Lê văn đạt xác định đồng thời một số chất có tác dụng chống nắng trong mẫu mỹ phẩm dạng kem bằng phương pháp hplc dad luận văn thạc sĩ dược học hà nội 2023

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ VĂN ĐẠT XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ CHẤT CÓ TÁC DỤNG CHỐNG NẮNG TRONG MẪU MỸ PHẨM DẠNG KEM BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC- DAD LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI 2023 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI LÊ VĂN ĐẠT XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ CHẤT CÓ TÁC DỤNG CHỐNG NẮNG TRONG MẪU MỸ PHẨM DẠNG KEM BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC- DAD LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học: TS Lê Quang Thảo TS Tống Thị Thanh Vượng HÀ NỘI 2023 LỜI CẢM ƠN Tôi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Lê Quang Thảo - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương, TS Tống Thị Thanh Vượng - Trường Đại học Dược Hà Nội, hai người thầy tận tình hướng dẫn, truyền đạt kinh nghiệm quý báu quan tâm giúp đỡ tơi suốt q trình thực hồn thành luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn thầy cơng tác khoa Hóa Phân tích Kiểm nghiệm thuốc – Trường Đại học Dược Hà Nội dạy giúp đỡ thời gian học tập trường Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương tạo điều kiện cho học tập thực luận văn Tôi xin gửi lời cảm ơn tới đồng nghiệp khoa Kiểm nghiệm Dược lý, khoa Kiểm nghiệm Mỹ phẩm, phòng Vật tư trang thiết bị - Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương tạo điều kiện giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới gia đình, người thân bạn bè giúp đỡ động viên để tơi có đủ nghị lực, tâm hoàn thành luận văn Một lần nữa, xin chân thành cảm ơn Quý Thầy, Cơ, Cơ quan, Gia đình Bạn bè hỗ trợ động viên, giúp tơi hồn thành luận văn Hà Nội, ngày 30 tháng 03 năm 2023 Học viên: Lê Văn Đạt MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ .1 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ MỸ PHẨM CHỐNG NẮNG .3 1.1.1 Các loại kem chống nắng .3 1.1.2 Bản chất chất chống nắng 1.1.3 Tác hại tia UV da vai trò CCN hóa học 1.1.4 Tác động CCN đến môi trường sức khỏe người 1.2 TỔNG QUAN VỀ CÁC NHÓM CHẤT NGHIÊN CỨU 1.2.1 Công thức cấu tạo tính chất lý hóa 1.2.2 Giới hạn cho phép số chất chống nắng mỹ phẩm 12 1.2.3 Một số phương pháp phân tích CCN mỹ phẩm 13 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 2.1 NGUYÊN LIỆU, TRANG THIẾT BỊ NGHIÊN CỨU 19 2.1.1 Chất chuẩn, dung mơi, hóa chất 19 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ phân tích 20 2.2 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 20 2.3 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .21 2.3.1 Xây dựng phương pháp phân tích 21 2.3.2 Thẩm định phương pháp phân tích 21 2.3.4 Ứng dụng phương pháp xây dựng để xác định chất chống nắng số mẫu mỹ phẩm dạng kem có mặt thị trường .24 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 3.1 KẾT QUẢ XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH .25 3.1.1 Khảo sát điều kiện sắc ký 25 3.1.2 Khảo sát quy trình xử lý mẫu .30 3.1.3 Kết xây dựng phương pháp HPLC định tính, định lượng đồng thời 10 CCN mẫu mỹ phẩm dạng kem 33 3.2 KẾT QUẢ THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 36 3.2.1 Tính thích hợp hệ thống .36 3.2.3 Giới hạn phát hiện, giới hạn định lượng 42 3.2.4 Xây dựng đường chuẩn khoảng tuyến tính .44 3.2.5 Độ đúng, độ lặp lại .47 3.2.6 Độ xác 49 3.2.7 Độ ổn định phương pháp .50 3.3 KẾT QUẢ XÁC ĐỊNH HÀM LƯỢNG CCN TRÊN CÁC MẪU MỸ PHẨM TRÊN THỊ TRƯỜNG 55 CHƯƠNG BÀN LUẬN 58 4.1 VỀ VIỆC LỰA CHỌN 10 CCN NGHIÊN CỨU TRONG ĐỀ TÀI .58 4.2 PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH .58 4.3 KẾT QUẢ KIỂM TRA CÁC MẪU MỸ PHẨM TRÊN THỊ TRƯỜNG 60 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .62 KẾT LUẬN .62 KIẾN NGHỊ 62 DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Giải thích ACN Acetonitril ATA Anisotriazin ASEAN Association of South East Asia’s Nations (Hiệp hội quốc gia Đông Nam Á) BDM Butyl methoxydibenzoylmethan BZP-1 Benzophenon-1 BZP-2 Benzophenon-2 BZP-3 Benzophenon-3 BZP-4 Benzophenon-4 BZP-5 Benzophenon-5 BZP-6 Benzophenon-6 BZP-8 Benzophenon-8 BS Benzyl salicylat CBM Camphor benzalkonium methosulfat CCN Chất chống nắng CoA Certificate of Analysis (Giấy chứng nhận phân tích) CTCT Công thức cấu tạo CTPT Công thức phân tử DAD Diode array detector (Detector mảng diod) DBT Diethylhexyl butamido triazon DHHB Diethylamino hydroxybenzoyl hexyl benzoat DTS Drometrizol trisiloxan EDP Ethylhexyl dimethyl PABA EHS Ethylhexyl salicylat EMC Ethylhexyl methoxycinnamat EMT Bis-ethylhexyloxyphenol methoxyphenyl triazin ET Ethylhexyl triazon EtOH Ethanol FSH Follicle-stimulating hormon (Hormon kích thích tạo nang trứng) GS-MS Gas chromatography – Mass spectrometry (Sắc ký khí khối phổ) HH Hỗn hợp HMS Homosalat HPLC High performance liquid chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) HPTLC High performance Thin layer chromatography (Sắc ký lớp mỏng hiệu cao) HQC High quality control (Mẫu kiểm tra nồng độ cao) IMC Isoamyl p-methoxycinnamat IUPAC International Union of Pure and Applied Chemistry (Liên minh Quốc tế Hóa học Hóa học ứng dụng) KLPT Khối lượng phân tử KTT Khoảng tuyến tính Liquid chromatography – Tandem mass spectrometry LC-MS/MS (Sắc ký lỏng khối phổ hai lần) LH Luteinizing Hormon (Hormon tạo hoàng thể) LOD Limit of detection (Giới hạn phát hiện) LOQ Limit of quantitation (Giới hạn định lượng) MAN Menthyl anthranilat MBC 4-Methylbenzyliden camphor MBP Methylen bis-benzotriazolyl tetramethylbutylphenol MCF-7 Michigan Cancer Foundation-7 (dòng tế bào ung thư vú) MeOH Methanol MQC Medium quality control (Mẫu kiểm tra nồng độ trung bình) ODP Octyl dimethyl PABA OMC Octyl methoxycinnamat OS Octyl salicylat OT Octyl triazon OTC Octocrylen PABA Para-aminobenzoic acid PBSA Phenylbenzimidazol sulfonic acid PLE Pressurized liquid extraction (Chiết áp suất cao) PMDSA Phenylbenzimidazol sulfonic acid PP Phương pháp PT Phương trình QC Quality control (Mẫu kiểm tra) RSD Relative standard deviation (Độ lệch chuẩn tương đối) SKĐ Sắc ký đồ SSB Sulisobenzon TB Trung bình TDSA Terephtalyliden dicamphor sulfonic acid THF Tetrahydrofuran TLTK Tài liệu tham khảo TDO Titanium dioxid United state – Food and Drug administration (Cục Quản lý Thực USFDA phẩm Dược phẩm Hoa Kỳ) UV Ultraviolet (tử ngoại) UV-VIS Ultraviolet-visible (tử ngoại – khả kiến) ZO Kẽm oxyd v/v Volume/Volume (thể tích/thể tích) DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Giới hạn cho phép 10 CCN mỹ phẩm 13 Bảng 1.2 Tóm tắt số phương pháp phân tích CCN hữu 13 Bảng 1.3 Quy trình phân tích CCN mỹ phẩm phương pháp HPLC 17 Bảng 2.1 Thông tin số chất chuẩn……………………………………………….19 Bảng 2.2 Công thức mẫu placebo ……………………………………………………20 Bảng 3.1 Chương trình gradient 27 Bảng 3.2 Diện tích pic CCN chiết dung mơi MeOH hỗn hợp dung môi MeOH : Dung dịch đệm natri acetat pH 3,85 (80:20)……………………32 Bảng 3.3 Chuẩn bị dãy dung dịch chuẩn 10 CCN 34 Bảng 3.4 Kết tính thích hợp hệ thống 37 Bảng 3.5 Kết độ đặc hiệu phương pháp 39 Bảng 3.6 LOD, LOQ CCN dung dịch chuẩn hốn hợp 42 Bảng 3.7 Giá trị LOD LOQ phương pháp 44 Bảng 3.8 Nồng độ dãy đường chuẩn CCN 45 Bảng 3.9 Kết khảo sát độ đúng, độ lặp lại .48 Bảng 3.10 Phương trình hồi quy tuyến tính sử dụng tính kết độ xác trung gian ……………………………………………………………………………49 Bảng 3.11 Kết khảo sát độ xác phương pháp 50 Bảng 3.12 Độ ổn định dung dịch chuẩn hỗn hợp gốc 51 Bảng 3.13 Độ ổn định dung dịch mẫu tự tạo 52 Bảng 3.14 Ảnh hưởng thay đổi nhiệt độ cột đến tính thích hợp hệ thống 53 Bảng 3.15 Ảnh hưởng thay đổi nhiệt độ cột đến độ thu hồi mẫu tự tạo 54 Bảng 3.16 Kết phân tích CCN số mẫu mỹ phẩm 56 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Cơng thức cấu tạo Benzophenon-4 Hình 1.2 Cơng thức cấu tạo Benzophenon-3 Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo 4-Methylbenzyliden camphor .8 Hình 1.4 Cơng thức cấu tạo Octocrylen Hình 1.5 Cơng thức cấu tạo Menthyl anthranilat .9 Hình 1.6 Cơng thức cấu tạo Octyl dimethyl PABA 10 Hình 1.7 Công thức cấu tạo Butyl methoxydibenzoylmethan .10 Hình 1.8 Cơng thức cấu tạo Octyl methoxycinnamat 11 Hình 1.9 Cơng thức cấu tạo Octyl salicylat 11 Hình 1.10 Cơng thức cấu tạo Homosalat .12 Hình 3.1 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng cột Phenomenex C6 Phenyl (250 x 4,6 mm; 5µm)……………………… ……………………….……… 25 Hình 3.2 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng cột Thermo betasil C18 (125 x mm, µm), gradient dung mơi 26 Hình 3.3 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng cột YMC Pack Pro C18 (150 mm x 4,6 mm; µm), gradient dung môi 26 Hình 3.4 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng cột Agilent Poroshell 120 C18 (100 x 4,6 mm; 2,7 µm), gradient dung mơi 26 Hình 3.5 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng pha động MeOH : Dung dịch đệm natri acetat pH 3,85 (70:30)………………………… ………………… 28 Hình 3.6 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng chương trình gradient 28 Hình 3.7 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng gradient dung mơi với tốc độ dịng 0,5 ml/phút…………………………………………………………… 29 Hình 3.8 SKĐ mẫu chuẩn hỗn hợp 10 CCN sử dụng gradient dung mơi với tốc độ dịng 0,8 ml/phút…………………………………… ……………………….29 Hình 3.9 SKĐ mẫu tự tạo sử dụng dung mơi MeOH 32 Hình 3.10 SKĐ mẫu tự tạo sử dụng hỗn hợp dung mơi MeOH 32 Hình 3.11 SKĐ mẫu tự tạo sử dụng hỗn hợp dung môi (MeOH : Dung dịch đệm natri acetat pH 3,85) 33 SKĐ độ xác trung gian – Chuẩn 10 Data file: Sample name: Sample amount: Instrument: D:\Data\DE TAI CCN/DCXTG/C10.D Injection date: Acq method: Analysis method: 0.000 HPLC Agilent 9/1/2021 CCN5.M CCN5.M Sample type: Location: Injection: Injection volume: 4:50:00 PM Sample 10 of 20.000 DADI Al Sig=31D.4 Ref-off Time [min] Signal: Compound Name BENZOPHENONE-4 BENZOPHENONE-3 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE OCTYL DIMETHYL PABA BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE OCTYL METHOXYCINNAMATE OCTYL SALICYLATE HOMOSALATE DAD1 A, Sig=310,4 Ref-off RT [min] Area 3.476 940.396 5.174 552.1 18 5.605 39.671 7.709 188.884 Symm 0.94 0.91 0.95 Plates Resolution 25849 56307 19.60 51633 4.65 55479 18.37 8.101 29.869 10.642 1040.424 1 023 1020.303 1 644 1267.966 12.379 1251.520 0.95 0.96 0.98 0.96 1.06 54208 44388 42918 41483 38856 2.91 14.93 84 2.82 3.07 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 12.920 1572.900 0.96 39345 2.12 1.0 13.696 278.652 14.815 1965.739 15.974 1645.332 0.97 1.01 1.01 37407 34365 33590 2.86 3.72 3.48 1.0 1.0 1.0 PL 47 Tail Factor 0.9 1.0 1.1 1.0 SKĐ độ xác trung gian - Tự tạo 1.2 Data file: Sample name: Sample amount: Instrument: D:\Data\DE TAI CCN/DCXTG/TUTAO 1.2.D Injection date: Acq method: Analysis method: 9/1/2021 6:08.18 PM CCN5.M CCN5.M 0.000 HPLC Agilent Sample type: Location: Injection: Injection volume: Sample 13 20.000 DADI Al Sig=31D.4 Ref-off 22 Time [min] Signal: DAD1 A, Sig=310,4 Ref-off Compound Name BENZOPHENONE-4 RT [min] 3.488 Area 9.015 Symm 1.03 Plates 30199 BENZOPHENONE-3 5.164 6.673 1.03 49160 19.38 0.9 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 7.684 12.141 0.93 54959 22.53 1.0 OCTOCRYLEN 10.591 9.622 1.03 47570 17.92 1.1 MENTHYL ANTHRANILATE 10.966 9.614 0.98 44255 1.87 1.0 OCTYL DIMETHYL PABA 1 583 12.673 0.93 40787 2.83 1.1 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE OCTYL METHOXYCINNAMATE OCTYL SALICYLATE 12.289 1.693 1.00 40108 2.98 1.0 12.836 15.626 0.97 38829 2.17 1.0 14.704 19.312 1.00 34373 6.48 1.0 HOMOSALATE 15.847 15.741 0.99 32559 3.43 1.1 PL 48 Resolution Tail Factor 1.1 SKĐ độ xác trung gian – Tự tạo 3.4 Data file: Sample name: Sample amount: Instrument: Injection date: Acq method: Analysis method: D:\Data\DE TAI CCN/DCXTG/TUTAO 3.4.D 0.000 HPLC Agilent Sample type: Location: Injection: Injection volume: 9/2/2021 12:13:49 AM CCN5.M CCN5.M Sample 27 of 20.000 DADI Al Sig=31D.4 Ref-off Time [min] Signal: DAD1 A, Sig=310,4 Ref-off Compound Name BENZOPHENONE-4 BENZOPHENONE-3 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE OCTYL DIMETHYL PABA BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE OCTYL METHOXYCINNAMATE OCTYL SALICYLATE HOMOSALATE RT [min] 3.475 5.160 5.585 7.664 Area Symm 942.633 1.29 549.843 0.95 39.687 0.92 1181.260 0.96 Plates Resolution Tail Factor 23832 0.8 56137 19.09 1.1 53815 4.65 1.1 55879 18.45 1.0 8.035 10.549 10.920 1.533 12.240 29.753 1032.240 1032.706 1260.381 1265.930 0.97 0.97 1.00 0.97 1.07 53361 44949 43035 41814 39466 2.77 14.90 1.82 2.82 3.00 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 12.776 13.551 14.642 15.782 1561.167 281.657 1978.273 1654.097 0.97 0.97 1.02 1.03 39354 37623 34722 34338 2.13 2.89 3.68 3.49 1.0 1.0 1.0 1.0 PL 49 SKĐ độ ổn định dung dịch chuẩn – Chuẩn pha Data file: D:\Data\DE TAI CCN/DO ON DINH DD/MOI PHA/CHUAN 1.D Sample name: Sample amount: Instrument: 0.000 HPLC Agilent Injection date: 8/30/2021 Acq method: Analysis method: CCN5.M CCN5.M Signal: Sample type: Location: Sample Injection: Injection volume: of 20.000 7:37:07 PM DAD1 A, Sig=310,4 Ref-off Compound Name RT [min] Area Symm Plates Resolution Tail Factor BENZOPHENONE-4 3.483 185.413 1.04 27471 1.1 BENZOPHENONE-3 5.164 111.118 0.99 50217 19.13 1.0 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 7.687 235.156 0.99 48301 21.80 1.0 OCTOCRYLEN 10.597 205.042 0.98 40195 MENTHYL ANTHRANILATE 10.962 200.687 OCTYL DIMETHYL PABA 11.583 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE OCTYL METHOXYCINNAMATE 16.61 1.0 1.00 38065 1.68 1.0 248.808 1.00 35868 2.65 1.0 12.287 244.040 0.99 33786 2.76 1.0 12.837 309.017 1.01 34518 2.03 1.0 13.603 54.458 1.01 32453 2.65 1.0 OCTYL SALICYLATE 14.690 387.786 1.02 29956 3.40 1.0 HOMOSALATE 15.833 326.783 1.03 29585 3.24 1.0 PL 50 SKĐ độ ổn định dung dịch chuẩn– Chuẩn sau ngày Data file: Sample name: Sample amount: Instrument: D:\Data\DE TAI CCN/DO ON DINH DD/SAU NGAY/CHUAN 1.D Injection date: 8/30/2021 Acq method: Analysis method: CCN5.M CCN5.M 0.000 HPLC Agilent 7:37:07 Sample type: Location: Sample Injection: Injection volume: of 20.000 PM DAD A Sig-—310.4 Ref—off Time [min] Signal: Compound Name DADI A, Sig=310,4 Ref-off RT [min] Area Symm Plates Resolution Tail Factor BENZOPHENONE-4 3.483 186.472 0.98 28571 BENZOPHENONE-3 5.157 10.828 0.96 56360 19.83 1.1 4-MethylBENZYLIDENE CAMPHOR OCTOCRYLEN 7.655 236.278 0.96 55031 23.04 1.0 10.515 206.498 0.97 45374 17.49 1.0 MENTHYL ANTHRANILATE 10.886 204.137 0.99 43651 1.83 1.0 OCTYL DIMETHYL PABA 11.495 252.386 0.98 41 178 2.81 1.0 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 12.183 246.547 1.00 39102 2.92 1.0 OCTYL METHOXYCINNAMATE 12.730 312.015 13.507 55.234 0.97 39020 0.97 36394 2.17 2.88 1.0 1.0 OCTYL SALICYLATE 14.585 390.633 0.99 34084 3.61 1.0 HOMOSALATE 15.717 327.430 0.98 33457 3.44 1.0 PL 51 1.0 SKĐ độ ổn định dung dịch tự tạo – Sau ngày D:\Data\DE TAI CCN/DO ON DINH DD/TU TAO – SAU TUAN.D Data file: Sample name: Sample amount: Instrument: 0.000 HPLC Agilent Injection date: 9/9/2021 Acq method: Analysis method: CCN5.M CCN5.M Signal: Sample type: Location: Sample 33 Injection: Injection volume: of 20.000 5:07:01 PM DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Compound Name BENZOPHENONE-4 BENZOPHENONE-3 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR RT [min] 3.480 5.178 7.727 Area Symm 189.722 1.00 113.345 0.95 240.608 0.98 Plates 27378 53975 52166 Resolution Tail Factor 1.0 19.67 1.0 22.77 1.0 OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE OCTYL DIMETHYL PABA BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 10.679 1 042 1 667 12.381 209.914 209.047 256.212 250.783 0.99 1.01 41247 1.00 39202 1.01 36900 17.36 1.72 2.76 2.90 1.0 1.0 1.0 1.0 OCTYL METHOXYCINNAMATE 12.934 319.751 0.99 36187 2.10 1.0 OCTYL SALICYLATE 13.701 14.801 57.227 409.093 1.01 34598 0.99 31723 2.71 3.52 1.0 1.0 HOMOSALATE 15.954 332.547 1.00 32305 3.36 1.0 PL 52 SKĐ độ ổn định nhiệt độ cột 380C – Chuẩn Data file: D:\Data\DE TAI CCN\NHIET DO COT\ NHIET DO 38- C1.D Sample name: Sample amount: Instrument: 0.000 HPLC Agilent Injection date: Acq method: Analysis method: 9/13/2021 11:46:4 CCN5-38.M CCN5-38.M Sample type: Location: Injection: Injection volume: AM Sample 1 of 20.000 Time [min] Signal: DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Compound Name BENZOPHENONE-4 RT [min] 3.737 Area 214.098 Symm 1.01 Resolution 1.00 Plates 291 12 51417 BENZOPHENONE-3 5.589 127.458 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 8.441 271.395 1.06 451 15 22.21 OCTOCRYLEN 1 780 234.040 1.07 36757 16.54 1.0 MENTHYL ANTHRANILATE 12.218 234.197 1.09 34627 1.73 1.0 OCTYL DIMETHYL PABA 12.916 286.096 1.07 33388 2.57 1.0 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 13.747 283.922 1.09 31726 2.82 0.9 OCTYL METHOXYCINNAMATE 14.362 354.563 1.06 31650 1.95 1.0 15.242 64.257 1.1 29492 2.60 0.9 16.498 449.537 1.07 27545 3.35 1.0 17.808 375.514 1.07 27330 OCTYL SALICYLATE HOMOSALATE PL 53 19.96 Tail Factor 1.0 1.0 1.0 1.0 SKĐ độ ổn định nhiệt độ cột 400C – Chuẩn Data file: D:\Data\DE TAI CCN\NHIET DO COT\ NHIET DO 40- C3 Sample name: Sample amount: Instrument: Injection date: Acq method: Analysis method: 0.000 Sample type: Location: Injection: Injection volume: HPLC Agilent 9/13/2021 1:58:07 PM CCN5.M CCN5.M Sample of 20.000 d: Signal: DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Area Symm BENZOPHENONE-4 Compound Name 3.729 213.446 0.98 31930 BENZOPHENONE-3 5.559 128.004 0.99 51508 20.24 1.0 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 8.367 272.859 1.06 45691 22.11 1.0 OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE 11.602 1.07 1.0 1.08 37438 34197 16.37 12.026 235.632 236.259 0.9 OCTYL DIMETHYL PABA 12.710 287.569 1.06 32987 1.70 2.54 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 13.509 281.604 1.08 31194 2.73 1.0 14.115 355.436 1.06 31470 1.95 1.0 14.987 64.473 453.122 377.686 1.05 29770 27675 26911 2.63 1.0 3.32 1.0 3.15 1.0 OCTYL METHOXYCINNAMATE RT [min] OCTYL SALICYLATE 16.206 HOMOSALATE 17.486 PL 54 1.07 1.07 Plates Resolution Tail Factor 1.0 0.9 SKĐ độ ổn định nhiệt độ cột 420C – Chuẩn Data file: D:\Data\DE TAI CCN\NHIET DO COT\ NHIET DO 42 – C2.D Sample name: Sample amount: Instrument: Injection date: Acq method: Analysis method: 0.000 HPLC Agilent 9/13/2021 4:09:32 PM CCN5-42.M CCN5-42.M Signal: Compound Name Sample Sample type: Location: Injection: of Injection volume: 20.000 DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off RT [min] Area Symm Plates Resolution Tail Factor BENZOPHENONE-4 3.721 212.739 1.04 28898 BENZOPHENONE-3 5.532 0.99 1.0 8.283 50493 45240 19.52 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 126.108 271.011 21.70 1.0 1.06 16.02 1.0 1.07 1.0 OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE 11.442 11.855 234.281 235.622 1.08 36415 34908 1.68 0.9 OCTYL DIMETHYL PABA 12.528 286.241 1.06 33402 2.56 1.0 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 13.285 279.437 1.08 31338 2.64 0.9 OCTYL METHOXYCINNAMATE 13.888 353.853 1.06 31788 1.98 1.0 14.751 64.030 1.05 29490 2.64 1.0 OCTYL SALICYLATE 15.940 453.196 1.05 27123 3.26 1.0 HOMOSALATE 17.192 379.247 1.07 26936 3.11 1.0 PL 55 SKĐ độ ổn định nhiệt độ cột 380C – Tự tạo Data file: D:\Data\DE TAI CCN\NHIET DO COT\ NHIET DO 38-TUTAO 2.D Sample name: Sample amount: Instrument: Injection date: Acq method: Analysis method: 0.000 HPLC Agilent 9/13/2021 8:06:52 PM CCN5-38.M CCN5-38.M Sample type: Location: Sample Injection: of Injection volume: 20.000 Signal: Compound Name DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off RT [min] Area Symm Plates Resolution Tail Factor BENZOPHENONE-4 3.738 212.896 0.98 31433 BENZOPHENONE-3 5.581 125.375 1.02 50692 20.14 1.0 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 8.404 269.511 1.09 44162 21.85 1.0 OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE 11.690 233.737 232.934 1.10 1.0 1.12 35726 33488 16.18 12.130 1.72 0.9 OCTYL DIMETHYL PABA 12.813 286.189 1.10 33420 2.51 0.9 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 13.632 281.894 1.12 30615 2.77 0.9 OCTYL METHOXYCINNAMATE 14.248 356.481 1.10 30092 1.93 0.9 15.130 OCTYL SALICYLATE HOMOSALATE 1.1 63.383 1.11 28451 2.57 0.9 16.369 461.563 1.09 26752 3.27 0.9 17.663 372.299 1.10 26008 3.10 0.9 PL 56 SKĐ độ ổn định nhiệt độ cột 400C – Tự tạo Data file: D:\Data\DE TAI CCN\NHIET DO COT\ NHIET DO 40-TUTAO 1.D Sample name: Sample amount: Instrument: Injection date: Acq method: Analysis method: 0.000 HPLC Agilent 9/13/2021 6:21:13 PM CCN5.M CCN5.M Signal: Compound Name BENZOPHENONE-4 Sample type: Location: Injection: Injection volume: Sample of 20.000 DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Area 3.727 211.939 Symm 0.35 Plates 28947 BENZOPHENONE-3 5.548 127.171 1.00 49698 19.52 0.9 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 8.340 270.633 2.01 44204 21.69 1.0 OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE 11.562 235.670 235.102 3.17 0.9 3.32 36397 33802 16.11 11.980 1.66 0.9 OCTYL DIMETHYL PABA 12.661 285.930 3.57 32634 2.53 0.9 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 13.444 281.622 3.85 30903 2.68 0.9 OCTYL METHOXYCINNAMATE 14.051 354.050 4.07 31387 1.95 1.0 14.921 OCTYL SALICYLATE HOMOSALATE RT [min] Resolution Tail Factor 1.0 64.348 4.39 28888 2.61 0.9 16.130 449.300 4.82 26987 3.26 0.9 17.400 375.898 5.28 26126 3.09 1.0 PL 57 SKĐ độ ổn định nhiệt độ cột 420C – Tự tạo Data file: D:\Data\DE TAI CCN\NHIET DO COT\ NHIET DO 42-TUTAO 2.D Sample name: Sample amount: Instrument: Injection date: Acq method: Analysis method: 0.000 HPLC Agilent 9/13/2021 5:27:43 PM CCN5-42.M CCN5-42.M Signal: Sample type: Location: Injection: Injection volume: Sample of 20.000 DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Compound Name RT [min] Area Symm Plates Resolution Tail Factor BENZOPHENONE-4 3.722 212.283 1.01 29604 1.0 BENZOPHENONE-3 5.532 125.619 0.99 49874 19.55 0.9 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR 8.287 270.844 1.07 44962 21.62 0.9 OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE 11.444 1.07 1.0 1.08 37001 34298 16.06 11.855 232.980 232.047 1.67 0.9 OCTYL DIMETHYL PABA 12.530 285.221 1.07 33269 2.55 1.0 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE 13.286 276.542 1.09 31942 2.65 0.9 OCTYL METHOXYCINNAMATE 13.890 355.535 1.06 31221 1.98 1.0 14.757 64.241 1.06 28238 2.61 1.0 OCTYL SALICYLATE 15.939 457.338 1.07 27402 3.22 1.0 HOMOSALATE 17.188 370.911 1.06 26900 3.11 1.0 PL 58 PHỤ LỤC Sắc ký đồ mẫu đại diện kiểm tra chất chống nắng PL 59 SKĐ kiểm tra mẫu – Mẫu M2 Data file: D:\Data\DETAI CCN\KT MAU\M2.D Sample name: Sample amount: 0.000 Instrument: HPLC Agilent Injection date: Acq method: Analysis method: 1/22/2021 5:20:13 PM CCN5-KT MAU.M CCN5-KT MAU.M Sample type: Location: Injection: Injection volume: Sample 54 of 20.000 Time [min] Signal:DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Compound Name BENZOPHENONE-4 BENZOPHENONE-3 4-METHYLBENZYLIDENE CAMPHOR RT [min] Area Symm Plates 4.202 217.73 15.432 143.35 0.74 1.04 30422 22063 Resolution Factor Tail OCTOCRYLEN MENTHYL ANTHRANILATE OCTYL DIMETHYL PABA BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE OCTYL SALICYLATE HOMOSALATE OCTYL METHOXYCINNAMATE PL 60 43.99 2.2 1.0 SKĐ kiểm tra mẫu – Mẫu M5 Data file: D:\Data\DETAI CCN\KT MAU\M5.D Sample name: Sample amount: 0.000 Instrument: HPLC Agilent Injection date: Acq method: Analysis method: 1/22/2021 6:38:29 PM CCN5-KT MAU.M CCN5-KT MAU.M Signal: Sample type: Location: Injection: Injection volume: Sample 57 of 20.000 DAD1 A, Sig=310,4 Ref=off Compound Name BENZOPHENONE-4 BENZOPHENONE-3 4-MethylBENZYLIDENE CAMPHOR MENTHYL ANTHRANILATE OCTYL DIMETHYL PABA HOMOSALATE RT [min] Area 4.264 Symm Plates 398.32 1.08 35415 Resolution Tail Factor 0.8 7.818 21.34 0.99 35739 27.83 1.0 10.407 1663.03 1.02 31414 12.97 0.9 OCTOCRYLEN 12.71 3519.91 04 27207 8.51 1.0 BUTYL METHOXYDIBENZOYL METHANE OCTYL METHOXYCINNAMATE 14.530 27.19 1.01 24169 5.35 1.0 15.485 18556.79 1.05 23409 2.46 0.9 OCTYL SALICYLATE 17.807 1806.10 1.04 20617 5.17 1.0 PL 61