Nghiên Cứu Quy Trình Tách Chiết Hesperidin Từ Quả Phật Thủ Làm Nguyên Liệu Sản Xuất Thuốc.docx

Microsoft Word Bao cao Hesperidin sua docx BỘ CÔNG THƯƠNG VIỆN HÓA HỌC CÔNG NGHIỆP VIỆT NAM BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHCN CẤP BỘ NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH CHIẾT HESPERIDIN TỪ QUẢ PHẬT THỦ LÀ[.]

BỘ CƠNG THƯƠNG VIỆN HĨA HỌC CƠNG NGHIỆP VIỆT NAM BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHCN CẤP BỘ: NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH C HESPERIDIN TỪ QUẢ PHẬT THỦ LÀM NGUYÊN L HÀ NỘI – 2008 BỘ CƠNG THƯƠNG VIỆN HĨA HỌC CƠNG NGHIỆP VIỆT NAM BÁO CÁO TỔNG KẾT ĐỀ TÀI NGHIÊN CỨU KHCN CẤP BỘ: NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH TÁCH C HESPERIDIN TỪ QUẢ PHẬT THỦ LÀM NGUYÊN L Chủ nhiệm Đề tài: Ths Nguyễn Vă Những người tham gia: Ths Trương T Tố Trinh CN Nguyễn Q HÀ NỘI – 2008 Nghiênc uốc iêncứuquyttrr̀ǹnhtáchchiếthes hesperidin eridinttừquảphậtt ậtthủlàmn àmnguyê uyênliệu liệussảnx ảnxuấtth ấtthu TÓMTẮT FlavonoidglycosidHesperidinmộtloạinguyênliệuthuốckhángviêm,c hốngơ x y h ó a , c h ốngd ịứng,c h ốngu n g t h ư,làmbềnt h n h mạchv g i ảmt í n h t hấmcủamaomạchđượcsửdụngnhiềutrongđiềutrịbệnhcaohuyếtápv bệnhtrĩđãđư ợctáchchiếttừquảPhậtthủvớinăngsuấtchiếtlà1,04%sov ớingunliệukhơ Quyt r ì n h t c h c h i ếtflavonoidh e s p e r i d i n đạttiêuchuẩnl m n g u y ê n liệusảnxuấtthuốcquymơphịngthínghiệmtừngunliệucóchứah e s p e r i d i n đ ãđượcx â y dựngt r ê n cơsởcáckếtq u ảkhảos t c c t h ô n g sốc ô n g nghệvềnh iệtđộ,pHmôitrườngchiếtvàmôitrườngkếttinh,tỷlệdungm ô i vv.Việcchiếttáchhe speridinởquymôlớnhơn10lầnquymôkhảosátđ ãđượcn g h i ê n cứun h ằmh o n c h ỉnhcơs ởd ữl i ệup h ụcv ục h o việcp h t triểnsảnxuấtởquymôlớnhơn Hesperidint c h chiếtđượcđ ãđượcxácđ ị nhcấut r ú c , p h â n t í c h địnht í n h 13 , địnhlượngbằngcácp h ươngp h p phổ:IR,UV,M S , H-NMR, CNMR,HPLCvàkiểmnghiệmcácchỉtiêucơbản Cáckếtqu ảnghiêncứuthuđượccó thểáp dụngvàosảnxuấth e s p e r i d i n t ừnguồnnguyênliệutựnhiênsẵncóvàrấtphongphútrongnướcởq u y môp i l o t nh ằmđ ápứngn g u y ê n liệusảnxuấtt h u ốcc h o c ô n g nghiệpb o chếdượcphẩmtron gnước ii MỤCLỤC TÓMTẮT .ii MỤCLỤC iii DANHMỤCBẢNG,BIỂU,HÌNHVẼ,SƠĐỒ v DANHMỤCCHỮVIẾTTẮT vi MỞĐẦU I TỔNGQUAN I.1 CâyPhậtthủ .3 I.1.1 CâyphậtthủvàtácdụngchữabệnhcủaPhậtthủ I.1.2 Thànhphầnhóa họccủaquảPhậtthủ I.2 Flavonoid,cáchợpchấtflavonoidtrongcâyhọCam I.2.1 Flavonoid I.2.2 FlavonoidtrongquảcâyhọCam I.3 Hesperidin 11 I.3.1 TínhchấtcủaHesperidin 12 I.3.2 TácdụngdượclýcủaHesperidin 12 I.3.3 Tổngquanvềtìnhhìnhnghiêncứutáchchiếthesperidin 17 I.4 Phântíchhesperidin .19 I.4.1 Phổtửngoạicủahesperidin 20 I.4.2 PhổkhốiMScủahesperidin 20 I.4.3 PhântíchhesperidinbằngHPLC 20 II PHƯƠNGPHÁP THỰCNGHIỆM 21 II.1 II.2 Phương pháptiếpcận .21 Nguyênliệu,hóachấtvàthiếtbị 22 II.2.1 Nguyênliệu,hóachất 22 II.2.2 Dụngcụ,thiếtbị 22 II.3 Phương phápchiếttáchhesperidin 23 II.3.1 Phương phápchiếtflavonoidtoànphần .23 II.3.2 PhươngpháptáchchiếtHesperidin 24 II.4 Phântíchsảnphẩm 24 III KẾTQUẢNGHIÊNCỨU 25 iii III.1 III.2 III.3 TáchchiếtflavonoidtoànphầntừquảPhậtthủ 25 Táchchiếtvà tinhchếHesperidin 25 Khảosátcácthơngsốảnhhưởngđếnqtrìnhtáchchiếthesperidintừquả Phậtthủ 27 III.3.1 ẢnhhưởngcủapHdungmôichiếtđếnhiệusuấttáchchiếthesperidin27 III.3.2 Ảnhhưởngcủatỷlệdungmôichiết .29 III.3.3 Ảnhhưởngcủanhiệtđộ .30 III.3.4 Ảnhhưởngcủathờigianchiếtmẫu .32 III.3.5 Ảnhhưởngcủakíchthướcnguyênliệu 34 III.3.6 ẢnhhưởngcủapH môitrườngkếttinh 35 III.4 III.5 KếtquảtáchchiếthesperidinlượnglớntừPhậtthủ,vỏCamvàvỏQuýt 38 Phântíchvàkiểmnghiệmsảnphẩm 39 III.5.1 PhổhồngngoạivàUVcủasảnphẩm .39 III.5.2 KhốiphổMScủa hesperidin .40 III.5.3 Phổcộnghưởngtừhạtnhân H-NMRcủahesperidin .40 III.5.4 Phổcộnghưởngtừhạtnhân C-NMRcủahesperidin 41 III.5.5 Kếtquảkiểmnghiệm 41 13 III.6 ĐềxuấtcôngnghệsảnxuấtHesperidin .42 KẾTLUẬNVÀKIẾNNGHỊ 45 TÀILIỆUTHAMKHẢO 47 CÁCPHỤLUC 50 iii DANH MỤCBẢNG, BIỂU,HÌNHVẼ,SƠĐỒ Bảng1:Cáchợpchấtflavanonedướidạngaglycone .8 Bảng2:Cáchợpchấtflavonedướidạngaglycone Bảng3:Cáchợpchấtpolymethoxyflavone Bảng4:Cáchợpchấtflavanone-O-glycosid Bảng5:Flavone-C-glucosidvàflavone-O-glucosid 10 Bảng6:ẢnhhưởngcủapHđếnhiệusuấttáchchiếthesperidin .27 Bảng7:Ảnhhưởngcủatỷlệdungmôichiếtđếnhiệusuấtchiếthesperidin.29B ảng8:Ả nhhưởngcủanhiệtđộđếnhiệusuấtchiếthesperidin 31 Bảng9:Ảnhhưởngcủathờigianđếnhiệusuấtchiếthesperidin 33 Bảng10:Ảnhhưởngcủakíchthướcnguyênliệuđếnhiệusuấtchiếth e s p e r i d i n 34 Bảng11:ẢnhhưởngcủapHmôitrườngkếttinh 36 Bảng12:Hiệusuấtchiếthesperidinởquymơvànguồnngunliệukhácnhau 38 Biểuđồ1:ẢnhhưởngcủapHđếnhiệusuấtqtrìnhchiết 28 Biểuđồ2:HiệusuấttáchchiếthesperidintừflavonoidtồnphầnởpHkhácnhau 28 Biểuđồ3:Ảnhhưởngcủatỷlệdungmơichiếtđếnhiệusuấtchiếthesperidin 30 Biểuđồ4:Ảnhhưởngcủanhiệtđộđếnhiệusuấtchiếthesperidin 32 Biểuđồ5:Ảnhhưởngcủathờigianđếnhiệusuấtchiếthesperidin 33 Biểuđồ6:Ảnhhưởngcủakíchthướcnguyênliệu 35 Biểuđồ7:ẢnhhưởngcủapHmơitrườngkếttinh 36 Hình1:Cây,hoavàquảPhậtthủ Hình2:Cáchợpchấtpolyphenolchínhtrongphậtthủ Hình3:Khungflavonevàflavanone Hình4:Cấutrúcphântửcủacácnhómflavonoid Hình5:Rutinosevàneohesperidose 10 Hình6:Sơđồphânmảnhquabướcchuyểnvịnộiphântửcủahesperidin 40H ìn h 7:S ơđồcơngnghệsảnxuấtHesperidin 44 DANHMỤCCHỮVIẾTTẮT CS: Cộngsự CP: Cổphần DMF: Dimetylformamid Gl: Glucose HPLC: Sắckýlỏnghiệunăngcao.KL/TT: Khốilượng/Thểtích KL: Khốilượng Rh: Rhamnose THF: Tetrahydofuran.TT/ KL: Thểtích/Khốilượng.TP: Tồnphần TT: Thểtích.YHCT: Yhọccổtruyền MỞĐẦU Hesperidinl mộtF l a v o n o i d cót c dụngk há n g viêm,c h ốngơ xy h óa , ch ốngd ịứ ng,c h ốngu n g thưn h ờkhản ănghấpt h ụt c n h â n g â y u n g thư.Hesperi dincótácdụnglàmbềnthànhmạchvàgiảmtínhthấmcủamaomạchn ên đượcsửdụ ngtrongđiềutrịbệnhcaohuyếtápvàbệnhtrĩ.Tácdụngchữah o củahesperidinlàdo khảnăngchốngdịứngnhờtínhchấtứcchếviệcgiảip h ó n g histaminetừcáctếbàolớ n.HesperidinkhidùngphốihợpvớivitaminC cótácdụngcộnghưởngvàhỗtrợhấpth ụvitaminC Hesperidinlà h ợpchấtflavonoidc h ủyếutrong vỏq u ảc â y h ọCửul ý h ương (Rutaceace)thườngđượcgọilàhọCamnhư:Cam,Quýt,Chanh,Phậtt h ủ,T h a n h y ê n , Bưởiv v Nhiềub ộphậncủac â y h ọnàyđượcsửd ụngl m t h u ốctrongyhọccổ truyềnđểđiềutrịbệnhđặcbiệtlàđểchữaho.Đặcbiệtt h u ốchođơngdượctừPhậtthủ cóthểdùngđượcchotrẻem.Tuynhiên,việcnghiêncứut c h chiếtc c h o ạtchấtc ó t r o n g c c loạidượcliệun y đ ể l m n g u y ê n liệusảnxuấtthuốcởnướctacịnđượ cquantâmchưanhiều Năm2007ViệnH ó a h ọccơngnghiệpViệtNamh ợptácvớiCơngt y C P V i m e d i m e x n g h i ê n cứup h t triểnt h u ốch o t ừq u ảP h ậtt h ủ.T r o n g q u tr ìn h t riểnk h a i nghiêncứu,c h ú n g t i nhậnthấyphầnb ã thảic ị n c h ứamộtl ượnglớnfla vonoidglycosidmàchủyếulàhesperidin.Vìvậychúngtơiđặtvấnđ ề n g h i ê n uchiếthesperidintừq u ảPhậtt h ủn h ằmt ậnd ụngv n â n g c a o hiệuquảkinhtế Vớinhữnglýdođềcậpởtrên,việcnghiêncứuchiếtxuấtHesperidintừn g u ồnn g u y ê n liệut h i ê n nhiênsẵnc ó t r o n g nướct r ê n cơs ởc ô n g n g h ệt ựnghiêncứ ul hếtsứccầnt h i ết.Hơnn ữa,việct ựsảnxuấth e s p e r i d i n t r o n g n ướcvừagópph ầnđadạnghóasảnphẩm,vừagópphầntựchủ,đadạnghóan g u ồnngunliệusảnxu ấtthuốcphùhợpvớimụctiêu,chiếnlượcxâydựngv pháttriểnngànhcơngnghiệphó adược Mụctiêucủađềtài:  Xâydựngq u y trìnhtáchchiết,phâ nl ậpHesperidin l m nguyênliệ usảnxuấtthuốctừquảphậtthủ Đềtàiđãtiếnhànhcácnộidungnghiêncứusau:  Xácđ ị nhđiềuk i ệnchiếtt c h flavonoidt o n p h ầnt ừq u ảphậtt h ủ  PhânlậpvàtinhchếHesperidinđạttiêuchuẩnnguyênlieuthuốc  XâydựngquytrìnhtáchchiếtHesperidintừquảphậtthủ  Phântíchkiểmnghiệmmộtsốchỉtiêucơbảncủasảnphẩm I TỔNGQUAN I.1 I.1.1 CâyPhậtthủ CâyphậtthủvàtácdụngchữabệnhcủaPhậtthủ CâyPhậtt h ủc ó t ê n k h o a h ọcl C i t r u s m e d i c a L v a r S a r c o d a c t y l i s Swingle thuộcc h i C a m q u ý t (Citrus)h ọCửul ý hương(Rutaceace)thườ ngđ ợ cg ọil h ọC a m ; t ê n thườngg ọil Buddha'sH a n d c i t r o n , Fingerc i t r o m f r e n i t , Phậtthủ.[5] CâyPhậtt h ủlàdạngc â y nh ỏx a n h t ốtqua nh năm,lámọcsol e , h ì n h t r ứng, mépcórăngcưanhỏ,gaingắnmọcởdướilá.Vàođầumùahạrahoam u trắng,cánh hoatrêntrắngdướiđỏ,quảchínvàomùađơng,vỏngồimàuv n g , t r ê n mộtsốn h ữn gmúic h ạyd i d ọcq u ảp h í a dướit c h r a t r ô n g n h ưngóntaynêncótênlàphậtth ủ.[5],[4](Hình1) Hình1:Cây,hoavàquảPhậtthủ