1 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH - - VƢƠNG THỊ HIN Đặc điểm hình thái hình thành synnema nấm Isaria tenuipes (Peck.) Samson nhộng tằm dâu Bombyx mori Linnaeus KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ SƢ NGÀNH: NÔNG HỌC Vinh – 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH - - Đặc điểm hình thái hình thành synnema nấm Isaria tenuipes (Peck.) Samson nhộng t»m d©u Bombyx mori Linnaeus KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ SƢ NGÀNH: NÔNG HỌC Người thực : Vƣơng Thị Hiền Lớp : 48K2 – Nông học Người hướng dẫn : PGS.TS Trần Ngọc Lân Vinh – 2011 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn hoàn toàn trung thực, số liệu thu thập qua thí nghiệm thân tiến hành chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tơi xin cam đoan thí nghiệm để thu thập số liệu luận văn thân tơi tiến hành phịng thí nghiệm Cơng Nghệ Sinh học Nông nghiệp, khoa Nông Lâm Ngư, trường Đại Học Vinh với đồng ý hướng dẫn PGS TS Trần Ngọc Lân, giáo viên hướng dẫn kĩ thuật viên phụ trách phịng thí nghiệm Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Vinh, ngày 20 tháng năm 2011 Tác giả Vương Thị Hiền LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình học tập nghiên cứu đề tài luận văn tốt nghiệp ngành kĩ sư Nông học, nhận nhiều giúp đỡ quý báu từ phía thầy cơ, bạn bè, người thân Với lịng chân thành biết ơn sâu sắc nhất, xin gửi lời cảm ơn đặc biệt tới PGS TS Trần Ngọc Lân, Th.S Nguyễn Thị Thúy, KS Trần Văn Cảnh, người hướng dẫn từ bước đầu làm nghiên cứu khoa học, tận tâm nhiệt tình hướng dẫn tơi suốt thời gian làm đề tài luận văn tốt nghiệp Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô giáo tổ môn Bảo vệ thực vật, giáo viên phụ trách, kĩ thuật viên phịng thí nghiệm tạo điều kiện sở vật chất hướng dẫn, giúp đỡ góp ý kiến cho tơi suốt q trình làm đề tài Và xin chân thành cảm ơn người thân gia đình, bạn bè động viên khích lệ tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hoàn thành luận văn Vinh, ngày20 tháng năm 2011 Tác giả Vương Thị Hiền MỤC LỤC C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Trang Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Bảng chữ viết tắt vi Danh mục bảng số liệu vii Danh mục hình vẽ viii MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu 3 Đối tượng, phạm vi phương pháp nghiên cứu Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU NGHIÊN CỨU 1.1 Nấm ký sinh côn trùng 1.1.1 Khái niệm phân loại 1.1.2 Cơ chế lây nhiễm nấm ký sinh côn trùng 1.2 Lƣợc sử nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng 1.2.1 Lƣợc sử nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng giới 1.2.2 Lƣợc sử nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng Việt Nam (Báo 17 cáo NKSCT) 1.2.3 Lƣợc sử nghiên cứu nấm ký sinh côn trùng Nghệ An Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 19 23 2.1 Quy trình nghiên cứu 23 2.2 Thời gian địa điểm 24 2.3 Vật liệu đối tƣợng nghiên cứu 24 2.3.1 Vật chủ 24 2.3.2 Chủng nấm 24 2.3.3 Trang thiết bị, vật tƣ, hóa chất 24 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Phƣơng pháp nghiên cứu 25 2.4.1 Phương pháp nghiên cứu đa dạng lồi nấm ký sinh trùng 25 2.4.2 Phương pháp lây nhiễm nấm lên vật chủ 26 2.4.3 Thu thập xử lý số liệu 29 2.4 CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Sự đa hình Isaria tenuipes 3.2 Ảnh hƣởng môi trƣờng lỏng đến khả sinh trƣởng sợi nấm 3.3 3.3.1 30 30 32 Ảnh hƣởng phƣơng pháp lây nhiễm nấm Isaria tenuipes nhộng tằm dâu 33 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiễm đến tỷ lệ nhiếm nấm 33 nhộng 3.3.2 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiễm đến thời gian hình 34 thành synnema 3.3.3 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiễm đến sản lượng 35 synnema 3.4 Lựa chọn nồng độ bào tử cho việc lây nhiễm nấm nhộng 37 3.4.1 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến khả lây nhiễm 37 nấm nhộng 3.4.2 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến thời gian hình thành 39 synnema 3.4.3 3.5 3.5.1 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến sản lượng synnema 40 Ảnh hƣởng cƣờng độ ánh sáng đến khả hình thành synnema 42 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng đến thời gian hình thành 42 synnema 3.5.2 Ảnh hƣởng cƣờng độ chiếu sáng đến sản lƣợng synnema 44 3.6 Chu trình lây nhiễm nấm ký sinh côn trùng Isaria 48 tenuipes nhộng tằm Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.7 Quy trình sản xuất synnema Isaria tenuipes nhộng 48 tằm phƣơng pháp tiêm nhiễm KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 49 Kết luận 49 Kiến nghị 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 51 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nội dung cfu Bào tử CT Công thức CV% Độ biến thiên mẫu EPF I Entomology Pathogenic Fungi - Nấm ký sinh côn trùng isaria KBTTN KH Khu bảo tồn thiên nhiên Kiểu hình PDA Phương sai mẫu Giá trị trung bình Potato Dextrose Agar PDB Potato Dextrose Broth RH Ẩm độ SD Độ lệch chuẩn LSD0.05 M SDY Sapouraud Dextrose Peptone Yeast extract Agar VQG Vườn Quốc Gia YM Yeast extract, Malat extrac Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CẤC BẢNG SỐ LIỆU Bảng Bảng 1.1 Bảng 3.1 Tên bảng Trang Tổng quan phân loại nấm ký sinh côn trùng theo Sung et al 2007 14 Tần suất bắt gặp kiểu hình I tenuipes tự 30 nhiên (N=123) Bảng 3.2 Các kiểu hình Isaria tenuipes Bảng 3.3 Ảnh hưởng loại môi trường lỏng đến khả phát triển sợi nấm Bảng 3.4 43 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến tỷ lệ hình thành synnema Bảng 3.12 41 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến thời gian hình thành synnema Bảng 3.11 39 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến sản lượng synnema Bảng 3.10 38 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến thời gian tỷ lệ hình thành synnema Bảng 3.9 36 Tỷ lệ hình thành synnema nhộng phương pháp tiêm nhiễm Bảng 3.8 35 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiếm đến sản lượng synnema I tenuipes Bảng 3.7 34 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiễm đến thời gian hình thành synnema Bảng 3.6 32 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiễm đến tỷ lệ nhiễm nấm nhộng Bảng 3.5 31 44 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng đến sản lượng synnema Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 45 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 10 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ Nội dung Hình Trang Hình 1.1 Chu trình xâm nhiễm nấm ký sinh trùng 06 Hình 1.2 Cơ chế xâm nhiễm nấm ký sinh trùng 08 Hình 2.1 Sơ đồ mơ tả quy trình nghiên cứu hình thành synnema 21 Isaria tenuipes nhộng tằm Hình 3.1 Sự phát triển sợi nấm mơi trường lỏng khác Hình 3.2 Tỷ lệ lây nhiễm nấm nhộng từ hai phương pháp lây nhiễm Hình 3.3 34 Thời gian hình thành synnema nhộng hai phương pháp lây nhiễm Hình 3.4 33 35 Ảnh hưởng phương pháp lây nhiễm đến sản lượng synnema 36 Hình 3.4a Kích thước synnema 36 Hình 3.4b Kích thước synnema 36 Hình 3.5 Sự hình thành synnema từ hai phương pháp lây nhiễm 37 Hình 3.6 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến tỷ lệ nhiễm nấm 38 nhộng Hình 3.7 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến thời gian tỷ lệ 40 hình thành synnema Hình 3.8 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến sản lượng synnema 41 Hình 3.9 Tỷ lệ nhiễm nấm hình thành synnema nhộng tằm 42 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 51 Tuy nhiên, tỷ lệ nhộng hình thành synnema tiêm mức nồng độ nêu lại giảm dần theo nồng độ Ở mức nồng độ 104 cho hiệu cao nhất, đạt tối ưu 100% nhộng hình thành synnema, sau tỷ lệ hình thành synnema giảm dần Nhưng sai khác khơng có ý nghĩa mặt thống kê mức ý nghĩa 0.05 Như vậy, nồng độ 104 cho 100% nhộng hình thành synnema thời gian để thể hồn thành chu trình kéo dài, cịn mức nồng độ 105 106 cho tỷ lệ nhộng hình thành synnema không đạt tối đa 100% thời gian để synnema hồn thành chu trình lại ngắn nhiều Vì cần lựa chọn nồng độ thích hợp cho việc tiêm nhiễm để vừa xác định xác mức thời gian bao phủ hình thành synnema vừa mang lại hiệu kinh tế nhanh 3.4.3 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến sản lượng synnema Bảng 3.9 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến sản lượng synnema Nồng độ bào tử Chiều dài Đường kính Số synnema hình synnema (mm) synnema (mm) thành (synnema) 104 37.33 ± 1.53a 1.43 ± 0.058a 7.67 ± 0.57c 105 34.00 ± 1.00b 1.03 ± 0.15c 10.67 ± 1.53b 106 31.00 ± 1.73c 1.27 ± 0.058b 13.67 ± 0.58a Lsd0.05 2.902 0.1997 0.997 CV% 4.3 8.0 9.4 tiêm (cfu/m) Ghi chú: Các chữ giống ghi sau giá trị (M ± SD) nằm cột khơng có sai khác mặt ý nghĩa thống kê mức 0,05 M: Giá trị trung bình, SD: Độ lệch chuẩn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 52 Số synnema hình thành Đường kính synnema (mm) Chiều dài synnema (mm) 13.67 10^6 1.267 31 10.67 10^5 1.033 34 7.67 10^4 1.433 37.33 Hình 3.8 Ảnh hưởng nồng độ bào tử đến sản lượng synnema Nồng độ bào tử yếu tố đóng vai trị quan trọng phát triển kích thước lẫn hình thành synnema thể nhộng tằm Kết phân tích thực nghiệm bảng 3.9 cho thấy, chiều dài synnema đường kính synnema giảm dần theo độ pha lỗng nồng độ bào tử Ở mức 104 cho kết tốt nhất, kích thước chiều dài đạt từ 37.33 ± 1.53 mm đường kính đạt từ 1.43 ± 0.058 mm Tiếp đến mức nồng độ 105, chiều dài synnema dao động từ 34.00 ± 1.00 mm đường kính dao động từ 1.03 ± 0.153 mm Cho kết chiều dài đường kính synnema thấp mức nồng độ 106 với chiều dài synnema đạt từ 31.00 ± 1.73 mm đường kính đạt từ 1.27 ± 0.058 mm Từ cho thấy có sai khác mức nồng độ bào tử tiêm nhiễm vào thể nhộng tằm, chứng tỏ sai khác có ý nghĩa mặt thống kê mức ý nghĩa 0.05 Tuy nhiên, số synnema hình thành lại tăng dần theo mức độ pha loãng dịch nấm đưa vào thể nhộng Ỏ nồng độ 106 cfu/ml cho số lượng synnema hình thành nhiều dao động từ 13.67 ± 0.58 synnema, số lượng synnema thu tiêm mức nồng độ 104 đạt từ 7.67 ± 0.57 synnema Điều chứng tỏ có sai khác mức nồng độ khác (sai khác có ý nghĩa thống kê mức 0.05) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 53 Như vậy, để thu số synnema nhiều có chiều dài đường kính lớn cần có lựa chọn mức nồng độ phù hợp để lây nhiễm vấn đề cần nghiên cứu sâu Ảnh nhộng tiêm 104 Ảnh nhộng tiêm 105 Ảnh nhộng tiêm 106 Hình 3.9 Tỷ lệ nhiễm nấm hình thành synnema nhộng tằm nồng độ bào tử 3.5 Ảnh hƣởng cƣờng độ ánh sáng đến khả hình thành synnema 3.5.1 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng đến thời gian hình thành synnema Cường độ chiếu sáng tảng góp phần định cho hình thành synnema Hình thái, kích thước synnema khác đáng kể tùy thuộc vào cường độ chiếu sáng giai đoạn synnema Ngoài cường độ chiếu sáng cịn tác động tới hình thành sợi nấm, tỷ lệ mọc mầm tỷ lệ hình thành synnema thể nhộng tằm dâu Bảng 3.10 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến thời gian hình thành synnema Cường độ Số nhộng chiếu thí nghiệm sáng Thời gian nhộng chết (ngày) Thời gian hình thành sợi nấm (ngày) Thời gian mọc nấm (ngày) Thời gian tăng trưởng (ngày) 100 lux 30 3.67 ± 0.58 a 6.00 ± 0.00 b 7.67 ± 0.57 b 26.33 ± 1.53 a 300 lux 500 lux 30 30 3.00 ± 0.00 a 3.00 ± 0.00 a 4.33 ± 0.57 a 4.33 ± 0.58 a 5.33 ± 0.58 a 5.67 ± 0.57 a 24.33 ± 0.58 a 19.00 ± 1.00 b Lsd0.05 0.666 0.942 1.153 2.209 CV% 10.3 9.6 9.3 4.8 Ghi chú: Các chữ giống ghi sau giá trị (M ± SD) nằm cột khơng có sai khác mặt ý nghĩa thống kê mức 0,05 M: Giá trị trung bình, SD: Độ lệch chuẩn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 54 500Lux 4.33 5.67 300Lux 4.33 5.33 100Lux 3.67 19 24.33 26.33 7.67 10 15 20 25 30 35 40 45 50 Thời gian (ngày) Thời gian nhộng chết (ngày) Thời gian hình thành sợi nấm (ngày) Thời gian mọc nấm (ngày) Thời gian tăng trưởng (ngày) Hình 3.10 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến thời gian hình thành synnema Kết bảng 3.10 cho thấy, cường độ chiếu sáng giai đoạn đầu không ảnh hưởng tới thời gian làm nhộng chết, điều có nghĩa mức cường độ chiếu sáng khơng có sai khác mức ý nghĩa 0.05 (Lsd0.05: 0.666) Nhưng bắt đầu thời gian hình thành sợi nấm trở sau có sai khác mức cường độ chiếu sáng với Khi chiếu mức cường độ thấp 100 lux) thời gian để hồn thành chu trình sản xuất synnema kéo dài tất tiêu thời gian nhộng chết 6.00 ± 0.00 (ngày), thời gian mọc nấm 7.67 ± 0.57 (ngày), thời gian tăng trưởng 26.33 ± 1.53 (ngày) Còn mức cường độ lại 300 lux 500 lux khơng có sai khác giai đoạn hình thành sợi nấm mọc mầm (Lsd0.05: 0.942 Lsd0.05: 1.153) Tuy nhiên, tới giai đoạn tăng trưởng mức 500 lux cần 19.00 ± 1.00 (ngày) hoàn thành giai đoạn mức 300 lux để hoàn thành thời gian tăng trưởng cần 24.33 ± 0.58 (ngày) Từ thấy có sai khác chiếu sáng mức cường độ khác nhau, chứng tỏ sai khác có ý nghĩa mặt thống kê mức ý nghĩa 0.05 (Lsd0.05: 2.209) 3.5.2 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến tỷ lệ hình thành synnema Mặt khác, số nhộng hình thành synnema chiếu sáng mức cường độ có khác rõ rệt Ở cường độ 500 lux cho số lượng nhộng hình thành synnema thấp đạt trung bình từ 76.67 ± 6.67 %, tiếp đến mức 100 lux Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 55 chiếu sáng cường độ thấp số nhộng hình thành synnema lại tương đối cao 91.11 ± 1.92 % Đạt số lượng cao 94.44 ± 1.92 % mức 300 lux (bảng 3.11) Như vậy, chiếu sáng cường độ thấp kéo dài tổng thời gian hồn thành chu trình phát triển synnema tỷ lệ nhộng hình thành synnema cao Còn chiếu sáng cường độ cao làm giảm thời gian synnema trưởng thành số nhộng hình thành synnema lại thấp Vì vậy, cần chọn lựa mức chiếu sáng với cường độ phù hợp để đảm hiệu thời gian lẫn số nhộng hình thành synnema Bảng 3.11 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến tỷ lệ hình thành synnema Cường độ Số nhộng thí chiếu sáng nghiệm 100 lux 30 43.67 ± 0.58 a 91.11 ± 1.92 a 300 lux 30 37.00 ± 1.00 b 94.44 ± 1.92 a 500 lux 30 32.00 ± 1.00 c 76.67 ± 6.67 b Fpr < 001 0.004 Lsd 0.05 1.762 8.31 CV% 2.3 4.8 Tổng thời gian (ngày) Số nhộng hình thành synnema (%) Ghi chú: Các chữ giống ghi sau giá trị (M ± SD) nằm cột khơng có sai khác mặt ý nghĩa thống kê mức 0,05 M: Giá trị trung bình, SD: Độ lệch chuẩn 3.5.2 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến sản lượng synnema Kích thước số synnema hình thành chiếu sáng nhiều mức cường độ ánh sáng khác Synnema xuất phát triển phụ thuộc vào mức độ cao hay thấp Dựa vào kết thí nghiệm thu bảng 3.11 cho thấy chiếu sáng mức 300Lux thu kết tốt hầu hết mặt, bật chiều dài synnema đạt giá trị trung bình từ 67.33 ± 2.52 mm/synnema, số thể hình thành đạt từ 14.00 ± 1.00 synnema/con, hiệu kinh tế đạt từ 1.527 ± 0.142 g/con Với mức cường độ 500 lux mức chiếu sáng cao làm hạn chế phát triển chiều dài, đường kính synnema đồng thời làm giảm tỷ lệ hình Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 56 thành synnema dẫn tới hiệu kinh tế mang lại thấp đạt khoảng 0.607 ± 0.0418 g/con Ngược lại, chiếu sáng cường độ thấp với 100 lux chiều dài, đường kính, số synnema hình thành sản lượng thu cao mức 500 lux Nhưng đường kính synnema 1.430 ± 0.082 mm lại dày so với chiếu sáng cường độ 300 lux tiêu khác chiều dài số synnema nhỏ nhiều Bảng 3.12 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng đến sản lượng synnema Cường độ chiếu sáng Chiều dài synnema (mm) Đường kính synnema (mm) Số synnema hình thành (synnema) Sản lượng synnema (g/con) 1.430 ± 0.082 a 12.67 ± 2.08 a 1.121 ± 0.164 a 300 lux 67.33 ± 2.52 b 1.303 ± 0.021 b 500 lux 46.00 ± 1.00 c 0.8667 ± 2.52 c 14.00 ± 1.00 a 8.333 ± 0.58 b 1.527 ± 0.142 b 0.607 ± 0.042 c 100 lux 52.67 ± 2.52 a 4.264 3.9 2.746 0.2548 CV% 11.8 11.8 Ghi chú: Các chữ giống ghi sau giá trị (M ± SD) nằm cột LSD0.05 0.1186 4.9 khơng có sai khác mặt ý nghĩa thống kê mức 0,05 M: Giá trị trung bình, SD: Độ lệch chuẩn Chiều dài synnema (mm) 10 20 30 500Lux 40 50 60 67.33 300Lux 1.303 1.43 52.67 0.2 0.4 0.6 0.8 80 0.867 46 100Lux 70 1.2 1.4 Đường kính synnema (mm) Đường kính synnema Chiều dài synnema Hình 3.11a Ảnh hưởng cường độ ánh sáng đến kích thước synnema Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 1.6 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 16 1.8 14 1.6 12 1.4 1.2 10 0.8 0.6 0.4 0.2 0 100Lux 300Lux Số synnema hình thành Trọng lượng synnema (g/con) Số synnema (synnema/con) 57 500Lux Trọng lượng synnema Hình 3.11b Ảnh hưởng cường độ ánh sáng đến sản lượng synnema Như vậy, chiếu sáng mức cường độ 100 lux, 300 lux, 500 lux cho thấy sai khác rõ ràng mức tất tiêu từ chiều dài, đường kính synnema tới số synnema hình thành sản lượng thu Chiếu sáng 100 lux Chiếu sáng 300 lux Chiếu sáng 500 lux Hình 3.12 Ảnh hưởng cường độ chiếu sáng đến hình thành synnema Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 58 3.6 Chu trình lây nhiễm nấm ký sinh côn trùng Isaria tenuipes nhộng tằm Kết nghiên cứu tối ưu chu trình hình thành synnema Isaria tenuipes nhộng tằm: Thời gian gây chết 3.00 ± 0.00 ngày Thời gian hình thành sợi nấm 4.33 ± 0.58 ngày Sợi nấm bao phủ nhộng 5.33 ± 0.577 ngày Thời gian tăng trưởng 24.33 ± 0.58 ngày Thời gian mọc mầm 5.33 ± 0.58 ngày Hình 3.13 Chu trình hình thành synnema Isaria tenuipes (Peck.) Samson nhộng tằm dâu Bombyx mori Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 3.7 Quy trình sản xuất synnema Isaria tenuipes nhộng tằm phƣơng pháp tiêm nhiễm Thứ tự Nội dung Bước - Nhân giống môi trường lỏng PDB - Nuôi máy lắc 25 ± 10C , RH= 75-80% điều Chuẩn bị giống kiện tối - ngày với 150 v/p - Đếm pha loãng để đạt nồng độ 106bt - Nhộng tằm tuổi cuối Bước Chuẩn bị nhộng - Ngâm khoảng phút ethanol 70% để khử trùng bề mặt nhộng - Lấy dùng lau sạch-khô bề mặt nhộng Cho vào hộp nhựa khử trùng cồn 700 - Bơm tiêm tiệt trùng, bình tam giác, nước cất tiệt trùng Bước Chuẩn bị tiêm - Pha loãng bào tử - Nồng độ bào tử tiêm vào là: 106 cfu/ml - Liều lượng tiêm: 100µl - Nuôi 25 ± 10C, RH= 70-75%, điều kiện tối sợi nấm phủ kín bề mặt (3-5 ngày) tiếp tục Bước Nuôi dưỡng nuôi khoảng ngày - Chuyển sang nuôi điều kiện 20 ± 10C, RH= 90-95% , chu kỳ 16 sáng/8 giờ; cường độ chiếu sáng 300 lux khoảng 30 ngày Bước Thu hoạch - Thu hoạch tất thời điểm 38 - 40 ngày - Cân sản lượng synnema tươi - Sấy khô cân sản lượng synnema khô Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Nghiên cứu “Đặc điểm hình thái hình thành synnema nấm Isaria tenuipes (Peck.) Samson nhộng tằm dâu Bombyx mori Linnaeus” thời gian từ tháng 1/2011 đến tháng 7/2011, thu số kết sau: (1) PDB môi trường phù hợp cho việc nhân giống mơi trường lỏng lồi Isaria tenuipes (Peck.) Samson (2) Sử dụng phương pháp lây nhiễm hình thức tiêm nhiễm nấm lên thể nhộng tằm có khả mang lại hiệu cao so với phương pháp phun nhiễm nhộng: - Có thể đạt hiệu nhiễm nấm từ 87 % trở lên - Thời gian nấm bao phủ bên nhộng thời gian để synnema hình thành ngắn từ 5.33 ± 1.528 (ngày) nấm bao phủ hết nhộng khoảng 37.33 ± 1.528 (ngày) synnema trưởng thành - Số synnema sản lượng synnema thu lớn, synnema đạt từ 14.67 ± 2.082 (synnema) mang lại sản lượng synnema thu từ 0.920 ± 0.056 (g /con) (3) Mức nồng độ 106 (cfu/ml) mức phù hợp cho việc tiêm nhiễm nấm vào thể nhộng để synnema hình thành: - Tỷ lệ nhộng nhiễm nấm đạt từ 68.8% trở lên tùy thuộc vào số lượng nhộng thí nghiệm - Chỉ sau 5.33 ± 0.577 (ngày) nấm bao phủ bên nhộng sau 40.33 ± 1.528 (ngày) synnema trưởng thành - Chiều dài dao động từ 31.00 ± 1.732 mm đường kính đạt từ 1.267 ± 0.058 mm - Số synnema hình thành đạt tỷ lệ trung bình từ 13.67 ± 0.577 g/con (4) Cường độ chiếu sáng có ảnh hưởng lớn tới hình thành synnema sinh trưởng, phát triển synnema Tuy nhiên qua việc tiến hành thí nghiệm tìm cường độ ánh sáng 300 Lux phù hợp cho việc chiếu sáng để tăng khả hình thành synnema: Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 61 - Tổng thời gian hoàn synnema trưởng thành dao động từ 37.00 ± 1.00 (ngày) - Số nhộng hình thành synnema đạt từ 94.44 ± 1.92 (synnema) tùy thuộc vào lượng nhộng đem thí nghiệm - Kích thước synnema đo cao tiêu chiều dài đạt từ 67.33 ± 2.52 (mm), đường kính 1.303 ± 0.021 (mm) - Số synnema thu nhiều, dao động khoảng 14.00 ± 1.00 (synnema) nên sản lượng thu cao 1.527 ± 0.142 (g/con) Kiến nghị (1) Kết nghiên cứu bước đầu cho thấy sử dụng phương pháp tiêm nhiễm nấm với nồng độ bào tử, cường độ chiếu sáng thích hợp vào thể nhộng tằm cho tỷ lệ hình thành synnema tương đối cao Cần tiếp tục nghiên cứu tiêu khác như: nhiệt độ, độ ẩm,… để xây dựng quy trình sản xuất synnema thể nhộng tằm dâu Isaria tenuipes (2) Xác định thành phần dinh dưỡng, hoạt chất sinh học tác dụng chất Isaria tenuipes nhằm ứng dụng vào y - dược làm thực phẩm chức phục vụ sống người Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 62 TÀI LIỆU THAM KHẢO TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT [1] Đỗ Tất Lợi, 1999 Cây thuốc vị thuốc Việt Nam, Nxb Y học, Hà Nội [2] Nguyễn Bá Hoạt, Nguyễn Tập, Ngô Quốc Luật cộng 2000 Đánh giá trạng nguồn dược liệu Việt Nam, Viện Dược liệu 1987-2000 [3] Nguyễn Lân Dũng cs., 1969 Tuyển tập Vi sinh vật học Tập I 1969, Tập II., 1972, Nxb KH&KT, Hà Nội [4] Nguyễn Lân Dũng, 1981 Sản xuất sử dụng chế phẩm vi sinh vật diệt côn trùng, Nxb Khoa học Kỹ thuật [5] Nguyễn Lân Dũng, Dương Văn Hợp, Phạm Thế Hải, 2005 Thần dược Đông Trùng Hạ Thảo http://vietsciences.free.fr/timhieu/khoahoc/ykhoa/thanduoc-dongtrunghathao.htm [6] Phạm Thị Thuỳ, Trần Văn Huy, Nguyễn Duy Mạnh 2005 Nghiên cứu hồn thiện cơng nghệ sản xuất thuốc trừ sâu vi nấm Beauveria Metarhizium để phòng trừ sâu hại đậu tương đậu xanh Hà Tĩnh năm 2003 Hội nghị Cơn trùng học tồn quốc lần thứ 5, Hà Nội 11-12/4/2005, Nxb Nông nghiệp [7] Trần Ngọc Lân, Nguyễn Tài Toàn, Nguyễn Thị Hiếu, Nguyễn Thị Thủy, Trương Xuân Sinh, Nguyễn Thị Vui, Hà Thị Thanh Hải, Đào Thị Hằng, Cao Thị Thu Dung, Somsak Sivichai, Patcharaporn Wongsa, Suchada Mongkolsamrit, Wiwantanee Tongsridam, 2008 Đa dạng sinh học nấm ký sinh côn trùng côn trùng bị nấm ký sinh Vườn Quốc gia Pù Mát Báo cáo Khoa học Hội nghị Cơn trùng học tồn quốc lần thứ 6, Hà Nội, ngày 9-10 tháng năm 2008, Nxb Nông Nghiệp, Hà Nội, 957-963 [8] Trần Ngọc Lân cs., 2008 Đa dạng sinh học nấm ký sinh côn trùng Vườn Quốc gia Pù Mát đánh giá khả ký sinh số loài nấm số loài sâu hại trồng, Báo cáo đề tài cấp Bộ Giáo dục Đào tạo (Mã số B2007-27-25), 2008, 120 trang [9] Trịnh Tam Kiệt, 1981, Nấm lớn Việt Nam, Nxb Khoa học Kỹ thuật, 1981 [10] Trịnh Tam Kiệt, 2003, Nghiên cứu chất có hoạt tính sinh học Nấm Việt Nam, Dự án hợp tác với CHLB Đức VIE 97, 2002-2003 Dự án Nghị định thư [11] Trịnh Tam Kiệt, Trịnh Tam Bảo, 2007, Thành phần loài nấm dược liệu Việt Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 63 Nam đặc điểm sinh học số loài quan trọng, Những vấn đề nghiên cứu Khoa học Sự sống, Nxb KH&KT, 2007 [12] Võ Thị Thu Oanh, 2003 Nghiên cứu đặc tính sinh học đánh giá tính độc chủng nấm Beauveria Metarhizium ký sinh côn trùng gây hại, 2003 [13] Phạm Văn Lầm, 2000 Nấm gây bệnh cho trùng, Tạp chí Bảo Vệ Thực Vật, 2000, 169(1): 35 – 37 TÀI LIỆU NƢỚC NGOÀI [14] Choi J H., 1999 Anti-aging effects of silkworm Tongchunghacho (Paecilomyces japonica) in brain In: Proceeding of the 1st International Symposium on Cordyceps, 1999 Nov 9., Suwon, Korea Seoul: The Korean Society of Sericulture Science, 1999 p 45-63 [15] Evans, H.C., 1982, Entomogenous fungi in tropical forest ecosystems: an appraisal Ecological Entomology, 1982, 7: 47-60 [16] Gi-Ho Sung, N L Hywel-Jones, Jae-Mo Sung, Jennifer Luangsa-ard J., Bhushan Shrestha, Joseph W Spatafora., 2007 Phylogenetic classification of Cordyceps and the Clavicipitaceous fungi Studies in Mycology, 2007, 57(1): 5-59 [17] Hywel-Jones N L., 1994 Cordyceps khaoyaiensis and C pseudomilitaris, Two New Pathogens of Lepidopteron Larvae from Thailand Mycol Res., 1994, 98: 939-942 [18] Janet Jennifer Luangsaard, Kanoksri Tasanathai, Suchada Mongkolsamrit, Somsak Sivachai, Nigel HywelJones 2006, Workshop [19] Isaka M et al., 2001 Bioxanthracenes from the insect pathogenic fungus Cordyceps pseudomilitaris BCC 1620 J Antibiot, 2001, 54: 36-43 [20] Isaka M., Tanticharoen M., Thebtaranonth Y., 2000 Cordyanhydrides A and B Two Unique Anhydrides from the Insect Pathogenic Fungus Cordyceps pseudomilitaris BCC 1620 Tetrahedron Lett., 2000, 41: 1657-1660 [21] Kiho T., Tabata H., Ukai S., Hara C A Minor, 1986 Protein-Containing Galactomannan from a Sodium Carbonate Extract of Cordyceps sinensis Carbohydr Res., 1986, 156: 189-198 [22] Kikuchi H., Miyagawa Y., Nakamura K., Sahashi Y., Inatomi S., Oshima Y., Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 64 2004 A Novel Carbon Skeletal Trichothecane, Tenuipesine A, Isolated from an Entomopathogenic Fungus Paecilomyces tenuipes Org Lett., 2004, 6: 45314533 [23] Kikuchi H., Miyagawa Y., Sahashi Y., Inatomi S., Haganuma A., Nakahata N., Oshima Y., 2004 Novel Spirocyclic Trichothecanes, Spirotenuipesine A and B, Isolated from Entomopathogenic Fungus, Paecilomyces tenuipes J Org Chem., 2004 69: 352-356 [24] Kim S W., Xu C P., Hwang H J., Choi J W., Kim C W., Yun J W., 2003 Production and Characterization ofExopolysaccharides from an Entomopathogenic Fungus Cordyceps militaris NG3 Biotechnol Prog., 2003, 19(2), 428 - 435 [25] Kittakoop P., Punya J., Kongsaeree P., Lertwerawat Y., Jintasirikul A., Tanticharoen M., Thebtaranonth Y., 1999 Bioactive Naphthoquinones from Cordyceps unilateralis Phytochemistry, 1999, 52: 453-457 [26] Kobayashi Y., 1941 The genus Cordyceps and its allies Sci Rep Tokyo Bunrika Daigaku Sect B, 1941, 5: 53-260 [27] Masahiko I., Prasat K et al., 2005 Bioactive Substances from Insect Pathogenic Fungi Acc Chem Res., 2005, 38: 813-823 [28] Panida Unagul, Patcharaporn Wongsa, Prasat Kittakoop, Sutichai Intamas, Prasert Srikitikulchai, Marakot Tanticharoen, 2005 Production of red pigments by the insect pathogenic fungus Cordyceps unilateralis BBC 1869 Industrial Microbiology and Biotechnology, 2005, 32(4): 135-140 [29] Patcharaporn Wongsa, Kanoksri Tasanatai, Patricia Watts, Nigel L Hywel – Jones, 2005 Isolation and in vitro cultivation of the insect pathogenic fungus Cordyceps unilateralis 2005, 5pp [30] Petch T., 1936 Cordyceps militaris and Isaria farinosa Trans Br Mycol Soc., 1936, 20:216-224 [31] Spatafora J W., Sung G-H, Sung J-M, Hywel-Jones N L., White J F Jr., 2007 Phylogenetic evidence for an animal pathogen origin for ergot and the grass endophytes Molecular Ecology, 2007, 16: 1701-1711 [32] Sung - Hom Yeon, Jun - Ran Kim, young - Joon Ahn, 2006 Comparison of growth - inhibiting activities of Cordyceps militaris and Paecilomyces japonica Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn