Nghiên cứu nhân nhanh và ra rễ in vitro cây la hán quả

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC 🙡 🕮 🙣 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH VÀ RA RỄ IN VITRO CÂY LA HÁN QUẢ (Siraitia grosvenorii) HÀ NỘI – 2023 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC 🙡 🕮 🙣 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU NHÂN NHANH VÀ RA RỄ IN VITRO CÂY LA HÁN QUẢ (Siraitia grosvenorii) Người thực : Lê Thanh Sơn MSV : 646105 Lớp : K64CNSHB Ngành : Công nghệ sinh học Người hướng dẫn : ThS Vũ Hoài Sâm TS Nguyễn Thị Thúy Hạnh HÀ NỘI – 2023 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn khóa luận ghi rõ nguồn gốc Sinh viên Lê Thanh Sơn i LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực khóa luận, em nhận quan tâm, giúp đỡ nhiều cá nhân quan đơn vị với nỗ lực thân em Nay khóa luận hồn thành, em xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới: ThS Vũ Hoài Sâm – Phó trưởng phịng Cơng nghệ sinh học Trung tâm Nghiên cứu Nguồn gen Giống dược liệu Quốc gia - Viện Dược liệu - dành nhiều thời gian, tâm huyết hướng dẫn, bảo, giúp đỡ em tận tình suốt trình em thực tập Trung tâm TS Nguyễn Thị Thúy Hạnh - Phó trưởng khoa, giảng viên Khoa Cơng nghệ sinh học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam, người tận tình hướng dẫn tạo điều kiện, giúp đỡ em trình thực tập Em xin cảm ơn anh chị cán phịng thí nghiệm ni cấy mô Trung tâm Nghiên cứu Nguồn gen Giống dược liệu Quốc gia - Viện Dược liệu giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho em trình làm thực tập Trung tâm Em xin cảm ơn thầy giáo, cô giáo Học viện Nơng nghiệp Việt Nam tận tình dạy bảo em suốt năm học qua Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn người thân gia đình bạn bè giúp đỡ động viên em suốt thời gian học tập Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 05 tháng 02 năm 2023 Sinh viên Lê Thanh Sơn ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii PHẦN I MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích 1.3 Yêu cầu PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung la hán 2.1.1 Nguồn gốc phân bố 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.1.3 Thành phần hóa học 2.1.4 Bộ phận sử dụng làm thuốc công dụng la hán 2.2 Cơ sở khoa học đề tài 2.2.1 Cơ sở lý luận phương pháp nhân giống in vitro 2.2.2 Quy trình nhân giống vơ tính in vitro 2.2.3 Ảnh hưởng số yếu tố đến trình nhân giống in vitro 2.2.3.1 Vật liệu nuôi cấy 2.2.3.2 Điều kiện nuôi cấy 2.2.3.3 Môi trường dinh dưỡng 2.3 Ưu nhược điểm phương pháp nhân giống in vitro 12 2.4 Một số nghiên cứu nhân giống in vitro la hán nước 13 2.4.1 Trong nước 13 2.4.2 Ngoài nước 13 iii PHẦN III ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tượng vật liệu nghiên cứu 16 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 16 3.3 Nội dung nghiên cứu 16 3.4 Phương pháp nghiên cứu 17 3.4.1 Phương pháp nuôi cấy in vitro 17 3.4.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 17 3.5 Các tiêu theo dõi 19 3.6 Phương pháp xử lý số liệu 19 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 20 4.1 Nghiên cứu nhân nhanh chồi 20 4.1.1 Nghiên cứu ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán 20 4.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán 21 4.1.3 Nghiên cứu ảnh hưởng tổ hợp BA IBA/NAA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán 23 4.2 Nghiên cứu rễ 25 4.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng nồng độ khoáng MS đến khả rễ in vitro la hán 26 4.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng NAA đến khả rễ in vitro la hán 27 4.2.3 Nghiên cứu ảnh hưởng IBA đến khả rễ in vitro la hán 28 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 31 5.1 Kết luận 31 5.2 Kiến nghị 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 32 PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU 35 iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT BA 6-Benzyladenin Cs Cộng CT Công thức CV% Hệ số biến động ĐC Đối chứng IBA 3-Indolebutiric axid LSD5% Giá trị sai khác nhỏ có ý nghĩa mức ý nghĩa 0.05 MS Murashige and Skoog NDT Nhân dân tệ (đơn vị tiền tệ Trung Quốc) NXB Nhà xuất TB Trung bình TT Thứ tự α-NAA α-Napthalene acetic axid v DANH MỤC BẢNG Bảng Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 20 Bảng Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 22 Bảng Ảnh hưởng tổ hợp BA IBA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 23 Bảng 4 Ảnh hưởng tổ hợp BA α-NAA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 24 Bảng Ảnh hưởng nồng độ khoáng đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 26 Bảng Ảnh hưởng α-NAA đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 27 Bảng Ảnh hưởng IBA đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 29 vi DANH MỤC HÌNH Hình La hán - Siraitia grosvenorii Hình Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 21 Hình Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 23 Hình Ảnh hưởng tổ hợp BA IBA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 24 Hình 4 Ảnh hưởng tổ hợp BA α-NAA đến khả nhân nhanh chồi in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 25 Hình Ảnh hưởng nồng độ khoáng đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 27 Hình Ảnh hưởng α-NAA đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 28 Hình Ảnh hưởng IBA đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 30 vii TÓM TẮT Đề tài “Nghiên cứu nhân nhanh rễ in vitro la hán (Siraitia grosvenorii)” thực nhằm hồn thiện quy trình nhân giống in vitro la hán Chồi la hán in vitro nuôi cấy mơi trường MS (Murashige and Skoog) có bổ sung chất điều tiết sinh trưởng để thăm dò khả nhân nhanh rễ chúng Kết nghiên cứu cho thấy: Mơi trường MS có bổ sung 0,5 mg/l BA cho kết nhân chồi tốt với 6,75 chồi/mẫu, chiều cao chồi trung bình 4,6 cm, số trung bình 5,8 sau tuần ni cấy Thí nghiệm cho thấy, mơi trường ½ MS có bổ sung 0,1 mg/l IBA cho tỷ lệ chồi tạo rễ đạt 100%, số rễ đạt nhiều 5,33 rễ/chồi, chiều dài rễ 5,15 cm viii Bảng Ảnh hưởng IBA đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) TT Nồng độ IBA (mg/l) 0,0 (ĐC) Số rễ (rễ) Chiều dài rễ (cm) Chiều cao (cm) Số lá/cây (lá) 4,83 ± 0,24b 4,86 ± 0,20ab 5,33 ± 0,40b 4,3 ± 0,26ab 0,1 5,33 ± 0,16a 5,15 ± 0,29a 5,86 ± 0,25a 4,5 ± 0,17a 0,3 4,45 ± 0,28bc 3,83 ± 0,16b 4,95 ± 0,16bc 4,0 ± 0,10b 0,5 4,13 ± 0,18c 3,75 ± 0,18b 4,43 ± 0,24c 3,8 ± 0,26b CV% 4,70 4,80 3,40 4,10 LSD0.05 0,42 0,40 0,52 0,40 Môi trường nền: ½MS + 30g/l sucrose + 6g/l agar Kết Bảng cho thấy, la hán đối tượng dễ rễ, mơi trường có hay khơng có chất điều tiết sinh trưởng, chồi rễ đạt 100% IBA có ảnh hưởng tích cực đến khả tạo rễ chồi la hán so với α-NAA: Chất lượng tốt hơn: cao, khỏe, màu xanh đậm, chiều dài rễ cải thiện rõ rệt, rễ dài Đặc biệt tượng tạo mô sẹo gốc chồi khơng có có (Hình 4.7) So với mơi trường có bổ sung α-NAA, tiêu số rễ mơi trường IBA hơn, rễ tạo có chất lượng tốt (rễ dài, trắng có nhiều rễ phụ) – giống với rễ la hán ngồi tự nhiên, cịn rễ môi trường NAA rễ nhiều, dạng rễ chùm, ngắn Theo nghiên cứu Qin Xinmin cộng năm 2008, tỷ lệ rễ môi trường lỏng ½ MS + mg/l IBA đạt 91,7% (Qin Xinmin et al., 2008) Kết thấp so với nghiên cứu môi trường thch MS, ẵ MS, ẳ MS cú hay khụng cú chất điều tiết sinh trưởng tỷ lệ rễ đạt 100% 29 Như vậy, mơi trường thạch ½ MS có bổ sung 0,1 mg/l IBA mơi trường rễ tốt (cả chất lượng rễ), 100% chồi tạo rễ, số rễ đạt cao 5,33 rễ; chiều dài rễ 5,15cm ĐC 0,1 mg/l 0,3 mg/l 0,5 mg/l Hình Ảnh hưởng IBA đến khả rễ in vitro la hán (sau tuần nuôi cấy) 30 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Môi trường MS có bổ sung 0,5 mg/l BA mơi trường nhân nhanh thích hợp cho tỷ lệ mẫu tạo chồi đạt 100%, hệ số nhân chồi đạt 6,75 chồi/mẫu, chồi to thân mập, to có màu xanh đậm Mơi trường ½ MS có bổ sung 0,1 mg/l IBA môi trường rễ tốt (cả chất lượng rễ), 100% chồi tạo rễ, số rễ đạt cao 5,33 rễ; chiều dài rễ 5,15 cm 5.2 Kiến nghị Tiếp tục nghiên cứu giai đoạn vườn ươm, hồn thiện quy trình nhân giống in vitro la hán 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Hoàng Minh Tấn, Nguyễn Quang Thạch, Vũ Quang Sáng (2006) Giáo trình sinh lý thực vật NXB Nơng nghiệp, 240tr Ngơ Xn Bình (2010) Ni Cấy Mô Tế Bào Thực Vật Cơ Sở Lý Luận Và Ứng Dụng NXB Khoa học Kỹ thuật, 296tr Trần Thị Lệ, Trần Thị Triêu Hà, Trương Thị Bích Phượng (2008) Giáo trình Cơng nghệ sinh học thực vật NXB Nơng Nghiệp, 288tr Trần Văn Hồng, Trịnh Ngọc Nam (2008) Giáo trình Ni cấy mơ tế bào thực vật NXB Đà Nẵng, 355tr Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2009) Công nghệ sinh học tập - Công nghệ tế bào NXB Giáo dục, 187tr Tài liệu tiếng Anh Chen, J F (2013) Tissue culture and rapid propagation of seedless Siraitia grosvenorii Plant Physiol J, 49: 968 - 972 Chen, W J., Wang, J., Qi, X Y., & Xie, B J (2007) The antioxidant activities of natural sweeteners, mogrosides, from fruits of Siraitia grosvenori International Journal of Food Sciences and Nutrition, 58(7), 548– 556 https://doi.org/10.1080/09637480701336360 Chun, L I., Li-mei, L I N., Feng, S U I., Zhi-min, W., Hai-ru, H U O., Li, D A I., & Ting-liang, J (2014) Chemistry and pharmacology of Siraitia grosvenorii: A review Chinese Journal of Natural Medicines, 12(2), 89–102 https://doi.org/10.1016/S1875-5364(14)60015-7 Flora of China Editorial Board of the Chinese Academy of Sciences (2004) Flora of China Beijing: Science Press 10 Gong Xue, Namuhan Chen, Kai Ren, Junying Jia, Kunhua Wei, Le Zhang, Ying Lv, Jianhua Wang, and Minhui Li (2019) The Fruits of Siraitia grosvenorii: A Review of a Chinese Food-Medicine Frontiers in Pharmacology, 10, 1400 doi: 10.3389/fphar.2019.01400 32 11 Jiang, N., Hu, F.Y., Ye, Y F., Jiang, S.Y., and Huang, X.Y., (2015) First Report of Leaf Spot Caused by Stagonosporopsis cucurbitacearum on Luohanguo (Siraitia grosvenorii) in China Plant Disease, 99(11), 1645 https://doi.org/10.1094/PDIS-12-14-1259-PDN 12 Lan Taoju, Xu Hongyuan, He Bing, Lin Wei, Li Qiqin, Sha Bo (2006) Studies on Direct Differentiatiing Regenerated Plantlets from Different Organs of Siraitia grosvenorii in vitro Biotechnology Bulletin, 514 - 516 13 Liang Zu-zhen, Li Wen-lan, Li Hua-ying, Hao Zai-bin, Li Hai-yun, Gao Yong-hua (2010) Establishment of an Effective Regeneration System via Cotyledon of Siraitia grosvenirii Special Wild Economic Animal and Plant Research 14 Liu, H., Wang, C., Qi, X., Zou, J., and Sun, Z (2018) Antiglycation and antioxidant activities of mogroside extract from Siraitia grosvenorii (Swingle) fruits J Food Sci Technol 55, 1880–1888 doi: 10.1007/s13197018-3105-2 15 Lu, A M., and Zhang, Z Y (1984) The genus Siraitia Merr in China Guihai 4, 27–33 16 Lu, F., Li, D., Fu, C., Liu, J., Huang, Y., Chen, Y., Nohara, T (2012) Studies on chemical fingerprints of Siraitia grosvenorii fruits (Luo Han Guo) by HPLC Journal of Natural Medicines, 66(1), 70–76 https://doi.org/10.1007/s11418-011-0555-5 17 Murashige T, Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures Physiol Plant 15:473–479 18 Suzuki, Y A., Murata, Y., Inui, H., Sugiura, M., & Nakano, Y (2005) Triterpene glycosides of Siraitia grosvenori inhibit rat intestinal maltase and suppress the rise in blood glucose level after a single oral administration of maltose in rats Journal of Agricultural and Food Chemistry, 53(8), 2941– 2946 https://doi.org/10.1021/jf0478105 33 19 Takasaki, M., Konoshima, T., Murata, Y., Sugiura, M., Nishino, H., Tokuda, H., Yamasaki, K (2003) Anticarcinogenic activity of natural sweeteners, cucurbitane glycosides, from Momordica grosvenori Cancer Letters, 198(1), 37–42 https://doi.org/10.1016/S0304- 3835(03)00285-4 20 Takeo, E., Yoshida, H., Tada, N., Shingu, T., Matsuura, H., Murata, Y., Kohda, H (2002) Sweet elements of siraitia grosvenori inhibit oxidative modification of low-density lipo- protein Journal of Atherosclerosis and Thrombosis, 9(2), 114–120 https://doi.org/10.5551/ jat.9.114 21 Wei Lin, Li Qi- qin, Mo Na, Huang Yong -bing, Peng Hao-wen, Liao Jinpeng (2003) Investigations of the virus disease of Siraitia grosvenori in Guangxi Zhiwu Baohu (China) 22 Qin Xinmin, Yang Hua, Wei Suling (2008) Study on the Tissue Culture and Rapid Propagation of Siraitia Grosvenorii Journal of Anhui Agricultural Sciences, 36(9), 3553 23 Yang Dongye and Liu Xianxian (2010) Effect of Different Plant Hormones on the Rapid Propagation of Momordica grosvenori Swingle Journal of Anhui Agricultural Sciences, 38(33), 18798-18799 24 Zeng Qiguo, Xiaojun Ma, Peihao Peng, Wei Xu, Shixin Feng, Rongchang Wei, Xi Huang, Qi Tang, Xiaofeng Wang, Limei Pan (2011) Agrogeological Investigation on the Original Producing Area of Siraitia grosvenorii International Conference on Multimedia Technology, 5264 – 5267 doi: 10.1109/ICMT.2011.6002832 34 PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU Ảnh hưởng BA đến khả nhân nhanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC/M FILE LH BA 16/11/** 14: PAGE VARIATE V003 SC/M LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 59.5904 14.8976 329.74 0.000 * RESIDUAL 10 451797 451797E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 60.0422 4.28873 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LH BA 16/11/** 14: PAGE VARIATE V004 CC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.19500 798750 16.35 0.000 * RESIDUAL 10 488600 488600E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.68360 263114 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LH BA 16/11/** 14: PAGE VARIATE V005 SL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1.88400 471000 8.72 0.003 * RESIDUAL 10 540000 540000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.42400 173143 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LH BA 16/11/** 14: PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 NOS 3 3 SC/M 1.00000 3.75000 6.75000 5.56000 5.43000 CC 5.90000 5.15000 4.60000 4.85000 4.75000 SL 6.80000 6.50000 5.80000 6.00000 6.30000 SE(N= 3) 0.122719 0.127619 0.134164 5%LSD 10DF 0.386692 0.402133 0.422756 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LH BA 16/11/** 14: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - 35 VARIATE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 4.4980 15 5.0500 15 6.2800 SC/M CC SL STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 2.0709 0.21256 4.7 0.0000 0.51295 0.22104 4.4 0.0003 0.41610 0.23238 3.7 0.0029 | | | | Ảnh hưởng Kinetin đến khả nhân nhanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC/M FILE LH KINETIN 16/11/** 14:25 PAGE VARIATE V003 SC/M LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 33.2596 8.31489 461.93 0.000 * RESIDUAL 10 180003 180003E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 33.4396 2.38854 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LH KINETIN 16/11/** 14:25 PAGE VARIATE V004 CC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.97740 994350 39.09 0.000 * RESIDUAL 10 254400 254400E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.23180 302271 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LH KINETIN 16/11/** 14:25 PAGE VARIATE V005 SL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.07600 519000 14.42 0.000 * RESIDUAL 10 360000 360000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.43600 174000 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LH KINETIN 16/11/** 14:25 PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 SE(N= 3) NOS 3 3 SC/M 1.00000 3.25000 5.13000 4.67000 4.48000 CC 5.90000 4.73000 4.78000 5.38000 5.91000 SL 6.80000 5.90000 6.10000 6.60000 6.80000 0.774603E-01 0.920870E-01 0.109545 36 5%LSD 10DF 0.244080 0.290169 0.345179 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LH KINETIN 16/11/** 14:25 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SC/M CC SL GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.7060 15 5.3400 15 6.4400 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.5455 0.13417 3.6 0.0000 0.54979 0.15950 3.0 0.0000 0.41713 0.18974 2.9 0.0005 | | | | Ảnh hưởng IBA đến khả nhân nhanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC/M FILE LHB IBA 16/11/** 14:56 PAGE VARIATE V003 SC/M LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 24.6908 8.23027 242.24 0.000 * RESIDUAL 271802 339753E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 24.9626 2.26933 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LHB IBA 16/11/** 14:56 PAGE VARIATE V004 CC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 4.31430 1.43810 84.10 0.000 * RESIDUAL 136800 171000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 4.45110 404645 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LHB IBA 16/11/** 14:56 PAGE VARIATE V005 SL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1.88250 627500 14.76 0.001 * RESIDUAL 340000 425000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.22250 202045 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LHB IBA 16/11/** 14:56 PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NOS SC/M CC 37 SL CT1 CT2 CT3 CT4 3 3 6.75000 4.38000 3.33000 3.15000 4.60000 3.21000 3.11000 3.38000 5.80000 6.60000 6.80000 6.10000 SE(N= 3) 0.106419 0.754984E-01 0.119024 5%LSD 8DF 0.347023 0.246193 0.388125 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LHB IBA 16/11/** 14:56 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SC/M CC SL GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 4.4025 12 3.5750 12 6.3250 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.5064 0.18432 4.2 0.0000 0.63612 0.13077 3.7 0.0000 0.44949 0.20616 3.3 0.0015 | | | | Ảnh hưởng NAA đến khả nhân nhanh BALANCED ANOVA FOR VARIATE SC/M FILE LHB NAA 16/11/** 15:24 PAGE VARIATE V003 SC/M LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 23.0384 7.67947 248.53 0.000 * RESIDUAL 247200 309000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 23.2856 2.11687 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LHB NAA 16/11/** 15:24 PAGE VARIATE V004 CC SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.81180 1.27060 42.04 0.000 * RESIDUAL 241800 302250E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 4.05360 368509 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LHB NAA 16/11/** 15:24 PAGE VARIATE V005 SL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 630000 210000 4.94 0.032 * RESIDUAL 340000 425000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 970000 881818E-01 - 38 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LHB NAA 16/11/** 15:24 PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 NOS 3 3 SC/M 6.75000 4.05000 3.48000 3.31000 CC 4.60000 3.13000 3.35000 3.56000 SL 5.80000 6.40000 6.10000 6.30000 SE(N= 3) 0.101489 0.100374 0.119024 5%LSD 8DF 0.330945 0.327311 0.388125 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LHB NAA 16/11/** 15:24 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE SC/M CC SL GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 4.3975 12 3.6600 12 6.1500 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 1.4549 0.17578 4.0 0.0000 0.60705 0.17385 4.8 0.0001 0.29695 0.20616 3.4 0.0317 | | | | Ảnh hưởng nồng độ khoáng đến khả rễ BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LH NDK 16/11/** 10: PAGE VARIATE V003 CC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 6.77540 3.38770 187.86 0.000 * RESIDUAL 108201 180334E-01 * TOTAL (CORRECTED) 6.88360 860450 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LH NDK 16/11/** 10: PAGE VARIATE V004 SL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 980000 490000 8.17 0.020 * RESIDUAL 360000 600000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 1.34000 167500 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE LH NDK 16/11/** 10: PAGE VARIATE V005 SR SUMS OF SQUARES 39 MEAN SQUARES F RATIO PROB ER LN ============================================================================= CT$ 1.69520 847600 13.92 0.006 * RESIDUAL 365400 609000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 2.06060 257575 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE LH NDK 16/11/** 10: PAGE VARIATE V006 CDR LN SOURCE OF VARIATION SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 6.97460 3.48730 47.51 0.000 * RESIDUAL 440400 734001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 7.41500 926875 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LH NDK 16/11/** 10: PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CT1 CT2 CT3 NOS 3 DF CC 5.28000 7.31000 5.75000 SL 4.90000 5.70000 5.40000 SR 4.40000 5.46000 4.86000 CDR 3.23000 5.34000 4.67000 SE(N= 3) 0.775316E-01 0.141421 0.142478 0.156418 5%LSD 6DF 0.268194 0.489199 0.492855 0.541076 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LH NDK 16/11/** 10: PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CC SL SR CDR GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 6.1133 5.3333 4.9067 4.4133 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.92760 0.13429 2.2 0.0000 0.40927 0.24495 4.6 0.0200 0.50752 0.24678 5.0 0.0062 0.96274 0.27092 4.1 0.0004 | | | | Ảnh hưởng NAA đến khả rễ BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LH NAA 16/11/** 10:35 PAGE VARIATE V003 CC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.46120 820400 9.97 0.005 * RESIDUAL 658200 822750E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.11940 283582 - 40 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LH NAA 16/11/** 10:35 PAGE VARIATE V004 SL LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.97000 990000 22.00 0.000 * RESIDUAL 360000 450000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.33000 302727 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE LH NAA 16/11/** 10:35 PAGE VARIATE V005 SR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 70.6538 23.5513 386.55 0.000 * RESIDUAL 487412 609265E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 71.1412 6.46738 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE LH NAA 16/11/** 10:35 PAGE VARIATE V006 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 35.1753 11.7251 372.53 0.000 * RESIDUAL 251797 314746E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 35.4271 3.22065 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LH NAA 16/11/** 10:35 PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 NOS 3 3 CC 5.33000 4.89000 4.45000 4.13000 SL 4.30000 3.30000 3.10000 3.10000 SR 4.83000 9.13000 10.3500 11.1000 CDR 4.86000 1.24000 0.880000 0.680000 SE(N= 3) 0.165605 0.122474 0.142509 0.102428 5%LSD 8DF 0.540021 0.399377 0.464707 0.334008 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LH NAA 16/11/** 10:35 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 12) NO STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | 41 | | | CC SL SR CDR OBS 12 12 12 12 4.7000 3.4500 8.8525 1.9150 TOTAL SS 0.53252 0.55021 2.5431 1.7946 RESID SS 0.28684 0.21213 0.24683 0.17741 | 3.1 0.0048 3.1 0.0004 2.8 0.0000 4.3 0.0000 | Ảnh hưởng IBA đến khả rễ BALANCED ANOVA FOR VARIATE CC FILE LH IBA 16/11/** 11:49 PAGE VARIATE V003 CC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3.28402 1.09467 14.35 0.002 * RESIDUAL 610401 763001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 3.89443 354039 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SL FILE LH IBA 16/11/** 11:49 PAGE VARIATE V004 SL SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 870000 290000 6.44 0.016 * RESIDUAL 360000 450000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 1.23000 111818 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SR FILE LH IBA 16/11/** 11:49 PAGE VARIATE V005 SR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2.40090 800300 16.54 0.001 * RESIDUAL 387200 484000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 2.78810 253464 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CDR FILE LH IBA 16/11/** 11:49 PAGE VARIATE V006 CDR SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 4.56442 1.52147 33.48 0.000 * RESIDUAL 363600 454500E-01 * TOTAL (CORRECTED) 11 4.92802 448002 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE LH IBA 16/11/** 11:49 PAGE MEANS FOR EFFECT CT$ - 42 CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 NOS 3 3 CC 5.33000 5.86000 4.95000 4.43000 SL 4.30000 4.50000 4.00000 3.80000 SR 4.83000 5.33000 4.45000 4.13000 CDR 4.86000 5.15000 3.83000 3.75000 SE(N= 3) 0.159478 0.122474 0.127017 0.123085 5%LSD 8DF 0.520043 0.399377 0.414190 0.401369 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE LH IBA 16/11/** 11:49 PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CC SL SR CDR GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 5.1425 12 4.1500 12 4.6850 12 4.3975 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.59501 0.27622 3.4 0.0016 0.33439 0.21213 4.1 0.0162 0.50345 0.22000 4.7 0.0011 0.66933 0.21319 4.8 0.0001 43 | | | |