Chương 1 BỘGIÁODỤC VÀĐÀO TẠO TRƯỜNGĐẠIHỌCVINH 1 NGUYỄNTHỊBÍCH NGỌC PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤTCÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ NÂM TỔ ONG LÔNG THÔ(HEXAGONIA APIARIA(PERS ) FRIES), LOÀI NẤM LINH[.]
1 BỘGIÁODỤC VÀĐÀO TẠO TRƯỜNGĐẠIHỌCVINH NGUYỄNTHỊBÍCH NGỌC PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤTCĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ NÂM TỔ ONG LƠNG THƠ(HEXAGONIA APIARIA(PERS.) FRIES), LỒI NẤM LINHCHI (GANODERMA PFEIFFERIBRES.) VÀ NẤM LINHCHI ĐEN BÓNG (GANODERMA MASTOPORUM(MONT)PAT.)Ở VÙNGBẮC TRUNGBỘ LUẬNÁNTIẾNSĨ HỐHỌC VINH-2015 NGUYỄNTHỊBÍCH NGỌC PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤTCÓ HOẠT TÍNH SINH HỌC TỪ NÂM TỔ ONG LƠNG THƠ(HEXAGONIA APIARIA(PERS.) FRIES), LOÀI NẤM LINHCHI (GANODERMA PFEIFFERIBRES.) VÀ NẤM LINHCHI ĐEN BĨNG (GANODERMA MASTOPORUM(MONT)PAT.)Ở VÙNGBẮC TRUNGBỘ Chunngành:HỐHỮUCƠ Mãsố:62.44.27.01LUẬ NÁNTIẾNSĨHỐHỌC Ngườihướngdẫnkhoa học: Vinh-2015 PGS.TSTRẦNĐÌNHTHẮNG PGS.TS PINGCHUNGKUO LỜICAMĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu,kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố bất kỳcơngtrìnhnàokhác Vinh,ngày15 tháng07năm2015 Kýtên LỜICẢMƠN Luận án thực phịng thí nghiệm chun đề Hố hữu khoaHố, phịng thí nghiệm Trung tâm Phân tích thực phẩm Mơi trường, Trường Đại họcVinh, Viện Hố học-Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam, khoa Công nghệsinh học, Đại học quốc gia Formosa, khoa Hóa-Đại học Quốc gia Cheng Kung, ĐàiLoan Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc đến PGS TS Trần ĐìnhThắng - Trường Đại học Vinh,P G S T S P i n g - C h u n g K u o - Đ i h ọ c q u ố c g i a F o r m o s a (Đài Loan) người thầy giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện tốt nhất,giúptơitừngbướctrong qtrình thực hiệnluậnán Tơi xin chân thành cảm ơn PGS TS Nguyễn Hoa Du, PGS TS Hoàng Văn Lựuđã tạo điều kiện thuận lợi, động viên tơi q trình làm luận án Tơi bày tỏlòng biết ơn GS TS Tian-Shung Wu-Đại học Quốc gia Cheng-Kung, Đài Loan giúpđánhgiákếtquả PGS.TS NgôAnhkhoaSinh,ĐạihọcKhoahọcHuế giúpđịnhdanh mẫunấm Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu, phịng banchứcnăng,các thầy cơ,cánbộkhoa Đà otạoSauđạihọc, khoa HoáhọcTrườ ng Đạ ihọc Vinh, bạn đồng nghiệp, học viên cao học, sinh viên, gia đình người thân đãđộngviênvàgiúpđỡtơihồnthànhluậnánnày Vinh,ngày15tháng07 năm 2015 NguyễnThịBíchNgọc MỤCLỤC Trang Mởđầu 1.Lýdochọnđềtài 2.Đốitượngnghiên cứu 3.Nhiệmvụnghiêncứu 4.Phươngphápnghiên cứu 5.Nhữngđónggóp mớicủaluậnán 6.Cấutrúc củaluận án Chương1: Tổngquan 1.1.ChiGanoderma(Linhchi) 1.1.1.Đặcđiểmhìnhtháicơbảnvàphânloại nấm linhchi 1.1.2.Cáchợpchấtcó hoạttính sinhhọc đượcphânlậptừnấmlinhchi (Ganodermalucidum) 1.1.2.1.Lanostanoittritecpenoit 1.1.2.2.Ganoderma polysaccarit 15 1.1.2.3.Peptitvà protein 17 1.2.ChiHexagonia 22 1.2.1.Đặcđiểmchung vềhìnhthái 22 1.2.2.Thànhphầnhóa học 23 1.3.Nấmtổonglơngthơ (Hexagoniaapiaria) 24 1.3.1.Đặcđiểmhìnhtháivàphânbố 24 1.3.2.Thànhphầnhốhọcvàhoạttínhsinhhọc 25 1.4.Nấmlinhchi(Ganodermapfeifferi) 25 1.4.1.Đặcđiểmhìnhtháivàphânbố 25 1.4.2.Thànhphầnhóahọc 26 1.4.3.Hoạt tínhsinhhọc 28 1.5.Nấmlinhchi đenbóng(Ganodermamastoporum) 28 1.5.1.Đặcđiểmhìnhtháivàphânbố 28 1.5.2.Thànhphầnhóahọc 29 1.5.3.Hoạt tínhsinhhọc 29 Chương2:Phươngphápvàthựcnghiệm 30 2.1.Phương phápnghiêncứu 30 2.1.1.Cácphươngphápxửlý mẫuvàchiết 30 2.1.2.Cácphươngphápphân tích,phân táchcác hỗn hợpvàphânlậpcáchợpchất 30 2.1.3.Phươngpháp khảosátcấutrúccáchợp chất 30 2.2.Hóachấtvàthiếtbị 30 2.2.1.Hố chất 30 2.2.2.D ụ n g cụvàthiết bị 31 2.3.Nghiêncứucáchợpchấttừnấmtổonglôngthô(Hexagonia apiaria) 31 2.3.1.Thu mẫu 31 2.3.2.Chiếtxuất,phânlập,xácđịnhcấu trúc cáchợpchấtphânlậpđược 31 2.3.3.Cácdữliệuvậtlývàphổ 33 2.3.3.1.Hexagonin A(HAM1) 33 2.3.3.2.HexagoninB(HAM2) 35 2.3.3.3.HexagoninC(HAM3) 35 2.3.3.4.Hexagonin D(HAM4) 36 2.3.3.5.HexagoninE(HAM5) 37 2.3.3.6.Hexatenuin A(HAM6) 37 2.3.3.7.Axitursolic(HAM7) 38 2.3.3.8.Ergosterol (HAM8) 39 2.4.Nghiêncứucáchợpchấttừ nấmlinhchi(Ganodermapfeiferi) 40 2.4.1.Thu mẫu 40 2.4.2.Chiếtxuất,phânlập,xácđịnhcấutrúccáchợpchấtphânlậpđược 40 2.4.3.Cácdữliệuvậtlývàphổ 41 2.4.3.1.Ergosterol (GPM1) 41 2.4.3.2.Ergosterol peroxit(GPM2) 41 2.4.3.3.A x i t 3β-hydroxy-5α-lanosa-7,9,24(E)-trien-26-oic(GCM3) 41 2.4.3.4.Ganodermadiol(GPM4) 41 2.4.3.5.Axit7-oxo-ganodericZ(GPM5) 42 2.4.3.6.Cerevisterol(GPM6) 44 2.5.Nghiêncứucáchợpchấtphânlậptừnấmlinhchiđenbóng 44 (Ganodermamastoporum) 2.5.1.Thu mẫu 44 2.5.2.Chiếtxuất, phânlập,xácđịnhcấutrúccáchọpchấtphânlậpđược 45 2.5.3.Cácdữliệuvậtlývàphổ 45 2.5.3.1.∆1-Lupenon(GCM1) 45 2.5.3.2.Ergosta-7,22-dien-3β-ol(GCM 2) 46 2.5.3.3.Ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-on(GCM3) 46 2.5.3.4.Ergosterol peroxit(GCM4) 47 2.5.3.5.Ganodermanondiol(GCM5) 47 2.5.3.6.LucidumolB(GCM6) 47 2.5.3.7.Ergosta-7,22-dien-3-on(GCM7) 48 2.5.3.8.3β,5α-dihydroxy-(22E,24R)-Ergosta-7,22-dien-6-on(GCM 8) 48 Chương3:K ế t quảvàthảoluận 50 3.1.Nấmtổonglôngthô(Hexagoniaapiaria) 50 3.1.1.Phânlậphợpchất 50 3.1.2.Xácđịnhcấu trúc 50 3.1.2.1.Hợpchất HAM1(HexagoninA) 50 3.1.2.2.Hợpchất HAM2(HexagoninB) 58 3.1.2.3.Hợpchất HAM3(HexagoninC) 66 3.1.2.4.Hợpchất HAM4(HexagoninD) 71 3.1.2.5.Hợpchất HAM5(HexagoninE) 74 3.1.2.6.Hợpchất HAM6(HexatenuinA) 79 3.1.2.7.Hợpchất HAM7(Ergosterol) 86 3.1.2.8.Hợpchất HAM8(Axit ursolic) 88 3.1.2.9.HợpchấtHAM9(Ergosterolperoxit) 91 3.1.3.Thửhoạttínhsinhhọc 93 3.2.Nấmlinhchi(Ganodermapfeiferi) 95 3.2.1.Phânlậpmộtsố hợpchất 95 3.2.2.Xácđịnhcấu trúc 95 3.2.2.1.HợpchấtGPM1 95 3.2.2.2.HợpchấtGPM2 95 3.2.2.3.HợpchấtGPM3 95 3.2.2.4.HợpchấtGPM4 97 3.2.2.5.HợpchấtGPM5 99 3.2.2.6.HợpchấtGPM6 102 3.2.3Thửhoạt tínhsinhhọc 104 3.3.Nấmlinhchiđenbóng(Ganodermamastoporum) 105 3.3.1.Phânlậpmộtsố hợpchất 105 3.3.2.Xácđịnhcấu trúc 106 3.3.2.1.Hợpchất GCM1 106 3.3.2.2.Hợpchất GCM2 107 3.3.2.3.Hợpchất GCM3 108 3.3.2.4.Hợpchất GCM4 109 3.3.2.5.Hợpchất GCM5 109 3.3.2.6Hợpchất GCM6 110 3.3.2.7.HợpchấtGCM7 112 3.3.2.8.hợpchất GCM8 113 3.3.3.Thử hoạttínhsinhhọc 114 Kếtluận 119 Danhmụccơng trìnhliênquanđếnluậnán 120 Tàiliệuthamkhảo 121 Phụlục 136 DANHSÁCHBẢNG Trang Bảng3.1 Cáchợpchất táchratừ lồinấmtổonglơngthơ 50 Bảng3.2: Sốliệu phổNMRcủahợpchấtHAM1 56 Bảng3.3: Sốliệu phổNMRcủahợpchấtHAM2 64 Bảng3.4:Sốliệu phổ1H-NMRcủachấtHAM3 69 Bảng3.5:Sốliệu phổ1H-NMRcủachấtHAM4 72 Bảng3.6: SốliệuphổNMRcủachấtHAM5 78 Bảng3.7: Sốliệu phổ NMRcủa hợpchấtHAM6 84 Bảng3.8: Sốliệuphổ NMRcủahợpchấtHAM7 87 Bảng3.9:Sốliệu phổ NMRcủa hợpchấtHAM8 89 Bảng3.10: Sốliệuphổ NMRcủahợpchấtHAM9 92 Bảng3.11:Tácdụngứcchếcủahợpchấttừ (H.apiaria) 94 Bảng3.12: Cáchợpchấtđượctáchra từnấmlinhchi(G.pfeiferi) 95 Bảng3.13:Sốliệuphổ13C-NMR,DEPTcủahợpchấtGPM3 96 Bảng3.14: SốliệuphổcủahợpchấtGCM4 98 Bảng3.15:DữliệuphổNMRcủahợpchấtGPM5 100 Bảng3.16:Dữliệuphổ NMRcủahợpchấtGPM6 103 Bảng3.17:Kếtquảthửnghiệmhoạttính khángviêm 104 Bảng3.18:Cáchợpchấtđược táchra từnấmlinhchiđenbóng 105 Bảng3.19: Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM1 106 Bảng3.20:Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM2 107 Bảng3.21: Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM3 108 Bảng3.22: Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM5 110 Bảng3.23: Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM6 111 Bảng3.24: Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM7 112 Bảng3.25:Sốliệuphổ1H-NMRcủahợpchấtGCM8 113 Bảng3.26: Tácdụngứcchếcủahợpchấttừ nấmlinhchiđenbóng 114 DANHSÁCHHÌNH Trang Hình1.1 NấmH.apiariamặttrướcvàmặtsau 22 Hình1.2.G.pfeifferinon 26 Hình1.3.G.pfeifferilâunăm 26 Hình1.4 Bềmặt củaquảthểG.pfeifferi 26 Hình1.5.Nấmlinhchiđenbóng(G.mastoprum) 28 Hình3.1:Phổkhốilượngcủahợp chấtHAM1 51 Hình3.2:PhổIRcủahợpchấtHAM1 51 Hình3.3:Phổ13C-NMRcủahợp chấtHAM1 52 Hình3.4: PhổDEPTcủahợpchấtHAM1 53 Hình3.5: PhổHSQCcủahợpchấtHAM1 53 Hình3.6: PhổHSQCcủahợpchấtHAM1 54 Hình3.7:Phổ1H-NMRcủahợpchấtHAM1 55 Hình3.8:PhổHMBCcủahợpchấtHAM1 56 Hình3.9: CơngthứcHMBCcủa hợpchấtHAM1 56 Hình3.10: PhổkhốilượngHR-ESI-MScủahợpchấtHAM2 59 Hình3.11: PhổIRcủahợpchấtHAM2 59 Hình3.12: Phổ13C-NMRcủahợpchất HAM2 60 Hình3.13: PhổDEPT củahợpchấtHAM2 61 Hình3.14: Phổ1H-NMRcủahợp chấtHAM2 62 Hình3.15:PhổHSQCcủahợpchấtHAM2 62 Hình3.16: PhổHSQCdãncủahợpchấtHAM2 63 Hình3.17:PhổHMBCcủahợpchấtHAM2 63 Hình3.18:PhổCOSYcủahợpchấtHAM2 64 Hình3.19:Phổkhốilượngcủahợpchât HAM3 66 Hình3.20: Phổ13C-NMRcủahợpchất HAM3 67 Hình3.21: Phổ13C-NMRcủahợpchất HAM3 67