thuốc chủng ZycoV D Chuyện thuốc chủng ngừa Covids Thuốc chủng ZycoV D , hy vọng của các nước nghèo? Trần Minh Quân Tin Reuters " Novavax chưa gửi kịp số lượng 1 1 tỷ liều thuốc chủng đến các quốc gia[.]
Chuyện thuốc chủng ngừa Covids : Thuốc chủng ZycoV-D , hy vọng nước nghèo? Trần Minh Quân Tin Reuters : " Novavax chưa gửi kịp số lượng 1.1 tỷ liều thuốc chủng đến quốc gia nghèo giới (Zimbabwe, Cộng hòa Trung Phi, Kiribati dự trù có thuốc từ tháng Ba-2022 !) , số lượng Novavax ký hợp đồng vối CEPI (trong tổng số yêu cầu đặt hàng ) tỷ liều năm 2022, cịn chờ thủ tục luật lệ y tế ! Ngoài Novavax, quốc gia nghèo đặt hy vọng vào thuốc ZycoV-D ? Sau viết đơn giản Thuốc chủng Novavax, TMQ nhận lời khuyến khích vị Thân hữu, bậc Thầy : GS Ph.D (Độc chất học) làm việc Phịng Thí nghiệm Genencor Palo Alto Chun gia Tham vấn (Risk assessor) WHO nhắc đến plasmid vector vaccine vaccine nhóm hy vọng nước nghèo giới ! Xin chân thành cảm tạ) Vài danh từ 'chuyên môn' bài, TMQ không đủ khả chuyển sang tiếng Việt, xin phép dùng 'nguyên' tiếng Anh, xin giải thích : - Plasmid , theo định nghĩa, "một phân tử DNA nhỏ có hai vịng xoắn, hình trịn tìm thấy tế bào vi khuẩn có khả tự phân lập khơng tùy thuộc vào chromosomal DNA ký chủ", thường gặp vi khuẩn, plasmid hữu tự nhiên sinh vật đơn bào yeast giới thực vật Plasmid nhà khoa học 'tạo' phịng thí nghiệm theo thiết kế chun biệt để chuyển DNA 'lạ' vào tế bào khác (lab plasmid) - Plasmid vector : Do tính chất 'nhân tạo', lab-plasmid thường gọi vector hay construct Để 'ghép' (insert=nhét) gen mong muốn vào vector, nhà khoa học dùng kỹ thuật nhân (cloning) (restriction enzyme, ligation independent, Gateway, Gibson ) Phương pháp nhân (cloning) chọn tùy theo plasmid định sử dụng : Sau giai đoạn cloning, vector có chứa gen, vừa nhét vào, 'biến đổi' tế bào vi khuẩn nuôi cấy tiếp (xim đọc thêm plasmid cuối ) Tạp chí Nature (02 September 2021) loan tin : " India 's DNA COVID vaccine is a world first more are coming " Nhận xét nhà Khoa học chuyên Siêu vi trùng : - "If DNA vaccines prove to be successful, this is really the future of vaccinology" (Shahid Jameel, virologist ĐH Sonipat, Ấn Độ) * DNA Vaccine ? Theo Wikipedia : DNA vaccine loại vaccine , chuyển giao (tranfects) , trình tự (sequence) DNA mã hoá ghi nhận kháng nguyên chuyên biệt, vào tế bào sinh vật, chế (mechanism) để khai triển phản ứng miễn nhiễm - Các vaccine truyền thống (cổ điển) chứa kháng nguyên chuyên biệt (từ tác nhân gây bệnh) hay siêu vi bị làm cho yếu ; để đưa vào thể , tạo phản ứng miễn nhiễm chống lại bệnh vi trùng, siêu vi gây - DNA vaccine thuộc nhóm nhà khoa học gọi genetic vaccine chúng có chứa thơng tin di truyền (information genetic : DNA hay RNA), thông tin mã hóa để tế bào ( sinh-tổng hợp protein= biosynthesis) tạo kháng nguyên DNA vaccine chứa DNA mã hóa để tạo kháng nguyên chuyên biệt từ vi trùng gây bệnh Khi chích vào thể, DNA vaccine tế bào thu nhận (các tiến trình biến dưỡng bên tế bào, tổng hợp protein tùy theo mã di truyền (genetic code) gắn (nhét) vào plasmid, mà tế bào nhận vào) Do protein (đưa vào) có khu vực (regions) chuỗi trình tự (sequence) acid amin có chứa đặc điểm riêng vi trùng (hay siêu vi) , nên bị tế bào thể nhận diện, xem vật lạ Hệ thống miễn nhiễm báo động để kích khởi hoạt động chống ngoại xâm Trong trường vaccine chống Covid-19 : "Cả mRNA (như vaccine Pfizer, Moderna) viral vector vaccine chứa thông tin hướng dẫn, cho tế bào thể cách chế tạo protein gai (là protein bề mặt siêu vi gây covid-19) Một tế bào thể tạo protein-gai Covid-19, Hệ miễn nhiễm nhận protein 'kẻ xâm lăng' , tạo kháng thể để chống lại, ngăn chặn siêu vi không cho lan tràn gây tác hại !" (Tất vaccine khơng chứa siêu vi covid-19) Trên lý thuyết DNA vaccine có nhiều lợi điểm vaccine loại truyền thống, kể 'khả tạo đáp ứng miễn nhiễm rộng rãi' Và nhiều DNA vaccine thử nghiệm để dùng ngành thú y; nhà khoa học thử nghiệm dùng DNA vaccine bệnh gây nơi người vi trùng, siêu vi, ký sinh trùng ung thư chưa có kết mong muốn (Các giai đoạn việc chế tạo DNA vaccine) Các lợi điểm DNA vaccine ghi nhận : - Không gây nguy bị nhiễm bệnh (bệnh muốn chống lại) - Kháng nguyên trình diện ( presentation) hai phân tử MHC (Major Histocompatibility Complex) loại - Phản ứng miễn nhiễm tập trung vào kháng nguyên cần quan tâm( of interest) - Dễ thiết kế sản xuất - Tồn trữ chuyển vận dễ dàng Cho đến (7/2022) : chưa có DNA vaccine FDA Mỹ cho phép dùng nơi người Hoa Kỳ Tại Hoa Kỳ,hiện có DNA vaccine (thú y) US Department of Agriculture = USDA (Center of Veterinary Biologics) cho phép ; - dùng chủng ngừa siêu vi West Nile cho ngựa (2005) - chủng ngừa tyrosinase (trường hợp ung thư melanoma) nơi chó-mèo (2010) - vaccine cho cá hồi (salmon) chống siêu vi gây hoại thư (2005) chống alphavirus subtype (2016 ) Phương thức hoạt động DNA Vaccine * Thuốc chủng ZyCov-D Ngày 20 tháng 8, 2021 Giới chức Y tế Ấn Độ cho phép sử dụng Vaccine ZyCoV-D cho dân Ấn Độ từ 12 tuổi trở lên ZyCov-D vaccine Công ty Ấn Zydus Cadila (trụ sở Ahmedabad) thiết kế sản xuất Khả chế tạo vaccine hạn chế, phát huy hết sức, Zydus Cadila sản xuất 100-120 triệu liều vaccine/ năm, nhiên vaccine mã hóa vào pVAX-1, plasmid có sẵn thị trường sản xuất theo phương pháp không chuyên biệt (generic) nên quốc gia 'thứ ba' dễ chế tạo theo Do đặc tính bản, DNA-based vaccine tiềm (less potent) mRNA vaccine, nên phải dùng liều cao đề kích thích đáp ứng miễn nhiễm chống siêu vi covid-19 ZyCov-D phải cần ba liều (mỗi liều chứa 2mg plasmid DNA encoding protein-gai (S) SARS-CoV-2 chuỗi trình tự (sequence) tín hiệu Immunoglobulin E (IgE) để thúc đẩy tiết (promote secretion).Cần liều cao DNA phải vượt vài rào cản tế bào để bắt đầu sản xuất kháng nguyên Việc đưa mRNA vào thể (chích) xác định rõ Trong việc đem DNA vaccine đến nhân tế bào chưa nghiên cứu hồn chỉnh : DNA vaccine, sau chích qua da, chưa biết plasmid DNA thu nhận đâu ? APC (xin xem cuối bài) tế bào đuôi gai (dendritic), nguyên bào sợi (fibroblast), hạ bì (dermis) hay tế bào bắp thịt (myocytes) ; tất địa điểm ? muốn hiệu nghiệm vaccine DNA plasmid-based phải đến dược nhân tế bào vaccin phiên mã (transcribed) thành mRNA , sau khỏi nhân để dịch mã (translation) tiếp tế bào chất (cytoplasm) Các nhà khoa học tìm nhiều cách để giúp đưa vaccine vào thể hữu hiệu dùng hạt nano lipid (lipid nanoparticles), electroporation, máy tiêm (jet injectors) súng bắn gen ( 'gene guns' ) ZyCov-D vaccine cần phải sử dụng Pharmajet needle free (khơng có kim) Tropis device, để 'đặt thuốc da, không chích qua bắp thịt, vùng da nơi có nhiều tế bào miễn nhiễm 'thu tóm' vật thể lạ mảnh (particles) vaccine chuyển hóa chúng (Pharmajet tên Cơng ty sản xuất) (Thiết bị dùng tia dịch lỏng áp suất hóa, đẩy cấu lị xo đơn giản để dịch thấm (xâm) qua da đưa vaccine vào) Thiết bị chích WHO (Performance Quality & Safety) chuẩn thuận cho dùng chung với ZyCov-D (giá ước tính liều + thiết bị vào khoảng 3.57 USD đợt chủng ngừa, mũi, khoảng 10 USD Chi phí giảm, rẻ tùy thuộc vào thiết bị sử dụng để chích) (Phương pháp electroporation 'đánh giá' : tăng cường hấp thu tế bào cách áp đặt điện trường=electric field vào nơi chích, làm lỗ chân lơng tạo khoảng trống tạm thời, nơi màng tế bào để phân tử lớn qua.) Về phương diện hiệu vaccine : Kết qua thử nghiệm cho biết đạt mức bảo vệ 67% chống trường hợp nhiễm covid có triệu chứng (khi thử 28 ngàn người chịu thử) ; 100 % trường hợp nhiễm nhẹ (?) Hiện nay, số DNA plasmid vector vaccine thời gian thử nghiệm : (Xin xem danh sách cuối bài) Một số thuốc chủng đáng ý : - AG0302-COVID-19 Công ty Nhật AnGes (Osaka) phối hợp ĐH Osaka, Takara Bio, Giai đoạn thử nghiệm 2/3 Đây DNA plasmid vaccin, mã hóa protein SARS-CoV-2 S, phải chích thịt liều - INO-4800 Inovio Pharmaceuticals (Plymouth , Pennsylvania) Advaccine Biopharmaveeuticals (Suzhou, China), gial đoạn 2/3 Cùng loại DNA plasmid vaccine giống vaccine Nhật trên; Chích liều, cách tuần ; chích phải kèm theo electroporation điểm chích thiết bị cầm tay Celllectra 2000 INO-4800 bị FDA đặt vào tình trạng 'treo=hold' vấn đề liên quan đến Cellectra 2000 , vaccine giai đoạn thử nghiệm Philippines, Mexico Colombia Vaccine , dù chuẩn thuận khó phổ biến phải tùy thuộc vào thiết bị dùng kèm theo (để khắc phục nhược điểm nhóm khoa học gia Georgia Institute of Technology, ĐH Emoryvà Sun-Yat-sen University, phối hợp để chế tạo thiết bị electroporation rẻ USD/đơn vị) Danh sách có vaccine quốc gia 'nhỏ' sản xuất : - Nam Hàn : Vaccine GX-19 N Công ty Genexine thiết kế sản xuất, dùng kỹ thuật DNA tổng hợp in vitro, rỗi gắn vào plasmid vector Chích liều, cách tuần kèm theo electroporation sau chích Vaccine GLS-5310 GeneOne Life Science (Seoul) thiết kế (hợp tác với Blue Bell ( PA, USA); Công ty trọng vào vaccine chống Zika nhiều - Canada có hai vaccine thử nghiệm : - Covigenic VAX-001 Entos Pharmaceuticals, thuộc loại proteolipid-vehicle formulated DNA vaccine, encoding SARS-CoV-2 S protein có thêm chất di truyền bổ trợ (adjuvant genetic) , chích bắp thịt mũi - bacTRL-Spike Công ty Symvivo thiết kế Vaccine đặc biệt, dùng theo đường uống : dùng vi khuẩn Bifidobacterium longum, chế tạo (engineered) để giao (deliver) plasmid DNA mã hóa protein SARS-Cov-2S Vi khuẩn uống vào thể bám vào nội mạc đường tiêu hóa thể chuyển plasmid Chỉ uống liều - Úc (University of Sydney) Thailand (BioNet, Bangkok) cộng tác để thiết kế vaccine Covigen, thuộc loại cần dùng thiết bị Pharmajet chích mũi cách 28 ngày Xin ghi thêm : Một số quốc gia nghèo có chương trình nghiên cứu 'tự chế tạo' vaccine "đủ loại để chống covid-19 : - Việt Nam : Có chương trình tự chế tạo Nanogen loan báo nano Covax Covid-19 Vaccine (loại sub-unit vaccine), thử nghiệm lâm sàng Long An khơng có thơng báo tiếp kết ? - Thái Lan : ĐH Chulalongkorn (Bangkok) (5-2021) có chương trình chế tạo vaccine ChulaCov19, xem loại mRNA vaccine (địa phương) dự trù sản xuất Đông Nam Á, giai đoạn thử thú vật (chuột khỉ) - Cuba : Finlay Institute (Havana) có vaccine Abdala ( liều) Soberana 02 thuộc loại protein-based, có kết khả quan Bộ Y Tế Cuba chuẩn thuận cho dùng nước từ tháng 11-2021, vaccine xuất cảng sang Venezuela, Viet Nam (?), Iran Nicaragua Trần Minh Quân 7/2022 Về plasmid : Vị Thân hữu GS Ph.D giải thích thêm : "Plasmid thu nhặt từ vi khuẩn, nấm men (yeast), nấm mốc (fungi) có khả tự tái sản xuất (replicate/ reproduce), độc lập với nhiễm sắc thể (chromosome) Gen muốn dùng (of interest) (từ thực vật, trái cây, thú vật vv) cần lấy (excised) từ DNA 'sinh vật cho' (of donor) cách dùng enzymes chuyên biệt Gene (of interest) ghép (inserted) vào plasmid Để ghép: Cần phải có khả tương thích (compatible) hai trình tự cuối (end sequence) gen với trình tự plasmid - (dùng enzyme ligase, men giúp nối thắt (ligation) DNA chất khác) Plasmid + Gene gọi Plasmid vector Plasmid vector tích hợp (integrated) vào chromosome ký chủ (host) vị trí riêng (locus) phương thức 'tái tổ hợp' (recombination) Campbell Ký chủ vi khuẩn E.coli, Bacillus licheniformis; nấm men Saccharomyces Khi chọn host (sẽ nhận plasmid vector) thường phải dùng thêm gen kháng thuốc kháng sinh (như ampicillin, streptomycin ) giúp tránh vi khuẩn gây nhiễm không muốn có (opportunistic bacteria) Các giai đoạn " chế tạo" phải theo dõi kiểm soát kỹ lưỡng Host organism (có mang expression vector) ni mơi trường cấy ( có thêm đường) , oxygen nhiệt độ thích hợp tạo protein muốn có theo kế hoạch dự trù Plasmid host ( E coli) * APC = Antigen-presenting Cell= Tế bào trình diện Kháng nguyên Một loại tế bào Hệ miễn nhiễm giúp tăng cường (boost) đáp ứng miễn nhiễm cách ' trình diện' hay phơ bày bề mặt bên ngoài, cho tế bào khác hệ Miễn nhiễm APC loại thực bào (phagocyte) Trần Minh Quân 7/2022