Nghiên cứu và sử dụng nấm bạch cương (beauveria bassiana) phòng trừ sâu hại lạc tại nghi đức thành phố vinh nghệ an

Tr-ờng đại học vinh Khoa sinh học ====***==== Lại thị minh Nghiên cứu sử dụng nấm bạch c-ơng (Beauveria bassiana) phòng trừ sâu hại lạc Nghi Đức - Thµnh Vinh - NghƯ An Khãa ln tèt nghiƯp đại học Ngành s- phạm sinh học Vinh - 2010 MỞ ĐẦU Tầm quan trọng việc nghiên cứu đề tài Cây lạc (Arachis hypogela L.) cơng nghiệp ngắn ngày, thực phẩm có giá trị kinh tế cao ngày đóng vai trị quan trọng q trình phát triển Kinh tế Nơng nghiệp Tất phận lạc có giá trị sử dụng mà chủ yếu hạt lạc với 44 - 56% lipit, 25 - 34% protein, 22% gluxit, loại vitamin chất khoáng Bởi lạc nguồn bổ sung quan trọng chất đạm, chất béo cho người (Lê Song Dự, Nguyễn Thế Côn, 1979) [6] Mặt khác, lạc họ đậu (Fabaceae) có tác dụng cải tạo đất lạc có khả cố định Nitơ tự khí trời, nhờ cộng sinh vi khuẩn Rhizobium vigna nốt sần Từ nốt sần cung cấp lượng đạm đáng kể cho trồng vụ sau, nhờ lạc góp phần cải tạo nâng cao độ phì đất Lạc trồng nhiệt đới có khả thích ứng rộng không yêu cầu khắt khe kĩ thuật nên trồng rộng rãi nhiều nơi giới Trong số 25 nước trồng lạc Châu Á, Việt Nam đứng thứ sản lượng suất thấp Tuy tiềm phát triển lạc nước ta cịn lớn, diện tích nước lên đến 40 – 50 vạn/ha với hai vùng trồng lạc hàng hóa lớn Nghệ Tĩnh Đông Nam Bộ [22] Tại Nghệ An lạc công nghiệp ngắn ngày chủ lực, sản lượng hàng năm mang đến cho người sản suất tương đương với thóc (Sở Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn, 2000) Từ năm 1996 đến nay, diện tích suất lạc tỉnh khơng ngừng tăng lên có khả mở rộng diện tích tới 35000 (Cục thống kê Nghệ An, 1999) [1] Cũng trồng khác, lạc bị nhiều loại sâu phá hại, đặc biệt sâu khoang, sâu xanh, sâu lạc, châu chấu… Theo wynnigor (1962), lạc sản lượng giảm sâu hại 17,1%, bệnh 11,5%, cỏ dại 11,8% Bởi làm giảm thiệt hại sâu bệnh gây góp phần tăng suất lạc Để bảo vệ lạc tăng suất, Nghệ An biện pháp sử dụng phổ biến để trừ loài sâu hại sử dụng thuốc hóa học Thực biện pháp hóa học cho hiệu cao, nhanh, đơn giản dễ sử dụng Nhưng bên cạnh lợi ích trước mắt ngày bộc lộ mặt trái như: Ơ nhiễm mơi trường, tính kháng thuốc sâu hại, bùng phát dịch hại mới, dư lượng thuốc hóa học sản phẩm nông nghiệp làm cân sinh thái, tác động xấu đến sức khỏe người Chính nhà khoa học nghiên cứu sản xuất ứng dụng chế phẩm sinh học bảo vệ thực vật từ nấm kí sinh trùng Hiện giới nghiên cứu sử dụng thành cơng loại nấm để phịng trừ nhiều loại sâu hại trồng nấm Metarhizium ansopliae, Beauveria bassiana, Hirsutella thompsonii [26] Trong nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) có tầm quan trọng đặc biệt theo Rehner SA, Buckley E (2005) [32], Donald G, McNeil (2005) [28] nấm diệt loại côn trùng nhiều loại trồng khác nhau, mối, mọt, muỗi sốt rét không lây nhiễm sang người động vật Và từ lâu y học Việt Nam dùng tằm vôi (tằm nhiễm nấm trắng Beauveria) để chữa chứng bệnh tai biến mạch máu não (Đông y Việt Nam 9.9.2006) Trong năm gần nước ta có số cơng trình nghiên cứu ứng dụng chế phẩm nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) phòng trừ rầy nâu (N.lugens) hại lúa, sâu đo xanh (A Flava) hại đay, sâu róm hại thơng tỉnh phía bắc (Phạm Thị Thùy cs, 1997) [20] phòng trừ cao nhện hại thực vật (Nguyễn Văn Đĩnh, 2000) [31] Tuy nhiên cơng trình trước tập trung nghiên cứu sử dụng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) để phịng trừ sâu hại rau, sâu róm hại thơng, mối, mọt chưa có cơng trình nghiên cứu sử dụng nấm nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) để phòng trừ sâu hại lạc Với ý nghĩa mong muốn tìm hiểu thêm nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) khả diệt sâu hại lạc, thực đề tài: “Nghiên cứu sử dụng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) phòng trừ sâu hại lạc Nghi Đức – Thành phố Vinh - Nghệ An’’ Mục tiêu đề tài Do thấy vai trò nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) diệt sâu hại lạc, ảnh hưởng đến suất, chất lượng trồng nên thực đề tài nhằm: Thu thập sâu hại lạc, từ phân lập chủng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) khiết Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) Nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) Thử nghiệm khả diệt sâu hại lạc nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) Xây dựng quy trình sản xuất chế phẩm, sản xuất sinh khối nấm để áp dụng vào thực tiễn sản xuất Rèn luyện cho thân số kĩ thí nghiệm đồng thời làm quen với phương pháp nghiên cứu khoa học Nhiệm vụ đề tài Để đạt mục tiêu nói trên, nhiệm vụ đề tài gồm: Điều tra thực địa, thu thập, xử lý bảo quản mẫu C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Pha chế môi trường nuôi cấy phân lập nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) khiết Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) Làm thí nghiệm ảnh hưởng số yếu tố mơi trường đến sinh trưởng, phát triển Từ tìm điều kiện tối ưu (opt) để điều khiển sinh trưởng, phát triển tốt, cho có lợi Làm thí nghiệm để thử nghiệm khả diệt sâu hại lạc nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) Từ yếu tố thích hợp nhất, xây dựng quy trình sản xuất sinh khối để sử dụng thực tiễn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chƣơng I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học 1.1.1 Nấm kí sinh trùng (IPF) Khái niệm ”Nấm kí sinh trùng - Insect pathogenic fungi (IPF)” hay nấm côn trùng – ”Insect pathogenic fungi” nhà khoa học sử dụng thuật ngữ đồng nghĩa, đề cập nhóm sinh vật (nấm) ký sinh gây bệnh cho côn trùng Theo Evan (1988), nấm kí sinh trùng chia thành nhóm: (1) Kí sinh trong, tức nấm kí sinh nội quan khoang thể trùng kí chủ (2) Kí sinh ngồi, tức nấm phát triển tầng chitin ngồi vỏ thể trùng gây nên bệnh cho côn trùng (3) Nấm mọc côn trùng, tức nấm trực tiếp gián tiếp chứng minh chúng kí sinh trùng (4) Cộng sinh, có nghĩa nấm trùng mang lại lợi ích cho mối quan hệ chung sống Nấm kí sinh trùng cịn chia thành kí sinh sơ cấp (primery pathogen) kí sinh thứ cấp (secondery pathogen) (Pu Li, 1996) Nấm kí sinh sơ cấp thường nhiễm vào kí chủ trùng khoẻ mạnh, gây bệnh sau giết chết trùng Trong đó, nấm kí sinh thứ cấp kí sinh côn trùng bị yếu côn trùng bị thương Các mầm bệnh kí sinh trùng trưởng thành hoăc trùng bị bệnh gọi kí sinh hội hoăc kí sinh khơng chun tính, loại kí sinh nhiễm vào kí chủ thơng qua xâm nhập qua lớp chitin vỏ thể trùng Các kí Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an sinh côn trùng bị thương gọi bệnh lây qua vết thương, xâm nhập vào trùng qua vết thương Như vậy, nấm kí sinh côn trùng (IPF) dùng mô tả tượng nấm kí sinh thể kí chủ trùng Khái niệm dùng cho nấm kí sinh nhện nhện trùng hai lớp ngành (Phyllum) Động vật chân khớp (Arthropoda) chúng có kiểu sinh thái ăn thực vật ăn thịt sinh sống chủ yếu (Tzean cs, 1997) [30] 1.1.2 Các nhóm nấm kí sinh sâu Nấm quần thể vi sinh vật khơng có chất diệp lục, có phân hố tế bào hữu tính số lồi đơn bào Chúng bao gồm nấm hoại sinh nấm kí sinh Nấm gây bệnh cho trùng phát 750 loài Phần lớn nấm gây bệnh cho côn trùng thuộc chi nấm mốc sâu (Entermophthorales) ngành phụ nấm tiếp hợp (Zygomicotina) lớp nấm sợi (Hyphomycetes) ngành phụ nấm bất tồn (Deuteromycotina) Trong có nhiều lồi thuộc chi Beauveria, Metarrhizium, Entomophthora, Coelomyces gây dịch bệnh cho sâu hại có tác dụng khống chế tự nhiên [18] - Ngành phụ nấm tiếp hợp (Zygomicotina) thường gặp loài nấm mốc ruồi (En muscae), nấm mốc ngài đen (En aulicae), nấm mốc dịch bọ (Erynia brahmina), nấm mốc rận (En delphacis) - Ngành phụ nấm bất toàn (Deuteromycotina) thường gặp chi: nấm bào tử hình thoi (Aschersonia Mont), nấm bạch cương (Beauveria Vuill), nấm lục cương (Metarhizium Sorohin), nấm mốc tựa xanh (Paracilomyces Bainier) Theo Zhang (1999) nấm bạch cương Beauveria bassiana bào tử cầu có phạm vi kí sinh rộng, gây bệnh cho 700 loài thuộc 149 họ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 15 trùng, 10 lồi nhện Nấm mốc tựa xanh (Paracilomyces) nhiều nhà khoa học coi trọng, chúng làm sâu róm thơng sâu thơng chết 90%-100% 1.1.3 Những bệnh lý côn trùng bị nấm kí sinh tiêu diệt Khi trùng bị loại nấm kí sinh thường có biểu hiện: - Phát dục khơng bình thường: Biểu chỗ phát dục kéo dài, thân sâu gầy yếu, đầu to, thân nhỏ - Hành vi khơng bình thường: Khi bị bệnh, sâu thường bị kích động Sau bị bệnh, sâu thường bước vào ngủ nghỉ sớm, thiếu phản ứng với mơi trường ngồi sâu bị bệnh di chuyển từ nơi nghỉ đến nơi khác, bị lên cao để chết - Tiêu hố khơng bình thường: Sâu bị bệnh thường ăn ít, có tiết dịch thể từ hậu mơn, có phân khơ, thành viên nhỏ dính vào hậu mơn, màu phân khác thường - Màu sắc khác thường: Sự biến màu thân sâu thường nhiều nguyên nhân: + Do tồn vật gây bệnh trên thân sâu nấm bạch cương (có màu trắng), nấm lục cương (có màu xanh), nấm hồng cương (có màu đỏ) Cũng vi khuẩn gây nên + Do vi sinh vật tạo sắc tố làm cho sâu biến màu nấm Serratia marcescens sinh sắc tố đỏ làm cho thân sâu có màu đỏ + Do phản ứng phòng vệ sâu tạo sắc tố đen, thường thân sâu có đốm đen - Biến đổi mô tế bào : Do vật gây bệnh khác nhau, quan phận biểu khơng bình thường Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Ví dụ: Nấm mốc sâu (Entomophthora aulicea) xâm nhiễm ban đầu phá hoại thể lipit sâu làm cho lipit tế bào bị khô bị phân giải Do ảnh hưởng đến đường tiêu hoá làm cho sâu ngừng ăn - Những triệu trứng khác: Ngồi triệu trứng trên, sâu cịn có số triệu trứng khác hệ thống sinh dục bị ảnh hưởng làm cho số lượng trứng giảm, biến đổi màu sắc làm cứng thân (như nấm bạch cương) thân mềm nhũn (như virut vi khuẩn), thể có mùi thối 1.1.4 Cơ chế tác dụng gây bệnh nấm * Đường xâm nhập: Nấm kí sinh trùng xâm nhiễm vào thể trùng qua số đường sau: - Xâm nhập qua đường tiêu hoá Chủ yếu qua ruột hệ thống yếu sâu - Xâm nhập qua da Bào tử nấm sau nẩy mầm thành ống mầm, nhờ tác dụng enzim tác dụng học xuyên qua da để vào thể - Thơng qua trứng trùng Có thể hệ sợi nấm xâm nhập vào phôi lây truyền cho hệ sau, hệ sợi nấm phát triển bề mặt trứng côn trùng trứng nở sâu non ăn vỏ trứng có nhiễm nấm nhiễm bệnh [18] *Tác dụng gây bệnh nấm Tác dụng gây bệnh nấm côn trùng cách bào tử nảy mầm, xâm nhập vào thể sinh sản xoang làm yếu phá hoại chức trao đổi chất côn trùng [18] Diễn biến tác dụng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) lên sâu hại sau: Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Sau tiếp xúc với bề mặt thể côn trùng, conidi nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) bắt đầu mọc mầm xâm nhập vào bên thể côn trùng Q trình sau trùng bị nhiễm conidi khoảng 10h kéo dài vài ngày Sau xâm nhập vào thể côn trùng, nấm bắt đầu sinh trưởng phát triển Khi trùng phải huy động tế bào bạch huyết để chống đỡ nấm Beauveria bassiana tiết độc tố Bovericin có chứa Protease số chất khác làm phá hủy tế bào bạch huyết, gây cho sâu chết Nấm tiếp tục sinh trưởng, phát triển Lượng sợi nấm bên thể vật chủ ngày tăng xác côn trùng trở nên rắn lại Khi gặp đủ độ ẩm sợi nấm mọc bên bề mặt thể vật chủ tạo thành conidi phủ thể sâu [15] - Nhờ gió, mưa bào tử nấm lây lan đến sâu khỏe, gặp điều kiện độ ẩm nhiệt độ thích hợp phình lên, nảy mầm thành ống mầm, ống mầm tiếp xúc với da sâu mà hình thành vịi bám, vịi bám hình thành sợi nhỏ chọc thủng da, từ xâm nhập vào thể sâu Sau xuyên qua da, sợi nấm phình to thành dạng bàn, mép bàn mọc sợi nấm hình thành sợi ngắn Sợi ngắn nhờ lực đẩy vào lớp cuối đạt đến da thật Nếu trùng lột xác chúng lại hình thành vịi bám để tiến hành tái xâm nhiễm [18] - Nấm thông qua áp lực học để xâm nhập vào thể côn trùng nhờ tác dụng enzim phân giải mà chọc thủng biểu bì Những enzim phân giải proteaza, lipoaza va chitinaza [18] - Nấm gây bệnh cứng sâu tổng hợp nhiều enzim Mỗi lồi nấm khác hình thành enzim khác chúng tự tạo enzim chitinaza [24] - Sự sinh sản nấm thể côn trùng làm cho hoạt động trao đổi chất, quan mô côn trùng bị phá hoại, chức sinh lý phát sinh rối loạn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 10 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Từ bảng 3.7 cho thấy: - Trong điều kiện bình thường có sâu chết tỷ lệ thấp Chúng chết di chuyển số điều kiện sống đột ngột thay đổi - Khi nhiễm nấm: + Ở độ pha loãng 10-2 sâu chết hết (100%) sau ngày + Ở độ pha loãng 10-4 sâu chết hết (100%) sau ngày + Ở độ pha loãng 10-6 sâu chết hết (100%) sau 12 ngày + Ở độ pha loãng 10-8 sau 12 ngày sâu chết khoảng 77% tỷ lệ không nhỏ (22,22%) sâu thực vịng đời sống mình, tức sâu hoá bướm Như độ pha loãng khác nhau, tác dụng diệt sâu chủng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) đạt > 50% nghĩa chúng đạt LD50 (Lethal Dose - liều gây chết 50%) Trong độ pha lỗng 10-2 cho kết tối đa LD100 (Max Lethal Dose) Do để có hiệu cao, phun sâu muốn chết nhanh cần có độ pha lỗng ≥ 10-2 3.8 Xây dựng quy trình sản xuất sinh khối nấm Bạch cƣơng (Beauveria bassiana) diệt sâu Sản xuất sinh khối khâu quan trọng công nghệ nấm Bằng sinh khối ta tạo số lượng nấm tăng lên hàng tỷ lần có đủ số lượng nấm cần thiết sử dụng tiêu chuẩn cho phép sử dụng chế phẩm phải có 109 bào tử/g Mặt khác, từ sinh khối nấm ta dễ bảo quản lưu giữ lâu ngày, sử dụng thời điểm Để sản xuất dùng phương pháp lên men xốp Từ kết thu bảng 3.3; bảng 3.4; bảng 3.5; bảng 3.6 xây dựng quy trình cơng nghệ sản xuất nấm áp dụng thực tiễn sản xuất sau: Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 45 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Môi trường sản xuất (60% cám + 30% ngô + 10% trấu) Điều chỉnh độ ẩm (RH = 75%), điều chỉnh pH thích hợp (pH = 6) Cho vào bình tam giác có dung tích 500ml Khử trùng (1atm 30-45 phút) trùng Pasteur Lấy để nguội, cho vào bình 0,1g nấm, lắc trộn Nuôi 300C 7-10 ngày Sấy, đóng gói, bảo quản, sử dụng Hình 3.1: Sơ đồ minh hoạ quy trình sản xuất sinh khối nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) Giải thích quy trình sản xuất sinh khối nấm: - Môi trường cấy nấm yếu tố quan trọng cho sinh trưởng, phát triển nấm Nếu môi trường không tốt, không đủ dinh dưỡng, nấm mọc yếu không mọc, môi trường thừa chất dinh dưỡng nấm mọc nhanh, sợi phát triển nhiều, bào tử Do cần phải tạo cho chúng môi trường đầy đủ dinh dưỡng Ở sử dụng môi trường gồm 60% cám + 30% ngô + 10% trấu lẽ cám, ngô nguồn dinh dưỡng quan trọng nấm, trấu để tăng độ xốp, độ thơng thống hơn, thơng thống hình thành nhiều bào tử nấm (đối với trấu xay nhỏ nguồn dinh dưỡng không dễ phát tán mơi trường sử dụng mà cịn sống, sinh trưởng lâu ngày đưa vào mơi trường) Và với tỷ lệ thích hợp cho nấm sinh trưởng tốt nhất, hình thành nhiều bào tử nấm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 46 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an - Điều chỉnh độ ẩm (RH = 75%) điều chỉnh pH (pH = 6) tối thích để nấm sinh trưởng, phát triển tốt - Hỗn hợp phải khử trùng nhiệt ẩm nồi khử trùng (Autoclave) để tránh lây nhiễm nấm vi khuẩn, vi rút từ mơi trường khơng khí từ ngun liệu - Sau khử trùng xong, hỗn hợp phải làm nguội nhiệt độ phòng cấy nấm nhiệt độ cao nấm bị diệt - Ni nhiệt độ tối thích 300C để nấm mọc - Sau – 10 ngày tiến hành thu sinh khối nấm tiến hành sấy khô dạng bột đóng gói sản phẩm bảo quản điều kiện thích hợp 3.9 Những điều cần lƣu ý sử dụng chế phẩm nấm Bạch cƣơng (Beauveria bassiana) công tác diệt trừ sâu - Khi sử dụng chế phẩm nấm để diệt sâu cần hiểu rõ tập tính hoạt động lồi sâu hại VD: Các loài sâu thuộc họ ngài đêm (sâu khoang, sâu xanh, sâu lá…) có tập tính hoạt động sáng sớm (5h – 7h) chiều tối (17h – 20h) lúc trời râm mát Chính cần phun vào thời điểm ngày đạt hiệu cao - Nghiên cứu kỹ vòng đời lồi sâu hại để diệt sâu hiệu Nên phun chế phẩm nấm giai đoạn sâu non đạt hiệu cao phun giai đoạn sâu hoá nhộng - Cần nắm bắt thay đổi thời tiết để phun chế phẩm nấm đạt hiệu cao Những nghiên cứu nước cho thấy, thời phun chế phẩm nấm đạt hiệu cao điều kiện độ ẩm cao (≥ 80%), khơng khí nhiều nước nên nấm dễ bám cây, côn trùng Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 47 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ A Kết luận: Nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) có khả sinh trưởng tốt mơi trường Czapeck, sau ngày nuôi cấy điều kiện nhiệt độ 300C khuẩn lạc đạt đường kính 18 – 55mm, có màu trắng suốt, bờ khuẩn lạc: trịn, xù xì, bề mặt khuẩn lạc: lồi, xốp Có dịch tiết đỏ nho Bào tử hình cầu hình elíp đính với đầu cuống conidi, tụ tập thành dạng chùm nho, kích thước vơ nhỏ Bào tử có kích thước 2,5 – 3μm, bào tử nhẹ dễ bay phát tán vào khơng khí Sợi nấm phân nhánh, có vách ngăn ngang Nhiệt độ tối thích (opt) cho nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) sinh trưởng, phát triển 300C, độ ẩm 75% pH thích hợp cho phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) pH = Hoạt tính diệt sâu hại lạc dịch nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) điều kiện phịng thí nghiệm cao, độ pha lỗng 10-2 cho kết tối đa LD100 (Max Lethal Dose) Trên sở kết thu phần thực nghiệm xây dựng quy trình sản xuất sinh khối nấm áp dụng sản xuất B Kiến nghị: Do thời gian nghiên cứu hạn chế, tiến hành số nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ, độ ẩm, pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) thử nghiệm khả diệt sâu hại lạc điều kiện phịng thí nghịêm Đề tài cần tiến hành nghiên cứu thử nghiệm hoạt tính diệt sâu nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) quy mô lớn với nhiều loại sâu hại trồng khác Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 48 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Chế phẩm nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) bảo vệ trồng có ý nghĩa to lớn mơi trường sống sức khoẻ người Do cần gắn liền việc dùng chế phẩm sinh học với hàng loạt cơng trình nghiên cứu khác bảo vệ môi sinh, phát triển nông nghiệp sinh thái hướng đến nông nghiệp Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 49 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt: Cục thống kê Nghệ An, 1999 Số liệu kinh tế xã hội (1996 – 1998) tỉnh Nghệ An tr 11 Viện bảo vệ thực vật, 1976 Kết điều tra côn trùng 1967 – 1968 Nxb Nơng nghiệp Số liệu phịng nơng nghiệp xã Nghi Đức, Thành phố Vinh (2008) Sở nông nghiệp phát triển nơng thơn, “Báo cáo tình hình thực công tác tháng năm 2006 ngành nông nghiệp phát triển nông thôn”, Trang thông tin điện tử Nghệ An Ngô Thế Dân, (2000) Kỹ thuật đạt suất cao Việt Nam Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Lê Song Dự, Nguyễn Thế Côn, 1979 Giáo trình lạc Nxb Nơng nghiệp Nguyễn Lân Dũng, 1972 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật 12-3 Nxb Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, 1976 Thực tập vi sinh vật học, Nxb Đại học Quốc gia Hà Nội Nguyễn Lân Dũng, 1981 Sử dụng vi sinh vật để phòng trừ sâu hại trồng Nxb Khoa học Kĩ thuật, Hà Nội 10 Nguyễn Thị Hiếu, 2001 – 2004 Côn trùng kí sinh sâu non sâu hại lạc cánh vảy Diễn Châu, Nghi Lộc - Nghệ An Luận văn thạc sỹ khoa học sinh học, trường Đại Học Vinh 11 Trịnh Thị Hồng, 2007 Cơn trùng kí sinh mối quan hệ chúng với sâu cánh vảy (Lepidoptera) hại ngô, lạc, vừng huyện Nghi Lộc - Nghệ Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 50 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an An, năm 2006 – 2007 Luận văn thạc sỹ khoa học sinh học, trường Đại Học Vinh 12 Li Hong Ke, “Thuốc sinh học nấm Beauveria bassiana phòng chống rầy nâu rầy xanh đuôi đen, Viện BVTV Hồ Nam – Trung Quốc – Lê Lương Tề 1997, dịch từ IRN Volume 11, N03,96”, Tạp chí bảo vệ thực vật số 2/ 1997, tr 46 – 47 13 Phạm Văn Lầm, 2000 “ Nấm gây bệnh cho trùng”, Tạp chí Bảo vệ Thực vật, 169 (1), tr 35 – 37 14 Trần Ngọc Lân, 2003 “Sâu hại lạc côn trùng ăn thịt, kí sinh chúng vùng đồng tỉnh Nghệ An”, Báo cáo đề tài nghiên cứu khoa học công nghệ 15 Trần Ngọc Lân, 2007 Quản lí tổng hợp dịch hại trồng nơng nghiệp Nxb Nghệ An 16 Nguyễn Văn Nam, 2003 Nghiên cứu nấm Beauveria bassiana ký sinh tằm dâu Bombyx mori biện pháp phịng chống có hiệu Luận văn thạc sỹ khoa học sinh học, Đại Học Nông nghiệp I Hà Nội, Hà Nội 17 Đặng Trần Phú, Lê Trường, Nguyễn Hồng Phi Nguyễn Xuân Hiển, 1977 Tư liệu lạc Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 18 Chu Thị Thơm, Phan Thị Lài Nguyễn Văn Tó, 2006 Phịng trừ sâu hại cơng nghệ vi sinh Nxb Lao Động 19 Đặng Thị Lệ Thuỷ, 2007 Cơn trùng kí sinh sâu ( Archips asiaticus Walsingam ) hại lạc Nghi Lộc - Nghệ An Luận văn tốt nghiệp đại học, Đại Học Vinh 20 Phạm Thị Thuỳ, Trần Thanh Tháp, 1993 “ Một số kết quả nghiên cứu sản xuất thử nghiệm nấm Beauveria bassiana nấm Metarhizium anisopliae rầy nâu hại lúa sâu đo xanh hại đay”, Tạp chí Nông nghiệp CNTP, số 4/1993 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 51 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 21 PGS Phạm Thị Thuỳ, Nguyễn Thị Bắc, 1997, “ Khảo nghiệm thuốc nấm Beauveria bassiana nấm Metarhizium anisopliae để phòng trừ sâu đo xanh”, Tạp chí Bảo vệ thực vật, số 3/1997 22 Lê Văn Thuyết, Lương Minh Khôi, Phạm Thị Vượng, 1993 “Một số nghiên cứu sâu hại lạc tỉnh Hà Bắc Nghệ Tĩnh, 1991”, Tạp chí BVTV (3), tr – 10 23 Nguyễn Duy Trí, 1998 Bệnh kí sinh trùng tằm Nxb Giáo Dục, Hà Nội tr 63 – 68 24 Nguyễn Dương Tuệ, 2003 Các phương pháp nghiên cứu vi sinh vật Đại Học Vinh 25 Nguyễn Dương Tuệ, 2007 “Sử dụng nấm kí sinh phịng trừ sâu hại số nơng nghiệp chính”, Tạp chí Khoa học – Cơng nghệ, Nghệ An Tài liệu tiếng nƣớc ngoài: 26 Bader P.S Jansson and Jonsson B G., 1995 Wood – inhabiting fungi and substratum decline in selectively logged boreal spruce forests Biol Conserv 27 Brady B.L., 1981 Fungi as parasites of insects and mites Biocontrol News Inf 28 Donald G McNeil Jr., 2005 Fungus Fatal to Mosquito May Aid Global War on Malaria The new york times 29 Janet Jennifer Luangsa-ard, Kanoksri Tasanathai, Suchada Mongkolsamrit, Somsak Sivachai, Nigel Hywel-Jones (2006), Workshop on The Collection, Isolation, Cultivation and Identification of Insect – Pathogenic Fungi, Vietnam 2006, 106p 30 Krasnoff S.B., Keresztes I., Gillilan R.E., Szebenyi D.M.E., Donzelli B.G.G., Churchill A.C.L., Gibson D.M., 2007 Serinocyclins A and B, Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 52 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Novel Heptapeptides from Metarhizium anisopliae Journal of Natural Products in press 31 Nguyen Van Dinh (2001), Using the pridatorymite, Amblyseius, Sp and product of B.b for controlling the broad mite polyphago taremus latus Bar K, Vietnamese Norowegian worksho 25 – 26 september 2001 32 Rehner SA, Buckley E, (2005) “ A Beauveria phylogeny inferred from nuclear ITS and EF1 – sequences: evidence for cryptic diversification and links to Cordyceps teleomorphs” Mycologia 97: 84 – 98 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 53 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 Tầm quan trọng việc nghiên cứu đề tài 2 Mục tiêu đề tài Nhiệm vụ đề tài Chƣơng I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học 1.1.1 Nấm kí sinh trùng (IPF) 1.1.2 Các nhóm nấm kí sinh sâu 1.1.3 Những bệnh lý trùng bị nấm kí sinh tiêu diệt 1.1.4 Cơ chế tác dụng gây bệnh nấm 1.2 Tình hình nghiên cứu giới 11 1.2.1 Nghiên cứu sâu hại lạc 11 1.2.2 Nghiên cứu ứng dụng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) kí sinh trùng phịng trừ sâu hại trồng 12 1.3 Tình hình nghiên cứu Việt Nam 15 1.3.1 Nghiên cứu sâu hại lạc 15 1.3.2 Nghiên cứu ứng dụng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) kí sinh trùng phịng trừ sâu hại trồng 16 Chƣơng II: ĐỐI TƢỢNG, THỜI GIAN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Đối tượng, địa điểm, thời gian nghiên cứu 19 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 19 2.1.3 Thời gian nghiên cứu 19 2.2 Phương pháp nghiên cứu 19 2.2.1.Phương pháp thu mẫu, xử lý bảo quản mẫu 19 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 54 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2.2 Phương pháp phân lập nấm 19 2.2.3 Phương pháp phân loại nấm 22 2.2.4 Phương pháp xác định số lượng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) kí sinh sâu hại lạc 22 2.2.5 Phương pháp xác định tốc độ sinh trưởng theo Blackman (1981) 24 2.2.6 Phương pháp quan sát tế bào nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) tiêu cố định 24 2.2.7 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng,phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 24 2.2.8 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng độ ẩm đến sinh trưởng, phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 25 2.2.8 Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 25 2.2.9 Phương pháp thử nghiệm hoạt tính diệt sâu hại lạc nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 25 Chƣơng III: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 27 3.1 Kết điều tra thực địa Nghi Đức – TP Vinh – Nghệ An 27 3.2 Tần số gặp chủng nấm diệt sâu hại lạc 28 3.3 Đặc điểm chủng nấm 29 3.4 Những đặc điểm nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 33 3.5 Số lượng nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 35 3.6 Kết nghiên cứu yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng, phát triển nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 36 3.6.1 Ảnh hưởng nhiệt độ 36 3.6.2 Ảnh hưởng độ ẩm 38 3.6.3 Ảnh hưởng pH 41 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 55 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.7 Thử nghiệm khả diệt sâu hại lạc nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) 43 3.8 Xây dựng quy trình sản xuất sinh khối nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) diệt sâu 45 3.9 Những điều cần lưu ý sử dụng chế phẩm nấm Bạch cương (Beauveria bassiana) công tác diệt trừ sâu 47 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 A Kết luận: 48 B Kiến nghị: 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 50 PHỤ LỤC Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 56 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an PHỤ LỤC Một số hình ảnh trình thực đề tài Ảnh 1: Chủng C1 Ảnh 2: Dịch tiết đỏ nho (Nấm Beauveria bassiana) nấm Beauveria bassiana) Ảnh 3: Chủng C3 Ảnh 4: Chủng C4 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 57 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Ảnh 5: Chủng C5 Ảnh 6: Sợi nấm bào tử nấm Beauveria bassiana Ảnh 7: Sâu chết độ pha loãng 10-2 Ảnh 8: Sâu chết độ pha loãng 10-8 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 58 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn