Khảo sát mô hình gây tổn thương thận cấp bằng cisplatin ở chuột nhắt trắng

1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐƠ NGUYỄN NGỌC PHỤNG KHẢO SÁT MƠ HÌNH GÂY TỔN THƯƠNG THẬN CẤP BẰNG CISPLATIN Ở CHUỘT NHẮT TRẮNG LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CẦN THƠ, 2021 i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐƠ NGUYỄN NGỌC PHỤNG KHẢO SÁT MƠ HÌNH GÂY TỔN THƯƠNG THẬN CẤP BẰNG CISPLATIN Ở CHUỘT NHẮT TRẮNG LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC Chuyên ngành: Dược lý Dược lâm sàng Mã số: 8720205 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC PGS.TS NGUYỄN THỊ THU HƯƠNG CẦN THƠ, 2021 I LỜI CẢM ƠN Trong thời gian học tập nghiên cứu Trung tâm Sâm Dược liệu Thành phố Hồ Chí Minh, em có nhiều kỉ niệm, đúc kết học hỏi thêm nhiều kĩ nghiên cứu khoa học kinh nghiệm sống Qua đó, em nhìn nhận rõ ưu điểm khuyết điểm thân để tiếp tục hoàn thiện Em xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến cô PGS.TS Nguyễn Thị Thu Hương Cô tạo điều kiện tốt nhất, ln tận tình hướng dẫn, bảo truyền đạt tri thức cho em suốt q trình hồn thành luận văn Em xin chân thành cảm ơn Thạc sĩ Trần Mỹ Tiên hỗ trợ tạo điều kiện tốt cho em trình học tập nghiên cứu trung tâm Em xin gửi lời cảm ơn đến ThS Mai Thành Chung, ThS Chung Thị Mỹ Duyên, ThS Nguyễn Hoàng Minh, DS Đào Trần Mộng, ThS Hà QuangThanh, Nguyễn Mai Trúc Tiên giúp đỡ động viên suốt trình thực đề tài Trung tâm Sâm Dược liệu Tp Hồ Chí Minh Em xin gửi lời cảm ơn Khoa xét nghiệm - Trung tâm chẩn đốn Y khoa Medic Tp Hồ Chí Minh hỗ trợ phần kinh phí q trình nghiên cứu, phần xét nghiệm chức thận Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy cô trường Đại học Tây Đô truyền đạt kiến thức kĩ năng, để em có đủ khả vận dụng kiến thức Con xin gửi lời cảm ơn đến Cha, mẹ gia đình ln ủng hộ, động viên, tạo điều kiện, chỗ tựa vững để tơi hồn thành luận văn Lời cuối cùng, em xin kính chúc q thầy cơ, anh chị bạn dồi sức khỏe, nhiều niềm vui đạt nhiều thành công Em xin chân thành cảm ơn! II LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Nếu khơng nêu trên, tơi xin chịu hồn tồn chịu trách nhiệm đề tài Người cam đoan NGUYỄN NGỌC PHỤNG III TÓM TẮT TIẾNG VIỆT Cisplatin thuốc sử dụng hiệu hóa trị liệu nhiều loại bệnh ung thư Tuy nhiên, độc tính thận tác dụng phụ làm hạn chế việc sử dụng cisplatin với chuyển biến từ tổn thương thận cấp đến tổn thương thận mạn Sử dụng cisplatin xây dựng mơ hình gây tổn thương thận cấp chuột nhắt trắng lựa chọn phù hợp tính đơn giản có nhiều điểm tương đồng với độc tính thận cisplatin gây bệnh nhân ung thư Nghiên cứu thực với mục tiêu khảo sát mơ hình thực nghiệm gây tổn thương thận cấp cisplatin nhằm ứng dụng sàng lọc ứng viên có tác dụng bảo vệ thận từ dược liệu Đề tài chọn liều thời gian phù hợp cho mơ hình sàng lọc thuốc có tác dụng bảo vệ thận trước độc tính cisplatin chuột nhắt trắng tiêm phúc mô cisplatin liều 15 mg/kg sau 72 ghi nhận có tăng nồng độ creatinin, BUN (blood ure nitrogen) huyết tương tăng hàm lượng MDA (malondialdehyd, marker tổn thương oxy hóa tế bào) dịch đồng thể thận Quercetin, flavonoid phổ biến thực vật sử dụng làm hợp chất thiên nhiên thử nghiệm, liều uống 30 mg/kg 50 mg/kg làm giảm nồng độ creatinin, BUN huyết tương hàm lượng MDA thận, thể tác dụng bảo vệ thận trước tổn thương gây cisplatin Bột chiết từ thân rễ sâm Việt Nam (panax vietnamensis Ha et Grushv.), dược liệu đặc hữu Việt Nam sử dụng làm dược liệu thử nghiệm, liều uống 100 mg/kg 200 mg/kg làm giảm nồng độ creatinin, BUN huyết tương hàm lượng MDA thận Những nghiên cứu tiếp tục thực nghiệm cần thực để góp phần sàng lọc hợp chất hay dược liệu tiềm việc giảm tác dụng phụ thận cisplatin điều trị bệnh ung thư Từ khóa: Mơ hình thực nghiệm gây tổn thương thận cấp cisplatin, Quercetin, Sâm Việt Nam IV TÓM TẮT TIẾNG ANH Cisplatin is a widely used and highly effective cancer chemotherapeutic agent One of the limiting cisplatin use is nephrotoxicity, its side effect causes the AKI (Acute kidney injury) to CKD (Chronic kidney disease) transition Cisplatin rodent model is a well appreciated and widely used model due to its simplicity and it has many similarities to human cisplatin nephrotoxicity The present study aims to set up a mouse model of acute kidney injury induced by cisplatin in order to select medicinal candidates for the renoprotective effects The issue determined the appropriate dosage and time, which is established for protective screening models of cisplatin kidneys The mice were injected intraperitoneal with 15 mg/kg after 72 hours, which resulted in a significant increase in plasma concentrations of creatinine, BUN (blood ure nitrogen), and renal MDA (malondialdehyde) levels Quercetin, one of the important bioflavonoids found mostly in plants was used as a natural compound reference Quercetin at the oral doses of 30 mg/kg and 50 mg/kg ameliorated plasma creatinine, BUN and renal MDA levels in cisplatin-subjected mice Vietnamese ginseng (panax vietnamensis Ha et Grushv.), an endemic Vietnamese medicinal plant was used as herbal reference Treatment of powdered ethanol extract from processed Vietnamese ginseng at the oral doses of 100 mg/kg and 200 mg/kg decreased plasma creatinine, BUN, and renal MDA levels in cisplatin-subjected mice, suggesting the reno-protective effect of quercetin on cisplatin-induced nephrotoxicity Further experimental and clinical investigations are required to contribute to the inspection of potential compounds or medicinal products in reducing renal side effects of cisplatin in cancer treatment Keywords: Cisplatin-induced nephrotoxicity, Quercetin, Vietnamese ginseng V MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN I TÓM TẮT TIẾNG VIỆT II TÓM TẮT TIẾNG ANH IV LỜI CAM ĐOAN II MỤC LỤC V DANH MỤC BẢNG VIII DANH MỤC BIỂU ĐỒ IX DANH MỤC HÌNH X DANH MỤC VIẾT TẮT XI CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ THẬN 1.1.1 Sinh lý thận .3 1.1.2 Tổn thương thận 1.2 TỔNG QUAN VỀ CISPLATIN 1.2.1 Giới thiệu cisplatin (CP) .9 1.2.2 Cơ chế tác động kháng ung thư chế gây tổn thương cisplatin .10 1.3 MƠ HÌNH GÂY TỔN THƯƠNG THẬN 14 1.3.1 Mơ hình gây độc thận với vancomycin 16 1.3.2 Mơ hình gây độc thận với gentamicin 16 1.3.3 Mơ hình gây độc thận với acetaminophen 16 1.3.4 Mơ hình gây độc thận với cisplatin 16 1.4 QUERCETIN .18 1.4.1 Giới thiệu quercetin 18 1.4.2 Tác dụng dược lý 18 1.4.3 Một số nghiên cứu tác dụng bảo vệ thận quercetin .19 1.5 SÂM VIỆT NAM .19 1.5.1.Thực vật học .19 1.5.2 Thành phần hoá học 20 1.5.3 Tác dụng dược lý sâm Việt Nam 20 1.5.4 Tóm tắt nghiên cứu sâm Việt Nam chế biến .22 1.5.5 Một số nghiên cứu tác dụng bảo vệ thận loài panax khác 23 VI CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 24 2.1.1 Động vật thử nghiệm .24 2.1.2 Tác nhân gây mơ hình tổn thương thận 24 2.1.3 Thuốc khảo sát đáp ứng với mơ hình tổn thương thận 24 2.1.4 Thiết bị hóa chất nghiên cứu .25 2.2.2 Khảo sát mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin chuột nhắt trắng 26 2.2.3 Khảo sát tác dụng quercetin mơ hình gây tổn thương thận cisplatin 28 2.2.4 Khảo sát tác dụng bột chiết sâm Việt Nam mơ hình gây tổn thương thận cisplatin 29 2.3 PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CHỈ SỐ SINH HOÁ 29 2.3.1 Định lượng creatinin huyết tương 29 2.3.2 Định lượng nồng độ blood ure nitrogen (BUN) 30 2.3.3 Phương pháp định lượng malondialdehyd (MDA) dịch đồng thể thận chuột 31 2.3.4 Phương pháp quan sát đại thể vi phẫu tiêu tế bào thận .32 2.4 ĐÁNH GIÁ KẾT QUẢ 32 2.5 ĐẠO ĐỨC TRONG NGHIÊN CỨU 32 2.6 XỬ LÝ CHẤT THẢI Y TẾ .32 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ 34 3.1 KHẢO SÁT MƠ HÌNH GÂY TỔN THƯƠNG THẬN CẤP BẰNG CISPLATIN TRÊN CHUỘT NHẮT TRẮNG 34 3.2 KHẢO SÁT ĐÁP ỨNG CỦA MÔ HÌNH VỚI THUỐC THỬ NGHIỆM .38 3.2.1 Khảo sát tác dụng bảo vệ thận quercetin mơ hình tổn thương thận cấp chuột nhắt trắng .38 3.2.2 Khảo sát tác dụng bảo vệ thận bột chiết sâm Việt Nam mơ hình tổn thương thận cấp chuột nhắt trắng .45 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 52 4.1 TỔN THƯƠNG THẬN GÂY BỞI CISPLATIN 52 4.2 TÁC DỤNG BẢO VỆ THẬN CỦA QUERCETIN 55 4.3 TÁC DỤNG BẢO VỆ THẬN CỦA SÂM VIỆT NAM CHẾ BIẾN 56 CHƯƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .60 5.1 KẾT LUẬN 60 5.2 KIẾN NGHỊ .60 VII TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 PHỤ LỤC I VIII DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1.Phân loại tổn thương thận cấp theo KDIGO 2012 Bảng 1.2 Phân độ suy thận cấp theo RIFLE (Rifle Risk Injury Failure Loss Endstage) [43] Bảng 1.3 Đánh giá mức độ suy thận dựa vào nồng độ creatinin Bảng 1.4 Một số nghiên cứu mơ hình in vivo gây độc thận 15 Bảng 1.5 Tóm tắt tác dụng dược lý rễ thân rễ sâm Việt Nam 21 Bảng 2.1 Quy trình định lượng creatinin 30 Bảng 2.2 Qui trình định lượng BUN 31 Bảng 3.1 Phân suất tử vong mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin chuột nhắt trắng 34 Bảng 3.2 Nồng độ creatinin huyết tương hàm lượng MDA dịch đồng thể thận mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin chuột nhắt trắng 35 Bảng 3.3 Nồng độ BUN mơ hình tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 36 Bảng 3.4 Kết khảo sát mô học thận mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 37 Bảng 3.5 Kết khảo sát tác dụng quercetin nồng độ creatinin mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 38 Biểu đồ 3.3 Kết định lượng creatinin (mg/dl) khảo sát tác dụng quercetin tổn thương thận cấp gây cisplatin 39 Bảng 3.6 Kết khảo sát tác dụng quercetin nồng độ BUN mô 40 Bảng 3.7 Kết khảo sát tác dụng quercetin hàm lượng MDA mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 42 Bảng 3.8 Phân tích mơ học thận tác dụng quercetin mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin 43 Bảng 3.9 Kết khảo sát tác dụng bột chiết sâm Việt Nam nồng độ creatinin mô hình gây tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 45 Bảng 3.10 Kết khảo sát tác dụng quercetin nồng độ BUN mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 47 Bảng 3.11 Kết khảo sát tác dụng bột chiết sâm Việt Nam hàm lượng MDA mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin liều 15 mg/kg chuột nhắt trắng 48 Bảng 3.12 Phân tích mơ học thận tác dụng bột chiết sâm Việt Nam mơ hình gây tổn thương thận cấp cisplatin 50 70 86 Yamasaki K (2000), “Bioactive saponins in Vietnamese Ginseng, panax vietnamensis”, Pharmaceutical biology, 38(1): 16–24 87 Yang Li, Tong Zhou, Chengyuan Ma, Weiwei Song, Jian Zhang, Zhenxiang Yu (2015), Ginsenoside metabolite compound k enhances the efficacy of cisplatin in lung cancer cells, Journal of Thoracic Disease, 7(3): 400-406 88 Yongtao Jiang, Xiaolei Qiu, Jinbo Ma, Guangyao Lu, Zongliang Wang, Jingwen Zhang, Fenghua Fu, Hongbo Wang (2015), Ameliorative effect of ginsenoside rt5 on cddp-induced nephrotoxicity, Wuhan University Journal of Natural Sciences, 20(4): 343-349 89 Zhou Y, Vaidya VS, Brown RP, Zhang J, Rosenzweig BA, Thompson KL, Miller TJ, Bonventre JV, Goering PL (2008), Comparison of kidney injury moleccule-1 other nephrotoxicity biomarkers in urine and kidney following acute exposure to gentamicin, mercury and chromium, Toxicological Sciences, 101(1): 159-170 TÀI LIỆU WEB 90 https://en.wikipedia.org/wiki/Kidney 91 https://sites.google.com/site/sinhlynguoikssp2/courses/chuong-8 I PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1: Kết khảo sát mô hình gây tổn thương thận cấp cisplatin chuột nhắt trắng Creatinin (mg/dl) cisplatin (i.p.) Lô chứng sinh lý 10 mg/kg 15 mg/kg 0,7 0,7 2,4 0,6 0,7 1,7 0,6 0,8 1,9 0,7 0,6 1,8 0,6 0,7 1,8 0,7 0,7 2,1 0,6 0,7 1,7 0,7 0,7 1,5 0,7 0,7 1,6 10 0,6 0,6 1,4 TB 0,65 0,69 1,79 SEM 0,02 0,02 0,09 II Lô chứng sinh lý cisplatin Lô tiêm cisplatin 10 mg/kg Lô tiêm cisplatin 15 mg/kg STT OD MDA OD MDA OD MDA 0,398 135,07 0,359 121,72 0,570 193,96 0,409 138,84 0,459 155,96 0,641 218,27 0,402 136,44 0,411 139,52 0,778 265,18 0,426 144,66 0,388 131,65 0,721 245,66 0,388 131,65 0,349 118,29 0,594 202,18 0,336 113,84 0,324 109,73 0,621 211,42 0,247 83,37 0,377 127,88 0,673 229,23 0,216 72,76 0,425 144,32 0,762 259,70 0,301 101,86 0,385 130,62 0,662 225,46 10 0,381 129,25 0,412 139,86 0,664 226,15 TB 0,350 118,774 0,389 131,96 0,669 227,72 SEM 0,02 7,89 0,013 4,28 0,022 7,38 III BUN (mg/dl) Lô chứng sinh lý 28,40 24,50 cisplatin (i.p.) 15 mg/kg 98,52 147,50 24,35 104,60 26,40 83,12 25,50 95,90 22,93 207,40 24,64 113,90 24,24 117,50 26,70 183,20 10 23,20 115,60 TB 25,09 126,72 SEM 0,53 12,75 IV PHỤ LỤC 2: Khảo sát đáp ứng mơ hình với thuốc thử nghiệm quercetin liều 30 mg/kg; 50 mg/kg Nồng độ Creatinin huyết tương (mg/dl) (-) STT (+) Chứng Quercetin Quercetin Chứng Quercetin Quercetin sinh lý 30 mg/kg 50 mg/kg bệnh lý 30 mg/kg 50 mg/kg 0,6 0,7 0,5 1,7 0,8 0,6 0,6 0,7 0,7 1,8 0,7 0,8 0,7 0,7 0,5 1,8 0,7 0,7 0,7 0,7 0,6 1,7 0,9 0,6 0,5 0,7 0,5 1,8 0,7 0,7 0,7 0,8 0,6 1,4 0,7 0,7 0,6 0,6 0,6 1,8 0,8 0,6 0,7 0,7 0,7 1,6 0,6 0,6 Trung bình 0,64 0,70 0,59 1,70 0,74 0,66 SEM 0,03 0,02 0,03 0,05 0,03 0,03 V Nồng độ BUN huyết tương (mg/dl) (-) STT (+) Chứng Quercetin Quercetin Chứng Quercetin Quercetin sinh lý 30 mg/kg 50 mg/kg bệnh lý 30 mg/kg 50 mg/kg 29,79 23,40 27,60 102,78 30,70 30,50 23,52 27,50 28,70 142,34 22,60 55,60 24,31 28,90 27,50 109,23 25,75 48,40 22,45 27,80 28,20 83,12 45,30 40,50 20,21 22,50 29,70 112,78 24,50 52,50 24,78 28,50 - 109,50 50,18 40,20 25,70 29,60 29,10 108,50 25,70 30,80 27,50 25,35 25,30 110,50 28,50 55,7 Trung bình 24,78 26,69 28,01 109,84 31,65 44,28 SEM 1,05 0,93 0,54 5,72 3,64 3,65 VI Hàm lượng MDA (nM/g protein) (-) STT (+) Chứng sinh lý Quercetin 30 mg/kg Quercetin 50 mg/kg Chứng bệnh lý Quercetin 30 mg/kg Quercetin 50 mg/kg 147,74 109,73 140,89 231,28 142,95 145,00 131,30 120,35 147,74 236,07 115,56 125,83 120,35 162,80 145,00 230,60 121,03 139,52 127,88 154,59 135,07 231,28 118,64 139,86 151,51 141,58 120,69 256,28 121,72 178,55 125,48 158,01 121,72 242,58 126,85 165,20 138,84 137,81 150,82 259,70 94,67 156,30 104,94 155,61 142,95 218,27 110,08 151,16 131,005 142,561 138,110 238,258 118,936 150,179 5,337 6,759 4,041 4,934 4,874 5,839 Trung bình SEM VII PHỤ LỤC 3: Khảo sát đáp ứng mơ hình với thuốc thử nghiệm bột chiết Sâm Việt Nam liều 100 mg/kg 200 mg/kg Nồng độ Creatinin huyết tương (mg/dl) (-) (+) Sâm Việt Nam 100 Sâm Việt Nam 200 mg/kg mg/kg 0,8 1,6 0,7 1,7 0,8 0,6 0,9 0,7 1,2 0,7 0,6 0,7 0,7 1,9 1,0 0,6 1,1 0,5 1,8 0,7 0,7 0,8 0,6 1,2 0,7 1,4 0,8 1,0 1,8 0,7 0,6 0,7 0,8 2,1 0,6 0,8 0,6 0,6 1,4 0,8 0,7 0,9 Trung bình 0,69 1,72 0,76 0,84 0,80 SEM 0,05 0,13 0,04 0,13 0,05 STT Chứng sinh Chứng bệnh Quercetin lý lý 30 mg/kg 0,7 2,4 0,6 VIII Nồng độ BUN huyết tương (mg/dl) (-) STT Chứng sinh lý (+) Chứng bệnh lý Quercetin 30 mg/kg Sâm Việt Nam 100 mg/kg Sâm Việt Nam 200 mg/kg 32,16 98,52 29,5 26,30 41,40 24,50 147,50 21,00 35,20 41,70 22,35 104,60 46,50 48,30 76,00 22,93 113,90 28,40 24,00 81,50 19,32 117,50 23,80 35,10 76,10 26,70 183,20 63,5 28,50 32,80 23,20 95,90 18,20 42,70 87,50 28,20 115,60 31,17 39,90 51,60 Trung bình 24,92 122,09 32,76 35,00 61,08 SEM 1,41 10,40 5,34 2,99 7,58 IX Hàm lượng MDA (nM/g protein) (-) (+) STT Chứng sinh lý Chứng bệnh lý Quercetin 30 mg/kg Sâm Việt Nam 100 mg/kg Sâm Việt Nam 200 mg/kg 101,86 324,07 117,61 208,34 96,38 129,25 218,27 92,62 107,68 118,29 119,66 265,18 94,67 187,11 102,20 127,88 245,66 110,08 232,31 93,30 151,51 229,23 109,73 138,15 153,22 138,84 259,70 91,93 182,66 111,10 142,95 225,46 108,37 174,10 135,07 147,74 226,15 190,54 179,58 136,10 104,94 264,49 149,79 158,70 127,88 Trung bình 129,40 250,91 118,37 174,29 119,28 SEM 5,95 10,96 10,78 12,23 6,79 X PHỤ LỤC 4: MỘT SỐ HÌNH ẢNH THỰC NGHIỆM XI Chứng Sinh lý Chứng bệnh lý Quercetin 30 mg/kg (-) Quercetin 50 mg/kg (-) Quercetin 50 mg/kg (+) Quercetin 30 mg/kg (+) Sâm VN 100 mg/kg (+) Sâm VN 200 mg/kg (+) Hình đại thể thận mơ hình tổn thương thận cấp cisplatin chuột nhắt trắng XII A B C A Máy ly tâm PRP EBA-200 (Đức); B Máy sinh hóa bán tự động Screen Master3000 (Arezzo, Italy); C Máy ly tâm lạnh HERMEL Z32 HK (Đức) XIII Cisplatin (Sigma Aldrich Co Ltd, Mỹ) XIV PHỤ LỤC 5: DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH NGHIÊN CỨU Bài báo 1: “Tác dụng bảo vệ thận sâm Việt Nam chế biến trước độc tính thận cisplatin” Tác giả: Nguyễn Thị Thu Hương, Mai Thành Chung, Nguyễn Ngọc Phụng Nhà xuất bản/ Tạp chí: Tạp chí Dược liệu, 25(2):116-121, 2020 (ISSN 18594735) Lĩnh vực nghiên cứu: Dược lý Bài báo 2: “Khảo sát mô hình gây tổn thương thận cấp cisplatin chuột nhắt trắng” Tác giả: Nguyễn Ngọc Phụng, Mai Thành Chung, Nguyễn Thị Thu Hương Nhà xuất bản/ Tạp chí: Tạp Chí Nghiên Cứu Khoa Học Và Phát Triển Kinh Tế, Trường Đại Học Tây Đô Số 10 Năm 2020 (đã chấp nhận đăng) Lĩnh vực nghiên cứu: Dược lý