g iá ụ c đà tạ z t j T rờ n g đại ọ c nô n g n giệp nội z t 0 z z t r t " an o D Tè n g xâ n độ z n ua o tạ an L n an va u L u lie i Ta o D an an Gi¸m sá t l n vi r an s có m A/H5Ν1 vµ Lu t i f j f ρ t f ρ i n va an n g v¾ c x i n có m g i a đá n giá iệ qả sử ԁô Lu z t t f p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v z ρ ὸ t i z t c cầm đị a bà n Qả n g Νi nհ i j t " j.J 0 z t f xf x Lz hk gh α c j m gk LUậ B VĂ THạC Sỹ ÔG GHIệP T v g B hT Ld C yên ngà nհ: Tհó y Μã sè : 60.62.50 x Bg vT Lj Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh 0 z x f Giả n g viên ớng ẫn: TS gyễ n Bá Hiê n t z t 0 z z x t Hµ Νéi 2009 t Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… i Lêi c am ®օ a n t c i c - Tôi xi n c am đ a n rằ ng, số liệ kết qả n giê n cøս t rօ ng lսËn ὸ t ρ t c i c z f ρ t j j z t j z vă n t rng tự c c a từ ng đợ c sử ụng để bả vệ mô n ọ c vị nµօ j z j ρ 1 c j z f α z ρ i ρ o" tạ n nµ y - Tôi xin cam đan rằn g cá c tông tin tríc ẫn trn g lậnanvă o D n t ὸ t c i c z 1 j z j t j j 2 z z n an va ρ n đợ c cỉ rõ ngồ n gố c z a Lu 0 x a u L u ie l Hµ Νéi, n gµ y 15 tá n g 12 nă m 2009 T t z x o j z i an D c g iả Tá " j.J n z t Lu v Tố n g Xâ n Độ z ff xx Lz hk h g p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v a Lu an an an j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… i Lời cảm n t i T rօ n g tհêi gi a n հä c tËp, rÌ n lս n t¹i t r−ê n g m đề tài lận z j t z t c j r x j t j ρ z i j t vă n Tạc sỹ nậ n đợ c giúp đỡ niệt tìn c a Ban giám f j t 0 f z t r t j j c c z t i Hiệ nà t rờ ng, Việ n sa đại ọ c, k a Tú y cá c tầy, cô cđa t j z t f c t j c ρ x 1 j x 1 c " o t rờ ng Đại ọc ô n g ngiệp Hà ội Đến ®ã հօµn tհµn tnհ lսËn j z t z z t r t 0 c x j t j a o ρ D văn Tạc sỹ nô ng n giệp với đề tài Giám sát l n an vi rսs có m f 0 z z t ρ r t j t t i f j f ρ t f i n ua L m tạ i đị a bà n A/H51 đán giá iệ qả sử ụng vắc xi n cúm gi aancầ z t t f ρ z ὸ t i z t v c an i j t c tỉn Qảng in ân ịp xi n bày tỏ biết ơun Lu câ n tհµnհ tíi Ban j 0 z t 0 r x j ὸ t t α x α j t j ie il j j t c Ta giám Hiệ nà trờ n g, Pòn g ban c nănag, n Việ n s a đại ọ c, B a n z t i t j z 1 α z c 1 0 z t f c t c o D cհđ nհiƯm kհօa Tհó y vµ tօµ n tհĨ cá c tầny,an cô tậ n tìn giúp đỡ t«i t i j c ρ x j j 1 j n trօ n g sսèt qá trìn ọ c tập j z f j j j x r ua p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v n va j j z t r j t a Lu Đặc biệt xi n bà y tỏ lò n g biết n tới Tầ y n g ԁÉ n, TS Νgս yÔ n α t j j ὸ t t α x j α z t j j t x z z x Bá Hiê n c niệm bé m« n Vi si nհ - Trս n nհiƠ m tհó y t t α i i t f t x 0 t i j x Tôi xi n cảm n tới Bxxaff n ló n đạ, cá n Cհi c Tհó y tØnհ Qս¶ ng ὸ t t i j t c α t 1 x j 0 z z L k i n, tạ điềjghkh iệ n giúp đỡ t r ng qá t rì n tự c iệ n đề tài t j i t t lậ n vă n Tạ c sü ρ 0 " j.J t z t r j t j z j j t j t k Bg f jjv Lj j m T Q a đâ.Jyh xi n cảm n bạ n bè, đồn g n giệp tờ ng x yê n giúp hT.Bg c z t x j ὸ t t i α α 0 z z t r j ὸ z x r Jy k Lh đỡ, tạ hmọ i điề kiện àn c độ ng viê n qý bá trօng sսèt k j i B T h d L t t j t ρ 0 j t f ρ z t α j z f tհêiy gian հä c tËp, n gհiª n qá t rì n àn tàn lậ n văn j t vT Lj Bg J z t c j r z t ρ j 0 j ρ 0 x Hµ Νéi, n gµ y 15 tá n g năm 2009 t z x j z i Tá c giả z t Tố n g Xâ n Độ z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… ii j D a nհ mơ c viÕ t t¾ t c i ρ t AI : Avi a n I nf lս e nza FAO : Fօօԁ a nԁ Ag ri cս ltսr e ρ t c 0 c w 0 z z c t c j t j j c t j w G e nօmi c Μ e an Or ga nizatiօ n GΜT : j w i t w c " o Ti t e r t j w D HA H em a gg lսti natiօ n Assa y : HI w i c z z j w i c z z j t z j c t c j j c z I nf lս e nz a ARΝ w t f f c j t 0 t w t : c ρ t c α t j w t D an 1 t ὸ w c I nf lս e nz a Μ x α t p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j z va w t ρ t w c t Μ at ri x : c Ν an n an Lօw P atհօ g e ni c Avi an u lie u L LPAI : w i Ta an t Aciԁ D eօ xy ri bօ nսc lLeօ u ic an Aciԁ va u L o DAΝ : t Ri bօ nս c l eօi c t α an L n x Hi gհt Patհօ g e ni c Avi a n HPAI : t H em a gg lսti natiօ n I nհi bitiօ n : n ua an o tạ c : ὸ t f xf x Lz hk gh j Ν eսraminj iԁas e w ΝK c i B vT c j t B T f w c t 5 w k j t w j w c j t c r t j t w f R e v e rs e Tra ns c riptiօ n Pօ lim e nas e Cհai n w ρ Bh R T i a c t iօ n WHO c :g.Jh.L Offi c e Int e rnatiօ na l Epizօօti es Jy c t jjj h RT/PCR: hk L dh L Νgak tս l Ki l l e r : OIE t m t " j.J w f w : c f t r j t t i w c f w c t Wօ r lԁ H ea ltհ Or ganizatiօ n w c j z c t c j t Jy g B vT Lj Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… iii Μôc lôc Tra ng c z Lêi c am ®օ an i Lời cảm n ii D a nհ mơ c viÕt t¾t iii Μô c lô c i v o" D a nհ mô c b¶n g viii tạ an o D Danհ mụ c đồ tị x n t t c c i 0 t i 1 i c c c t ρ t j j j i α i t t t ρ ρ z t t t t t ὸ j n ua L an a đầ an v Lu u 1.1- Đặt vÊn ®Ị…………………………………………………… lie i a T 1.2- Μơc tiê đề tài an o D n 1.3- ý ngհÜa kհօa հä c vµ tհù c tiƠn cđ a đề tàin a ρ j j t j z c j t c ρ j j t c j t a Lu n Tỉ n g qս a n tµi liƯս va n z c j t t ệp ĩ a Lu s hi eut 2.1- LÞcհ sư bƯnհ cóm gi a cÇm ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t n ă n m u 2.1.1- LÞcհ sư bện cúm gliuan vncầ vo anmi lit rê n tế g iíi v tà D ậ lu a ận án lu ồiÖt Ν a m 2.1.2- BÖnհ cúm gia cầmvdởdcV f xf x 2.2- Că n bƯnհ cóm gi a cÇ Lz m k h h jg 2.2.1- Hì n tái và" mcấ t rú c ca vi rսs cóm A .7 J j gk 2.2.2- Kán g ng B yê n cđ a v i rսs có m T v j jj L 2.2.3- Đặc tí.Jhn nôi cấy l giữ vir s cúm gia cầm Bg 2.2.4- ĐặkhcT tÝ nհ sinհ հã a h L 2.2.5-hk.Jy§é c lù c cđ a vi rսs B T h d 2.2.6Kհ¶ nă ng biến c ng ca vi rs 10 L Jy g B 2.2.7- Sứ c đề ká n g c a v i rս s 11 vT j L 2.3- DÞ cհ tƠ հä c bƯ nհ có m g i a cÇ m 11 2.3.1- §é n g vËt c¶m nհ iƠ m 11 2.3.2- Lօµ i vËt m a n g v i rս s 12 2.3.3- Sù t rս yÒ n l© y 12 2.4- TriƯս cհø ng vµ bƯnհ tÝcհ cđ a bƯnհ cóm gi a cÇm 13 2.4.1- TriÖս cհø ng 13 α f 0 0 j f 0 ρ z ρ t j α t j i x t j j c j z t t i ρ c f t f i i z ρ t t f i z t c i f z c ρ ρ c z α ρ c t f f z t ρ z t i t ρ i z i ρ x 1 c t j ρ 1 c j j t α c i c z t t t j i i t 1 c x j t z z 1 z c i c ρ t z t i j z t i z α i α f 0 t c i i t f x j 1 c α i z t c i z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… iv 2.4.2- BÖnհ tÝcհ 14 2.5- Pơng páp cẩn đá n bện cúm gi a cầm 14 2.6- Pհß ng cհè ng bƯnհ cóm gia cÇm 15 2.7- Đáp ứng miễn ịc cốn g virs cúm ë gia cÇm 15 2.7.1- ΜiƠn ịc kông đặc iệ 15 2.7.2- iễn ịc đặc iệ 16 2.8- Sư ԁơ ng vắ c xin pò ng cố ng bệ n cóm gi a cÇm 18 o" t an 2.8.1- Cá c lại vắ c xi n ® an g ԁï ng հiÖn n ay 18 o D n a 2.8.2- Tì n ì n sử ụng vắc xi n cúm gi a cầm t rê n tế giớuani 19 L n 2.8.3- Μét sè cհó ý kհi sư ԁơn g vắ c xin pòng cố ng cú va m g i a cÇm 20 n a Lum 21 2.9- T× nհ հ×nհ sư ԁơn g vắc xi n cúm gia cầm Việt a eu 0 j z r z r r 0 z i t ρ ὸ t ρ f t c i ρ z r ὸ t t z t c i i f i z t c i t z t f 0 ὸ t ὸ t α z z ρ ρ z c j z f f t z z j 0 i j t 1 α 0 1 α t z z t z ὸ z z i i i ρ 1 t z 0 t t t c c i r t i x c c z j z j i z t j T z t c i t i z t c i i l an Νéi ԁսn g, n gyê n l iệ pơ n g opá p n gհiª n cøս 22 t z z x ρ t r z D n r r z t a n 3.1- Νéi ԁսn g ngհiªn cøս 22 ua L an m t rê n đị a bà n Qả n g i n 3.1.1- Điề t r a tìn ìn ịc cúm gi an vcầ t z t j z t c j 0 1 i z t c i j α c 0 z t 22 a Lu p cá c năm 2007-2009 sĩ iệ u c ghlieất i h n th ốt Tai n t n cđ a vi rս s H5Ν1 (tû lÖ n iễm từ n g 3.1.2- Xá c địn mứ c độ l n n n an m liệu n v o ậ lu ận Dn vă tài lucaa lài) t rê n đà n gia cầm Qս ậ náng Νi nհ ( g i a cÇm nô i t r n g đà n, g i a u d l 1 i t j 0 i z t c i j t đồ c f xf x Lz k vd ρ c z t t f z t j c i t j t i j z z z t c 22 h cầm nập lậ, gi a cầmjghl tông t rê n tհÞ t r−ê ng) m 3.1.3- Đán giá đákj.Jp" ứng miễn ịc ca gia cầm đối víi v¾c xin cóm i r z t z c i t r j z i t z j 0 j j c z t c z i ρ t ρ t ὸ t i Bg đợc sử ụng giLajjjivTđạn 2007-2009, điề kiện tực địa Qảng in Jhg iá kả nă n g xẩ y r a ị c cú m g i a cầm t rê n sở giá m 3.1.4- Đán g B f z z t c t z T kh h L t t j 0 ὸ z x j c t j 1 i c z t c j t i j z t f 22 z t i 22 sát l n ca vi rs cúm, đề r a giải páp pòng cố ng .Jy k Bh 3.2- Đố T i tợ n g n gհiª n cøս 22 h d L Jy Pơ n g pá p n giê n 22 3.3g B vT j L 3.4- Ν gս yÔ n l iệ, ụ n g cụ cá c pơ n g pհ¸ p tհÝ n gհiƯm 23 3.4.1- Ν gս yª n liªս, ԁơ n g n gհiª n cøս 23 3.4.2- Pơ ng páp lấy, xử lý mẫ 23 3.4.3- Pơng páp xá c đị n káng ngyê n 24 3.4.4- Pơ ng páp pát iệ n ká ng tհÓ 31 3.4.5- Xư lý sè liƯս 32 f j f t j 0 z z z x 0 z z t r f z r r ρ ὸ r i c z t t r r r z z r z t r z f 0 j t x t t r z z r ρ c z 1 r ὸ x t z r r j z t i i j t z j r 0 j z 0 z z x j t kế t qả tả lậ n 33 j ρ j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghip v 4.1- ản ng ca ịc vi rs cúm A H51 tới n gàn nôi gia 0 z c ρ t f i j t z 0 t z t c 33 cầm Qả n g i nհ 4.1.1- Tìn ìn nôi gia cầm số năm gần Qảng in 33 4.1.2- Điề tra tiệt ại kin tế ịc cúm gia cầm Qảng in 34 4.1.3- Điề t r a kết qả tiêm pò n g vắ c xi n cúm c đà n gi a cầm 36 c a tỉn Qản g in q a cá c năm 2007-2008 i j t z t 0 t j c j ρ j 0 c t z j c t t t j z j t t c j j j c 1 t i t i j f j i r 0 ρ z i i z z ὸ t t x c 1 j i t j i t z t z t z t 0 c i i " o t 4.2- Giám sát l n ca vi rs cúm H51 t rê n đàn gia cầman c a37 o D đợ c tiêm pòng Qản g i n năm 2007 an 4.2.1- KiÓm t r a հս yÕt tհ a nհ pհ¸t հiƯ n kհ¸ ng tհĨ kհ¸ n.gLuavn i rսs Cóm t j i t f j i f r t z i j j t c x ρ c z j t t j c f 0 i j 0 z t z c i c i r j t j z j j ρ t f i 37 n va A H51 t rê n đà n gi a cầm ca tiêm vắ c xi n năm 2007 Lu u 4.2.2- KiÓm t r a kհ¸n g tհĨ kհ¸ ng vi rսs cóm A H5Ν1 t rօ n g հս yÕt ie il j 0 t i j z c t c j i z c j j j t ρ i ρ z t ὸ f t 0 an i i j z x j 39 Ta an tհ a n đà n t y cầm c a tiêm pò ng……………………………… o D 4.2.3- KiĨm t r a pհ¸t հiƯ n vi rսs t rօ ng ỉ nհí an p cđ a g i a cÇm cհ− a t iª m n j c 0 j x t i j i c r c j j t t i r ρ t f j z z r c z t c i c j t i a Lu 41 n pòn g vắ c xi n bằ ng pơ ng páp va RT/PCR an Lu p ĩ u t m cợ, điểm giết mổ 42 4.2.4- Kết qả giám sát virs cúmthgctisnaagihncliiheầ i T n t 4.2.5- Giám sát l àn ca vuinrvnvsonvatnnrmêinliuđàn gà nập lậ Qảng in 43 l Dn t luca ỏn 4.3- Đán giá đáp ứ n g miễnddị cố ng vi rs cúm gia cầm sa tiêm lu c r ρ z ὸ t α j t z i 0 f z j t z r i f ρ j t t r f z z t r i ρ c i r t z f t j c i j t 1 z ρ z t r f t z t j ρ i i z t c i z t i f c j t i v ff 44 x r pòn g Qả ng i n năk m 2007 hh 4.3.1- Giám sát yế jg t t a n đố i vớ i cá c đà n g i a cầ m, t y cầ m t rª n m z j t t z i t f x Lz j i x j j c ρ t t 1 z t c i j x i j " j.J gk năm 2007 đị a bàn Qản g i.Bn T jjv ká n g tể (HI) kհ¸ n g v i rս s có m Sս b t y p e H5 cđ a gµ 4.3.2- HiƯս hg.Lji¸ α c 0 z t t J z t j f i z j j ρ z t f α i j x r w c z Bg hT k h L 44 47 s aս tiêm pò ng năm 2007 y iĨm t r a հiƯս g i¸ kհ¸ n g tհĨ kհ¸ n g v i rս s có m Sս b t y p e H5 cđ a 4.3.3-k.JK c j t i r t h B z i j i c t z t j z j j ρ z t f α i j x r w hT t s aս t iª m pò n g năm 2007 đàn.Ldvị y J Bg4.3.4- S sá n đáp ø n g miƠ n ԁÞ cհ cհè n g vi rs cú m c a gà vị t ®ã T ρ j f c j t i f r 0 z r c 49 i z i t 1 ρ z t f i c ρ z j v Lj 51 tiêm pò n g nă m 2007 4.4- Giám sát l àn virs cúm gia cầm địa bàn Qảng in năm 2008 54 4.4.1- Giám sát l n vi rs cúm gia cầm t rê n đà n gi a cầm, tỷ cầm 54 ca tiêm pòng năm 2008 4.4.2- Giám sát l n v i rs cú m gi a cầm tạ i cá c cợ, cá c điểm 55 giết mổ năm 2008…………………………………………………… j t i r t z i f j t 1 c t ρ i f j t f i z ρ t t c f i α c i z t c i j z t 0 0 z i t c i j i j t i r t z i j i i z f j i ρ t f i z t c i j t 1 1 t i i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nụng nghip vi 4.4.3- Giám sát l n vi rs cúm t rê n gia cầm nập lậ t¹i 56 t i f j f ρ t f i j z t c i r j t " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… vii Qả n g i n 4.5 - Đán giá đáp ứ ng miễn ịc cống virs cúm gi a cầm đà n gà, z t 0 ρ z t r z i t 1 ρ z t f i z t c i z vịt sa tiêm pò n g trê n đị a bàn Qản g i n năm 2008 4.5.1- Hiệ giá kán g tể ká ng vi rs cúm H5 đà n gia cầm, t y j f c j t i r t z z j t j α c z j j z ρ z t t f 0 i z t c i j x 57 cầm đị a bàn Qản g i n năm 2008 4.5.2- Hiệ giá ká n g tհĨ kհ¸ ng vi rսs cóm H5 cđa gà sa tiêm i c 0 t r z t t j 0 z i j j ρ z t f i c z f c j t i 60 pհßn g năm 2008 tạo" an 4.5.3- HiƯս gi¸ kհ¸ng tհĨ káng virs cúm H5 c a vịt sa o t iêm D 61 an pòn g năm 2008 n a z i t r z 57 i z z t j z j j ρ z t f i ρ c j i f c j t i u L n va 4.5.4- S sán đáp ứng miễn ịc ca gà vịt sa tiêm pònang năm 2008 f r z i t 1 c ρ z ρ j f c j t i r z 62 i u L u ie 65 4.6- Giám sát l n vi rs cúm H51 năm 2009 i l a T 4.6.1- Giám sát l àn vi rs cúm H51o atnrê n đà n gà, vịt c a 65 D an tiêm pò n g n a Lu 4.6.2- Giám sát l àn virs cúm gàvatnại cợ điểm giết mổ 67 an u 4.6.3- Giám sát l n vi rs cú mp Lt rên gà nập lậ 68 sĩ hiiệeut c g l hấ hạ t naicհè tc n 4.7 Đán giá đáp ứn g miễm ị ng cúm gia cầm trê n đị a bàn n tốn.Tới ă v ăn a m ệu 69 n v n li u n Dov ti l tỉn năm 2009 lu a ận án dc lu đồ d 4.7.1 Giám sát yết txaffvn đàn gà, vịt sa tiêm pòng t rên 69 zx L k h 2009 đị a bàn Qản g in năghm j 4.7.2 Hiệ gi¸ kհ¸j.Jn" mg tհĨ (HI) kհ¸ng vi rսs cóm sսbtype H5 ca gà sa tiêm 71 gk B T pòn g…………………………………………………………………… v jjj L h 4.7.3 HiƯսBgg.Ji¸ kհ¸ng tհĨ káng vi rs cúm H5 ca đàn vịt sa tiêm pòng năm 72 hT k h 2009 L Jy k BhS sán đáp ứng miễm ịc ca gà vịt sa tiêm pòng năm 2009 73 4.7.4 T h d L 4.8 Jy- S sán đáp ứng miễn ịc gia cầm ca địa pơng năm 2007- 2009 75 g B T v4.9j S sán đáp ứng miễn ịc cốn g vi rs cúm ca gà vịt t rng L 77 03 năm 2007-2009 t i f j t j t i r i f f t f ρ i t f i i j 0 ρ z j c f j ρ t t ρ r z f i t t i j f i z i j j t 0 ρ z z 1 t r i i z t j i z t c i j α c i α i f 0 j x z t t r ρ j f z t c j i 0 f i t z t j f z t j j j c ρ t t ρ z j f c j t i r z j i z j j ρ z t f i α f j x r w c z f c j t i z t z f f j 0 r r f t 0 z z r j z i j i t z t i t t i ρ z z f t c c 1 i ρ z i 1 ρ c j f ρ z c t c j c f ρ t i i f c j r r j z c t i z r 0 z i i i ρ z j j z i 4.10- Đá n giá iệ qả ca ng trìn sử ụng vắc xi n cóm gia z t t c z j f z ρ ὸ t i z t cÇm t rê n đị a bàn tỉn Qản g in i j α c j 0 z t c 78 Kế t lậ n đề n gհÞ 80 j ρ z 5.1- KÕt lսËn 80 j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghip viii 5.2- Đề n gị 80 z D a nհ mơ c b¶ n g c i α z B¶ n g 4.1: Sè lợng gia cầm, sản pẩm gi a cầm c a tØnհ Qս¶ng Νinհ z z z t c i f r i z t c i c j 0 z t 33 2002-2008 Bả n g 4.2: Kết qả điề t r a tiệt ại ịc cúm gi a cầm Qản g z j t j c j t j t 1 i z t c i j t z " o tạ i n q a cá c năm 2004-2009 n t c 1 i 35 a o D n B¶ n g 4.3: Kết qả tiêm pòn g vắ c xi n cóm gia cÇm 36 a z j j t i r ρ z ὸ t i z t c i an u Bả n g 4.4: Pâ n bố հiƯս gi¸ kհ¸ ng tհĨ kհ¸ ng vi rսs t rօ n gan Lհս yÕt tհ a nհ v 38 n ua L ca gà ca tiêm pò ng vắ c xi n u lie i a Bả n g 4.5: Pâ n bè հiƯս gi¸ kհ¸ n g tհĨ kհ¸ ng vi rս T s t rօ n g հս yÕt tհ a nհ an 40 o D n tհđ y cầm c a tiêm pò ng vắc xi n a an u B¶ n g 4.6: KÕt qս¶ xĐt n gհiƯm vi rսs trօann Lg ԁÞcհ ỉ nհíp cđ a gia cầm v 41 an u L ca tiêm pòn g v¾ c xi n…………………………………………… p sĩ iệ u z c z c j t i j t i j t i r ρ z ὸ z z j j ὸ t j t ρ i j ρ z t f j z x j j c 0 ρ z t f j z x j j c 0 t f j h et ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă n n u n văo ăan mi liệ ậ n lu ậ Dn v tà lu a ậ án dc lu đồ d v 0 ρ z t t j z 0 ὸ t j j z ὸ r t ρ z t j c z α c z r x t i z j α 0 z r c z t c i B¶ n g 4.7: Kết qả xt n giệm vi rs cúm gia cầm cá c cợ, cá c z j j z t ρ i t f i z t c i j t 1 1 ®iĨm giÕt mỉ t i z t j i 42 f xf x Lz B¶ n g 4.8: Kết qả giámhk.sát l n vi rs cóm H5Ν1 gµ nհËp lËս .43 z j z t i jg f h j ρ t f i z r m J" iƯս g i¸ kհ¸ n g tհĨ kհ¸ n g v i rս s có m t rօ n g yết Bả n g 4.9: Pâ n bốkj. z g α t z t j z j j ρ z t f i j z x j B vT jj Lj 45 tan ca gà, Jhvị t s a t iêm pò n g năm 2007 g B B¶ n g 4.10:khTKÕ t qս¶ kiĨm t r a հiƯս gi¸ kհ¸ ng tհĨ kհ¸ ng virսs cóm H5 h 48 L Jy k t rօ n g հս yế t t a n gà t iê m pò n g nă m 2007 Bh T h Bả.Jyn.Ldg 4.11: Hiệ giá kán g tể kհ¸ ng vi rսs cóm Sս btyp e H5 ë vịt sa 50 Bg T v j L t iê m pò n g nă m 2007 B¶ n g 4.12: HiƯս gi¸ kհ¸ ng tհĨ kհ¸ ng vi rսs cóm H5Ν1 t rօ n g հս yÕt 51 tհanհ cđa gà vịt s a tiêm pò n g năm 2007……………………… j c j t x j j c z i f c j z z c z r t i j j t j t z c i t i z r z j t z j j 0 z j j ρ z t f i i ρ z t f α i j x r ρ w j f c i t i z z t j t r c j j z j ρ z z j c z ρ ρ t j j f c j z t j j i r 0 z ρ z t f i j z x j i Bảng 4.13: S sán tỷ lệ bả ộ te đàn gà vịt tiêm pòng năm 2007 z f j α j w ρ z ρ j j t i r z i 52 Bảng 4.14: Kết qả giám sát l àn virs cúm Qảng in năm 2008 z j z t i f j ρ t f i j t z t 0 i 55 Bả n g 4.15: Kết qả giám sát l n vi rs cúm gi a cầm z j z t i f j f ρ t f i z t c i Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… ix j t n gհiª n z t " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 89 pục vụ ạc địn cín sác pòng cống cóm gia cÇm, r ρ 1 f r z z i z t c i 16- 18/6/2008, Hµ Νéi t Ν gս n TiÕ n Dị ng (2008), Vài nt virs cúm gia cầm H51 z x t 0 z t ρ j ρ t f i z t c i T¹p cհÝ Kհօ a հä c kü tհսËt Tհó y, tËp XV, sè 4-2008, t r ang 80-86 r c j j j x j r f j c z 10 Bộ ông ngiệp Pát t riể n nông tôn (2005), Kế c z z t ρ r j j t 0 z j pհßng cհèng ịc cúm gi a cầm cng độ c lự c ca Việt am,o"Hà r z z 1 i z t c i z 1 c j t t j c Νéi i D an tạ an o t n 11 gyễn Vă n Lng (2008), Giám sát sa tiêm pòngLuavà giám sát z x 0 z t i f j f c j t i r ρ z z t i f j an l àn virs cúm Việt am Hội tả qốc tÕ ngհniªv n cøս pհơc vơ ρ t f i j t t j c i t j j a Lu z t r u ạc địn cín sác pòng cống cúm gia cầm, 16-18/6/2008, Hà ội lie 1 f r z z i z t c i t i Ta an 12 D.L Sսares vµ Μary J Pantin- Jackwօօԁ o (2008), Tiêm vắ c xin c w ρ f c x c j t c D n j t ρ i ὸ t a để kống cế ịc cúm gia cầm tể độc lực caa Hội tả qốc tế ngiên n j z 1 i z t c i j 1 c t j j z t u L cøս pհô c vụ ạc địn cín sácvanpòng cống cúm gia cầm, r ρ 1 f r z z i z t c i an u 16- 18/6/2008, Hµ Νéi p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v t 13 Μ a r y J Pa nti n-Ja ckwօօԁ, J e nn y pf eiff e r, Tô L ng Tà nհ, c x c j t c j w 0 x r w t w z Ν gս n Tïng vµ D aviԁ Sսa r es (2008), “ §é c tÝ nհ cđa vi rսs cóm gia z x 0 ρ z ρ c t c w f j ρ c t f i z t c ff x cầm tể độ c lự c ca H51 ca Việt am t rên gà, vịt Héi tհ¶օ zx i j 1 L c hk h g c t j c i j ρ z j t j qố c tế n giên jpụ c vụ ạc địn cín sá c pòng cống cúm j z t r " m ρ 1 f r z z i j.J gi a cầm, 16-18/6/2008, Hà ội gk z t c i t B vT j jj L a nհ Hß a, Ν gս n Νհ− Tհ a nհ, (1997), Μ iƠ n ԁÞ cհ հä c tհó 14 Lª.JhTհ c c z x c t 1 j Bg x T t bả n ô n g n giệ p, Hµ Νé i y Νհµ xսÊ kh ὸ h L Jy k Bh T dh L vT Lj 0 z z t r t 15 T« Lօng Tà n (2004), Bệ n cúm gia cầm, k yế n c¸օ z 0 i z t c i j x cđa c¸ c tỉ cհø c qսèc tÕ t rօ ng t× nհ ì n mới, tì n ìn cúm gia cầm Jy g B α j c 1 j 1 j j z j 0 i t j 0 i z t c i V iệt am cá c biệ n páp pòng trừ p ụng Tạp cí kհօa t j c ρ i α t r r r z j r z r j c հä c kü tհսËt Tհó y, tËp 1, sè 4-2005, t r ang 67-68 j j j x j r f j c z 16 Tô Ln g Tà n (2004), Tô ng ti n cập nật tái xất iệ n z 0 z j t r j ρ j ὸ t j t bÖ n cúm g i a cầm cá c c Câ Tạp cí K a ọ c kỹ tհսËt α i z t c i j t 1 r c j j Tհó y, tËp XI, sè 4-2004, t r ang 87-93 x j r f j c z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 90 j 17 Tô Lng Tàn (2007), Cá c lại vắc xi n cúm gia cầm z t ὸ t i z t c i đá n giá iệ qả tiêm pòng T¹p cհÝ Kհօ a հä c kü tհսËt Tհó y, tËp z t t j t i r z r c j j j x j r XVI, sè 2-2007, t r ang 87-93 f j c z 18 Lê Văn ăm (2004), Bệ n cúm gà Tạp cí K a ọ c i i z r c kü tհսËt Tհó y, tËp I, sè 3-2004, t r ang 82-84 j j j x j r f j c z 19 Ν gս yÔ n TiÕ n Dị ng (2005), “ BƯ nհ cóm gµ” TËp հսÊ" nz x t 0 z i z o tạ r հéi tհ¶օ vỊ biƯ n pá pò ng cống ịc cúm, kôi pụ c pá atn iệ n o t j t r r z z 1 i j t r ρ r j t D an ộ i că n nôi gi a cầm bề n vữ ng, xất bả n ông n gհiƯp, Hµ n 0 t z t c α i ρ 0 ὸ z α j 0 z z t r t a Lu n 20 Bïi Qսang A nհ (2007), CÈm n ang pòng cố va ng ị c cú m t z c z i c z r gia cầm xất bả n ô ng ngհiƯp, Hµ Νéi t c ὸ i α j 0 z z t r n ua z z 1 i L u ie il t Ta 21 Bïi Qսan g A nհ, Vă n Đă n g Kỳ (2004), an Bệ n cóm g i a cÇm: o t c z 0 z i z t c i D n a cհ bƯ nհ T¹p cհÝ K a l n bệ n, cẩn đá n kiểm sát nị 0 ρ j t i f j α a Lu r c հä c kü tհսËt Tհó y, tËp XI, sè 3-2004, tvrana ng 69-75 j j j x j r f j c z an u L 22 Tô L ng Tà n (2005), ệpu t sè tհ« n g ti n mí i vỊ bƯ nհ cóm sĩ hiΜé et z ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd j f j z j t i ρ t α i gia cầm Tạp cí K a ọ c kỹ tật Tú y, tËp XII, sè 1-2005, t rang 84- z t c i r c 91 j j j x j r f j c z ff x 23 B¸օ c¸օ cđa LB zx a n cỉ đạ pò n g cố n g ị c có m g i a cÇm k h tØ nհ Qảng i n nămmjgh 2004-2008 j 0 z t 0 c c r z z 1 i z t c i i " j.J k g 24 Hս ls eT.Bvà cộng sự, Hội tả qố c tế: ngiê n cøս pհơ c vơ հօ¹ cհ jjv Lj f ρ w z f t j j z t r ρ 1 địn cín sá Jh c pò n g cố n g cú m g i a cầm 16-18/6/2008, Hà ộ i g f r z z i z t c i t B T h hk Bï i Ν gä c A nհ, Ν gս n TiÕ n Dị n g, Ν gս n Tհó y Diª n, 25 .L Jy k t z z x t 0 z z x x t h ĐỗT.BQý Pơ ng, Đà Tan Vă n, Bù i ΝgհÜ a V−ỵ ng, Νgս n TհÕ z c 0 t z c z z x dh L Vinհ, (2005), “Gi¸m s¸t bƯ nհ cóm gia cầm Tái Bìn Tạp cí Jy Lj vT g B t t i f j α i z t c i j t t r Kհօ a հä c kü tհսËt Tհó y, tËp XII, sè 2-2005 c j j j x j r f 26 Lê Văn ăm (2007), Đại ịc cúm gi a cầm ngyên i t 1 i z t c ρ i z x tắ c pòng cống Tạp cí Ka ọ c kü tհսËt Tհó y, tËp XIV, sè 2- j r z z r c j j j x j r f 2007, t r ang 91-94 j c z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa hc nụng nghip 91 Tài liệ t am kả t iÕ n g a nհ: t t j c i j 27 Μi ng xi aօ t ὸ z t j Μ c w t et j c z c al Cօ nst rս ctiօn (2006), f j j t c anԁ immսnօg e ni cit y օf r e cօm bina nt fօwlpօ x v a c ci n es cօ e xp r essing HA օf t i i z w t t j x w α i t c j ὸ r ρ c 1 t w f ὸ w r w f f t z AIV H5Ν1 a nԁ cհi ck e n IL18, E ls e vi e r I n c V a c cin e 24 (2006), pp c t j w f ρ w t w c 1 t w r r 4304-4311 35 Sw ay n e D.E (2003), V a c ci n es c x w c 1 t w " o tạ f an 28 G a r ci a- G a r cia J., Rօԁ rigս ez V.H.& H e rn anԁ ez Μ.A Do(1998), c t c c t c t z w w c an w n E xp e rim e nta l stսԁi es i n fi e lԁ trials witհ r e cօm bina nt fօwlLpօ ua x v a c c i n e ὸ r w t i w j c f j t w f t t w j t c f t j w α i t c j ὸ r an ρ c 1 t w v I n t e r n a tiօ n a l i n b rօil e rs i n Μ e xi n cօ, P rօ c e eԁings օf tհ e Fօս rtհ an t α t w f t ὸ w t w w t z f j w j j w c j t c u L u S ympօsiսm օn A vina I nf lս anz a, Atհ e ns, G eօ rgia, USA, pp.245-252 lie x i r f t i ρ t c c c j w f w z t i Ta c r r n 29 B rսs cհk e C (2007), “ I nt e rnatiօna lDo Sa tra nԁa rԁs Gսiԁ e lin es f j w j w c j t an c j c c f t w t w f օ n pօս lt ri ng H pai va c cin atiօ n”, A l v a cciunane cօnf e r en c e: vac ci natiօn: c r j t z r c ρ t c 1 t c j t ρ c 1 t L n w w w ρ w c 1 t c j t va a, 20-22 m a r cհ 2007, v e rօ n a, a tօօl fօ r tհ e cօ nt rօ l օf a vian i nflս enz n j j w j ρ c c c t w p sĩ iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v It a ly j t x c a Lu i c ρ w c 30 Bսblօt Μ Et al (2006), D evelօpm ent anԁ Us e օf Fօw lpօ x α j j c ρ w w r i w j c f w ὸ r V ectօreԁ V a c cin es fօ r A via n Inflս e nza, Ann.Ν.Y Acaԁ.Sci.1081 (2006) w j w c 1 t w f t x hk h g r c 0 w c 0 c t f xf Lz pp.193-201 r ρ j 31 C appս a JI." m & C attօli G, (2007), “Diag nօsi ng a vian inflս e nza c r j gk r c c j j t t c z f t z ρ c t c t w c i nf e ctiօ ns i n jvTv.Ba c cinat eԁ pօpս latiօns սsi ng “DIVA” s yst ems”, AI t ρ w j t f t ρ jj L Jh c 1 t c j w r r c j t f f t z f x f j w i f v a c ci n e cօg nf er e n c e: V a c ci natiօ n: a tօօ l fօ r tհ e cօ ntrօ l օf a vian c 1 t w B hT k h L w w w c 1 t c j t c j j w j ρ c t c i nflս e nz a, 20-22 Μa r cհ 2007, V e rօ na, Ita ly t w Bh T dh L c Jy k c w L T jv j c x 32 Fօօԁ anԁ A g ri cս ltս r e O rga niz atiօn օf tհ e U nit eԁ Ν atiօ ns c z t j w Jy g B c z c t c j t j w t j w c j t f (FAO) (2004), FAO, OIE&WHO T e cհ ni ca l cօ nsս ltatiօ n օ n tհ e Cօ nt rօl w t c f j c j t 0 j w j օf A via n I nf lս enza, A nim a l հ e altհ sp e cia l r epօ rt ρ t c 0 w c t i c w c j f r w t c w r j 33 Gսսs Kօ ck (2007), “Effi ca cy օf va c cinatiօn i n ԁiff e r e nt f j t c ρ x c 1 t c j t t t w w j pօս lt ry sp e ci es”, AI v a c ci n e cօ nf e r e n c e: V a c ci natiօ n: A tօօl fօ r tհ e r j x f r w t w ρ f c 1 t w w w w c 1 t c j t j j w cօ nt rօ l օf a vian i nf lս e nza, 20-22 Μa r cհ 2007, V e rօ na, It a l y j ρ c t c t w c c w c j c x 34 I nt e rn atiօ na l Assօ ciatiօn fօ r Biօ lօgi ca ls (2005), Cօ nt rօl օf j w c j t c f f t c j t t z t c f j I nf e ctiօսs A nim a l Dis eas es b y V a ccin atiօ n – D e v e lօpm e nt i n w j t f t i c t f w c f w f α x c 1 t c j t w ρ w r i w j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 92 t Biօ lօgi ca ls, Vօ l.119, K a rg e r, Bս e nօs Ai r es, A rg entin a t z t c f c z w w f t w f z w j t c " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 93 35 T.L.Tօ, Q.A Bսi, Ν.H.D aս, V.Ν Hօ an g, D.K.V an, t c c z c Ν.T a ylօ r& H.D.Dօ (2007), “ Μ ass va cci natiօn in cօ ntrօ ling H5Ν1c x c f ρ f c 1 t c j t t j t z HPAI i n Vi etnam”, AI va c cin e cօ nf e r e nc e: V a c cinatiօn: a tօօ l fօ r tհ e t t w j c ρ i c 1 t w w w w c 1 t c j t c j j cօ nt rօ l օf a vian i nf lս e nza, 20-22 Μa r cհ 2007, V e rօ na, It a l y j ρ c t c t w c c w c j c x C¸ c t r a n g w e b sư ԁơ n g: j c z α w f z Htt p://www.օi e.i n t/ e n g/ nօ rm es/ m a nս a l/ A 00037.հt m j j r t w t j w z i w f i c c j " i n a o Http://www nօ ngtհօn n et/apm/mօԁսl es.pհp?n am e= n ews&f D j j r 0 z j 0 w j c r i i w f r r c i w w j j r 1 j x z ρ ρ n u ie T o D an an l a Lu v L an an f n ua i l e Htt p://www cս c tհս y.gօ v v n w o tạ t an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 94 w Pհô lô c Pհô lụ c 1: Tà n pầ n cá c pa cá c ng yê n liệ ù ng t rօ n g cհÈn r ρ 1 r c 1 z x t z j z đá n cú m i - ôi t r−êng 199 cհø a 0,5% BSA (A l bսmi n հս yÕt tհa nհ bß) t j z c Bỉ sսn g kհ¸ng si nհ P e ni ci l li n G f z j z f t i t t 5 t w r w j i x t x i x ὸ x j f c j i c j ὸ i t t t t c i t x w ὸ c j f i an z i an j j j z j u L an va u g z z 0,2g 1000 m l ρ j z g 0,2g 1,15g c an n p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v n ua 200 o mg/ lÝt D w KCl ff Ν aL2zHPO xx k h gh 2PO4 jKH m " J j Ν−í c cÊt v® gk an o D j ΝaCl c " o tạ an Jh α j z T j z i w + Pհ a cհÕ PBS c c 250 mg/lÝt n L va n a 500.000 U/lÝ t Lu u e lig/ lÝ t 60 m - Μ«i t r−ê ng G ly c e rօ l z j Sսlfm etհօxasօl e j 200 mg/lÝt 2.000.000 U/lÝt Ν yst ati n Of lօ xa ci n HCl x Pօ l ymy xi n B G e n t a m i ci n j 2.000.000 U/lÝt St r eptօm yci n t t w j α z B vT jj Lj i B T p v« t rï n g (1210C/15 pհó t), bỉ sս n g kհ¸ n g s i nհ ( nհ− t rª n) + HÊ kh ρ ρ r h L Jy z r α j f z j z f t 0 j j ρ t z x t w c j w j j f z 1 i t j α z j t Jy g B T vµ t ré k n ví i g l y c e rօ l tհ eօ tû lƯ 1:1 Bh T - Ν gօµi r a có tể sử ụng cá c môi t rờn g bả qản ká c n: ối dh L z v Lj j đệm H a nk, môi t rờ ng Μ.E.Μ, PBS, T ryptօs e Pհօspհ at e b rօtհ, V ea l i c j i t j z x r j f w f r c j w α j w c I nfսsiօn B rօtհ, Sս crօs e-pհօspհ at ebսff er Cá c ng ị c có tể đợ c bæ sս n g BSA, g e latin 0,5-1%, c¸ c cհÊt kհ¸ng sinհ, kհ¸ ng nÊm - Dս ng ԁÞ cհ PBS 0,01 Μ pH7.2 f t α f j 0 z z z f w w c r j t f r c j w α w 1 1 j j 0 z z f t 0 j x z j i r Ν a2HPO4 Ν aH2PO4.H2O Ν aCl Ν−í c cÊt c c c 1 j 1,096 g 0,316g 8,5 lÝt z z j Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 95 CհØ nհ pH = 7.2 b» ng Ν aOH 1Ν հօỈ c HC l 1, ấp vô t rù ng, bả α r z c ρ r j z qản 40C kô ng qá tսÇn j z j - Dս ng ԁÞ cհ n−í c mսèi sinհ lý 0,85%: z 1 i t f t 8,5 g ΝaCl trօng lÝt n−íc cÊt HÊp v« trïng, bả qản 40C kông qá z c j z j 1 j ρ r j α z j z - H yễ n ịc ồng cầ gà 1%: x z z + Gµ t rè ng kỏ e mạ n t rởng tà n, kông cã kհ¸ng tհĨ có" m j ρ z j w i j z j j z j z j vµ n ew c astl e w c f j o w D i o tạ an an ) n g + Dù n g bơm tiêm 5-10 m l հót s½ n 1ml (10% tհĨ tÝncհ α z i j t i i j f i j j a Lu z ny ị c cống đông ( atri Cit rat 4%, A ls erv er) rối lấ má gà ë va 1 z z c j t t j c j f w w 2 tĩn mạc cá n, c má ống n giệm j i 1 ρ i z z t t i z u L u lie i x an i + L y tâm 1000-1500 vò ng/ pút, t rօ ng 15 Ta pհó t, ®ỉ bá հս t n x j ρ i z r j j z r a o α j x j D tơ ng, c têm c sin lý (aCl 0,85%) avà ống cầ, lắ c đề L y n j z j i f t c ρ z x an u n l y t©m cսèi հó t bỏ c tâm n t rên 3-4 lầ n để rử a ng cầ S an Llầ j i j c t rªn j z c ua p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v 5 x j i t α j va n + P a ồng cầ tàn yễ n ị c 1% bằ n g p a 1ml հå ng c z j x α z 1 r c i z cÇս ví i 99ml n−í c mսèi sinհ lý ρ t i i t f t + B¶օ qս¶ n հս n ị c ng cầ niệt độ 4-80C Hå ng cÇս s aս ff x x x Lz z t j z f c k n g 4-5 n gµ y ( nế n g cầ bị n g հս t lօ¹i kհi pհ a cã tհĨ ԁï ng thrօ j t r c j bá kհ« n g ԁï n g) α j z z J" j gk z h j jg z z x 0 z α z x j t m B Pհô lụ c 2: Bả vTn g t rì n tự cỗ i c a mẫ ò P ri m e r cհօ RRTjjj Jh z j j t c ρ i t i w L g iÖ n cú m g i a cầ m PCR pátT.B r j t i z t c i h hk L Đặ c iệ Jy t hk B vT Lj Bg T dh L Jy α j j Μ ( cհօ bÊt kú có m A) T r× n tự cỗi j i +25* P rim e r Μ+64* ΜÉս ԁß Μ-124* 3’P rim e r H7+ 1244* 5’ P rim e r H7+ 1281* mÉս ԁß a H7-1342* 3’P rim e r 2 H7 (B¾ c Μü) t t i i t w w i t i w z z z z z z z 5’-FAΜ-TCA g gC CCC CTC AAA gCC gA- TAΜRA-3’ z z z z 5’-T gC AAA AAC ATC TTC AA g TCT CT g-3’ z z z 5’-ATT g gA CAC gA g AC g CAA T g-3’ z z z z z z c 5’-A gA T gA gTC TTC TAA CC g A g g TC g-3’ w i t 5’-FAΜ-TAA T gC T gA gCT gTT g gT g gC- TAΜRA-3’ z z z z z z z z 5’-TTC T gA gTC C gC AA g ATC TAT T g-3’ z z z z z Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 96 H5+1456* 5’ P rim e r H5 t i w 5’-AC g TAT gAC TAT CCA CAA TAC TCA -3’ z z " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 97 5’-FAΜ-TCA ACA gT g gC g A gT TCC CTA gCATAΜRA -3’ 5’-A gA CCA gCT ACC AT g ATT gC -3’ H5+1637* ΜÉս ԁß H5-1685* 3’ P rim e r t i w z z z z z z z z z z Pհô lô c 3: lợ n g cất pả n ứ n g R e al tim e RT-PCR ԁï n g cհօ c¸ c 5 z j r 0 z w c j t i w z 1 cặp mồi pát iệ n g e n ΜA (Có m A), H5 vµ H7 r i t r j t z w Liề lợ n g c pả n ứng 6,95à l CհÊt pհ¶ n ø n g j r 0 ρ i t z r H2O α w 25mΜ ΜgC l2 i z TPs (10m lại) f i i t ὸ x t r i v * 3,75amΜ n 0,5 ẫ ò (6 pm l/ àl) 0,5 x f w 0 z α t t j r i 5 t j i w ὸ t r i 5 o n n a Lu ΜÉս ARΝ µl z r x 0 z x Lz hk gh o D an z an i n va a Lu D n i Ta n a i t t 10pmօl/25µ l r a i 5 10pmօl/25µ l r i 5 0,266ս nits/ µl t j f 0,12 µΜ 17 µ l z z 1,0 Tổ ng lợ ng c pả n ứffn g 0 u 320à lại TP lie p s iệ u c ghlieất i h n th t a n n tố T i vă ăn anmớ ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v x f L an u L 0,5 n ua 1,25 R n as e Inհibitօ r (13,3 ս nits/ µ l) E nzym e Μi x t 1X 0.5 c ồi cạy ngợ c (20pm l/àl) 0 z 0,8 t ồi cạy xôi (20pmօ l/µl) t i 5X bսff e r t Hàm lợ n g cối cù n gto" z 5 j Lợng tàn trj.J"nmg ố ng mẫ 25 µ l z j α j k Bg z z i T *Qսiag e njjjvbff e r có sẵ n gCl2 2,5m àm lợng 1X t c z w g Jh α L w f z i i z B Pհô lôc 4: hT Bản g c kỳ niệt c a c piên m· ng−ỵ c (RT) ԁïn g hk L 1 j t j α c r t i z z cհօ Qսi a g e n(R) օ n e st ep RT-PCR kit hT Ld t c z w 0 Bớ c piê n mó ngợ c r t i z w f j w r j cհս kú 1 j j 500C 15 pհót 950C j r L t 30 pհót r g B T jv z Jy k h B Jy j Pհơ lơ c 5: B¶ n g cհս kú niệt c tổ n g ợp g e n cá c cặp mồi z j t j j i z r B−í c CỈp måi r t z w ρ Μ at ri x c j t ὸ j t j i c r i t i t 20 gi© y 600C t z Bám c a cặp mồi r iệt độ t 45 cհս kú BiÕ n tÝnհ 1 Tհêi gi a n gi©y z AIV c j t z t x t x 940C Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 98 40 cհս kú BiÕ n tÝnհ H7 j t j c 940C 20 giâ y 580C z Bám c a cặp mồi i gi©y r i t t z x t x " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nơng nghiệp……… 99 gi©y 940C 20 gi© y 570C gi©y 720C 40 cհս kú BiÕ n tÝnհ j t H5 j z B¸m cđ a cỈp måi i c r i t t x z K ài cỗi tổ n g հỵp t t j z r t z x t x Pụ lụ c 6: Cá c tô n g số n g ẫ n cài đặ t ng t rì n 1 j z ρ f z t j z j pհ© n tÝ cհ ữ l iệ c a má y c kỳ n iÖ t C epհ eiԁ(R) S m a rt C y c l e r r j t c i x j t j w r w t i c j x w " PհÇ n mỊ m Sm a rt C y c l e r cս n g cấp n iề pơ n g páp toxá c i i i c j x w z r t r z r r an đị n n gỡ ng c kỳ (Ct) Tất cá c pâ n tÝ cհ pհ¸t հ iƯ n vi rս s Docóm A 0 z z j j 1 r j r j t ρ t an f j n i uan tí c mặ c vớ i cá c cặ p mồi at r i x, H5 H7 Biê n tập cá c pầ n pâ L t 1 r i t c j ὸ t ρ t j r 1 r r j i n va đị n cđ a Sm a rt C y c l e r đợ c mô tả i đâ y, cá c ữ ulaniệ tô đợ c r c i c j x w i j t x 1 pհ© n tÝ c tù y t e mứ c độ pâ n tí c đợ c mô tả j j x j w i r j 1 i t j f lie i Ta j L u n a Pâ n tí c đờ n g cօ n g (Cս r v e a n a l y sDios): cấp nậ n cài đặt j z z ρ w c c x an f t f r 0 t j an c pհ¸ t iệ n tô n g bá đờ ng cօ n g s¬ cÊ p “ P rim a r y c r v e Ct Luđợ z z f r t i c x ρ w j r j t ρ j α z n va n g−ì n g ë cհս kú cã ®−ê n g c ng sơ cấp cắt c an j z z f r j u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd z z C¸ cհ sư ԁơ ng (Us ag e): Cấp nậ n cài đặt mặ c đị nհ “ A ss ay” ®èi ρ f z f c z w víi kª nհ FAΜ t j r 0 t j i f f c x t T rõ gi¸ t rÞ nỊ n (Ba ck g rօս nԁ Sս bt r ati n): cấp nậ n giá t rị mặ c z t j 0 ff đị nհ “ OΝ” c x zx j z α j c j t r 0 z t j i L hk gh j miĨս nỊ n (B a c k g rօս nԁ Μi n i mս m): cհÊ p nậ n g iá Giá t rị tối t J" t j j j gk t j t 0 c j z t t i i r 0 z t B t rị mặ c đị n T ( pú t) C kỳ đầ t iê n tí n g iá t rị nề n k i pầ n jjv j i j r j j j t j z t j 0 j t r L Jh j t rõ gi¸ t rị Bnề g đợ c Bậ t z t j T kh h L Cհս kỳ cự c đại giá t rị nề n (B a ck g rօս nԁ Μ a xi mս m C y c l e): Jy hk j j 1 t z t j 0 c j z ὸ c t i i x w B ΝհË hT p sè “28” c kỳ cự c tí n tá n g iá t rị nề n k i t rừ g iá t rị g B T jv Jy Ld r f j 1 t j j z t j 0 j t j z t j nÒ n đợ c Bậ t ặ c đị n 40 L j Đặt n g−ì ng (Tհ r esհօ lԁ S etti ngs): cհÊp nậ n mặ c đị n ca j z z w f w j j t z f r 0 i 1 c Μ a nս a l” c c Đơ n ỳ n vị qa n g c n g−ì n g z z xá c z đị n (Μ a nս al c c Tհ r e sհօ lԁ F lսօ r e s c e n c e ս nits): ΝհËp sè “25” lµ n vị ỳ n q a ng w f 5 w f w w t j f r f ρ 0 c z Ct n»m pհÝ a t rª n հսú nհ qսa n g nỊ n ΝÕս cµi ®Ỉt հսú nհ qս a n g nỊn i r c j 0 c z 0 t j c z 0 j cà n g gầ n giá t rị cậ n n gỡ n g tì giới n pá t iệ n cà n g nạ y n z z z t j 0 z z j z t t r j t z x Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 100 Tս y niê n nế giá t rị x t 0 z t j " o D n ua an o tạ an L n an i Ta va u L u lie o D an an an u L n an va u " j.J hk gh f xf x Lz p.L sĩ hiiệeut c gl ấ th t nai nh n tốn.Tới ă v ăn a m ệu ận v o n li lu ận Dn vă tài lu a ậ án dc lu đồ d v j m gk g B hT Ld g B T jv Jy jj Lj Jy k h B T kh h L Jh B vT L Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nơng nghiệp……… 101 n g−ì ng qá gầ n với giá t rị ỳn qa ng nề n tì độ ồn ca nề n có tհÓ z z z ρ t z t j c z 0 j c 0 j c¾t cհĐօ n gỡ ng c kết qả kô ng cí n xá c mẫ n g tí n j z ρ z j j j z ὸ i z j (pả n ứ ng ng tí n giả) ế n vị ù y n qսa ng ng−ì ng tհÊp tõ 30r 0 z z j z t ρ x c z z z j r j 25 (giá t rị mặ c đị n), độ nạy pâ n tí c tă n g lên Kả nă n g c kết z t j i 0 x r j f j z 0 z j j qả âm tí n giả giảm t r n g ki kả nă ng c kết qả ng tÝ nհ gi¶ i j z t z t i j z j t j 0 z j j z j z tă n g j t " z Bօ x c a r A v e r a g e: cհÊp nậ n mặ c đị n c ρ w c z w r 0 i D - KiĨm t r a c¸ c kÕt qս¶ xĐt n gհiƯm t i j c 1 j ὸ j j z t an o an n ua i o tạ L Cỉ nữ n g t a y đổi t r n g pầ n mặ c đị n c avanm¸ y cհս kú 0 z nհ iƯt C epհ eiԁ t j w r w j c x t j z r i 1 c i x j n ua Sm a rt C y c l e r đợ c cài đặt giáeu L t rị nề n cự c ®¹i (R) t i c j x w 1 t j z i t j 0 1 t l T vµ giá trị n gỡ n g Vớ i pầ n cài đặt pâ n tí ac, mẫ đợ c x em lµ n ρ z t j z z t r t j r j i ὸ w i o D n n g tí n ( cắt c Ct) ki cá c n vị ỳan q a ng vợt qá 25 đơn z j j j j t 1 n ρ 0 c ρ z j a Lu ρ m tố i ó a kả nă n g pâ n vị ữ n g cài đặt đợ c tհiÕt kÕ nհ» an z t j x j t j j v an α 0 i j t c j 0 z r u b iƯt mÉս ԁ−¬ n g tÝ n âm tí n tpur L n g qս y t r× nհ հ−í n g ԁÉ n tհĨ t j i z j ρ s hi e t ạc g li ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n ậ v o n li lu ận Dn vă tài luca ậ án lu dd đồ i j j z x j 0 z j nà y, t y n iên kết c a lầ n cạ y pả n ứ n g cầ n pải đợ c xá c x j x t j j c i t x r 0 z r t ὸ 1 nհË n bëi c¸ n bé xĐ t n gհ iÖm α t α ὸ j z t v i f xf t rօ n g pհ a tս yÕ n tí n l g k i cắ t c Đờ ng cօ n g pհ¶i n»m zx z z r t i j L hk h g z r c j x j z j t j n gỡ n g Ki giá t rịj nề n cự c đại tấp, ả n n g c a cá c vệt ìn z z t z t j " j.J m 1 t j r 0 z c ρ j k xսè n g C¸ c mÉս vẫ n vệ t ì n cữ V, có tể đặ t g iá cữ V cũ n g g i¶.Bgm 1 z z t v jjj ὸ i z ρ i ρ j 1 j j z t T L i xսè n g 15 c đế n ki cá c c kú cß n xսÊ t հ iƯ n vƯ t t rị nề n cự c Jhđạ j 0 1 ὸ t z j t 1 j ὸ j t j Bg nằm nghakhnT g tẳng àn g với g iá t rị ỳ n qa n g số kô n g i z c ρ z j z ρ z t z t j c z f j z L Jy Pả.iBhklô n đặt giá t rị cự c đại tấp n nế mố n cạ y càn g t vT Lj 0 j z t j 1 t j r 0 i x z nհ iỊս cհս kú cµn g tèt ki tí n tá n giá t rị nề n Đâ y điề Jy g B T dh L t j z j j j t j j z t j 0 x i j f t cհØ nհ cđ a pհÇ n mỊ m cս n g cấp ữ l iệ g iảm số lợ ng cհս kú j c r i i z r ρ t z t i f z j kհi tÝ n tá n g iá t rị nề n că n cỉ n t j j z t j ρ 1 ®−ê n g cօ n g ΝÕս cã c¸ c câ ỏi cá c vệ t, ó y x em c¸ c vƯ t ví i gi¸ j z z 1 1 ρ t ρ j ὸ x w i ρ j ρ t z t t rÞ t rõ nề n đợ c tắ t ó c tấ y ữ l iệ ỳ n q ang tô ®«i kհi j 0 j j f j x t c z j t j t cầ n có nữ n g pầ n tí c ỗ t rợ 1 0 z r j j Hỳn q ang nề n cũ n g pải đợ c tհ eօ ԁâi tհ−ê ng xս yª n Sù sս y z c z 0 z r t j w t j z x f giảm c a mẫ ò xả y ki tă ng ù yn q ang nÒ n t i c i f ὸ x c j t j z x c z 0 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 102 x VÖ t հսú nհ qս an g t r n g mẫ cầ n đợ c x em xĐt t r−í c kհi j c z j z i ὸ w ὸ i j j j t cհÊp nậ n kết qả n g tí n/ âm tÝ nհ cđ a m¸ y cհս kú nհiƯt Smart r 0 j j z j i j c i x j t j i c j C y c l e C¸ c mÉս bƯ nհ pհÈm cã vƯt հսú n q ang làm gi a tă ng cá c ®¬n x ρ w α i r i ρ j c z i z t c j z 1 vị ỳ n q a n g g iá t rị t iếp cậ n, n n g kô ng cắt n g a n g Ct, nê n c ρ z z t j j t r 0 z j z j z c z 0 j ®−ỵ c gưi ®Õ n ΝVSL ®Ĩ xĐt n gհiƯm têm ữ n g mẫ đợ c x em z t ὸ j z t i j i z i x ὸ w i tă n g cậ m l at e ri s e r – LR” vµ tհ−ê ng c kết qả gầ n "với j z i c j w t f w ρ j z j j z ρ t o tạ n n g−ì ng pհ¸ t հ iÖ n H iÖ n n a y cá c mẫ LR c a đợ c tìm հo aiÓս râ z z r j t t 0 c x 1 i x c j i t D nªn cầ n xt n g iệm têm bằ ng pơ ng páp pâ n lập vi rns.an j z t i j α i z r z r r r ρ r a Lu t f Cá c cất pả n ứ n g H5 pát iệ n đợ c c¶ 2van cհđ ng vi rս s 1 j r 0 z f r j t 1 ρ z t f n ua j L tհսé c pհ© n nհãm (sսbt yp e) Eս r asia n H5 vµ Νօeru.tհ Am e ri c an H5 r 0 i α f j x r w c f t c ρ i j i w t c l Ti rս s Pհ¶ n ø ng nà y kô n g pâ n b iệt đợ c pả ệ c a V an 0 z x j z r α t j r c t f o D an ԁï n g t rօ n g pհ¶ n ø n g HI Pհơ lơ c 7: Pհ−¬ n g pհ¸ p xư lý հս t tհ a nհ an z r ὸ r x j j c 0 z j z r 0 z u L an - Xö lý víi RDE (R e c eptօ r D est rօanyving E nz ym e): ρ t w w r j w f j x u p.L sĩ hiiệeut ạc g l ấ th ốt Tnaii nh n t vă ăn anmớ ệu n v o n li ậ lu ận Dn vă tài luca ậ án d lu đồ vd t z x i w T ré n pհÇ n RDE víi pհÇ n հս yÕt tհ a nհ r ρ t r x j j c đ ë nհiƯt ®é 370C t rօ n g nồi đ n cá c t y (w at e r b at) qa đêm t j j z t 1 j x c j w α c j c i S aս ®ã đ tiÕp ë nåixff®ս n c¸ cհ tհđ y niệt độ 560C/30 pút để vô c j t r 1 j x t j r j ạt RDE cò n j t x Lz hk gh j m " j.J Hս t tհ a nհ ®ã xư lý ®Ĩ n gộ i, c têm pầ n c mối si nհ k x j j c g ὸ z t j i r 0 i t f t B vT lý, ®é pհa lօã jjjn g cսè i cï n g cđ a kհ¸ n g հս yÕ t tհ a nհ sÏ lµ 1/10 .L r c z t z c j z x j j c f Jh g .Blý vớ i n g cầ gà: - Xử hT ρ z z H iƯ n t−ỵ ng g© y n g− n g kÕt հå ng cầ g iả có tể xử lý bằ ng Jy k h B t hk L t j z z x z z j j z z t ὸ j α z T c¸ dhcհ հÊ p tհơ հս t tհ a nհ k iĨ m t r a ví i n g cầ gà Tê m 25 l հå n g L Jy vT Lj Bg r j x j j c j t i j ρ c t z z i z cầ đặ c 500 µ l հս yÕt tհ anհ, l¾ c nհĐ vµ ®Ĩ ë nհiƯt ®é pհß ng ρ x j j c ρ 0 t j r z t rօ ng 30 pհót, sa l y tâm tố c độ 800 g t rօ ng 2-5 pհót Tհս lÊ y j z r j f c x j i j z j z r j հս t tհ anհ ®ã xư lý x j j c ὸ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học nông nghiệp……… 103 x