Sàng lọc tác dụng dịch chiết của một số cây dược liệu trong phòng trừ nấm sclerotium rolfsii gây bệnh héo rũ gốc mốc trắng trên cây địa hoàng

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “SÀNG LỌC TÁC DỤNG DỊCH CHIẾT CỦA MỘT SỐ CÂY DƯỢC LIỆU TRONG PHÒNG TRỪ NẤM SCLEROTIUM ROLFSII GÂY BỆNH HÉO RŨ GỐC MỐC TRẮNG TRÊN CÂY ĐỊA HOÀNG” HÀ NỘI – 2023 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC - - KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “SÀNG LỌC TÁC DỤNG DỊCH CHIẾT CỦA MỘT SỐ CÂY DƯỢC LIỆU TRONG PHÒNG TRỪ NẤM SCLEROTIUM ROLFSII GÂY BỆNH HÉO RŨ GỐC MỐC TRẮNG TRÊN CÂY ĐỊA HOÀNG” Sinh viên thực Họ tên : Dương Văn Sáng Lớp : K64CNSHB Mã sinh viên : 640828 Người hướng dẫn : TS Phan Thúy Hiền ThS Trần Thị Hồng Hạnh Chuyên ngành : Công nghệ sinh học HÀ NỢI – 2023 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam số liệu sử dụng phân tích luận văn kết nghiên cứu tự tìm hiểu, phân tích cách khách quan, trung thực, có nguồn gốc rõ ràng chưa công bố hình thức Tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm có khơng trung thực thơng tin sử dụng cơng trình nghiên cứu Hà Nội, ngày 22 tháng 02 năm 2023 Sinh viên Dương Văn Sáng i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài tốt nghiệp này, nhận giúp đỡ, dạy dỗ hướng dẫn tận tình thầy cô giáo khoa Công nghệ sinh học – Học viện Nông nghiệp Việt Nam Lời đầu tiên, xin cảm ơn đến thầy cô Học viện Nông nghiệp Việt Nam khoa Công nghệ sinh học trang bị kiến thức, kĩ năng, tạo điều kiện để tơi hồn thành đề tài tốt nghiệp với kết tốt Tôi xin chân thành cảm ơn cô ThS Trần Thị Hồng Hạnh ân cần hướng dẫn, giảng dạy tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc, đặc biệt TS Phan Thị Thúy Hiền, ThS Chu Thị Mỹ môn Canh tác Bảo vệ thực vật – Trung tâm Nghiên cứu trồng chế biến thuốc Hà Nội – Viện Dược liệu giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài tốt nghiệp Cuối xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè ln động viên, bên cạnh giúp đỡ, tạo nguồn lượng tinh thần lớn cho suốt trình thực đề tài hồn thành Khóa luận tốt nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 22 tháng 02 năm 2023 Sinh viên Dương Văn Sáng ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ix PHẦN 1: MỞ ĐẦU .1 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN 2: TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 Đặc điểm thực vật, điều kiện sinh thái, giá trị sử dụng cơng dụng địa hồng .3 2.2 Một số nghiên cứu nấm bệnh hại dược liệu, đặc điểm nấm Sclerotium rolfsii dược liệu sử dụng nghiên cứu phòng trừ nấm S rolfsii 2.2.1 Nghiên cứu chung bệnh dược liệu 2.2.2 Đặc điểm nấm Sclerotium rolfsii 2.2.3 Những dược liệu sử dụng nghiên cứu phòng trừ nấm S rolfsii 2.2.3.1 Cà độc dược (Datura metel) .7 2.2.3.2 Long não (Cinnamomum camphora) 2.2.3.3 Thanh hao hoa vàng (Artemisia annua) .9 2.3 Những nghiên cứu ứng dụng dịch chiết dược liệu phòng trừ bệnh hại trồng 11 2.3.1 Những nghiên cứu giới .11 iii 2.3.2 Kết nghiên cứu nước .14 PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tượng nghiên cứu 16 3.2 Vật liệu nghiên cứu 16 3.3 Địa điểm điều tra thời gian nghiên cứu 16 3.4 Nội dung nghiên cứu 16 3.5 Phương pháp nghiên cứu .17 3.5.1 Phương pháp nghiên cứu phịng thí nghiệm 17 3.5.1.1 Phương pháp chuẩn bị môi trường 17 3.5.1.2 Phương pháp phân lập nấm .18 3.5.1.3 Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường đến khả phát triển tản nấm S rolfsii môi trường mPDA, PCA, WA 20 3.5.1.4 Nghiên cứu ảnh hưởng pH khác (4, 5, 6) đến khả phát triển tản nấm S rolfsii môi trường mPDA, PCA, WA 20 3.5.1.5 Nghiên cứu ảnh hưởng nhiệt độ khác đến khả phát triển tản nấm S rolfsii môi trường mPDA or PCA WA 21 3.5.1.6 Phương pháp chiết cao dược liệu .21 3.5.1.7 Phương pháp nghiên cứu khả ức chế loại dịch chiết dược liệu S rolfsii phịng thí nghiệm 22 3.5.1.8 Phương pháp nhân sinh khối 23 3.5.2 Phương pháp lây bệnh nhân tạo 23 3.5.2.1 Lây bệnh trồng nhà lưới 23 3.5.2.2 Phương pháp đánh giá hiệu phòng trừ bệnh héo rũ gốc mốc trắng địa hoàng loai dịch chiết thời điểm xử lý dịch chiết khác .24 3.5.3 Phương pháp xử lý số liệu .24 3.5.3.1 Các cơng thức tính tốn 24 PHẦN IV: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 26 4.1 Kết thu thập phân lập mẫu bệnh héo rũ gốc mốc trắng địa hoàng .26 iv 4.2 Ảnh hưởng số yếu tố sinh thái đến phát triển nấm S rolfsii 27 4.2.1 Ảnh hưởng môi trường đến phát triển nấm S rolfsii 27 4.2.2 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển nấm S rolfsii 28 4.2.3 Ảnh hưởng độ pH đến phát triển nấm S rolfsii 30 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng dịch chiết dược liệu đến phát triển nấm S rolfsii 33 4.3.1 Ảnh hưởng dịch chiết cà độc dược đến phát triển nấm S rolfsii 33 4.3.2 Ảnh hưởng dịch chiết long não đến phát triển nấm S rolfsii36 4.3.3 Ảnh hưởng dịch chiết hoa hoa vàng đến phát triển nấm S rolfsii .37 4.4 Kết nhân sinh khối nấm S rolfsii phịng thí nghiệm .39 4.5 Kết nghiên cứu ảnh hưởng thời điểm xử lý loại dịch chiết đến hiệu phòng trừ bệnh héo rũ gốc mốc trắng địa hoàng 39 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 44 5.1 Kết luận 44 5.2 Kiến nghị .44 TÀI LIỆU THAM KHẢO .45 v DANH MỤC BẢNG Bảng Ảnh hưởng môi trường đến phát triển nấm S rolfsii 28 Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển nấm S rolfsii 29 Bảng Ảnh hưởng pH đến phát triển nấm S rolfsii 31 Bảng 4 Ảnh hưởng cao tổng cà độc dược đến phát triển tản nấm S.rolfsii môi trường PDA 34 Bảng Ảnh hưởng cao tổng long não đến phát triển tản nấm S rolfsii môi trường PDA .36 Bảng Ảnh hưởng cao tổng hao hoa vàng đến phát triển tản nấm S rolfsii môi trường PDA 38 Bảng Ảnh hưởng cao tổng dịch chiết cà độc dược, long não hao hoa vàng vào thời điểm xử lý đến bệnh héo rũ gốc mốc trắng địa hoàng sau ngày xử lý T3 .40 vi DANH MỤC HÌNH Hình Nấm S rolfsii gây bệnh đồng ruộng (a) phân lập môi trường nuôi cấy (b) Hình 2 Cà độc dược .7 Hình Hình thái lá, hoa long não Hình 4.Thanh hao hoa vàng 10 Hình Triệu chứng bệnh héo rũ gốc mốc trắng địa hoàng………… 26 Hình Nấm làm hình thành hạch mơi trường ni cấy 26 Hình Hình thái sợi nấm S rolfsii 27 Hình 4 Tản nấm S rolfsii sau 48h nuôi cấy 20 oC, 25 oC 30 oC (lần lượt từ trái qua phải) .29 Hình Tản nấm S rolfsii sau 72h nuôi cấy 20 oC, 25 oC 30 oC (lần lượt từ trái qua phải) .29 Hình Tản nấm S rolfsii sau 48h nuôi cấy pH 4, 5, (lần lượt từ trái qua phải) 31 Hình Tản nấm S rolfsii sau 72h nuôi cấy pH 4, 5, (lần lượt từ trái qua phải) 31 Hình Tản nấm S rolfsii sau 96h nuôi cấy pH 4, 5, 7(lần lượt từ trái qua phải) 32 Hình Cao tổng cà độc dược .33 Hình 10 Sự phát triển tản nấm S rolfsii mơi trường mPDA có bổ sung dịch chiết cà độc dược sau ngày nuôi cấy 35 Hình 11 Cao tổng long não 36 Hình 12 Sự phát triển tán nấm S rolfsii có bổ sung dịch chiết long não nồng độ khác sau ngày 37 Hình 13 Cao tổng hao hoa vàng 37 vii Hình 14 Sự phát triển tản nấm S rolfsii mơi trường mPDA có bổ sung dịch chiết hao hoa vàng nồng độ khác sau ngày 38 Hình 15 Nấm S rolfsii nhân sinh khối giá thể kê vỏ trấu với tỉ lệ 1:4 39 Hình 16 Cây xử lý CĐD (3% bên trái – 6% bên phải) theo thứ tự lây bệnh T1, T2, T3 (lần lượt từ trái qua phải) sau ngày xử lý T3 42 Hình 17 Cây xử lý dịch chiết LN (2% bên trái - 4% bên phải) theo thứ tự T1, T2, T3 (lần lượt từ trái qua phải) sau ngày xử lý T3 43 Hình 18 Cây sử lý dịch chiết THHV (2% bên trái - 4% bên phải) theo T1, T2, T3 (lần lượt từ trái qua phải) sau ngày xử lý T3 43 viii Hình 17 Cây xử lý dịch chiết LN (2% bên trái - 4% bên phải) theo thứ tự T1, T2, T3 (lần lượt từ trái qua phải) sau ngày xử lý T3 Hình 18 Cây sử lý dịch chiết THHV (2% bên trái - 4% bên phải) theo T1, T2, T3 (lần lượt từ trái qua phải) sau ngày xử lý T3 43 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Đã phân lập tác nhân gây bệnh héo rũ gốc mốc trắng địa hoàng Nấm S.rolfsii phân lập làm môi trường WA mPDA để thực thử nghiệm đánh giá hiệu phòng trừ loại dịch chiết Tác nhân gây bệnh phát triển thuận lợi môi trường mPDA, điều kiện: nhiệt độ từ 25-30oC (tốt 30oC); pH từ 4-7 (tốt pH 7) Với kết đánh giá khả ức chế loại dịch chiết với nấm S.rolfsii Cao chiết tổng cà độc dược có tác dụng ức chế hoàn toàn phát triển nấm S.rolfsii môi trường mPDA nồng độ 3.0% Dịch chiết long não tốt để ức chế phát triển nấm S.rolfsii nồng độ 1,5% đặc biệt 2% ức chế hồn tồn phát triển tản nấm môi trường mPDA Dịch chiết hao hoa vàng có tác dụng ức chế 100% phát triển nấm S.rolfsii nồng độ 1,5% Đánh giá hiệu phòng trừ bệnh bệnh héo rũ gốc mốc trắng cho thấy sử dụng nồng độ dịch chiết cà độc dược dạng cao tổng nồng độ 3% 6% phun trừ bệnh héo rũ gốc mốc trắng vừa xuất bệnh có hiệu phịng trừ cao với hiệu phòng trừ lên đến 84,44%, dịch chiết long não tổng có hiệu phịng trừ tốt (66,67%) nồng độ 2% thời điểm phun trừ nấm sau lây bệnh xuất triệu chứng đồng ruộng Ở nồng độ nghiên cứu 2% dịch chiết tổng hao hoa vàng phun vào thời điểm sau ngày lây bệnh nhân tạo có hiệu phòng trừ tốt 86% 5.2 Kiến nghị Tiếp tục điều tra diễn biến, mức độ gây hại bệnh héo rũ gốc mốc trắng S rolfsii gây địa hoàng vùng Tiếp tục thử nghiệm, đánh giá hiệu phòng trừ số loại dịch chiết dược liệu bảo vệ thực vật phịng bệnh nấm hại địa hồng nói chung nấm S rolfsii nói riêng đồng ruộng 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO A Tài liệu tiếng Việt Bộ Nông nghiệp PTNT (2010), QCVN 01-38: 2010/BNNPTNT, quy chuẩn kỹ thuật quốc gia phương pháp điều tra phát dịch hại trồng Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Trương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đầm (2006), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập 2, NXB Khoa học kỹ thuật Đỗ Huy Bích, Đặng Quang Chung, Bùi Xuân Trương, Nguyễn Thượng Dong, Đỗ Trung Đầm (2003), Cây thuốc động vật làm thuốc Việt Nam, tập 1, NXB Khoa học kỹ thuật, tr.774 – 781 Đỗ Tất Lợi (1995), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, NXB Khoa học Kỹ thuật, 1485 trang Lê Lương Tề, Vũ Triệu Mân cộng (1998), Giáo trình Bệnh đại cương, NXB Nơng nghiệp Hà Nội Lê Trần Đức (1997), Cây thuốc Việt Nam, NXB Nông nghiệp Lester W, Burgess, Timothy E, Knight, Len Tesoriero, Phan Thúy Hiền (2009), Cẩm nang chẩn đoán bệnh Việt Nam, Australian Centre for International Agricultural Research, ACIAR, 199 trang Nguyễn Thị Lan Phạm Tiến Dũng (2005), Giáo trình phương pháp thí nghiệm, NXB Nông nghiệp Hà Nội Ngô Quốc Luật, Vũ Thị Tuyết Mai, Ngơ Bích Hảo (2005), “Nghiên cứu nấm bệnh Sclerotium rolfsii hại bạch truật khảo sát số biện pháp phịng trừ”, Tạp chí dược liệu, số 10.Lê Đăng Quang cộng (2018) Nghiên cứu công nghệ sản xuất chế phẩm BVTV sinh học từ Muồng trâu Cassia alata L Cục Thông tin khoa học công nghệ quốc gia, mã báo cáo đề tài: 14020 11.Chu Thị Mỹ, Đặng Thị Hà, Trần Hữu Khánh Tân, Nguyễn Thị Duyên, Đào Văn Núi, Nguyễn Văn Hùng, Trần Văn Lộc, Phan Thúy Hiền (2018) Bước 45 đầu nghiên cứu tác dụng ức chế nấm Sclerotium rolfsii Tạp chí bảo vệ thực vật, số 6(281): p.31-39 12.Bộ Y tế Dược điển Việt Nam V Y Học: 2011 13.Hà, T T T., & Hòa, P T (2012) Khả đối kháng nấm trichoderma với nấm bệnh hại trồng Sclerotium rolfsii Sacc điều kiện in vitro Hue University Journal of Science: Agriculture and Rural Development, 75(6) 14.Vũ Hoài Sâm, Nguyễn Thị Xuyên, Trịnh Văn Vượng, Nguyễn Thị Hương, Đỗ Thị Hà, Phan Thúy Hiền (2020) Đặc điểm hình thái số mẫu giống địa hoàng (Rehmania glutinosa (Gaertn.) Libosch.) trồng Việt Nam Tạp chí Dược học, số (60): p 67-72 15 Lester W Burgess Timothy E Knight Len Tesoriero Phan Thúy Hiền (2009) Cẩm nang chẩn đoán bệnh Việt Nam p 88-94 16.Nguyễn Tiến Bân (chủ biên) (2005) Danh lục loài thực vật Việt Nam Tập III Hà Nội: Nhà xuất Nông nghiệp trang 222 17.Trịnh Thùy Dương, Phan Thúy Hiền, Chu Thị Mỹ, Đặng Thị Hà, Lê Thị Thu, Ngô Quốc Luật (2015) Nghiên cứu tác nhân gây bệnh thối gốc địa hồng Tạp chí bảo vệ thực vật, số (264), trang 23 -28 B Tài liệu tiếng Anh V Jalander BD Gachande (2012) "effect of aqueous leaf extract of datura sp against two plant pathogenic fungi", International journal of food, agriculturen and veterinary sciences, vol (3), pp 131 – 134 Franzener, G., Stangarlin, J.R., Schwan-Estrada, K.R.F., & Cruz, M.E.S (2003) Antifungal activity and induction of resistance in wheat to Bipolaris sorokiniana by Artemisia camphorata Acta Scientiarum Agronomy, 25(2), 503-507 Carre, V., Stangarlin, J R., Becker, A., Zanella, A L., Gonỗalves Jỳnior, A C., Schwan-Estrada, K R F., & Cruz, M E S (2006) Postharvest control 46 of Colletotrichum musae in banana (Musa sp.) with camphor (Artemisia camphorata) and chitosan Scientia Agraria Paranaensis, 5(1), 57-66 Garden, B B (2000) Natural disease control: A common-sense approach to plant first aid Handbook 164 Brooklyn Botanic Garden Inc, 1000, 98 Okereke, V C., & Wokocha, R C (2006) Effects of some tropical plant extracts, Trichoderma harzianum and captan on the damping-off disease of tomato induced by Sclerotium rolfsii Agricultural Journal, 1(2), 52-54 Tohamy M.R A; A.Z Aly; T.H Abd –El- Moity, M.M Atia and Maisa L Abed – El- Moncim (2002) Evaluation of some plant extract in control damping off and mildew diseases of cucumber Eggpt J phytopa tol, vol 30, No.2, pp 71-80 Singh, U P., Prithiviraj, B., Wagner, K G., & Plank-Schumacher, K (1995) Effect of ajoene, a constituent of garlic (Allium sativum), on powdery mildew (Erysiphe pisi) of pea (Pisum sativum)/Die Wirkung von Ajoen, einer Verbindung aus Knoblauch (Allium sativum), auf Echten Mehltau (Erysiphe pisi) der Erbse (Pisum sativum) Zeitschrift für Pflanzenkrankheiten und Pflanzenschutz/Journal of Plant Diseases and Protection, 399-406 N Siva, S Ganesan, N Banumathy and Muthuchelian (2008) Anti fungal effect of leaf extract of some medical plant against Fusarium oxysporum causing wilt dease of solanum melogene L Ethnobata nical leaf let 12: 156163 R.C Dubey, Haris Kamur, R.R Pandey (2009) Fungitoxic effect of neem extracts on growth and sclerotial surviral of Macrophomina phaseonila in vintro Journal of American scican sciene 5(5) :17-24 10.Abdalla, M., Shabana, Y M., Ismaiel, A A., & El-Nady, I A (2009) effect of different plant extracts and essential oils on some important fungal pathogens causing damping-off and root rot diseases in sugar beet Journal of Plant Protection and Pathology, 34(8), 9107-9116 47 11.Sohbat Bahraminejad, Saeed Abbasi and Reza Amiri.The effect off some medical and ornamental plant extracts against Fusarium oxysporum J Crop Prot, 2015, 4(2); 189- 197 12.Kuo, P C., Hsieh, T F., Lin, M C., Huang, B S., Huang, J W., & Huang, H C (2015) Analysis of antifungal components in the galls of Melaphis chinensis and their effects on control of anthracnose disease of chinese cabbage caused by Colletotrichum higginsianum Journal of Chemistry, 2015 13.Solimana, K.M and Badeaa, R.I (2002) Effect of oil extracted from some medicinal plants on different mycotoxigenic fungi Food and Chemical Toxicology 40: 1669-1675 14.Wilson, C L., Solar, J M., El Ghaouth, A., & Wisniewski, M E (1997) Rapid evaluation of plant extracts and essential oils for antifungal activity against Botrytis cinerea Plant disease, 81(2), 204-210 15.Pradhanang, P M., Momol, M T., Olson, S M and Jones, J B (2003) Effects of plant essential oils on Ralstonia solanacearum population density and bacterial wilt incidence in tomato Plant Dis 87: 423-427 16.Van der Wolf, J M., Birnbaum, Y., Van der Zouwen, P S., & Groot, S P C (2008) Disinfection of vegetable seed by treatment with essential oils, organic acids and plant extracts Seed science and technology, 36(1), 76-88 17.Guzman, R S., & Davide, R G (1992) Screening of various plant extracts for toxicity to Meloidogyne incognita and Radopholus similis PARRFI Book Series (Philippines) no 18.J.R Stanarlin, O.J Kuhn, L Assi, K.R.F Schwan-Estrada Control of plant disease using extracts from medicinal plant and fungi 19.Saira Banaras, Arshad Javaid and Sheikh Muhammad Iqbal, use of methanolic extracts of asteraceous weed eclipita alba for control of Mcrophomina phaseolina Pak.J Weed Sci.Res., 21 (1): 101-110, 2015 48 20.Sahimerdan Türkölmez, E.Mine Soylu (2014) Antifungal Efficacies of Plant Essential Oils and Main Constituents Against Soil-Bome Fungal Disease Agents of Bean, ournal-of-essential-oil-bearing-plants 17 (2) 21.Wavare, SH, RM Gade, and AV Shitole (2017) Effect of Plant Extracts, BioAgents and Fungicides against Sclerotium rolfsii Causing Collar Rot in Chickpea Indian Journal of Pharmaceutical Sciences 79(4): 513-520 22.Dissanayake, M L M C and J A N Jayasinghe (2013) Antifungal activity of selected medicinal plant extracts against plant pathogenic fungi; Rhizoctonia solani, Colletotrichum musea and Fusarium oxysporum Int J Sci Inven Today, 2(5):421-431 23.Wavare, SH, RM Gade, and AV Shitole (2017) Effect of Plant Extracts, Bio Agents and Fungicides against Sclerotium rolfsii Causing Collar Rot in Chickpea Indian Journal of Pharmaceutical Sciences 79(4):513-520 24.Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition, Revision A, 1998 25.Steel, R.G.D and J.H Torrie (1980) Principles and Procedure of Statistics A Biometrical Approach p 507 McGraw Hill Book Co., Inc New York, USA 26.Philippe S., Souaïbou F., Guy A., et al (2012), Chemical Composition and Antifungal activity of essential oil of fresh leaves of Ocimum gratissimum from Benin against six mycotoxigenic fungi isolated from traditional cheese wagashi Research Journal of Biological Sciences, 1, 22– 27 27.Sesha K., Lingaraju S., Adiver S (2006), Effect of Plant Extracts on Sclerotium rolfsii, the Incitant of Stem rot of Groundnut, Journal Mycology plant pathology, 36(1), 77-79 28.Aycock R (1966), Stem rot and other diseases caused by Sclerotium rolfsii, North Carolina Agricultural experiment Station Technical Bulletin, 2, 174202 49 29.Talukder M (1974), Plant diseases of Bangladesh, Bangladesh Journal of Agriculture Research, 1(1), 64-68 30.Goto, K (1930) On the perfect stage of Sclerotium rolfsii Sacc produced on culture media Preliminary report Journal of the Society of Tropical Agriculture, 31.D Saha, S Dasgupta, and A Saha (2005) Antifungal Activity of Some Plant Extracts Against Fungal Pathogens of Tea (Camellia sinensis) Pharmaceutical Biology Vol 43, No 1, pp 87–91 50 PHỤ LỤC Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến phát triển tản nấm S Rolfsii F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 33) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS 0.60830 0.11292 C OF V |ND % | | | | | | 24H 33 0.41667 48H 33 1.9173 1.8014 0.16875 8.8 0.0000 72H 33 4.0856 2.5253 0.58948 14.4 0.0000 96H 33 6.7455 3.2443 0.21138 3.1 0.0000 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H FILE MT 27.1 0.0000 1/ 2/** 16: PAGE Anh huong cua moi truong den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V002 24H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= MT 25.4589 * RESIDUAL 24 404718 12.7295 754.86 0.000 168633E-01 * TOTAL (CORRECTED) 26 25.8637 994756 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H FILE MT 1/ 2/** 16: PAGE Anh huong cua moi truong den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V003 48H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= MT * RESIDUAL 67.5753 24 1.07389 33.7877 755.11 0.000 447455E-01 * TOTAL (CORRECTED) 26 68.6492 51 2.64035 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H FILE MT 1/ 2/** 16: PAGE Anh huong cua moi truong den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V004 72H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= MT 146.707 * RESIDUAL 73.3536 24 1.18693 ****** 0.000 494554E-01 * TOTAL (CORRECTED) 26 147.894 5.68824 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 96H FILE MT 1/ 2/** 16: PAGE Anh huong cua moi truong den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V005 96H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB SQUARES SQUARES ER LN ============================================================================= MT 296.104 * RESIDUAL 24 826206 148.052 ****** 0.000 344252E-01 * TOTAL (CORRECTED) 26 296.930 11.4204 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MT 1/ 2/** 16: PAGE Anh huong cua moi truong den su phat trien cua nam S rolfsii MEANS FOR EFFECT MT MT NOS 24H 48H 0.000000 0.925000 52 72H 96H 1.31667 1.97500 2.07500 4.31111 6.44444 9.00000 2.04444 4.25000 6.05556 9.00000 SE(N= 9) 5%LSD 24DF 0.432862E-01 0.705105E-01 0.741286E-01 0.618468E-01 0.126340 0.205800 0.216361 0.180514 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MT 1/ 2/** 16: PAGE Anh huong cua moi truong den su phat trien cua nam S rolfsii F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 27) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |MT % | | | | | | 24H 27 1.3731 0.99737 0.12986 9.5 0.0000 48H 27 3.1620 1.6249 0.21153 6.7 0.0000 72H 27 4.6056 2.3850 0.22239 4.8 0.0000 96H 27 6.6583 3.3794 0.18554 2.8 0.0000 Ảnh hưởng nhiệt độ đến phát triển tản nấm S Rolfsii BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H FILE NHIETDO 1/ 2/** 14:44 PAGE Anh huong cua nhiet den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V002 24H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= ND * RESIDUAL 11.4583 30 382498 5.72917 449.35 0.000 127499E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 11.8408 370026 - 53 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H FILE NHIETDO 1/ 2/** 14:44 PAGE Anh huong cua nhiet den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V003 48H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= ND 102.993 * RESIDUAL 30 854293 51.4963 ****** 0.000 284764E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 103.847 3.24521 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H FILE NHIETDO 1/ 2/** 14:44 PAGE Anh huong cua nhiet den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V004 72H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= ND 96.8239 30 10.4248 347492 * RESIDUAL 193.648 278.64 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 32 204.073 6.37727 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 96H FILE NHIETDO 1/ 2/** 14:44 PAGE Anh huong cua nhiet den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V005 96H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF SQUARES MEAN F RATIO PROB ER SQUARES LN ============================================================================= ND 335.476 54 167.738 ****** 0.000 * RESIDUAL 30 1.34041 446803E-01 * TOTAL (CORRECTED) 32 336.817 10.5255 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NHIETDO 1/ 2/** 14:44 PAGE Anh huong cua nhiet den su phat trien cua nam S rolfsii MEANS FOR EFFECT ND ND NOS 20 11 25 11 30 11 24H 48H 72H 96H 1.05682 2.23636 4.26318 6.98636 9.00000 1.48864 4.21364 9.00000 0.000000 0.000000 1.25000 0.000000 SE(N= 11) 0.340454E-01 0.508799E-01 0.177736 0.637326E-01 5%LSD 30DF 0.983259E-01 0.146946 0.184065 0.513318 - ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NHIETDO 1/ 2/** 14:44 PAGE Anh huong cua nhiet den su phat trien cua nam S rolfsii Ảnh hưởng pH đến tốc độ phát triển tản nấm nấm S rolfsii BALANCED ANOVA FOR VARIATE 24H FILE PH 10/ 2/** 21:54 PAGE Anh huong cua pH den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V002 24H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= PH * RESIDUAL 170.557 32 840277 56.8525 ****** 0.000 262586E-01 * TOTAL (CORRECTED) 35 171.398 4.89708 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 48H FILE PH 55 10/ 2/** 21:54 PAGE Anh huong cua pH den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V003 48H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= PH 152.000 * RESIDUAL 32 958241 50.6667 ****** 0.000 299450E-01 * TOTAL (CORRECTED) 35 152.958 4.37024 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 72H FILE PH 10/ 2/** 21:54 PAGE Anh huong cua pH den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V004 72H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= PH 149.351 * RESIDUAL 32 1.22540 49.7837 ****** 0.000 382939E-01 * TOTAL (CORRECTED) 35 150.576 4.30218 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 96H FILE PH 10/ 2/** 21:54 PAGE Anh huong cua pH den su phat trien cua nam S rolfsii VARIATE V005 96H LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN SQUARES SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= PH * RESIDUAL 226.786 75.5952 32 6.64112 207535 364.25 0.000 * TOTAL (CORRECTED) 35 233.427 6.66934 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PH 10/ 2/** 21:54 PAGE Anh huong cua pH den su phat trien cua nam S rolfsii 56 MEANS FOR EFFECT PH PH NOS 24H 48H 9 1.57500 1.58056 1.46389 2.06667 3.47222 3.45556 3.34444 4.10556 5.83056 5.49167 5.42778 6.78611 9) 5%LSD 32DF 0.000000 96H SE(N= 0.000000 72H 0.000000 0.000000 0.540151E-01 0.576821E-01 0.652294E-01 0.151853 0.155592 0.166155 0.187895 0.437417 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PH 10/ 2/** 21:54 PAGE Anh huong cua pH den su phat trien cua nam S rolfsii F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD (N= SD/MEAN | 36) DEVIATION NO BASED ON BASED ON OBS TOTAL SS RESID SS C OF V |PH % | | | | | 24H 36 2.7194 2.2129 0.16205 6.0 0.0000 48H 36 2.6319 2.0905 0.17305 6.6 0.0000 72H 36 2.5590 2.0742 0.19569 7.6 0.0000 96H 36 3.2396 2.5825 0.45556 14.1 0.0000 57 |