dẫn PGS.TS Mai Đình Trị Các số liệu, kết nghiên cứu luận văn hồn tồn khách quan, trung thực xác TP Hồ Chí Minh, tháng 11 năm 2021 Học viên cao học Trần Thị Mai Trâm LỜI CẢM ƠN Để hồn thành tốt luận văn tốt nghiệp chuyên ngành Hóa hữu kết trình cố gắng khơng ngừng thân với giúp đỡ, động viên khích lệ thầy, cô, bạn bè người thân Qua trang viết xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới người giúp đỡ thời gian nghiên cứu hồn thiện luận văn Đầu tiên tơi xin tỏ lịng biết ơn kính trọng sâu sắc tới PGS.TS Mai Đình Trị Thầy trực tiếp bảo, hướng dẫn nhiệt tình cho tơi góp ý q báu suốt q trình tơi thực nghiên cứu Xin cảm ơn anh/chị Phịng thí nghiệm cơng nghệ chất có hoạt tính sinh học Viện Cơng nghệ Hóa học - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam hỗ trợ, đồng hành, tạo điều kiện thuận lợi để hồn thành nghiên cứu Tơi xin cảm ơn đến q thầy, mơn Hóa hữu trường Đại học sư phạm TP Hồ Chí Minh nhiệt tình giảng dạy, hướng dẫn, quan tâm tạo điều kiện cho tơi q trình học tập nghiên cứu Cuối xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè ln ủng hộ động viên tinh thần để tơi hồn thành tốt luận văn Mặc dù cố gắng để thực đề tài cách hoàn chỉnh nhất, khơng tránh khỏi sai sót Tơi mong góp ý q thầy, quan tâm đến đề tài để luận văn hồn chỉnh Tơi xin chân thành cảm ơn TP Hồ Chí Minh, tháng 11 năm 2021 Học viên cao học Trần Thị Mai Trâm MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục ký hiệu từ viết tắt v Danh mục bảng biểu vii Danh mục sơ đồ viii Danh mục hình ảnh ix MỞ ĐẦU Chương TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu Chi Bướm bạc (Mussaenda) 1.2 Giới thiệu Bướm bạc đài cong (Mussaenda recurvata) 1.2.1 Giới thiệu chung 1.2.2 Mô tả thực vật Bướm bạc đài cong (Mussaenda recurvata) 1.3 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 1.3.1 Các nghiên cứu thành phần hóa học 1.3.2 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học 17 Chương THỰC NGHIỆM 19 2.1 Hoá chất, dụng cụ, thiết bị, phương pháp tiến hành 19 2.1.1 Hoá chất 19 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị 19 2.1.3 Phương pháp tiến hành 19 2.2 Quá trình thực nghiệm 20 2.2.1 Nguyên liệu 20 2.2.2 Điều chế loại cao 20 2.2.3 Qui trình phân lập chất từ cao EA Mussaenda recurvata 21 2.2.3 Khảo sát phân đoạn E3 22 2.2.3 Khảo sát phân đoạn E6 24 2.3 Thử nghiệm hoạt tính sinh học gây độc tế bào 26 2.3.1 Nguyên tắc 26 2.3.2 Chuẩn bị thí nghiệm 26 2.3.3 Thực thí nghiệm 26 2.3.4 Xứ lý số liệu đánh giá hoạt tính 27 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 28 3.1 Biện luận cấu trúc phổ 28 3.1.1 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR21 29 3.1.2 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR26 32 3.1.3 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR20A 34 3.1.4 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR4B 37 3.1.5 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR45 40 3.1.6 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR14 43 3.1.7 Khảo sát cấu trúc hợp chất MR46 47 3.2 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào 51 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 53 DANH MỤC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ TỪ VIẾT TẮT IR Infrared spectroscopy (Phổ hấp thu hồng ngoại) UV-VIS Ultraviolet – Visible spectroscopy (Phổ hấp thu tử ngoại khả kiến) NMR H-NMR 13 C-NMR HSQC HMBC Nuclear Magnetic Resonance spectrocopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) Proton Nuclear Magnetic Resonance Carbon 13 Nuclear Magnetic Resonance Heteronuclear Single Quantum Correlation (Tương quan 1H→13C qua nối) Heteronuclear Multiple Bond Correlation (Tương quan 1H→13C qua nối) UV Tia cực tím (Ultra violet) SKC Sắc ký cột SKLM Sắc ký lớp mỏng COSY Correlation Spectroscopy DEPT Distortionless Enhancement by Polarization Transfer HR-ESI-MS Phổ khối lượng phun mù điện phân giải cao lần NOESY Nuclear overhauser effect spectroscopy S Stereospermum H n-Hexane C Chloroform EA Ethyl acetate EtOH Ethanol Me Methanol HepG2 Human hepatocarcinoma (ung thư gan người) MCF7 Human breast carcinoma (ung thư vú người) IC50 Half Maximal Inhibitory Concentraion (Nồng độ mẫu thử có khả ức chế 50% gốc tự do) DPPH• 2,2-diphenyl-1-picrylhdrazyl J Coupling constant (hằng số ghép) s Singlet (Mũi đơn) d Doublet (Mũi đôi) dd Doublet of doublet (Mũi đôi đôi) t Triplet (Mũi ba) m Multipplet (Mũi đa) DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU Bảng 1.1 Các hợp chất khung ursane phân lập từ chi Mussaenda Bảng 1.2 Các hợp chất khung oleanane phân lập từ chi Mussaenda Bảng 1.3 Các hợp chất khung cycloartane phân lập từ chi Mussaenda 10 Bảng 1.4 Các hợp chất khung flavonoid phân lập từ chi Mussaenda 13 Bảng 1.5 Các hợp chất phenol phân lập từ chi Mussaenda 16 Bảng 3.1 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR MR21 pololic acid 30 Bảng 3.2 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR MR26 quinovic acid 33 Bảng 3.3 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR MR20A quinovic acid 28-O-βD-glucopyranosyl ester 36 Bảng 3.4 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR MR4B 3-O-β-D-glucopyranosyl quinovic acid 39 Bảng 3.5 Dữ liệu phổ H-NMR 13 C-NMR MR45 3-O-α-L- rhamnopyranosyl quinovic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 42 Bảng 3.6 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR MR14 với 3-O-β-Dglucopyranosylquinovic acid 28-O-β-D-glucopyranosyl ester 45 Bảng 3.7 Dữ liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR MR46 MR14 49 Bảng 3.8 Kết thử hoạt tính gây độc tế bào ưng thư MCF7, HepG2 52 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Quy trình điều chế loại cao từ Mussaenda recurvata 21 Sơ đồ 2.2 Quy trình phân lập phân đoạn E3 22 Sơ đồ 2.3 Quy trình phân lập phân đoạn E3.2 23 Sơ đồ 2.4 Quy trình phân lập phân đoạn E3.6 24 Sơ đồ 2.5 Quy trình phân lập phân đoạn E6 24 Sơ đồ 2.6 Quy trình phân lập phân đoạn E6.2 25 Sơ đồ 2.7 Quy trình phân lập phân đoạn E6.3 25 Phụ lục 32 Phổ 13C-NMR hợp chất MR14 đo DMSO-d6 Phụ lục 33 Phổ DEPT hợp chất MR14 đo DMSO-d6 Phụ lục 34 Phổ HSQC hợp chất MR14 đo DMSO-d6 Phụ lục 35 Phổ HMBC hợp chất MR14 đo DMSO-d6 Phụ lục 36 Phổ COSY hợp chất MR14 đo DMSO-d6 [M-H]-= 779,4929 Phụ lục 37 Phổ HR-ESI-MS hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 38.a Phổ 1H-NMR hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 38.b Phổ 1H-NMR giản rộng hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 39 Phổ 13C-NMR hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 40 Phổ HSQC hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 41 Phổ HMBC hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 42 Phổ COSY hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 43.a Phổ NOESYcủa hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 43.b Phổ NOESYcủa hợp chất MR46 đo DMSO-d6 Phụ lục 43.c Phổ NOESYcủa hợp chất MR46 đo DMSO-d6