Khóa luận tốt nghiệp nghiên cứu sự sinh trưởng, phát triển của chủng nấm linh chi ga cb28 trên một số giá thể nhân giống và nuôi trồng

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -  - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU SỰ SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN CỦA CHỦNG NẤM LINH CHI GA-CB28 TRÊN MỘT SỐ GIÁ THỂ NHÂN GIỐNG VÀ NUÔI TRỒNG Hà Nội, 8/2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC -  - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU SỰ SINH TRƯỞNG, PHÁT TRIỂN CỦA CHỦNG NẤM LINH CHI GA-CB28 TRÊN MỘT SỐ GIÁ THỂ NHÂN GIỐNG VÀ NUÔI TRỒNG Sinh viên thực : Phạm Thị Hương Khoa : Công nghệ sinh học Lớp : K62CNSHP Giảng viên hướng dẫn : ThS Trần Đông Anh Hà Nội, 8/2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Nghiên cứu sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 số giá thể nhân giống nuôi trồng” trực tiếp thực Số liệu kết nghiên cứu khóa luận hồn tồn xác, trung thực chưa cơng bố tài liệu, báo, tạp chí Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn khóa luận rõ nguồn gốc, đảm bảo trích dẫn theo quy định Hà Nội, ngày tháng năm 2021 Sinh viên Phạm Thị Hương i LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khóa luận tốt nghiệp này, bên cạnh nỗ lực cố gắng thân, nhận động viên, quan tâm, giúp đỡ tận tình tập thể cá nhân Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới ThS Trần Đông Anh dành nhiều thời gian, tâm huyết tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, định hướng, tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực tập, nghiên cứu khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, Ban chủ nhiệm Khoa Công nghệ sinh học tạo điều kiện, truyền đạt cho kiến thức quan trọng, quý báu suốt thời gian học tập, rèn luyện Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Ngô Xuân Nghiễn, TS Nguyễn Thị Bích Thùy ThS Nguyễn Thị Luyện - Bộ môn Công nghệ vi sinh- khoa Công Nghệ Sinh Học- Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam giúp đỡ, hướng dẫn tơi q trình thực tập Tơi xin gửi lời cảm ơn tới bạn, anh, chị, em làm Trung tâm Đào tạo, Nghiên cứu Phát triển Nấm tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ hướng dẫn tơi hồn thành khóa luận Cuối cùng, tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè động viên, giúp đỡ, tạo động lực cho tơi suốt q trình nghiên cứu, học tập Hà Nội, ngày tháng năm 2020 Sinh viên Phạm Thị Hương ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC HÌNH vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT viii TÓM TẮT ĐỀ TÀI ix PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích, yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tình hình nghiên cứu, sản xuất nấm giới Việt Nam 2.1.1 Tình hình nghiên cứu sản xuất nấm giới 2.1.2 Tình hình nghiên cứu sản xuất nấm Việt Nam 2.2 Tiềm phát triển nghề trồng nấm Linh chi Việt Nam 2.3 Đặc điểm sinh học nấm Linh chi 2.3.1 Giới thiệu chung 2.3.2 Vị trí phân loại 2.3.3 Phân bố 2.3.5 Chu kỳ sinh trưởng nấm Linh chi 10 2.3.6 Các yếu tố dinh dưỡng ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển nấm Linh chi 11 2.3.7 Các yếu tố ngoại cảnh ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển nấm Linh chi 12 2.3.8 Thành phần hóa học giá trị dược liệu nấm Linh chi 13 2.4 Nguồn chất sử dụng để trồng nấm Linh chi 18 iii PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 20 3.1 Đối tượng vật liệu 20 3.1.1 Đối tượng thí nghiệm 20 3.1.2 Vật liệu thí nghiệm 20 3.1.3 Điều kiện thí nghiệm 20 3.1.4 Thời gian địa điểm thí nghiệm 21 3.2 Nội dung phương pháp thí nghiệm 21 3.2.1 Nội dung thí nghiệm 21 3.2.2 Phương pháp thí nghiệm 21 3.2.3 Bố trí thí nghiệm 21 3.2.4 Các tiêu theo dõi 24 3.2.5 Phương pháp xử lý số liệu 24 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 25 4.1 Đánh giá ảnh hưởng hưởng số môi trường nhân giống đến sinh trưởng chủng nấm Linh chi Ga-CB28 25 4.2 Đánh giá ảnh hưởng thành phần mùn cưa lõi ngô đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 27 4.2.1 Giai đoạn nuôi sợi 27 4.2.2 Giai đoạn nuôi thể 30 4.3 Đánh giá ảnh hưởng thành phần mùn cưa hạt đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 31 4.3.1 Giai đoạn nuôi sợi 31 4.3.2 Giai đoạn nuôi thể 34 4.4 Đánh giá ảnh hưởng thành phần dinh dưỡng bổ sung đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 35 4.4.1 Giai đoạn nuôi sợi 35 4.4.2 Giai đoạn nuôi thể 40 4.5 Đánh giá ảnh hưởng nguồn nguyên liệu nhân giống khác đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 41 iv 4.5.1 Giai đoạn nuôi sợi 41 4.5.2 Giai đoạn nuôi thể 44 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 45 5.1 Kết luận 45 5.2 Đề nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 48 v DANH MỤC HÌNH Trang Hình 2.1 Bản đồ phân bố nấm Linh chi Hình 2.2 Hình ảnh nấm Linh chi (A), bào tử nấm Linh chi (B) Hình 2.3 Chu kì phát triển nấm Linh chi .10 Hình 3.1 Quả thể nấm Linh chi Ga-CB28 tự nhiên 20 Hình 4.1 Hệ sợi chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 7, 14, 17, 21 ngày nuôi cấy môi trường nhân giống khác (theo thứ tự từ trái sang phải) 27 Hình 4.2 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 10 ngày nuôi cấy môi trường tỉ lệ mùn cưa lõi ngô khác 29 Hình 4.3 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 14 ngày nuôi cấy môi trường tỉ lệ mùn cưa lõi ngô khác 30 Hình 4.4 Hình ảnh thể thí nghiệm 31 Hình 4.5 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 10 ngày nuôi cấy môi trường tỉ lệ mùn cưa hạt khác 33 Hình 4.6 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 14 ngày nuôi cấy môi trường tỉ lệ mùn cưa hạt khác 34 Hình 4.7 Hình ảnh bịch thể thí nghiệm 35 Hình 4.8 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 10 ngày nuôi cấy môi trường tỉ lệ thành phần dinh dưỡng bổ sung khác 38 Hình 4.9 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 14 ngày nuôi cấy môi trường tỉ lệ thành phần dinh dưỡng bổ sung khác 39 Hình 4.10 Hình ảnh thể thí nghiệm 40 Hình 4.11 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 10 ngày nuôi cấy môi trường nguồn nguyên liệu nhân giống khác 43 Hình 4.12 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 14 ngày nuôi cấy môi trường nguồn nguyên liệu nhân giống khác 43 Hình 4.13 Hình ảnh thể thí nghiệm 44 vi DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1 Vị trí phân loại nấm linh chi Bảng 2.2 Thành phần chất dinh dưỡng có mùn cưa .18 Bảng 2.3 Thành phần chất dinh dưỡng có cám ngơ .19 Bảng 2.4 Hàm lượng trung bình (g/100g) hợp chất sinh học lúa mì 19 Bảng 4.1 Ảnh hưởng số môi trường nhân giống đến sinh trưởng chủng nấm Linh chi Ga-CB28 26 Bảng 4.2 Ảnh hưởng thành phần mùn cưa lõi ngô đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 28 Bảng 4.3 Ảnh hưởng thành phần mùn cưa hạt đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 32 Bảng 4.4 Ảnh hưởng thành phần dinh dưỡng bổ sung đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 37 Bảng 4.5 Ảnh hưởng nguồn nguyên liệu nhân giống khác đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 42 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Ý nghĩa CT Công thức CV% Sai số thí nghiệm LSD0,05 Gía trị sai khác nhỏ mức xác suất 95% viii 4.4.2 Giai đoạn nuôi thể Khi hệ sợi bịch nấm mọc khoảng 1/3 đến 1/2 bịch, tiến hành nới lút chuyển bịch sang nhà ươm Trong giai đoạn cần trì nhiệt đọ nhà ươm khoảng 22ºC – 28 ºC, không tưới nước trực tiếp vào cổ nút, xả để đảm bảo độ ẩm, khống chế ánh sáng nên trì ánh sáng phịng khoảng 800 – 1000 lux tránh gây tổn thương học ruồi, muỗi chích hút, chuột cắn phá, Đặc biệt, Linh chi có mùi thơm nên đễ bị xâm nhập côn trùng, đặc biệt sâu đục thể Khi phát thể bị nhiễm sâu bệnh, cần cách ly với bịch khác để tránh bị sâu lây lan từ bịch sang bịch Sau tiếp tục theo dõi q trình phát triển thể thu hoạch Thời gian hình thành mầm thể thời gian thu hoạch tiêu quan trọng việc để ứng dụng thời vụ nuôi trồng nhằm sử dụng hiệu nguồn lao động đáp ứng yêu cầu thị trường Khi xuất mầm quả, thực hiển tưới để trì độ ẩm tưới phun sương bề mặt để tạo môi trường thuận lợi cho nấm Linh chi phát triển Qua theo dõi cho thấy bịch chủng nấm Linh chi Ga-CB28 thể xuất có dấu hiệu mốc sâu đục thân, bịch cịn lại có dấu hiệu chết sợi đen toàn bịch số yếu tố: Thời tiết không thuận lợi nên sợi nấm không khỏe yếu tố để nấm mốc vi khuẩn công Chủng nấm Linh chi Ga-CB28 lấy nguồn từ tự nhiên nên áp dụng vào nuôi trồng nhân tạo kịp thích nghi Chủng nấm Linh chi Ga-CB28 ngồi tự nhiên quen với việc dinh dưỡng nên áp dụng nuôi trồng nhân tạo cho nhiều dinh dưỡng nuôi sợi nên sợi yếu Chưa tìm cơng thức phù hợp để chủng nấm Linh chi Ga-CB28 phát triển Hình 4.10 Hình ảnh thể thí nghiệm 40 4.5 Đánh giá ảnh hưởng nguồn nguyên liệu nhân giống khác đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 4.5.1 Giai đoạn nuôi sợi Trong thí nghiệm này, chúng tơi sử dụng cơng thức nhân giống cấp thí nghiệm để cấy vào công thức nguyên liệu (84% mùn cưa + 8% bột ngô + 7% cám mạch + 1% bột nhẹ) để nghiên cứu ảnh hưởng nguồn giống cấy khác đến khả sinh trưởng phát triển giống nấm Linh chi Ga-CB28 nguyên liệu nuôi trồng Sau nguyên liệu ủ với thời gian tiến hành đóng bịch, hấp khử trùng Giống sau cấy xong đưa vào nhà ươm sợi ni sợi mơi trường có nhiệt độ ổn định từ 260C - 280C Các bịch thí nghiệm cần tránh di chuyển nhiều làm tổn thương hệ sợi, làm ảnh hưởng đến tốc độ phát triển hệ sợi Trong thời gian nuôi sợi liên tục kiểm tra để loại bỏ bịch nhiễm, phân tích ngun nhân nhiễm tìm biện pháp xử lý, phải loại bỏ bịch bị nhiễm bệnh khỏi phòng ươm để tránh lây nhiễm sang bịch khác Bên cạnh đó, theo dõi tốc độ mọc sợi ngày lần đến nới nút Sau nới nút bịch chuyển qua phịng chăm sóc thể Chúng tơi đánh giá khảo sát sinh trưởng phát triển hệ sợi nấm Linh chi Ga-CB28 nguồn nguyên liệu nhân giống khác sử dụng túi nilon kích thước 25x35 cm, trọng lượng bịch 1.3 kg nguyên liệu phối trộn Kết thu bảng 4.5 Ở điều kiện nhiệt độ phòng ươm sợi 26ºC – 28ºC, độ ẩm phòng 52% sau ngày từ ngày cấy giống sợi nấm bắt đầu bung sợi mọc trắng bề mặt bịch, bám vào nguyên liệu, hệ sợi sinh mạnh,có chênh lệch rõ rệt, sau khoảng ngày mặt bịch xuất màng dai màu vàng, ngày sau xuất rõ rệt nhiều Hệ sợi chủng nấm Linh chi Ga-CB28 nguồn nguyên liệu nhân giống khác nhau, tốc độ mọc hệ sợi khác Từ bảng 4.5 so sánh khả sinh trưởng hệ sơi nấm Linh chi Ga-CB28 cơng thức khác cho thấy cơng thức có độ dài hệ sợi sau 10 ngày cao (38,53mm), cơng thức có độ dài hệ sợi sau 10 ngày thấp (23,83 mm) Đối với thời gian hệ sợi mọc kín bịch công thức công thức ngắn (28 ngày ) tốc độ mọc hệ sợi công thức cao (4,78mm/ ngày) cơng thức có thời gian hệ sợi mọc 41 kín bịch dài (32,97 ngày ), tốc độ mọc hệ sợi công thức thấp (4,41mm/ ngày) Các cơng thức cịn lại thời gian trung bình hệ sợi mọc kín (28,4828,33 ngày), tốc độ mọc hệ sợi từ (4,49- 4,54 mm/ ngày) Bảng 4.5 Ảnh hưởng nguồn nguyên liệu nhân giống khác đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 Chỉ Độ dài hệ Thời gian Tốc độ tiêu sợi sau 10 mọc hệ hệ sợi Mật độ hệ sợi ngày nuôi mọc kín sợi Cơng (mm/ngày) cấy bịch thức (mm) (ngày) CT1 24,78 28,48 4,41 +++ CT2 38,53 32,97 4,54 +++ CT3 24,14 28 4,51 +++ CT4 26,74 28 4,78 +++ CT5 23,83 28,33 4,49 +++ LSD0.05 11,90 4,65 0,10 21,30 1,20 CV % 8,50 Ghi chú: Mật độ hệ sợi: + : Độ dày hệ sợi thưa ++ : Độ dày hệ sợi trung bình +++ : Độ dày hệ sợi dày 42 Đặc điểm hình thái hệ sợi Hệ sợi trắng, mọc dày Mật độ hệ sợi tương đối đồng đều, xuất màng dai xung quanh bịch Hệ sợi trắng, mọc dày Mật độ hệ sợi tương đối đồng đều, xuất màng dai xung quanh bịch Hệ sợi trắng, mọc dày Mật độ hệ sợi tương đối đồng đều, xuất màng dai xung quanh bịch Hệ sợi trắng, mọc dày Mật độ hệ sợi tương đối đồng đều, xuất màng dai xung quanh bịch Hệ sợi trắng, mọc dày Mật độ hệ sợi tương đối đồng đều, xuất màng dai xung quanh bịch Hình 4.11 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 10 ngày nuôi cấy môi trường nguồn nguyên liệu nhân giống khác Hình 4.12 Hệ sợi chủng nấm chủng nấm Linh chi Ga-CB28 sau 14 ngày nuôi cấy môi trường nguồn nguyên liệu nhân giống khác 43 4.5.2 Giai đoạn nuôi thể Khi hệ sợi bịch nấm mọc khoảng 1/3 đến 1/2 bịch, tiến hành nới lút chuyển bịch sang nhà ươm Trong giai đoạn cần trì nhiệt đọ nhà ươm khoảng 22ºC – 28 ºC, không tưới nước trực tiếp vào cổ nút, xả để đảm bảo độ ẩm, khống chế ánh sáng nên trì ánh sáng phịng khoảng 800 – 1000 lux tránh gây tổn thương học ruồi, muỗi chích hút, chuột cắn phá, Đặc biệt, Linh chi có mùi thơm nên đễ bị xâm nhập côn trùng, đặc biệt sâu đục thể Khi phát thể bị nhiễm sâu bệnh, cần cách ly với bịch khác để tránh bị sâu lây lan từ bịch sang bịch Sau tiếp tục theo dõi trình phát triển thể thu hoạch Thời gian hình thành mầm thể thời gian thu hoạch tiêu quan trọng việc để ứng dụng thời vụ nuôi trồng nhằm sử dụng hiệu nguồn lao động đáp ứng yêu cầu thi trường Khi xuất mầm quả, thực hiển tưới để trì độ ẩm tưới phun sương bề mặt để tạo môi trường thuận lợi cho nấm Linh chi phát triển Qua theo dõi cho thấy bịch chủng nấm Linh chi Ga-CB28 thể xuất có dấu hiệu mốc sâu đục thân, bịch lại có dấu hiệu chết sợi đen tồn bịch số yếu tố tương tự thí nghiệm Hình 4.13 Hình ảnh thể thí nghiệm 44 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu thu được, rút số kết luận sau: Trên môi trường nhân giống cấp 2: (CT2: 69% thóc tẻ + 30% mùn cưa + 1% CaCO3) có khả sinh trưởng phát triển tối ưu so với công thức cịn lại Trên mơi trường ni trồng: Với tỉ lệ thành phần mùn cưa lõi ngô (CT2: 63% mùn cưa + 21% lõi ngô + 8% bột ngô + 7% cám mạch + 1% bột nhẹ) có khả sinh trưởng phát triển tối ưu so với cơng thức cịn lại Với tỉ lệ thành phần mùn cưa hạt ( CT1: 84% mùn cưa + 0% + 8% bột ngô + 7% cám mạch + 1% bột nhẹ) có khả sinh trưởng phát triển tối ưu so với cơng thức cịn lại Với tỉ lệ thành phần dinh dưỡng bổ sung bột ngô, cám mạch bột nhẹ (CT4: 87% mùn cưa + 6% bột ngô + 6% cám mạch + 1% bột nhẹ) có khả sinh trưởng phát triển tối ưu so với cơng thức cịn lại Với tỉ lệ nguồn ngun liệu nhân giống giá thể ni trồng giống (CT4: 69% mùn cưa + 15% Cám mạch + 10% bột ngơ + 5% trấu + 1% CaCO3) thí nghiệm cho thấy khả sinh trưởng phát triển tối ưu so với cơng thức cịn lại 5.2 Đề nghị Dựa kết đạt nghiên cứu, để góp phần đưa kết áp dụng cách có hiệu thực tiễn sản xuất, xin đề nghị số vấn đề sau: Nghiên cứu thêm ảnh hưởng yếu tố dẫn đến phát triển thể chủng nấm Linh chi Ga-CB28 ni trồng thể từ tìm mơi trường công thức cho suất tốt Tiếp tục đánh giá giai đoạn hình thành thể để tìm cơng thức tối ưu cho thể phát triển 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Nguyễn Thị Mai Anh, Đào Văn Phan, Phạm Thị Vân Anh (2005) Bước đầu nghiên cứu tác dụng nấm linh chi Việt Nam (Garnoderma lucidum) qua số số lipid máu chuột cống Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh, Nguyễn Thị Sơn, Ngô Xuân Nghiễn, Zani Federico (2000) Nấm ăn – Cơ sở khoa học công nghệ nuôi trồng Nhà xuất Nông nghiệp Trịnh Tam Kiệt (2011) Nấm lớn Việt Nam, Tập Nhà xuất Khoa học tự nhiên Công nghệ Trịnh Tam Kiệt (2012) Nấm lớn Việt Nam, Tập Nhà xuất Khoa học tự nhiên Công nghệ Đỗ Tất Lợi (1977) Cây thuốc vị thuốc Việt Nam NXB Khoa học Kỹ thuật Hà Nội Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn, Nguyễn Duy Trình, Ngơ Xn Nghiễn (2012) Kĩ thuật trồng, chế biến nấm ăn nấm dược liệu Nhà Xuất Nông nghiệp (Tái lần thứ nhất) Trần Văn Mão (2004) Nuôi trồng chế biến nấm ăn nấm làm thuốc chữa bệnh Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Đỗ Tất Lợi, Lê Duy Thắng, Trần Văn Luyến (1994) Nấm Linh chi nuôi trồng sử dụng, NXB Nông nghiệp Hà Nội Lê Xuân Thám (1996) Nghiên cứu đặc điểm sinh học đặc điển hấp thu khoáng nấm Linh chi Ganoderma lucidum (Leyss.ex Fr).Karst Luận án phó tiến sỹ khoa học sinh học, Đại học Khoa Học Tự Nhiên, Đại học Quốc Gia Hà Nội, Việt Nam Tài liệu internet Cơng Phiên, 2012 Nấm - Dịng sản phẩm chủ lực Báo Sài Gịn Giải Phóng Tài liệu tiếng anh Banuelos GS, Lin ZQ (2009) Use and development of Bio fortified Agricultural products Boca Ratan, Florida, CRC Press 272–292 Boh B, Berovic M, Zhang J, Zhi-Bin L (2007) Ganoderma lucidum and its pharmaceutically active compounds Biotechnol Annu Rev 13:265–301 Borchers A T, Stern J S, Hackman R M, Keen C L, Gershwin M E (1999) Minireview: Mushrooms, tumors and immunity Proc Soc Exp Biol Med 221:281–93 Chang S T, Buswell J (1996) Biotechnol.12:473–6 Chang S T, Buswell J (1999) A Ganoderma lucidum (Curt.: Fr.) P Karst (Aphyllophoromycetideae): A mushrooming medicinal mushroom Int J Med Mushrooms.1:139–46 Chang ST, Mills PG (2004) Mushrooms: Cultivation, Nutritional Value, Medicinal Effect, and environment impact CRC Press 357–372 A Mushroom nutriceuticals World J Microbiol 46 Chen AW (2002) Natural log cultivation of the medicinal mushroom, Ganoderma lucidum (Reishi) Mushroom Growers’s Newsletter 3(9), 2–6 Chen HZ, Chen JW (2004) A preliminary report on solid-state fermentation of Ganoderma lucidum with Radix astragali containing medium Chinese Journal of Integrative Medicine 2, 216–218 Lai T, Gao Y, Zhou SF (2004) Global marketing of medicinal Ling Zhi mushroom Ganoderma lucidum (W Curt Fr) Lloyd (Aphyllophoromycetideae) products and safety concerns International Journal of Medicinal Mushrooms 6, 189–194 10 Li S, Dong C, Wen HA, Liu X (2016) Development of Ling-zhi industry in China– emanated from the artificial cultivation in the Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences (IMCAS) Mycology 7, 74–80 11 Mau J L, Lin H C, Chen C C (2001) Non-volatile components of several medicinal mushrooms Food Res Int 34:521–6 12 Meekin D (2005) The perception of Ganoderma lucidum in Chinese and Western culture Mycologist 18:165–9 13 Pegler DN (2002) Useful fungi of the world: The Ling-zhi – the mushroom of immortality Mycologist 16, 100–101 14 Perumal K (2009) Indigenous technology on organic cultivation of Reishi AMM Murugappa Chettiar Research Centre 1–12 15 Rai RD (2003) Successful cultivation of the medicinal mushroom Reishi, Ganoderma lucidum in India Mushroom Research 12, 87–91 16 Sanodiya B S, Thakur G S, Baghel R K, Prasad G B, Bisen P S (2009) Ganoderma lucidum: A potent pharmacological macrofungus Curr Pharm Biotechnol 10(8):717–42 17 Sissi Wachtel-Galor, Iris F F Benzie (2011) Herbal Medicine: Biomolecular and Clinical Aspects, Edition: 2nd, Chapter: Chapter 9: Ganoderma lucidum (Lingzhi or Reishi): A Medicinal Mushroom 18 Subarna Roy, Miskat Ara Akhter Jahan, Kamal Kanta Das, Saurab Kishore Munshi, Rashed Noor (2015) American Journal of BioScience,Volume 3, Issue 5, September 2015, 178-182 19 Yu YN, Shen MZ (2003) The history of Lingzhi (Ganoderma spp.) cultivation Mycosystema 22, 3–9 20 Zhou SF, Gao YH (2002) The immunomodulating effects of Ganoderma lucidum (Curt Fr.) P Karst (Lingzhi, Reishi mushroom (Aphyllophoromycetideae) International Journal of Medicinal Mushrooms 4, 1–11 21 Zhou X, Lin J, Yin Y, Zhao J, Sun X, Tang K (2007) Ganodermataceae: Natural products and their related pharmacological functions Am J Chin Med 35:559–74 47 PHỤ LỤC BẢNG PHÂN TÍCH SỐ LIỆU CỦA ĐỀ TÀI Thí nghiệm 1: Đánh giá sinh trưởng phát triển chủng nấm Linh chi GaCB28 số môi trường nhân giống khác BALANCED ANOVA FOR VARIATE SAU7N FILE HSGIONG 11/ 8/** 12:32 PAGE VARIATE V003 SAU7N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 140.096 35.0240 10.41 0.003 NL 30.0213 15.0107 4.46 0.050 * RESIDUAL 26.9120 3.36400 * TOTAL (CORRECTED) 14 197.029 14.0735 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKIN FILE HSGIONG 11/ 8/** 12:32 PAGE VARIATE V004 TGKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 28.7573 7.18933 1.44 0.304 NL 9.42400 4.71200 0.95 0.430 * RESIDUAL 39.8027 4.97533 * TOTAL (CORRECTED) 14 77.9840 5.57029 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDM FILE HSGIONG 11/ 8/** 12:32 PAGE VARIATE V005 TDM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 8.40427 2.10107 1.71 0.240 NL 2.35776 1.17888 0.96 0.425 * RESIDUAL 9.83057 1.22882 * TOTAL (CORRECTED) 14 20.5926 1.47090 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE HSGIONG 11/ 8/** 12:32 PAGE MEANS FOR EFFECT MT$ MT$ ct1 ct2 ct3 ct4 ct5 NOS 3 3 SAU7N 7.33333 8.26667 15.8667 11.7333 12.2667 TGKIN 15.6667 13.6000 17.3333 17.0667 16.9333 TDM 8.51667 9.56667 7.50667 7.73333 7.82667 SE(N= 3) 1.05893 1.28781 0.640006 5%LSD 8DF 3.45306 4.19940 2.08699 MEANS FOR EFFECT NL 48 NL NOS 5 SAU7N 13.0400 10.5200 9.72000 TGKIN 17.2400 15.6000 15.5200 TDM 7.67000 8.48600 8.53400 SE(N= 5) 0.820244 0.997530 0.495746 5%LSD 8DF 2.67473 3.25285 1.61658 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE HSGIONG 11/ 8/** 12:32 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SAU7N TGKIN TDM GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 11.093 15 16.120 15 8.2300 STANDARD DEVIATION C OF V |MT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.7515 1.8341 16.5 0.0033 2.3601 2.2305 13.8 0.3041 1.2128 1.1085 13.5 0.2399 |NL | | | 0.0496 0.4296 0.4253 | | | | Thí nghiệm 2: Đánh giá ảnh hưởng thành phần mùn cưa lõi ngô đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm linh chi Ga-CB28 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SAU10N FILE TN1 11/ 8/** 12:39 PAGE VARIATE V003 SAU10N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 256.158 64.0395 2.08 0.175 NL 21.9627 10.9813 0.36 0.714 * RESIDUAL 246.415 30.8019 * TOTAL (CORRECTED) 14 524.536 37.4668 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKIN FILE TN1 11/ 8/** 12:39 PAGE VARIATE V004 TGKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 14.6193 3.65483 61.19 0.000 NL 796120 398060 6.66 0.020 * RESIDUAL 477814 597268E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 15.8932 1.13523 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDM FILE TN1 11/ 8/** 12:39 PAGE VARIATE V005 TDM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 229107 572766E-01 49.52 0.000 NL 202133E-01 101067E-01 8.74 0.010 49 * RESIDUAL 925336E-02 115667E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 258573 184695E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1 11/ 8/** 12:39 PAGE MEANS FOR EFFECT MT$ MT$ ct1 ct2 ct3 ct4 ct5 NOS 3 3 SAU10N 23.7000 34.8267 27.6933 23.4100 26.5900 TGKIN 30.4000 29.9767 31.9333 32.5000 32.0000 TDM 3.78333 3.81333 3.57333 3.49333 3.61000 SE(N= 3) 3.20426 0.141099 0.196356E-01 5%LSD 8DF 10.4488 0.460109 0.640297E-01 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 SAU10N 27.4700 28.6000 25.6620 TGKIN 31.4800 31.0400 31.5660 TDM 3.64400 3.70400 3.61600 SE(N= 5) 2.48201 0.109295 0.152097E-01 5%LSD 8DF 8.09359 0.356399 0.495972E-01 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1 11/ 8/** 12:39 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SAU10N TGKIN TDM GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 27.244 15 31.362 15 3.6547 STANDARD DEVIATION C OF V |MT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 6.1210 5.5499 20.4 0.1753 1.0655 0.24439 0.8 0.0000 0.13590 0.34010E-01 0.9 0.0000 |NL | | | 0.7139 0.0199 0.0100 | | | | Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng thành phần mùn cưa hạt đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SAU10N FILE 20 11/ 8/** 12:45 PAGE VARIATE V003 SAU10N LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 271.349 67.8373 3.27 0.072 NL 41.9523 20.9762 1.01 0.408 * RESIDUAL 165.941 20.7426 * TOTAL (CORRECTED) 14 479.242 34.2316 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DF TGKIN FILE 20 50 11/ 8/** 12:45 PAGE VARIATE V004 TGKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 2.97400 743500 1.49 0.292 NL 756334 378167 0.76 0.503 * RESIDUAL 3.99200 499000 * TOTAL (CORRECTED) 14 7.72233 551595 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDM FILE 20 11/ 8/** 12:45 PAGE VARIATE V005 TDM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 253733E-01 634333E-02 0.34 0.844 NL 516000E-02 258000E-02 0.14 0.873 * RESIDUAL 149107 186383E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 179640 128314E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 20 11/ 8/** 12:45 PAGE MEANS FOR EFFECT MT$ MT$ ct1 ct2 ct3 ct4 ct5 NOS 3 3 SAU10N 21.4000 23.6000 15.1167 22.7167 13.1000 TGKIN 28.0667 28.5333 28.2167 28.9333 29.2667 TDM 3.60667 3.54333 3.50667 3.51333 3.49000 SE(N= 3) 2.62949 0.407840 0.788212E-01 5%LSD 8DF 8.57449 1.32992 0.257028 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS SAU10N TGKIN TDM 18.5000 28.6000 3.55800 21.4900 28.3300 3.52200 17.5700 28.8800 3.51600 SE(N= 5) 2.03679 0.315911 0.610546E-01 5%LSD 8DF 6.64177 1.03015 0.199093 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 20 11/ 8/** 12:45 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SAU10N TGKIN TDM GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 19.187 15 28.603 15 3.5320 STANDARD DEVIATION C OF V |MT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.8508 4.5544 23.7 0.0722 0.74269 0.70640 2.5 0.2919 0.11328 0.13652 3.9 0.8439 51 |NL | | | 0.4078 0.5027 0.8726 | | | | Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng thành phần dinh dưỡng bổ sung đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SAU10N FILE TN30 11/ 8/** 12:53 PAGE VARIATE V003 SAU10N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 315.583 52.5972 4.50 0.013 NL 26.0129 13.0064 1.11 0.361 * RESIDUAL 12 140.156 11.6797 * TOTAL (CORRECTED) 20 481.752 24.0876 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKIN FILE TN30 11/ 8/** 12:53 PAGE VARIATE V004 TGKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 9.45876 1.57646 2.74 0.065 NL 423801 211900 0.37 0.703 * RESIDUAL 12 6.90487 575406 * TOTAL (CORRECTED) 20 16.7874 839371 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDM FILE TN30 11/ 8/** 12:53 PAGE VARIATE V005 TDM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 417628 696047E-01 7.03 0.002 NL 960955E-02 480477E-02 0.49 0.632 * RESIDUAL 12 118857 990477E-02 * TOTAL (CORRECTED) 20 546095 273048E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN30 11/ 8/** 12:53 PAGE MEANS FOR EFFECT MT$ MT$ ct1 ct2 ct3 ct4 ct5 ct6 ct7 NOS 3 3 3 SAU10N 16.9000 20.0633 17.6000 19.8333 25.3167 11.3500 18.3833 TGKIN 31.6667 31.7333 31.0900 30.0900 30.2667 31.9500 31.1333 TDM 3.53000 3.63000 3.69333 3.85333 3.78667 3.40000 3.65333 SE(N= 3) 1.97313 0.437952 0.574595E-01 5%LSD 12DF 6.07987 1.34948 0.177052 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS SAU10N TGKIN 52 TDM 7 19.8929 18.4143 17.1700 31.3286 30.9957 31.0743 3.62000 3.67000 3.65857 SE(N= 7) 1.29171 0.286707 0.376160E-01 5%LSD 12DF 3.98021 0.883441 0.115908 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN30 11/ 8/** 12:53 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SAU10N TGKIN TDM GRAND MEAN (N= 21) NO OBS 21 18.492 21 31.133 21 3.6495 STANDARD DEVIATION C OF V |MT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.9079 3.4176 18.5 0.0131 0.91617 0.75855 2.4 0.0648 0.16524 0.99523E-01 2.7 0.0023 |NL | | | 0.3614 0.7034 0.6317 | | | | Thí nghiệm 5: Ảnh hưởng nguồn nguyên liệu nhân giống khác đến sinh trưởng, phát triển chủng nấm Linh chi Ga-CB28 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SAU10N FILE 40 11/ 8/** 12:59 PAGE VARIATE V003 SAU10N LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 495.139 123.785 3.10 0.081 NL 41.4420 20.7210 0.52 0.618 * RESIDUAL 319.540 39.9425 * TOTAL (CORRECTED) 14 856.120 61.1514 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TGKIN FILE 40 11/ 8/** 12:59 PAGE VARIATE V004 TGKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 55.1982 13.7995 2.27 0.151 NL 12.9087 6.45433 1.06 0.392 * RESIDUAL 48.7070 6.08837 * TOTAL (CORRECTED) 14 116.814 8.34384 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TDM FILE 40 11/ 8/** 12:59 PAGE VARIATE V005 TDM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= MT$ 230627 576567E-01 18.86 0.001 NL 208002E-02 104001E-02 0.34 0.724 * RESIDUAL 244534E-01 305668E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 257160 183686E-01 53 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 40 11/ 8/** 12:59 PAGE MEANS FOR EFFECT MT$ MT$ ct1 ct2 ct3 ct4 ct5 NOS 3 3 SAU10N 24.7833 38.5333 34.1417 26.7433 23.8333 TGKIN 28.4833 32.9767 28.0000 28.0000 28.3333 TDM 4.41333 4.53667 4.51000 4.78000 4.49000 SE(N= 3) 3.64886 1.42459 0.319201E-01 5%LSD 8DF 11.8986 4.64544 0.104088 MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5 SAU10N 27.7300 29.3200 31.7710 TGKIN 28.4100 28.6000 30.4660 TDM 4.55800 4.53000 4.55000 SE(N= 5) 2.82639 1.10348 0.247252E-01 5%LSD 8DF 9.21658 3.59835 0.806264E-01 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 40 11/ 8/** 12:59 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SAU10N TGKIN TDM GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 29.607 15 29.159 15 4.5460 STANDARD DEVIATION C OF V |MT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.8199 6.3200 21.3 0.0812 2.8886 2.4675 8.5 0.1506 0.13553 0.55287E-01 1.2 0.0005 54 |NL | | | 0.6178 0.3921 0.7244 | | | |