Nghiên cứu các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình thu nhận cao dược liệu từ cây aralia armata thuộc chi họ nhân sâm (araliaceae)

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM PHAN NGUYỄN PHƢƠNG THẢO NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH THU NHẬN CAO DƢỢC LIỆU TỪ CÂY ARALIA ARMATA THUỘC CHI HỌ NHÂN SÂM (ARALIACEAE) LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Đà Nẵng, Năm 2022 ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM PHAN NGUYỄN PHƢƠNG THẢO NGHIÊN CỨU CÁC YẾU TỐ ẢNH HƢỞNG ĐẾN QUÁ TRÌNH THU NHẬN CAO DƢỢC LIỆU TỪ CÂY ARALIA ARMATA THUỘC CHI HỌ NHÂN SÂM (ARALIACEAE) Chuyên ngành: Hóa lý thuyết hóa lý Mã số: 8440119 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS Giang Thị Kim Liên Đà Nẵng, Năm 2022 MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH i DANH MỤC BẢNG BIỂU ii MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tƣợng phạm nghiên cứu .2 Phƣơng pháp nghiên cứu .2 4.1 Phương pháp nghiên cứu lý thuyết 4.2 Phương pháp nghiên cứu thực nghiệm Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài .2 5.1 Ý nghĩa khoa học .2 5.2 Ý nghĩa thực tiễn .3 Cấu trúc luận văn CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Aralia armata 1.1.1 Thực vật học 1.1.2 Mô tả 1.1.3 Phân bố sinh thái .4 1.1.4 Tính vị cơng dụng 1.2 T nh h nh nghiên cứu thành phần hóa học Aralia armata giới 1.3 T nh h nh nghiên cứu thành phần hóa học Aralia armata Việt Nam 13 TIỂU KẾT CHƢƠNG 14 CHƢƠNG NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Nguyên liệu, dụng cụ, hóa chất 15 2.1.1 Nguyên liệu 15 2.1.2 Dụng cụ, thiết bị 15 2.1.2.1 Dụng cụ 15 2.1.2.2 Thiết bị .15 2.2 Sơ đồ thực nghiệm tổng thể 18 2.3 Nội dung thực nghiệm .19 2.3.1 Khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến trình thu nhận dịch chiết cao từ Aralia armata 19 2.3.1.1 Khảo sát ảnh hưởng tỉ lệ rắn/lỏng đến trình chiết cao .19 2.3.1.2 Khảo sát ảnh hưởng thời gian đến trình chiết cao 19 2.3.1.3 Khảo sát ảnh hưởng nhiệt độ đến trình chiết cao .19 2.3.2 Phương pháp quy hoạch thực nghiệm 19 2.3.3 Tối ưu hoá .22 2.3.4 Xây dựng tiêu chuẩn sở cao dược liệu với dung môi nước dựa theo Dược điển Việt Nam V 22 2.3.4.1 Chiết u t cao dư c liệu 22 2.3.4.2 Mô tả cảm quan .22 2.3.4.3 ác định h m lư ng c n hông tan nư c 22 2.3.4.4 ác định tỷ lệ m t hối lư ng l m hô .23 2.3.4.5 ác định h m lư ng tro to n phần 23 2.3.4.6 ác định h m lư ng im loại n ng 23 2.3.4.7 Độ pH 25 2.3.4.8 Định tính số l p ch t 25 2.3.5 Định danh số thành phần hoá học .27 2.3.6 Khảo sát hoạt tính sinh học 28 2.3.6.1 Phương pháp thử háng viêm: ác định ức chế sản sinh NO 28 2.3.6.2 Phương pháp ác định hoạt tính háng sinh: phương pháp vi định lư ng môi trường lỏng .29 2.3.6.3 ác định hoạt tính háng o y hóa: phương pháp thông qua phản ứng bao vây gốc tự (DPPH) 29 2.3.7 Nghiên cứu ứng dụng cao Aralia armata sản xuất thực phẩm bảo vệ sức khỏe 29 2.3.7.1 Nguyên liệu 30 2.3.7.2 Quy trình sản u t 30 2.3.7.3 Phương pháp iểm tra ch t lư ng sản phẩm 31 2.3.7.4 Phương pháp hảo sát thời gian bảo quản .31 TIỂU KẾT CHƢƠNG 32 CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến tr nh chiết xuất cao dƣợc liệu từ Aralia armata .33 3.1.1 Ảnh hưởng tỉ lệ Rắn/lỏng đến trình chiết xuất cao dược liệu từ Aralia armata 33 3.1.2 Ảnh hưởng thời gian đến trình chiết xuất cao dược liệu từ Aralia armata 35 3.1.3 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình chiết xuất cao dược liệu từ Aralia armata 37 3.2 Kết quy hoạch thực nghiệm 39 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.2.1 Mã hóa, lập ma trận thực nghiệm .40 3.2.2 Xây dựng mơ hình thực nghiệm 41 3.2.3 Kiểm định mơ hình thực nghiệm 42 3.4 Kết xây dựng tiêu chuẩn sở cho cao dược liệu .45 3.4.1 Chiết xuất cao dược liệu 45 3.4.2 Hàm lượng cặn không tan nước 46 3.4.3 Tỷ lệ khối lượng làm khô 46 3.4.4 Hàm lượng tro toàn phần 47 3.4.5 Hàm lượng kim loại nặng 47 3.4.6 Độ pH 47 3.4.7 Định tính số lớp chất .48 3.5 Kết định danh số thành phần hoá học 49 3.6 Kết khảo sát hoạt tính sinh học 57 3.6.1 Hoạt tính kháng vi sinh vật 57 3.6.2 Hoạt tính kháng viêm 58 3.6.3 Hoạt tính kháng oxi hóa 58 3.7 Nghiên cứu ứng dụng sản xuất sản phẩm thực phẩm bảo vệ sức khỏe 59 3.7.1 Nghiên cứu, bổ sung cao Aralia armata vào kẹo Armata 59 3.7.2 Kiểm tra chất lượng sản phẩm kẹo Armata 60 3.7.3 Khảo sát thời gian bảo quản 61 TIỂU KẾT CHƢƠNG 62 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .64 KẾT LUẬN .64 KIẾN NGHỊ 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 PHỤ LỤC .69 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an i DANH MỤC HÌNH Số hiệu Tên h nh 1.1 Hình ảnh hoa Aralia armata Nguyên liệu Aralia armata phơi khô (a) bột 2.1 xử lý (b) Máy đo quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS Shimadzu 2.2 AA 7000 2.3 Một số hóa chất dùng nghiên cứu Quy trình thực nghiệm chiết xuất cao dƣợc liệu từ 2.4 Aralia armata 2.5 Sơ đồ quy trình sản xuất kẹo Armata Dịch chiết thu đƣợc đƣợc thay đổi thể tích dung 3.1 mơi chiết Đồ thị biểu diễn kết lƣợng cao thu đƣợc thay 3.2 đổi thể tích dung mơi chiết Đồ thị đƣờng thẳng biểu diễn tƣơng quan khối lƣợng 3.3 cao chiết thể tích dung môi chiết 3.4 Dịch chiết thu đƣợc thay đổi thời gian chiết Đồ thị biểu diễn khối lƣợng cao thu đƣợc thay đổi 3.5 thời gian chiết Đồ thị đƣờng thẳng biểu diễn tƣơng quan khối lƣợng 3.6 cao chiết thời gian chiết 3.7 Dịch chiết thu đƣợc thay đổi nhiệt độ chiết Đồ thị biểu diễn khối lƣợng cao thu đƣợc thay đổi 3.8 nhiệt độ chiết Đồ thị đƣờng thẳng biểu diễn tƣơng quan khối lƣợng 3.9 cao chiết nhiệt độ chiết 3.10 Kết thu đƣợc từ MATLAB 3.11 Cao chiết Aralia armata 3.12 Thuốc Tuệ đức Hoàn nguyên cốt 3.13 Sản phẩm kẹo Armata Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Trang 04 15 16 16 18 31 33 34 35 35 36 37 37 38 39 45 46 59 60 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ii DANH MỤC BẢNG BIỂU Số hiệu 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 3.10 3.11 3.12 3.13 3.14 3.15 3.16 3.17 3.18 Tên bảng Kết khảo sát tỉ lệ rắn lỏng Kết khảo sát thời gian Kết khảo sát nhiệt độ Kết thí nghiệm quy hoạch thực nghiệm Bảng kết chuyển đổi từ biến khảo sát Z thành bảng biến không thứ nguyên x Kết khảo sát cặn không tan nƣớc cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết khảo sát khối lƣợng làm khô cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết khảo sát tro toàn phần cao đặc Aralia armata Kết khảo sát hàm lƣợng số kim loại nặng cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết khảo sát độ pH dung dịch cao đặc Aralia armata nƣớc với dung môi chiết xuất nƣớc Kết định tính nhóm chất cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết đo GC-MS dịch chiết phân đoạn từ cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết khảo sát hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết khảo sát hoạt tính kháng viêm cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết khảo sát hoạt tính kháng oxi hố cao đặc Aralia armata với dung môi chiết xuất nƣớc Kết đánh giá % cao chiết kẹo Armata Kết kiểm tra chất lƣợng kẹo Armata Kết khảo sát thời gian bảo quản kẹo Armata Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Trang 34 36 38 40 41 46 46 47 47 48 48 50 57 58 58 60 60 61 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Việt Nam nƣớc nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa nên có hệ thực vật đa dạng phong phú Theo ƣớc tính, nƣớc ta có khoảng gần 13.000 lồi thực vật bậc cao có khoảng 4.000 lồi đƣợc sử dụng làm thuốc Đây nguồn dƣợc liệu quý, tiềm triển vọng, có giá trị kinh tế xã hội lớn Ngày nay, với phát triển khoa học cơng nghệ, hàng chục ngàn hoạt chất có cỏ đƣợc phát hiện, nghiên cứu, chế biến làm thuốc chữa bệnh Do việc nghiên cứu, xác định chất có hoạt tính sinh học sở khoa học để phát hiện, khai thác, sử dụng có hiệu nhƣ bảo tồn, phát triển bền vững nguồn tài nguyên thực vật chứa hợp chất có hoạt tính sinh học nhiệm vụ lớn đặt trƣớc Các nhà khoa học giới nói chung Việt Nam nói riêng, tìm số chất từ thiên nhiên chữa số bệnh nhƣ ung thƣ, bệnh khớp, mụn nhọt Từ cơng trình nghiên cứu nhà khoa học ngồi nƣớc, nhận thấy thành phần hóa học lồi thuộc chi Aralia saponin, đồng thời chất đƣợc tách từ lồi thuộc chi thể nhiều hoạt tính hữu ích Tuy nhiên, nghiên cứu lồi Aralia armata (cẩm ràng, cẩm giàng) thuộc chi Aralia Việt Nam hạn chế, dân gian sử dụng phận loài để chữa bệnh theo kinh nghiệm, việc nghiên cứu điều kiện chiết tách để thu nhận cao chiết từ loài hầu nhƣ chƣa có cơng bố Với lý trên, chọn đề tài: Nghiên cứu yếu tố ảnh hƣởng đến tr nh thu nhận cao dƣợc liệu từ Aralia armata thuộc chi họ nhân sâm (Araliaceae)” làm đề tài luận văn thạc s Đề tài nghiên cứu cung cấp thêm thông tin khoa học điều kiện thu nhận cao chiết từ phận Aralia armata, xây dựng tiêu chuẩn sở làm khoa học để ứng dụng cao chiết thực tiễn Mục đích nghiên cứu - Khảo sát yếu tố ảnh hƣởng đến trình chiết xuất cao dƣợc liệu từ cành, Aralia armata - Tiến hành tốn tối ƣu hóa q trình chiết để tìm điều kiện chiết tối ƣu - Xây dựng tiêu chuẩn sở để thu nhận cao dƣợc liệu theo Dƣợc điển Việt Nam V - Xác định số thành phần hố học - Khảo sát số hoạt tính sinh học - Ứng dụng cao dƣợc liệu để làm thực phẩm bảo vệ sức khoẻ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 82 Phụ lục Kết thử nghiệm hoạt tính chống oxi hố Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 83 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 84 Phụ lục Kết kiểm tra chất lƣợng kẹo Armata Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 85 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 86 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 87 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 88 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 89 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 90 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 91 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 92 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 93 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 94 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 95 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn