Nghiên cứu ứng dụng biopro xử lý mùi hôi trại nuôi chim cút và tạo phân hữu cơ vi sinh thử nghiệm trồng tỏi ở huyện đảo lý sơn theo hướng bền vững

g an aN cD ho D g an aN cD ho D DANH SÁCH NHỮNG THÀNH VIÊN THAM GIA THỰC HIỆN ĐỀ TÀI TT Họ tên Đơn vị công tác lĩnh vực chuyên Nhiệm vụ môn Đoàn Thị Vân Lê Vũ Khánh Trang Nguyễn Khoa Giáo dục tiểu học, Trường Đại Chủ nhiệm học Sư phạm Đà Nẵng đề tài Khoa Sinh-Môi trường, Trường Đại học Thành viên Sư phạm Đà Nẵng Lan Khoa Sinh-Môi trường, Trường Đại học Thị Phương Trịnh Đăng Mậu Khoa Sinh-Môi trường, Trường Đại học Khoa Sinh-Môi trường, Trường Đại học Thư ký khoa Sư phạm Đà Nẵng g an aN cD ho Ngơ Thị Hồng Vân Thành viên Sư phạm Đà Nẵng Sư phạm Đà Nẵng D Thành viên học ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM THÔNG TIN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Thông tin chung - Tên đề tài: Nghiên cứu ứng dụng BioPro xử lý mùi hôi trại nuôi chim cút tạo phân hữu vi sinh thử nghiệm trồng tỏi Huyện đảo Lý Sơn theo hướng bền vững - Mã số: B2019-DN03-45 - Chủ nhiệm: TS Đoàn Thị Vân - Thành viên tham gia: ThS Lê Vũ Khánh Trang, ThS Nguyễn Thị Lan Phương, TS Trịnh Đăng Mậu, ThS Ngơ Thị Hồng Vân Thời gian thực hiện: 24 tháng (từ tháng 03 năm 2020 đến tháng 03 năm 2022) Mục tiêu ho - D - Cơ quan chủ trì: Trường ĐH Sư phạm Đà Nẵng - Xây dựng quy trình ứng dụng chế phẩm BioPro để xử lý mùi hôi chuồng cD trại chăn nuôi chim cút; aN - Tạo phân hữu vi sinh từ phân chim cút để thử nghiệm trồng tỏi Huyện đảo Lý Sơn, Quảng Ngãi theo hướng phát triển bền vững Tính sáng tạo an Ứng dụng chế phẩm vi sinh Biopro để xử lý phụ phẩm chăn nuôi chim cút trực g tiếp chuồng trại Sau xử lý, thu phân hữu vi sinh từ phân chim cút có tiêu chí chất lượng đáp ứng TCVN 7185:2002 Thử nghiệm ứng dụng phân hữu từ phân chim cút để trồng tỏi huyện đảo Lý Sơn, tỉnh Quảng Ngãi, cho thấy, củ tỏi sau thu hoạch có hình thái chất lượng tốt so với tỏi trồng phân hữu từ bã cà phê Kết nghiên cứu Qua trình nghiên cứu, đưa kết luận sau: 4.1 Chế phẩm Biopro có tiềm xử lý mùi hôi chuồng trại chăn nuôi chim cút Từ chủng Bacillus licheniformis TT01 tạo chế phẩm Biopro Biopro có khả sinh enzyme ngoại bào cần thiết để phân hủy hợp chất hữu có phân chim cút, như: tinh bột, cellulose, protein, acid phytic Biopro khả ức chế, tiêu diệt chủng vi sinh vật có hại, thường xuất phân chim cút Salmonella typhi, E coli Qua kết tính cảm quan, hàm lượng vi sinh vật gây hại nồng độ loại khí H2S, NH3 trại chăn nuôi chim cút cho thấy, sử dụng chế phẩm vi sinh Biopro, EM 01, Balasa 01 để xử lý phụ phẩm chăn ni chim cút có hiệu rõ rệt so với lô không sử dụng chế phẩm vi sinh Trong đó, chế phẩm Biopro sản xuất từ chủng Bacillus licheniformis TT01 có hiệu xử lý tốt 4.2 Đã xây dựng qui trình xử lý phân chim cút trực tiếp chuồng trại chăn nuôi chim cút tạo phân hữu vi sinh Sau xử lý, phân hữu vi sinh từ phân chim cút có tiêu chí chất lượng phù hợp với TCVN 7185:2002 Biopro có tiềm ứng dụng xử lý phụ phẩm chăn nuôi trực tiếp chuồng trại, góp phần giảm cách bền vững D nguy ô nhiễm môi trường từ nguồn thải phát triển nghề chăn nuôi chim cút ho 4.3 Ứng dụng phân hữu vi sinh dạng rời dạng viên từ phân chim cút để thử nghiệm trồng tỏi huyện đảo Lý Sơn, tỉnh Quảng Ngãi Qua tiêu chí đánh giá cD cảm quan, hình thái, kích thước thân, lá, củ tỏi sau thu hoạch, khả đối kháng aN dịch chiết alicin từ tỏi với chủng vi sinh vật gây bệnh cho thấy, tỏi trồng hình thức bón lót phân hữu vi sinh từ phân chim cút cho hiệu cao rõ an rệt so với tỏi trồng hình thức bón lót phân hữu vi sinh từ bã cà phê Sau thu hoạch tỏi, mật độ vi sinh vật hữu hiệu tầng đất mặt, tầng đất cách mặt 20cm g lơ trồng tỏi hình thức bón lót phân hữu vi sinh từ phân chim cút cao so với đất trồng tỏi bón lót phân hữu từ bã cà phê Sản phẩm 5.1 Sản phẩm khoa học - Bài báo đăng tạp chí quốc tế: Lam Van Tan, Thanh Tran, Van Doan Thi (2021) Biosynthesis of Silver Nanoparticles from Bacillus licheniformis TT01 Isolated from Quail Manure Collected in Vietnam Processes 2021, 9, 584 - Bài báo đăng tạp chí nước: Đồn Thị Vân, Võ Châu Tuấn, Trần Quang Dần (2021) Nghiên cứu hoạt tính sinh học chế phẩm vi sinh chứa vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 Tạp chí Khoa học Công nghệ Đà Nẵng 5.2 Sản phẩm đào tạo - Sinh viên nghiên cứu khoa học: Nguyễn Châu Giang, Nguyễn Thị Oanh, Lê Thị Thúy Nga (18 CNSH) Nghiên cứu khả ứng dụng BIO-MS1 để trồng tỏi huyện đảo Lý Sơn theo hướng bền vững Năm học 2019-2020 5.3 Sản phẩm ứng dụng - Chế phẩm Biopro dạng lỏng: 10 lít - Quy trình xử lý mùi hôi chuồng trại nuôi chim cút: 01 quy trình - Giấy xác nhận ứng dụng quy trình cơng nghệ xử lý mùi hôi chuồng trại ông Nguyễn Văn Rạng, Điện Bàn, Quảng Nam - Giấy xác nhận ứng dụng phân hữu hữu vi sinh tạo từ phân chim cút để trồng tỏi ông Bùi Văn Bốn, Lý Sơn thôn Tây, An Hải, Tỉnh Quảng Ngãi dụng D Hiệu quả, phương thức chuyển giao kết nghiên cứu khả áp ho 6.1 Hiệu giáo dục đào tạo Hiện nay, khoa Sinh – Môi trường triển khai hướng nghiên cứu giảng cD dạy ứng dụng vi sinh vật nông nghiệp, xử lý ô nhiễm môi trường Đề tài thành aN công cung cấp cho khoa báo cáo đầy đủ quy trình xử lý mùi hôi trại nuôi chim cút công nghệ sản xuất phân hữu vi sinh an 6.2 Hiệu kinh tế - xã hội - Đề tài cung cấp chế phẩm BioPro, chứa chủng vi sinh vật có lợi, đặc hiệu để g xử lý mùi môi trại nuôi cút, sản xuất phân hữu vi sinh từ phân chim cút Các chủng vi sinh vật phân lập Điện Bàn, tỉnh Quảng Nam, nên sinh trưởng phát triển chúng phù hợp với điều kiện thổ nhưỡng vùng Duyên Hải miền Trung Tây Nguyên - Đề tài thành cơng cung cấp quy trình xử lý mùi hôi chuồng trại hộ nuôi chim cút, giúp giảm thiểu dịch bệnh, hạn chế sử dụng chất kháng sinh chăn nuôi, nhằm đảm bảo sức khỏe cho người dân sử dụng sản phẩm nông nghiệp này; - Đề tài cung cấp quy trình cơng nghệ ủ phân chim cút tạo phân hữu vi sinh, góp phần giảm nguy gây nhiễm môi trường từ nguồn thải chim cút; g an aN cD ho D THE UNIVERSITY OF DANANG THE UNIVERSITY OF SCIENCE AND EDUCATION INFORMATION ON RESEARCH RESULTS General information - Project title: Research and application of BioPro to treat the odor of quail farms and create micro-organic fertilizers to experiment with growing garlic in Ly Son island district in a sustainable way - Code number: B2019-DN03-45 - Project Leader: Dr Doan Thi Van - Coordinator: Le Vu Khanh Trang, Nguyen Thi Lan Phương, Dr Trinh Dang Mau, Ms Ngo Thi Hoang Van D - Implementing institution: Danang University of Education - Duration : from 03/2020 to 03/2022 Objective(s) cD ho - Developed a process to apply BioPro product to treat the odor of quail cages; aN - Create micro-organic fertilizer from quail droppings to experiment with growing garlic in Ly Son island district, Quang Ngai towards sustainable development Creativeness and innovativeness an g Application microbial products Biopro to treat quail breeding by-products directly in the barn After treatment, microbiological organic fertilizers are obtained from quail droppings with quality criteria meeting TCVN 7185:2002 Experimenting with the application of organic fertilizer from quail manure to grow garlic in Ly Son island district, Quang Ngai province, showed that garlic bulbs after harvesting had better morphology and quality than garlic grown with organic fertilizer from grounds coffee Research results 4.1 The strain Bacillus licheniformis TT01 has specific biological properties, suitable for the application of quail by-product treatment The Biopro was created from Bacillus licheniformis TT01 strain Biopro has the ability to produce extracellular enzymes necessary to degrade organic compounds found in quail manure: cellulose, protein, phytic acid Biopro has the ability to inhibit and destroy harmful microorganisms, which often appear in quail feces, Salmonella typhi, E coli This is the scientific basis for the application of Biopro in the treatment of waste from quail farming 4.2 Through the results of the organoleptic properties, the content of harmful microorganisms and the concentration of H2S, NH3 gases in the quail farm, it was found that using Biopro, EM 01, Balasa 01 to treat quail by-products were significantly more effective than those that didn’t use microbial products The best treatment efficiency is Biopro product from Bacillus licheniformis TT01 After treatment, microbial organic fertilizers from quail droppings have quality criteria in accordance with TCVN 7185:2002 Biopro has potential applications in processing livestock by-products directly in the barn, contributing to reducing the risk of D environmental pollution from this waste source and developing quail farming in a ho sustainable way 4.3 Application of microbial organic for growing garlic in Ly Son island cD district, Quang Ngai province Through the evaluation criteria of sensory, aN morphological, and size of the stems, leaves and bulbs of garlic after harvest, the antagonistic ability of allicin extracts from garlic with pathogenic microorganisms an showed that garlic grown by priming with micro-organic fertilizer from quail with micro-organic fertilizer from grounds coffee g droppings, the efficiency is significantly higher than that of garlic grown by priming Products 5.1 Science product 5.1.1 Lam Van Tan, Thanh Tran, Van Doan Thi (2021) Biosynthesis of Silver Nanoparticles from Bacillus licheniformis TT01 Isolated from Quail Manure Collected in Vietnam Processes 2021, 9, 584 5.1.2 Đoàn Thị Vân, Võ Châu Tuấn, Trần Quang Dần (2021) Nghiên cứu hoạt tính sinh học chế phẩm vi sinh chứa vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Đà Nẵng 5.2 Products for training Student science research: Nguyễn Châu Giang, Nguyễn Thị Oanh, Lê Thị Thúy Nga (18 CNSH) Nghiên cứu khả ứng dụng BIO-MS1 để trồng tỏi huyện đảo Lý Sơn theo hướng bền vững 5.3 Products application - Biopro: 10 liters - Process of handling the odor of quail manual: 01 process - Certificate of application of technology process to treat barn odors from Mr Nguyen Van Rang, Dien Ban, Quang Nam - Certificate of application of microbiological organic fertilizer created from quail manure to grow garlic by Mr Bui Van Bon in Ly Son Quang Ngai province Effects, transfer alternatives of reserach results and applicability 6.1 Effective in education and training D The successful project will provide the faculty with a full report on the odor treatment process at quail farms as well as the production technology of microbial cD ho organic fertilizers 6.2 Effective in socio-economic aN - The project provides Biopro product, specifically to treat lip odor in quail farms, as well as producing micro-organic fertilizers from quail droppings; an - The successful project will provide a process to handle the smell of barns in ensure the health of people when using product; g quail households, help to reduce epidemics, limit the use of antibiotics in livestock, to - The successful project will supply micro-organic fertilizer, application for growing garlic in Ly Son island district in particular, as well as across the country 6.3 Transfer research results - The results of the project will be transferred to lecturers, laboratory staff as well as students to serve teaching and scientific research; - The results of the research on the treatment of barn odors will be applied in quail cages in Quang Nam and Da Nang in particular as well as across the country in general - The results of research on application of microbiological fertilizers will be applied to grow garlic on Ly Son island district CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu Chế phẩm Biopro dạng lỏng, cung cấp phịng thí nghiệm Cơng nghệ Vi sinh - Hóa sinh thuộc Khoa Sinh – Môi Trường, Trường Đại học Sư phạm – Đại Học Đà Nẵng Chế phẩm Biopro có mật độ vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 lớn 1012CFU/ml - PCC trại chăn nuôi chim cút Điện Bàn, Tỉnh Quảng Nam - Tỏi Lý Sơn, cung cấp hộ dân trồng tỏi địa bàn huyện Đảo Lý Sơn, Tỉnh Quảng Ngãi g an aN cD ho D 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Sơ đồ nghiên cứu 2.2.2 Phương pháp nghiên cứu tài liệu 2.2.3 Phương pháp sản xuất chế phẩm vi sinh 2.2.4 Phương pháp xác định mật độ vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 chế phẩm 2.3.5 Phương pháp xác định khả tạo nano bạc chế phẩm 2.3.6 Phương pháp phá vỡ tế bào vi khuẩn 2.3.7 Phân tích phổ tử ngoại phổ khả kiến (UV – Vis) 2.3.8 Phân tích giản đồ nhiễu xạ tia X (XRD) 2.3.9 Phân tích kích thước hạt hình dạng hạt nano bạc tạo thành thơng qua kính hiển vi điện tử truyền qua (TEM) D ho phẩm 2.3.10 Phương pháp khảo sát khả sinh loại enzyme ngoại bào chế 2.3.11.Phương pháp xác định khả kháng khuẩn chế phẩm cD 2.3.12.Phương pháp bố trí lơ thử nghiệm thử nghiệm xử lý phụ phẩm aN 2.3.13 Phương pháp phun chế phẩm vi sinh xử lý phân chim cút 2.3.14.Phương pháp thu mẫu khí phân tích khí NH3 H2S an 2.3.15.Phương pháp sản xuất phân hữu vi sinh từ phân chim cút phù hợp g canh tác tỏi 2.3.16.Phương pháp trồng tỏi phân hữu vi sinh 2.3.17.Phương pháp đánh giá hình thái tỏi 2.3.18.Phương pháp đánh giá chất lượng củ tỏi 2.3.19.Phương pháp xác định mật độ vi sinh vật đất trồng tỏi 2.3.20.Phương pháp xử lý số liệu CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Ứng dụng chế phẩm BioPro để để xử lý mùi hôi chuồng trại nuôi chim cút 3.1.1 Sản xuất chế phẩm BioPro dạng lỏng Theo kết nghiên cứu đề tài trọng điểm cấp Trường Đại học Sư phạm với mã số: T2017 – TĐ – 03-6, phân lập chủng Bacillus licheniformis TT01 Để tạo chế phẩm vi sinh vật, tiến hành cho 6ml chủng Bacillus licheniformis TT01 vào 200ml mơi trường LB tiệt trùng Cho bình ni cấy nhiệt độ từ 350C, 150 vòng/phút, vòng 48h, thu chế phẩm lỏng Kết cho thấy, chế phẩm Biopro chứa chủng Bacillus licheniformis TT01 dạng lỏng, có màu vàng, đáy lắng nhiều sinh khối vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 – có màu trắng Sau 48h, Biopro có màu vàng sáng Khảo sát đĩa Petri cho D thấy, số lượng vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 Biopro đạt 3.108 CFU/ml Như vậy, tạo chế phẩm vi sinh vật từ vi khuẩn Bacillus licheniformis TT01 nhiệt ho độ từ 350C, số lượng vi sinh vật hữu hiệu ≥108 CFU/ml - điều phù hợp với yêu cầu cD chất lượng chế phẩm vi sinh vật theo TCVN 6168:2002 TCVN 7304-1:2003 trại nuôi cút aN 3.1.2 Cơ sở khoa học ứng dụng chế phẩm BioPro để xử lý mùi hôi chuồng an Sau xác định số lượng vi sinh vật hữu hiệu, tiến hành khảo sát khả g sinh enzyme bào chế phẩm Biopro phương pháp đục lỗ thạch môi trường đặc trưng Kết cho thấy chế phẩm Biopro tạo từ chủng Bacillus licheniformis TT01 xuất vòng phân giải enzyme amylase, protease, cellulose, phytase Chế phẩm Biopro có khả sinh enzyme ngoại bào (amylase, protease, cellulose, phytase) cao Vì vậy, chế phẩm Biopro có khả phân giải hợp chất cao phân tử, phân hủy dở dang phân chim cút, như: tinh bột, cellulose, protein, acid phytic Điều phù hợp với nghiên cứu trước đặc tính sinh học tế bào vi khuẩn Bacillus sp [13, 42, 51] Chế phẩm Biopro có khả sinh enzyme phytase cao, đường kính vòng phân giải đạt 3,45 ± 0,09 cm Điều phù hợp với nghiên cứu Elsorra E Idriss, et al., (2002) Nguyễn Văn Giang cộng năm 2013 [13, 42] Enzyme phytase giúp phân giải acid phytic, dẫn tới giảm ô nhiễm phosphophytate, mà giúp cho phân giải hợp chất chứa K+, Ca2+,Cu2+, Zn2+, Mg2+ số dạng phức hợp protein, góp phần làm giảm mùi từ phân chim cút, giảm ô nhiễm môi trường [15, 33, 51] Qua nghiên cứu cảm quan, đếm số lượng vi sinh vật hữu hiệu đĩa Petri khả sinh 04 loại enzyme ngoại bào, cho thấy chế phẩm Biopro có số lượng vi sinh vật hữu hiệu đạt tiêu chuẩn chế phẩm vi sinh vật Việt Nam khả sinh enzyme ngoại bào amylase, protease, cellulose phytase cao Theo nghiên cứu Thi Van Doan năm 2018, từ chủng Bacillus licheniformis TT01 có khả đối kháng với Salmonella typhi, E Coli [57] Vì vậy, chế phẩm Biopro có tiềm ứng dụng để xử lý phụ phẩm chăn nuôi chim cút trực tiếp chuồng trại D Xác định khả tạo nano bạc chế phẩm Biopro Dựa kết nghiên cứu [54] cho thấy, hạt AgNPs hình thành ho chủng vi sinh vật sinh trưởng phát triển đạt cực đại, tiến hành nuôi cấy chủng cD Bacillus licheniformis TT01 môi trường Luria-Bertani (LB) lỏng, 400C, pH từ aN 7,0 đến 7,5 khoảng thời gian từ 15 đến 25h [57] Ủ theo cơng thức thí nghiệm, thu dịch tổng hợp sau từ đến ngày tổng hợp an Sau từ 2, ngày ủ, màu sắc công thức không thay đổi trước sau g ủ Sau ngày ủ màu sắc trước sau ủ CT1 nồng độ AgNO3 1mM 2mM không thay đổi, vàng đậm màu Ở CT3, trước ủ màu dịch tổng hợp màu trắng, sau ủ kết dịch tổng hợp không bị thay đổi màu Ở CT2 trước sinh tổng hợp nano bạc dung dịch có màu trắng đục, sau sinh tổng hợp nano bạc kết cho thấy dung dịch chuyển sang màu vàng nâu, theo nhiều tài liệu [38], [45], [55], [48] thay đổi màu dịch tổng hợp chứng tỏ có diện nano bạc kích thích cộng hưởng plasmon bề mặt hạt bạc nano Để làm rõ việc có diện nano bạc dịch sau tổng hợp cơng thức thí nghiệm này, tiến hành phân tích UV – Vis Phân tích phổ tử ngoại phổ khả kiến (UV – Vis) Sinh tổng hợp nano bạc theo CT1 Phản ứng sinh tổng hợp thực cách thu 100ml dịch cho vào 100ml dung dịch AgNO3 1mM 2mM, ủ lắc liên tục (150rpm) thời gian từ – ngày, sau tổng hợp tiến hành quét phổ UV – Vis bước sóng từ 300nm đến 700nm Kết cho thấy, sau ngày hiệu suất tổng hợp từ CT1 (dịch ngoại bào ủ với AgNO3 1mM va 2mM) không cho hiệu quả, không thấy diện đỉnh phổ đặc trưng nano bạc Theo nghiên cứu số tác giả [45, 54] dịch (canh trường ly tâm sinh khối vi khuẩn) chứa enzyme, protein, acid amin, polysaccharide vitamin có vai trị tích cực việc khử ion Ag+ chế chấp nhận rộng rãi để tổng hợp nano bạc từ vi khuẩn qua khử trung gian enzyme khử nitrat (nitrat reductase) Thông qua phổ UV – Vis kết phương pháp trình bày CT1 ủ dịch ngoại bào vi khuẩn Bacillus D licheniformis TT01 với AgNO3 chưa thấy rõ phổ đặc trưng nano bạc ho trình tổng hợp Sinh tổng hợp nano bạc theo CT3 cD Phản ứng sinh tổng hợp thực cách thu 100ml dịch sinh khối lắc aN với nước cất sau – ngày (dịch ly tâm loại bỏ sinh khối vi khuẩn) ủ với 100ml AgNO3 nồng độ 1mM 2mM lắc liên tục (150rpm) thời gian từ – an ngày, sau tổng hợp tiến hành quét phổ UV – Vis bước sóng từ 300nm đến 700nm g Kết thể hình Kết cho thấy, sau ngày hiệu suất tổng hợp từ CT3 chưa thấy xuất đỉnh phổ hấp thu đặc trưng nano bạc Việc cho sinh khối Bacillus licheniformis TT01 vào nước cất vô trùng để lắc nhằm đánh giá nước có tác động đến thành tế bào vi khuẩn khiến vi khuẩn tiết hợp chất bao gồm enzyme nitrat reductase NADH (chất cho điện tử) hay không [48] Sinh tổng hợp nano bạc theo CT2 Phản ứng sinh tổng hợp thực cách chuyển 5g sinh khối ướt vào 100ml dung dịch AgNO3 1mM 2mM, ủ lắc liên tục (150rpm) thời gian từ – ngày, sau tổng hợp phá vỡ tế bào vi khuẩn tiến hành ly tâm thu dịch để quét phổ UV – Vis từ 300nm đến 700nm Mẫu từ màu trắng, đục chuyển sang màu vàng nâu Sự đổi màu dung dịch sinh tổng hợp chứng tỏ có nano bạc kích thích cộng hưởng plasmon bề mặt hạt kim loại bạc có kích thước nano Kết cho thấy, sau – ngày có diện nano bạc nồng độ tổng hợp, hạt nano bạc hình thành có kích thước nhỏ bao phủ protein có dung dịch nên đỉnh hấp thu nano bạc phát Khi tăng thời gian phản ứng, đỉnh hấp thu cường độ hấp thu tăng dần Từ ngày đến ngày, đỉnh hấp thu nano bạc thấy vị trí gần chênh lệch (416 – 420,5nm từ CT2 (1mM AgNO3); 416,5 – 418nm từ CT2 (2mM AgNO3)), phổ hấp thụ dao động, chứng tỏ đến khoảng – ngày trình sinh tổng hợp nano bạc từ CT2 gần hồn thành, kích thước hạt ổn định Đây ưu điểm trình sinh tổng hợp nhờ vi sinh vật thơng thường theo phương pháp khử hố học, tăng thời gian phản ứng, đỉnh hấp thu chuyển dịch theo chiều có bước sóng D lớn thường xảy tượng kết tụ tạo hạt có kích thước lớn, kết nghiên cứu Nguyen Phuc Quan cộng (2018) [16] rằng, kích thước hạt ho nano bạc tổng hợp biện pháp sinh học nhỏ so với kích thước hạt nano bạc cD tổng hợp biện pháp hóa học [39, 47, 55, 15, 30] aN Từ kết phân tích UV – Vis nhận thấy, dung dịch sau trình sinh tổng hợp CT1 CT3 quét bước sóng 300 – 700nm chưa thấy xuất đỉnh phổ an đặc trưng nano bạc Ở CT2, dung dịch sau trình sinh tổng hợp nồng độ g 1mM AgNO3 2mM AgNO3 cho đỉnh phổ đặc trưng nano bạc nằm khoảng 416 – 420nm, bạc nano tổng hợp nồng độ 1mM AgNO3 cho đỉnh hấp thụ mạnh so với bạc nano tổng hợp nồng độ 2mM AgNO3 Như vậy, chọn dịch nano bạc tổng hợp CT2 (sinh khối tế bào ủ với 100ml dung dịch AgNO3 1mM 2mM) sau ngày ủ để thực khảo sát kháng khuẩn Khảo sát kháng khuẩn theo phương pháp khuếch tán qua giếng thạch Sau thu dịch tổng hợp nano bạc tổng hợp từ CT2, tiến hành thử kháng khuẩn với vi sinh vật kiểm định Trong nghiên cứu ba chủng vi sinh vật gây bệnh sử dụng để kiểm tra tính kháng khuẩn E.coli, B.cereus, R.solancerum Tiến hành theo phương pháp khuếch tán qua giếng thạch, hút 100µl dịch vi sinh vật kiểm định trang lên đĩa thạch môi trường LB, đục lỗ đối xứng, hút 300 – 10